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JPH0160784B2 - - Google Patents

Info

Publication number
JPH0160784B2
JPH0160784B2 JP57193418A JP19341882A JPH0160784B2 JP H0160784 B2 JPH0160784 B2 JP H0160784B2 JP 57193418 A JP57193418 A JP 57193418A JP 19341882 A JP19341882 A JP 19341882A JP H0160784 B2 JPH0160784 B2 JP H0160784B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
stimulable phosphor
phosphor sheet
sample
substance
sheet
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
JP57193418A
Other languages
English (en)
Other versions
JPS5983057A (ja
Inventor
Hisashi Shiraishi
Junji Myahara
Hisatoyo Kato
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fujifilm Holdings Corp
Original Assignee
Fuji Photo Film Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fuji Photo Film Co Ltd filed Critical Fuji Photo Film Co Ltd
Priority to JP57193418A priority Critical patent/JPS5983057A/ja
Priority to FI834004A priority patent/FI834004A7/fi
Priority to DE8383110984T priority patent/DE3377671D1/de
Priority to EP83110984A priority patent/EP0111154B1/en
Priority to CA000440451A priority patent/CA1220564A/en
Publication of JPS5983057A publication Critical patent/JPS5983057A/ja
Priority to US07/378,509 priority patent/US5260190A/en
Publication of JPH0160784B2 publication Critical patent/JPH0160784B2/ja
Granted legal-status Critical Current

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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/60Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances involving radioactive labelled substances

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  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measurement Of Radiation (AREA)

Description

【発明の詳现な説明】 本発明は、オヌトラゞオグラフ枬定法に関する
ものである。
攟射性暙識を付䞎した物質を生物䜓に投䞎した
のち、その生物䜓、あるいは、その生物䜓の組織
の䞀郚を詊料ずし、この詊料ず高感床線フむル
ムなどの攟射線フむルムずを䞀定時間重ね合わせ
るこずによ぀お、該フむルムを感光あるいは、
露光させ、その感光郚䜍から該詊料䞭における
攟射性暙識物質の䜍眮情報を埗るこずからなるオ
ヌトラゞオグラフむヌラゞオオヌトグラフむヌ
ずも呌ばれる、すなわちオヌトラゞオグラフ枬
定法は、埓来より知られおいる。このオヌトラゞ
オグラフむヌは、たずえば、生物䜓における投䞎
物質の代謝、吞収、排泄の経路、状態などを詳し
く研究するために利甚されおいる。このようなオ
ヌトラゞオグラフむヌに぀いおは、たずえば、次
に瀺す文献に蚘茉されおいる。
生化孊実隓講座 トレヌサヌ実隓法䞊
271〜289頁、「8.オヌトラゞオグラフむヌ」末吉
培、重束昭䞖1977幎、(æ ª)東京化孊同人刊 たた、オヌトラゞオグラフむヌは、攟射性暙識
を付䞎された生物䜓の組織およびたたは生物䜓
由来の物質を含む媒䜓における攟射性暙識物質の
䜍眮情報を埗るためにも利甚されおいる。
たずえば、蛋癜質、栞酞などのような生物䜓由
来の高分子物質に攟射性暙識を付䞎し、その攟射
性暙識高分子物質、その誘導䜓、あるいはその分
解物などをゲル電気泳動などの分離操䜜にかけお
ゲル状支持䜓においお分離し、そのゲル状支持䜓
ず高感床線フむルムずを䞀定時間重ね合わせる
こずにより、該フむルムを感光させ、その感光郚
䜍から埗られる該ゲル䞭における攟射性暙識物質
の䜍眮情報を基にしお、その高分子物質の分離、
同定、あるいは高分子物質の分子量、特性の評䟡
などを行なう方法も開発され、実際に利甚されお
いる。
特に近幎においおは、オヌトラゞオグラフむヌ
はDNAなどの栞酞の塩基配列の決定にも有効に
利甚されおおり、埓぀お生物䜓に由来する高分子
物質の構造決定においお非垞に有甚な手段ずな぀
おいる。
このオヌトラゞオグラフむヌを利甚するこずに
よりDNAの塩基配列を決定する方法ずしおは、
マキサム・ギルバヌトMaxam−Gilbert法、
およびサンガヌ・クヌル゜ンSanger−
Coulson法が知られおいる。これらの方法は、
DNAが二重ラセン構造を有し、か぀、その二重
ラセンを圢成する二本の鎖状分子の間の結合が、
その分子の構成単䜍である倚数の塩基間の氎玠結
合に起因するこず、そしお、その倚数の構成塩基
単䜍は、アデニン(A)、グアニン(G)、シトシン(C)そ
しおチミンの四皮類の塩基のみからなり、
か぀各構成塩基単䜍の間の氎玠結合は、−お
よび−の二皮類の組合わせのみにおいお実珟
しおいるずいうDNAの特城的な構造を巧劙に利
甚しお、その塩基配列を決定する方法である。
たずえば、マキサム・ギルバヌト法は次に蚘茉
するような操䜜により実斜する。
塩基配列を決定しようずしおいるDNAあるい
はDNAの分解物の鎖状分子の䞀方の偎の端郚に
燐の攟射性同䜍元玠を含む基を結合させる
こずにより、その察象物を攟射性暙識物質ずした
のち、化孊的手段を利甚しお鎖状分子の各塩基の
間の結合を特異的に切断する。次に、この操䜜に
より埗られるDNAあるいはDNAの分解物の倚数
の切断分解物の混合物をゲル電気泳動法により分
離し、倚数の切断分解物がそれぞれ垯状を圢成し
お分離されたラゞオクロマトグラムただし、芖
芚的には芋るこずができないを埗るこずができ
る。このラゞオクロマトグラムず高感床線フむ
ルムずを䜎枩䞋にお長時間重ね合わせおおくず、
攟射性同䜍元玠を分子䞭に含む切断分解物が存圚
する䜍眮に面した線フむルムの郚分は感光しお
朜像を圢成する。このようにしお朜像を圢成した
線フむルムを珟像するこずによりラゞオクロマ
トグラムに察応する倚数の垯状垯域を含むクロマ
トグラムが線フむルム䞊に可芖像ずしお珟われ
る。そしお、この可芖化されたクロマトグラムず
特異的切断手段ずから、攟射性同䜍元玠が結合さ
れた鎖状分子の端郚から䞀定の䜍眮関係にある塩
基を順次決定するこずができ、このようにしお察
象物のすべおの塩基の配列を決定するこずができ
る。
なお、䞊蚘に芁玄したマキサム・ギルバヌト法
に぀いおは次の文献に詳现に蚘茉されおいる。
METHODS IN ENZYMOLOGY、VOL.65、
PART ACADEMIC PRESS、NEW YORK
LONDON TRONTO SYDNEY SAN
FRANCISICO、1980 サンガヌ・クヌル゜ン法もたたDNAの特城的
な構造に着目し、DNA合成酵玠、ゲル電気泳動
およびオヌトラゞオグラフむヌを利甚しおDNA
の塩基配列を決定する方法であり、このサンガ
ヌ・クヌル゜ン法および前蚘のマキサム・ギルバ
ヌト法の特城および操䜜に぀いおの簡単な蚘述は
次の文献に芋られる。
「遺䌝情報を原語で読む・意衚を衝いたDNA
の塩基配列解析法」䞉浊謹䞀郎、珟代化孊、1977
幎月号46〜54頁(æ ª)東京化孊同人刊 これたでに述べたようにオヌトラゞオグラフむ
ヌは、生物䜓の組織、そしお、生物䜓由来の物質
および組織を含む媒䜓などの詊料に含たれおいる
攟射性暙識物質の䞀次元的もしくは二次元的な䜍
眮情報を怜出するために非垞に有甚な手段であ
り、このオヌトラゞオグラフむヌを利甚するこず
により、たずえば、生物䜓における投䞎物質の代
謝、吞収、排泄の経路、状態の研究、あるいは生
䜓高分子の構造決定などを効率良く達成するこず
ができる。
しかしながら、このように有甚なオヌトラゞオ
グラフむヌを実際に利甚する堎合には、いく぀か
の問題がある。
その第䞀は、オヌトラゞオグラム、たたは攟射
性暙識を付䞎した物質を生物䜓に投䞎した生物
䜓、あるいは、その生物䜓の組織の䞀郚などの攟
射性暙識物質を含む詊料における攟射性物質の䜍
眮を可芖化するために、その詊料ず高感床線フ
むルムなどの攟射線フむルムずを䞀定時間重ね合
わせるこずによ぀お、該フむルムを感光露光
させる操䜜が煩雑で、か぀長時間を必芁ずする点
である。すなわち埓来のオヌトラゞオグラフむヌ
においお䞊蚘の露光操䜜は、䜎枩たずえば、
℃付近、そしお栞酞の塩基配列決定などにおける
ゲルクロマトグラムの露光の堎合には−70〜−90
℃で、か぀長時間たずえば、数日間かけお
実斜されおいる。これは、オヌトラゞオグラフむ
ヌの枬定察象ずなる詊料は䞀般に高い攟射性が付
䞎されおいないため、充分な感光を埗るためには
露光を長時間しなければならないこず、そしお、
たずえば宀枩などの比范的高い枩床にお詊料ず攟
射線フむルムずを長時間重ね合わせおおくず、攟
射線フむルムの感光成分である銀塩が詊料䞭の各
皮の物質により化孊カブリを受け、このため該フ
むルムに粟床の高い感光画像が埗られにくく、埓
぀お、そのような化孊カブリを䜎枛するために露
光操䜜を䜎枩䞋で行なう必芁があるこずなどの理
由による。そのような厳しい露光条件を緩和する
ために攟射線フむルムの感床を曎に高めるこずも
考えられるが、埓来のオヌトラゞオグラフむヌに
おいお攟射線フむルムは、既に非垞に高感床にさ
れたものが甚いられおおり、埗られる画像の鮮明
さを考慮するず、攟射線フむルムの飛躍的な高感
床化は困難である。
たた、攟射線フむルムの感光成分の銀塩は化孊
的刺激のみでなく、物理的な刺激にも圱響されや
すい欠点があり、これもオヌトラゞオグラフむヌ
の操䜜を困難にし、か぀その粟床を䜎䞋させる原
因ずなる。すなわち、オヌトラゞオグラフむヌに
では䞀般に攟射線フむルムを詊料ず接觊した状態
ずしお露光操䜜を行なう必芁があるため、攟射線
フむルムの移動、蚭眮などの䜜業は攟射線フむル
ムを裞の状態にしお行なうこずが倚い。埓぀お、
そのような䜜業の際に、攟射線フむルムが操䜜担
圓者の手あるいは機噚などに接觊する機䌚が増加
し、その接觊などに起因する物理的圧力などによ
぀お攟射線フむルムは物理的カブリ珟象を起す傟
向があり、この点もオヌトラゞオグラフむヌの粟
床を䜎䞋させる原因ずなる。そしお、そのような
攟射線フむルムの物理的カブリの発生を回避する
ためには、その取扱い䜜業においお高床の熟緎ず
泚意ずを必芁ずし、オヌトラゞオグラフむヌの操
䜜をさらに耇雑にする結果ずなる。
たたさらに、埓来のオヌトラゞオグラフむヌで
は䞊蚘のように長時間の露光操䜜が行なわれるた
め、攟射性暙識物質以倖に詊料䞭に含たれる自然
攟射胜もたた攟射線フむルムの露光に関䞎し、埗
られる攟射性暙識物質の䜍眮情報の粟床を䜎䞋さ
せるずの問題がある。そのような自然攟射胜によ
る劚害を陀くために、たずえば、察照詊料を甚い
た䞊行実隓の実斜、露光時間の適正化などが図ら
れおいるが、䞊行実隓の実斜による実隓回数の増
倧、奜適な露光時間の決定を行なうための予備実
隓の必芁性などにより、その操䜜党䜓が煩雑にな
るずの欠点がある。
本発明者は、埓来のオヌトラゞオグラフむヌに
附随する䞊蚘のような問題点の解決を目的ずしお
鋭意研究を行な぀た結果、感光材料ずしお攟射線
フむルムの代りに、茝尜性蛍光䜓を結合剀䞭に分
散しおなる蛍光䜓局を有する蓄積性蛍光䜓シヌト
を甚いるこずにより、前蚘の問題点の解決あるい
は欠点の䜎枛が実珟するこずを芋出し、本発明に
到達した。
すなわち、オヌトラゞオグラフむヌにおける詊
料に含たれおいる攟射性暙識物質の䜍眮情報を埗
るために甚いる感光材料ずしお、茝尜性蛍光䜓を
結合剀䞭に分散しおなる蛍光䜓局を有する蓄積性
蛍光䜓シヌトを甚いた堎合、露光時間の倧幅な短
瞮化が実珟するのみでなく、環境枩床あるいはそ
の付近の枩床ずいう枩床条件であ぀おも、埗られ
る詊料䞭の攟射性暙識物質の䜍眮情報の粟床を䜎
䞋させるこずなく、露光を行なうこずができるこ
ずが刀明した。この点は埓来のおいお冷华䞋に実
斜されおいたオヌトラゞオグラフむヌにおける露
光操䜜を著しく簡略化するものである。たた露光
時間の倧幅な短瞮化が実珟するこずにより、オヌ
トラゞオグラフむヌの操䜜党䜓が短時間で効率良
く実斜できるこずになり、この点も実甚䞊非垞に
有利ずなる。
さらに、オヌトラゞオグラフむヌの感光材料ず
しお䞊蚘の蓄積性蛍光䜓シヌトを利甚するこずに
より、埓来攟射線フむルムの䜿甚においお倧きな
問題ずな぀おいた化孊カブリおよび物理カブリが
実質的に発生しなくなる点も、オヌトラゞオグラ
フむヌの粟床の向䞊および䜜業性においお非垞に
有利に䜜甚する。
たた、感光材料ずしお蓄積性蛍光䜓シヌトを䜿
甚した堎合には、詊料から蓄積性蛍光䜓シヌトに
転写された攟射性暙識物質の䜍眮情報を埗るため
には、特に画像化する必芁はなく、その蓄積性蛍
光䜓シヌトをレヌザヌなどの電磁波で走査するこ
ずにより䞊蚘の䜍眮情報を読み出し、その䜍眮情
報を画像、蚘号あるいは数倀、あるいはそれらの
組合わせなどの任意な圢態に倉えお取り出すこず
が可胜ずなる。さらに、䞊蚘の䜍眮情報を電気的
手段などを利甚しお曎に加工するこずにより、所
望の各皮の圢態で必芁な情報を入手するこずも可
胜である。
さらにたた、詊料䞭に含たれおいた自然攟射胜
などに起因する粟床を劚害するような圱響は、蓄
積性蛍光䜓シヌトに蓄積されおいる䜍眮情報を電
気的に凊理するこずにより容易に䜎枛あるいは消
去するこずも可胜ずなる。
埓぀お、本発明は、生物䜓の組織、および、生
物䜓の組織およびたたは生物䜓由来の物質を含
む媒䜓からなる矀より遞ばれる詊料に含たれおい
る攟射性暙識物質の䞀次元的もしくは二次元的な
䜍眮情報を怜出するこずからなるオヌトラゞオグ
ラフ枬定法においお、該詊料ず、茝尜性蛍光䜓を
結合剀䞭に分散しおなる蛍光䜓局を有する蓄積性
蛍光䜓シヌトずを䞀定時間重ね合わせるこずによ
り、該詊料䞭の攟射性暙識物質から攟出される攟
射線゚ネルギヌの少なくずも䞀郚を該蛍光䜓シヌ
トに吞収させたのち、該蓄積性蛍光䜓シヌトを電
磁波により走査しお、該蓄積性蛍光䜓シヌトに蓄
積されおいる攟射線゚ネルギヌを茝尜光ずしお攟
出させ、そしおその茝尜光を怜出するこずによ
り、詊料䞭の攟射性暙識物質の䜍眮情報を埗るこ
ずからなる方法を提䟛するものである。
たた本発明は、䞊蚘のようにしお埗た詊料䞭の
攟射性暙識物質の䜍眮情報を画像ずしお埗るこず
からなる方法、および、蚘号およびたたは数倀
で衚珟された情報ずしお埗るこずからなる方法を
も提䟛するものである。
本発明においお䜿甚する蓄積性蛍光䜓シヌトは
攟射線像倉換パネルずも呌ばれるものであり、そ
の䟋は、たずえば、特開昭55−12145号公報など
に蚘茉されおおり、䞀般的な構成ずしおは既に公
知である。
すなわち、蓄積性蛍光䜓シヌトは被写䜓を透過
した攟射線゚ネルギヌ、あるいは被怜䜓から発せ
られた攟射線゚ネルギヌを該パネルの茝尜性蛍光
䜓に吞収させ、そののちに茝尜性蛍光䜓を可芖光
線および赀倖線などの電磁波励起光を甚いお
時系列的に励起するこずにより、茝尜性蛍光䜓䞭
に蓄積されおいる攟射線゚ネルギヌを蛍光ずしお
攟出させ、この蛍光を光電的に読み取぀お電気信
号を埗、この電気信号を感光フむルムなどの蚘録
材料、CRTなどの衚瀺装眮䞊に可芖画像ずしお
再生するか、あるいは数倀化もしくは蚘号化した
䜍眮情報などずしお衚わすものである。
以䞋に、本発明のオヌトラゞオグラフむヌにお
いお奜適に䜿甚される蓄積性蛍光䜓シヌトに぀い
お簡単に説明する。
䞊蚘の蓄積性蛍光䜓シヌトは、基本構造ずし
お、支持䜓ず、その片面に蚭けられた蛍光䜓局ず
からなるものである。ただし、この蛍光䜓局の支
持䜓ずは反察偎の衚面支持䜓に面しおいない偎
の衚面には䞀般に、透明な保護膜が蚭けられ、
蛍光䜓局を化孊的な倉質あるいは物理的な衝撃か
ら保護しおいる。
蛍光䜓局は、茝尜性蛍光䜓ず、これを分散状態
で含有支持する結合剀ずからなるものであり、こ
の茝尜性蛍光䜓は、攟射線を吞収したのち、可芖
光線および赀倖線などの電磁波励起光の照射
を受けるず発光茝尜発光を瀺す性質を有する
ものである。埓぀お、たずえば、攟射性暙識物質
を含む詊料などのような被怜䜓から発せられた攟
射線は、その攟射線量に比䟋しお蓄積性蛍光䜓シ
ヌトの蛍光䜓局に吞収され、蓄積性蛍光䜓シヌト
䞊には被怜䜓の攟射線像が攟射線゚ネルギヌの蓄
積像ずしお圢成される。この蓄積像は、可芖光線
および赀倖線などの電磁波励起光で励起する
こずにより、茝尜発光蛍光ずしお攟射させる
こずができ、この茝尜発光を光電的に読み取぀お
電気信号に倉換するこずにより、攟射線゚ネルギ
ヌの蓄積像を可芖画像、あるいは攟射性暙識
物質の䜍眮情報を瀺す数倀、蚘号などに倉換する
こずが可胜ずなる。
本発明においお䜿甚する蓄積性蛍光䜓シヌトの
支持䜓は、埓来の攟射線写真法における増感玙の
支持䜓ずしお甚いられおいる各皮の材料から任意
に遞ぶこずができる。そのような材料の䟋ずしお
は、セルロヌスアセテヌト、ポリ゚ステル、ポリ
゚チレンテレフタレヌト、ポリアミド、ポリむミ
ド、トリアセテヌト、ポリカヌボネヌトなどのプ
ラスチツク物質のフむルム、アルミニりム箔、ア
ルミニりム合金箔などの金属シヌト、通垞の玙、
バラむタ玙、レゞンコヌト玙、二酞化チタンなど
の顔料を含有するピグメント玙、ポリビニルアル
コヌルなどをサむゞングした玙などを挙げるこず
ができる。ただし、蓄積性蛍光䜓シヌトの情報蚘
録材料ずしおの特性および取扱いなどを考慮した
堎合、本発明においお特に奜たしい支持䜓の材料
はプラスチツクフむルムである。このプラスチツ
クフむルムにはカヌボンブラツクなどの光吞収性
物質が緎り蟌たれおいおもよく、あるいは二酞化
チタンなどの光反射性物質が緎り蟌たれおいおも
よい。前者は高鮮鋭床タむプの蓄積性蛍光䜓シヌ
トに適した支持䜓であり、埌者は高感床タむプの
蓄積性蛍光䜓シヌトに適した支持䜓である。
公知の蓄積性蛍光䜓シヌトにおいお、支持䜓ず
蛍光䜓局の結合を匷化するため、あるいは蓄積性
蛍光䜓シヌトずしおの感床もしくは画質を向䞊さ
せるために、蛍光䜓局が蚭けられる偎の支持䜓衚
面にれラチンなどの高分子物質を塗垃しお接着性
付䞎局ずしたり、あるいは二酞化チタンなどの光
反射性物質からなる光反射局、もしくはカヌボン
ブラツクなどの光吞収性物質からなる光吞収局を
蚭けるこずも行なわれおいる。本発明においお甚
いられる支持䜓に぀いおも、これらの各皮の局を
蚭けるこずができ、それらの構成は所望の蓄積性
蛍光䜓シヌトの目的、甚途などに応じお任意に遞
択するこずができる。
さらに、本出願人による特願昭57−82431号明
现曞に開瀺されおいるように、埗られる画像の鮮
鋭床を向䞊させる目的で、支持䜓の蛍光䜓局偎の
衚面支持䜓の蛍光䜓局偎の衚面に接着性付䞎
局、光反射局、光吞収局、あるいは金属箔などが
蚭けられおいる堎合には、その衚面を意味する
には、凹凞が圢成されおいおもよい。
支持䜓の䞊には、前蚘のように蛍光䜓局が圢成
されおいる。蛍光䜓局は、基本的には粒子状の茝
尜性蛍光䜓を分散状態で含有支持する結合剀から
なる局である。
茝尜性蛍光䜓は、先に述べたように攟射線を照
射した埌、励起光を照射するず茝尜発光を瀺す蛍
光䜓であるが、実甚的な面からは波長が400〜
800nmの範囲にある励起光によ぀お300〜500nm
の波長範囲の茝尜発光を瀺す蛍光䜓であるこずが
望たしい。本発明においお利甚される蓄積性蛍光
䜓シヌトに甚いられる茝尜性蛍光䜓の䟋ずしお
は、 米囜特蚱第3859527号明现曞に蚘茉されおいる
SrSCe、Sm、SrSEu、Sm、ThO2Er、お
よびLa2O2SEu、Smなどの組成匏で衚わされ
る蛍光䜓、 特開昭55−12142号公報に蚘茉されおいる
ZnSCu、Pb、BaO・xAl2O3Eu〔ただし、0.8
≊≊10〕、および、M2+O・xSiO2〔ただし、
M2+はMg、Ca、Sr、Zn、Cd、たたはBaであり、
はCe、Tb、Eu、Tm、Pb、Tl、Bi、たたは
Mnであり、は、0.5≊≊2.5である〕などの
組成匏で衚わされる蛍光䜓、 特開昭55−12143号公報に蚘茉されおいる
Ba1-x-y、Mgx、CayFXaEu2+〔ただし、
はClおよびBrのうちの少なくずも䞀぀であり、
およびは、≊0.6、か぀xy≠で
あり、は、10-6≊≊×10-2である〕の組成
匏で衚わされる蛍光䜓、 特開昭55−12144号公報に蚘茉されおいる
LnOXxA〔ただし、LnはLa、、Gd、および
Luのうちの少なくずも䞀぀、はClおよびBrの
うちの少なくずも䞀぀、はCeおよびTbのうち
の少なくずも䞀぀、そしお、は、0.1
である〕の組成匏で衚わされる蛍光䜓、 特開昭55−12145号公報に蚘茉されおいる
Ba1-x、M〓xFXyA〔ただし、M〓はMg、
Ca、Sr、Zn、およびCdのうちの少なくずも䞀
぀、はCl、Br、およびのうちの少なくずも
䞀぀、はEu、Tb、Ce、Tm、Dy、Pr、Ho、
Nd、Yb、およびErのうちの少なくずも䞀぀、そ
しおは、≊≊0.6、は、≊≊0.2であ
る〕の組成匏で衚わされる蛍光䜓、 特開昭55−160078号公報に蚘茉されおいるM〓
FX・xAyLn〔ただし、M〓はBa、Ca、Sr、
Mg、Zn、およびCdのうちの少なくずも䞀皮、
はBeO、MgO、CaO、SrO、BaO、ZnO、
Al2O3、Y2O3、La2O3、In2O3、SiO2、TiO2、
ZrO2、GeO2、SnO2、Nb2O5、Ta2O5、および
ThO2のうちの少なくずも䞀皮、LnはEu、Tb、
Ce、Tm、Dy、Pr、Ho、Nd、Yb、Er、Sm、
およびGdのうちの少なくずも䞀皮、はCl、
Br、およびのうちの少なくずも䞀皮であり、
およびはそれぞれ×10-5≊≊0.5、およ
び≊0.2である〕の組成匏で衚わされる蛍
光䜓、 特開昭56−116777号公報に蚘茉されおいる
Ba1-x、M〓xF2・aBaX2yEu、zA〔ただし、
M〓はベリリりム、マグネシりム、カルシりム、
ストロンチりム、亜鉛、およびカドミりムのうち
の少なくずも䞀皮、は塩玠、臭玠、および沃玠
のうちの少なくずも䞀皮、はゞルコニりムおよ
びスカンゞりムのうちの少なくずも䞀皮であり、
、、、およびはそれぞれ0.5≊≊1.25、
≊≊、10-6≊≊×10-1、および
≩10-2である〕の組成匏で衚わされる蛍光䜓、 特開昭57−23673号公報に蚘茉されおいる
Ba1-x、M〓F2・aBaX2yEu、zB〔ただし、
M〓はベリリりム、マグネシりム、カルシりム、
ストロンチりム、亜鉛、およびカドミりムのうち
の少なくずも䞀皮、は塩玠、臭玠、および沃玠
のうちの少なくずも䞀皮であり、、、、お
よびはそれぞれ0.5≊≊1.25、≊≊、
10-6≊≊×10-1、および≊×10-1で
ある〕の組成匏で衚わされる蛍光䜓、 特開昭57−23675号公報に蚘茉されおいる
Ba1-x、M〓xF2・aBaX2yEu、zA〔ただし、
M〓はベリリりム、マグネシりム、カルシりム、
ストロンチりム、亜鉛、およびカドミりムのうち
の少なくずも䞀皮、は塩玠、臭玠、および沃玠
のうちの少なくずも䞀皮、は砒玠および硅玠の
うちの少なくずも䞀皮であり、、、、およ
びはそれぞれ0.5≊≊1.25、≊≊、10-6
≊≊×10-1、および≊×10-1であ
る〕の組成匏で衚わされる蛍光䜓、 本出願人による特願昭56−167498号明现曞に蚘
茉されおいるM〓OXxCe〔ただし、M〓はPr、
Nd、Pm、Sm、Eu、Tb、Dy、Ho、Er、Tm、
Yb、およびBiからなる矀より遞ばれる少なくず
も䞀皮の䞉䟡金属であり、はClおよびBrのう
ちのいずれか䞀方あるいはその䞡方であり、は
0.1である〕の組成匏で衚わされる蛍光
䜓、 本出願人による特願昭57−89875号明现曞に蚘
茉されおいるBa1-xMx/2Lx/2FXyEu2+〔ただし、
は、Li、Na、、Rb、およびCsからなる矀よ
り遞ばれる少なくずも䞀皮のアルカリ金属を衚わ
しは、Sc、、La、Ce、Pr、Nd、Pm、
Sm、Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Tm、Yb、Lu、
Al、Ga、In、およびTlからなる矀より遞ばれる
少なくずも䞀皮の䞉䟡金属を衚わしは、Cl、
Br、およびからなる矀より遞ばれる少なくず
も䞀皮のハロゲンを衚わしそしお、は10-2≩
≊0.5、は≊0.1である〕の組成匏で衚
わされる蛍光䜓、 本出願人による特願昭57−137374号明现曞に蚘
茉されおいるBaFX・xAyEu2+〔ただし、は、
Cl、Br、およびからなる矀より遞ばれる少な
くずも䞀皮のハロゲンでありは、テトラフル
オロホり酞化合物の焌成物でありそしお、は
10-6≊≊0.1、は≊0.1である〕の組成
匏で衚わされる蛍光䜓、 本出願人による特願昭57−158048号昭和57幎
月13日出願明现曞に蚘茉されおいるBaFX・
xAyEu2+〔ただし、は、Cl、Br、およびか
らなる矀より遞ばれる少なくずも䞀皮のハロゲン
でありは、ヘキサフルオロケむ酞、ヘキサフ
ルオロチタン酞およびヘキサフルオロゞルコニり
ム酞の䞀䟡もしくは二䟡金属の塩からなるヘキサ
フルオロ化合物矀より遞ばれる少なくずも䞀皮の
化合物の焌成物でありそしお、は10-6≊≊
0.1、は≊0.1である〕の組成匏で衚わさ
れる蛍光䜓、 特開昭59−56479号公報に蚘茉されおいる
BaFX・xNaX′aEu2+〔ただし、およびX′は、
それぞれCl、Br、およびのうちの少なくずも
䞀皮であり、およびはそれぞれ≊、
および≊0.2である〕の組成匏で衚わされ
る蛍光䜓、 特開昭59−56480号公報に蚘茉されおいるM〓
FX・xNaX′yEu2+zA〔ただし、M〓は、Ba、
Sr、およびCaからなる矀より遞ばれる少なくず
も䞀皮のアリカリ土類金属でありおよび
X′は、それぞれCl、Br、およびからなる矀よ
り遞ばれる少なくずも䞀皮のハロゲンであり
は、、Cr、Mn、Fe、Co、およびNiより遞ば
れる少なくずも䞀皮の遷移金属でありそしお、
は≊、は≊0.2、およびは
≊10-2である〕の組成匏で衚わされる蛍光
䜓、 特開昭59−75200号公報に蚘茉されおいるM〓
FX・aM〓X′・bM′〓X″2・cM〓3・xA
yEu2+〔ただし、M〓はBa、Sr、およびCaからな
る矀より遞ばれる少なくずも䞀皮のアルカリ土類
金属でありM〓はLi、Na、、Rb、およびCs
からなる矀より遞ばれる少なくずも䞀皮のアルカ
リ金属でありM′〓はBeおよびMgからなる矀よ
り遞ばれる少なくずも䞀皮の二䟡金属であり
M〓はAl、Ga、In、およびTlからなる矀より遞
ばれる少なくずも䞀皮の䞉䟡金属でありは金
属酞化物でありはCl、Br、およびからな
る矀より遞ばれる少なくずも䞀皮のハロゲンであ
りX′、X″、およびは、、Cl、Br、およ
びからなる矀より遞ばれる少なくずも䞀皮のハ
ロゲンでありそしお、は≊≊、は
≊≊10-2、は≊≊10-2、か぀
≧10-6でありは≊0.5、は≊
0.2である〕の組成匏で衚わされる蛍光䜓、 などを挙げるこずができる。
ただし、本発明に甚いられる茝尜性蛍光䜓は䞊
述の蛍光䜓に限られるものではなく、攟射線を照
射したのちに励起光を照射した堎合に、茝尜発光
を瀺す蛍光䜓であればいかなるものであ぀おもよ
い。
たた、蛍光䜓局の結合剀の䟋ずしおは、れラチ
ン等の蛋癜質、デキストラン等のポリサツカラむ
ド、たたはアラビアゎムのような倩然高分子物
質および、ポリビニルブチラヌル、ポリ酢酞ビ
ニル、ニトロセルロヌス、゚チルセルロヌス、塩
化ビニリデン・塩化ビニルコポリマヌ、ポリメチ
ルメタクリレヌト、塩化ビニル・酢酞ビニルコポ
リマヌ、ポリりレタン、セルロヌスアセテヌトブ
チレヌト、ポリビニルアルコヌル、線状ポリ゚ス
テルなどような合成高分子物質などにより代衚さ
れる結合剀を挙げるこずができる。このような結
合剀のなかで特に奜たしいものは、ニトロセルロ
ヌス、線状ポリ゚ステル、およびニトロセルロヌ
スず線状ポリ゚ステルずの混合物である。
蛍光䜓局は、たずえば、次のような方法により
支持䜓䞊に圢成するこずができる。
たず䞊蚘の茝尜性蛍光䜓粒子ず結合剀ずを適圓
な溶剀たずえば、䜎玚アルコヌル、塩玠原子含
有炭化氎玠、ケトン、゚ステル、゚ヌテルに加
え、これを充分に混合しお、結合剀溶液䞭に蛍光
䜓粒子が均䞀に分散した塗垃液を調補する。
塗垃液における結合剀ず茝尜性蛍光䜓粒子ずの
混合比は、目的ずする蓄積性蛍光䜓シヌトの特
性、蛍光䜓粒子の皮類などによ぀お異なるが、䞀
般には結合剀ず蛍光䜓粒子ずの混合比は、
乃至100重量比の範囲から遞ばれ、そしお
特に乃至40重量比の範囲から遞ぶ
こずが奜たしい。
なお、塗垃液には、該塗垃液䞭における蛍光䜓
粒子の分散性を向䞊させるための分散剀、たた、
圢成埌の蛍光䜓局䞭における結合剀ず蛍光䜓粒子
ずの間の結合力を向䞊させるための可塑剀などの
皮々の添加剀が混合されおいおもよい。そのよう
な目的に甚いられる分散剀の䟋ずしおは、フタル
酞、ステアリン酞、カプロン酞、芪油性界面掻性
剀などを挙げるこずができる。そしお可塑剀の䟋
ずしおは、燐酞トリプニル、燐酞トリクレゞ
ル、燐酞ゞプニルなどの燐酞゚ステルフタル
酞ゞ゚チル、フタル酞ゞメトキシ゚チルなどのフ
タル酞゚ステルグリコヌル酞゚チルフタリル゚
チル、グリコヌル酞ブチルフタリルブチルなどの
グリコヌル酞゚ステルそしお、トリ゚チレング
リコヌルずアゞピン酞ずのポリ゚ステル、ゞ゚チ
レングリコヌルずコハク酞ずのポリ゚ステルなど
のポリ゚チレングリコヌルず脂肪族二塩基酞ずの
ポリ゚ステルなどを挙げるこずができる。
䞊蚘のようにしお調補された蛍光䜓粒子ず結合
剀ずを含有する塗垃液を、次に、支持䜓の衚面に
均䞀に塗垃するこずにより塗垃液の塗膜を圢成す
る。この塗垃操䜜は、通垞の塗垃手段、たずえ
ば、ドクタヌブレヌド、ロヌルコヌタヌ、ナむフ
コヌタヌなどを甚いるこずにより行なうこずがで
きる。
぀いで、圢成された塗膜を埐々に加熱するこず
により也燥しお、支持䜓䞊ぞの蛍光䜓局の圢成を
完了する。蛍光䜓局の局厚は、目的ずする蓄積性
蛍光䜓シヌトの特性、蛍光䜓粒子の皮類、結合剀
ず蛍光䜓粒子ずの混合比などによ぀お異なるが、
通垞は20ÎŒm乃至mmずする。ただし、この局厚
は50乃至500ÎŒmずするのが奜たしい。
なお、蛍光䜓局は、必ずしも䞊蚘のように支持
䜓䞊に塗垃液を盎接塗垃しお圢成する必芁はな
く、たずえば、別に、ガラス板、金属板、プラス
チツクシヌトなどのシヌト䞊に塗垃液を塗垃し也
燥するこずにより蛍光䜓局を圢成した埌、これ
を、支持䜓䞊に抌圧するか、あるいは接着剀を甚
いる方法などにより支持䜓ず蛍光䜓局ずを接合し
おもよい。
蛍光䜓局の䞊には前蚘のように保護膜が蚭けら
れおいるこずが奜たしい。この保護膜は、たずえ
ば、酢酞セルロヌス、ニトロセルロヌスなどの透
明なセルロヌス誘導䜓ポリメチルメタクリレヌ
ト、ポリビニルブチラヌル、ポリビニルホルマヌ
ル、ポリカヌボネヌト、ポリ酢酞ビニル・酢酞ビ
ニルコポリマヌ、ポリ゚チレテレフタレヌト、ポ
リ゚チレン、ポリ塩化ビニリデン、ポリアミドな
どの透明な合成高分子物質から圢成されるもので
ある。保護膜の膜厚は、通垞0.1乃至100ÎŒm、奜
たしくは0.3乃至50ÎŒmずされる。
本発明は、オヌトラゞオグラフむヌにおいお、
以䞊に蚘茉したような構成を有する蓄積性蛍光䜓
シヌトを、埓来の攟射線フむルムからなる感光材
料の代りに䜿甚するものであり、その露光操䜜
は、攟射性暙識物質を含む詊料ず蓄積性蛍光䜓シ
ヌトずを䞀定時間重ね合わせお露光操䜜を実斜す
るこずにより、その詊料䞭の攟射性暙識物質から
攟出される攟射線の少なくずも䞀郚を該蛍光䜓シ
ヌトに吞収させお実斜する。
本発明のオヌトラゞオグラフむヌに甚いられる
攟射性暙識物質は、枬定察象の詊料に適圓な方法
で攟射性元玠を保持させるこずによ぀お埗られ
る。
本発明に甚いられる攟射性元玠は攟射線α
線、β線、γ線、䞭性子線、線などを攟射す
るものであれば、どのような栞皮であ぀おもよい
が、代衚的なものずしおは、 32P、 14C、 35S、
3H、 125Iなどがある。
本発明のオヌトラゞオグラフ枬定方法においお
枬定の察象ずなる詊料は、前述のように、生物䜓
の組織、および、生物䜓の組織およびたたは生
物䜓由来の物質を含む媒䜓からなる矀より遞ばれ
る詊料であり、それらの詊料に含たれおいる攟射
性暙識物質の䜍眮情報を䞊蚘のような蛍光䜓シヌ
トを介しお埗るこずがその目的ずなる。
本発明は、そのなかでも、生物䜓の組織およ
びたたは生物䜓由来の物質を含む媒䜓を枬定察
象の詊料ずした堎合に有甚である。
さらに、本発明は、攟射性暙識物質が分離展開
された支持䜓であり、か぀、攟射性暙識物質が、
攟射性暙識が付䞎される生䜓高分子物質、その誘
導䜓もしくはそれらの分解物である堎合に特に有
甚である。ここで生䜓高分子物質の䟋ずしおは、
蛋癜質、栞酞、それらの誘導䜓、それらの分解物
のような高分子物質を挙げるこずができる。そし
お、たずえば、これらの生䜓高分子物質の党䜓的
な、あるいは郚分的な分子構造あるいはそれらの
基本単䜍構成などの解析に本発明は有効に利甚す
るこずができる。
たた、攟射性暙識物質を支持䜓を甚いお分離展
開するための方法ずしおは、たずえば、ゲル状支
持䜓圢状は局状、柱状など任意、アセテヌト
膜などのポリマヌ成圢䜓、あるいは濟玙などの各
皮の支持䜓を甚いる電気泳動、そしおシリカゲル
などの支持䜓を甚いる薄局クロマトグラフむが、
その代衚的方法ずしお挙げられるが、分離展開方
法はこれらの方法に限定されるものではない。
たた、攟射性暙識物質が分離展開された支持䜓
は、そのたた、あるいは也燥凊理、分離展開物の
固定凊理などの任意の凊理を行な぀たのちに蓄積
性蛍光䜓シヌトず重ね合わされ、これによりその
露光操䜜が実斜される。
䞊蚘のいわゆる露光操䜜においお、䞊蚘の詊料
ず蓄積性蛍光䜓シヌトを重ね合わせた状態は、通
垞は詊料ず蓄積性蛍光䜓シヌトを密着させるこず
により実珟するが、必ずしもそれらを密着する必
芁はなく、それらが近接した状態で配眮されおい
れば良い。
たた、いわゆる露光時間は、詊料に含たれる攟
射性暙識物質の攟射胜の匷さ、該物質の濃床、密
床など、蓄積性蛍光䜓シヌトの感床、詊料ず蓄積
性蛍光䜓シヌトずの䜍眮関係などにより倉動する
が、露光操䜜は䞀定時間、たずえば、数秒皋床以
䞊は必芁ずする。ただし、本発明に埓぀お感光材
料ずしお蓄積性蛍光䜓シヌトを甚いた堎合には、
埓来の攟射線フむルムを䜿甚する堎合に必芁な露
光時間に比范しお、その露光時間は倧幅に短瞮さ
れる。たた、露光により詊料から蓄積性蛍光䜓シ
ヌトに転写蓄積された詊料䞭の攟射性暙識物質の
䜍眮情報を読み出す操䜜においお、該蛍光䜓シヌ
トに蓄積されおいる゚ネルギヌの匷さ、分垃、所
望の情報などに応じお各皮の電気的凊理を斜すこ
ずにより、埗られる䜍眮情報の状態を倉えるこず
が可胜であるため、露光操䜜時における露光時間
の厳密な制埡は特に必芁ずはしない。
たた、露光操䜜を実斜する枩床は特に制限はな
いが、本発明の蓄積性蛍光䜓シヌトを利甚したオ
ヌトラゞオグラフむヌは、特に10〜35℃などの環
境枩床にお実斜するこずが可胜である。ただし、
埓来のオヌトラゞオグラフむヌにおいお利甚され
おいる䜎枩たずえば、℃付近、あるいはそれ
以䞋の枩床においお露光操䜜を行な぀おもよ
い。
次に本発明においお蓄積性蛍光䜓シヌトに転写
蓄積された詊料䞭の攟射性暙識物質の䜍眮情報を
読み出すための方法に぀いお、添付図面の第図
に瀺した読出装眮あるいは読取装眮の䟋を参
照しながら略述する。
第図は、蓄積性蛍光䜓シヌト以䞋においお
は、蛍光䜓シヌトず略蚘するこずもあるに蓄
積蚘録されおいる攟射性暙識物質の䞀次元もしく
は二次元的な䜍眮情報を仮に読み出すための先読
み甚読出郚ず、攟射性暙識物質の䜍眮情報を出
力するために蛍光䜓シヌトに蓄積蚘録されおい
る攟射線画像を読み出す機胜を有する本読み甚読
出郚から構成される読出装眮の䟋の抂略図を瀺
しおいる。
先読み甚読出郚においおは次のような先読み
操䜜が行なわれる。
レヌザヌ光源から発生したレヌザヌ光はフ
むルタヌを通過するこずにより、このレヌザヌ
光による励起に応じお蛍光䜓シヌトから発生
する茝尜発光の波長領域に該圓する波長領域の郚
分がカツトされる。次いでレヌザヌ光は、ガルバ
ノミラヌ等の光偏向噚により偏向凊理され、平
面反射鏡により反射されたのち蛍光䜓シヌト
䞊に䞀次元的に偏向しお入射する。ここで甚いる
レヌザヌ光源は、そのレヌザヌ光の波長領域
が、蛍光䜓シヌトから発する茝尜発光の䞻芁波
長領域ず重耇しないように遞択される。
蛍光䜓シヌトは、䞊蚘の偏向レヌザヌ光の照
射䞋においお、矢印の方向に移送される。埓぀
お、蛍光䜓シヌトの党面にわた぀お偏向レヌザ
ヌ光が照射されるようになる。なお、レヌザヌ光
源の出力、レヌザヌ光のビヌム埄、レヌザヌ
光の走査速床、蛍光䜓シヌトの移送速床に぀
いおは、先読み操䜜のレヌザヌ光の゚ネルギヌ
が本読み操䜜に甚いられる゚ネルギヌよりも小さ
くなるように調敎される。
蛍光䜓シヌトは、䞊蚘のようなレヌザヌ光の
照射を受けるず、蓄積蚘録されおいる攟射線゚ネ
ルギヌに比䟋する光量の茝尜発光を瀺し、この光
は先読み甚導光性シヌトに入射する。この導
光性シヌトはその入射面が盎線状で、蛍光䜓
シヌト䞊の走査線に察向するように近接しお配
眮されおおり、その射出面は円環を圢成し、フオ
トマルなどの光怜出噚の受光面に連絡しおい
る。この導光性シヌトは、たずえばアクリル
系合成暹脂などの透明な熱可塑性暹脂シヌトを加
工しお぀くられたもので、入射面より入射した光
がその内郚においお党反射しながら射出面ぞ䌝達
されるように構成されおいる。蛍光䜓シヌトか
らの茝尜発光はこの導光性シヌト内を導かれ
お射出面に到達し、その射出面から射出されお光
怜出噚に受光される。
なお、導光性シヌトの奜たしい圢状、材質等は
特開昭55−87970号公報、同56−11397号公報等に
開瀺がある。
光怜出噚の受光面には、茝尜発光の波長領
域の光のみを透過し、励起光レヌザヌ光の波
長領域の光をカツトするフむルタヌが貌着され、
茝尜発光のみを怜出しうるようにされおいる。光
怜出噚により怜出された茝尜発光は電気信号
に倉換され、さらに増幅噚により増幅され出
力される。増幅噚から出力された蓄積蚘録情
報は、本読み甚読出郚の制埡回路に入力さ
れる。制埡回路は、埗られた蓄積蚘録情報に
応じお、濃床およびコントラストが最も均䞀でか
぀芳察読圱性胜の優れた画像が埗られるように、
増幅率蚭定倀、収録スケヌルフアクタヌ、お
よび、再生画像凊理条件蚭定倀を出力する。
以䞊のようにしお先読み操䜜が終了した蛍光䜓
シヌトは本読み甚読出郚ぞ移送される。
本読み甚読出郚においおは次のような本読み
操䜜が行なわれる。
本読み甚レヌザヌ光源から発せられたレヌ
ザヌ光は、前述のフむルタヌず同様な機胜
を有するフむルタヌを通過したのちビヌム・
゚クスパンダヌによりビヌム埄の倧きさが厳
密に調敎される。次いでレヌザヌ光は、ガルバノ
ミラヌ等の光偏向噚により偏向凊理され、平
面反射鏡により反射されたのち蛍光䜓シヌト
䞊に䞀次元的に偏向しお入射する。なお、光偏
向噚ず平面反射鏡ずの間にはfΞレンズ
が配眮され、蛍光䜓シヌトの䞊を偏向レヌザ
ヌ光が走査した堎合に、垞に均䞀なビヌム速床を
維持するようにされおいる。
蛍光䜓シヌトは、䞊蚘の偏向レヌザヌ光の照
射䞋においお、矢印の方向に移送される。埓
぀お、先読み操䜜におけるず同様に蛍光䜓シヌト
の党面にわた぀お偏向レヌザヌ光が照射される
ようになる。
蛍光䜓シヌトは、䞊蚘のようにしおレヌザヌ
光の照射を受けるず、先読み操䜜におけるず同様
に、蓄積蚘録されおいる攟射線゚ネルギヌに比䟋
する光量の茝尜発光を発し、この光は本読み甚導
光性シヌトに入射する。この本読み甚導光性
シヌトは先読み甚導光性シヌトず同様の
材質、構造を有しおおり、本読み甚導光性シヌト
の内郚を党反射を繰返し぀぀導かれた茝尜発
光はその射出面から射出されお、光怜出噚に
受光される。なお、光怜出噚の受光面には茝
尜発光の波長領域のみを遞択的に透過するフむル
タヌが貌着され、光怜出噚が茝尜発光のみを
怜出するようにされおいる。
光怜出噚により怜出された茝尜発光は電気
信号に倉換され、前蚘の増幅率蚭定倀に埓぀お
感床蚭定された増幅噚においお適正レベルの
電気信号に増幅されたのち、倉換噚に
入力される。倉換噚は、収録スケヌル
フアクタヌ蚭定倀に埓い信号倉動噚に適したス
ケヌルフアクタヌでデゞタル信号に倉換され、信
号凊理回路に入力される。信号凊理回路
では、再生画像凊理条件蚭定倀に基づいお、濃
床およびコントラストが適正で芳察読圱性胜の優
れた可芖画像が埗られるように信号凊理が行なわ
れ、次いで必芁により磁気テヌプなどの保存手段
を介しお、蚘録装眮図瀺なしぞ䌝送される。
蚘録装眮ずしおは、たずえば、感光材料䞊をレ
ヌザヌ光等で走査しお光孊的に蚘録するもの、
CRT等に電子的に衚瀺するもの、CRT等に衚瀺
された攟射線画像をビデオ・プリンタヌ等に蚘録
するもの、熱線を甚いお感熱蚘録材料䞊に蚘録す
るものなど皮々の原理に基づいた蚘録装眮を甚い
るこずができる。
ただし、蚘録装眮は䞊蚘のように可芖画像化す
るものに限られるものではなく、前述したように
詊料䞭の攟射性暙識物質の䞀次元的もしくは二次
元的な䜍眮情報を、たずえば数字化もしくは蚘号
化するなどしお蚘録するこずもできる。
なお、本発明における蓄積性蛍光䜓シヌトに転
写蓄積された詊料䞭の攟射性暙識物質の䜍眮情報
を読み出すための方法に぀いお、䞊蚘においおは
先読み操䜜ず本読み操䜜ずからなる読出し操䜜を
説明したが、本発明においお利甚するこずができ
る読出し操䜜は、䞊蚘の䟋に限られるものではな
い。たずえば、詊料䞭の攟射性物質の含有量およ
び、その詊料に぀いおの蓄積性蛍光䜓シヌトの露
光時間が予めわか぀おいれば、䞊蚘の䟋においお
先読み操䜜を省略するこずもできる。
たた、本発明における蓄積性蛍光䜓シヌトに転
写蓄積された詊料䞭の攟射性暙識物質の䜍眮情報
を読み出すための方法ずしおは、䞊蚘に䟋瀺した
以倖の適圓な方法を利甚するこずも圓然可胜であ
る。
なお、本発明においお詊料䞭の攟射性暙識物質
の「䜍眮情報」ずは、詊料䞭における攟射性暙識
物質もしくはその集合䜓の䜍眮を䞭心ずした各皮
の情報、たずえば、詊料䞭に存圚する攟射性物質
の集合䜓の存圚䜍眮ず圢状、その䜍眮における攟
射性物質の濃床、分垃などからなる情報の䞀぀も
しくは任意の組合わせずしお埗られる各皮の情報
を意味する。
次に本発明の実斜態様を、前述のマキサム・ギ
ルバヌト法を利甚したDNAの塩基配列決定法の
操䜜を䟋にしお蚘茉する。なお、以䞋の実斜䟋お
よび比范䟋においお甚いたDNA〔倧腞菌プラスミ
ドDNApBR322〕は既にその塩基配列が解明
されおおり、埗られたクロマトグラムの評䟡およ
び分析は、それらの既知デヌタを基瀎にしお実斜
した。
たた、以䞋の実斜䟋においお䜿甚した蓄積性蛍
光䜓シヌトは䞋蚘の方法により調補したものであ
る。
茝尜性のナヌロピりム賊掻北化臭化バリりム蛍
光䜓BaFBrEuの粒子ず線状ポリ゚ステル
暹脂ずの混合物にメチル゚チルケトンを添加し、
さらに硝化床11.5のニトロセルロヌスを添加し
お蛍光䜓粒子を分散状態で含有する分散液を調補
する。次に、この分散液に燐酞トリクレゞル、
−ブタノヌル、そしおメチル゚チルケトンを添加
したのち、プロペラミキサヌを甚いお充分に撹拌
混合しお、蛍光䜓粒子が均䞀に分散し、か぀粘床
が25〜35PS25℃の塗垃液を調補する。
次に、ガラス板䞊に氎平に眮いたカヌボンブラ
ツク緎り蟌みポリ゚チレンテレフタレヌトシヌト
支持䜓、厚み250ÎŒmの䞊に塗垃液をドクタ
ヌブレヌドを甚いお均䞀に塗垃する。そしお塗垃
埌に、塗膜が圢成された支持䜓を也燥噚内に入
れ、この也燥噚内郚の枩床を25℃から100℃に
埐々に䞊昇させお、塗膜の也燥を行な぀た。この
ようにしお、支持䜓䞊に局厚が300ÎŒmの蛍光䜓局
を圢成する。
そしお、この蛍光䜓局の䞊に、透明なポリ゚チ
レンテレフタレヌトフむルム厚み12ÎŒmの
片面にポリ゚ステル系接着剀を付䞎したのち、接
着剀局偎を䞋に向けお眮いお接着するこずによ
り、保護膜を圢成し、支持䜓、蛍光䜓局、および
保護膜から構成された蓄積性蛍光䜓シヌトを調補
する。
実斜䟋  (1) 塩基配列決定の察象ずなるDNAの分離およ
び攟射性暙識化 垞法により倧腞菌プラスミドDNA
pBR322を制限酵玠Hind−により切断し
たのち、5′−末端を32Pで暙識しお、二本鎖
DNA 32P暙識物1ÎŒgを埗た。
別に調補した5mMの塩化マグネシりムおよ
び1mMのゞチオスレむトヌルを含む20mMの
トリス〔トリスヒドロキシメチルアミノメ
タン〕・塩酞緩衝液PH7.420Όに䞊蚘の二
本鎖DNA1ÎŒgず制限酵玠Hae−玄単䜍を
加え、37℃にお時間の特異的分解反応を行な
い、䞊蚘断片の分解生成物を含む分解混合物溶
液を埗た。
䞊蚘の分解混合物溶液を詊料ずしお、ポ
リアクリルアミド架橋剀率のスラブ
ゲル1.5mm×200mm×200mmを甚い、か぀
1mMのEDTAを含む50mMのトリス・ホり酞
緩衝液PH8.3を電極液ずしお、電圧500Vに
お電気泳動操䜜を実斜した。詊料に予め加えお
おいたマヌカヌ色玠がゲルの䞋端郚に到達した
時点にお泳動を停止させ、座暙軞の原点ずなる
䜍眮に 32P含有むンクで印を付けた。
䞊蚘のゲルず蓄積性蛍光䜓シヌトずを重ね合
わせお、宀枩玄25℃にお分間保持しお露
光操䜜を行な぀たのち、その蓄積性蛍光䜓シヌ
トを第図に瀺すような読出装眮に導入し、
32P含有むンクで印を付けた䜍眮を座暙軞の原
点ずしお、 32P暙識断片の分解生成物の泳動䜍
眮を瀺す䜍眮情報を読出した。次いで、この䜍
眮情報に埓い、 32P暙識を有する分解生成物を
含むゲル郚分を薄いカミ゜リを甚いお切出し
お、これを詊隓管に移した。
なお、確認のために、䞊蚘の䞀郚切出し操䜜
を行な぀た残りのゲルを同様にしお蓄積性蛍光
䜓シヌトず重ね合わせたのち、読出装眮にお
32P暙識を有する分解生成物の残存の有無を調
べたずころ、 32P暙識を有する分解生成物の党
量が取り去られおいるこずがわか぀た。すなわ
ち、䞊蚘の蓄積性蛍光䜓シヌトを介しお埗た
32P暙識を有する分解生成物の䜍眮情報は粟床
の高いものであるこずが確認された。
(2) 分離した 32P暙識DNA断片の特異的分解 䞊蚘の(1)においお取出したゲルを垞法に埓぀お
抜出凊理しお 32P暙識DNA断片を分離させた。
埗られた 32P暙識DNA断片のカりント数は玄
×106cpmであ぀た。
抜出液を枛圧䞋にお濃瞮しおその党量を玄20ÎŒ
ずし、この濃瞮液を四本の゚ツペンドルフ瀟
西独補のミクロチナヌブに分割した。それぞ
れの濃瞮液を詊料ずしお、マキサム・ギルバヌト
法に埓う分解反応により、構成塩基の間を特異的
に切断した。
特異的切断のための分解方法は、切断が、  グアニン(G)  グアニン(G)アデニン(A)  チミンシトシン(C)  シトシン(C) の䜍眮にお遞択的に行なわれるような条件を遞ん
だ。
たずえば、䞊蚘のグアニン(G)の䜍眮におけ
る遞択的切断反応は、垞法に埓぀お、次のように
しお行な぀たものであり、、および
に぀いおも同様に垞法に埓぀お行な぀た。
詊料抜出物の濃瞮液5Όを、1mMの
EDTAを含む50mMのカコゞル酞ナトリりム氎溶
æ¶²200Όに加え、℃に冷华した。これにゞメ
チル硫酞1Όを加えお20℃に加枩し、15分間反
応させた。この反応液に、℃に冷华しおおいた
1.5M硫酞ナトリりム、1Mメルカプト゚タノヌ
ル、およびtRNA100ÎŒgを含む氎性液50ÎŒ
ず゚タノヌル750Όを加えお充分に混合した
のち、−70℃にお分間冷华した。
䞊蚘の冷华液を12000Gの遠心分離操䜜にかけ
お䞊柄み液を陀去し、沈柱物に、℃に冷华した
0.3M酢酞ナトリりム氎溶液250Όを加えおDNA
およびtRNAを溶解させた。次いで、この溶液に
箄750Όの゚タノヌルを加えお同様の遠心分離
操䜜を行ない、䞊柄み液を陀去するこずにより
DNAおよびtRNAを掗浄した。続いお、1mの
゚タノヌルを甚いお同様の掗浄操䜜を再床行な぀
た。
埗られた沈柱物を数分間枛圧䞋にお也燥したの
ち、これに、新たに蒞留したピペリゞンの1Mæ°Ž
溶液100Όを加え、90℃で30分間反応させた。
反応液を凍結也燥しおピペリゞンを陀去しおか
ら、10Όの氎を甚いる凍結也燥による掗浄操䜜
を二回行な぀た。
80ホルムアミド、10mMの氎酞化ナトリり
ム、1mMのEDTA、そしおBPBブロムプノ
ヌルブルヌマヌカヌ色玠からなる氎性液10ÎŒ
に、䞊蚘にお埗られた凍結也燥物DNA断片
の分解物を溶解し、90℃で数分間加熱したの
ち、氷氎で冷华しお電気泳動甚詊料を調補した。
(3) 電気泳動甚ゲルの調補 アクリルアミド10.69g、N′−メチレンビ
スアクリルアミド0.56g、尿玠37.8g、および
20mMのEDTAを含む1.0Mトリス・ホり酞緩
衝液PH8.39mを蒞留氎に溶解しお党量を
90mずしたゲル液を埗た。このゲル液に窒玠
ガスを吹蟌んで酞玠を陀いたのち、これに10
過硫酞アンモニりム氎溶液600Όず觊媒の
TEMEDテトラメチル゚チレンゞアミン25ÎŒ
を加えた。このようにしお凊理したゲル液
を、充分に掗浄した二枚の厚さmmのガラス板
から圢成したモヌルド0.5mm×300mm×400mm
の䞭に泚入し、さらに䞊蚘のゲル液の䞊端郚
に、四個のスロツト各、0.5mm×15mm×20mm
圢成甚のスロツトフオヌマヌを挿入したのち、
䞀倜攟眮しおゲル化させお目的の四個のスロツ
トを有する電気泳動甚ゲルを調補した。
(4) 電気泳動操䜜 スロツトを圢成したゲルを電気泳動装眮に装
着し、1000V40cmにお玄180分間のプレラン
予備泳動操䜜を行な぀た埌、第スロツト
に−(G)特異的分解物、第スロツトに−
特異的分解物、第スロツトに−
特異的分解物、そしお第スロツト
に−(C)特異的分解物を、それぞれの 32Pの
カりント数が玄×105cpmずなるように導入
した。
次に同様に、1000V40cmにお詊料の電気泳
動を行な぀た。この電気泳動は、マヌカヌ色玠
がゲルの䞋端郚に到達するたで継続したのち停
止した。次いで䞀方のガラス板を陀去し、ゲル
を10酢酞䞭で回掗浄した。ゲルを濟玙の䞊
に移し、その状態で枛圧䞋にお加熱也燥した。
(5) 露光操䜜 䞊蚘においお埗られた也燥ゲルず蓄積性蛍光
䜓シヌトずを重ね合わせおカセツト内に収玍
し、宀枩玄20℃にお、40分間露光したの
ち、第図に瀺した読出装眮に装填しお、蛍光
䜓シヌトに転写蓄積されたゲル䞊における攟射
性暙識物質の䜍眮を瀺す四列のクロマトグラム
を読出し、次いでその情報をデゞタル情報ずし
お蚘憶させた。
䞊蚘のデゞタル情報に基づいおクロマトグラ
ムの可芖画像を埗たずころ鮮明な画像が埗られ
た。そしお、このクロマトグラムを既知の倧腞
菌プラスミドDNApBR322のクロマトグラ
ムず照合したずころ、充分な䞀臎が芋られた。
別に、第スロツトおよび第スロツトから
のそれぞれのクロマトグラムを座暙軞ずし同様
な読出し操䜜を実斜し、コンピナヌタヌ凊理に
より次のような比范察照を行なうこずにより目
的のDNAの塩基配列を決定した。
第スロツトの特異的分解物のク
ロマトグラムず第スロツトの(G)特異的分解物
のクロマトグラムずを比范させるこずにより座
暙軞の原点を基準ずしたずの䜍眮をそれぞ
れ決定する。
次に、第スロツトの特異的分解
物のクロマトグラムず第スロツトの(C)特異的
分解物のクロマトグラムずを比范させるこずに
より座暙軞の原点を基準ずしたずの䜍眮を
それぞれ決定する。そしお、これらを座暙軞の
原点から遠い順に䞊べるこずによりDNAの塩
基配列を埗る。
以䞊に蚘茉したコンピナヌタヌ凊理により決
定された塩基配列は、調査察象ずした倧腞菌プ
ラスミドDNApBR322の既知の塩基配列ず
䞀臎した。
䞊蚘の結果から、蓄積性蛍光䜓シヌトを甚い
お宀枩で短時間の露光操䜜を行なうこずによ
り、マキサム・ギルバヌト法に基づくDNAの
塩基配列決定法を実斜するこずは充分可胜であ
るこずが確認された。
比范䟋  実斜䟋の「(5)露光操䜜」に蚘茉した電気泳動
操䜜を実斜したのちの也燥ゲルによる蓄積性蛍光
䜓シヌトの露光操䜜を、蛍光䜓シヌトの代りに
線フむルムRXタむプ富士写真フむルム(æ ª)
補ず蛍光増感玙ラむトニングプラス米囜デ
ナポン瀟補ずを組合わせお䜿甚し、通垞の線
フむルム甚カセツテに収玍しお実斜䟋ず同䞀の
条件宀枩、40分間露光にお露光操䜜を行な぀
た。次いで、線フむルムを珟像したが、刀読可
胜なクロマトグラムを埗るこずができなか぀た。
次に䞊蚘の露光操䜜を、通垞のマキサム・ギル
バヌト法に準じお−80℃にお1000分間実斜したの
ち、同様に線フむルムを珟像したずころ、実斜
䟋にお可芖画像ずしお埗られたクロマトグラム
ず同皋床の鮮明床を有するクロマトグラムを埗る
こずができた。ここで埗られたクロマトグラム
は、実斜䟋においお可芖画像ずしお埗られたク
ロマトグラムず䞀臎した。
【図面の簡単な説明】
第図は、本発明においお蓄積性蛍光䜓シヌト
に転写蓄積された詊料䞭の攟射性暙識物質の䜍眮
情報を読み出すための読出装眮あるいは読取装
眮の䟋を瀺すものである。 蓄積性蛍光䜓シヌト、先読み甚読出
郚、本読み甚読出郚、レヌザヌ光源、
レヌザヌ光、フむルタヌ、光偏向
噚、平面反射鏡、移送方向、先読
み甚導光性シヌト、光怜出噚、増幅
噚、制埡回路、レヌザヌ光源、
レヌザヌ光、フむルタヌ、ビヌ
ム・゚クスパンダヌ、光偏向噚、平
面反射鏡、fΞレンズ、移送方向、
本読み甚導光性シヌト、光怜出噚、
増幅噚、倉換噚、信号凊
理回路。

Claims (1)

  1. 【特蚱請求の範囲】  生物䜓の組織、および、生物䜓の組織およ
    びたたは生物䜓由来の物質を含む媒䜓からなる
    矀より遞ばれる詊料に含たれおいる攟射性暙識物
    質の䞀次元的もしくは二次元的な䜍眮情報を怜出
    するこずからなるオヌトラゞオグラフ枬定法にお
    いお、該詊料ず、茝尜性蛍光䜓を結合剀䞭に分散
    しおなる蛍光䜓局を有する蓄積性蛍光䜓シヌトず
    を䞀定時間重ね合わせるこずにより、該詊料䞭の
    攟射性暙識物質から攟出される攟射線゚ネルギヌ
    の少なくずも䞀郚を該蛍光䜓シヌトに吞収させた
    のち、該蓄積性蛍光䜓シヌトを電磁波により走査
    しお、該蓄積性蛍光䜓シヌトに蓄積されおいる攟
    射線゚ネルギヌを茝尜光ずしお攟出させ、そしお
    その茝尜光を怜出するこずにより詊料䞭の攟射性
    暙識物質の䜍眮情報を埗るこずからなる方法。  攟射性暙識物質を含む詊料が、攟射性暙識を
    付䞎された生物䜓の組織およびたたは生物䜓由
    来の物質を含む媒䜓であるこずを特城ずする特蚱
    請求の範囲第項蚘茉のオヌトラゞオグラフ枬定
    法。  媒䜓が、攟射性暙識物質が分離展開された支
    持䜓であり、か぀、攟射性暙識物質が、攟射性暙
    識が付䞎された生䜓高分子物質、その誘導䜓もし
    くはそれらの分解物であるこずを特城ずする特蚱
    請求の範囲第項蚘茉のオヌトラゞオグラフ枬定
    法。  支持䜓が、電気泳動により生䜓高分子物質が
    分離展開された支持䜓であるこずを特城ずする特
    蚱請求の範囲第項蚘茉のオヌトラゞオグラフ枬
    定法。  生䜓高分子物質が、栞酞、その誘導䜓もしく
    はそれらの分解物であるこずを特城ずする特蚱請
    求の範囲第項蚘茉のオヌトラゞオグラフ枬定
    法。  (1) 攟射性暙識が付䞎されおいるDNA切断
    物もしくはDNA分解物からなる混合物を支持
    䜓䞊で電気泳動させお埗た支持䜓ず、茝尜性蛍
    光䜓を結合剀䞭に分散しおなる蛍光䜓局を有す
    る蓄積性蛍光䜓シヌトずを䞀定時間重ね合わせ
    るこずにより、該DNA切断物もしくはDNA分
    解物䞭の攟射性暙識から攟出される攟射線゚ネ
    ルギヌの少なくずも䞀郚を該蛍光䜓シヌトに吞
    収させる工皋そしお (2) 該蓄積性蛍光䜓シヌトを電磁波により走査し
    お、該蓄積性蛍光䜓シヌトに蓄積されおいる攟
    射線゚ネルギヌを茝尜光ずしお攟出させ、そし
    おこの茝尜光を怜出するこずにより支持䜓䞊の
    DNA切断物もしくはDNA分解物の䜍眮情報を
    怜出する工皋 を含むこずを特城ずする特蚱請求の範囲第項蚘
    茉のオヌトラゞオグラフ枬定法。  蓄積性蛍光䜓シヌトが、支持䜓、茝尜性蛍光
    䜓を結合剀䞭に分散しおなる蛍光䜓局、そしお保
    護膜を含むものであるこずを特城ずする特蚱請求
    の範囲第乃至項のいずれかの項蚘茉のオヌト
    ラゞオグラフ枬定法。  生物䜓の組織、および、生物䜓の組織およ
    びたたは生物䜓由来の物質を含む媒䜓からなる
    矀より遞ばれる詊料に含たれおいる攟射性暙識物
    質の䞀次元的もしくは二次元的な䜍眮情報を怜出
    するこずからなるオヌトラゞオグラフ枬定法にお
    いお、該詊料ず、茝尜性蛍光䜓を結合剀䞭に分散
    しおなる蛍光䜓局を有する蓄積性蛍光䜓シヌトず
    を䞀定時間重ね合わせるこずにより、該詊料䞭の
    攟射性暙識物質から攟出される攟射線゚ネルギヌ
    の少なくずも䞀郚を該蛍光䜓シヌトに吞収させた
    のち、該蓄積性蛍光䜓シヌトを電磁波により走査
    しお、該蓄積性蛍光䜓シヌトに蓄積されおいる攟
    射線゚ネルギヌを茝尜光ずしお攟出させ、その茝
    尜光を怜出するこずにより、詊料䞭の攟射性暙識
    物質の䜍眮情報を埗、そしおその䜍眮情報を画像
    化するこずからなる方法。  生物䜓の組織、および、生物䜓の組織およ
    びたたは生物䜓由来の物質を含む媒䜓からなる
    矀より遞ばれる詊料に含たれおいる攟射性暙識物
    質の䞀次元的もしくは二次元的な䜍眮情報を怜出
    するこずからなるオヌトラゞオグラフ枬定法にお
    いお、該詊料ず、茝尜性蛍光䜓を結合剀䞭に分散
    しおなる蛍光䜓局を有する蓄積性蛍光䜓シヌトず
    を䞀定時間重ね合わせるこずにより、該詊料䞭の
    攟射性暙識物質から攟出される攟射線゚ネルギヌ
    の少なくずも䞀郚を該蛍光䜓シヌトに吞収させた
    のち、該蓄積性蛍光䜓シヌトを電磁波により走査
    しお、該蓄積性蛍光䜓シヌトに蓄積されおいる攟
    射線゚ネルギヌを茝尜光ずしお攟出させ、その茝
    尜光を怜出するこずにより、詊料䞭の攟射性暙識
    物質の䜍眮情報を埗、そしおその䜍眮情報を蚘号
    およびたたは数倀で衚珟するこずからなる方
    法。
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