JPH1135569A - ポリフェノール化合物及びこれを含有する医薬 - Google Patents
ポリフェノール化合物及びこれを含有する医薬Info
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- JPH1135569A JPH1135569A JP9195779A JP19577997A JPH1135569A JP H1135569 A JPH1135569 A JP H1135569A JP 9195779 A JP9195779 A JP 9195779A JP 19577997 A JP19577997 A JP 19577997A JP H1135569 A JPH1135569 A JP H1135569A
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D307/93—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with a ring other than six-membered
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
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- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
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Abstract
(57)【要約】
【解決手段】 ネパレンシノールＡ、Ｂ及びＣ、並びに
これを有効成分とする医薬。 【化１】 【効果】 優れたトポイソメラーゼII阻害作用を有し、
抗腫瘍剤として有用。
これを有効成分とする医薬。 【化１】 【効果】 優れたトポイソメラーゼII阻害作用を有し、
抗腫瘍剤として有用。
Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は植物由来の新規ポリ
フェノール化合物及びこれを含有する抗腫瘍剤に代表さ
れる医薬に関する。
フェノール化合物及びこれを含有する抗腫瘍剤に代表さ
れる医薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来より植物中には、種々の生理活性物
質が含まれていることが知られている。例えばビンプラ
スチンやビンクリスチンなどのアルカロイド類、コハヒ
チン類縁体のコルセミド、カンプトテシン誘導体ＣＰＴ
−１１等は抗腫瘍作用を有することが知られている。
質が含まれていることが知られている。例えばビンプラ
スチンやビンクリスチンなどのアルカロイド類、コハヒ
チン類縁体のコルセミド、カンプトテシン誘導体ＣＰＴ
−１１等は抗腫瘍作用を有することが知られている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、従来の
植物由来の医薬は、未だ充分満足できるものではなく、
さらに新たな生理活性物質が望まれている。本発明の目
的は医薬として有用な植物由来の新たな化合物を提供す
ることにある。
植物由来の医薬は、未だ充分満足できるものではなく、
さらに新たな生理活性物質が望まれている。本発明の目
的は医薬として有用な植物由来の新たな化合物を提供す
ることにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】そこで本発明者らは、ト
ポイソメラーゼIIに着目し、これに作用して複製の終了
したＤＮＡの分配（Ｍ期）を阻害することにより抗腫瘍
作用を発揮する医薬を見出すべく、種々の植物抽出成分
を探索したところ、カヤツリグサ科の植物から単離され
る３種のポリフェノール化合物が優れたトポイソメラー
ゼII阻害作用を有し、抗腫瘍剤として有用であることを
見出し、本発明を完成するに至った。
ポイソメラーゼIIに着目し、これに作用して複製の終了
したＤＮＡの分配（Ｍ期）を阻害することにより抗腫瘍
作用を発揮する医薬を見出すべく、種々の植物抽出成分
を探索したところ、カヤツリグサ科の植物から単離され
る３種のポリフェノール化合物が優れたトポイソメラー
ゼII阻害作用を有し、抗腫瘍剤として有用であることを
見出し、本発明を完成するに至った。
【０００５】すなわち、本発明は、次式で表される化合
物ネパレンシノールＡ、Ｂ及びＣ又はそれらの塩を提供
するものである。
物ネパレンシノールＡ、Ｂ及びＣ又はそれらの塩を提供
するものである。
【０００６】
【化４】
【０００７】
【化５】
【０００８】
【化６】
【０００９】また、本発明はこれらの化合物を有効成分
とする医薬を提供するものである。
とする医薬を提供するものである。
【００１０】
【発明の実施の形態】本発明化合物の塩としては、塩酸
塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、過塩素酸塩等の無機酸塩、
ナトリウム塩、カリウム塩等が挙げられる。本発明にお
いてはこのうちナトリウム塩が好ましい。また、本発明
にはこれらの化合物又はその塩の水和物、溶媒和物も使
用できる。
塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、過塩素酸塩等の無機酸塩、
ナトリウム塩、カリウム塩等が挙げられる。本発明にお
いてはこのうちナトリウム塩が好ましい。また、本発明
にはこれらの化合物又はその塩の水和物、溶媒和物も使
用できる。
【００１１】前記の本発明化合物は、カヤツリグサ科植
物から抽出、単離することにより得られる。用いられる
カヤツリグサ科の植物としては、ヒゲハリスゲ（Kobres
ia）、ミヤマカンスゲ（Maltifolia）、カンスゲ（Morr
owii）、オクノカンスゲ（Foliosissima）、アゼスゲ
（Thunbergii）、カサスゲ（Dispalata）、コカンスゲ
（Reinii）、ケタガネソウ（Ciliato-morginata）等が
挙げられる。抽出部位は、特に制限されず、これらの植
物の果実、果皮、樹皮、根皮、葉、根材等のうち１又は
２以上の箇所（以下「原体」という）が用いられる。
物から抽出、単離することにより得られる。用いられる
カヤツリグサ科の植物としては、ヒゲハリスゲ（Kobres
ia）、ミヤマカンスゲ（Maltifolia）、カンスゲ（Morr
owii）、オクノカンスゲ（Foliosissima）、アゼスゲ
（Thunbergii）、カサスゲ（Dispalata）、コカンスゲ
（Reinii）、ケタガネソウ（Ciliato-morginata）等が
挙げられる。抽出部位は、特に制限されず、これらの植
物の果実、果皮、樹皮、根皮、葉、根材等のうち１又は
２以上の箇所（以下「原体」という）が用いられる。
【００１２】抽出方法も特に制限されず、これらの原体
から溶剤により抽出し、単離することにより行うことが
できる。例えば原体を細片に切断し、乾燥・粉砕し、こ
れをベンゼン、酢酸エチル、メタノール、アセトン等の
有機溶媒で抽出し、減圧下溶媒を濃縮してエキスを得
る。得られたエキスを再結晶、シリカゲルカラムクロマ
トグラフィー等により精製し、成分を単離することがで
きる。なお、本発明においては、前記化合物の有効量を
含有していれば、上記抽出操作の途中の段階、例えば抽
出エキスの段階でも使用できる。
から溶剤により抽出し、単離することにより行うことが
できる。例えば原体を細片に切断し、乾燥・粉砕し、こ
れをベンゼン、酢酸エチル、メタノール、アセトン等の
有機溶媒で抽出し、減圧下溶媒を濃縮してエキスを得
る。得られたエキスを再結晶、シリカゲルカラムクロマ
トグラフィー等により精製し、成分を単離することがで
きる。なお、本発明においては、前記化合物の有効量を
含有していれば、上記抽出操作の途中の段階、例えば抽
出エキスの段階でも使用できる。
【００１３】本発明化合物又はその塩は、優れたトポイ
ソメラーゼII阻害活性を示すことから、抗腫瘍剤として
有用である。
ソメラーゼII阻害活性を示すことから、抗腫瘍剤として
有用である。
【００１４】本発明の医薬は、経口投与又は非経口投与
（筋肉内、皮下、静脈内、坐薬等）のいずれでも投与で
きる。
（筋肉内、皮下、静脈内、坐薬等）のいずれでも投与で
きる。
【００１５】経口用製剤を調製する場合には賦形剤、さ
らに必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯
味矯臭剤などを加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、
顆粒剤、カプセル剤、溶液剤、シロップ剤、エリキシル
剤、油性又は水性の懸濁液剤などとする。賦形剤として
は、例えば乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、ソ
ルビット、結晶セルロースなどが、結合剤としては例え
ば、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、エチ
ルセルロース、メチルセルロース、アラビアゴム、トラ
ガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルセ
ルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、ポリビニルピ
ロリドン等がある。
らに必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯
味矯臭剤などを加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、
顆粒剤、カプセル剤、溶液剤、シロップ剤、エリキシル
剤、油性又は水性の懸濁液剤などとする。賦形剤として
は、例えば乳糖、コーンスターチ、白糖、ブドウ糖、ソ
ルビット、結晶セルロースなどが、結合剤としては例え
ば、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、エチ
ルセルロース、メチルセルロース、アラビアゴム、トラ
ガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルセ
ルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、ポリビニルピ
ロリドン等がある。
【００１６】崩壊剤としては例えばデンプン、寒天、ゼ
ラチン末、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素
ナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストラン、ペク
チン等が、滑沢剤としては例えば、ステアリン酸マグネ
シウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ、硬
化植物油等が、着色剤としては医薬品に添加することが
許可されているものが、矯味矯臭剤としては、ココア
末、ハッカ脳、芳香酸、ハッカ油、竜脳、桂皮末等が用
いられる。これらの錠剤は、顆粒剤には糖衣、ゼラチン
衣、その他必要により適宜コーティングすることはもち
ろん差しつかえない。
ラチン末、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素
ナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストラン、ペク
チン等が、滑沢剤としては例えば、ステアリン酸マグネ
シウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ、硬
化植物油等が、着色剤としては医薬品に添加することが
許可されているものが、矯味矯臭剤としては、ココア
末、ハッカ脳、芳香酸、ハッカ油、竜脳、桂皮末等が用
いられる。これらの錠剤は、顆粒剤には糖衣、ゼラチン
衣、その他必要により適宜コーティングすることはもち
ろん差しつかえない。
【００１７】注射剤を調製する場合には必要によりpH調
整剤、緩衝剤、安定化剤、保存剤などを添加し、常法に
より皮下、筋肉内、静脈内注射剤とする。注射剤は溶液
を容器に収納後、凍結乾燥等によって固形製剤として用
時調整の製剤としてもよい。また一投与量を容器に収納
してもよく、また多投与量を同一の容器に収納してもよ
い。
整剤、緩衝剤、安定化剤、保存剤などを添加し、常法に
より皮下、筋肉内、静脈内注射剤とする。注射剤は溶液
を容器に収納後、凍結乾燥等によって固形製剤として用
時調整の製剤としてもよい。また一投与量を容器に収納
してもよく、また多投与量を同一の容器に収納してもよ
い。
【００１８】本発明の医薬の投与量は、ネパレンシノー
ルＡ、Ｂ又はＣとしてヒトの場合成人１日当たり通常
０．０１〜１０００mg、好ましくは０．１〜１００mgの
範囲である。また、動物の場合の投与量は、処置すべき
動物の体重１kg当たり通常０．００１〜１０００mg、好
ましくは０．１〜１００mgの範囲である。この１日量を
１日１回、あるいは２〜４回に分けて投与する。
ルＡ、Ｂ又はＣとしてヒトの場合成人１日当たり通常
０．０１〜１０００mg、好ましくは０．１〜１００mgの
範囲である。また、動物の場合の投与量は、処置すべき
動物の体重１kg当たり通常０．００１〜１０００mg、好
ましくは０．１〜１００mgの範囲である。この１日量を
１日１回、あるいは２〜４回に分けて投与する。
【００１９】
【実施例】以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、
本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００２０】実施例１ カヤツリグサ科のヒゲハリスゲ（Kobresia）を水洗い後
風乾し、粉砕後、メタノールで抽出した。メタノール抽
出液を減圧下溶媒留去し、得られた残渣をｎ−ヘキサ
ン、酢酸エチル、ブタノール可溶部に分画し、得られた
酢酸エチル可溶部をキーゼルゲル６０（メルク社製）を
充填したシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付した
後、ＯＤＳ中圧カラムクロマトグラフィー、分取カラム
クロマトグラフィーを行い、ネパレンシノールＡ７０mg
を得た。
風乾し、粉砕後、メタノールで抽出した。メタノール抽
出液を減圧下溶媒留去し、得られた残渣をｎ−ヘキサ
ン、酢酸エチル、ブタノール可溶部に分画し、得られた
酢酸エチル可溶部をキーゼルゲル６０（メルク社製）を
充填したシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付した
後、ＯＤＳ中圧カラムクロマトグラフィー、分取カラム
クロマトグラフィーを行い、ネパレンシノールＡ７０mg
を得た。
【００２１】赤褐色粉末 [α]D=-161.7°(c=0.2 MeOH) UVλmax 276.0, 220.4nm(MeOH) IRνmax 3200-3600, 1612cm-1(KBr)1 H-MMR(400MHz,アセトン-d6)δ：2.89(1H,s), 3.05(1H,
d,9.6),3.87(1H,d,3.6), 4.16(1H,s), 4.34(1H,dd,3.5,
9.7), 4.95(1H,d,7.2),5.48(1H,d,7.2), 5.90(2H,d,2.
1), 6.60(1H,t,2.1), 6.30(1H,t,2.2),6.40(3H,s,H-10,
14,12,overlaped), 6.54(2H,d,8.7), 6.58(2H,d,8.7),
6.77(2H,d,8.5), 6.87(2H,d,8.6), 6.93(2H,d,8.4), 7.
31(2H,d,8.6)13 C-NMR(100MHz,アセトン-d6)δ：55.8, 57.5, 57.7, 5
8.2, 77.8, 93.6,96.0, 100.5, 101.6, 105.5, 108.0,
114.7, 115.0, 115.4, 119.9, 122.7,127.7, 128.4, 12
8.8, 133.4, 136.0, 136.8, 145.0, 146.7, 150.5,154.
7, 155.7, 156.6, 157.5, 158.2, 158.4, 161.4
d,9.6),3.87(1H,d,3.6), 4.16(1H,s), 4.34(1H,dd,3.5,
9.7), 4.95(1H,d,7.2),5.48(1H,d,7.2), 5.90(2H,d,2.
1), 6.60(1H,t,2.1), 6.30(1H,t,2.2),6.40(3H,s,H-10,
14,12,overlaped), 6.54(2H,d,8.7), 6.58(2H,d,8.7),
6.77(2H,d,8.5), 6.87(2H,d,8.6), 6.93(2H,d,8.4), 7.
31(2H,d,8.6)13 C-NMR(100MHz,アセトン-d6)δ：55.8, 57.5, 57.7, 5
8.2, 77.8, 93.6,96.0, 100.5, 101.6, 105.5, 108.0,
114.7, 115.0, 115.4, 119.9, 122.7,127.7, 128.4, 12
8.8, 133.4, 136.0, 136.8, 145.0, 146.7, 150.5,154.
7, 155.7, 156.6, 157.5, 158.2, 158.4, 161.4
【００２２】実施例２ ネパールのヒマラヤ高地（３０００ｍ以上）にて採集さ
れたKobresia neparensis の地上部を、水洗い後風乾
（乾燥重量約１．５kg）してメタノールに約１ヵ月浸漬
した。その濃縮物（約４００ｇ）を、ヘキサン、酢酸エ
チル、ブタノール可溶部に分画し、酢酸エチル可溶部
（約５０ｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに
付し、クロロホルム：メタノール系で溶出することによ
り粗分画を行った。得られた画分について、さらにシリ
カゲルカラム、Sephadex LH-20及び高速液体クロマトグ
ラフィー（ＨＰＬＣ）を繰り返し、ネパレンシノールＢ
及びネパレンシノールＣを得た。
れたKobresia neparensis の地上部を、水洗い後風乾
（乾燥重量約１．５kg）してメタノールに約１ヵ月浸漬
した。その濃縮物（約４００ｇ）を、ヘキサン、酢酸エ
チル、ブタノール可溶部に分画し、酢酸エチル可溶部
（約５０ｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに
付し、クロロホルム：メタノール系で溶出することによ
り粗分画を行った。得られた画分について、さらにシリ
カゲルカラム、Sephadex LH-20及び高速液体クロマトグ
ラフィー（ＨＰＬＣ）を繰り返し、ネパレンシノールＢ
及びネパレンシノールＣを得た。
【００２３】（１）ネパレンシノールＢ1 H-NMR(400MHz,アセトン-d6)δ：3.97(1H,s), 4.29(1H,
s), 4.31(1H,d,1.7),5.31(1H,d,1.7), 6.29(2H,brs),
6.31(1H,t,2.0), 6.56(2H,d,8.5),6.75(2H,d,8.5), 7.1
1(2H,d,8.5)13 C-NMR(100MHz,アセトン-d6)δ：49.6, 56.4, 59.9, 9
3.4, 96.1, 101.6,106.0, 114.8, 115.4, 115.6, 125.
9, 126.6, 128.6, 134.0, 137.9,143.9, 148.0, 154.9,
155.3, 157.3, 159.5, 162.6
s), 4.31(1H,d,1.7),5.31(1H,d,1.7), 6.29(2H,brs),
6.31(1H,t,2.0), 6.56(2H,d,8.5),6.75(2H,d,8.5), 7.1
1(2H,d,8.5)13 C-NMR(100MHz,アセトン-d6)δ：49.6, 56.4, 59.9, 9
3.4, 96.1, 101.6,106.0, 114.8, 115.4, 115.6, 125.
9, 126.6, 128.6, 134.0, 137.9,143.9, 148.0, 154.9,
155.3, 157.3, 159.5, 162.6
【００２４】（２）ネパレンシノールＣ1 H-NMR(400MHz,アセトン-d6)δ：3.54(1H,dd,11.1,9.
9),3.98(1H,dd,11.3,9.4), 4.32(1H,d,6.0), 4.50(1H,
d,9.5),5.28(1H,d,6.0), 5.33(1H,d,9.2), 5.86(2H,d,
2.1), 6.02(1H,d,1.9),6.08(1H,t,2.1), 6.12(1H,d,1.
9), 6.29(2H,d,2.1), 6.41(1H,t,2.1),6.64(2H,d,8.5),
6.76(2H,d,8.5), 6.88(2H,d,8.5), 7.04(2H,d,8.4),7.
06(2H,d,8.5), 7.16(2H,d,8.5)
9),3.98(1H,dd,11.3,9.4), 4.32(1H,d,6.0), 4.50(1H,
d,9.5),5.28(1H,d,6.0), 5.33(1H,d,9.2), 5.86(2H,d,
2.1), 6.02(1H,d,1.9),6.08(1H,t,2.1), 6.12(1H,d,1.
9), 6.29(2H,d,2.1), 6.41(1H,t,2.1),6.64(2H,d,8.5),
6.76(2H,d,8.5), 6.88(2H,d,8.5), 7.04(2H,d,8.4),7.
06(2H,d,8.5), 7.16(2H,d,8.5)
【００２５】試験例１ トポイソメラーゼII型阻害活
性測定 （Ａ）Rat Infant Brain Nuclei（ＩＢＮ）から粗トポ
イソメラーゼIIの抽出 ＩＢＮ（１１．９８mg／ml in ５０％グリセロール）を
４．２μｌ分取し、遠心（３，０００×ｇ，１分）によ
りグリセロールを取り除いた。ペレットをNuclear extr
action buffer（20mM Tris-HCl<pH7.5>, 0.3M NaCl, 14
0mM β-Me, 50ml/ml BSA, 20mM PMSF）１０μｌで懸濁
し、氷中で３０分インキュベートした。次に、遠心（１
０，０００×ｇ，１０分）により上清を分取し粗トポイ
ソメラーゼIIを得た。これを活性に応じて希釈した。
性測定 （Ａ）Rat Infant Brain Nuclei（ＩＢＮ）から粗トポ
イソメラーゼIIの抽出 ＩＢＮ（１１．９８mg／ml in ５０％グリセロール）を
４．２μｌ分取し、遠心（３，０００×ｇ，１分）によ
りグリセロールを取り除いた。ペレットをNuclear extr
action buffer（20mM Tris-HCl<pH7.5>, 0.3M NaCl, 14
0mM β-Me, 50ml/ml BSA, 20mM PMSF）１０μｌで懸濁
し、氷中で３０分インキュベートした。次に、遠心（１
０，０００×ｇ，１０分）により上清を分取し粗トポイ
ソメラーゼIIを得た。これを活性に応じて希釈した。
【００２６】（Ｂ）精製トポイソメラーゼII（Top GEN,
Inc）の希釈 トポイソメラーゼII（Top GEN, Inc）を、０．７５ uni
t/mlになるようにNuclear extration bufferで希釈し
た。
Inc）の希釈 トポイソメラーゼII（Top GEN, Inc）を、０．７５ uni
t/mlになるようにNuclear extration bufferで希釈し
た。
【００２７】エッペンドルフチューブに被検体を１μ
ｌ、必要量のMilli Ｑ、４×トポイソメラーゼII buffe
r（250 mM Tris-HCl<pH7.9>, 600mM KCl, 50mM MgCl2,
0.5mMEDTA, 2.5mM ATP, 150mg/ml BSA）、ｋ ＤＮＡ
（３１２ng／ml）を混合したbuffer １８μｌを加え、
ボルテックスと軽い遠心を行った。次に、希釈した粗ト
ポイソメラーゼIIもしくは希釈した精製トポイソメラー
ゼII １μｌを加え、再びボルテックスと軽い遠心を行
った（ただし、対照の反応系として作製した酵素とキサ
ントン誘導体を含まない反応系にはMilli Ｑ、１μｌと
５０％ ＤＭＳＯ１μｌを、キサントン誘導体を含まな
い反応系には５０％ ＤＭＳＯ １μｌを代わりに加え
た）。
ｌ、必要量のMilli Ｑ、４×トポイソメラーゼII buffe
r（250 mM Tris-HCl<pH7.9>, 600mM KCl, 50mM MgCl2,
0.5mMEDTA, 2.5mM ATP, 150mg/ml BSA）、ｋ ＤＮＡ
（３１２ng／ml）を混合したbuffer １８μｌを加え、
ボルテックスと軽い遠心を行った。次に、希釈した粗ト
ポイソメラーゼIIもしくは希釈した精製トポイソメラー
ゼII １μｌを加え、再びボルテックスと軽い遠心を行
った（ただし、対照の反応系として作製した酵素とキサ
ントン誘導体を含まない反応系にはMilli Ｑ、１μｌと
５０％ ＤＭＳＯ１μｌを、キサントン誘導体を含まな
い反応系には５０％ ＤＭＳＯ １μｌを代わりに加え
た）。
【００２８】上記のエペンドルフチューブを粗トポイソ
メラーゼIIの場合は３０℃、精製トポイソメラーゼIIの
場合は３７℃で３０分間放置した後、氷中でＳＤＳ／Ｐ
Ｋ／ＢＪを４μｌずつ入れた。その後、どちらの場合も
５０℃で５分間放置してからボルテックスと軽い遠心を
行い、再度５０℃で３０分間放置してからボルテックス
と軽い遠心を行った。
メラーゼIIの場合は３０℃、精製トポイソメラーゼIIの
場合は３７℃で３０分間放置した後、氷中でＳＤＳ／Ｐ
Ｋ／ＢＪを４μｌずつ入れた。その後、どちらの場合も
５０℃で５分間放置してからボルテックスと軽い遠心を
行い、再度５０℃で３０分間放置してからボルテックス
と軽い遠心を行った。
【００２９】（Ｃ）アガロースゲル電気泳動とデンシト
メトリー 泳動用１×ＴＢＥ緩衝液（89mM Tris Base/89mM ホウ酸
/2mM EDTA2Na) を用いたアガロースゲル電気泳動（-EtB
r 50 V）を行い、泳動後に１×ＴＢＥ（0.1ml/ml EtB
r）でゲル染色を行い、ゲルの脱色後、ＵＶ照射を行
い、バンドを観察した。アガロースゲルの濃度を０．８
％とした。
メトリー 泳動用１×ＴＢＥ緩衝液（89mM Tris Base/89mM ホウ酸
/2mM EDTA2Na) を用いたアガロースゲル電気泳動（-EtB
r 50 V）を行い、泳動後に１×ＴＢＥ（0.1ml/ml EtB
r）でゲル染色を行い、ゲルの脱色後、ＵＶ照射を行
い、バンドを観察した。アガロースゲルの濃度を０．８
％とした。
【００３０】酵素の反応量はアガロースゲルのバンドの
濃さをコンピューター＜NIH Imageに付属しているマク
ロス（Gel Plotting Macros）＞を用いて数値化し、定
量した。ミニサークルＤＮＡのバンドをコンピューター
に取り込ませて数値化、算出により残存活性率（％）を
得た。結果を表１に示す。
濃さをコンピューター＜NIH Imageに付属しているマク
ロス（Gel Plotting Macros）＞を用いて数値化し、定
量した。ミニサークルＤＮＡのバンドをコンピューター
に取り込ませて数値化、算出により残存活性率（％）を
得た。結果を表１に示す。
【００３１】
【表１】
【００３２】表１から、本発明化合物は、トポイソメラ
ーゼIIの阻害活性を有していることが明らかである。
ーゼIIの阻害活性を有していることが明らかである。
【００３３】
【発明の効果】本発明化合物は、優れたトポイソメラー
ゼII阻害活性を示し、抗腫瘍剤として有用である。
ゼII阻害活性を示し、抗腫瘍剤として有用である。
Claims (5)
- 【請求項１】 次式で表される化合物ネパレンシノール
Ａ（NeparensinolＡ）又はその塩。 【化１】 - 【請求項２】 次式で表される化合物ネパレンシノール
Ｂ（NeparensinolＢ）又はその塩。 【化２】 - 【請求項３】 次式で表される化合物ネパレンシノール
Ｃ（NeparensinolＣ）又はその塩。 【化３】 - 【請求項４】 請求項１〜３のいずれか１項記載の化合
物を有効成分とする医薬。 - 【請求項５】 抗腫瘍剤である請求項４記載の医薬。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9195779A JPH1135569A (ja) | 1997-07-22 | 1997-07-22 | ポリフェノール化合物及びこれを含有する医薬 |
| PCT/JP1998/003272 WO1999005135A1 (en) | 1997-07-22 | 1998-07-22 | Polyophenol compounds and drugs containing the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9195779A JPH1135569A (ja) | 1997-07-22 | 1997-07-22 | ポリフェノール化合物及びこれを含有する医薬 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1135569A true JPH1135569A (ja) | 1999-02-09 |
Family
ID=16346833
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9195779A Pending JPH1135569A (ja) | 1997-07-22 | 1997-07-22 | ポリフェノール化合物及びこれを含有する医薬 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH1135569A (ja) |
| WO (1) | WO1999005135A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007097455A1 (ja) * | 2006-02-27 | 2007-08-30 | Meiji Dairies Corporation | パウ・フェロから単離された新規化合物 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SA08290245B1 (ar) | 2007-04-23 | 2012-02-12 | استرازينيكا ايه بي | مشتقات كربو كساميد جديدة من -n (8-اريل رباعي هيدرو نفثالين غير متجانس- 2- يل) أو -n (5-اريل كرومان غير متجانس -3-يل) لعلاج الألم |
-
1997
- 1997-07-22 JP JP9195779A patent/JPH1135569A/ja active Pending
-
1998
- 1998-07-22 WO PCT/JP1998/003272 patent/WO1999005135A1/ja not_active Ceased
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007097455A1 (ja) * | 2006-02-27 | 2007-08-30 | Meiji Dairies Corporation | パウ・フェロから単離された新規化合物 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1999005135A1 (en) | 1999-02-04 |
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