JPH10500661A

JPH10500661A - ラパマイシン誘導体

Info

Publication number: JPH10500661A
Application number: JP7522321A
Authority: JP
Inventors: ルエンゴ，ジュアン・イグナシオ
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 1994-02-23
Filing date: 1994-08-02
Publication date: 1998-01-20
Also published as: EP0754040A1; DE69432190T2; US5362735A; EP0754040B1; DE69432190D1; EP0754040A4; WO1995022972A1

Abstract

(57)【要約】ラパマイシン誘導体、そのようなラパマイシン誘導体と医薬上許容される担体または賦形剤とからなる医薬組成物、およびかかる誘導体を用いて病原性真菌の増殖を阻害するか、免疫抑制を誘発するか、または発癌性腫瘍を治療する方法を開示する。

Description

【発明の詳細な説明】ラパマイシン誘導体発明の背景本発明はラパマイシン誘導体、そのような誘導体からなる医薬組成物、病原性真菌に起因する疾患の治療法、およびそのようなラパマイシン誘導体を利用する望ましい免疫抑制誘発法に関する。ラパマイシンは、培養操作により産生することができる天然に存在する大環状トリエン抗生物質である。その構造は以下に示すとおりである：少なくとも１つのラパマイシン産生菌株であるストレプトマイセス・ヒグロスコピウス（Streptomyces hygroscopius）は、受入番号ＮＲＲＬ５４９１の下、米国、イリノイ州、ペオリア、ユー・エス・デパートメント・オブ・アグリカルチャー、アグリカルチュアル・リサーチ・サービス、ノーザン・ユーティリゼーション・アンド・リサーチ・ディビジョンに寄託されている。ラパマイシンおよびＮＲＲＬ５４９１の培養によるその製法は、米国特許第３,９２９,９９２号（１９７５年１２月３０日発行）に開示されており、その内容を出典明示により本明細書の一部とする。ヒトおよびヒト以外の動物にて、免疫抑制を治療的に誘発することが治療または予防に有益である種々の疾患がある。そのような疾患は、あらゆる宿主の炎症および自己免疫疾患を包含し、さらにまた移植器官に対する耐性または移植器官の拒絶反応を包含する。特に移植器官の拒絶反応を防止するのに、免疫抑制が望ましい場合、シクロスポリンが、治療上広く用いられる。しかし、シクロスポリンは腎毒素であることが知られている。同様に、コルチコステロイドが、長年の間、免疫抑制剤として、特に炎症に起因する疾患の治療にて用いられてきた。しかし、コルチコステロイドは、一般に、高全身性毒性を示すと考えられている。真菌感染症の治療にアンホテリシンが用いられる。しかし、これらの化合物は腎毒素であり、望ましい広域スペクトルの抗真菌活性を欠いている。かくして、現在知られている治療物質よりも弱毒性の免疫抑制剤および抗真菌剤が望ましいのは明らかである。発明の要約本発明者は、式：［式中、Ｒ¹およびＲ²は、＝Ｏ、（−ＯＨ，Ｈ）および（Ｈ，Ｈ）からなる群より選択され；Ｒ³およびＲ⁴は、＝Ｏ、（Ｈ，Ｈ）および（Ｈ，ＯＨ）からなる群より選択され；およびＲ⁵およびＲ⁶は、＝Ｏおよび（Ｈ，ＯＨ）からなる群より選択される］で示される新規なラパマイシン誘導体、およびその医薬上許容されるすべての塩、水和物または溶媒和物を見いだした。本発明はまた、有効量の１または２以上の式IIの化合物と、医薬上許容される担体または賦形剤とからなる医薬組成物に関する。本発明はまた、ヒトまたはヒト以外の動物における病原性真菌の増殖に起因する疾患の治療法であって、有効な非毒性量の１または２以上の式IIの化合物をその治療を必要とするヒトまたはヒト以外の動物に投与することからなる方法に関する。本発明はまた、ヒトまたはヒト以外の動物における治療上望ましい免疫抑制を誘発する治療法であって、有効な非毒性量の１または２以上の式IIの化合物をその治療を必要とするヒトまたはヒト以外の動物に投与することからなる方法に関する。発明の詳細な記載式IIのいずれかの化合物の式中にて置換基（例えば、アリール、アルコキシ、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁵またはＲ⁶）が２個以上存在する場合、所定の場合のかかる置換基の定義は、特記しない限り、他の場合での定義と独立している。本発明の化合物の構成要素である置換基の組み合わせは、かかる組み合わせが安定な化合物をもたらす場合にのみ許容される。Ｒ¹のような置換基の定義に用いられる挿入句の記載（例、（Ｈ，ＯＨ））は、関連する原子の両方の結合手上の置換基を表すものである。本発明は特定の異性体に限定されるものではなく、括弧内の基の順序は特定の配置を示唆するものではない。７−デメトキシ−７,８−デヒドロ・ラパマイシンとして知られている、本発明の好ましい化合物は、式II：式中、Ｒ¹,Ｒ²が（ＯＨ，Ｈ）であり、Ｒ³,Ｒ⁴が＝Ｏであり、Ｒ⁵,Ｒ⁶が＝Ｏであるの化合物である。本発明の化合物は、遊離形にて、適宜、塩の形態にて存在しうる。医薬上許容される塩およびその調製物は当該分野における当業者に周知である。本発明の化合物の医薬上許容される塩は、例えば、無機または有機酸または塩基より形成される通常の非毒性塩または第四級アンモニウム塩を包含する。本発明の化合物は水和物または溶媒和物を形成してもよい。電化した化合物を水と一緒に凍結乾燥すると水和種を形成し、あるいは適当な有機溶媒を含む溶液中にて濃縮した場合、溶媒和種を形成することが当業者に知られている。本発明の化合物は、以下に記載の方法またはその慣用的変法により、ラパマイシンまたはその適宜置換した誘導体より調製してもよい。一般に、該化合物のテトラエニル環構造は、合成の間の官能基の保護を制御するよく知られた原則に従って、環置換基を工夫する前後にて導入される。スキームＡ〜Ｄにおいて、かかる置換基の工夫はテトラエニル環構造の形成の前に示されている。使用する試薬は文献に記載されているか、または商業上入手可能である。Ｃ−３０位を還元したラパマイシン誘導体は、ラパマイシンを三塩化セリウムおよびシアノホウ水素化ナトリウムの混合物で処理することにより製造される。この反応についての適当な溶媒は酢酸およびテトラヒドロフランの混合物を包含する。この反応は、スキームＡにて、出発物質としてラパマイシンを用いて説明されているが、他のラパマイシン誘導体もまたこの方法でＣ−３０位を還元してもよい。Ｃ−１４およびＣ−３０の両方の位置が還元されている本発明の化合物（すなわち、Ｒ³，Ｒ⁴およびＲ⁵，Ｒ⁶＝（Ｈ，ＯＨ））を、水素化ジイソブチルアルミニウムをラパマイシンまたはその誘導体に作用させることにより調製してもよい。その還元法を適当に制御すること（反応時間および還元剤の量を制限すること）により、Ｃ−１４位だけを還元した化合物を調製することができる。この反応は、出発物質として、スキームＢにて示されているラパマイシンを用いて説明されている（Ｃ−１４およびＣ−３０の両方の位置で還元）。本発明のある化合物を新規なフェニルチオノカルボネート中間体より調製してもよい。これらの中間体の調製、および本発明の化合物への変換はスキームＣに示されている。スキームＣに示されているように、ラパマイシン（誘導されたラパマイシンもまた利用することができるが）を、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）のような塩基の存在下でフェニルクロロチオノホルメートと接触させ、Ｃ −２８および／またはＣ−４３原子で誘導されたラパマイシンを調製する。これらの中間体は、水素化トリアルキルスズまたはトリス（トリメチルシリル）シランのような遊離基ベースの還元剤およびアゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）、ベンゾイルペルオキシドまたはトリエチルボランのようなラジカル開始剤との反応により本発明の化合物に変換してもよい。Ｃ−４３にオキシ（＝Ｏ）基を有する本発明の化合物はスキームＤに従って調製される。スキームＤは、他の本発明の化合物を調製するための中間体として有用である、４３−デヒドロラパマイシンの調製を説明する。高濃度のジエチルエーテル中過塩素酸リチウムを用いる方法が、温和な条件下、合成変態の数を促進する効果的な方法であると報告されており；最近の文献例として、ディールズーアルダー・シクロアディションズ（Diels-Alder cyclo−a dditions）、イオン化反応および［１，３］シグマトロピー転位（ピー・エイ・グリエコ（P.A.Grieco）ら、ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティ（J.Am.Chem.Soc.）１９９０、１１２、４５９５および１９９１、１１３、５４８８）が挙げられる。本発明の化合物のテトラエニル環構造は、ラパマイシンを過塩素酸リチウムの無水ジエチルエーテル中高濃度（３−５Ｍ）溶液と作用させることにより調製できる。該反応は少量の酢酸の存在下でより効果的に作用する。これらの条件下、メタノール因子の脱離が起こり、Ｃ７−Ｃ８二重結合が生成される。本明細書の以下に示す実施例は、本発明の化合物を製造するための種々の合成方法を提供する。本発明はまた、医薬上許容される担体または賦形剤と、有効量の１または２以上の式IIの化合物とからなる医薬組成物に関する。式IIの化合物は、慣用的操作に従って、治療上有効量の化合物（「活性成分」）を標準的医薬担体または賦形剤と組み合わせることにより調製された通常の投与形にて投与される。これらの操作は、成分を、適宜、所望の調製物に混合、造粒および圧縮または溶解することを包含する。用いられる医薬担体は、例えば、固体または液体のいずれであってもよい。固体担体の一例は、ラクトース、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などである。液体担体の一例は、シロップ、落花生油、オリーブ油、水などである。同様に、担体または賦形剤は、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルのような当該分野に周知の遅効性物質を単独で、またはワックス、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルメタクリレート等と一緒にした物質を包含する。広範囲の医薬形を用いることができる。固体担体を用いる場合、調製物を錠剤化し、散剤またはペレット形のあるいはトローチまたはロゼンジの形態の硬セラチンカプセルに入れることができる。固体担体の量は大きく変化するが、好ましくは、約２５ｍｇ〜約１ｇである。液体担体を用いる場合、調製物はシロップ、エマルジョン、軟ゼラチンカプセル、アンプルまたはバイアル中の滅菌注射溶液または懸濁液あるいは非水性液体懸濁液の形態であろう。安定な水溶性投与形を得るために、本発明の化合物の医薬上許容される塩を有機または無機酸の水溶液、例えば、コハク酸または好ましくはクエン酸の０．３Ｍ溶液に溶かす。別法として、酸性誘導体を適当な塩基性溶液に溶かすことができる。可溶性の塩形が利用できない場合、本発明の化合物を適当な共溶媒またはその組み合わせに溶かす。このような適当な共溶媒として、限定するものではないが、総容量の０−６０％の範囲の濃度での、アルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール３００、ポリソルベート８０、グリセリンなどが挙げられる。試験により本発明の化合物がヒトまたはヒト以外の動物にて病原性真菌の増殖を予防的にまたは治療的に阻害するのに有用であることがわかる。したがって、本発明は、病原性真菌の増殖の阻害を必要とするヒトまたはヒト以外の動物におけるその増殖の阻害法であって、そのようなヒトまたは動物に有効な非毒性量の式IIの化合物を投与することからなる方法を包含する。「病原性真菌」なる語は、ヒトまたはそれ以外の動物にて疾患誘起能を有する真菌を意味する。病原性真菌は、例えば、限定するものではないが、カンジダ・アルビカンス（candida albicans）および他のカンジダ種、ミクロスポルム・ジプセウム（Microsporum gypseum）、トリコフィトン・メンタグロフィテス（Tri chophyton mentagrophytes）、アルペルギルス・エス．ピー（Aspergillus sp. ）およびスポロトリクム・エス・ピー（Sporotrichum sp.）を包含する。本発明の化合物の病原性真菌の増殖阻害能は、公知かつこの目的のために用いられる標準試験、例えば、以下に記載の酵母検定により測定または予想される。当該分野における当業者は、慣用的実験操作により、病原性真菌の増殖を阻害する目的で、有効な非毒性量の化合物がいくらであるかを決定することができる。しかし、一般に、有効量は、約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇ（体重）／日の範囲にある。試験により、本発明の化合物がまた、免疫抑制を誘発するのに、すなわち、ヒトまたは動物の免疫系の抑制を誘発するのに有用であることがわかる。したがって、本発明は、免疫抑制の誘発を必要とするヒトまたはヒト以外の動物にて免疫抑制を予防的にまたは治療的に誘発する方法であって、有効な非毒性量の本発明の化合物をそのようなヒトまたはそれ以外の動物に投与することからなる方法に関する。本発明の化合物の免疫抑制能は、この目的のために用いられる標準試験、例えば、混合リンパ球反応試験またはチミジン摂取により測定されるＴ−細胞増殖の測定試験にて測定される。本発明の化合物が免疫抑制を誘発するのに有用性を有するという事実は、それらの化合物が移植器官または組織（例、腎臓、心臓、肺、骨髄、皮膚、角膜など）に対する耐性またはその拒絶反応の治療または予防；自己免疫疾患、炎症疾患、増殖性および過増殖性疾患、および免疫学上の介在疾患（例、リウマチ様関節炎、エリテマトーデス、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、１型糖尿病、ブドウ膜炎、ネフローゼ症候群、乾癖、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎および別の湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、天庖瘡、水庖性類天庖瘡、表皮水庖症、蕁麻疹、アンジオデマス（angiodemas）、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増加症、円形脱毛症等）の皮膚発現の治療または予防；可逆性閉塞気道疾患、腸炎症およびアレルギー（例、小児脂肪便症、直腸炎、好酸球増加症、胃腸炎、肥満細胞症、クローン病および潰瘍性大腸炎）および食物関連アレルギー（例、片頭痛、鼻炎および湿疹）の治療に有用である。当業者は、慣用的実験操作により、免疫抑制を誘発する目的で、有効な非毒性量の化合物がいくらであるかを決定できる。しかしながら、一般に、効果的な投与量は約０.０５〜１００ｍｇ／ｋｇ（体重）／日の範囲にある。本発明の化合物をそのような効果が治療または予防的効果をもたらすに十分な量にて前記した治療法に従ってヒトまたはヒト以外の動物に投与する。本発明のそのような化合物は、公知技法に従って、本発明の化合物を通常の医薬上許容される担体または賦形剤と組み合わせることによって調製された通常の投与形にてかかるヒトまたはヒト以外の動物に投与できる。当業者であれば、医薬上許容される担体または賦形剤の形態および特性は、組み合わせようとする活性成分の量、投与経路および他の周知変数により決定されることが理解されるであろう。本発明の化合物の投与経路は経口、非経口、吸入によるまたは局所投与であってもよい。本明細書にて用いる非経口なる語は、静脈内、筋肉内、皮下、経直腸、経膣または腹腔内投与を包含する。非経口投与の皮下および筋肉内投与形が一般に好ましい。病原性真菌の増殖を予防的または治療的に阻害するか、あるいは免疫抑制を予防的または治療的に誘発するために本発明の化合物を用いる一日の非経口および経口投与用量は、一般に、約０.０５〜１００、好ましくは約０.５〜１０ｍｇ／ｋｇ（体重）／日の範囲である。本発明の化合物はまた、吸入により投与してもよい。「吸入」なる語は、経鼻内および経口吸入投与を意味する。エアロゾル処方または計量吸入器のようなかかる投与に適当な投与形は、慣用的技法により調製される。用いられる本発明の化合物の好ましい投与量は、一般に、約１０〜１００ｍｇの範囲内にある。本発明の化合物はまた、局所投与してもよい。局所投与なる語は非全身性投与を意味し、外部から本発明の化合物の表皮への、口腔前庭への塗布およびかかる化合物の耳、目および鼻中への滴下、および化合物が有意に血流中に入らない投与を包含する。全身性投与なる語は、経口、静脈内、腹腔内および筋肉内投与を意味する。局所投与における病原性真菌増殖阻害または免疫抑制誘発に対する治療または予防作用に必要な本発明の化合物（以下、活性成分という）の量は、もちろん、選択する化合物、治療される症状の性質および重度で変化するが、最終的には、顧問医の判断である。本発明の化合物の適当な局所用量は、一般に、約１〜１００ｍｇ／ｋｇ（体重）／日の範囲内にある。活性成分を生化学物質として単独で投与することも可能であるが、医薬組成物として投与することが好ましい。活性成分は、局所投与では、０.００１％〜１０％ｗ／ｗ、例えば、１〜２重量％の処方からなり、１０％ｗ／ｗほどの処方からなっていてもよいが、好ましくは５％ｗ／ｗを越えることなく、さらに好ましくは０.１％〜１％ｗ／ｗの処方である。獣医学および医学の両方の使用の関する本発明の局所処方は、活性成分と、そのための１または２種以上の許容される担体とからなり、所望によりいずれか他の治療成分（複数）が配合されていてもよい。担体は、処方の他の成分と融和し、その受容者に有害でないという意味で「許容される」ものでなければならない。局所投与に適する処方は、皮膚を介して治療が必要な部位に浸透するのに適した液体または半液体調製物、例えば、リニメント、ローション、クリーム、軟膏またはペースト、および耳、目または鼻への投与に適する滴剤を包含する。本発明の滴剤は滅菌水性または油性溶液もしくは懸濁液からなり、活性成分を適当な殺菌剤および／または殺真菌剤および／またはいずれか他の適当な保存剤の水溶液（好ましくは、界面活性剤を含有する）に溶かすことにより調製してもよい。ついで、得られた溶液を濾過により清澄化し、適当な容器に移し、ついでそれを密封し、９０−１００℃で半時間、オートクレーブに付すかまたは維持することにより滅菌処理する。また、該溶液を無菌技法により濾過し、容器に移すことにより滅菌処理してもよい。滴剤に配合するのに適する殺菌剤および殺真菌剤は、例えば、硝酸または酢酸フェニル水銀（０.００２％）、塩化ベンゾアルコニウム（０.０１％）および酢酸クロルヘキシジン（０.０１％）である。油状溶液を調製するのに適当な溶媒は、グリセロール、希アルコールおよびプロピレングリコールを包含する。本発明のローションは、皮膚または眼に適用するのに適するものを包含する。点眼用ローションは、所望により殺菌剤を含有していてもよい滅菌水溶液からなり、滴剤の調製法と類似する方法により調製される。皮膚に塗布するためのローションまたはリニメントはまた、アルコールまたはアセトンのような乾燥を促進し、皮膚を冷却する試薬、および／またはグリセロールのような加湿剤またはヒマシ油もしくは落花生油のような油を有していてもよい。本発明のクリーム、軟膏またはペーストは外服用活性成分の半固体処方である。該処方は、微細化または微粉末化形態のそれだけの、または水性もしくは非水性流体の溶液または懸濁液の活性成分を、適当な機械を用いて、グリース状または非グリース状基材と混合することにより製造してもよい。該基材は硬質、軟質または流動パラフィンのような炭化水素、グリセロール、ミツロウ、金属石鹸；粘液；アーモンド、コーン、落花生、ゴマまたはオリーブ油のような天然源の油；羊毛脂またはその誘導体、またはステアリン酸またはオレイン酸のような脂肪酸と、プロピレングリコールまたはマクロゴールのようなアルコールとからなっていてもよい。該処方は、アニオン性、カチオン性またはノニオン性界面活性剤、例えばソルビタンエステルまたはそのポリオキシエチレン誘導体のような界面活性剤を配合することができる。天然ガムのような沈殿防止剤、セルロース誘導体またはシリカのような無機物質およびラノリンのような他の成分もまた配合されていてもよい。本発明の化合物の個々の投与における最適量および間隔は、治療される症状の性質および程度、投与の形態、経路および部位、ならびに治療される個々の動物により決定され、そのような最適量は慣用的技法により決定できることは当業者に明らかである。さらに、最適な治療コース、すなわち、所定の日数の間に、一日に投与する本発明の化合物の投与回数は、通常の治療決定試験に従って当業者であれば確認できるのは明らかである。当業者であれば、さらに工夫を施すことなく、前記した記載に従って、本発明をその十分な程度まで利用できる。したがって、以下の実施例は単なる例示であって、本発明の範囲を何ら制限するものではないと解釈すべきである。実施例Ｉ．組成物の例示実施例Ａ−カプセル組成物カプセルの形態の本発明の医薬組成物を、標準的な２ピース型ハードゼラチンカプセルに、５０ｍｇの粉末形の本発明の化合物、１００ｍｇのラクトース、３２ｍｇのタルクおよび８ｍｇのステアリン酸マグネシウムを充填することにより調製する。実施例Ｂ−注射用非経口組成物注射による投与に適した形態の本発明の医薬組成物を、１.５重量％の本発明の化合物を１０容量％のプロピレングリコールおよび水中に撹拌することにより調製する。該溶液を濾過により滅菌処理する。実施例Ｃ−軟膏組成物本発明の化合物１.０ｇ白色軟質パラフィン１００.０ｇまで本発明の化合物を少量のビヒクル中に分散させ、徐々に多量のビヒクル中に配合し、滑らかで均質な製品を得る。ついで、折りたたみ金属チューブに該分散液を充填する。実施例Ｄ−局所用クリーム組成物本発明の化合物１.０ｇポラワックスＧＰ２００２０.０ｇ（Po1awax GP200）ラノリン無水物２.０ｇ白色ミツロウ２.５ｇヒドロキシ安息香酸メチル０.１ｇ蒸留水１００.０ｇまでポラワックス、ミツロウおよびラノリンを一緒に６０℃に加熱する。ヒドロキシ安息香酸メチルの溶液を加え、高速撹拌機を用いて均質化を達成する。ついで、温度を５０℃に下げる。ついで、本発明の化合物を加え、十分に分散させ、該組成物を低速で撹拌しながら冷却させる。実施例Ｅ−局所用ローション組成物本発明の化合物１.０ｇソルビタンモノラウレート０.６ｇポリソルベート２００.６ｇセトステアリルアルコール１.２ｇグリセリン６.０ｇヒドロキシ安息香酸メチル０.２ｇ精製水Ｂ.Ｐ. １００.００ｍｌまでヒドロキシ安息香酸メチルおよびグリセリンを、７５℃で７０ｍｌの水に溶かす。ソルビタンモノラウレート、ポリソルベート２０およびセトステアリルアルコールを７５℃で一緒に融解させ、その水溶液に加える。得られたエマルジョンを均質化し、連続して撹拌しながら冷却し、本発明の化合物を残りの水の懸濁液として加える。懸濁液全体が均質となるまで撹拌する。実施例Ｆ−点眼組成物本発明の化合物０.５ｇヒドロキシ安息香酸メチル０.０１ｇヒドロキシ安息香酸プロピル０.０４ｇ精製水Ｂ.Ｐ. １００.００ｍｌ(Ｂ.Ｐ.＝英国薬局方) ヒドロキシ安息香酸メチルおよびプロピルを７０ｍｌの精製水に７５℃で溶かし、得られた溶液を冷却する。ついで、本発明の化合物を加え、該溶液を膜フィルター（０.２２ｍμの孔径）を介する濾過により滅菌処理し、適当な滅菌容器に無菌的に充填する。実施例Ｇ−吸入による投与用の組成物１５−２０ｍｌの容量のエアロゾル容器について：１０ｍｇの本発明の化合物を０.２−０.２％の滑沢剤、例えば、ポリソルベート８５またはオレイン酸と混合し、かかる混合物を噴射剤、例えば、フレオン、好ましくは、１,２−ジクロロテトラフルオロエタンおよびジフルオロクロロメタンの組み合わせに分散させ、経鼻または経口吸入投与のいずれかに適する適当なエアロゾル容器に充填する。実施例Ｈ−吸入による投与用の組成物１５−２０ｍｌの容量のエアロゾル容器について：１０ｍｇの本発明の化合物をエタノール（６−８ｍｌ）に溶かし、０.１−０.２％の滑沢剤、例えば、ポリソルベート８５またはオレイン酸を加え、それを噴射剤、例えば、フレオン、好ましくは、１,２−ジクロロテトラフルオロエタンおよびジフルオロクロロメタンの組み合わせに分散させ、経鼻または経口吸入投与のいずれかに適する適当なエアロゾル容器に充填する。 II．合成方法以下の実施例において、ラパマイシンを醗酵操作により得、特記しない限り、他のすべての出発物質および化学試薬を商業的供給源より入手した。実施例１７−デメトキシ−７,８−デヒドロラパマイシンの調製ラパマイシン（４.０ｇ、４.３７ミリモル）の無水エーテル（７９ｍｌ）中懸濁液に、無水過塩素酸リチウム（４２.２ｇ、３９６.６ミリモル）および少量の酢酸（６７ｍｇ、１.１ミリモル）を加え、得られた溶液を室温で３時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、塩化メチレンで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して黄色固体にした。粗物質を逆相クロマトグラフィー（Rainin Dynamax-60A 8μm C18）に付して精製し；メタノール：水（８７：１３）で溶出し、白色粉末として標記化合物を得た（１.２７ｇ、３３％）。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨz，トランス：シスのアミド回転異性体の２.５：１混合物；トランス−回転異性体のついてのデータ）：δ ６.４８（ｄｄ,Ｊ＝１４.４,１１.５Ｈz,１Ｈ）、６.２６（ｄｄ,Ｊ＝１４.４, １０.９Ｈz,１Ｈ）、６.２３（ｄ,Ｊ＝１５.８Ｈz,１Ｈ）、６.１９（ｄ,Ｊ＝１１.５Ｈz,１Ｈ）、６.１２（ｄｄ,Ｊ＝１５.０,１０.９Ｈz,１Ｈ）、５.７７（ｄｄ,Ｊ＝１５.８,３.６Ｈz,１Ｈ）、５.４３（ｄｄ,Ｊ＝１５.０,９.０Ｈz,１Ｈ）、５.４１（ｄ,Ｊ＝１０.０Ｈz,１Ｈ）、５.２０（ｄ,Ｊ＝５.１Ｈz,１Ｈ）、５.１４（ｍ,１Ｈ）、４.５８（ｂｒｄ,Ｊ＝１０.１Ｈz,１Ｈ）、４.２４（ｄ ,Ｊ＝４.１Ｈz,１Ｈ）、３.９９（ｄ,Ｊ＝４.１Ｈz,１Ｈ）、３.４５（ｂｒｄ, Ｊ＝１４.５Ｈz,１Ｈ）、３.４０（ｓ,３Ｈ）、３.３３（ｓ,３Ｈ）、３.１６（ｄｑ,Ｊ＝１０.０,６.６Ｈz,１Ｈ）、２.６４（ｄｄ,Ｊ＝１７.５,４.５Ｈz,１Ｈ）、２.３５（ｄｄ,Ｊ＝１７.５,７.０Ｈz,１Ｈ）、１.８３（ｓ,３Ｈ）、１. ７２（ｓ,３Ｈ）、１.０７（ｄ,Ｊ＝６.６Ｈz,３Ｈ）、１.０２（ｄ,Ｊ＝６.６Ｈz,３Ｈ）、０.９６（ｄ,Ｊ＝６.６Ｈz,３Ｈ）、０.９２（ｄ,Ｊ＝６.６Ｈz,３Ｈ）、０.８６（ｄ,Ｊ＝６.６Ｈz,３Ｈ）、０.６２（ｑ,Ｊ＝１２.０Ｈz,１Ｈ）；¹³ ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，１００.６ＭＨz，トランス：シスのアミド回転異性体の３：１混合物；トランス−回転異性体についてのデータ）：δ２１２.４、２０７.５、１９６.８、１６９.７、１６５.９、１３９.２、１３５.２、１３４. ７、１３３.３、１３０.９、１３０.７、１２９.５、１２７.９、１２６.０、９９.０、８４.４、８３.９、７６.４、７４.８、７３.９、６９.３、５８.２、５６.７、５１.９、４５.９、４４.４、４１.９、２１.３、２１.０、１６.１、１５.９、１５.８、１５.６、１４.３、１３.７、１２.９；ＭＳ（ＥＳＩ⁺／ＮＨ₄ ＯＡc）ｍ／ｚ９０４（Ｍ＋ＮＡ⁺）、８９９（Ｍ＋ＮＨ₄ ⁺）、８８２、８６４；ＭＳ（ＥＳＩ^-／ＮＨ₄ＣＯＯＨ）ｍ／ｚ９２６（Ｍ＋ＨＣＯＯ^-）；ＵＶ（ＭｅＯＨ）λ_max２９４、３０９、３２４ｎｍ。 III．生物学的例本発明の好ましい化合物を次の検定を用いて抗真菌および免疫抑制活性について分析した。抗真菌活性についての検定対数増殖の酵母生物（サッカロミセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisi ae））を完全寒天培地（ＹＰＤ）にプレートした。化合物を適当な水性または有機溶媒に溶かし、寒天上に穿孔したウェルに入れた。プレートを４８時間インキュベートし、阻害領域を測定した。免疫抑制活性についての有糸分裂促進検定ＢＤＦ１雌マウス由来の脾臓細胞を１０％ウシ胎児血清を有するＲＰＭＩに５ｘ１０⁶／ｍｌで安定させた。この懸濁液の１００μｌのアリコート（５ｘ１０⁵ 細胞）を９６−ウェルの丸底マイクロタイタープレート（Linbro、フロー・ラボラトリース（Flow Laboratories））に分配した。有糸分裂促進性剌激剤としてコンカナバリンＡ（５μｇ／ｍｌ）を加え、マイクロタイターウェルにおける最終容量をＲＰＭＩで２００μＬに調整した。細胞培養物を５％ＣＯ₂雰囲気にて３７℃で７２時間インキュベートし、０.５μＣi³Ｈ−チミジン（比活性２.００Ｃi／モル）で７２時間の培養の最後の１８時間パルス処理した。細胞を自動式複数サンプルハーベスターで収穫し、細胞関連の放射活性をベックマン式液体シンチレーションカウンターにて計数した。結果を四回の測定の平均値として表す。７２時間インキュベートした後に、トリパンブルー排除試験により細胞の生死を測定した。試験すべき化合物を細胞を添加する前に適当な希釈度でマイクロタイタープレートに添加した。生物学的データ好ましい化合物は、サッカロミセス・セレビシエに対して７ｎｇ／ｍＬのＩＣ₁₂ を、有糸分裂促進検定にて７ｎＭのＩＣ₅₀を示した。ＩＣ₁₂とは１２ｍｍの抑制領域をもたらす前記した抗真菌寒天拡散検定における薬剤の濃度をいう。これらの結果は該化合物が抗真菌および免疫調節の両方の活性を有することを示している。前記した説明および実施例は、本発明および本発明の製法および使用法を含め、その好ましい具体例を十分に開示するものである。しかし、本発明は前記した明細書に記載の特定の具体例に限定されるものではなく、その一切の修飾も後記する請求の範囲の範囲内に含めるものであると理解すべきである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/445 ＡＢＥ 9454−4ＣＡ６１Ｋ 31/445 ＡＢＥＡＢＦ 9454−4ＣＡＢＦＡＢＧ 9454−4ＣＡＢＧＡＢＰ 9454−4ＣＡＢＰＡＣＤ 9454−4ＣＡＣＤＡＣＶ 9454−4ＣＡＣＶＡＤＡ 9454−4ＣＡＤＡ

Claims

【特許請求の範囲】１．式：［式中、Ｒ¹およびＲ²は、＝Ｏ、（−ＯＨ，Ｈ）および（Ｈ，Ｈ）からなる群より選択され；Ｒ³およびＲ⁴は、＝Ｏ、（Ｈ，Ｈ）および（Ｈ，ＯＨ）からなる群より選択され；およびＲ⁵およびＲ⁶は、＝Ｏおよび（Ｈ，ＯＨ）からなる群より選択される］で示される化合物、またはその医薬上許容されるすべての塩、水和物もしくは溶媒和物。２．Ｒ¹，Ｒ²が（ＯＨ，Ｈ）である請求項１記載の化合物。３．Ｒ³がＲ⁴と一緒になって＝Ｏである請求項１記載の化合物。４．Ｒ⁵がＲ⁶と一緒になって＝Ｏである請求項１記載の化合物。５．Ｒ¹，Ｒ²が（ＯＨ，Ｈ）であり、Ｒ³，Ｒ⁴が＝Ｏであって、Ｒ⁵，Ｒ⁶が＝Ｏである請求項１記載の化合物。６．医薬上許容される担体または賦形剤と、治療または予防に有効な量の１または２以上の請求項１の化合物とからなる医薬組成物。７．医薬上許容される担体または賦形剤と、治療または予防に有効な量の請求項２の化合物とからなる医薬組成物。８．医薬上許容される担体または賦形剤と、治療または予防に有効な量の請求項３の化合物とからなる医薬組成物。９．医薬上許容される担体または賦形剤と、治療または予防に有効な量の請求項４の化合物とからなる医薬組成物。 10．医薬上許容される担体または賦形剤と、治療または予防に有効な量の請求項５の化合物とからなる医薬組成物。 11．病原性真菌の増殖の阻害を必要とするヒトまたはヒト以外の動物における該真菌の増殖阻害法であって、そのようなヒトまたはヒト以外の動物に有効な非毒性量の請求項１の化合物を投与することからなる方法。 12．病原性真菌の増殖の阻害を必要とするヒトまたはヒト以外の動物における該真菌の増殖阻害法であって、そのようなヒトまたはヒト以外の動物に有効な非毒性量の請求項５の化合物を投与することからなる方法。 13．免疫抑制の誘発を必要とするヒトまたはヒト以外の動物において免疫抑制を誘発する方法であって、そのようなヒトまたはヒト以外の動物に有効な非毒性量の請求項１の化合物を投与することからなる方法。 14．免疫抑制の誘発を必要とするヒトまたはヒト以外の動物において免疫抑制を誘発する方法であって、そのようなヒトまたはヒト以外の動物に有効な非毒性量の請求項５の化合物を投与することからなる方法。 15．ラパマイシンまたはその適宜置換された誘導体を、高濃度の過塩素酸リチウムの溶液と接触させることからなる請求項１の化合物の製法。 16．過塩素酸リチウムの濃度が約３〜５Ｍである請求項１５記載の方法。 17．過塩素酸リチウムを無水ジエチルエーテルに溶かし、溶液を形成させる請求項１６記載の方法。 18．さらに、少量の酢酸を該溶液に添加することからなる請求項１７記載の方法。