JPH08511027A - レチノイドｘレセプターに対して選択的な活性を有する化合物、およびレチノイドｘレセプターによって媒体されたプロセスの調節手段 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 レチノイン酸レセプター（ＲＡＲ）のサブクラスの成員に優先してレチノイドＸレセプター（ＲＸＲ）のサブクラスの成員に選択的な活性を有するレチノイド様化合物を用いた、レチノイドＸレセプターによって媒体されるプロセスを調節するための化合物、組成物および方法。かかる化合物の例は、２環式ベンジル、ピリジニル、チオフェン、フラニル、ピロール、および炭素環式ポリエン酸を含むポリエン酸誘導体である。開示した方法は、レチノイドＸレセプターによって選択的に媒体されるプロセスを調節するための化合物を用いる。

Description

【発明の詳細な説明】 レチノイドＸレセプターに対して選択的な活性を有する化合物、およびレチノイ ドＸレセプターによって媒体されたプロセスの調節手段発明の技術分野 この発明は、細胞内レセプターおよびそのリガンドに関する。さらに詳しくは 、この発明は、特定のレチノイン酸レセプターに対して選択的な活性を有する化 合物、およびかかる化合物の使用方法に関する。発明の背景 ビタミンＡ代謝産物であるレチノイン酸は、長い間、広スペクトルの生物学的 作用を引き起こすと認識されてきた。レチノイン酸の種々の構造類似体が合成さ れており、これらも生物学的に活性であることがわかっている。レチン−Ａ（Re tin−Ａ^R）（ジョンソン＆ジョンソンの登録商標）やアクタン（Accutane^R）（ ホフマン−ラロシュ（Hoffmann−LaRoche）の登録商標）などの幾つかの類似体 は、種々の病的状態を治療するための治療剤としての有用性が認められている。 ビタミンＡの代謝産物およびその合成類似体は、「レチノイド」と総称されてい る。 合成レチノイドは、レチノイン酸の薬理作用の多くを擬態することがわかって いる。しかしながら、生物学的に活性な合成レチノイドのすべてによってレチノ イン酸の広スペクトルの薬理作用が完全に再生されるわけではない。 医学専門家は、レチノイドの医薬としての応用に非常に興味を抱くようになっ てきた。ＦＤＡによって承認されたレチノイドの用途の中には、重篤な形態のア クネおよび乾癬の治療がある。これら化合物が日光への長期の暴露によって生じ る皮膚障害の作用を抑制し、あるいはある程度まで逆転させるのに用いることが できるという多数の証拠もまた存在する。これら化合物が黒色腫、頚部癌、幾つ かの形態の白血病、および基底細胞および偏平上皮細胞の癌腫を含む種々の重篤 の癌の治療に有用であるかもしれないという他の証拠が存在する。レチノイドは また、口内白斑症などの前癌状態の細胞障害の治療において有効であることや悪 性化を防ぐ能力などが示されている。 レチノイドの使用には、多くの有意の副作用が伴う。これら副作用のうちで最 も重篤なものは、一つのクラスとして、レチノイドが知られている最も強力な催 奇形物質の一つであることである。催奇形物質とは、特定の期間胎児が暴露する ことによって重篤な先天性欠損症を引き起こす化合物である。他の副作用として は、処置した組織に対する刺激性が挙げられ、余りにも刺激性であるため患者が 該処置に耐えられないほどである。 レチノイン酸暴露の種々の薬理学的帰結を引き起こす合成レチノイドの能力を 支配する構造−活性相関を解明するため、種々の研究がなされている。しかしな がら、このことは複雑な仕事であった。なぜなら、研究者に利用できるアッセイ は動物そのままかまたは単離した組織のいずれかで行うバイオアッセイであった からである。技術的な制約のため、異なるアッセイに異なる小動物種を使用する ことを余儀なくされることがしばしばであった。関与するレセプターにおける薬 品動力学的および代謝的影響の可能性および種差の可能性のため、結果の解釈は 複雑なものとなっていた。それにもかかわらず、種々の合成レチノイドの薬理学 的作用に明確な差異が観察された。 レチノイン酸シグナル変換の分子機構に対する主な洞察は１９８８年に得られ た。それまでは、幾つかの高頻度（high abundance）細胞性レチノイド結合タン パク質が間違ってレチノイン酸のシグナル変換レセプターであると推論されてい た。１９８８年にステロイド／胸腺ホルモン細胞内レセプタースーパーファミリ ー（エバンス（Evans）、Science、２４０：８８９〜９５（１９８８））の成員 がレチノイン酸シグナル（ジゲール（Giguere）ら、Nature、３３０：６２４〜 ２９（１９８７）；ペトコビッチ（Petkovich）ら、Nature、３３０：４４４〜 ５０（１９８７））を変換することが示された。この予期しない発見によってレ チノイン酸が他の非ペプチドホルモンと関係付けられ、細胞機能の変化における レチノイン酸の作用のメカニズムが解明された。今ではレチノイドが２つの区別 される細胞内レセプターサブファミリー；レチノイン酸レセプター（ＲＡＲ）お よびレチノイドＸレセプター（ＲＸＲ）の活性を制御することがわかっている。 同定された最初のレチノイン酸レセプター（ＲＡＲ−アルファと称する）は、 ス テロイド／胸腺ホルモン細胞内レセプタースーパーファミリーの成員の多くの場 合に示されているように、リガンドに依存した仕方で特定の標的遺伝子の転写を 調節するように作用する。ＲＡＲ−アルファの転写調節活性が依存する内生の低 分子量リガンドは、全トランスレチノイン酸である。レチノイン酸レセプターに よって媒体された遺伝子発現における変化の結果、細胞の表現型に特徴的な変化 がもたらされ、多くの組織においてレチノイン酸に対する生物学的応答が示され る結果となる。ＲＡＲ−アルファに関連する２つの別の遺伝子が最近同定され、 ＲＡＲ−ベータおよびＲＡＲ−ガンマと名付けられ、非常に高度に関連している （ブランド（Brand）ら、Nature、３３２：８５０〜５３（１９８８）；イシカ ワ（Ishikawa）ら、Mol.Endocrin.、４：８３７〜４４（１９９０））。リガン ド結合を付与することが示されているレチノイドレセプターの領域において、一 次アミノ酸配列はこれら３つのＲＡＲサブタイプまたはイソ型で１５％未満の差 異がある。全トランスレチノイン酸はレチノイン酸レセプター（ＲＡＲ）の天然 のリガンドであり、これらレセプターに高親和性で結合することができ、その結 果、遺伝子発現が制御される。新たに発見されたレチノイド代謝産物である９− シス−レチノイン酸もまたＲＡＲのアクチベーターである。 最近、関連するが予期しない観察がなされた（マンゲルスドルフ（Mangelsdor f）ら、Nature、３４５：２２４〜２９（１９９０））。それによると、ステロ イド／胸腺レセプタースーパーファミリーの他の成員もまたレチノイン酸に応答 することが示された。この新たなレチノイドレセプターサブタイプはレチノイド Ｘレセプター（ＲＸＲ）と名付けられた。というのは、ある初期のデータが、全 トランスレチノイン酸の誘導体がＲＸＲの内生リガンドであることを示唆したか らである。ＲＡＲのように、ＲＸＲもまた少なくとも３つのサブタイプまたはイ ソ型、すなわちＲＸＲ−アルファ、ＲＸＲ−ベータおよびＲＸＲ−ガンマを有す ることがわかっており、それそれ対応する固有の発現パターンを有する（マンゲ ルスドルフら、Genes＆Devel.、６：３２９〜４４（１９９２））。 ＲＡＲおよびＲＸＲはともに全トランスレチノイン酸にインビボで応答するが 、これらレセプターは幾つかの重要な点で異なっている。まず、ＲＡＲとＲＸＲ と は一次構造が互いに有意に異なっている（たとえば、ＲＡＲαおよびＲＸＲαの リガンド結合ドメインは２７％しかアミノ酸の同一性を有しない）。これら構造 上の相違は、種々のビタミンＡ代謝産物や合成レチノイドに対するＲＡＲおよび ＲＸＲの応答性の相対的程度が異なることに反映されている。加えて、組織分布 の明確に異なるパターンがＲＡＲおよびＲＸＲに認められる。たとえば、内蔵組 織では高レベルで発見されることのないＲＡＲとは対照的に、ＲＸＲαｍＲＮＡ は肝臓、腎臓、肺、筋肉および腸に最も豊富に存在することが示されている。最 後に、ＲＡＲおよびＲＸＲは異なる標的遺伝子特異性を有する。たとえば、細胞 性レチナール結合タンパク質タイプII（cellular retinal binding protein typ e II）（ＣＲＢＰII）およびアポリポタンパク質ＡＩ遺伝子において応答要素が 最近同定されたが、これらはＲＸＲには応答性を付与するがＲＡＲには応答性を 付与しない。さらに、ＲＡＲはまた、ＲＸＲに媒体される活性化をＣＲＢＰIIＲ ＸＲ応答要素によって抑制することが最近示された（マンゲルスドルフら、Ｃel l、６６：５５５〜６１（１９９１））。これらデータは、２つのレチノイン酸 応答経路が単に重複しているのではなく、複雑な相互作用を示すことを示してい る。最近、ヘイマン（Heyman）ら（Cell、６８：３９７〜４０６（１９９２）） およびレビン（Levin）ら（Nature、３５５：３５９〜６１（１９９２））は、 独立に、９−シス−レチノイン酸がＲＸＲの天然の内生リガンドであることを示 した。９−シス−レチノイン酸は、ＲＸＲならびにＲＡＲに結合しトランス活性 化する（transactivate）ことが示され、それゆえ、「２官能性」リガンドとし て機能すると思われる。 これらレセプターの関連するが明らかに区別される性質を考慮すると、レチノ イドＸレセプターサブファミリーに対して一層選択的なリガンドは、ＲＸＲイソ 型の１または２以上によって媒体されるプロセスを選択的に制御するうえで大き な価値を有し、ＲＸＲによって媒体される生理学的プロセスの独立的制御能を提 供するであろう。レセプターイソ型の１または２以上には優先的に影響を及ぼす が全部に対しては影響を及ぼさないリガンドもまた、医薬用途に用いられたとき に治療学的有効性を増加させる可能性がある。 本明細書において上記および以下において言及する刊行物および文献の全開示 は、参照のために引用される。発明の要約 本発明は、１または２以上のレチノイドＸレセプターによって媒体されるプロ セスを調節するための化合物、組成物および方法に関する。さらに詳しくは、本 発明は、レチノイン酸レセプターに比べてレチノイドＸレセプターを選択的また は優先的に活性化する化合物に関する。これら化合物は、レチノイドＸレセプタ ーによって媒体されるプロセスを選択的に調節する。従って、本発明はまた、本 発明の化合物を用いることにより、レチノイン酸レセプターに比べて１または２ 以上のレチノイドＸレセプターによって選択的に媒体されるプロセスを調節する 方法にも関する。本発明に用いられ本発明の一部を構成する化合物の例としては 、２環式ベンジル誘導体、ピリジニル誘導体、チオフェン誘導体、フラニル誘導 体、ピロール誘導体およびポリエン酸誘導体（炭素環式ポリエン酸を含む）が挙 げられる。開示した化合物を含有する医薬組成物もまた本発明の範囲に含まれる 。本発明の化合物を用いることによるレチノイドＸレセプターの同定または精製 方法もまた本発明に包含される。図面の簡単な記載 添付の図面を参照することにより、本発明は一層よく理解され、その利点も当 業者により評価されるであろう。 図１は、３−メチル−ＴＴＮＣＢによるＲＡＲおよびＲＸＲイソ型のトランス 活性化を示す標準化用量応答プロフィールを示す。 図２は、全トランスレチノイン酸によるＲＡＲおよびＲＸＲイソ型のトランス 活性化を示す標準化用量応答プロフィールを示す。 図３は、９−シス−レチノイン酸によるＲＡＲおよびＲＸＲイソ型のトランス 活性化を示す標準化用量応答プロフィールを示す。 図４は、３−メチル−ＴＴＮＥＢによるＲＡＲおよびＲＸＲイソ型のトランス 活性化を示す標準化用量応答プロフィールを示す。 図５は、３−ブロモ−ＴＴＮＥＢによるＲＡＲおよびＲＸＲイソ型のトランス 活性化を示す標準化用量応答プロフィールを示す。 図６は、３−メチル−ＴＴＮＣＨＢＰによるＲＡＲおよびＲＸＲイソ型のトラ ンス活性化を示す標準化用量応答プロフィールを示す。 図７は、３−メチル−ＴＴＮＥＨＢＰによるＲＡＲおよびＲＸＲイソ型のトラ ンス活性化を示す標準化用量応答プロフィールを示す。 図８は、９−シス−レチノイン酸、全トランスレチノイン酸および３−メチル −ＴＴＮＣＢによるトランスグルタミナーゼ活性の抑制を示す。 図９は、９−シス−レチノイン酸、全トランスレチノイン酸、３−メチル−Ｔ ＴＮＣＢおよび１,２５−ジヒドロキシビタミンＤについてのリノマウスでの試 験に基づく局所用量応答を示す。 図１０は、ラットＨＤＬコレステロールに対する全トランスレチノイン酸、９ −シス−レチノイン酸、３−メチル−ＴＴＮＣＢおよび３−メチル−ＴＴＮＥＢ の影響を示す。 図１１は、放射性標識したチミジンのＤＮＡ中への取り込みに対する３−メチ ル−ＴＴＮＥＢおよびTＴＮＰＢそれぞれの濃度に関連した影響を示す。 図１２は、放射性標識したチミジンのＤＮＡ中への取り込みに対する３−メチ ル−ＴＴＮＥＢとＴＴＮＰＢとの組み合わせの濃度に関連した影響を示す。発明の詳細な記載 本発明は、レチノイン酸レセプター（ＲＡＲ）のサブファミリーの成員に比べ てレチノイドＸレセプター（ＲＸＲ）のサブファミリーの成員に対して選択的な 活性を有するレチノイド様化合物またはリガンドを開示する。かかる化合物の例 としては、２環式ベンジル誘導体、ピリジニル誘導体、チオフェン誘導体、フラ ニル誘導体、ピロール誘導体およびポリエン酸誘導体が挙げられ、式： （式中、Ｒ₁およびＲ₂は、それぞれ独立に、水素または炭素数１〜４の低級アル キルまたはアシルを示す； ＹはＣ、Ｏ、Ｓ、Ｎ、ＣＨＯＨ、ＣＯ、ＳＯ、ＳＯ₂または薬理学的に許容し うるその塩を示す； Ｒ₃は、ＹがＣまたはＮである場合に水素または炭素数１〜４の低級アルキル を示す； Ｒ₄は、ＹがＣである場合に水素または炭素数１〜４のアルキルを示すが、Ｙ がＮである場合はＲ₄は存在せず、ＹがＳ、Ｏ、ＣＨＯＨ、ＣＯ、ＳＯ、または ＳＯ₂である場合はＲ₃およびＲ₄のいずれも存在しない； Ｒ’およびＲ”は、水素、炭素数１〜４の低級アルキルまたはアシル、ＯＨ、 炭素数１〜４のアルコキシ、チオールまたはチオエーテル、またはアミノを示す ；またはＲ’およひＲ”は一緒になってオキソ（ケト）、メタノ、チオケト、Ｈ Ｏ−Ｎ＝、ＮＣ−Ｎ＝、（Ｒ₇Ｒ₈）Ｎ−Ｎ＝、Ｒ₁₇Ｏ−Ｎ＝、Ｒ₁₇Ｎ＝、エポキ シ、シクロプロピル、またはシクロアルキル基を形成し、その際、エポキシ、シ クロプロピルおよびシクロアルキル基は炭素数１〜４の低級アルキルまたはハロ ゲンで置換されていてよい； Ｒ'"およびＲ""は、水素、ハロゲン、炭素数１〜４の低級アルキルまたはアシ ル、アルキルアミノを示す； またはＲ'"およびＲ""は一緒になって炭素数３〜１０のシクロアルキル基を形 成し、その際、シクロアルキル基は炭素数１〜４の低級アルキルまたはハロゲン で置換されていてよい； Ｒ₅は、水素、炭素数１〜４の低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、ＯＲ₇、ＳＲ₇ 、ＮＲ₇Ｒ₈または（ＣＦ）_nＣＦ₃を示すが、Ｒ₆、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁、Ｒ₁₂およびＲ₁₃ がすべて水素であり、Ｚ、Ｚ’、Ｚ”、Ｚ'"およびＺ""がすべて炭素であり、か つ Ｒ’およびＲ”がＨ、ＯＨ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシまたはＣ₁〜Ｃ₄アシルオキシ を示すかまたはＲ’およびＲ”が一緒になってオキソ、メタノまたはヒドロキシ イミノ基を形成する場合はＲ₅は水素ではあり得ない； Ｒ₆、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁、Ｒ₁₂、Ｒ₁₃はそれぞれ独立に水素、炭素数１〜４の低級ア ルキル、ハロゲン、ニトロ、ＯＲ₇、ＳＲ₇、ＮＲ₇Ｒ₈または（ＣＦ）_nＣＦ₃を示 し、Ｚ、Ｚ’、Ｚ”、Ｚ'"またはＺ""が炭素である場合のみに存在し、またはＺ 、Ｚ’、Ｚ”、Ｚ'"またはＺ""がＮである場合にはそれぞれ独立に水素または炭 素数１〜４の低級アルキルを示し、その際、Ｒ₆、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁、Ｒ₁₂またはＲ₁₃ の一つはＸである； Ｒ₇は水素または炭素数１〜６の低級アルキルを示す； Ｒ₈は水素または炭素数１〜６の低級アルキルを示す； Ｒ₉は炭素数１〜４の低級アルキル、フェニル、芳香族アルキル、またはｑ− ヒドロキシフェニル、ｑ−ブロモフェニル、ｑ−クロロフェニル、ｑ−フルオロ フェニルまたはｑ−ヨードフェニルを示し、その際、ｑは２〜４である； Ｒ₁₄は水素、炭素数１〜４の低級アルキル、オキソ、ヒドロキシ、炭素数１〜 ４のアシル、ハロゲン、チオールまたはチオケトンを示す； Ｒ₁₅は炭素数１〜１２の低級または分枝鎖アルキルを示し、Ｒ₁₆がハロゲンま たは炭素数１〜８の低級アルキルの場合にのみメチルであってよい； Ｒ₁₆は水素、炭素数１〜８の低級アルキルまたはハロゲンを示す； まだはＲ₁₅およびＲ₁₆は一緒になってフェニル、シクロヘキシルまたはシクロ ペンタール環または以下に示す基の一つを示す； Ｒ₁₇は水素、炭素数１〜８の低級アルキル、アルケニル（ハロゲン、アシル、 ＯＲ₇およびＳＲ₇で置換されたアルケンを含む）、Ｒ₃、アルキルカルボン酸（ ハロゲン、アシル、ＯＲ₇およびＳＲ₇で置換されたアルキルを含む）、アルケニ ルカルボン酸（ハロゲン、アシル、ＯＲ₇およびＳＲ₇で置換されたアルケンを含 む）、アルキルアミン（ハロゲン、アシル、ＯＲ₇およびＳＲ₇で置換されたアル キルを含む）、およびアルケニルアミン（ハロゲン、アシル、ＯＲ₇およびＳＲ₇ で置換されたアルケンを含む）を示す； Ｒ₁₈は水素、炭素数１〜４の低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、ＯＲ₇、ＳＲ₇ 、ＮＲ₇Ｒ₈または（ＣＦ）_nＣＦ₃を示す； Ｒ₁₉は水素、炭素数１〜８の低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、ＯＲ₇、ＳＲ₇ 、ＮＲ₇Ｒ₈または（ＣＦ）_nＣＦ₃を示す； ＸはＣＯＯＨ、テトラゾール、ＰＯ₃Ｈ、ＳＯ₃Ｈ、ＣＨＯ、ＣＨ₂ＯＨ、ＣＯ ＮＨ₂、ＣＯＳＨ、ＣＯＯＲ₉、ＣＯＳＲ₉、ＣＯＮＨＲ₉、またはＣＯＯＷ（式中 、Ｗは薬理学的に許容しうる塩である）であり、その際、Ｘは環上のいずれのＣ またはＮに由来していてもよい； ＶはＣＯＯＨ、テトラゾール、ＰＯ₃Ｈ、ＳＯ₃Ｈ、ＣＨＯ、ＣＨ₂ＯＨ、ＣＯ ＮＨ₂、ＣＯＳＨ、ＣＯＯＲ₉、ＣＯＳＲ₉、ＣＯＮＨＲ₉、またはＣＯＯＷ（式中 、Ｗは薬理学的に許容しうる塩である）である； Ｚ、Ｚ’、Ｚ”、Ｚ'"およびＺ""は、それぞれ独立に、Ｃ、Ｓ、Ｏ、Ｎ、また は薬理学的に許容しうる塩を示すが、他のかかるＺに二重結合によって結合して いる場合、またはＯまたはＳである他のかかるＺに結合している場合にはＯまた はＳではなく、Ｎである他のかかるＺに単結合により結合している場合にはＮで はない； ｎは０〜３である； 構造中の破線は任意の二重結合を示す）で示すことができる。 本明細書の開示において、薬理学的に許容しうる塩とは、塩酸、臭化水素酸、 ヨウ化水素酸、フッ化水素酸、硫酸、クエン酸、マレイン酸、酢酸、乳酸、ニコ チン酸、コハク酸、シュウ酸、リン酸、マロン酸、サリチル酸、フェニル酢酸、 ステアリン酸、ピリジン、アンモニウム、ピペラジン、ジエチルアミン、ニコチ ンアミド、ギ酸、尿素、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、亜 鉛、リチウム、桂皮酸、メチルアミノ、メタンスルホン酸、ピクリン酸、酒石酸 、トリエチルアミノ、ジメチルアミノ、およびトリス（ヒドロキシメチル）アミ ノメタンが挙げられるが、これらに限られるものではない。他の薬理学的に許容 しうる塩は当業者に知られている。 本発明による代表的な誘導体としては、以下のものが挙げられる： ｐ[３,５,５,８,８−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−２−ナフチ ル−(２−カルボニル)]安息香酸；４−[(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６ ,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)カルボニル]安息香酸としても知られ、「 ３−メチル−ＴＴＮＣＢ」と称する； ｐ[５,５,８,８−テトラメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−３−イソプロ ピル−２−ナフチル−(２−カルボニル)]安息香酸；４−[(３−イソプロピル− ５,５,８,８−テトラメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)カル ボニル]安息香酸としても知られ、「３−ＩＰＲ−ＴＴＮＣＢ」または化合物３７ と称する； ｐ[５,５,８,８−テトラメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−３−イソプロ ピル−２−ナフチル−(２−メタノ)]安息香酸；４−[１−(３−イソプロピル− ５,５,８,８−テトラメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)エテ ニル)]安息香酸としても知られ、「３−ＩＰＲ−ＴＴＮＥＢ」または化合物４２と 称する； ｐ[５,５,８,８−テトラメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−３−エチル− ２−ナフチル−(２−メタノ)]安息香酸；４−[１−(３−エチル−５,５,８,８− テトラメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)エテニル)]安息香酸 としても知られ、「３−エチル−ＴＴＮＥＢ」または化合物４５と称する； ｐ[５,５,８,８−テトラメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−３−ブロモ− ２−ナフチル−(２−メタノ)]安息香酸；４−[１−(３−ブロモ−５,５,８,８− テトラメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)エテニル)]安息香酸 としても知られ、「３−ブロモ−ＴＴＮＥＢ」または化合物４６と称する； ｐ[５,５,８,８−テトラメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−３−クロロ− ２−ナフチル−(２−メタノ)]安息香酸；４−[１−(３−クロロ−５,５,８,８− テトラメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)エテニル)]安息香酸 としても知られ、「３−クロロ−ＴＴＮＥＢ」または化合物４３と称する； ｐ[３,５,５,８,８−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−２−ナフチ ル−(２−メタノ)]安息香酸；４−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６ ,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)エテニル)]安息香酸としても知られ、「３ −メチル−ＴＴＮＥＢ」と称する； ｐ[３,５,５,８,８−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−２−ナフチ ル−(２−ヒドロキシメチル)]安息香酸；４−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメ チル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)ヒドロキシメチル)]安息香酸 としても知られ、「３−メチル−ＴＴＮＨＭＢ」と称する； ｐ[５,５,８,８−テトラメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−３−ブロモ− ２−ナフチル−(２−カルボニル)]安息香酸；４−[(３−ブロモ−５,５,８,８− テトラメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)カルボニル]安息香 酸としても知られ、「３−ブロモ−ＴＴＮＣＢ」または化合物４１と称する； ｐ[５,５,８,８−テトラメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−３−クロロ− ２−ナフチル−(２−カルボニル)]安息香酸；４−[(３−クロロ−５,５,８,８− テトラメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)カルボニル]安息香 酸としても知られ、「３−クロロ−ＴＴＮＣＢ」または化合物３８と称する； ｐ[５,５,８,８−テトラメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−３−ヒドロキ シ−２−ナフチル−(２−カルボニル)]安息香酸；４−[(３−ヒドロキシ−５,５ ,８,８−テトラメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)カルボニル ]安息香酸としても知られ、「３−ヒドロキシ−ＴＴＮＣＢ」または化合物３９と 称する； ｐ[５,５,８,８−テトラメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−３−エチル− ２−ナフチル−(２−カルボニル)]安息香酸；４−[(３−エチル−５,５,８,８− テトラメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)カルボニル]安息香 酸としても知られ、「３−エチル−ＴＴＮＣＢ」または化合物４０と称する； ｐ[３,５,５,８,８−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−２−ナフチ ル−(２−チオケト)]安息香酸；４−[(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６, ７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)チオケト]安息香酸としても知られ、「チオ ケトン」と称する； ｐ[３,５,５,８,８−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−２−ナフチ ル−(２−カルボニル)]−Ｎ−(４−ヒドロキシフェニル)ベンズアミド；４−[( ３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)カ ルボニル]−Ｎ−(４−ヒドロキシフェニル)ベンズアミドとしても知られ、「３− メチル−ＴＴＮＣＨＢＰ」と称する； ｐ[３,５,５,８,８−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロ−２−ナフチ ル−(２−メタノ)]−Ｎ−(４−ヒドロキシフェニル)ベンズアミド；４−[(３,５ ,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)エテニ ル]−Ｎ−(４−ヒドロキシフェニル)ベンズアミドとしても知られ、「３−メチル −ＴＴＮＥＨＢＰ」または化合物６３と称する； ２−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２ −ナフチル)エテニル]ピリジン−５−カルボン酸、「ＴＰＮＥＰ」または化合物５ ８と称する； ２−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２ −ナフチル)エテニル]ピリジン−５−カルボン酸エチル、「ＴＰＮＥＰＥ」または 化合物Ｅｔ−５８と称する； ２−[１−(５,５,８,８−テトラメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナ フチル)エテニル]ピリジン−５−カルボン酸、「ＴＴＮＥＰ」または化合物５６と 称する； ４−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２ −ナフチル)エポキシ]安息香酸、「ＴＰＮＥＢ」または化合物４７と称する； ４−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２ −ナフチル)シクロプロピル]安息香酸、「ＴＰＮＣＢ」または化合物４８と称する ； ４−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２ −ナフチル)エテニル]ベンゼンテトラゾール、「３−メチル−ＴＴＮＥＢＴ」また は化合物５５と称する； ５−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２ −ナフチル)エテニル]ピリジン−２−カルボン酸、「ＴＰＮＥＰＣ」または化合物 ６０と称する； ２−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２ −ナフチル)シクロプロピル]ピリジン−５−カルボン酸、「ＴＰＮＰＣ」または化 合物６２と称する； ２−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２ −ナフチル)シクロプロピル]ピリジン−５−カルボン酸メチル、化合物Ｍｅ−６ ２と称する： ３−メチル−７−プロピル−９−(２,６,６−トリメチル−１−シクロヘキセ ン−１−イル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ,８Ｅ−ノナテトラン酸、化合物７４と称する； ３−メチル−７−イソプロピル−９−(２,６,６−トリメチル−１−シクロヘ キセン−１−イル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ,８Ｅ−ノナテトラン酸、化合物７５と称す る； ３−メチル−７−ｔ−ブチル−９−(２,６,６−トリメチル−１−シクロヘキ セン−１−イル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ,８Ｅ−ノナテトラン酸、化合物７７と称する ； ３−メチル５−{２−[２−(２,６,６−トリメチルシクロヘキセン−１−イル) エテニル]シクロヘキシル}−２Ｅ,４Ｅ−ペンタジエン酸、化合物１００と称す る； (２Ｅ,４Ｅ)−３−メチル−５−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６ ,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)シクロプロピル]ペンタ−２,４−ジエン 酸、化合物１０４と称する； (２Ｅ,４Ｅ)−３−メチル−６−{１−[２,６,６−トリメチル−１−シクロヘ キセニル)エテニル]シクロプロピル}−２,４−ヘキサジエン酸、化合物１１０と 称する； (２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ)−７−(５,５,８,８−テトラメチル−５,６,７,８−テトラ ヒドロ−２−ナフチル)−３,８−ジメチル−ノナ−２,４,６−トリエン酸、化合 物１２３と称する；および (２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ)−７−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テト ラヒドロ−２−ナフチル)−３−メチル−オクタ−２,４,６−トリエン酸、化合 物１２８と称する。 かかる化合物の代表的構造を以下に示す。 加えて、チオフェン、フラニル、ピリジン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジ ン、チアジアゾールおよびピロール基はフェニル基の等配電子（isosteres）と して機能し、上記２環式ベンジル誘導体のフェニル基と置換してよい。 本発明の代表的な誘導体は、以下に示す反応式に従って調製することができる 。 Ｒ₅が低級アルキルである構造１の化合物は、米国特許第２,８９７,２３７号 明細書に従って調製する。Ｒ₅がハロ、ＯＨ、アミノまたはチオである場合は、 適当な置換ベンゼンを三塩化アルミニウムの存在下で２,５−ジクロロ−２,５− ジメチルヘキサンと結合させる標準的なフリーデル−クラフツ反応条件によって 調製する。 化合物１とモノ−メチルテレフタレート２との縮合は、ＣＨ₂Ｃｌ₂中の化合物 １および２にＰＣｌ₅を加え、ついで室温でＡｌＣｌ₃を加えることにより行った 。 得られたメチルエステル３を水性ＫＯＨ−ＭｅＯＨ中で還流し、ついで酸性に することにより加水分解してカルボン酸４とする。 ケトン４をＮａＢＨ₄で処理してアルコール５を得る。 メチルエステル３をＴＨＦ中のメチルトリホスホニウムブロマイド−ナトリウ ムアミドで処理してメタノ化合物６を得る。 ＭｅＯＨ中のメタノ化合物６にＫＯＨを加え、ついで酸性にすることによりカ ルボン酸７を得る。 メチルエステル６を水素ガスおよび酢酸エチル中の５％パラジウム／炭素で処 理して水素化化合物９を得る。 還流ＭｅＯＨ中の水性ＫＯＨで化合物９を処理し、ついで酸性にすることによ りカルボン酸１０を得る。 化合物１とチオフェン２,５−モノメチルジカルボン酸またはフラニル２,５− モノメチルジカルボン酸との縮合を、ＣＨ₂Ｃｌ₂中のＰＣｌ₅を加え、ついで室 温でＡｌＣｌ₃を加えることにより行ってエステル１１および１２を得、これら をＫＯＨで処理後に酸性にして対応の酸とする。 式１３および１４の４,４−ジメチルクロマンおよび４,４−ジメチル−７−ア ルキルクロマン並びに４,４−ジメチルチオクロマン、４,４−ジメチル−７−ア ルキルチオクロマン、４,４−ジメチル−１,２,３,４−テトラヒドロキノリン、 および４,４−ジメチル−７−アルキル−１,２,３,４−テトラヒドロキノリン類 似体を化合物３と同様の方法、すなわち、適当なジメチルクロマン、ジメチルチ オクロマンまたはジメチルテトラヒドロキノリンをＡｌＣｌ₃またはＳｎＣｌ₄の 存在下でモノメチルテレフタレート酸クロライドと結合させ、ついで塩基による 加水分解および酸性化してカルボン酸を得るフリーデル−クラフツ条件により合 成した。テトラヒドロキノリン類似体を合成するには、モノ−メチルテレフタレ ート酸クロライドとフリーデル−クラフツカップリングする前にアミンをアシル 化する必要がある。適当なジメチルクロマン、ジメチルチオクロマンおよびテト ラヒドロキノリンの合成については、米国特許第５,０５３,５２３号および同第 ５,０２３,３４１号およびヨーロッパ特許公開第０２８４２８８号各明細書を参 照のこと。 式１８の化合物を合成するため、グリニャール試薬１６をブロモテトラロン、 ブロモインダンまたは他の２環式ケトン誘導体に親核付加した。得られたアルコ ールをメタノール性のＨＣｌで処理して中間体１７を得た。キノリン中で臭素を ＣｕＣＮで置換してニトリルを得、ついでこれを還流ＫＯＨ中で酸１８に加水分 解した。臭素化合物１５は、２,５−ジクロロ−２,５−ジメチルヘキサンおよび ２−ブロモトルエンおよび触媒量のＡｌＣｌ₃から合成した。 化合物３−メチル−ＴＴＮＣＢおよび３−メチル−ＴＴＮＥＢをＤＣＣ、ｐ− アミノフェノールおよびＤＭＡＰで処理してアミノエステル１９および２０を得 た。 代表的なピリジナール誘導体（化合物２１、２３、２６および２７）は、上記 合成反応式に従って調製することができる。化合物２１の合成は、化合物７につ いて記載したのと同様である。ペンタメチルテトラヒドロナフタレン１、ピリジ ナール酸クロライド２４、およびＡｌＣｌ₃をＣＨ₂Ｃｌ₂中て攪拌してケトン２ ５を得る。ケトン２５をＴＨＦ中のメチルトリホスホニウムブロマイド−ナトリ ウムアミドで処理してエテニル化合物２６を得た。化合物２６を加水分解（ＫＯ Ｈ、ＭｅＯＨ）し、ついで酸性にして酸２１を得た。シクロプロピル類似体２３ を合成するには、エテニル化合物２６を還流エーテル中のＣＨ₂Ｉ₂、亜鉛末、Ｃ ｕＣｌで処理した（シモンズ−スミス(Simmons−Smith)反応）。得られたシクロ プロピルエステル２７の加水分解をメタノール性ＫＯＨ、ついで酸性化により行 って化合物２３を得た。Ｒ₁〜Ｒ₅がメチルである場合は、たとえば、以下の実施 例３３に示すように化合物６２（ＴＰＮＣＰ）が得られる。 ＴＰＮＣＢ（化合物４８）などの他のシクロプロピル誘導体も類似体２３と同 じ方法によって同様に調製することができる：オレフィン６を上記シモンズ−ス ミス試薬で処理し、ついでメタノール性ＫＯＨによる加水分解および酸性化（Ｈ Ｃｌ）によって所望のシクロプロピル誘導体を得る。ＴＰＮＥＢ（化合物４７） などのエポキシ誘導体は、化合物７をＣＨ₂Ｃｌ₂中のｍ−クロロ過安息香酸で室 温にて数時間処理することにより合成することができる。 別法として、化合物５８（ＴＰＮＥＰ）、６０（ＴＰＮＥＰＣ）、および６１ （３ＴＴＮＥＰＥ）などのピリジナール類似体は以下の合成経路により調製する ことができる。 ｎ−アルキルシクロヘキセニルノナテトラン酸誘導体は、以下の合成反応式に 従って調製することができる。表示のように、得られる特定の化合物（たとえば 、化合物７３、７４、７５、７６または７７）は出発物質（たとえは、化合物７ ９、８０、８１、８２または８３）の選択に依存する。 ３,７−ジアルキル−９−(２,６,６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１− ィル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ,８Ｅ−ノナテトラン酸および３,６,７−トリアルキル− ９−(２,６,６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ ,８Ｅ−ノナテトラン酸誘導体の合成： 式７３〜７７の化合物を以下のようにして合成した：適当なメチルケトン８４ と適当なホスホン酸アニオン８５とを縮合させてエステル８６を得た。該エステ ル８６（または７９〜８３）をβ−シクロシトラール７８と縮合させてラクトン ８７Ａを得、これをＬｉＡｌＨ₄で処理してラクトール８７Ｂを得た。該ラクト −ル８７Ｂを塩化メチレン中のＨＣｌで処理して異性体として純粋なアルデヒド ８８を得た。該アルデヒド８８をホスホン酸のアニオン９０と縮合して異性体と して純粋な３,７−ジアルキル−９−(２,６,６−トリメチル−１−シクロヘキセ ン−１−イル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ,８Ｅ−ノナテトラン酸エチルを得、これを加水 分解して化合物７３〜７７を得た。 同様に、化合物９５を合成するため、以下に示すように、ウイッテッヒイリド ９１をベンゼンジアルデヒド９２と縮合させてアルデヒド９３を得た。以下に示 すように、アルデヒド９３をホスホン酸のアニオン９２と縮合させて化合物９４ を得、ついでこれを加水分解してカルボン酸９５とした。 式１００、１０４、および１１０の化合物の合成反応式を上記に示す。式１２ ３および１２８の化合物の合成反応式を以下に示す。 本発明による幾つかの化合物の調製例は以下の通りである。実施例１ 化合物３（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄およびＲ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はオ キソ、Ｘ＝ＣＯＯＭｅ）の調製： ＣＨ₂Ｃｌ₂（２００ｍＬ）中の１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４ −テトラヒドロナフタレン（７ｇ、３４．７ミリモル）およびテレフタル酸モノ メチル（６ｇ、３３.３ミリモル）にＰＣｌ₅（８ｇ、３８.８ミリモル）を加え た。反応混合物を激しく沸騰させると、１０分以内に透明になった。さらに１時 間攪拌後、ＡｌＣｌ₃（６ｇ、４３.５ミリモル）を１ｇずつ１５分間かけて加え 、反応混合物を一夜攪拌した。混合物を２０％水性ＨＣｌ（３００ｍＬ）中に注 ぎ、５％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンで抽出し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濃縮し、Ｍ ｅＯＨから結晶化させてメチルエステル３（６ｇ、１６.５ミリモル）を得た。¹ HNMR（CD₃OCD₃）δ1.20（s，2(CH₃)），1.35（s，2(CH₃)），1.75（s，2(CH₂) ），2.31（s，CH₃），3.93（s，COOCH₃），7.21（s，Ar-CH），7.23（s，Ar-CH ），7.85（d，J=8Hz，Ar-2(CH)），8.18（d，J=8Hz，Ar-2(CH)）．実施例２ 化合物４（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄およびＲ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はオ キソ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−メチル−ＴＴＮＣＢ）の調製： ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中に懸濁させたメチルエステル３（６ｇ、１６.５ミ リモル）に５Ｎ水性ＫＯＨ（５０ｍＬ）を加えた。混合物を還流下で１時間加熱 し、冷却し、酸性にし（２０％水性ＨＣｌ）、有機物をＥｔＯＡｃで抽出した。 乾燥後（ＭｇＳＯ₄）、生成物を濃縮し、１：４ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから沈殿 させて酸４（５ｇ、１４.３ミリモル）を得た。¹ HNMR（CD₃OCD₃）δ1.20（s，2(CH₃)），1.35（s，2(CH₃)），1.75（s，2(CH₂) ），2.31（s，CH₃），7.21（s，Ar-CH），7.23（s，Ar-CH），7.91（d，J=8Hz， Ar-2(CH)），8.21（d，J=8Hz，Ar-2(CH)）実施例３ 化合物５（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄およびＲ₅はメチル、Ｒ’＝ＨでＲ”＝Ｏ Ｈ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−メチル−ＴＴＮＨＭＢ）の調製： ケトン４（１ｇ、２.８６ミリモル）を含有する１：１ＴＨＦ−ＭｅＯＨ容液 にＮａＢＨ₄（１００ｍｇ）を加えた。混合物を５０℃で１０分間加熱し、冷却 し、酸性にし（２０％水性ＨＣｌ）、有機物を抽出した（ＥｔＯＡｃ）。乾燥後 （ＭｇＳＯ₄）、生成物を濃縮し、１：３ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから沈殿させて アルコール５（５５０ｍｇ、１.５６ミリモル）を得た。¹ HNMR（CD₃OCD₃）δ1.20（s，CH₃)），1.22（s，(CH₃)），1.22（s，2(CH₃)）， 1.65（s，2(CH₂)），2.21（s，CH₃），6.00（s，-CHOH-），7.09（s，Ar-CH）， 7.41（s，Ar-CH），7.53（d，J=8Hz，Ar-2(CH)），8.01（d，J=8Hz，Ar-2(CH)） ．実施例４ 化合物６（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄およびＲ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はメ タノ、Ｘ＝ＣＯＯＭｅ）の調製： 乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）中のメチルエステル３（１ｇ、２.７ミリモル）にメ チルトリホスホニウムブロマイド−ナトリウムアミド（１.２ｇ）３.０８ミリモ ル）を加えた。この溶液を室温で３時間またはＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ−ヘキ サン）により完了するまで攪拌した。水を加え、有機物をＥｔＯＡｃで抽出し、 乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、濃縮し、ＳｉＯ₂クロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ− ヘキサン）、ついでＭｅＯＨから結晶化させることにより精製してメタノ化合物 ６（７００ｍｇ、１.９３ミリモル）を得た。¹ HNMR（CD₃OCD₃）δ1.22（s，2(CH₃)），1.30（s，2(CH₃)），1.72（s，2(CH₂) ），1.95（s，CH₃），3.85（s，COOCH₃），5.29（s，=CH），5.92（s，=CH），7 .19（s，Ar-CH），7.20（s，Ar-CH），7.39（d，J=8Hz，Ar-2(CH)），7.96（d， J=8Hz，Ar-2(CH)）．実施例５ 化合物７（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄およびＲ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はメ タ ノ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−メチル−ＴＴＮＥＢ）の調製： ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中のメタノ化合物６（５００ｍｇ、１.３８ミリモル） に５Ｎ水性ＫＯＨ（５ｍＬ）を加え、懸濁液を１時間還流した。酸性にした後（ ２０％水性ＨＣｌ）、有機物を抽出し（ＥｔＯＡｃ）、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄） 、濃縮し、固形物をＥｔＯＡｃ−ヘキサン（１：５）から再結晶化させてカルボ ン酸７（３５０ｍｇ、１.０ミリモル）を得た。¹ HNMR（CD₃OCD₃），δ1.22（s，2(CH₃)），1.30（s，2(CH₃)），1.72（s，2(CH₂ )），1.95（s，CH₃），5.22（s,=CH），5.89（s,=CH），7.19（s，Ar-CH），7.2 0（s，Ar-CH），7.39（d，J=8Hz，Ar-2(CH)），7.96（d，J=8Hz，Ar-2(CH)）．実施例６ 化合物３７（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ₅はイソプロピル、Ｒ’お よびＲ”はオキソ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−ＩＰＲ−ＴＴＮＣＢ）の調製： 実施例１および２において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４−テ トラヒドロナフタレンの代わりに６−イソプロピル−１,１,４,４−テトラメチ ル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレンを用いる他は化合物４と同様にして 標記化合物を調製した。 MP：254℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.19（d,J=7Hz,CH(CH₃)₂），1.21（s,2(CH₃)）， 1.33（s,2(CH₃)），1.70（s,2(CH₂)），3.12（q,J=7Hz,CH(CH₃)₂），7.14（s,Ar -CH），7.37（s,Ar-CH），7.92（d,J=8Hz，Ar-2(CH)），8.18（d,J=8Hz，Ar-2(C H)）．実施例７ 化合物３８（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ₅はクロロ、Ｒ’およびＲ ”はオキソ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−クロロ−ＴＴＮＣＢ）の調製： 実施例１および２において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４−テ トラヒドロナフタレンの代わりに６−クロロ−１,１,４,４−テトラメチル−１, ２,３,４−テトラヒドロナフタレンを用いる他は化合物４と同様にして標記化合 物を調製した。 MP：254℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.26（s,2(CH₃)），1.32（s,2(CH₃)），1.72（s, 2(CH₂)），7.35（s,Ar-CH），7.36（s,Ar-CH），7.91（d,J=8Hz，Ar-2(CH)），8 .19（d,J=8Hz，Ar-2(CH)）．実施例８ 化合物３９（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ₅はヒドロキシ、Ｒ’およ びＲ”はオキソ、Ｘ−ＣＯＯＨ）（３−ヒドロキシ−ＴＴＮＣＢ）の調製： 実施例１および２において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４−テ トラヒドロナフタレンの代わりに６−ヒドロキシ−１,１,４,４−テトラメチル −１,２,３,４−テトラヒドロナフタレンを用いる他は化合物４と同様にして標 記化合物を調製した。 MP：264℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.17（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.68（s, 2(CH₂)），7.02（s,Ar-CH），7.44（s,Ar-CH），7.77（d,J=8Hz，Ar-2(CH)），8 .27（d,J=8Hz，Ar-2(CH)），11.50（s,-OH）．実施例９ 化合物４０（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ₅はエチル、Ｒ’およびＲ ”はオキソ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−Ｅｔ−ＴＴＮＣＢ）の調製： 実施例１および２において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４−テ トラヒドロナフタレンの代わりに６−エチル−１,１,４,４−テトラメチル−１, ２,３,４−テトラヒドロナフタレンを用いる他は化合物４と同様にして標記化合 物を調製した。 MP：226℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.16（t,J=7.5Hz,-CH₂CH₃），1.19（s,2(CH₃)） ，1.32（s,2(CH₃)），1.69（s,2(CH₂)），2.69（q,J=7.5Hz，CH₂CH₃），7.20（s ,Ar-CH），7.25（s,Ar-CH），7.87（brd,Ar-2(CH)），8.20（brd,Ar-2(CH)）．実施例１０ 化合物４１（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ₅はブロモ、Ｒ’およびＲ ”はオキソ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−ブロモ−ＴＴＮＣＢ）の調製： 実施例１および２において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４−テ トラヒドロナフタレンの代わりに６−ブロモ−１,１,４,４−テトラメチル−１, ２,３,４−テトラヒドロナフタレンを用いる他は化合物４と同様にして標記化合 物を調製した。 MP：275℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.25（s,2(CH₃)，1.32（s,2(CH₃)），1.71（s,2( CH₂)），7.30（s,Ar-CH），7.54（s,Ar-CH），7.90（d,J=8Hz，Ar-2(CH)），8.1 8（d,J=8Hz,Ar-2(CH)）．実施例１１ 化合物４２（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ₅はイソプロピル、Ｒ’お よびＲ”はメタノ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−ＩＰＲ−ＴＴＮＥＢ）の調製： 実施例１、２、４および５において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３ ,４−テトラヒドロナフタレンの代わりに６−イソプロピル−１,１,４,４−テト ラメチル−１,２,３,４−テトラヒトロナフタレンを用いる他は化合物７と同様 にして標記化合物を調製した。 MP：252℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.05（d,J=7Hz,CH(CH₃)₂），1.27（s,2(CH₃)）， 1.32（s,2(CH₃)），1.70（s,2(CH₂)），2.73（q,J=7Hz,CH(CH₃)₂），5.32（s,=C H），5.87（s,=CH）7.06（s,Ar-CH），7.23（s,Ar-CH），7.40（d,J=8Hz,Ar-2(C H)），8.040（d,J=8Hz,Ar-2(CH)）．実施例１２ 化合物４３（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ₅はクロロ、Ｒ’およびＲ ”はメタノ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−クロロ−ＴＴＮＥＢ）の調製： 実施例１、２、４および５において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３ ,４−テトラヒドロナフタレンの代わりに６−クロロ−１,１,４,４−テトラメチ ル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレンを用いる他は化合物７と同様にして 標記化合物を調製した。 MP：233℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.28（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.71（s, 2(CH₂)），5.42（s,=CH），5.89（s,=CH），7.23（s,Ar-CH），7.28（s,Ar-CH） ，7.37（d,J=8Hz,Ar-2(CH)），8.03（d,J=8Hz,Ar-2(CH)）．実施例１３ 化合物４４（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ₅はヒドロキシ、Ｒ’およ びＲ”はメタノ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−ヒドロキシ−ＴＴＮＥＢ）の調製： 実施例１、２、４および５において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３ ,４−テトラヒドロナフタレンの代わりに６−ヒドロキシ−１,１,４,４−テトラ メチル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレンを用いる他は化合物７と同様に して標記化合物を調製した。 MP：216℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.21（s,2(CH₃)，1.30（s,2(CH₃)），1.68（s,2( CH₂)），5.54（s,=CH），5.94（s,=CH），6.86（s,Ar-CH），7.00（s,Ar-CH）， 7.48（d,J=8.4Hz，Ar-2(CH)），8.07（d,J=8.4Hz，Ar-2(CH)）．実施例１４ 化合物４５（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ₅はエチル、Ｒ’およびＲ ”はメタノ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−Ｅｔ−ＴＴＮＥＢ）の調製： 実施例１、２、４および５において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３ ,４−テトラヒドロナフタレンの代わりに６−エチル−１,１,４,４−テトラメチ ル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレンを用いる他は化合物７と同様にして 標記化合物を調製した。 MP：236℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ0.99（t,J=7.6Hz,-CH₂CH₃），1.27（s,2(CH₃)） ，1.31（s,2(CH₃)），1.70（s,2(CH₂)），2.29（q,J=7.6Hz,-CH₂CH₃），5.34（s ,=CH），5.83（s,=CH），7.08（s,Ar-CH），7.12（s,Ar-CH），7.38（d,J=8Hz,A r-2(CH)），8.00（d,J=8Hz，Ar-2(CH)）．実施例１５ 化合物４６（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ₅はブロモ、Ｒ’およびＲ ”はメタノ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（３−ブロモ−ＴＴＮＥＢ）の調製： 実施例１、２、４および５において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３ ,４−テトラヒドロナフタレンの代わりに６−ブロモ−１,１,４,４−テトラメチ ル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレンを用いる他は化合物７と同様にして 標記化合物を調製した。 MP：235℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.27（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.71（s, CH₃），5.40（s,=CH），5.90（s,=CH），7.26（s,Ar-CH），7.36（s,Ar-CH），7 .43（d,J=8Hz,Ar-2(CH)），8.04（d,J=8Hz,Ar-2(CH)）．実施例１６ 化合物４７（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”は一緒 になってＣＨ₂−Ｏ（エポキシド）、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（ＴＰＮＥＢ）の調製： 標記化合物を化合物６（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル）から調製 した。ＣＨ₂Ｃｌ₂（５ｍＬ）中のオレフィン６（１ｇ、２.７６ミリモル）にｍ ＣＰＢＡ（６００ｍｇ、３.４６ミリモル）を加え、反応液を室温で２時間攪拌 した。水を加え、ついで有機物をエーテルで抽出した。エーテル層を水、１Ｎ Ｎａ₂ＣＯ₃、食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、濃縮した。Ｍ ｅＯＨから結晶化させて所望のエポキシド−メチルエステルを得た。このメチル エステルを還流メタノール性ＫＯＨ中で加水分解し、ついで酸性にして（１Ｎ ＨＣｌ）粗製のエポキシド−酸４７を得、これをＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶 化させることにより精製して白色粉末（６００ｍｇ、１.６４ミリモル）を得た （収率：５９％）。 MP：168℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.26（s,CH₃），1.27（s,CH₃），1.30（s,CH₃） ，1.31（s,CH₃），1.69（s,(2CH₂)），2.14（s,CH₃），3.15（d,J=5.6Hz,CH-O） ，3.41（d,J=5.6Hz,CH-O），7.09（s,Ar-CH），7.28（d,J=8.3Hz，Ar-2(CH)）， 7.32（s,Ar-CH），8.01（d,J=8.3Hz,Ar-2(CH)）．実施例１７ 化合物４８（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”は一緒 になってＣＨ₂−ＣＨ₂（シクロプロピル）、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（ＴＰＮＣＢ）の調 製： 標記化合物を化合物６（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル）から調製 した。還流冷却器、滴下漏斗およびマグネチック攪拌棒を備えた乾燥した１００ ｍＬ容３つ首丸底フラスコに、亜鉛末（７２２ｍｇ、１１.６５ミリモル）、塩 化銅（Ｉ）（ＣｕＣｌ）（１０９ｍｇ、１.１０５ミリモル）、乾燥ＴＨＦ（７. ５ｍＬ）およびジヨードメタン（１.４８ｇ、５.５２ミリモル）を加えた。添加 漏斗に乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）中の化合物６（１ｇ、２.７６ミリモル）を加える 。フラスコを８０℃に加熱し、ついで化合物６を滴下する。化合物６の添加完了 後、反応液を３０時間または反応が完了するまで還流し、ついでエーテル（５０ ｍＬ）および飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）で希釈した。有機層を１ ０％ＮａＯＨ（３×２０ｍＬ）、食塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させた 。生成物を濃縮し、分取ＴＬＣ（２％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）によって精製して 化合物４８のメチルエステル（２２０ｍｇ、０.５９ミリモル）を得た。このメ チルエステルを還流メタノール性ＫＯＨで加水分解し、ついで酸性にして（１Ｎ ＨＣｌ）所望の化合物４８（１５０ｍｇ、０.４１ミリモル）をＥｔＯＡｃ−ヘ キサンから結晶化した後に得た（収率：１５％）。 MP：244℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.28（s,4(CH₃)），1.39（s,CH₂-CH₂），1.69（s ,2(CH₂)），2.12（s,CH₃），6.98（d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)），7.06（s,Ar-CH），7 .29（s,Ar-CH），7.91（d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)）．実施例１８ 化合物４９（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’＝ＨでＲ”＝ＣＨ₃ 、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（ＰＴＮＥＢ）の調製： 標記化合物を化合物７（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル）から調製 した。ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）中の化合物７（１ｇ、２８７ミリモル）に１０％ Ｐｄ／Ｃ（１０ｍｇ）を加えた。混合物を真空下で脱気し、ついでＨ₂を加え、 Ｈ₂下で２時間攪拌した。反応液をセライト濾過し、生成物をＥｔＯＡｃ−ヘキ サンから結晶化させて所望の生成物４９（７５０ｍｇ、２.１４ミリモル）を得 た（収率：７５％）。 MP：208℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.24（s,CH₃），1.25（s,CH₃），1.26（s,CH₃） ，1.29（s,CH₃），1.61（d,J=7.2Hz,CH₃），1.67（s,2(CH₂)），2.12（s,CH₃） ，4.30（q,J=7.2Hz，CH），7.02（s,Ar-CH），7.20（s,Ar-CH），7.24（d,J=8.4 Hz，Ar-2(CH)），7.99（d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)）．実施例１９ 化合物５０（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”＝メチ リデンシクロペンタン、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（ＰＴＮＣＢ）の調製： 標記化合物を化合物４（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル）から調製 した。０℃のＴＨＦ（２５ｍＬ）中の化合物４（１ｇ、２.８７ミリモル）に１ Ｍシクロペンテニルマグネシウムクロライド溶液（８.６ミリモル）（８.６ｍＬ ）を加えた。３０分間攪拌した後、水を加え、５Ｎ ＨＣｌで酸性にした。酸性 にした混合物を５分間加熱し、冷却し、有機生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。Ｅ ｔＯＡｃ層を水および食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、濃縮 して粗製の生成物を得た。ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化させて化合物５０（ ３４０ｍｇ、０.８５ミリモル）を白色粉末として得た（収率：３０％）。 MP：201℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.27（s,4(CH₃)），1.64（br t,CH₂），1.68（s, 2(CH₂)），1.70（br t,CH₂），1.97（s,CH₃），2.15（br t,CH₂），2.56（br t, CH₂），7.04（s,Ar-CH），7.05（s,Ar-CH），7.29（d,J=8Hz,Ar-2(CH)），7.97 （d,J=8Hz,Ar-2(CH)）．実施例２０ 化合物５１（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”＝イソ プロピリデン、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（ＰＴＮＩＢ）の調製： 標記化合物を化合物４（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル）から調製 した。０℃のＴＨＦ（２５ｍＬ）中の化合物４（１ｇ、２.８７ミリモル）に１ Ｍイソプロピルマグネシウムクロライド溶液（８.６ミリモル）（８.６ｍＬ）を 加えた。３０分間攪拌した後、水を加え、５Ｎ ＨＣｌで酸性にした。酸性にし た混合物を５分間加熱し、冷却し、有機生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯ Ａｃ層を水および食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、濃縮して 粗製のイソプロピリデン生成物を得た。ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化させて 化合物５１（５５０ｍｇ、１.４６ミリモル）を白色粉末として得た（収率：５ １％）。 MP：297℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.25（br s,4(CH₃)），1.64（s,=CCH₃），1.66（ s,=CCH₃）1.87（s,2(CH₂)），1.96（s,CH₃），7.00（s,Ar-CH），7.03（s,Ar-CH ），7.25（d,J=8Hz,Ar-2(CH)），7.97（d,J=8Hz,Ar-2(CH)）．実施例２１ 化合物５２（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”＝オキ ソ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（ＴＴＮＣＴＣ）の調製： ＣＨ₂Ｃｌ₂（２５ｍＬ）中の１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４− テトラヒドロナフタレン（１ｇ、４.９ミリモル）およびチオフェンカルボン酸 クロライドモノメチル（１ｇ、４.９ミリモル）にＡｌＣｌ₃（１ｇ、７.５ミリ モル）を加えた。反応液を１５分間加熱還流し、ついで冷却し、２０％水性ＨＣ ｌを加えた。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、洗浄し（Ｈ₂Ｏ、食塩水）、乾燥さ せ（ＭｇＳＯ₄）、 濾過し、濃縮し、ＭｅＯＨから結晶化させることにより精製して化合物５２のメ チルエステル（４５０ｍｇ、１.２１ミリモル）を得た（収率：２５％）。この メチルエステルをメタノール性のＫＯＨ中で加水分解し、ついで酸性にし（２０ ％ＨＣｌ）、ＥｔＯＡｃで抽出し、洗浄し（Ｈ₂Ｏ、食塩水）、乾燥させ（Ｍｇ ＳＯ₄）、濾過し、濃縮し、ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化させることによっ て精製して化合物５２（３７５ｍｇ、１.０５ミリモル）を得た（収率：８７％ ）。 MP：206℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.26（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.71（s, 2(CH₂)），2.38（s,CH₃），7.21（s,Ar-CH），7.44（s,Ar-CH），7.48（d,J=4Hz ，Thio Ar-CH），7.85（d,J=4Hz,Thio Ar-CH）．実施例２２ 化合物５３（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”＝メタ ノ、Ｚ＝Ｓ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）（ＴＴＮＥＴＣ）の調製： 実施例４および５と同様にして化合物５２のメチルエステルから化合物５３を 調製した。 MP：200℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.26（s,2(CH₃)），1.30（s,2(CH₃)），1.69（s, 2(CH₂)），2.10（s,CH₃），5.21（s,=CH），5.88（s,=CH），6.76（d,J=4Hz,Thi o Ar-CH），7.11（s,Ar-CH），7.23（s,Ar-CH），7.68（d,J=4Hz,Thio Ar-CH） ．実施例２３ 化合物５４（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”＝オキ ソ、Ｘ＝テトラゾール）（３−メチル−ＴＴＮＣＢＴ）の調製： トルエン中の４−［（３.５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラ ヒドロ−２−ナフチル）カルボニル］ベンゾニトリル（ＣＨ₂Ｃｌ₂中の１,１,４ ,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレンと４−シアノ安 息香酸クロライドとのＡｌＣｌ₃触媒による縮合により合成）（５００ｍｇ、１. ５１ミ リモル）にアジ化トリメチルスズ（３４２ｍｇ、１.６６ミリモル）を加えた。 混合物を２３時間還流し、冷却して所望のテトラゾール５４（５３７ｍｇ、１. ４４ミリモル）を白色沈殿として得た（収率：９６％）。 LRMS：374.15；¹H-NMR（CD₃SOCD₃）δ1.19（s,2(CH₃)），1.32（s,2(CH₃)），1. 70（s,2(CH₂)），2.25（s,CH₃），3.19（s,N-H），7.30（s,Ar-CH），7.32（s,A r-CH），7.90（d,J=8Hz,Ar-2(CH)），8.20（d,J=8Hz,Ar-2(CH)）．実施例２４ 化合物５５（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”＝メタ ノ、Ｘ＝テトラゾール）（３−メチル−ＴＴＮＥＢＴ）の調製： トルエン中の４−［１−（３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テ トラヒドロ−２−ナフチル）エテニル］ベンゾニトリル（ＣＨ₂Ｃｌ₂中の１,１, ４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレンと４−シアノ 安息香酸クロライドとのＡｌＣｌ₃触媒による縮合後、得られたケトンをＣＨ₃Ｐ Ｐｈ₃Ｂｒ−ＮａＮＨ₂で処理することにより合成）（５００ｍｇ、１.５２ミリ モル）にアジ化トリメチルスズ（３４２ｍｇ、１.６７ミリモル）を加えた。混 合物を２３時間還流し、冷却して所望のテトラゾール５５（５３５ｍｇ、１.４ ４ミリモル）を白色沈殿として得た（収率：９５％）。 LRMS：372.25；¹H-NMR（CD₃SOCD₃）δ1.21（s,2(CH₃)），1.24（s,2(CH₃)），1. 68（s,2(CH₂)），1.92（s,CH₃），2.55（s,N-H），5.27（=CH），5.97（s,=CH） ，7.10（s,Ar-CH），7.18（s,Ar-CH），7.47（d,J=8Hz,Ar-2(CH)），8.00（d,J= 8Hz,Ar-2(CH)）．実施例２５ 化合物２５（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ’およびＲ”＝オキソ、Ｘ ＝ＣＯＯＭｅ）の調製： １,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレンの代 わりに１,１,４,４−テトラメチル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレンを用 い、テレフタル酸クロライドモノメチルの代わりにピリジン２−酸クロライド４ −メチルエステルを用いた他は（実施例１および２参照）化合物４と同様にして 標記化合物を調製した。実施例２６ 化合物５６（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄はメチル、Ｒ’およびＲ”＝メタノ、Ｘ ＝ＣＯＯＨ）（ＴＴＮＥＰ）の調製： 実施例４と同様にして化合物２５をＣＨ₃ＰＰｈ₃Ｂｒ−ＮａＮＨ₂で処理した 。得られたオレフィンメチルエステルをメタノール性ＫＯＨで加水分解し、つい で酸性にし（２０％ＨＣｌ）、ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化させて化合物５ ６を得た。 MP：173℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.26（s,(CH₃)），1.27（s,CH₃），1.30（s,2(CH₃ )），1.70（s,(CH₂)），5.70（s,=CH），6.10（s,=CH），7.08（d,J=8Hz,Pyr-C H），7.27（s,Ar-CH），7.19（d,J=8Hz,Ar-CH），7.39（d,J=8Hz,Ar-CH），8.28 （d,J=8Hz,Pyr-CH），9.31（s,Pyr-CH）．実施例２７ 化合物５７（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”＝オキ ソ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）の調製： テレフタル酸クロライドモノメチルの代わりにピリジン２−酸クロライド４− メチルエステルを用いた他は（実施例１および２参照）化合物６（実施例４）と 同様にして化合物５７を調製した。得られたメチルエステルを実施例５と同様に して加水分解して化合物５７を得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ1.22（s,2(CH₃)），1.30（s,2(CH₃)），1.69（s,2(CH₂)），2 .40（s,CH₃），7.22（s,Ar-CH），7.43（s,Ar-CH），8.13（d,J=8.0Hz,Pyr-CH） ，8.54（d,J=8Hz,Pyr-CH），9.34（s,Pyr-CH）．実施例２８ 化合物５８（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”＝メタ ノ、 Ｘ＝ＣＯＯＨ）（ＴＰＮＥＰ）の調製： 実施例２６のメチルエステルを実施例４と同様にしてＣＨ₃ＰＰｈ₃Ｂｒ−Ｎａ ＮＨ₂で処理し、ついで還流下のメタノール性ＫＯＨで１時間加水分解し、２０ ％水性ＨＣｌで酸性にし、ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化させて化合物５８を 得た。 MP：235℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.27（s,2(CH₂)），1.31（s,2(CH₃)），1.70（s, 2(CH₂)），2.00（s,CH₃），5.55（s,=CH），6.57（s,=CH），7.06（d,J=8.3Hz,P yr-CH），7.12（s,Ar-CH），7.14（s,Ar-CH），8.20（d,J=8.1Hz,Pyr-CH）．9.2 9（s,Pyr-CH）．実施例２９ ２−アセチル−５−ピリジンカルボン酸メチルの調製： ０℃のメタノール（１２０ｍＬ）中の２,５−ピリジンジカルボン酸２９（３ ４ｇ、０.２モル）のスラリーに塩化チオニル（１５ｍＬ）を滴下し、得られた スラリーを室温に温めて透明な溶液とした。ついで、この混合物を１２時間加熱 還流して黄色のスラリーを得た。反応混合物を濾過して２,５−ピリジンジカル ボン酸ジメチル３０を黄色の結晶性固体として定量的収率で得た。 ピリジンジカルボン酸エステル３０（１９.５ｇ、０.１モル）をメタノール（ ３００ｍＬ）中の固体ＫＯＨ（６.５１ｇ、０.１モル）で室温にて２時間処理し て濃い薄白色の懸濁液を得、これを濾過し、乾燥させてピリジンカルボン酸モノ カリウム３を定量的収率で得た。 粗製のモノ−ピリジンカルボン酸３１（８８０ｍｇ、４ミリモル）を塩化チオ ニル（３ｍＬ）で２時間還流処理し、過剰のＳＯＣｌ₂を通常の方法で除去した 。−７８℃のＴＨＦ（８ｍＬ）中の粗製の酸クロライドに新たに調製した１.０ Ｍエーテル溶液（５.５ｍＬ、５.５ミリモル）Ｍｅ₂ＣｕＬｉをゆっくりと加え た。得られた暗色のスラリーを−７８℃で６０分間攪拌し、ついで２％ＨＣｌで 反応停止させた。この粗製の混合物の標準操作およびクロマトグラフィーにより ２−アセチル−５−ピリジンカルボン酸メチル３２を５６％以上の収率で黄色の 固体とし て得た。実施例３０ 化合物５８（ＴＰＮＥＰ）（実施例２８の反応式とは別の反応式による）および 対応エステルＥｔ−５８（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およ びＲ”＝メタノ、Ｘ＝ＣＯＯＨ）の調製： ジクロロエタン（１００ｍＬ）中の２−ブロモトルエン（８.５ｇ、５０ミリ モル）および２,２−ジクロロ−２,２−ジメチルヘキサン（９.１５ｇ、５０ミ リモル）の溶液を三塩化アルミニウム（０.６６ｇ、５ミリモル）で処理した。 得られた暗褐色の溶液を室温で３０分間攪拌し、ついで氷で反応停止させた。溶 媒を除去し、メタノールから再結晶させて２−ブロモ−３,５,５,８,８−ペンタ メチル−５,６,７,８−テトラヒドロナフタレン３３を９５％の収率で白色固体 として得た。ブロモ化合物３３（１４１ｍｇ、０.５ミリモル）を含有する−７ ８℃のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液をｎ−ＢｕＬｉの１.６Ｍヘキサン溶液を（０.４ｍ Ｌ、０.６ミリモル）で処理し、ついで得られた混合物を−７８℃の２−アセチ ル−５−ピリジンカルボン酸エステル３２（７２ｍｇ、０.４ミリモル）のＴＨ Ｆ（２ｍＬ）溶液にカニューレで添加した。混合物を−７８℃で６０分間攪拌し 、２％ＨＣｌで反応停止させた。溶媒を除去し、粗製の混合物をクロマトグラフ ィーにかけて中間体３４を得、ついでこれを５％ＨＣｌで還流処理し、ついでＫ ＯＨ−ＭｅＯＨで７０℃にて３０分間処理した。この粗製の混合物の標準操作お よびクロマトグラフィーにより２−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５, ６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)エテニル]ピリジン−５−カルボン酸５ ８を５０％以上の収率で白色固体として得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ1.27（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.70（s,2(CH₂)），2 .00（s，CH3），5.56（s,=CH），6.55（s,=CH），7.08（d,J=8.3Hz，Pyr-CH）， 7.12（s,Ar-CH），7.15（s,Ar-CH），8.23（d,J=8.3Hz,Pyr-CH）および9.32（s, Pyr-CH）． ピリジンカルボン酸５８（１５ｍｇ、０.００４ミリモル）を還流下、エタノ ー ル（５ｍＬ）中のＳＯＣｌ₂（１滴）で６０分間処理し、ついでフラッシュクロ マトグラフィーにかけて定量収率のエチルエステルＥｔ−５８を白色固体として 得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ1.27（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.40（t,J =7.1Hz，- CH₂CH₃），1.70（s,2(CH₂)），1.99（s,CH₃），4.40（q,J=7.1Hz，-CH₂CH₃），5 .51（s,=CH），6.53（s,=CH），7.01（d，J=8.0Hz,Pyr-CH），7.12（s,Ar-CH） ，7.14（s,Ar-CH），8.15（d,J=8.0Hz,Pyr-CH）および9.23（s,Pyr-CH）．実施例３１ ３−アセチル−２−ピリジンカルボン酸Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルアミド３６ａの 調製： ピリジンカルボン酸モノカリウム３１（１.１ｇ、５ミリモル）をＳＯＣｌ₂（ ５ｍＬ、過剰）で７０℃にて２時間処理し、過剰の塩化チオニルを除去して黄色 がかった固体を得た。０℃の塩化メチレン（１０ｍＬ）中のジイソプロピルアミ ン（１ｇ、１０ミリモル）の溶液に上記酸クロライドのＣＨ₂Ｃｌ₂溶液（１０ｍ Ｌ）を加えた。得られたスラリーを室温で３時間攪拌し、アンモニウム塩から濾 過した。溶媒を除去し、粗製の残渣をクロマトグラフィーにかけて生成物３６ａ を９０％の収率で白色固体として得た。実施例３２ 化合物６０（ＴＰＮＥＰＣ）および６１（３ＴＴＮＥＰＥ）の調製： ２−ブロモ−３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロナ フタレン３３（６２０ｍｇ、２.２ミリモル）およびアセチルピリジンアミド３ ６ａ（５００ｍｇ、２ミリモル）を上記と同様の方法により変換して中間体３４ を８０％以上の収率で得た。−７８℃のＴＨＦ（５ｍＬ）中の該ピリジンアミド ３４（４３２ｍｇ、１ミリモル）の溶液に１.５Ｍ ＤＩＢＡＬトルエン溶液（０ .７ｍＬ、１.０５ミリモル）を加え、得られた黄色の透明な溶液を−２０℃まで ６０分間かけてゆっくりと温め、ついで水で反応停止させた。溶媒を除去し、粗 製の混合物をクロマトグラフィーにかけてピリジンアルデヒド３５を８３％の収 率で白色固 体として得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ1.25（s,2(CH₃)），1.29（s,2(CH₃)），1.70（s,2(CH₂)），1 .96（s,CH₃），5.47（s,=CH），5.92（s,=CH），7.10（s,Ar-CH），7.11（s,Ar- CH），7.70（d,J=8.0Hz,Pyr-CH），7.88（d,J=8.0Hz,Pyr-CH），8.72（s, Pyr-C H），10.06（s,CHO）． ピリジンアルデヒド３５（１０ｍｇ、０.０３ミリモル）をメタノール−水（ １：１）混合物（２ｍＬ）中のＨ₂Ｏ₂（２.０ｍＬ）で室温にて１０時間処理し 、ついで１０％ＨＣｌで反応停止させた。混合物をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で抽 出し、溶媒を除去して５−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８ −テトラヒドロ−２−ナフチル)エテニル]ピリジン−２−カルボン酸６０を白色 固体としてほぼ定量収率で得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ1.26（s,2(CH₃)），1.30（s,2(CH₃)），1.70（s,2(CH₂)），1 .94（s,CH₃），5.47（s,=CH），5.92（s,=CH），7.10（s,Ar-2(CH)），7.76（bs ,Pyr-CH，8.16（bs,Pyr-CH）および8.65（s,Pyr-CH）． ピリジンカルボン酸６０（５ｍｇ）を還流下、エタノール（１ｍＬ）中のＳＯ Ｃｌ₂（１滴）で６０分間処理し、ついでフラッシュクロマトグラフィーにかけ て定量収率のエチルエステル６１を白色固体として得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ1.26（s,2(CH₃)），1.29（s,2(CH₃)），1.44（t,J=7.1Hz,-CH₂ CH₃），1.69（s,2(CH₂)），1.95（s,CH₃），4.46（q,J=7.1Hz,-CH₂CH₃)），5.4 3（s,=CH），5.88（s,=CH），7.09（s,Ar-CH），7.10（s,Ar-CH），7.64（d,J=8 .0Hz，Pyr-CH），8.03（d,J=8.0Hz,Pyr-CH）および8.68（s,Pyr-CH）．実施例３３ 化合物６２（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”は一緒 になってＣＨ₂ＣＨ₂）（ＴＰＮＣＰ）の調製： 乾燥エーテル（３ｍＬ）中の亜鉛末（１６２ｍｇ、２.４８ミリモル）、Ｃｕ Ｃｌ（２ ５ｍｇ、０.２５ミリモル）およびＣＨ₂Ｉ₂（３３２ｍｇ、１.２４ミリモル）に 乾燥エーテル（５ｍＬ）中のオレフィン２６（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅ はメチル）（１５０ｍｇ、０.４１３ミリモル）を滴下した。混合物を１２時間 またはＨ−ＮＭＲにより完了するまで加熱還流した。水を加え、有機物をエーテ ルで抽出し、ＮＨ₄Ｃｌ、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させた。所望のシク ロプロピル化合物をエーテル−ＭｅＯＨから結晶化させることにより精製して化 合物６２のメチルエステル（６０ｍｇ、０.１５９ミリモル）を薄黄色の固体と して得た（収率：３９％）。 MP：177℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.27（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.35（S, CH₂），1.70（s,2(CH₂)），1.85（s,CH₂），2.11（s,CH₃），3.90（s,CH₃），6. 75（d,J=8.0Hz,Pyr-CH），7.14（s,Ar-CH），7.26（s,Ar-CH），7.98（d,J=8.0H z,Pyr-CH）および9.23（s,Pyr-CH）． ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の上記メチルエステル（６０ｍｇ、０.１６ミリモル ）に水性６Ｎ ＫＯＨ溶液（１ｍＬ）を加えた。室温で１時間攪拌後、加水分解 は完了し、固形分が沈殿するまで１Ｎ水性ＨＣｌで反応液を酸性にした。生成物 をエーテル抽出し、水、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させた。ＥｔＯＡｃ −ヘキサンから結晶化させてピリジナールカルボン酸６２（３３ｍｇ、０.０９ ４ミリモル）を得た（収率：５９％）。 MP：275℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.25（s,2(CH₃)），1.35（s,2(CH₃)），1.40（s, CH₂），1.72（s,2(CH₂)），1.85（s,CH₂），2.15（s,CH₃），6.78（d,J=8.0Hz,P yr-CH），7.14（s,Ar-CH），7.26（s,Ar-CH），8.02（d,J=8.0Hz,Pyr-CH）およ び9.15（s,Pyr-CH）．実施例３４ 化合物６３（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はメタ ノ、Ｘ＝ＣＯＮＨＲ₉、Ｒ₉＝４−ヒドロキシフェニル）（３−メチル−ＴＴＮＥ ＨＢＰ）の調製： 無水エーテル（２２ｍＬ）中のＤＭＦ（７５０ｍｇ、１０ミリモル）に塩化オ キサリル（１.３ｇ、１０ミリモル）を加えた。反応液を１時間攪拌し、ついで 溶媒を除去して粗製の白色固体（ジメチルクロロホルマジニウムクロライド）を 得た。このジメチルクロロホルマジニウムクロライドに乾燥ＤＭＦ（１２ｍＬ） 中の化合物７（２.８７ｇ、８.２４ミリモル）を加えた。反応液を室温にて２０ 分間攪拌し、ついで０℃に冷却した。この化合物７の酸クロライドの冷溶液に、 ４−アミノフェノール（３.６２ｇ、３３ミリモル）およびトリエチルアミン（ １.６８ｇ、１６.３ミリモル）を含有する冷ＤＭＦ（０℃）溶液を加えた。０℃ で３０分攪拌後、反応液を室温に１２時間温めた。水性２０％ＨＣｌを加え、得 られた固体を濾過し、水、アセトンおよびＥｔＯＡｃで洗浄して所望の化合物６ ３（６００ｍｇ、１.３６ミリモル）を得た（収率：１７％）。¹ H=NMR（CDCl₃）δ1.29（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.71（s,(CH₂)），1. 99（s,CH₃），5.31（s,=CH），5.80（s,=CH），6.85（d,Ar-2(CH)），7.09（s,A r-CH），7.16（s,Ar-CH），7.40（d,Ar-2(CH)），7.48（d,Ar-2(CH)），8.40（d ,Ar-2(CH)）．実施例３５ 化合物６４（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はメタ ノ、Ｘ＝ＣＯＮＨＲ₉、Ｒ₉＝４−フルオロフェニル）（３−メチル−ＴＴＮＥＦ ＢＰ）の調製： ４−アミノフェノールの代わりに４−フルオロアニリンを用いた他は、化合物 ６３と同様にして標記化合物を調製した。 MP：203℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.28（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.70（s, 2(CH₂)），1.96（s,CH₃），5.33（s,=CH），5.81（s,=CH），7.05（d,J=9Hz）， Ar-2(CH)），7.09（s,Ar-CH），7.13（s,Ar-CH），7.39（d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)） ，7.59（dd,J=5,9Hz,Ar-2CH），7.75（brs NH），7.78（d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)） ．実施例３６ 化合物６５（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はメタ ノ、Ｘ＝ＣＯＮＨＲ₉、Ｒ₉＝４−フェニルカルボン酸）（３−メチル−ＴＴＮＥ ＣＢＰ）の調製： ４−アミノフェノールの代わりに４−アミノフェニルカルボン酸メチルを用い た他は化合物６３と同様にして標記化合物を調製した。得られたエステルをメタ ノール性ＫＯＨ中で加水分解し、ついで酸性にして（２０％ＨＣｌ）所望の化合 物６５を得た。 Mp：200℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.28（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.71（s, 2(CH₂)），1.97（s,CH₃），5.34（s,=CH），5.85（s,=CH），7.09（s,Ar-CH）， 7.14（s,Ar-CH），7.40（d,J=8Hz,Ar-CH），7.80（d,J=8Hz,Ar-2(CH)），7.87（ br s,Ar-2(CH)），8.14（br s,Ar-2(CH)）．実施例３７ 化合物６６（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はオキ ソ、Ｘ＝ＣＯＮＨＲ₉、Ｒ₉＝３−ヒドロキシフェニル）（３−メチル−ｍ−ＴＴ ＮＣＨＢＰ）の調製： 無水エーテル（２２ｍＬ）中のＤＭＦ（７５０ｍｇ、１０ミリモル）に塩化オ キサリル（１.３ｇ、１０ミリモル）を加えた。反応液を１時間攪拌し、ついで 溶媒を除去して粗製の白色固体（ジメチルクロロホルマジニウムクロライド）を 得た。このジメチルクロロホルマジニウムクロライドに乾燥ＤＭＦ（１２ｍＬ） 中の化合物４（２.８８ｇ、８.２４ミリモル）を加えた。反応液を室温にて２０ 分間攪拌し、ついで０℃に冷却した。この化合物７の酸クロライドの冷溶液を、 ４−アミノフェノール（３.６２ｇ、３３ミリモル）およびトリエチルアミン（ １.６８ｇ、１６.３ミリモル）を含有する冷ＤＭＦ（０℃）溶液を加えた。０℃ で３０分攪拌後、反応液を室温に１２時間温めた。水性２０％ＨＣｌを加え、得 られた固体を濾過し、水、アセトンおよびＥｔＯＡｃで洗浄して所望の化合物６ ６（７５０ｍｇ、１.７０ミリモル）を得た（収率：２１％）。 MP：182℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.22（s,2(CH₃)），1.32（s,2(CH₃)），1.70（s, 2(CH₂)），2.37（s,CH₃），6.58（m,Ar-2(CH)），7.20（d,J=8Hz,Ar-CH），7.22 （s,Ar-CH），7.28（s,Ar-Ch），7.91（d,J=8.3Hz,Ar-2(CH)），8.26（d,J=8.3H z,Ar-2(CH)）．実施例３８ 化合物６７（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はメタ ノ、Ｘ＝ＣＯＮＨＲ₉、Ｒ₉＝３−ヒドロキシフェニル）（３−メチル−ｍ−ＴＴ ＮＥＨＢＰ）の調製： ４−アミノフェノールの代わりに３−アミノフェノールを用いた他は化合物６ ３と同様にして標記化合物を調製した。 MP：136℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.28（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.70（s, 2(CH₂)），1.97（s,CH₃），5.35（s,=CH），5.84（s,=CH），6.57（m,Ar-2(CH) ），7.09（s,Ar-CH），7.14（s,Ar-CH），7.16（m,Ar-CH），7.39（d,J=8.3Hz,A r-2(CH)），8.09（d,J=8.3Hz,Ar-2(CH)）．実施例３９ 化合物６８（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はメタ ノ、Ｘ＝ＣＯＮＨＲ₉、Ｒ₉＝２−ヒドロキシフェニル）（３−メチル−ｏ−ＴＴ ＮＣＨＢＰ）の調製 ４−アミノフェノールの代わりに２−アミノフェノールを用いた他は化合物６ ３と同様にして標記化合物を調製した。 MP：180℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.28（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.71（s, 2(CH₂)），1.97（s,CH₃），5.35（s,=CH），5.84（s,=CH），6.9（m,Ar-CH），7 .08-7.2（m,Ar-CH），7.09（s,Ar-CH），7.13（s,Ar-CH），7.42（d,J=8.4Hz,Ar -2(CH)），7.83（d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)），8.03（brs,Ar-CH），8.64（s,NH）．実施例４０ 化合物６９（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はメタ ノ、Ｘ＝ＣＯＮＨＲ₉、Ｒ₉＝３−フェニルカルボン酸）（３−メチル−ｍ−ＴＴ ＮＥＣＢＰ）の調製： ４−アミノフェノールの代わりに３−アミノフェニルカルボン酸メチルを用い た他は化合物６３と同様にして標記化合物を調製した。得られたエステルをメタ ノール性ＫＯＨ中で加水分解し、ついで酸性にして（２０％ＨＣｌ）所望の化合 物６９を得た。 MP：250℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.28（s,2(CH₃)），1.31（s,2(CH₃)），1.71（s, 2(CH₂)），1.97（s,CH₃），5.34（s,=CH），5.85（s,=CH），7.09（s,Ar-CH）， 7.14（s,Ar-CH），7.40（d,J=8Hz,Ar-2(CH)），7.55（m,Ar-CH），7.76（m,Ar-C H），7.80（d,J=8Hz,Ar-2(CH)），7.87（s,Ar-CH），8.14（s,NH）．実施例４１ 化合物７０（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はメタ ノ、ｎ＝０、Ｘ＝ＣＯＯＨ）の調製： 実施例１、２、４および５において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３ ,４−テトラヒドロナフタレンの代わりに１,１,３,３,５−ペンタメチルインダ ンを用いた他は、化合物７と同様にして標記化合物を調製した。 MP：145℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.05（s,2(CH₃)），1.28（s,CH₃），1.31（s,CH₃ ），1.38（s,CH₂），1.98（s,CH₃），5.34（s,CH），5.84（s,CH），6.90（s,Ar -CH），6.92（s，Ar-CH），7.36（d,J=8.4Hz，Ar-2(CH)），8.00（d,J=8.4Hz,Ar -2(CH)）．実施例４２ 化合物７１（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₁₄はメチル、Ｒ’およびＲ” はメタノ、ｎ＝０、Ｘ＝ＣＯＯＨ）の調製： 実施例１、２、４および５において１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３ ,４−テトラヒドロナフタレンの代わりに１,１,２,３,３,５−ペンタメチルイン ダンを用いた他は、化合物７と同様にして標記化合物を調製した。 MP：217℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.01（d,J=7.3Hz,CH₃），1.08（s,CH₃），1.10（ s,CH₃），1.27（s,CH₃），1.30（s,CH₃），1.88（q,CH），2.00（s,CH₃），5.35 （s,=CH），5.85（s,=CH），6.95（s,Ar-CH），6.98（s,Ar-CH），7.38（d,J=8. 3Hz,Ar-2(CH)），8.00（d,J=8.3Hz,Ar-2(CH)）．実施例４３ 化合物７２（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅はメチル、Ｒ’およびＲ”はＨ、 Ｘ＝ＣＯＯＨ）の調製： テレフタル酸クロライドモノメチルの代わりに４−（ブロモメチル）安息香酸 メチルを用いた他は化合物４（実施例１および２）と同様にして標記化合物を調 製した。 MP：237℃；¹H-NMR（CDCl₃）δ1.23（s,2(CH₃)），1.27（s,2(CH₃)），1.67（s, 2(CH₂)），2.16（s,CH₃），4.06（s,CH₂），7.01（s,Ar-CH），7.08（s,Ar-CH） ，7.25（d,J=8Hz,Ar-2(CH)），8.01（d,J=8Hz,Ar-2(CH)）．実施例４４ 化合物８１の調製： ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のトリメチルホスホノアセテート（４.５６ｇ、２５.０ ミリモル）にアルゴン下、０℃にてＮａＨ（油中に６０％）（９０２ｍｇ、２２ .５ミリモル）を３回に分けて加えた。０℃で３０分間攪拌した後、ＴＨＦ（１ ０ｍＬ）中のイソプロピルメチルケトン（２.２７ｍＬ、２１.２ミリモル）を加 えた。この反応混合物を６５℃で３時間加熱し、ついで室温に冷却し、飽和ＮＨ₄ Ｃｌ水溶液（５０ｍＬ）中に注ぎ、有機生成物をエーテル（２５０ｍＬ）で抽 出した。エーテル層を水（２×３０ｍＬ）、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥 させ（ＭｇＳＯ₄）、シリカゲルの短ベッドで濾過し、濃縮して所望のエステル ８１の本質的に純粋なＥ,Ｚ混合物（１.６ｇ）を得た（収率：６５％）。実施例４５ 化合物８７Ａ（式中、Ｒ’はイソプロピル、Ｒ”はＨ）の調製： −７８℃のＴＨＦ（５ｍＬ）中のジイソプロピルアミン（１.２ｍＬ、８.６ミ リモル）の溶液にｎＢｕＬｉの２.５Ｍ溶液（２.５７ｍＬ、６.４ミリモル）を 加えた。混合物を１０分間攪拌し、エステル８１（６０９ｍｇ、４.３ミリモル ）を滴下した。反応液を室温に温め、さらに３０分間攪拌し、ＴＨＦ（５ｍＬ） 中のシクロシトラール（６５１ｍｇ、４.３ミリモル）を加えた。３０分間攪拌 した後、反応液を飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液（１０ｍＬ）中に注ぎ、有機層をエーテ ルで抽出した。エーテル層を水および食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄） 、濃縮して本質的に純粋なラクトン８７Ａ（７２９ｍｇ）を得た。 −７８℃のＣＨ₂Ｃｌ₂（２１ｍＬ）中のラクトン８７Ａ（１.１ｇ、４.２ミリ モル）にＤＩＢＡＬ（５.０ミリモル、１Ｍヘキサン溶液を５ｍＬ）を加えた。 −７８℃で３０分間攪拌した後、飽和ＫＮａ−酒石酸水溶液（２０ｍＬ）で反応 停止させ、ついで反応生成物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出した。ＥｔＯＡ ｃ溶液をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、濃縮してラクトール８７Ｂを定量収率 で得た。このラクトールをさらに精製することなく次の工程に用いた。実施例４６ 化合物８８（式中、Ｒ’はイソプロピル、Ｒ”はＨ）の調製： ラクトール８７Ｂ（３８０ｍｇ、１.４４ミリモル）を含有するＣＨ₂Ｃｌ₂溶 液に、室温にてＨＣｌ（ＣＨ₂Ｃｌ₂中に０.１２Ｍ、３ｍＬ、０.３６ミリモル） を加えた。この反応液を３時間またはすべてのラクトールがＴＬＣにより消費尽 くされるまで攪拌した。反応混合物を０℃の飽和ＮａＨＣＯ₃中に注ぎ、ついで ＣＨ₂Ｃｌ₂（５０ｍＬ）で抽出した。下方の有機層を水（２×１０ｍＬ）で洗浄 し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濃縮して実質的に純粋なアルデヒド８８（３１０ ｍｇ、１.２６ミリモル）を得た（収率：８８％）。実施例４７ 化合物８９（式中、Ｒ’はイソプロピル、Ｒ”はＨ）の調製： ＴＨＦ（６ｍＬ）中のホスホノ試薬９０（８１５ｍｇ、３.１ミリモル）の溶 液にＮａＨ（油中に６０％）（９３ｍｇ、２.３ミリモル）を加え、混合物を１ ０分間攪拌した。この混合物に室温にてアルデヒド８８（実施例４６から）（３ ８０ｍｇ）を加えた。３０分間攪拌した後、水性ＮＨ₄Ｃｌを加え、有機生成物 をエーテルで抽出した。エーテル層を洗浄し（水、食塩水）、乾燥させ（ＭｇＳ Ｏ₄）、濾過し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサ ン中の６０％ベンゼン）により精製してエステル８９を得た。実施例４８ 化合物７５の調製： １：１ ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ溶液（１ｍＬ）中の化合物８９（１５ｍｇ、０.０４ ２ミリモル）の溶液に、室温にてＫＯＨ（４.３ｍｇ、０.２６ミリモル）を加え た。混合物を７０℃で２時間加熱し、０℃に冷却し、エーテル（１０ｍＬ）で希 釈し、０.１Ｍ ＨＣｌで酸性にした。エーテル層を洗浄し（水、食塩水）、乾燥 させ（ＭｇＳＯ₄）、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ ＣＨＣｌ₃）により精製して純粋な酸７５を得た。¹ H-NMR（CDCl₃）δ1.02（s，2(CH₃)），1.12（d，J=4.5Hz,（2(CH₃)），1.50（m ，CH₂），1.62（m，CH₂），1.75（s，CH₃），2.05（t，J=5Hz，CH₂），2.31（s ，CH₃），2.75（q，J=4.5Hz，CH(CH₃)₂），5.78（s，CH），6.08（d，J=12Hz，C H），6.24（d，J=16Hz，CH），6.26（d，J=16Hz，CH），7.21（dd，J=16，12Hz ，CH）．実施例４９ 化合物７３の調製： 出発物質として化合物８１の代わりに化合物７９を用いた他は化合物７５（実 施例４４〜４８）と同様にして化合物７３を調製した。化合物７９は、イソプロ ピル−メチルケトンの代わりにエチル−メチルケトンを用いた他は化合物８１と 同様にして調製した。中間体化合物８７、８８および８９については、Ｒ’はエ チルであり、Ｒ”はＨである。¹ H-NMR（CDCl₃）δ1.05（s，2（CH₃)），1.151（t，J=4.5Hz，CH₂CH₃），1.51（ m，CH₂），1.62（m，CH₂），1.71（s，CH₃），2.05（m，CH₂），2.30（s，CH₃） ，2.35（t，J=4.5Hz，CH₂CH₃），5.78（s，CH），6.05（d，J=11Hz，CH），6.25 （d，J=15Hz，CH），6.30（d，J=15Hz，CH），6.52（dd，J=15，11Hz，CH）．実施例５０ 化合物７４の調製： 出発物質として化合物８１の代わりに化合物８０を用いた他は化合物７５（実 施例４４〜４８）と同様にして化合物７４を調製した。化合物８０は、イソプロ ピル−メチルケトンの代わりにｎ−プロピル−メチルケトンを用いた他は化合物 ８１と同様にして調製した。中間体化合物８７、８８および８９については、Ｒ ’はｎ−プロピルであり、Ｒ”はＨである。¹ H-NMR（CDCl₃）δ0.9（t，J=5Hz，CH₂CH₃），1.02（s，2(CH₃)），1.40-1.65（ m，3(CH₂)），1.70（s，CH₃），2.00（m，CH₂），2.40（m，CH₂CH₂CH₃），5.75 （s，CH），6.05（d，J=12Hz，CH），6.21（d，J=15Hz，CH），6.25（d，J=16Hz ，CH），6.50（d，J=16Hz，CH），7.10（dd，J=15，12Hz，CH）．実施例５１ 化合物７６の調製： 出発物質として化合物８１の代わりに化合物８２を用いた他は化合物７５（実 施例４４〜４８）と同様にして化合物７６を調製した。化合物８２は、トリメチ ルホスホノアセテートの代わりにメチル−トリメチルホスホノアセテートを用い 、イソプロピル−メチルケトンの代わりにアセトンを用いた他は化合物８１と同 様にして調製した。中間体化合物８７、８８および８９については、Ｒ’はメチ ルであり、Ｒ”はメチルである。¹ H-NMR（CDCl₃）δ1.05（s，2(CH₃)），1.50（m,（CH₂），1.65（m，CH₂），1.7 5（s，CH₃），1.95（s，CH₃），2.05（m，CH₂+CH₃），2.35（s，CH₃），5.81（s ，CH），6.25（d，J=16Hz，CH），6.30（d，J=16Hz，CH），6.72（d，J=16Hz，C H），7.35（d，J=16Hz，CH）．実施例５２ 化合物７７の調製： 出発物質として化合物８１の代わりに化合物８３を用いた他は化合物７５（実 施例４４〜４８）と同様にして化合物７７を調製した。化合物８３は、イソプロ ピル−メチルケトンの代わりにｔ−ブチル−メチルケトンを用いた他は化合物８ １と同様にして調製した。中間体化合物８７、８８および８９については、Ｒ’ はｔ−ブチルであり、Ｒ”はＨである。¹ H-NMR（CDCl₃）δ0.89（s，CH₃），0.90（s，CH₃），1.00（s，C(CH₃)₃），1.4 5（m，CH₂），1.65（m，CH₂），1.70（s，CH₃），2.01（t，J=5Hz，CH₂），2.32 （s，CH₃），5.71（s，CH），6.00（d，J=12Hz，CH），6.32（d，J=16Hz，CH） ，6.50（d，J=16Hz，CH），7.10（dd，J=16，12Hz，CH）．実施例５３ 化合物９５の調製： 乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のホスホニウム塩９１（１.４ｇ、２.９ミリモル） にアルゴン下、０℃にて２.４ＭｎＢｕＬｉ溶液（１.１ｍＬ、２.６ミリモル） を加えた。この暗赤色のイリドを０℃で３０分間攪拌し、−７８℃に冷却した。 このイリドにＴＨＦ（２ｍＬ）中のジアルデヒド９２（３９１ｍｇ、２.９ミリ モル）を加えた。反応液を２０分間攪拌し、ついで水性ＮＨ₄Ｃｌ中に注ぎ、エ ーテル（５０ｍＬ）で希釈し、エーテル層を水、食塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｍ ｇＳＯ₄）、濾過し、濃縮した。粗製の生成物をクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂、 ５％エーテル−ヘキサン）により精製して純粋なアルデヒド９３（５４３ｍｇ、 ２.１４ミリモル）を得た（収率：７４％）。 化合物９４を実施例４７と同様にして調製した。 化合物９５を実施例４８と同様にして調製した。¹ H-NMR（CDCl₃）δ1.06（s，(CH₃)₂₎，1.50（m，CH₂），1.65（m，CH₂），1.75 （s，CH₃），2.05（t，J=5Hz，CH₂），2.40（s，CH₃），5.90（s，CH），6.45（ d，J=16Hz，CH），6.60（d，J=16Hz，CH），6.72（d，J=16Hz，CH），7.20-7.50 （m，Ar-H+CH）．実施例５４ 化合物１００の調製： エーテル（３０ｍＬ）中にシス−１,２−シクロヘキサンジメタノール９６（ ４００ｍｇ、２９ミリモル）およびトリエチルアミン（３００ｍｇ、３.０ミリ モル）を含有する溶液にベンゾイルクロライド（４００ｍｇ、２９ミリモル）を 加え、 白色の濁った溶液とした。この反応混合物を室温で１５時間攪拌した。白色固体 から濾過して粗製の混合物を得、ついでこれをクロマトグラフィーにかけてモノ 保護したジオールを５０％の収率で得た。−７８℃の塩化メチレン（３ｍＬ）中 のＤＭＳＯの溶液（０.３ｍＬ、４ミリモル）に塩化オキサリルの２.０Ｍ ＣＨ₂ Ｃｌ₂溶液（１.０ｍＬ、２.０ミリモル）を加え、得られた透明な溶液を−６０ ℃で２０分間攪拌し、ついで、上記アルコール（３７０ｍｇ、１.５ミリモル） をＣＨ₂Ｃｌ₂溶液として導入した。この反応混合物を−６０℃でさらに２０分間 攪拌し、トリエチルアミンを加えた。ついで、この混合物を室温に温め、水で反 応停止させた。標準操作の後にクロマトグラフィーにかけてシス−アルデヒド９ ７を８７％の単離収率で無色油状物として得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）1.40-1.60（m，3H），1.63-1.75（m，4H），1.90-2.00 （m，1H），2.35-2.48（m，1H），2.62-2.68（m，1H），4.44（d，J=7.2Hz，2H ），７.44（t，J=7.6Hz，2H），7.54（t，J=7.6Hz，1H），7.99（d，J=7.6Hz，2 H）および9.86（s，1H）． ２,６,６−トリメチルシクロヘキセニルメチル−トリフェニルホスホニウムブ ロマイト９１（１.０ｇ、２ミリモル）をＴＨＦ中のＫＮ(ＳｉＭｅ₃)₂の０.５Ｍ トルエン溶液（３ｍＬ、１.５ミリモル）と反応させて、室温で暗赤色のスラリ ーを得、これにＴＨＦ中のアルデヒド９７（３２０ｍｇ、１.３ミリモル）を３ ０分間かけてゆっくりと加えた。２時間攪拌した後、反応混合物を２％ＨＣｌで 反応停止させ、酢酸エチルで抽出した。溶媒を除去し、粗製の残基をクロマトグ ラフィーにかけてジエン生成物９８を約４０％の収率で得、ついでこれを加水分 解してアルコール９８ａを得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）0.97（s，3H），0.98（s，3H），1.20-1.45（m，8H） ，1.55-2.00（m，8H），1.66（s，3H），3.44-3.52（m，1H），3.65-3.71（m,1H ），5.26（dd，J=12.5and7.5Hz，1H）および5.88（dd，J=12.5and1.0Hz，1H）． このアルコール９８ａを上記と同様の方法で酸化してアルデヒド９９を良好な 収率で得、ついでこれを標準的なウィッティッヒ反応によりカップリングして最 終生成物のエチルエステルを得た。このエステルをメタノール／水中のＫＯＨで 加水分解して化合物１００を無色油状物として得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）0.89（s，3H），0.92（s，3H），1.20-1.80（m，14H） ，1.58（s，3H），1.90-1.98（m，2H），2.23（s，3H），5.12（dd，J=13.1and7 .0Hz，1H），5.65-5.82（m，2H）および6.08-6.13（m，2H）． 実施例５５ 化合物１０４の調製： −７８℃のＴＨＦ中のブロモ化合物３３（１.４１ｇ、５.０ミリモル）の透明 な溶液に１.６Ｍｎ−ＢｕＬｉヘキサン溶液（３.５ｍＬ、５.６ミリモル）を加 えて濁った黄色がかった混合物を得、これを該温度で１５分間攪拌した。このア ニオン溶液を−３０℃のＣｕｌ ＴＨＦ溶液にカニューレで添加し、得られた暗 色の混合物を２０分間攪拌し、ついで−７８℃のアセトキシアセチルクロライド ＴＨＦ溶液を入れた別のフラスコにカニューレで添加した。この反応混合物を低 温度で２０分間攪拌し、ついで室温まで温め、ついで水を加えて反応を停止させ た。混合物の標準的な操作およびフラッシュクロマトグラフィーによる精製を行 って生成物１０１を５５％の収率で得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）1.28（s，6H），1.29（s，6H），1.69（s，4H），2.21 （s，3H），2.47（s，3H），5.20（s，2H），7.18（s，1H）および7.26（s,1H） ． 中間体１０１（２００ｍｇ、０.７ミリモル）をＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＫＮ( ＳｉＭｅ₃)₂およびメチルトリフェニルホスホニウムブロマイド（３５７ｍｇ、 １.０ミリモル）に由来するイリドで室温にて１６時間処理し、ついで生成物を 加水分解してアリルアルコール１０２を５０％の収率で得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）1.26（s，6H），1.28（s，6H），1.67（s，4H），2.25 （s，3H），4.31（d，J=6.0Hz，2H），5.05（s，1H），5.45（s，1H），7.03（s ，1H）および7.10（ｓ，1H）． エチレンジクロライド（１ｍＬ）中のアリルアルコール１０２（９５ｍｇ、０ .３５ミリモル）の溶液にＥｔ₂Ｚｎ（０.２１ｍＬ）２ミリモル）を加え、つい で０℃にてＣＨ₂ＩＣｌ（７００ｍｇ、４ミリモル）を加えた。得られた混合物 を、すべての出発物質が消失するまで６０分間攪拌した。混合物の標準的な操作 ついでクロマトグラフィーによりシクロプロパノールを得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）0.90-1.10（m，4H），1.26（s，12H），1.65（s，4H） ，2.37（s，3H），3.57（d，J=5.5Hz，2H），7.06（s，1H）および2.21（s，1H ）． この中間体を上記方法により酸化して対応アルデヒド１０３を得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）0.90-1.10（m，4H），１.25（s，6H），１.27（s，6H ），１.65（s，4H），2.21（s，3H），7.10（s，1H），7.11（s，1H）および9.6 7（s，1H）． このアルデヒドを標準的なウィッティッヒカップリングにより変換し、すでに 記載したエステル加水分解により最終生成物の酸１０４とした。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）1.05-1.13（m，4H），1.25（s，6H），1.28（s，6H） ，1.70（s，4H），2.22（s，3H），2.24（s，3H），5.53（d，J=15.5Hz，1H）， 5.85（d，J=15.5Hz，1H），6.14（s，1H），7.05（s，1H）および7.12（s，1H） ．実施例５６ 化合物１１０の調製： ０℃のＴＨＦ（６０ｍＬ）中のジ酸１０５（５ｇ、３８ミリモル）の溶液にＢ Ｈ₃−ＴＨＦ溶液を滴下して白色のスラリーを得、これを室温で１６時間攪拌し た。ついで、ＴＨＦ−Ｈ₂Ｏ（１：１）（２２ｍＬ）を加え、ついでＫ₂ＣＯ₃を 加えた。 ６０分間攪拌した後、反応混合物を濾過し、濾液を乾燥させ、濃縮して粗製のジ オールを得、これを直接エーテル中のベンゾイルクロライド（７ｇ、５０ミリモ ル）およびＥｔ₃Ｎ（６ｇ、６０ミリモル）と２時間反応させた。白色固体から 濾過し、残渣をクロマトグラフィーにかけてジオールのモノエステルおよびジエ ステルを良好な収率で得た。ついで、モノエステルを同様の方法により酸化して 対応アルデヒド１０６を得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）1.24-1.36（m，4H），4.56（s，2H），7.43（t，J=7.9 Hz，2H），7.55（t，J=7.9Hz，1H），8.01（d，J=7.9Hz，2H）および9.06（s，1 H）． −７８℃の)ＴＨＦ／ＤＭＰＵ（５／１）（１０ｍＬ）中の２,６,６−トリメ チルシクロヘキセニルメチルトリフェニルホスホニウムブロマイド９１（１.５ ｇ、３ミリモル）の黄色溶液に１.０Ｍ ＬｉＮ(ＳＩＭｅ₃)₂ＴＨＦ溶液（３ｍＬ ）３ミリモル）を加えて暗赤色の溶液を得、これを室温に温めた。ＴＨＦ（３ｍ Ｌ）中のアルデヒド１０６（１.１ｇ、５ミリモル）を上記イリド溶液に６０分 間かけてゆっくりとカニューレで添加し、反応混合物をさらに１時間攪拌した。 標準的な操作ついでクロマトグラフィーにより生成物１０７を４０％の収率で得 た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）0.76-0.86（m，4H），0.95（s，6H），1.41-1.46（m， 2H），1.56-1.62（m，2H），1.64（s，3H），1.95（t，J=4.0Hz，1H），4.34（s ，2H），5.31（d，J=16.0Hz，1H），5.95（d，J=16.0Hz，1H），7.41（t，J=7.6 Hz，2H），7.54（t，J=7.6Hz，1H）および8.04（d，J=7.6Hz，2H）． エステル１０７をＴＨＦ中のＭｅＬｉで処理してアルコール１０８を定量的収 率で無色油状物として得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHZ）0.68（s，4H），0.97（s，6H），1.42-1.47（m，2H） ，1.58-1.63（m，2H），1.65（s，3H），1.99（t，J=5.2Hz，2H），3.58（d，J= 6.0Hz，2H），5.27（d，J=16.0Hz，1H）および5.94（d，J=16.0Hz，1H）． アルコール１０８を上記ウィッティッヒ反応により中間体１０９に変換した。 アルコール１０８（１８０ｍｇ、０.８ミリモル）をＴＨＦ（１０ｍＬ）中のト リフェニルホスフィン（２６２ｍｇ、１.０ミリモル）および四具化炭素（３３ ２ｍｇ、１.０ミリモル）で１時間処理してブロモ化合物を得、これをエタノー ル／水（２／１）中の過剰のシアン化カリウムと６時間反応させてシアノ化合物 １０９を得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）0.78-0.82（m，4H），0.99（m，6H），1.45-1.60（m， 4H），1.84（s，3H），1.95-2.00（m，2H）2.54（s，2H），5.18（d，J=15.5Hz ，1H）および5.90（d，J=15.5HZ，1H）． 上記シアノ化合物１０９をＤＩＢＡＬで還元してアルデヒドとし、ついで化合 物１００および１０４について記載したウィッティッヒ反応およびエステル加水 分解を行って所望の生成物１１０を得た。¹ H-NMR（CDCl₃，400MHz）0.59-0.68（m，4H），0.93（s，6H），1.40-1.45（m， 2H），1.55-1.60（m，2H），1.61（s，3H），1.94（t，J=6.2Hz，2H），2.27（s ，3H），2.33（d，J=5.4Hz，2H），5.16（d，J=16.0Hz，1H），5.71（s，1H）， 5.24（d，J=16.0Hz，1H）,および6.20-6.30（m，2H）．実施例５７ 化合物１２３の調製： 化合物１１７とイソプロピル−メチルケトン１１８との縮合を２５℃のＣＨ₂ Ｃｌ₂中のＡｌＣｌ₃を加えることによって行ってケトン１１９を得、ついでこれ をＮａＨ処理下、８０℃のＴＨＦおよびＤＭＰＵを共溶媒として用いてシアノメ チルホスホネート１２４と縮合させ、ついでカラムクロマトグラフィーにかけて 純粋なシス−ニトリル１２０を得た。ニトリル１２０のＤＩＢＡＬ還元により対 応シス−アルデヒド１２１を得た。ｎＢｕＬｉ処理下、ＴＨＦおよびＤＭＰＵを 共溶媒として用いてアルデヒド１２１をホスホン酸エステル１２２とカップリン グし、ついでウィッティッヒ生成物を加水分解し、カラムクロマトグラフィー後 に純粋な化合物１２３を薄黄色の固体として得た。 MP=170-171℃；¹H-NMR（CDCl₃）：ppm1.07（d，J=7Hz，2xCH₃），1.25（s，2xCH₃ ），1.28（S，2xCH₃），1.68（s，CH₂CH₂），2.11（s，CH₃），2.70（m，CH） ，5.73（s，CH），6.16（d，J=11Hz，CH），6.27（d，J=15Hz，CH），6.66（dd ，J=11，15Hz，CH），6.90（dd，J=2，8Hz，Ar-CH），7.03（d，J=2Hz，Ar-CH） ，7.25（d，J=8Hz，Ar-CH）．実施例５８ 化合物１２８の調製： １,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレン１と アセチルクロライドとの縮合を２５℃のＣＨ₂Ｃｌ₂中のＡｌＣｌ₃を加えること により行ってケトン１２５を得、ついでこれをＮａＨ処理下、８０℃のＴＨＦお よびＤＭＰＵを共溶媒として用いてシアノメチルホスホネート１２４と縮合させ 、ついでカラムクロマトグラフィーにかけて純粋なシス−ニトリル１２６を得た 。ニトリル１２６のＤＩＢＡＬ還元により対応シス−アルデヒド１２７を得た。 ｎＢｕＬｉ処理下、ＴＨＦおよびＤＭＰＵを共溶媒として用いてアルデヒド１２ ７をホスホン酸エステル１２２とカップリングし、ついでウィッティッヒ生成物 を加水分解し、カラムクロマトグラフィー後に純粋な化合物１２８を得た。¹ H-NMR（CDCl₃）：ppm1.22（s，2xCH₃），1.27（s，2xCH₃），1.66（s，CH₂CH₂ ）2.07（S，CH₃），2.08（s，CH₃），2.13（s，CH₃），5.72（s，CH），6.19（d ，J=16Hz，CH），6.22（d，J=8Hz，CH），6.33（dd，J=8，16Hz，CH），6.90（s ，Ar-CH），7.08（s，Ar-CH）．レチノイドレセプターサブタイプ選択性の評価 本発明の代表的な合成レチノイド化合物を分析したところ、以下に一層詳細に 記載するように、レチノイドレセプターに対してサブタイブ選択性を示すこと、 およびレチノイドＸレセブターによって選択的に媒体されるプロセスを調節しう ることがわかった。 本明細書において「レチノイドＸレセプターによって選択的に媒体されるプロ セス」とは、レチノイドＸレセプター選択的プロセスに応答性のレセプターまた はレセプターの組み合わせ、たとえばＲＸＲサブファミリーの１および／または 複数の成員を選択的に活性化する化合物によって媒体される生物学的、生理学的 、分泌学的その他の生体のプロセスをいう。調節には、かかるプロセスの活性化 または促進並びに阻害または抑制が含まれ、インビトロまたはインビボで行うこ とができる。インビボでの調節は広範囲の被験者、たとえばヒト、齧歯類、ヒツ ジ、ブタ、ウシなどで行うことができる。かかるプロセスの調節が疾患状態の治 療での使用と直接の関連を有することは一般に受け入れられている。 レチノイドＸレセプター選択的リガンドに応答性のレセプターとしては、レチ ノイドＸレセプター−アルファ、レチノイドＸレセプター−ベータ、レチノイド Ｘレセプター−ガンマ、かかるレセプターの遺伝子によってコードされるスプラ イシング変異体、並びにこれらの種々の組み合わせ（すなわち、ホモダイマー、 ホモトリマー、ヘテロダイマー、ヘテロトリマーなど）が挙げられる。また、レ チノイドＸレセプターと、該レセプターとヘテロダイマー、ヘテロトリマーおよ び一層高度のヘテロマルチマーを形成することによって相互反応するレセプター のステロイド／胸腺スーパーファミリーの他の成員との組み合わせも含まれる。 たとえば、レチノイン酸レセプター−アルファ、−ベータ、または−ガンマイソ 型はレチノイドＸレセプターイソ型のいずれか（すなわち、アルファ、ベータ、 またはガンマ；異なるレセプターイソ型の組み合わせを含む）とヘテロダイマー を形成し、種々のレチノイドＸレセプターは胸腺レセプターとヘテロダイマーを 形成し、ビタミンＤレセプターとヘテロダイマーを形成する。レチノイドＸレセ プターサブファミリーの成員は、ある種の「オーファン（orphan）レセプター」 とヘテロダイマーを形成する。かかるオーファンレセプターとしては、ＰＰＡＲ （イッセマン（Issemann）およびグリーン（Green）、Nature、３４７：６４５ 〜４９（１９９０））；ＨＮＦ４（スラデック（Sladek）ら、Genes＆Developme nt４：２３５３〜６５（１９９０））；レセプターのＣＯＵＰファミリー（たと えば、ミヤジ マ（Miyajima）ら、Nucleic Acids Res.１６：１１０５７〜７４（１９８８）、 およびワング（Wang）ら、Nature、３４０：１６３〜６６（１９８９））；ＣＯ ＵＰ様レセプターおよびＣＯＵＰ類似体、たとえばムロドジク（Mlodzik）ら（C ell、６０：２１１〜２４（１９９０））およびラディアス（Ladias）ら（Scien ce、２５１：５６１〜６５（１９９１））によって記載されたもの；ウルトラス ピラクル（ultraspiracle）レセプター（たとえば、オロ（Oro）ら、Nature、３ ４７：２９８〜３０１（１９９０））などが挙げられる。 本明細書において、「レセプターのステロイド／胸腺スーパーファミリーの成 員」（「核レセプター」または「細胞内レセプター」としても知られる）とは、 リガンド依存的な転写因子として働くホルモン結合性タンパク質をいう。さらに 、この分類には、特異的リガンドが未だ同定されていないレセプター（以下、「 オーファンレセプター」と称する）のステロイド／胸腺スーパーファミリーの同 定された成員が含まれる。細胞内レセプタースーパーファミリーのすべての成員 は、特定のＤＮＡ配列に結合する内在的能力を有する。結合後、標的遺伝子（す なわち、該特定のＤＮＡ配列に付随する遺伝子）の転写活性は該レセプターに結 合したリガンドの関数として調節される。また、ヘイマン（Heyman）ら、Cell、 ６８：３９７〜４０６（１９９２）、および1９９１年１２月１８日に出願した 継続中の米国特許出願第８０９,９８０号を参照のこと（全開示が参照のため本 明細書に引用される）。 リガンドであるレチノイン酸とそのレセプターによる遺伝子発現の調節は、細 胞培養中の再構成システムにより調べることができる。かかるシステムを用い、 レチノイドレセプターサブタイプＲＡＲα、ＲＡＲβ、ＲＡＲγ、ＲＸＲα、Ｒ ＸＲβ、およびＲＸＲγとの相互反応について本発明の合成レチノイド化合物を 評価した。 リガンド依存性転写制御を再構成するシステム（エバンス（Evans）ら、Scien ce、２４０：８８９〜９５（１９８８）によって開発された）を「コトランスフ ェクション」または「シス−トランス」アッセイと称する。このアッセイは、米 国特許第４,９８１,７８４号および同第５,０７１,７７３号明細書にさらに詳細 に記載されて いる（参照のため本明細書に引用する）。また、ヘイマンら、Cell、６８：３９ ７〜４０６（１９９２）を参照のこと。このコトランスフェクションアッセイに より、細胞内レセプターによって開始される転写応答を化合物が調節する能力を 評価するための機構が得られる。コトランスフェクションアッセイはホルモンま たはリガンド活性をモニターする機能的な迅速なアッセイであり、インビボシス テムを良好に予測することができ、疾患状態を治療するうえでの該リガンドの薬 理学的効能および有用性を定量するのに用いることができる。バーガー（Berger ）ら、J.Steroid Bjochem Molec.Biol.、４１：７３３〜３８（１９９２）。 簡単に説明すると、コトランスフェクションアッセイには、レチノイドレセプ ターに関して陰性の哺乳動物細胞バックグラウンド中に２つのプラスミドを一過 性のトランスフェクションによって導入することが含まれる。第一のプラスミド にはレチノイドレセブターｃＤＮＡが含まれ、コードレセプターの構成的発現を 指令する。第二のプラスミドは、容易に定量可能なタンパク質、たとえば蛍ルシ フェラーゼやクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）をコ ードするｃＤＮＡを、レチノイン酸応答要素を含有するプロモーターの制御下に 含んでおり、これによって該リポーターの転写へのレチノイド依存性が付与され る。このコトランスフェクションアッセイにおいて、すべてのレチノイドレセブ ターは全トランスレチノイン酸に同様の仕方で応答する。このアッセイは、個々 のレチノイドレセプターサブタイプと相互作用するリガンドとしてのレチノイン 酸および合成レチノイドの効力および有効性を正確に測定するのに用いることが できる。 従って、このコトランスフェクションアッセイを用いて本発明の合成レチノイ ド化合物とレチノイドレセプターサブタイプとの相互作用を評価した。その際、 ＣＶ−１細胞をレチノイドレセプターサブタイプの一つ、リポーター構築物、お よびトランスフェクション効率のために応答を標準化するのを可能にする内部コ ントロールでコトランスフェクションした。以下の実施例で説明する。実施例５９ レチノイド ： 全トランスレチノイン酸（ＲＡ）および１３−シス−レチノイン酸（１３−シ ス−ＲＡ）はシグマから得た。９−シス−レチノイン酸（９−シス−ＲＡ）はヘ イマンら、Cell、６８：３９７〜４０６（１９９２）の記載に従って合成した。 レチノイドの純度は、逆相高速液体クロマトグラフィーにより９９％以上のもの として確立された。レチノイドは、転写活性化アッセイに使用するためジメチル スルホキシド中に溶解した。プラスミド ： コトランスフェクションアッセイに使用するレセプター発現ベクターは、すで に記載されている（ｐＲＳｈＲＡＲ−α：ジゲールら（１９８７）；ｐＲＳｈＲ ＡＲ−βおよびｐＲＳｈＲＡＲ−γ：イシカワ（Ishikawa）ら（１９９０）；ｐ ＲＳｈＲＸＲ−α：マンゲルスドルフら（１９９０）；ｐＲＳｍＲＸＲ−βおよ びｐＲＳｍＲＸＲ−γ：マンゲルスドルフら、Genes＆Devel.、６：３２９〜４ ４（１９９２））。２コピーのＴＲＥ−パリンドローム応答要素５'−ＴＣＡＧ ＧＴＣＡＴＧＡＣＣＴＧＡ−３'（ウメソノ（Umesono）ら、Nature、３３６：２ ６２〜６５（１９８８））を含む基本的リポータープラスミドΔ−ＭＴＶ−ＬＵ Ｃ（ホレンバーグ（Hollenberg）およびエバンス、Cell、５５：８９９〜９０６ （１９８８））をＲＡＲのトランスフェクションに用い、ＲＸＲＥ（レチノイド Ｘレセプター応答要素（マンゲルスドルフら、Cell、６６：５５５〜６１（１９ ９１）））を含有するＣＲＢＰＩＩＦＫＬＵＣをＲＸＲのトランスフェクション に用いた。ＣＶ−１細胞中でのコトランスフェクションアッセイ ： サルの腎臓細胞株であるＣＶ−１をシス−トランスアッセイに用いた。細胞を ２つのプラスミドでトランスフェクションした。トランス−ベクターは、これら 細胞（通常、該レセプタータンパク質を発現しない）においてレチノイドレセプ ターの効率的な産生を可能とした。シス−ベクターは、レチノイド応答要素、す なわちＲＡＲＥまたはＲＸＲＥに結合した容易にアッセイ可能な遺伝子産物（こ の場合、蛍ルシフェラーゼ）を含む。レチノイン酸または適当な合成レチノイド を添加するとレチノイド＝ＲＡＲまたはレチノイド−ＲＸＲ複合体が生成し、こ れがルシフェラーゼ遺伝子の発現を活性化し、細胞抽出物から光が放射されるこ と になる。ルシフェラーゼ活性のレベルは、レチノイド−レセプター複合体が遺伝 子発現を活性化する有効性に正比例する。この高感度で再現性のあるコトランス フェクション法により、異なるレセプターイソ型と相互作用するレチノイドの同 定が可能となる。 １０％活性炭樹脂処理した（charcoal resin−stripped）ウシ胎仔血清を添加 したＤＭＥＭ中で細胞を培養し、９６−ウエルプレート中で実験を行った。１０ ｎｇのｐＲＳ（ラウスサルコーマウイルスプロモーター）レセプター−発現プラ スミドベクター、５０ｎｇのリポータールシフェラーゼ（ＬＵＣ）プラスミド、 内部コントロールとしての５０ｎｇのｐＲＳβ−ＧＡＬ（β−ガラクトシダーゼ ）、および９０ｎｇの担体プラスミド、ｐＧＥＭを用い、リン酸カルシウム法（ ウメソノおよびエバンス、Cell、５７：１１３９〜４６（１９８９）およびバー ガーら、J.Steroid Biochem.Molec.Biol.、４１：７３３〜３８（１９９２）） によってプラスミドを一過性にトランスフェクションした。細胞を６時間トラン スフェクションし、ついで洗浄して沈殿を除去した。ついで、細胞をレチノイド とともに、またはレチノイドなしで３６時間インキュベートした。トランスフェ クション後、その後のすべての工程はベックマンバイオメク自動ワークステーシ ョン（Beckman Biomek Automated Workstation）で行った。細胞抽出物を調製し 、ついでバーガーら（１９９２）の記載に従ってルシフェラーゼおよびβ−ガラ クトシダーゼ活性についてアッセイした。すべての測定を２つの独立に行った実 験で３回行い、β−ガラクトシダーゼを内部コントロールとして用いることによ ってトランスフェクション効率を標準化した。レチノイド活性を全トランスレチ ノイン酸の活性に対して標準化し、有効性（ＥＣ５０）（観察された最大応答の ５０％を生成するのに必要なレチノイドの濃度）および効力（％）（１０^-5Ｍに おける全トランスレチノイン酸の最大応答と比較した観察された最大応答）とし て表した。得られたデータは、少なくとも４つの独立した実験の平均である。５ ％未満の効力値は、０％のハックグラウンドと統計的に異なるものではない。１ ０^-5Ｍの濃度で２０％未満の効力を有する化合物は不活性であるとみなされる。 一層高い濃度（たとえば、１０^-4Ｍなど）では、これら化合物は一般に細胞に対 して毒性であり、それゆえ、 本明細書の表および図では１０^-5Ｍにおける最大効力を報告してある。 上記合成レチノイド化合物である３−メチル−ＴＴＮＣＢについて、レチノイ ドレセプターによって媒体される遺伝子発現を制御する能力を評価した。図１に 示すように、この化合物はＲＸＲサブファミリーの成員、すなわちＲＸＲα、Ｒ ＸＲβ、およびＲＸＲγを活性化することができるが、ＲＡＲサブファミリーの 成員、すなわちＲＡＲα、ＲＡＲβ、およびＲＡＲγに対しては明らかに有意の 活性を有しない。参照のため全トランスレチノイン酸（図２）および９−シス− レチノイン酸（図３）を用いたアッセイを行ったところ、これらレチノイン酸イ ソ型はＲＡＲおよびＲＸＲの両サブファミリーを活性化することが示された。 下記表にまとめて示すように、有効性および効力を３−メチル−ＴＴＮＣＢ化 合物について計算した。参照のため、９−シス−レチノイン酸のデータも併せて 示す。 表１のデータに示すように、３−メチル−ＴＴＮＣＢは容易に、しかも低濃度 でＲＸＲを活性化する。さらに、３−メチル−ＴＴＮＣＢは、ＲＡＲを活性化す るために遙かに高濃度を必要とする点で、ＲＡＲに比べてＲＸＲの一層強力なア クチベーターであり、ＲＡＲに比べてＲＸＲを優先的に活性化する。対照的に、 同様に表１に示すように、９−シス−レチノイン酸はＲＸＲを優先的に活性化す ることはない。むしろ、９−シス−レチノイン酸は、ＲＸＲβおよびＲＸＲγイ ソ型に比べてＲＡＲβおよびＲＡＲγイソ型を一層低濃度で一層容易に活性化し 、ＲＸＲαイソ型と比較した場合にＲＡＲαイソ型に対して実質的に同じ（測定 の正確さの範囲内で）活性を有する。 ９−シス−レチノイン酸を含有すると報告された抽出物は、以前には、ＲＡＲ αの誘発に比べてＲＸＲαの誘発において少なくとも１０倍強力であることが報 告されている（ヘイマンら、Cell、６８：３９７、３９９（１９９２年１月２４ 日））。現在利用できるデータは、上記に示したように、９−シス−レチノイン 酸はＲＡＲと比較してＲＸＲを優先的に活性化するわけではない。本発明の化合 物はＲＡＲに比較してＲＸＲを優先的に活性化するものてあり、好ましくはＲＡ Ｒに比べてＲＸＲのアクチベーターとして少なくとも３倍強力である。 有効性および効力を、下記表２にまとめて示すように、３−メチル−ＴＴＮＥ Ｂ、３−ブロモ−ＴＴＮＥＢ、３−メチル−ＴＴＮＣＨＢＰ、３−メチル−ＴＴ ＮＥＨＢＰ、ＴＰＮＥＰ、およびＴＰＮＣＰ化合物についても計算した。 表２のデータに示すように、３−メチル−ＴＴＮＥＢ、３−ブロモ−ＴＴＮＥ Ｂ、３−メチル−ＴＴＮＣＨＢＰ、３−メチル−ＴＴＮＥＨＢＰ、ＴＰＮＥＰ、 およびＴＰＮＣＰは、それぞれ、容易かつ優先的にＲＸＲを活性化し、ＲＡＲの アクチベーターとしてよりもＲＸＲのアクチベーターとして一層強力である。Ｒ ＸＲに対するものと比較してＲＡＲに対してこれら化合物の活性が減少すること はまた、図４〜７においてこれら化合物のうちの幾つかについて示してある。 ｎ−アルキルシクロヘキセニルノナテトラン酸誘導体化合物７４、７５および ７７の有効性および効力を下記表３に、化合物１００、１０４、１１０、１２３ および１２８の有効性および効力を表３Ａに示す。示すように、これら化合物も またＲＡＲと比較してＲＸＲを優先的に活性化する。これら化合物の他の幾何異 性仲もまた、この同じ活性を示すことがわかっている。 レチノイドＸレセブターに対する本発明の化合物の選択的な活性は、他の公知 化合物によっては示されていない。たとえば、米国特許第４,８３３,２４０号（ マイグナン（Maignan）ら）に記載されている化合物は構造的に本発明の化合物 に類似しているが、３−位に官能基（たとえば、メチル、エチル、イソプロピル 、ブロモ、クロロなど）を欠いている。かかる化合物は殆どまたは全く有効性を 有せず、ＲＸＲに対する選択性を欠く。 たとえば、米国特許第４,８３３,２４０号（マイグナンら）の代表的化合物を 本発明の化合物である３−メチル−ＴＴＮＣＢとともに以下に示す。 マイグノンの化合物および３−メチル−ＴＴＮＣＢの有効性および効力を以下 にまとめて示す。 示したように、マイグノンの化合物は実質的に不活性であり、ＲＸＲに対して 選択性を示さない。対照的に、３−メチル−ＴＴＮＣＢなどの本発明の化合物は ３−位に置換基を有しており、ＲＸＲの強力なアクチベーターであり、表１（並 びに表２、３および３Ａ）に示し上記で記載したように予期しないＲＸＲ選択性 を示す。 表１、２、３および３Ａに例示したようなレチノイドレセプターイソ型の全部 にではなくその幾つかに優先的に作用する合成レチノイドリガンドは、医薬製剤 の形態で、現在用いられているレチノイドに比べて高い治療指数および一層良好 な副作用プロフィールを有する医薬を提供することが期待される。たとえば、本 発明の化合物は、従来の公知レチノイドに比べて皮膚に対する刺激が穏やかであ ることが観察されている。 本発明のレチノイド化合物は、角化疾患、すなわち分化／増殖などのある種の 皮膚疾患状態の治療に有用である。これら化合物の活性を測定するための標準ア ッセイは、トランスグルタミナーゼの酵素活性の測定である。これは、レチノイ ドの抗増殖作用の測定手段である。レチノイドは分化の経路を抑制することが示 されており、このことは、トランスグルタミナーゼなどの偏平上皮細胞表現型の 発現に付随する幾つかの生化学的マーカーの減少によって示される（ユスパ（Yu spa）ら、Cancer Research、４３：５７０７〜１２（１９８３））。図８からわ かるように、３−メチル−ＴＴＮＣＢ化合物はトランスグルタミナーゼ活性を抑 制することができ、１×１０^-7Ｍにて該酵素活性の５０％を抑制する。 本発明のレチノイド化合物はインビトロ試験において、細胞増殖を起こす一揃 いの癌遺伝子であるＡＰ−１活性を阻害（または拮抗する）ことが示された。多 くの増殖異常は癌遺伝子／癌遺伝子活性化の結果によるものであるため、ＡＰ− １癌遺伝子経路を阻害する化合物は、癌、炎症性疾患、乾癬等を含む増殖異常を 伴う疾患を治療するのに用いることができる。たとえば、化合物３−メチル−Ｔ ＴＮＥＢをコトランスフェクションアッセイを用いて評価した。該アッセイにお いて、構成的プロモーターの制御下でＲＸＲαを発現するプラスミド、およびＡ Ｐ−１応答要素を含む条件的プロモーター（コラーゲナーゼ）の制御下でリポー ター酵素ルシフェラーセを発現するプラスミドとでヒーラ細胞をコトランスフェ クションした。たとえば、エンジェル（Angel）ら、Mol.Cell.Biol.、７：２２ ５６（１９８７）；ラフィアチス（Lafyatis）ら、Mol.Endocrinol.、４：９７ ３（１９９０）。ＡＰ−１活性化の後、アッセイ結果は、ＲＸＲαを介した３− メチル−ＴＴＮＥＢ化合物によるＡＰ−１活性の拮抗を用量に依存した仕方で示 した。本発明の他の化合物もＡＰ−１活性に対して同様の拮抗を示した。これら 結果は、細胞増殖を制限し過増殖を伴う疾患を治療するための抗増殖剤として、 ３−メチルＴＴＮＥＢなどのＲＸＲ選択性化合物を用いることができることを示 している。 本発明の化合物はまた、クリグマン（Kligman）ら（J.of Inves.Derm.、７３ ：３５４〜５８（１９７９））およびメジック（Mezick）ら（J.of Inves.Derm. 、８３：１１０〜１３（１９８４））に記載されたリノ（Rhino）マウスに対す る試験において良好なコメド溶解活性を示した。リノマウスに対する試験は、コ メド溶解剤をスクリーニングするためのモデルである。３−メチル−ＴＴＮＣＢ レチノイド化合物の活性並びに９−シスおよび全トランスレチノイン酸の活性を 図９に示す。３−メチル−ＴＴＮＣＢの０.１％溶液は、小のうの直径を約５０ ％抑制することができる。３−メチル−ＴＴＮＣＢはまた、９−シスまたは全ト ランスレチノイン酸に比べてリノマウスの皮膚に対する刺激性が低いことも観察 された。 コトランスフェクションアッセイにより、化合物がレチノイドレセプターに依 存した仕方で遺伝子発現を調節する能力を調べることが可能となる。本発明の化 合物がこれらレセプターと直接相互作用する能力を調べるため、本発明者らは６ つのすべてのレチノイドレセプターのリガンド結合能を調べた。これらレセプタ ーはバクロウイルス発現系を用いて発現され、その際、本発明者らはＲＸＲαが ９−シス−レチノイン酸に高親和性で結合することを示した（ヘイマンら、Cell 、６８：３９７（１９９２））。バクロウイルス系および哺乳動物系で発現され たレセプターの結合パラメーターは本質的に同じである。 本発明の合成レチノイドを放射性リガンド置換アッセイにおいても試験した。 種々のレセプターイソ型への結合に対して種々の合成レチノイドが放射性標識し たレチノイン酸と競合する能力を試験することにより、これら化合物がレセプタ ーと直接相互作用する能力を調べることができ、レセプター自体の相対的解離定 数を決定することができる。これはコトランスフェクションアッセイの重要な補 助分析である。というのは、コトランスフェクションアッセイで測定されるもの とは異なるレチノイト活性の特性／決定因を検出することができるからである。 これら２つのアッセイ系における決定因／差異には以下のものが挙げられる：（ １）被験化合物の活性化されるまたは不活化される代謝的変化、（２）血清タン パク質への結合（被験化合物の遊離の濃度やその他の特性を変化させ得る）、（ ３）被験化合物における細胞透過性の違い、（４）レセプタータンパク質に対す る被験化合物の親和性、すなわちＫｄにおける内在性の差異を直接測定すること ができること、および（５）被験化合物が結合した後にレセプターに生じるコン ホメーション変化であって、これはリポーター遺伝子発現に対する影響に反映さ れる；（すなわち、レセプター活性化の機能的測定）。 ３−メチル−ＴＴＮＣＢ化合物はＲＸＲに結合した³Ｈ−９−シス−レチノイ ン酸を置換することができるが、ＲＡＲに結合した放射性標識リガンドを置換す ることはできない。このことは３−メチル−ＴＴＮＣＢ化合物がＲＡＲに比べて ＲＸＲに優先的に結合することを示しており、これはＲＸＲに選択的なリガンド に期待される特性である。Ｋｄ値をクレング−プルソフ（Cleng−Prusoff）式を 適用することにより決定した。これら値は、データのログ−ロジット（log−log it）プロットからグラフ上で得られたＩＣ₅₀値の測定に基づいていた。 ウェックスラー（Wecksler）およびノーマン（Norman）のAnal.Bjochem.、９ ２：３１４〜２３（１９７９）に記載された方法を用い、種々の化合物について 結合データを得た。結果を下記表４に示す。 表４の化合物は、すでに記載したように、コトランスフェクションアッセイを 用いた場合にＲＸＲを容易かつ優先的に活性化すること、およびＲＡＲに対する よりもＲＸＲに対して一層強力なアクチベーターであることが示された。表４の 結合結果もまた、これら化合物がＲＡＲよりもＲＸＲに優先的に結合することを 示している。これら化合物のリガンド結合特性とＲＸＲサブファミリーの成員を 選択的に調節する能力とを一緒にすると、独特の生物学的特性を有する化合物の クラスの同定が示される。結合特性およびとりわけ転写活性化アッセイは、化合 物の薬理活性の良好な予測手段である（バーガーら（１９９２））。 コトランスフェクションアッセイは、影響を受けるかどうか調べようとする特 定の遺伝子ブロセスに対するアゴニストかまたはアンタゴニストのいずれかとし ての試験しようとするリガンドの機能的評価を与え、インビボ薬理学の予測手段 であると認識されている（バーガーら（１９９２））。コトランスフェクション アッセイによって決定されるように、他の細胞内レセプターと有意に反応しない リガンドは薬理学的な副作用を殆ど引き起こさないことが期待される。コトラン スフェクションアッセイは生きた細胞内で行うので、リガンドの評価は、治療効 果が期待される濃度での候補化合物の潜在的毒性を早期に示すものである。 本発明に従ってレチノイドレセプターによって調節されうるプロセスとしては 、インビトロでの細胞分化、四肢の形態形成を含む形態形成プロセスの制御、細 胞性レチノール結合性タンパク質（ＣＲＢＰ）の制御などが挙げられる。当業者 には容易に認識されるように、リガンドをレチノイドＸレセプターに適用するこ とが できることにより、まず第一に、レチノイドＸレセプターサブファミリーの成員 によって制御されるプロセスを解明することが可能となる。加えて、これらレセ プターに対するアンタゴニストを同定するためのアッセイを開発することが可能 となる。 本発明に従ってレチノイドレセプターによって調節されうるプロセスとして、 さらに、脂質代謝のインビボ調節；皮膚関連プロセスのインビボ調節（たとえば 、アクネ、乾癬、老化、しわ等）；プログラムされた細胞死（アポト−シス）の インビボ調節；たとえば、急性前骨髄球性白血病、乳癌、前立腺癌、肺癌、呼吸 消化経路の癌、皮膚癌、膀胱癌、および肉腫において生じるような悪性の細胞成 長のインビボ調節；口内白斑症などで生じるような前癌性障害のインビボ調節； 慢性関節リウマチなどの自己免疫疾患のインビボ調節；脂肪酸代謝のインビボ調 節などが挙げられる。かかる適用は、催奇形性作用、皮膚刺激、粘膜の乾燥、脂 質障害などの望ましくない副作用を減少させながら種々の生物学的プロセスの調 節を可能とすることが期待できる。インビボの適用は、たとえば、ヒト、齧歯類 、ヒツジ、ブタ、ウシなどの広範囲の被験者に用いることができる。 たとえば、上記脂質代謝のインビボ調節についていうと、アポリポタンパクＡ −１（「ａｐｏＡ１」）は、血漿の高密度リポタンパク（ＨＤＬ）コレステロー ルの主要なタンパク質成分である。ヒトのＨＤＬの循環レベルは、アテローム性 冠状血管疾患（ＡＳＣＶＤ）（米国における最も高い罹患率および死亡率を示す ）のリスクと逆の相関関係を示し、ＨＤＬコレステロールが１％減少するごとに ＡＳＣＶＤは３〜４％増加する。ゴードン（Gordon）ら、New Engl.J.Med.、３ ２１：１３１１（１９８９）。現在のところＨＤＬコレステロールを増加させる 良好な治療法はないが、ａｐｏＡ１の合成の制御はＨＤＬコレステロールの血漿 濃度に影響を与え、ＡＳＣＶＤのリスクを減少させるのに用いることが可能であ ると期待できる。リューベン（Reuben）ら、Nature、３５３：２６５（１９９１ ）。ａｐｏＡ１の転写の制御は細胞内レセブタースーパーファミリーの成員によ って制御されていること、さらに、ａｐｏＡ１遺伝子転写開始部位「Ａ」はレチ ノイドＸレセプターに応答する高度に選択的なレチノイン酸応答要素であること が確立されてい る。ロットマン（Rottman）ら、Mol.Cell.Biol.、１１：３８１４〜２０（１９ ９１）。ＲＸＲはＡＲＰ−１やＣＯＵＰ−ＴＦなどのトランスリプレッサーおよ びＨＮＦ−４などのトランスアクチベーターとヘテロダイマーを形成することが でき、ＲＸＲ応答要素はａｐｏＡ１プロモーター内に存在するので、レチノイン 酸レセプターのＲＸＲファミリーの成員を選択的に活性化するレチノイドまたは リガンドはａｐｏＡ１転写を制御する。以下の実施例において示すように、本発 明者らは、ＲＸＲに対して選択的な活性を有する本発明のリガンドをａｐｏＡ１ ／ＨＤＬコレステロールの調節および血漿ＨＤＬレベルの有意の上昇に用いるこ とができることをインビボ研究で示した。実施例６０ 雄のスプラーグ−ドーリーラット（１６０〜２００ｇ）をハーラン（Harlan） から入手した。動物を標準的な研究室の食餌（ハーラン／テクラッド（Teklad） ）で飼育し、環境制御した動物家屋中に入れ、午前６時から午後６時まで照明を 施した。オリーブ油中の懸濁液として調製した薬剤で動物を処理した。 ＲＸＲ活性化が血漿ａｐｏＡ１／ＨＤＬコレステロールを増加させることを確 認するため、最初の研究を行った。これには、ＲＡＲ選択性の化合物、全トラン スレチノイン酸、非選択性のＲＡＲ／ＲＸＲアゴニスト、９−シス−レチノイン 酸、および２つのＲＸＲ選択性剤、３−メチル−ＴＴＮＣＢまたは３−メチル− ＴＴＮＥＢのいずれかを４日間ラットに投与した。各薬剤を１００ｍｇ／ｋｇの 投与量にて腹腔内で投与した。陽性のコントロール群にはオリーブ油をビヒクル として投与した。最後の処理から２４時間後、ラットをＣＯ₂吸入により屠殺し 、０.１５％ＥＤＴＡ（０.１ｍｌ）を入れた管中に下大静脈から血液を採取し、 ４℃にて１５００×ｇで２０分間遠心分離にかけた。血漿を分離し、血漿全コレ ステロールおよび高密度リポタンパクコレステロール（ＨＤＬ−コレステロール ）を評価するために４℃で貯蔵した。 血漿全コレステロールの測定は、アボットＶＰバイクロマティックアナライザ ー（ＡＢＢＯＴＴ ＶＰ Bichromatic Analyzer）を用いたベーリンガーマンハイ ムダイアグノスティックスハイパーフォーマンスコレステロールメソッズ （Boeringer Mannheim Diagnostics High Performance Cholesterol Methods） により行った。ＨＤＬコレステロールの測定は、血漿のヘパリン−マンガン沈殿 によりＨＤＬ含有フラクションを調製した後に行った。このフラクション中のＨ ＤＬ−コレステロールをすでに記載したようにして推定した。他のリポタンパク の混入がないかどうか、全ＨＤＬ分離物についてアガロースゲル電気泳動により チェックした。 この試験の結果を図１０に示す。示すように、ＲＸＲ選択性の化合物を投与し たラットは、とりわけ３−メチル−ＴＴＮＥＢを投与した場合に、ＨＤＬレベル の実質的かつ統計的に有意の増加を示した。 ＲＸＲ選択性のリガンドである３−メチル−ＴＴＮＥＢが最も効果的であった ので、この薬剤を用い、０.３、１、３、６、１０、３０、１００または３００ ｍｇ／ｋｇ腹腔内（１.０ｍｌのオリーブ油中）または１、３、１０、３０、１ ００、３００ｍｇ／ｋｇ経口（１.０ｍｌのオリーブ油中）の投与量にてさらに ４日間実験を行った。薬理作用に対する耐性が生じるかどうかを決定するため、 １０、３０、または１００ｍｇ／ｋｇ３−メチル−ＴＴＮＥＢにてさらに３０日 間の経口試験を行った。３−メチル−ＴＴＮＥＢを種々の投与量にて４日間投与 したラットについて、３−メチル−ＴＴＮＥＢが投与量に依存した仕方でＨＤＬ −コレステロールの血漿濃度を増加させ、最も低濃度の０.３ｍｇ／ｋｇ腹腔内 でも有意の増加を生じることが観察された。最適有効投与量においては、３−メ チル−ＴＴＮＥＢは血漿ＨＤＬ−コレステロール濃度を５８ｍｇ／ｄｌから９５ ｍｇ／ｄｌに増加させた（６０％以上の増加）。全コレステロールの測定は、Ｈ ＤＬ−コレステロール画分の増加による増加を示した。トリグリセリドの測定は 、変化なしかまたはわずかな減少のいずれかを示した。３−メチル−ＴＴＮＥＢ を用いた３０日間の試験では、薬理作用に対する耐性の生成は示されなかった。 この試験は、腹腔内もしくは経口内の投与後に、ｔ−メチル−ＴＴＮＥＢが投 与量に依存した仕方でＨＤＬ−コレステロールの血漿濃度を増加させることを示 した。 循環しているａｐｏＡ１に対する経□投与した３−メチル−ＴＴＮＥＢの作用 についても調べた。雄のスプラーグ−ドーリーラットを３ｍｇ／ｋｇ体重の３− メチル−ＴＴＮＥＢで毎日、４日間処理した。血清試料を取り、ラットａｐｏＡ １に特異的な抗血清を用いたウエスタンブロットにより分析した。３−メチル− ＴＴＮＥＢの処理により、循環しているａｐｏＡ１レベルが有意に増加した。 これらの試験は、３−メチル−ＴＴＮＥＢなどのＲＸＲ特異的な化合物で処理 するとａｐｏＡ１／ＨＤＬコレステロールの血漿濃度が増加することを示してい る。かかる動物試験はヒトでの応答の容認された予測手段であるので、かかる化 合物をアテローム性動脈硬化症にかかっているかまたはその危険のある患者にお いてＨＤＬ−コレステロールを治療学的に増加させるのに用いることができると 期待される。 以下の実施例において記載するように、ａｐｏＡ１の転写の制御に対するＲＸ Ｒ−選択性リガンドの作用を示すため、本明細書にすでに記載したコトランスフ ェクションアッセイを用いてさらにインビトロ試験を行った。実施例６１ 本実施例は、ａｐｏＡ１遺伝子からのＲＸＲ応答要素（「Ａ」部位）を含む基 本プロモーターの制御下、リポーター分子（たとえば、ルシフェラーゼ）上のレ チノイドルセプターＲＡＲおよびＲＸＲの転写特性を調べるものである。種々の レセプターをコードするプラスミド構築物を、リポータープラスミドとともにヒ ト肝細胞株（ＨｅｐＧ−２）中にトランスフェクションした。リポータープラス ミドには、ＲＸＲに結合することが示されたａｐｏＡ１「Ａ」部位（転写開始部 位に対して−２１４〜−１９２）のマルチマーが含まれていた。ウィドム（Wido m）ら、Mol.Cell.Biol.１２：３３８０〜８９（１９９２）；ラディアス（Ladia s）およびカラサナシス（Karathanasis）、Science ２５１：５６１〜６５（１ ９９１）。トランスフェクション、処理、回収、およびアッセイ後、得られたデ ータを、トランスフェクション効率を制御するためにトランスフェクションした ベーターガラク卜シダーゼ活性に対して標準化した。得られた結果は、ＲＸＲ特 異的リガンドである３−メチル−ＴＴＮＣＢおよび３−メチル−ＴＴＮＥＢを用 いた系において濃度に依存した仕方での活性化を示し、ＲＸＲ特異的リガンドが ａｐｏＡ１遺伝 子からの「Ａ」部位を介して転写活性を制御しうることを示した。これら化合物 はトランスフェクションにＲＡＲを用いた場合には効果がなく、レセプター特異 性を示していた。ＲＸＲによる転写制御は、ホルモン応答要素の存在に依存して いた。 これらインビボおよびインビトロ試験は、本発明のＲｘＲ選択性の化合物がＡ ｐｏＡ１／ＨＤＬコレステロールを上昇させるのに用いることができ、関連する 心血管系疾患を治療するのに用いることができることを示している。 プログラムされた細胞死（アポトーシス）に関しては、本発明のレチノイド化 合物は白血病細胞および偏平上皮細胞癌腫を含む特定の細胞種にアポトーシスを 引き起こすことが示された。通常、細胞内では増殖、分化、および細胞死の細胞 プロセス間に絶妙な均衡が保たれており、この均衡に影響を与える化合物をある 種の癌を治療するために用いることができる。詳しくは、３−メチル−ＴＴＮＥ Ｂが急性前骨髄球性白血病細胞株、ＨＬ６０において分化を誘発し、増殖を抑制 し、アポトーシスを誘発する能力を調べた。細胞増殖をチミジン取り込みアッセ イ（シュリバスタブ（Shrivastav）ら、Cander Res.、４０：４４３８（１９８ ０））により測定したところ、３−メチル−ＴＴＮＥＢは細胞増殖に対して何ら 効果を有しないことがわかった。これは、チミジンの取り込みを抑制した全トラ ンスレチノイン酸とは対照的である。細胞がニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢ Ｔ）を還元する能力により細胞分化を測定したところ（ブライトマン（Breitman ）ら、Proc.Natl.Acad.Sci.７７：２９３６（１９８０））、３−メチル−ＴＴ ＮＥＢは過度の分化を引き起こさないことがわかった。３−メチル−ＴＴＮＥＢ によって媒体される分化のＥＣ₅₀は＞１０００μＭであったが、全トランスレチ ノイン酸では２.０μＭである。しかしながら、３−メチル−ＴＴＮＥＢは濃度 依存的な仕方でＨＬ６０細胞（マートー（Murtaugh）ら、J.Biol.Chem.２５８： １１０７４（１９８３））においてトランスグルタミナーゼ活性を誘発すること がわかったが、このことはアポトーシスすなわちプログラムされた細胞死と相関 関係を有するものである。さらに、ＤＮＡ断片化および形態学的変化による測定 でも、３−メチル−ＴＴＮＥＢがアポトーシスを引き起こしうることがわかった 。本発明の他のレ チノイド化合物も同様の結果を示し、同様の結果はまた偏平上皮細胞株およびＭ Ｅ１８０細胞、ヒト頚部癌などの他の細胞株でも示された。 これら結果は、３−メチル−ＴＴＮＥＢなどのＲＸＲ特異的化合物が、増殖の 抑制および分化の誘発に対する直接作用を最小限に抑えながらアポトーシスを誘 発することを示している。アポトーシスを誘発しうる化合物は癌の化学療法（た とえば、乳癌および前立腺癌への抗ホルモン療法）に有効であることが示されて いる。 対照的に、他の細胞種では、レチノイドは活性化により駆動されたＴ−細胞ア ポトーシスを抑制することが示され、９−シス−レチノイン酸は全トランスレチ ノイン酸に比べて約１０倍強力であった（アシュウエル（Ashwell）ら、Proceed ings National Academy of Science、Vol.９０、６１７０〜６１７４頁（１９９ ３））。これらデータは、この事象にＲＸＲが関与していることを暗示している 。それゆえ、レチノイドは、ある種の疾患（たとえば、ＡＩＤＳ）に伴うＴ−細 胞のアポトーシスを阻害および／または免疫調節するのに用いることができる。 驚くべきことに、ＲＸＲに対しては特異活性を有するがＲＡＲに対しては本質 的に活性を有しないリガンドを、ＲＡＲに対しては特異活性を有するがＲＸＲに 対しては特異活性を有しないリガンドと組み合わせて投与すると、各リガンド個 々では有意の応答を引き起こさない極めて低い投与量で細胞応答を引き起こすこ とがわかった。詳しくは、ミエローマ細胞株（ＲＰＭＩ ８２２６）の増殖に対 するＲＸＲ特異的リガンドおよびＲＡＲ特異的リガンドの濃度に関連した効果を 、チミジン取り込みアッセイを用いたインビトロ試験において試験した。このア ッセイは放射性標識したチミジンのＤＮＡ中への取り込みを調べるものであり、 ＤＮＡ中へのチミジンの取り込みを化合物が抑制する能力を測定することにより 細胞増殖を測定するものである（ブラッドリー（L.M.Bradley）、Selected Meth ods in Cellular Immunology 、１０.１章、２３５〜３８頁、ミシェルおよびシ イギ（Mishell ＆ Shiigi）（編）、フリーマン（Freeman ＆ Co.）、ニューヨ ーク、１９８０）。細胞増殖を抑制する化合物は、ある種の癌の治療に有用であ ることがよく知られている。 すでに示したように（表２）、３−メチル−ＴＴＮＥＢはＲＸＲサブファミリ ーの成員を活性化するがＲＡＲサブファミリーの成員に対しては有意の活性を有 しない。ミエローマ細胞の増殖に対する３−メチル−ＴＴＮＥＢの影響を調べる とチミジン取り込みの濃度に依存した抑制が示される。図１１に示すように、Ｉ Ｃ₅₀（最大応答の５０％抑制をもたらすのに必要な３−メチル−ＴＴＮＥＢの濃 度）は１０^-7Ｍである。図１１に示すように、１０^-8Ｍ未満の濃度は細胞増殖に 対して本質的に影響を及ぼさない。 化合物ＴＴＮＰＢはＲＡＲサブファミリーの成員を活性化するがＲＸＲサブフ ァミリーの成員に対しては有意の活性を有しないことがよくわかっている。この 化合物ＴＴＮＰＢを以下に示す。その活性を表５に示す。 細胞増殖に対するＴＴＮＰＢの効果を図１１に示す。ＴＴＮＰＢのＩＣ₅₀値は 約５×１０^-11Ｍであり、１０^-11Ｍ未満の濃度は本質的に細胞増殖に対して何ら 影響を及ぼさない。 しかしながら、３−メチル−ＴＴＮＥＢおよびＴＴＮＰＢが一緒に存在する場 合には、各化合物単独では実質的に抗増殖作用を示さないそれぞれの濃度にて、 これら２つの化合物の組み合わせが細胞増殖を有効に阻止することがわかった。 これら２つの化合物の組み合わせは、相加作用以上の効果、すなわち相乗効果を 示すように思われる。 たとえば、図１２に示すように、ＴＴＮＰＢが１０^-11Ｍの濃度で存在すると チミジンの取り込みが９％抑制される。しかしながら、これを１０^-8Ｍの濃度の ３−メチル−ＴＴＮＥＢ（細胞増殖に対して効果を有しない）と組み合わせると ４９％の抑制効果に大きく促進される。同様に、３−メチル−ＴＴＮＥＢの抑制 効果は、単独では効果を有しない濃度のＴＴＮＰＢの存在により大きく増加する ことがわかった。 ＴＴＮＰＢなどの化合物の毒性副作用は濃度に依存することがよく知られてい るので、かかるＲＡＲ特異的化合物とＲＸＲ特異的化合物とを組み合わせた結果 得られる相乗効果は一層低い有効投与量を可能とすることが期待され、それゆえ 毒性の副作用を低減させることが期待される。たとえば、癌の治療において、か かる２つの化合物を組み合わせて相対的に低投与量にて用いれば、これら化合物 を一層高い投与量で用いた場合に起こる望ましくない副作用を最小限に抑えなが ら所望の有効な効果を得ることができる。 コトランスフェクションアッセイを利用したインビトロでの試験もまた、この 同じ相乗効果を示した。たとえば、すでに記載したコトランスフェクションアッ セイを利用し、ＲＡＲαおよびＲＸＲα並びにＴＫＬＵＣの文脈中のＡｐｏＡ１ 応答要素「Ａ」部位からなるリポーターを用い（ラディアスおよびカラサナシス 、Science２５１：５６１〜６５（１９９１））、ＨＥＰＧ２細胞においてトラ ンスフェクションを行った。この試験において、１００ｎｇの所定レセプターを 用い、ＲＳＶプロモーターの量を一定に保持するための担体としてＲＳＶＣＡＴ を用いた。すべての化合物を１０^-7Ｍの最終濃度で加えた。ＲＸＲ特異的化合物 である３−メチル−ＴＴＮＥＢ（表２、上記）およびＲＡＲ特異的化合物である ＴＴＮＰＢ（表５、上記）を用いた。下記表６に示すように、各化合物を単独で 用いた場合 に達成される応答に比べてこれら２つの化合物の組み合わせを用いた場合には、 コトランスフェクションアッセイを用いて観察される相対的標準化応答もまた相 乗効果を示した。 上記から当業者には認識されるように、所定濃度におけるＲＡＲ選択性化合物 の生物学的応答は、ＲＸＲ選択性化合物と組み合わせることにより相乗的に促進 することができる。同様に、ＲＸＲ選択性化合物の生物学的応答はＲＡＲ選択性 化合物と組み合わせることにより促進することができる。それゆえ、各化合物を 単独で用いた場合に比べて低濃度にてＲＡＲ選択性化合物およびＲＸＲ選択性化 合物の組み合わせを用い、所望の生物学的応答を達成することが可能となる。か かるＲＡＲ選択性化合物とＲＸＲ選択性化合物との組み合わせにより得られる利 点としては、副作用を低減させながら所望の治療効果が達成できることである。 加えて、いずれかの薬剤単独では得られない新規効果をＲＡＲ選択性化合物とＲ ＸＲ選択性化合物との組み合わせにより達成することができる。 ＲＸＲ特異的化合物はまた、他のホルモン系の応答を相乗的に促進することが さらに示された。詳しくは、ベルオキシソーム増殖因子活性化レセプター（pero xisome proliferator−activated receptor）（ＰＰＡＲ）は、脂質ホメオスタ シスの調節において役割を果たす細胞内レセプタースーパーファミリーの成員で ある。ＰＰＡＲは、クロフィブリン酸（clofibric acid）やゲンフィブリゾール （gemfjbrizol）などの両親媒性カルボン酸によって活性化されることが示され ている。これら薬剤はペルオキシソーム増殖因子と呼ばれるが、ヒトにおいて低 脂肪血症剤として用いられている。ＲＸＲαおよびＰＰＡＲ発現プラスミドでト ラ ンスフェクションしたＨｅｐＧ２細胞に９−シス−レチノイン酸（ＲＡＲおよび ＲＸＲの両レセプターを活性化するレチノイドリガンド）およびクロフィブリン 酸を加えるとレセプター遺伝子が活性化されるが、該活性化は各リガンドで別々 に活性化したものの合計よりも大きかった（クリーワー（Kliewer）ら、Nature ３５８：７７１（１９９２））。同様に、上記２つのレセプターをＨｅｐＧ２細 胞中にコトランスフェクションした場合、下記表７に示すように、ＲＸＲ特異的 リガンド（３−メチル−ＴＴＮＥＢ）およびクロフィブリン酸の両者を添加する と標的リポーター遺伝子の活性化によって決定されるように相加応答以上の応答 をもたらすことがわかった。 同様の相乗効果は、ＲＸＲおよびＲＸＲ特異的リガンドおよびビタミンＤレセ プター（ＶＤＲ）およびその同族リガンドでも観察された。ホルモン応答要素を 含むＣＶ−１細胞にＲＸＲβおよびＶＤレセプターをコトランスフェクションし た場合、ＲＸＲ選択的３−メチル−ＴＴＮＣＢおよび１,２５−ジヒドロキシ− ビタミンＤ（１,２５−Ｄ）を添加すると、下記表８に示すように、個々のリガ ンドそれぞれで観察されるよりも大きな相加応答以上の応答が得られた。 上記に示すように、上記結果は、各ペアのレセプター（それぞれ、ＲＸＲα／ ＰＰＡＲおよびＲＸＲβ／ＶＤＲ）が各レセプターを特異的に活性化することが 知られているリガンドの存在下で相乗的応答を生成しうることを示している。こ れら結果は、２つの薬剤を組み合わせることによって単独の薬剤の応答が促進さ れ得ること、およびかかる薬剤を組み合わせて一層低い投与量で使用することに より匹敵しうる生物学的または治療学的応答を達成し得ることを示している。 ＲＸＲ特異的リガンドが、ＲＡＲリガンド、ＰＰＡＲリガンド、およびビタミ ンＤリガンドとともに相乗的に作用しうるという観察は、ＲＸＲ特異的リガンド が単独の治療剤としてのみならず組み合わせ療法においても有用であり、該ＲＸ Ｒ特異的リガンドを添加することにより生物学的または治療学的応答を促進する ことができることを示している。かかる組み合わせ療法はまた、主剤を一層低投 与量で用いることによって主剤による副作用を減少させることができるという利 点も得られる。たとえば、皮膚疾患（アクネ、乾癬）、過増殖性疾患（良性およ び悪性の癌）およびカルシウムホメオスタシスの疾患を含む種々の疾患の治療の ためにピタミンＤまたは関連するビタミンＤレセプターリガンドをＲＸＲ選択的 化合物とともに用いることにより、ビタミンＤ療法単独に伴う副作用を低減させ ることができる。 別の例として、本発明のＲＸＲ特異的化合物はインビトロでインターフェロン などの細胞増殖に影響を与える化合物とともに相乗的に作用することが示された 。詳しくは、標準細胞培養手順を用い、２つのヒト腫瘍細胞株（ＭＥ１８０、偏 平上皮細胞癌腫、およびＲＰＭＩ１８２２６、多発性骨髄腫）の増殖特性を、化 合物３−メチル−ＴＴＮＥＢ単独の存在下およびインターフェロンα２ｂとの組 み合わせでモニターした。これら細胞の増殖に対する影響を、細胞数を評価する ことにより、またＲＰＭＩ１８２２６細胞株については半固体培地中での増殖を 評価することによりモニターした。３−メチル−ＴＴＮＥＢおよびインターフェ ロンα２ｂの両者とも濃度に依存した仕方で細胞増殖を抑制し、各単独では細胞 増殖に有意の低減をもたらすことがわかった。加えて、これら細胞を両化合物で 処理すると、細胞増殖の低減において相加効果または相加効果以上の効果が観察 された。抗増殖剤および／または細胞周期調節剤（たとえば、メトトレキセート 、 フルオロウラシル（５ＦＵ、ＡＲＡ−Ｃ等））を含む他の化学療法剤をＲＸＲ特 異的化合物と組み合わせて処理しても同様の結果を生じることが期待される。促 進された抗増殖効果は、偏平上皮細胞その他の癌腫などの増殖性疾患の治療にお ける治療学的投与量の低減を可能とすることが期待できる。 加えて、組み合わせ療法は、低減した副作用／毒性作用とともに匹敵しうる効 果を達成するためにこれら化合物を一層低い投与量で使用することが可能となり 、それによって治療の治療指数を高めることができる。治療指数は、化合物の毒 性に対する効力の比として定義される。 ＲＸＲは細胞内レセプタースーパーファミリーの種々の成員とヘテロダイマー を形成することがわかっているので、ＲＸＲ選択的リガンドを使用して得られた 相乗的応答が、それがヘテロダイマーを形成する他のレセプターを用いても得ら れることが期侍される。これらには、上記のようにＰＰＡＲ、ＲＡＲ、ビタミン Ｄ、胸腺ホルモンレセプター、ＨＮＦ４、レセプターのＣＯＵＰファミリー、お よびレセプターの細胞内スーパーファミリーの未だ未同定の他の成員が挙げられ る。 当業者には理解されるであろうように、上記に開示した化合物は、選択的なレ チノイドレセプター活性を望む場合、および他の関連する細胞内レセプターとの 交差反応性を最小限に抑えたい場合に、薬理学的応用に容易に利用することがで きる。本発明のインビボでの応用としては、哺乳動物、とりわけヒトに開示化合 物を投与することが挙げられる。 本発明の化合物は、比較的脂肪に可溶性または脂肪親和性であり、原形質膜を 通って受動拡散により細胞中に侵入することのできる小さな分子である。それゆ え、これらリガンドは、経口および注射による投与並びに局所投与に充分適して いる。投与されると、これらリガンドはレチノイドＸレセプターを選択的に活性 化し、それによってこれらレセプターにより媒体されるプロセスを選択的に調節 する。 本発明の医薬組成物は、本発明の活性化合物または該化合物の混合物を許容さ れた手順に従って非毒性の医薬担体とともに、哺乳動物とりわけヒト患者におい て所望の薬動学的活性を得るのに充分な非毒性量にて混合することにより、通常 の投与単位剤型にて調製される。好ましくは、該組成物は、約５ｍｇ〜約５００ ｍｇの活性成分／投与単位から選ばれた活性だが非毒性の量で活性成分を含む。 この量は、所望とする特定の生物学的活性および患者の状態に依存する。 使用する医薬担体またはビヒクルは、たとえば固体であっても液体であっても よい。種々の剤型を用いることができる。従って、固体の担体を用いる場合には 、調製物を単純に粉砕し、油中で微粉とし、錠剤化し、ハードゼラチン中または 腸溶コーティングカプセル中に微粉化粉末またはペレットの形状で入れ、または トローチ、ロゼンジまたは坐剤の剤型とすることができる。液体の担体を用いる 場合には、調製物をアンプルなどの液剤の形態、または水性または非水性の液体 懸濁剤とすることができる。局所投与の場合は、軟膏やクリームなどの低刺激性 の加湿ベースを用いて活性成分を調合することができる。適当な軟膏ベースの例 としては、ワセリン、ワセリンと揮発性のシリコーン、ラノリン、およびユーセ リン（Eucerin）（バイエルスドルフ（Beiersdorf））などの油中水懸濁液が挙 げられる。適当なクリームベースの例としては、ニベアクリーム（Nivea Cream ）（バイエルスドルフ）、コールドクリーム（ＵＳＰ）、パーポスクリーム（Pu rpose Cream）（ジョンソン＆ジョンソン）、親水性軟膏（ＵＳＰ）、およびル ブリダーム（Lubriderm）（ワーナー−ランバート（Warner−Lambert））が挙げ られる。 以下の実施例は、医薬組成物の調合の例示である。実施例６２ 下記成分を用いてハードゼラチンカプセルを調製する。 量（ｍｇ／カプセル） ３−メチル−ＴＴＮＣＢ １４０ デンブン、乾燥 １００ ステアリン酸マグネシウム １０ 合計 ２５０ｍｇ 上記成分を混合し、ハードゼラチンカブセル中に２５０ｍｇの量で充填する。実施例６３ 下記成分を用いて錠剤を調製する。 量（ｍｇ／錠剤） ３−メチル−ＴＴＮＣＢ １４０ セルロース、微結晶 ２００ 二酸化ケイ素、発煙 １０ ステアリン酸 １０ 合計 ３６０ｍｇ 上記成分を混合し、圧錠して、それぞれ３６０ｍｇの重さの錠剤を調製した。実施例６４ それぞれ６０ｍｇの活性成分を含有する錠剤を以下のようにして調製する。 量（ｍｇ／錠剤） ３−メチル−ＴＴＮＣＢ ６０ デンプン ４５ セルロース、微結晶 ３５ ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ） ４ （水中の１０％溶液として） カルボキシメチルデンプンナトリウム（ＳＣＭＳ） ４.５ テアリン酸マグネシウム ０.５ タルク １.０ 合計 １５０ 活性成分、デンプン、およびセルロースをＮｏ.４５メッシュＵ.Ｓ.シーブに 通し、充分に混合する。得られた粉末にＰＶＰの溶液を混合し、ついでこれをＮ ｏ.１４メッシュＵ.Ｓ.シーブに通す。かくして得られた顆粒を５０℃で乾燥さ せ、Ｎｏ.１８メッシュＵ.Ｓ.シーブに通す。ＳＣＭＳ、ステアリン酸マグネシ ウム、およびタルクを前以てＮｏ.６０メッシュＵ.Ｓ.シーブに通し、ついで上 記顆粒に加え、これを混合後、打錠機で圧錠して重さがそれぞれ１５０ｍｇの錠 剤を得る。実施例６５ それそれ２２５ｍｇの活性成分を含有する坐剤を以下のようにして調製するこ とができる。 ３−メチル−ＴＴＮＣＢ ２２５ｍｇ 飽和脂肪酸グリセリド ２,０００ｍｇ 合計 ２,２２５ｍｇ 活性成分をＮｏ.６０メッシュＵ.Ｓ.シーブに通し、最小限必要な熱を用いて 前以て溶融させた飽和脂肪酸グリセリド中に懸濁する。ついで、混合物を通常の ２ｇ容量の坐剤型枠中に注ぎ、冷却する。実施例６６ 静脈内調合物を以下のようにして調製することができる。 ３−メチル−ＴＴＮＣＢ １００ｍｇ 等張食塩水 １,０００ｍｌ グリセリン １００ｍｌ 目的化合物をグリセリン中に溶解し、ついで溶液を等張食塩水でゆっくりと希 釈する。ついで、上記成分の溶液を１ｍｌ／分の速度で患者に静脈内投与する。 本発明の化合物はまた、標識したときに、ＲＸＲの存在を決定するためのアッ セイに使用するためのリガントとして有用性を有する。これら化合物は、ＲＸＲ サブファミリーの成員に選択的に結合できる能力ゆえに特に有用であり、それゆ え、他の関連するレセプターの存在下でＲＸＲイソ型の存在を決定するために用 いることができる。 レチノイドＸレセプターに対する本発明の化合物の選択的特異性のため、これ ら化合物はまたレチノイドＸレセプターの試料をインビトロで精製するのに用い ることもできる。かかる精製は、レチノイドＸレセプターを含有する試料を開示 の１または２以上の２環式誘導体化合物と混合して該化合物（リガンド）がレセ プターに結合するようにし、ついで結合したリガンド／レセプター複合体を当業 者に知られた分離法により分離することによって行うことができる。これら分離 法 としては、とりわけ、カラム分離、濾過、遠心分離、標識化と物理的分離、およ び抗体との複合体形成が挙げられる。 好ましい態様を記載および説明したが、本発明の範囲から逸脱することなく種 々の置換および変更を行うことができる。従って、本発明は例示によって記載さ れたものであってこれらに限定されるものでないことを理解すべきである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/38 ＡＤＵ 9454−4Ｃ Ａ６１Ｋ 31/38 ＡＤＵ 31/41 ＡＤＦ 9454−4Ｃ 31/41 ＡＤＦ 31/44 ＡＤＳ 9454−4Ｃ 31/44 ＡＤＳ Ｃ０７Ｃ 47/225 Ｃ０７Ｃ 47/225 49/242 49/242 49/258 49/258 49/743 9049−4Ｈ 49/743 Ｃ 49/757 49/757 57/26 9450−4Ｈ 57/26 57/48 9450−4Ｈ 57/48 57/50 9450−4Ｈ 57/50 63/66 63/66 63/74 63/74 65/17 65/17 65/19 65/19 65/34 65/34 69/608 69/608 69/618 69/618 69/65 69/65 233/66 233/66 233/75 233/75 233/81 233/81 235/84 235/84 309/28 7419−4Ｈ 309/28 311/21 7419−4Ｈ 311/21 323/62 7419−4Ｈ 323/62 325/02 7106−4Ｈ 325/02 403/20 403/20 403/22 403/22 Ｃ０７Ｄ 213/79 9164−4Ｃ Ｃ０７Ｄ 213/79 213/80 9164−4Ｃ 213/80 257/04 7431−4Ｃ 257/04 Ａ 7431−4Ｃ Ｂ 303/38 7329−4Ｃ 303/38 307/68 9159−4Ｃ 307/68 311/58 9360−4Ｃ 311/58 333/38 9455−4Ｃ 333/38 333/40 9455−4Ｃ 333/40 Ｃ０７Ｆ 9/38 9450−4Ｈ Ｃ０７Ｆ 9/38 Ｚ (31)優先権主張番号 ０８／０５２，０５０ (32)優先日 1993年４月21日 (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，Ｃ Ａ，ＣＺ，ＦＩ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＫ，ＭＮ ，ＭＷ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ， ＳＫ，ＵＡ (72)発明者 ジ，リン アメリカ合衆国92122カリフォルニア、サ ン・ディエゴ、ショーライン・ドライブ 7120番、アパートメント2110 (72)発明者 ファン，チャン・コウ アメリカ合衆国92122カリフォルニア、サ ン・ディエゴ、カミノ・プラヤ・マラガ 5035番 (72)発明者 ホワイト，スティーブ アメリカ合衆国92129カリフォルニア、サ ン・ディエゴ、サリックス・アベニュー 7665番 (72)発明者 ナドザン，アレックス アメリカ合衆国92130カリフォルニア、サ ン・ディエゴ、リバートン・プレイス4052 番

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．式： （式中、Ｒ₁およびＲ₂は、それぞれ独立に、水素または炭素数１〜４の低級アル キルまたはアシルを示す； ＹはＣ、Ｏ、Ｓ、Ｎ、ＣＨＯＨ、ＣＯ、ＳＯ、ＳＯ₂または薬理学的に許容し うるその塩を示す； Ｒ₃は、ＹがＣまたはＮである場合に水素または炭素数１〜４の低級アルキル を示す； Ｒ₄は、ＹがＣである場合に水素または炭素数１〜４のアルキルを示すが、Ｙ がＮである場合はＲ₄は存在せす、ＹがＳ、Ｏ、ＣＨＯＨ、ＣＯ、ＳＯ、または ＳＯ₂である場合はＲ₃およびＲ₄のいずれも存在しない； Ｒ’およびＲ”は、水素、炭素数１〜４の低級アルキルまたはアシル、ＯＨ、 炭素数１〜４のアルコキシ、チオールまたはチオエーテル、またはアミノを示す ；またはＲ’およびＲ”は一緒になってオキソ（ケト）、メタノ、チオケト、Ｈ Ｏ−Ｎ＝、ＮＣ−Ｎ＝、（Ｒ₇Ｒ₈）Ｎ−Ｎ＝、Ｒ₁₇Ｏ−Ｎ＝、Ｒ₁₇Ｎ＝、エポキ シ、シクロプロピル、またはシクロアルキル基を形成し、その際、エポキシ、シ クロプロピルおよびシクロアルキル基は炭素数１〜４の低級アルキルまたはハロ ゲンで置換されていてよい； Ｒ₉は炭素数１〜４の低級アルキル、フェニル、芳香族アルキル、またはｑ− ヒドロキシフェニル、ｑ−ブロモフェニル、ｑ−クロロフェニル、ｑ−フルオロ フェニルまたはｑ−ヨードフェニルを示し、その際、ｑは２〜４である； Ｒ₁₅は炭素数１〜１２の低級または分枝鎖アルキルを示し、Ｒ₁₆がハロゲンま たは炭素数１〜８の低級アルキルの場合にのみメチルであってよい； Ｒ₁₆は水素、炭素数１〜８の低級アルキルまたはハロゲンを示す； またはＲ₁₅およびＲ₁₆は一緒になってフェニル、シクロヘキシルまたはシクロ ペンタール環または以下に示す基の一つを示す； Ｒ₁₇は水素、炭素数１〜８の低級アルキル、アルケニル（ハロゲン、アシル、 ＯＲ₇およびＳＲ₇で置換されたアルケンを含む）、Ｒ₃、アルキルカルボン酸（ ハロゲン、アシル、ＯＲ₇およびＳＲ₇で置換されたアルキルを含む）、アルケニ ルカルボン酸（ハロゲン、アシル、ＯＲ₇およびＳＲ₇で置換されたアルケンを含 む）、アルキルアミン（ハロゲン、アシル、ＯＲ₇およびＳＲ₇で置換されたアル キルを含む）、およびアルケニルアミン（ハロゲン、アシル、ＯＲ₇およびＳＲ₇ で置換されたアルケンを含む）を示す； Ｒ₁₈は水素、炭素数１〜４の低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、ＯＲ₇、ＳＲ₇ 、ＮＲ₇Ｒ₈または（ＣＦ）_nＣＦ₃を示す； Ｒ₁₉は水素、炭素数１〜８の低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、ＯＲ₇、ＳＲ₇ 、ＮＲ₇Ｒ₈または（ＣＦ）_nＣＦ₃を示す； ＶはＣＯＯＨ、テトラゾール、ＰＯ₃Ｈ、ＳＯ₃Ｈ、ＣＨＯ、ＣＨ₂ＯＨ、ＣＯ ＮＨ₂、ＣＯＳＨ、ＣＯＯＲ₉、ＣＯＳＲ₉、ＣＯＮＨＲ₉、またはＣＯＯＷ（式中 、Ｗは薬理学的に許容しうる塩である）である； Ｚ、Ｚ’、Ｚ”、Ｚ'"およびＺ""は、それぞれ独立に、Ｃ、Ｓ、Ｏ、Ｎ、また は薬理学的に許容しうる塩を示すが、他のかかるＺに二重結合によって結合して いる場合、またはＯまたはＳである他のかかるＺに結合している場合にはＯまた はＳではなく、Ｎである他のかかるＺに単結合により結合している場合にはＮで はない； ｎは０〜３である； 構造中の破線は任意の二重結合を示す）で示される化合物。 ２．レチノイン酸レセプターよりも優先してレチノイドＸレセプターを選択的 に活性化する請求項１に記載の化合物。 ３．レチノイン酸レセプターに対するよりもレチノイドＸレセプターに対して 少なくとも３倍強力なアクチベーターである請求項２に記載の化合物。 ４．３−メチル−７−エチル−９−(２,６,６−トリメチル−１−シクロヘキ セン−１−イル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ,８Ｅ−ノナテトラン酸、 ３−メチル−７−プロピル−９−(２,６,６−トリメチル−１−シクロヘキセ ン−１−イル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ,８Ｅ−ノナテトラン酸、 ３−メチル−７−イソプロピル−９−(２,６,６−トリメチル−１−シクロヘ キセン−１−イル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ,８Ｅ−ノナテトラン酸、 ３,６,７−トリメチル−９−(２.６.６−トリメチル−１−シクロヘキセン− １−イル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ,８Ｅ−ノナテトラン酸、 ３−メチル−７−ｔ−ブチル−９−(２,６,６−トリメチル−１−シクロヘキ セン−１−イル)−２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ,８Ｅ−ノナテトラン酸、および ３−メチル−５−{２−[２−(２,６,６−トリメチルシクロヘキセン−１−イ ル)エテニル]フェニル}−２Ｅ,４Ｅ−ペンタジエン酸 よりなる群から選ばれた化合物。 ５．３−メチル−５−{２−[２−(２,６,６−トリメチルシクロヘキセン−１ −イル)エテニル]シクロヘキシル}−２Ｅ,４Ｅ−ペンタジエン酸、 (２Ｅ,４Ｅ)−３−メチル−５−[１−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６ ,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル)シクロプロピル]ペンタ−２,４−ジエン 酸、 (２Ｅ,４Ｅ)−３−メチル−６−{１−[２,６,６−トリメチル−１−シクロヘ キセニル)エテニル]シクロプロピル}−２,４−ヘキサジエン酸、 (２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ)−７−(５,５,８,８−テトラメチル−５,６,７,８−テトラ ヒドロ−２−ナフチル)−３,８−ジメチル−ノナ−２,４,６−トリエン酸、およ び (２Ｅ,４Ｅ,６Ｚ)−７−(３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テト ラヒドロ−２−ナフチル)−３−メチル−オクタ−２,４,６−トリエン酸、より なる群から選ばれた化合物。 ６．経腸、非経口または局所投与に適した薬理学的に許容しうるビヒクル中に 請求項１に記載の化合物を１種または２種以上含有してなる医薬組成物。 ７．１または２以上のレチノイドＸレセプターによって媒体されるプロセスの 調節方法であって、請求項１に記載の化合物の少なくとも１種の存在下で該プロ セスを行わせることを特徴とする方法。 ８．該レチノイドＸレセプターが、レチノイドＸレセプター−アルファ、レチ ノイドＸレセプター−ベータ、またはレチノイドＸレセプター−ガンマである請 求項７に記載の方法。 ９．該プロセスが、脂質代謝のインビボ調節、皮膚関連プロセスのインビボ調 節、悪性の細胞発育のインビボ調節、前癌障害のインビボ調節、またはプログラ ムされた細胞死のインビボ調節である、請求項７に記載の方法。 １０．該プロセスが、インビボもしくはインビトロ細胞増殖および分化、また はインビボ四肢形態形成である、請求項７に記載の方法。 １１．１または２以上のレチノイドＸレセプターによって媒体されるプロセス の調節方法であって、該１または２以上のレチノイドＸレセプターによって媒体 される該プロセスを調節するのに有効な量の請求項１に記載の化合物の１種また は２種以上を噛乳動物に投与することを特徴とする方法。 １２．１または２以上のレチノイドＸレセプターによって媒体されるプロセス の調節方法であって、該１または２以上のレチノイドＸレセプターによって媒体 される該プロセスを調節するのに有効な量の請求項３に記載の化合物の１種また は２種以上を咄乳動物に投与することを特徴とする方法。 １３．薬理学的有効量の請求項１に記載の化合物の１種または２種以上をレチ ノイドＸレセプター療法を必要とする哺乳動物に投与することを特徴とする、レ チノイドＸレセプター療法を必要とする哺乳動物の治療方法。 １４．薬理学的有効量の請求項３に記載の化合物の１種または２種以上をレチ ノイドＸレセプター療法を必要とする哺乳動物に投与することを特徴とする、レ チノイドＸレセプター療法を必要とする哺乳動物の治療方法。 １５．薬理学的有効量の請求項１に記載の化合物の１種または２種以上を哺乳 動物に投与することを特徴とする、哺乳動物において高密度リポタンパクの血漿 濃度を増加させる方法。 １６．細胞内レセプターによって媒体されるプロセスを調節する方法であって 、レチノイン酸レセブターに優先してレチノイドＸレセプターを選択的に活性化 する請求項１に記載の第一の化合物を、レチノイドＸレセプター以外の１または ２以上の細胞内レセプターを活性化する第二の化合物とともに含む組成物の存在 下で該プロセスを起こさせ、その際、所定濃度において該組成物によって哺乳動 物 中で生じる生理学的効果が該化合物を該濃度で用いた場合に達成される相加効果 よりも大きいことを特徴とする方法。