JPH0383927A - 歯周組織再生促進剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、歯周炎により破壊された歯根膜を再生し、正
常な歯根と結合組織間の付着を促進するために用いる薬
剤に関する。

粱朱！蓋貨 従来、歯周炎の治療方法としては、主としてスケーリン
グ等による機械的な歯周ポケット内のプラーク除去が行
なわれ、また重篤な場合には歯周外科的処置が行なわれ
、加えて最近では抗生物質による化学療法も試みられて
いる。しかし、これらの療法は、歯周炎の進行を阻止す
るには有効な方策であるが、破壊された歯周組織を積極
的に修復、再生させるものではなく、臨床症状の改善は
あくまで生体の自己治癒力によるものである。

発明が解決しようとする課題 歯周組織は硬組織＜ｔｎ根）と軟組織（歯肉）が歯根膜
を介した線維性の強固な結合により付着するという他の
組織には見られない構造を有しているが、歯周炎により
歯周組織が破壊されると、歯根膜が再生する前に歯肉表
面の上皮細胞が破壊部分を被覆してしまう（上皮のダウ
ングロース）ために、上皮組織と歯根との緩い結合しか
生じない。このため歯周組織の修復、再生が遅延し、歯
肉の退縮が高頻度に生じる。これに対し、正常な線維性
結合を達成するために、従来から、（１）クエン酸によ
る根面処理（２）細胞付着性糖タンパクであるフィブロ
ネクチンの局所への適用（３）生体適合性の高い遮断膜
により上皮のダウングロースを抑制する誘導組織再生法
（ＧＴＲ法）が知られているが、（１）は細胞に対する
為害性、（２）は高分子であるフィブロネクチンの安定
性、抗原性、（３）は摘出のための再手術の必要性およ
び術者による差といった問題点を抱えており、安全性、
剤型化の容易性、有効性を兼ね備えた歯周組織再生を促
進する薬剤の開発が望まれている。

本発明は、前記安全性、安定性および有効性に優れた歯
周組織再生剤を提供することを目的とする。

課題を解決するための手段 Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−
ガラクトサミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンおよ
びこれらのアミノ糖がα−またはβ−１，４結合したオ
リゴ糖からなる群から選ばれるＮ−アセチル化アミノ糖
を活性成分として含有することを特徴とする歯周組織再
生剤を提供するものである。

これらのＮ−アセチル化アミノ糖は特公昭５８−１１９
２７号において、本出願人が歯垢の歯牙への付着抑制口
腔用組成物の有効成分として開示しているが、歯周炎の
治療においてこれを応用した報告はない。ところが、意
外にも、本発明者らは、これらのＮ−アセチル化アミノ
糖が歯周組織再生促進効果を有し、歯周炎の治療に有用
であることを見出した。

本発明で活性成分として用いるＮ−アセチル−Ｄ−グル
コサミンは昆虫や甲殻類の殻の多糖であるキチンの主成
分、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンはコンドロイチ
ン硫酸の主成分であり、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミ
ンとともに自然界に存在する。また、Ｎ−アセチル−Ｄ
−グルコサミンオリゴマーはキチンを加水分解し、中和
、脱塩の後、ゲル濾過法によって単離精製される。Ｎ−
アセチルーＤ−ガラクトサミンオリゴマーはＤ−ガラク
トサミンが主にα−１，４結合したα−ｌ。

４ポリガラクトサミンを加水分解、アセチル化後、ゲル
濾過法によって単離精製される。

これらの物質は生体由来物質であり非常に安全性が高く
、例えば培養したヒト歯根膜細胞に対する細胞毒性は１
０叩／−以上であり、有効性の観察されるｌＯ〜１００
μｇ／−では増殖阻害は全く見られない。

かくして、本発明の歯周組織再生促進剤は、通常の製剤
技術に従って、有効かつ非毒性量の該Ｎアセチル化アミ
ノ糖を医薬上許容される担体、例えば溶剤、等張化剤、
乳化剤、懸濁剤、安定化剤と合して外用剤（例えば、液
剤、乳液、ゲル剤）とすることができる。かかる本発明
の歯周組織再生促進剤は歯周外科処置、あるいは根面滑
沢処理後の歯根面および剥離歯肉面に直接投与すること
により使用できる。投与量は治療すべき症状、部位によ
り適宜増減できるが、通常、該Ｎ−アセチル化アミノ糖
を１０〜１００　μｇ／ａ１２（０，０Ｏ１〜０．０１
％）の濃度で１回０．ｌ〜０．３ｉ＋１２程度、１日１
〜３回患部に塗布、あるいは注入により適用すると、所
望の歯周組織再生促進効果が発揮される。

実施例 次に実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。

実施例１ 成分　　　　　　　　　　　　　量 Ｎ−ｙセｆルーＤ−７ン／　　　０．００２ｇサミン（
シグマ社製） 生理食塩水　　　　　　　全量１００ｇに調整これらの
成分を混合溶解し、無菌濾過して液剤を得る。

実施例２ 成分　　　　　　　　　　　　量 Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクト　　０．０１ｇサミノダイ
マー（フナコシ薬品） ステアリン酸　　　　　　　　　　　　２ｇセタノール
　　　　　　　　　　　　０．５ｇウラノリ２ｇ イソプロピルミリステート２ｇ スクワラン　　　　　　　　　　　　　３ｇ流動パラフ
ィン　　　　　　　　　　　８ｇポリオキシエチレンセ
チル　　　　１．７ｇエーテル トリエタノールアミン　　　　　　　　Ｉｇグリセリン
　　　　　　　　　　　４ｇ防腐剤　　　　　　　　　
　　　　　　適量精製水　　　　　　　　　全ｊｌｌｏ
ｏｇに調整これらの成分を用い、常法に従って乳液を得
る。

実施例３ 成分　　　　　　　　　　　　　量 Ｎ−アセチルーＤ−グルコ　　　　０．０１ｇサミノト
ライマー ラウリル硫酸ナトリウム　　　　　　０．２ｇカルボキ
シメチルセルロース　　　　　２ｇグリセリン　　　　
　　　　　　　４０ｇ精製水　　　　　　　　　全１！
１００ｇに調整これらの成分を混合し、ゲル剤を得る。

Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−
ガラクトサミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンおよ
びこれらのアミノ糖がα−またはβ−１，４結合による
オリゴ糖の歯周組織再生促進作用を試験した。以下にそ
の結果を示す。

（１）歯根膜線維芽細胞の運動性に対する作用ヒト抜去
歯に残存する歯根膜より歯根膜線維芽細胞を、歯肉組織
より上皮細胞を初代培養し、各種Ｎ−アセチル化アミノ
糖およびオリゴ糖を有する歯根膜線維芽細胞および歯肉
上皮細胞への走化性活性を、孔径８ミクロンのフィルタ
ーを用いた４８穴マイクロチヤンバー法により測定した
。

５．０ＸＩＯ”個／ｌｎＱの細胞懸濁液をチャンバーの
王室に、下室には各種のＮ−アセチル化アミノ糖および
オリゴ糖を１０〜１００μｇ／−の割合で加え、３７℃
で４時間インキュベートした。ついでフィルターを固定
し、デイツークイック（Ｄ　ｉｆＴ　−Ｑ　ｕｉｃｋ）
染色後、フィルターの底部まで遊走した細胞数を顕微鏡
下で計数した。対照として、検体を加えずに同様に試験
を行なった。対照の係数値を１００％とした場合のＮ−
アセチル化アミノ糖およびオリゴ糖添加時の相対的割合
を第１表に示す。

第１表 第１表に示すごとく、 Ｎ−アセチル−Ｄ−グル コサミンとそのダイマー、 トライマー、 Ｎ−アセ チルーＤ−ガラクトサミンとそのダイマー、トライマー
、さらにＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは、いずれも
が歯根膜線維芽細胞に対する特異的な走化性活性を有し
、歯肉上皮細胞にはほとんど作用しなかった。この結果
、明らかに、これらの薬剤は歯周組織再生の中心となる
歯根膜線維芽細胞のみをより選択的に病変部位に遁走せ
しめる作用を有する。

Ｃ２＞ｍ根膜線維芽細胞の増殖性に対する作用各種Ｎ−
アセチル化アミノ糖およびオリゴ糖の歯根膜線維芽細胞
の増殖性に対する作用を測定した。

直径３５ｍｍの組織培養用シャーレに歯根膜線維芽細胞
３．０Ｘ１０’個を播種し、３７°Ｃで１日インキュベ
ート後、各種Ｎ−アセチル化アミノ糖およびオリゴ糖を
ｌＯＯμｇ／ｍ１２の割合で加え、さらに３７°Ｃで２
日インキュベートした。ついで細胞を０．１５％トリプ
シン溶液でシャーレより剥離し、細胞数を血球計算盤に
より計測した。対照として、検体を加えずに同様に試験
を行なった。

各検体においてシャーレ中で増殖した細胞数を第２表に
示す。

第２表 第２表に示すごとく、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン
とそのダイマー、トライマー、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラ
クトサミンとそのダイマー、トライマー、さらにＮ−ア
セチル−Ｄ−マンノサミンは、いずれもが歯根膜線維非
細胞の増殖性を高めた。

（３〉イヌ歯肉剥離掻爬手術後の歯周組織再生過程に対
する作用 イヌ歯肉剥離掻爬手術後の歯周組織再生過程に対する各
種Ｎ−アセチル化アミノ糖およびオリゴ糖の作用を病理
組織学的定量評価法により検討した。ブラッシング等に
より健常な歯周組織を確立した上下顎小臼歯部に、常法
に従って歯肉剥離掻爬手術を施した。この際、後の病理
組織学的定量化の基準点とするため、歯槽骨の削除を実
施する前後で、根面にノツチと呼ばれる基準点を付与し
た。検体は実施例３で示したと同様なゲル剤とし、左側
上下顎の露出した根面上に１部位当り５０Ｒ９を投与し
、対照として右側上下顎には薬物を配合しないゲル剤を
投与した。手術後は歯肉弁を復位し、縫合とパックによ
る保護を１週間施した。評価は術後４週目に被検部位を
採取し、常法により組織標本を作成した後、顕微鏡下で
接眼マイクロメーターを用いて各部位間の距離を測定し
、以下の基準で定量化した。

■＝上皮のダウングロース率（％） ２：線維性付着率（％） 線維が垂直および斜走する部分の長さ 結果を表３に示す。

第３表 第３表に示すごとく、 Ｎ−アセチル ガラ クトサミンとそのトライマー、さらにＮ−アセチル−Ｄ
−ゲルコサミノトライマーは、上皮のダウングロースを
わずかに抑制するとともに、線維性付着率に対しては明
らかに促進作用を示した。

以上の結果から明らかなごとく、Ｎ−アセチル化アミノ
糖およびオリゴ糖はすぐれた歯周組織再生促進作用を有
する。

発明の効果 本発明によれば、歯周炎の治療に有用な、安全性、安定
性および有効性に優れた歯周組織再生促進剤が得られる
。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、Ｎ−アセチン
   −Ｄ−ガラクトサミン、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミ
   ンおよびこれらがα−またはβ−１，４−結合したオリ
   ゴ糖からなる群から選ばれるＮ−アセチル化アミノ糖を
   活性成分として含有することを特徴とする歯周組織再生
   促進剤。