JPH11187866A - 植物病原糸状菌に対する抗菌性を有する菌株およびそれを用いることによる植物糸状菌病の防除方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 植物糸状菌病に対して高い拮抗性を有する細
菌を提供し、さらに、その細菌を有効成分とする微生物
農薬、および、その細菌により土壌および／または植物
を処理することによる植物糸状菌病の防除方法を提供す
る。 【解決手段】 植物病原糸状菌に対して抗菌性を有する
シュードモナス属細菌に属するシュードモナス・エスピ
ー ＣＧＦ８７８菌株、該菌株を有効成分とする微生物
農薬、該菌株により土壌および／または植物を処理する
ことを特徴とする植物糸状病菌の防除方法、および、該
菌株を有効成分とする微生物農薬により土壌および／ま
たは植物を処理することによる植物糸状菌病の防除方
法。 【効果】 植物糸状菌病を効果的に防除することが可能
となった。本発明では、生きた細菌を、いわゆる生物防
除策として用いる方法であり、しかも薬害がなく、安全
な植物病害の防除方法を提供するものである。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、植物病原糸状菌に
対する抗菌性を有する学名シュードモナス（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ）属細菌に属する新菌株、および、この菌
株を生きたまま土壌および／または植物に散布すること
により植物糸状菌病を防除する方法に関するものであ
る。

【０００２】

【発明が解決しようとする課題】従来よりフザリウム属
などに属する糸状菌には、種々の作物に甚大な病害を生
じる菌があることが知られている。例えば、フザリウム
・オキシスポラムによるトマト萎凋病、ナス半枯病、キ
ュウリつる割れ病、サツマイモつる割れ病などがある。

【０００３】フザリウム属菌などによる病害は、土壌病
害として知られており、多くの作物に多大な損害を与え
ているにもかかわらず、有効な防除方法があまりないの
が現状である。従来の土壌病害に対する防除方法として
は、例えば、クロルピクリンや臭化メチルなどによる土
壌消毒方法があるが、この方法には、土壌中の有用な微
生物や昆虫をも殺してしまうなどの環境上の問題や、臭
気があること、それゆえ、人家の近くでは使用が制限さ
れるなどの問題がある。また、一旦滅菌した後に病原菌
が侵入した場合、かえって病気が進行してしまうという
懸念をも抱えている。

【０００４】また、シュードモナス属細菌を用いて植物
病害を防除する方法は、いくつか見出され、特許出願さ
れている。例えば、ナス科植物の青枯病（特開平６−９
３２５号公報、特開平６−８６６６８号公報、特公平６
−１７２９１号公報）、イネ苗立枯病（特開平４−１０
４７８３号公報）、ポトリチス属およびペニシリウム属
の植物病原菌に起因する植物病害（特開平４−７７４０
５号公報）、グラム陽性細菌起因の植物病害（特開平５
−３１０５２１号公報）、フザリウム属菌に起因する植
物病害（特公平６−６５２３号公報）などをシュードモ
ナス属細菌により防除することができることが報告され
ている。しかし、その防除効果は、未だ満足すべきもの
ではない。

【０００５】本発明は、フザリウム病害に対して高い拮
抗性を有する細菌を提供し、さらに、その細菌を有効成
分とする微生物農薬、および、その細菌により土壌およ
び／または植物を処理することによる植物糸状菌病の防
除方法を提供するものである。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、シュード
モナス属細菌に属するシュードモナス・エスピー ＣＧ
Ｆ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ． Ｃ
ＧＦ８７８）がフザリウム属菌などによる植物糸状菌病
を効果的に防除することを見出し、本発明に至った。

【０００７】すなわち、本発明は、植物病原糸状菌に対
して抗菌性を有するシュードモナス属細菌に属するシュ
ードモナス・エスピー ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ． ＣＧＦ８７８）、植物病原糸
状菌に対して抗菌性を有するシュードモナス属細菌に属
するシュードモナス・エスピー ＣＧＦ８７８菌株（Ｐ
ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ． ＣＧＦ８７８）を有
効成分とする微生物農薬、植物病原糸状菌に対して抗菌
性を有するシュードモナス属細菌に属するシュードモナ
ス・エスピー ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎ
ａｓ ｓｐｐ．ＣＧＦ８７８）により土壌および／また
は植物を処理することを特徴とする植物糸状菌病の防除
方法、および、植物病原糸状菌に対して抗菌性を有する
シュードモナス属細菌に属するシュードモナス・エスピ
ー ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ
ｐ． ＣＧＦ８７８）を有効成分とする微生物農薬によ
り土壌および／または植物を処理することを特徴とする
植物糸状菌病の防除方法である。

【０００８】以下、本発明を詳細に説明する。植物糸状
菌病の中でフザリウム属菌による病害としては、以下の
病害が農業において重要である。例えば、キャベツ萎黄
病（病原菌；Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ
ｆ．ｓｐ． ｃｏｎｇｌｕｔｉｎａｎｓ）、キュウリつ
る割れ病（病原菌；Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒ
ｕｍ ｆ．ｓｐ． ｃｕｃｕｍｅｉｎｕｍ）、トマト萎
凋病（病原菌；Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ
ｆ．ｓｐ． ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ）、ナス半枯病
（病原菌；Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ
ｆ．ｓｐ． ｍｅｌｏｎｇｅｎｅａ）、サツマイモつる
割病（病原菌；Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ
ｆ．ｓｐ． ｂａｔａｔａｓ）などがあり、問題とな
っている。本発明は、これらの植物病害を効果的に防除
する方法を提供するものである。

【０００９】以下に本発明の菌株の採取方法について述
べる。土壌や植物体の中からトマト萎凋病菌などの植物
病原糸状菌に対して拮抗性のある細菌を探索するため
に、まず、ポテトデキストロース寒天培地上でトマト萎
凋病菌と対峙培養し、拮抗菌のスクリーニングを行っ
た。数多くの採取細菌を検討した結果、複数の植物病原
糸状菌に対して強い抗菌活性を有する細菌を得ることが
できた。得られた細菌の菌学的性質は、以下の通りであ
る。 （１）形態学的性質 形状 ：桿状 グラム染色 ：陰性 運動性 ：＋ 胞子形成 ：− （２）コロニー形状 肉汁寒天平板培養において平滑円形コロニー （３）生理学的性質 硝酸塩の還元 ：＋ 硫化水素の生成 ：− ゼラチン液化 ：＋ ウレアーゼ ：− オキシダーゼ ：＋ アルギニンの分解 ：＋ アセトアミドの分解：− 酸素に対する態度 ：好気的 ２５℃での生育 ：＋ ３７℃での生育 ：＋ ４２℃での生育 ：− インドール分解 ：− エスクリン分解 ：− β−ガラクトシターゼ活性：− 糖、有機酸の資化性 Ｄ−グルコース ：＋ Ｄ−マルトース ：− Ｄ−フルクトース：− アラビノース ：＋ Ｌ−ラムノース ：− Ｄ−マンノース ：− Ｄ−キシロース ：＋ Ｄ−マンニット ：− シュークロース ：− マロン酸 ：＋ クエン酸の利用 ：＋ 上記の菌学的性質を有する菌株を、「バージェイズ・マ
ニュアル・オブ・システマティツク・バクテリオロジー
（ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅ
ｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ），第１巻、１
９８４年」に基づき検索すると、グラム陰性桿菌である
こと、好気的に生育すること、オキシダーゼ活性が陽性
であることなどの性質より、本菌株は、シュードモナス
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属に属するものであり、さ
らにシュードモナス・メンドシーナ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏ
ｎａｓ ｍｅｎｄｏｃｉｎａ）に近い性質を有すること
がわかった。一方、４２℃での増殖ができないこと、ゼ
ラチン加水分解性を有していること、アラビノース、シ
ュークロースの資化性が典型的なシュードモナス・メン
ドシーナと異なっている。また、非蛍光性で水溶性の赤
褐色色素を生成する。

【００１０】したがって、本菌株は、シュードモナス属
に分類されると考えられることから、これをシュードモ
ナス・エスピー ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏ
ｎａｓ ｓｐｐ． ＣＧＦ８７８）と命名し、平成９年
１２月１７日に工業技術院生命工学工業技術研究所に寄
託し、ＦＥＲＭ Ｐ−１６５６１（生技研菌寄Ｐ−１６
５６１）として受託されている。

【００１１】次に本発明のシュードモナス・エスピー
ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．
ＣＧＦ８７８）を有効成分とする微生物農薬の作成方
法を述べる。まず、上記の本発明のシュードモナス・エ
スピー ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ｓｐｐ． ＣＧＦ８７８）を適当な培地で培養する。こ
こで使用する培地は、菌株が増殖するものであれば特に
限定されるものではなく、通常使用されている培地を使
用すればよい。培養して菌株を増殖させた後、遠心分離
により集菌を行い、保護剤と混合し、凍結乾燥した後、
本菌株を含む粉状もしくは粒状の微生物農薬として作成
することができる。保護剤としては、グルコース、フル
クトース、シュークロースおよびトレハロースなどの糖
類の１つもしくは複数の混合物を用いることができる。

【００１２】一方、本発明のシュードモナス・エスピー
ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ
ｐ． ＣＧＦ８７８）を同様に培養後、しかるべき担体
と混合し、粉剤もしくは粒剤とすることもできる。この
場合の担体には、タルク、クレー、炭酸カルシウム、ケ
イソウ土などの鉱物性粉末や、ピートモス、さらには、
ポリビニルアルコールなどの高分子化合物、ザンサンゴ
ムやアルギン酸などの天然高分子化合物などがある。

【００１３】次に本発明のシュードモナス・エスピー
ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．
ＣＧＦ８７８）を有効成分とする微生物農薬の使用方
法を述べる。本発明のシュードモナス・エスピー ＣＧ
Ｆ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ． Ｃ
ＧＦ８７８）は、トマトやハクサイなどの植物糸状菌病
の対象となる作物の根や茎などに存在することにより、
抗菌剤としての効果を示す。したがって、種子へのバク
テリゼーション、すなわち、種子への菌株のコーティン
グ、育苗土壌への散布や混合による幼苗への菌株の定着
により、この目的は達成される。作成した粉剤や粒剤
は、そのまま種子にコーティングし、種子が発芽する際
にコーティングした本菌株を根部に定着させることがで
きるし、育苗土壌に混合することにより根、茎に定着さ
せることも可能である。さらに、水に懸濁させ、苗全体
に散布したり、根部を本菌液に浸すことにより植物体に
定着させることが可能となり、各種の植物糸状菌病を防
除することができる。このように本菌株を有効成分とす
る微生物農薬による簡単な処理方法により、糸状菌によ
って生じる種々の植物病害を防除することが可能となっ
た。

【００１４】植物糸状菌病への防除効果の機作は、抗菌
物質による糸状菌の菌糸成長阻害や菌核形成阻害、また
は発芽阻害などが考えられる。本菌株では、寒天培地上
でトマト萎凋病菌に対する菌糸成長阻害効果が認められ
た。

【００１５】

【発明の実施の形態】以下、本発明の実施の形態を実施
例により具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に
限定されるものではない。

【００１６】

【実施例】実施例１ シュードモナス・エスピー ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ． ＣＧＦ８７８）の植物病
原糸状菌に対する抗菌性を測定した。ポテトデキストロ
ース寒天培地（ジャガイモ２００ｇエキス、グルコース
２０ｇ、寒天１５ｇ、水１Ｌ）上での対峙培養法で抗菌
性を調べた。結果を表１に示す。

【００１７】

【表１】 ＋＋ ： 抗菌活性が強い ＋ ： 抗菌活性がある − ： 抗菌活性が無い実施例２ ３〜４葉期のトマト苗をシュードモナス・エスピー Ｃ
ＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．
ＣＧＦ８７８、菌密度１×１０⁸ｃｆｕ／ｍｌ）液に２
０分間浸漬した後、育苗ポットに定植した。定植後、７
日目にフザリウム・オキシスポラム（トマト萎凋病菌；
Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍＩＦＯ−３１２
１３、菌密度１×１０⁶ｃｆｕ／ｍｌ）を１０ｍｌ土壌
全面に潅注した。その後、４９日目に発病調査を行っ
た。表２に結果を示す。防除価は、１００．０％であっ
た。

【００１８】発病の判定（発病指数） ０：外部健全 １：一部の葉が枯死 ２：全体の５０以上の葉が枯死 ３：茎が枯死

【００１９】

【数１】

【００２０】

【数２】

【００２１】

【表２】 実施例３ ３〜４葉期のナス苗をシュードモナス・エスピー ＣＧ
Ｆ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ． Ｃ
ＧＦ８７８、菌密度１×１０⁸ｃｆｕ／ｍｌ）液に２０
分間浸漬した後、育苗ポットに定植した。定植後、７日
目にフザリウム・オキシスポラム（ナス半枯病菌；Ｆｕ
ｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ、菌密度１×１０⁶
ｃｆｕ／ｍｌ）を１０ｍｌ土壌全面に潅注した。その
後、３０日目に発病調査を行った。表３に結果を示す。
防除価は、７５．０％であった。

【００２２】

【表３】 発病の判定（発病指数） ０：外部健全 １：一部の葉が枯死 ２：全体の５０以上の葉が枯死 ３：茎が枯死

【００２３】

【数３】

【００２４】

【数４】 実施例４ ３〜４葉期のキュウリ苗をシュードモナス・エスピー
ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．
ＣＧＦ８７８、菌密度１×１０⁸ｃｆｕ／ｍｌ）液に
２０分間浸漬した後、育苗ポットに定植した。定植後、
７日目にフザリウム・オキシスポラム（キュウリつる割
病菌；Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ＩＦＯ
−３１２２４、菌密度１×１０⁶ｃｆｕ／ｍｌ）を１０
ｍｌ土壌全面に潅注した。その後、４９日目に発病調査
を行った。表４に結果を示す。防除価は、５０．０％で
あった。

【００２５】

【表４】 発病の判定（発病指数） ０：外部健全 １：一部の葉が枯死 ２：全体の５０以上の葉が枯死 ３：茎が枯死

【００２６】

【数５】

【００２７】

【数６】 実施例５ ３〜４葉期のトマト苗をシュードモナス・エスピー Ｃ
ＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．
ＣＧＦ８７８、菌密度１×１０⁸ｃｆｕ／ｍｌ）液に２
０分間浸漬した後、圃場に定植した。フザリウム・オキ
シスポラム（トマト萎凋病菌；Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘ
ｙｓｐｏｒｕｍ ＩＦＯ−３１２１３、菌密度１×１０
⁶ｃｆｕ／ｍｌ）を圃場の土壌全面に潅注した。圃場へ
の定植直前のトマト萎凋病菌の濃度は、約５×１０³ｃ
ｆｕ／ｇ−土壌であった。その後、３カ月後に発病調査
を行った。表５に結果を示す。防除価は、５４．３％で
あった。

【００２８】

【表５】 発病株率、発病度および防除価の計算は、実施例２と同
様である。

【００２９】

【発明の効果】本発明により、植物糸状菌病を効果的に
防除することが可能となった。特に、従来、防除が困難
であった土壌病害であるフザリウム属菌による病害を効
果的に防除できる。本発明では、生きた細菌を、いわゆ
る生物防除策として用いる方法であり、しかも薬害がな
く、安全な植物病害の防除方法を提供するものである。

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】植物病原糸状菌に対して抗菌性を有するこ
   とを特徴とするシュードモナス属細菌に属するシュード
   モナス・エスピー ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍ
   ｏｎａｓ ｓｐｐ． ＣＧＦ８７８）。
2. 【請求項２】植物病原糸状菌がフザリウム属に属する糸
   状菌であることを特徴とする請求項１記載のシュードモ
   ナス属細菌に属するシュードモナス・エスピー ＣＧＦ
   ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ． ＣＧ
   Ｆ８７８）。
3. 【請求項３】植物病原糸状菌に対して抗菌性を有するシ
   ュードモナス属細菌に属するシュードモナス・エスピー
   ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ
   ｐ．ＣＧＦ８７８）を有効成分とすることを特徴とする
   微生物農薬。
4. 【請求項４】植物病原糸状菌がフザリウム属に属する糸
   状菌であることを特徴とする請求項３記載の微生物農
   薬。
5. 【請求項５】植物病原糸状菌に対して抗菌性を有するシ
   ュードモナス属細菌に属するシュードモナス・エスピー
   ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ
   ｐ．ＣＧＦ８７８）により土壌および／または植物を処
   理することを特徴とする植物糸状菌病の防除方法。
6. 【請求項６】植物糸状菌病がフザリウム属に属する糸状
   菌により引き起こされる糸状菌病であることを特徴とす
   る請求項５記載の植物糸状菌病の防除方法。
7. 【請求項７】植物病原糸状菌に対して抗菌性を有するシ
   ュードモナス属細菌に属するシュードモナス・エスピー
   ＣＧＦ８７８菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ
   ｐ．ＣＧＦ８７８）を有効成分とする微生物農薬により
   土壌および／または植物を処理することを特徴とする植
   物糸状菌病の防除方法。
8. 【請求項８】植物糸状菌病がフザリウム属に属する糸状
   菌により引き起こされる糸状菌病であることを特徴とす
   る請求項７記載の植物糸状菌病の防除方法。