JPH0812514A - ペプチド、キトサン及び有機酸塩を含有することを特徴と する植物病害防除剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 農耕地、緑地、特に芝草地での植物病害の発
生を安全にかつ容易に防除する植物病害防除剤を提供す
る。 【構成】 （ア）魚肉を蛋白分解酵素により分解して得
られるペプチド（イ）甲殻類のキチン質を脱アセチル化
して得られるキトサン及び（ウ）有機酸で構成される群
の中から選ばれた１種もしくは２種以上の物質は、極め
て有用で安全な植物病害防除剤である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、植物病害防除剤に関
し、詳しくはペプチド、キトサン及び有機酸で構成され
る群の中から選ばれた１種もしくは２種以上の物質から
なる植物病害防除剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】農耕地で使用される薬剤は、収穫された
農作物中の残留農薬として、食品の安全性が問題となっ
ている。一方、ゴルフ場の芝草病害、例えば春はげ症、
ブラウンパッチ、ラージパッチ、葉枯病、ダラースポッ
ト、赤焼病（綿腐病）、苗立枯病、その他しずみ症、フ
ェアリーリング、さび病、イエローパッチ等の防除、病
害虫、例えばシバットガ、コガネムシ、シバオサゾウム
シ、スジキリヨトウ、タマナヤガ等の防除、及び雑草防
除などに使用される薬剤による環境汚染が社会問題とな
り、特にゴルフ場周辺の河川を水源とする住民の不安感
は強く、かつ深刻化しており、環境保全対策が望まれて
いる。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】このように薬剤使用に
あたっては、使用者の安全性や経済性を充分考慮した上
で、農耕地、緑地での環境に及ぼす影響を少なくし、植
物病原菌の防除、病害虫の防除、及び雑草特に芝草の防
除を安全かつ容易にする植物病害防除剤の開発を目的と
した。

【０００４】

【課題解決するための手段】そこで本発明者は上記課題
を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、（ア）魚肉を蛋白
分解酵素により分解して得られるペプチド、（イ）カ
ニ、エビ、オキアミ等の甲殼類のキチン質を脱アセチル
化して得られるキトサン及び（ウ）各種有機酸の中から
選ばれた１種もしくは２種以上の有機酸で構成される群
の中から選ばれた１種もしくは２種以上の物質が、各種
植物（野菜、果実）、特に芝草等の植物病原菌に対し抗
菌作用を有することを見い出し、本発明を完成するに至
った。

【０００５】以下、本発明につき更に詳細に説明する。
本発明における、ペプチド、キトサン及び有機酸の中か
ら選ばれた１種もしくは２種以上の物質を用いて植物病
害防除効果をみることが出来るが、その場合には第１１
８回日本農芸化学会東北支部例会（開催日時；平成５年
７月９日、会場；東北大学農学部）、講演演題「イワシ
筋肉由来塩基性ペプチドおよびキトサンの植物病害防除
作用について」の方法に準拠し、例えば以下のようにし
て行なうことが出来る。

【０００６】本発明に用いられるペプチドとしては、魚
肉を蛋白質分解酵素により分解して得られるペプチドが
考えられるが、その場合には、末綱等［Ｂｕｌｌｅｔｉ
ｎｏｆ ｔｈｅ Ｊａｐａｎｅｓｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ
ｏｆ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ：５
２（１１），１９８１−１９８４（１９８６）．及び
Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｊａｐａｎｅｓｅ
Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｆｉｓ
ｈｅｒｉｅｓ：５４（１０），１８５３（１９８８）］
の調製方法に準じて例えば以下のようにして行なわれ
る。イワシやタチウオ等の魚類の筋肉を、水でホモジナ
イズした後、ｐＨを６．０に調整し、蛋白質分解酵素を
作用させ加水分解を行う。分解反応液を煮沸処理して酵
素を失活させた後、吸引濾過を行う。濾液に活性炭を加
え、再度濾過し清澄な粗ペプチド溶液を得る。このペプ
チド溶液を減圧濃縮した後、メタノールを加え、終夜冷
所放置後、生じた沈澱物を得る。この白色沈澱物を水に
再溶解後、陽イオン交換樹脂カラム及び限外濾過膜によ
る分離を用いて精製し、分子量が３００〜５０００でリ
ジン、アルギニン等を多く含む塩基性ペプチドを得る。

【０００７】本発明で用いられるキトサンとしては、無
脊椎動物、例えばカニ殻、エビ殼、オキアミ等の甲殼類
を塩酸で脱カルシウム、苛性ソーダで脱蛋白して得られ
るキチンを高濃度苛性ソーダで熱処理し、脱アセチル化
した遊離アミノ基を有する分子量数万〜数十万のキトサ
ンを得る。このキトサンのアセチル化度は０〜８０％好
ましくは５〜６０％である。

【０００８】本発明で用いられる有機酸としては、例え
ば酢酸、アジピン酸、ギ酸、乳酸、リンゴ酸、プロピオ
ン酸、クエン酸、アスコルビン酸、酒石酸、グルコン
酸、グルコノデルタラクトン、フマル酸又は他のオキシ
カルボン酸の中から選ばれた１種もしくは２種以上の有
機酸が挙げられる。

【０００９】本発明に係わる植物病害防除剤は、上記
（ア）〜（ウ）成分の中から選ばれた１種もしくは２種
以上の混合物を有効成分とするものである。上記（ア）
〜（ウ）成分の中から選ばれた１種もしくは２種以上の
物質の混合比は任意であるが、ペプチド：キトサン：有
機酸の混合比が１：０．１〜６：０．１〜６、好ましく
は１：０．２〜２：０．２〜２とすれば、多種の植物病
原菌に対する強い相乗的な抗菌作用が発現する。本発明
に係わる防除剤は、水に溶解した状態において上記
（ア）〜（ウ）成分が含まれていればよいから、各成分
を別々に水に添加して溶解してもよいが、２または３成
分を粉末状態で、実質的に水の不存在下に配合しても良
い。すなわち溶剤の他、適当な担体等を適宜加えて粉
剤、粒剤等の形態で使用することができ、粉末、粒状状
態で配合したものは吸湿性が少ないから配合状態におけ
る貯蔵安定性に優れている。本発明に係わる防除剤の使
用方法や使用濃度等は対象植物、対象病害の種類、その
他の要因により様々であるが、例えば液剤として用いる
場合、上記（ア）〜（ウ）成分の中から選ばれた１種も
しくは２種以上の化合物に対して０．０００１〜０．３
重量％程度となるように配合し、対象植物に散布すれば
よい。又散布間隔は通常３〜２５日毎とし、防除効果を
観察しながら決定すればよい。

【００１０】本発明に係わる植物病害防除剤は、各種植
物（野菜、果実、茶葉）の病害に適用することができ、
特に芝草は本発明に係わる防除剤に対する耐性が強く、
比較的高濃度で施用できることから卓効が期待できる。
すなわち強健な芝草の栽培（成長促進作用）に効果が認
められ、芝草の品質としてのパッテングクオリティ（グ
リーン上でのゴルフボールの走りと転がり等の性状）の
向上が期待される。本発明に係わる防除剤は、既に安全
性の確認されている成分を用いているので毒性を問題に
する必要がない。従って使用時期は育苗期、生育期のみ
ならず収穫期にも適用できる。

【００１１】

【発明の効果】本発明の植物病害防除剤は、ペプチド、
キトサン及び有機酸の中から選ばれた１種もしくは２種
以上の物質からなり、農耕地、緑地、特に芝草地での植
物病害の発生を安全かつ容易に防除することができる。

【００１２】

【実施例】以下に製造例及び試験例を挙げて本発明を具
体的に説明するが、本発明はこれにより限定されるもの
ではない。

【００１３】製造例１ イワシＳａｒｄｉｎｏｐｓ ｍｅｌａｎｏｓｔｉｃｔａ
普通肉５００ｇに脱イオン水５ｌを加え、ホモジナイズ
した後、ｐＨを６．０に調整し、蛋白質分解酵素（ナガ
セ生化学工業（株）製デナチームＡＰ）１０ｇを添加
し、４０℃で５時間撹拌しながら加水分解を行った。分
解反応液を１５分間煮沸処理して酵素を失活させた後、
冷却、吸引濾過した。濾液に粉末活性炭（武田薬品
（株）製カルボラフィン）５０ｇを加え撹拌後、再度吸
引濾過して清澄濾液を得た。上記酵素分解清澄濾液を１
ｌまで減圧濃縮した後、メタノール１０ｌを加え、冷所
に一夜放置し、生じた沈澱物を吸引濾過した。白色沈澱
物を脱イオン水３００ｍｌに溶解し、強酸性陽イオン交
換樹脂カラム（Ｄｏｗｅｘ５０Ｗ（Ｈ^＋），５０−１０
０ｍｅｓｈ，φ４．５Ｘ２０ｃｍ）に加えた。カラムを
脱イオン水で充分洗浄した後、２Ｎ−ＮＨ_４ＯＨ５００
ｍｌで溶出した。減圧濃縮によりアンモニアを除去した
後、それを限外濾過膜ＹＣ−０５（アミコン社製、分画
分子量５００）及びＹＮ−５（分画分子量５０００）で
限外濾過してペプチド溶液を得、更に凍結乾燥して、リ
ジン４７．６８％、アルギニン６．８５％を含む塩基性
ペプチド粉末２１．５ｇを得た。

【００１４】製造例２ カニ甲殻２５０ｇを水洗して芥や汚れを除き、少量のオ
クチルアルコールを加えた２Ｎ−ＨＣｌ ５ｌに浸漬
し、室温で適時撹拌しながら４８時間放置した。この脱
カルシウムされた甲殼を水洗後、少量の石鹸剤を加えた
１Ｎ−ＮａＯＨ５ｌに浸漬した後、１００℃、１２時間
煮沸し、冷却後、水洗して脱蛋白された粗製キチンを得
た。更に０．５％ ＫＭＮＯ_４溶液に浸漬した後、７０
℃、４０分間撹拌し、充分水洗後、乾燥することにより
脱色素されたフレーク状の純白キチン３０ｇを得た。ニ
ッケル又は鉄るつぼに粉末キチン３０ｇ，ＫＯＨ １５
０ｇを加え、１８０℃、３０分間加熱した。放冷後、る
つぼごと１ｌの水の中に入れ生ずる沈澱物を遠心分離
（５０００ｒｐｍ，１０分間）で分離し、充分水洗し
た。次に５％酢酸溶液１ｌに沈澱物を溶解後、希アルカ
リを加え遊離キトサンを沈澱させた。この操作を３回繰
り返した後、最終的に０．１Ｎ−ＨＣｌ １ｌに溶か
す。氷冷下で濃塩酸を滴下することによりキトサン塩酸
塩を生成させ、遠心分離（５０００ｒｐｍ，１０分間）
後、得られた沈澱物にエチルアルコールを加え脱水した
後、減圧乾燥して、アセチル化度７０％以上のキトサン
粉末２２ｇを得た。

【００１５】試験例１ 製造例１で作製した塩基性ペプチド１ｇ、製造例２で作
製したキトサン１ｇ及びアジピン酸（住友化学社製）１
ｇの混合物３ｇを３００ｍｌの蒸留水に溶かし供試原液
（１Ｗ／Ｖ％）とした。供試原液を所定の濃度０．０
１，０．００５、０．００２５％Ｗ／Ｖに調整した後、
０．４５μｍメンブランフィルター（ミリポア社製）を
用いて除菌濾過した供試料を用いた。これとは別に、被
験菌としてＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ Ｉ
ＦＯ３０４６４、Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏ−ｓｐｏｒｉｕｍ
ｓｉｇｍｏｉｄｅｕｍ ｖａｒ．ｉｒｒｅｇｕｌａｒ
ｅＩＦＯ ５２７３、Ｐｙｔｈｉｕｍ ａｐｈａｉｄｅ
ｒｍａｔｕｍ ＩＦＯ ７０３０、Ｆｕｓａｒｉｕｍ
ｓｏｌａｎｉ ｆ．ｓｐ．ｐｉｓｉ ＩＦＯ ９４２５
の４株をそれぞれポテトデキストロース寒天培地（ポテ
ト２００ｇ、 ブドウ糖２０ｇ、寒天１５ｇ、蒸留水１
ｌ）で斜面培地２６℃、７日間培養し、被験菌の胞子或
いは菌糸を白金耳で４〜５回掻き取り、滅菌水に懸濁さ
せた。滅菌済のφ９０ｍｍのペトリ皿に胞子懸濁液１ｍ
ｌを添加した後、滅菌後５０℃位に冷却したポテトデキ
ストロース寒天培地２０ｍｌを分注し、よく混合した
後、固化させ検定平板を作製した。次いで、先に所定濃
度に調整した供試料液をφ８ｍｍのペーパーディスク
（東洋濾紙製）に充分浸し、検定平板上にのせ、２４
℃、６日間培養し、生じた阻止円の直径（ｍｍ）を測定
した結果を表１に示した。又、各被検菌の増殖に及ぼ
す、本発明に係わる植物病害防除剤の影響を図１〜図４
に示した。

【００１６】

【表１】

【００１７】

【図面の簡単な説明】

【図１】Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ Ｉｆ
Ｏ ３０４６４の増殖に及ぼす、本発明に係る植物病害
防除剤の影響。

【図２】Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ ｓｉｇｍ
ｏｉｄｅｕｍ ｖａｒ．ｉｒｒｅｇｕｌａｒｅ ＩＦＯ
５２７３の増殖に及ぼす、本発明に係る植物病害防除
剤の影響。

【図３】Ｐｙｔｈｉｕｍ ａｐｈａｉｄｅｒｍａｔｕｍ
ＩＦＯ ７０３０の増殖に及ぼす、本発明に係る植物
病害防除剤の影響。

【図４】Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ ｆ．ｓｐ．
ｐｉｓｉ ＩＦＯ ９４２５の増殖に及ぼす、本発明に
係る植物病害防除剤の影響。

─────────────────────────────────────────────────────

【手続補正書】

【提出日】平成６年１０月２８日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】図面の簡単な説明

【補正方法】変更

【補正内容】

【図面の簡単な説明】

【図１】図面に代わる写真は生物の形態を示す図であ
り、Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ ＩＦＯ
３０４６４の増殖に及ぼす本発明に係わる植物病害防除
剤の影響。

【図２】図面に代わる写真は生物の形態を示す図であ
り、Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ ｓｉｇｍｏｉ
ｄｅｕｍ ｖａｒ．ｉｒｒｅｇｕｌａｒｅ ＩＦＯ ５
２７３の増殖に及ぼす本発明に係わる植物病害防除剤の
影響。

【図３】図面に代わる写真は生物の形態を示す図であ
り、Ｐｙｔｈｉｕｍ ａｐｈａｉｄｅｒｍａｔｕｍ Ｉ
ＦＯ ７０３０の増殖に及ぼす本発明に係わる植物病害
防除剤の影響。

【図４】図面に代わる写真は生物の形態を示す図であ
り、Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｏｌａｎｉ ｆ．ｓｐ．ｐｉｓ
ｉ ＩＦＯ ９４２５の増殖に及ぼす本発明に係わる植
物病害防除剤の影響。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 （ア）魚肉を蛋白分解酵素により分解し
   て得られる分子量３００〜５０００の塩基性ペプチド、
   （イ）カニ、エビ、オキアミ等の甲殻類のキチン質を脱
   アセチル化して得られるキトサン及び（ウ）酢酸、アジ
   ピン酸、ギ酸、乳酸、リンゴ酸、プロピオン酸、クエン
   酸、アスコルビン酸、酒石酸、グルコン酸、グルコノデ
   ルタラクトン、フマル酸又は他のオキシカルボン酸の中
   から選ばれた１種もしくは２種以上の有機酸で構成され
   る群の中から選ばれた１種もしくは２種以上の物質から
   なる植物病害防除剤。
2. 【請求項２】 植物病害防除の対象が芝草である請求項
   １記載の植物病害防除剤。