JPH0733618A - 線虫製剤及びその使用方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 簡単な条件下で線虫類の保存性を高く維持し
ながら、施用の際に容易に利用出来る線虫製剤、及び、
そのような線虫製剤を用いて、植物を害虫による被害か
ら守る場合に高い殺虫性を発揮することのできる使用方
法を提供すること。 【構成】 線虫及び粒径３００μｍ以下で水に不溶の固
形物を、水中に分散させて水分量８５ｗｔ％以上のスラ
リー状にして、苗の土中埋込部分に、その線虫製剤を付
着させた後、その苗を土中に植え付ける。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】線虫類の中には昆虫と夾雑する状
態で、昆虫の口器、肛門、足関節等から昆虫の血体腔中
に侵入して、その昆虫を宿主とし、線虫体内に生息して
いる共生細菌を放出し、その宿主昆虫の免疫機構を破壊
するとともに、前記宿主昆虫の体内で増殖して、その宿
主昆虫を死に至らしめるような昆虫寄生性線虫が知られ
ている。また、このような昆虫寄生性線虫を用いて、農
作物等の植物に被害を与える害虫を殺虫して、前記植物
の被害を防ぐために、このような線虫類を大量に培養す
ることが考えられている。

【０００２】そこで本発明は、例えば、上述のような大
量培養した線虫類を圃場に施用する場合に、その線虫類
を施用可能な状態で保存する技術に関し、詳しくは、線
虫製剤及びその使用方法に関する。

【０００３】

【従来の技術】従来、線虫を保存する技術としては、
（１）蒸留水中に線虫を分散させた線虫懸濁液をエアレ
ーションして保存する方法、（２）前記線虫懸濁液をポ
リウレタンフォームや濾紙等の担体中に浸込ませて、そ
の担体を通気性を有する容器中で保存する方法、（３）
線虫類を乾燥し、仮死状態（乾燥生存状態）にして保存
する方法、（４）アルギン酸ゲル中にビーズ状又はフィ
ルム状に包含させて保存することが行われており、また
施用可能な状態に製剤化する技術としては、（５）線虫
をアタパルジャイト粘土に含水状態で混合する方法が考
えられている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】ところが上述した従来
の技術においては、以下のような欠点があった。

【０００５】すなわち（１）の方法においては常にエア
レーションが必要であり、そのエアレーションを行うた
めの装置が必要となるため、保存のための装置が大掛か
りになり、汎用性が伴わないものであった。（２）の方
法は、（１）に汎用性をもたせた方法であるが、担体中
に浸込んだ線虫類は施用の際に担体から分離回収せねば
ならず、この線虫回収操作は、困難であるとともに煩雑
なものであり、かつ長期保存に向かない。また、（３）
の方法では、線虫を活動状態に回復させ、施用可能にす
るために、水にもどす操作が必要となり、この操作に時
間がかかる等の問題があり、（４）の方法においても施
用時にアルギン酸ゲルをクエン酸ナトリウム水溶液等を
用いて溶解せねばならず、この溶解操作に時間を要し、
煩雑になる等、これらの保存方法を用いた場合には施用
するための取扱いが煩雑であったり困難であったりする
欠点があった。

【０００６】これらの欠点を解決するために（５）の方
法が提案されているが、線虫類の保存性を高く維持する
ためには粘土中に自由水の存在しない条件下（水分量３
３〜６７％）で混合せねばならないと考えられていたた
め、施用の際散布機で散布する場合には、水にもどす等
の加工が煩雑になる他、粘土は粒径の大きいものを含む
ので、ノズル孔径の小さな散布機等では直接用いること
が出来ない等の欠点を有していた。

【０００７】そこで、本発明の目的は、上記欠点に鑑
み、簡単な条件下で線虫類の保存性を高く維持しなが
ら、施用の際に容易に利用出来る線虫製剤、及び、その
ような線虫製剤を用いて、植物を害虫による被害から守
る場合に高い殺虫性を発揮することのできる使用方法を
提供することにある。

【０００８】

【課題を解決するための手段】この目的を達成するため
の本発明の線虫製剤の特徴構成は、線虫及び粒径３００
μｍ以下で水に不溶の固形物を、水中に分散させて水分
量８５ｗｔ％以上のスラリー状にしてあることにあり、
前記固形物がシリカであればなおよく、さらに、本発明
の線虫製剤の使用方法の特徴手段は植物の苗の土中埋込
部分や種子に、前記線虫製剤を付着させた後、その苗又
は種子を土中に植え付けることにあり、そこから得られ
る作用効果は以下のとおりである。

【０００９】

【作用】つまり、線虫製剤をスラリー状にしてあること
から、施用の際にも、簡単に水に分散させることがで
き、そのスラリーを構成する固形物が粒径３００μｍ以
下としてあることで、ノズル孔径の小さな散布機を用い
たとしても目詰まりする等の不都合なく用いることが出
来るので、容易に施用することが出来るようになった。

【００１０】また、固形物は水に不溶性であるため、水
中への酸素溶解量を減少させることなく、この線虫製剤
中の水分量を８５％以上としてあることで、線虫類の高
い保存性を維持することが出来るということを実験的に
証明した。さらに、前記固形物がシリカであれば、線虫
と混在させた状態での水への分散性が高い。

【００１１】さらに土壌中に生息する害虫をターゲット
とする際、植物の苗の土中埋込部分や種子に昆虫寄生性
線虫を用いた線虫製剤を付着させた後、その苗又は種子
を植え付けることで用いれば、高効率でその植物を害虫
の被害から守ることが出来る。

【００１２】

【発明の効果】従って、例えば、昆虫寄生性線虫からな
るこのような線虫製剤を用いた場合に、容易に施用する
ことが出来、且つ、線虫類の簡単な施用で、高い殺虫性
を維持した線虫製剤を提供することが出来、これによっ
て圃場等での農作物の被害を効率的に防ぐことが出来る
ようになった。

【００１３】

【実施例】粒径３〜２０μｍのシリカ（ＳｉＯ₂含有量
９０ｗｔ％以上のもの）を水に懸濁分散させたスラリー
に、昆虫寄生性線虫の一例であるスタイナーネマ・クシ
ダイ（Steinernema kushidai, 以下クシダイと称す）を
混入して、水分量９０ｗｔ％にして、１ｍｌあたり１０
万頭のクシダイを含有するスラリー状の線虫製剤を調製
した。

【００１４】この線虫製剤を保存容器に収容し、相対湿
度８０％で２０〜３０℃の温度サイクルを人工気象器で
設定した夏場の室温環境において保存した。尚、クシダ
イは、ドッグフードを主成分とする培地で培養したもの
をベルマン法で回収後、０．１％ホルマリン水溶液で表
面殺菌して用い、保存容器は底が平らで上部に開口を有
する直径１６ｍｍの円柱状の容器であり、その保存容器
には前記線虫製剤を１ｍｌ（水深約５ｍｍ）収容して、
上部の開口をフィルム（クリアラムパッケージング社製
プラスチックフィルム）でシールした後、中央に小さな
穴を開けて用いた。

【００１５】その結果、過酷な環境条件で保存したにも
関わらず、７日後においても９６．５％の線虫が生存し
ていることがわかった。

【００１６】また、このような線虫製剤をサツマイモの
苗の根部に付着させ、植え付けたところ、害虫による被
害度は、従来化学農薬を用いて防除しつつ栽培した場合
に比して１／３程度にまで減少した。

【００１７】以下に様々に調製した線虫製剤に関する試
験例を示す。

【００１８】〔試験例１〕：線虫の生存率の水分量依存
性 様々な粒径のシリカを水に懸濁分散させたスラリーに、
クシダイを１０万頭／ｍｌの割合で混入して、水分量を
種々の割合に調製した線虫製剤を用い、前記保存容器で
前記夏場の室温環境で７日間保存して、線虫の生存率を
調べた。その結果、表１のようになった。尚、比較例と
あるものは蒸留水中に線虫のみを分散させた線虫製剤の
試験例である。

【００１９】

【表１】

【００２０】ところで、シリカは粒径が５００μｍ以上
のものを用いた場合には、散布機で散布を行う場合に、
ノズルの孔に詰まるので使用出来ない。つまり、シリカ
の粒径によって、それぞれ範囲は異なるものの、スラリ
ーの水分量を調整すれば線虫類の生存率を高くすること
が出来、シリカの粒径を３００μｍ以下としてあれば、
水分量を８５％以上に調整することで極めて高い生存率
を得ることが出来ることがわかった。また、シリカの粒
径が３００μｍ〜５００μｍであった場合には、線虫製
剤自体がスラリー状になりにくいという欠点があること
もわかった。これらのことから、線虫製剤は、スラリー
状を維持する程度の粘性をもっていれば、線虫製剤内部
で線虫が沈殿することなく運動出来て、酸素欠乏状態に
なりにくくなり、線虫の生存率を高く維持出来るように
なると考えられ、また、水分量が過多、或いは、シリカ
の粒径が大きすぎるような場合、粘性が低下して線虫が
沈殿してしまい、酸素欠乏状態を招くことで生存率が低
下するものと考えられる。

【００２１】〔試験例２〕：線虫生存率の線虫密度依存
性 （１） 粒径５０〜３００μｍのシリカ（ＳｉＯ₂含有
量９０ｗｔ％以上のもの）を水に懸濁分散させたスラリ
ーにクシダイを混入して、水分量８７．５％になるよう
にして、それぞれ１ｍｌあたり５万頭〜４０万頭の線虫
を有する種々のスラリー状の線虫製剤を調整した。これ
らの線虫製剤を、前記保存容器内で前記夏場の室温環境
で１４日間保存し、その線虫製剤中の線虫の生存率を調
べた。 （２） 前記クシダイをスタイナーネマ・カルポカプサ
エＡｌｌ（Steinernemacarpocapsae All,以下Ａｌｌと
略称する）にかえ、同様に生存率を調べた。その結果、
表２のようになった。

【００２２】

【表２】

【００２３】つまり、表２から線虫製剤に含まれる線虫
は、２０万頭／ｍｌ以下の線虫密度にしてあれば、高い
生存率で線虫を保存することが出来、さらに望ましく
は、１０万頭／ｍｌ以下の線虫密度にしてあれば、極め
て高い生存率の線虫製剤をつくることが出来ることがわ
かった。また、クシダイのみならずＡｌｌであっても、
高い生存率を示す線虫製剤を製造可能であることがわか
り、他の線虫に対しても線虫の生存率を高く、製剤化可
能であることが示唆された。つまり、本発明の線虫製剤
に用いる線虫は、試験例１，２に用いたクシダイやＡｌ
ｌに限られるものではなく、他の一般の線虫にも適用出
来るものである。

【００２４】〔試験例３〕：線虫生存率の保存温度依存
性 粒径５０〜３００μｍのシリカ（ＳｉＯ₂含有量９０ｗ
ｔ％以上のもの）を水に懸濁分散させたスラリーに、ク
シダイを混入して、水分量８７．５％になるようにし
て、それぞれ１ｍｌあたり１０万頭の線虫を含んだスラ
リー状の線虫製剤を調整した。この線虫製剤を前記保存
容器中で１５℃，２０℃，３０℃，で各別に保存し、そ
の線虫製剤中の線虫の生存率を経日的に調べた。その結
果、表３のようになった。

【００２５】

【表３】

【００２６】つまり、表３より、本発明の線虫製剤は、
従来の保存方法と同様に１５℃〜２５℃の一定温度での
保存で、生存率高く線虫類を保存でき、５４日後におい
ても高い生存率を維持出来ていることがわかり、恒温条
件下ではかなりの長期にわたる保存が可能であることが
わかる。

【００２７】〔試験例４〕：線虫製剤をスラリー状にす
る方法の検討 線虫製剤をスラリー状にするのに、シリカに替えてグア
ガム、アルギン酸ナトリウムを用いて１ｍｌあたり１０
万頭のクシダイを含むスラリー状の線虫製剤を種々調整
し、これら線虫製剤を、前記保存容器中、前記夏場の室
温環境で１４日間保存し、それぞれの線虫製剤中での線
虫の生存率を調べた。尚、比較のため、粒径３〜２０μ
ｍのシリカを用いて調整した線虫製剤についても、同条
件において生存率を調べた。その結果、表４のようにな
った。

【００２８】

【表４】

【００２９】表４より線虫製剤をスラリー状にするに、
グアガム、アルギン酸ナトリウムを用いた場合には、線
虫製剤を、たとえ線虫の活動可能な粘度のスラリー状に
したとしても、線虫の生存率を向上させることが出来な
いということがわかる。このことは、水溶性の材料を用
いてスラリーを調整した場合には、スラリー中への酸素
溶解量が減少し、線虫が酸素欠乏状態になりやすいため
ではないかと考えられる。つまり、線虫製剤をスラリー
状にするに、水不溶性の固形物を用いることで、線虫が
沈殿することなく、運動出来る粘度のスラリーを調整で
きるとともに、スラリー中への酸素溶解量を減少させる
ことがないので、線虫類を高い生存率で保存することが
出来ることがわかった。また、水不溶性の固形物とし
て、シリカ等の無機物を用いれば、雑菌等の混入も起き
難いという利点があり、製剤化に適していると云える。

【００３０】〔試験例５〕：線虫製剤を大量のスラリー
状にする方法の検討 （１） 粒径５０〜３００μｍのシリカ（ＳｉＯ₂含有
量９０ｗｔ％以上のもの）を水に懸濁分散させたスラリ
ーにクシダイを混入して、水分量８７．５％にして、１
ｍｌあたり１０万頭のクシダイを含有するスラリー状の
線虫製剤を調整した。底が平らで上部に開口を有する長
方形のプラスチック製容器に、前記線虫製剤を５０ｍｌ
入れ、前記開口を通気性のフィルム（三井東圧社製エス
ポアール）でシールした後、前記夏場の室温条件で保存
し、その線虫製剤中の線虫の生存率を経日的に調べた。

【００３１】（２） ８０ｍｍ×１００ｍｍ×２０ｍｍ
のポリウレタンフォームに、１ｍｌあたり１０万頭の中
を蒸留水に懸濁させて調整した線虫懸濁液を５０ｍｌ浸
込ませた後、通気性のフィルムでつくった袋の中に入れ
て、前記夏場の室温条件で保存し、その袋の中の線虫の
生存率を経日的に調べた。

【００３２】その結果、表５のようになった。

【００３３】

【表５】

【００３４】表５より、本発明の線虫製剤（１）によれ
ば、従来の線虫の保存方法に比べて、過酷な保存環境で
あったとしても、生存率高く、保存出来ることがわか
る。つまり、本発明の線虫製剤は、優れた保存性を有す
るものであることがわかった。

【００３５】〔試験例６〕：線虫製剤の施用方法の検討 （１） 粒径５０〜３００μｍのシリカ（ＳｉＯ₂含有
量９０ｗｔ％以上のもの）を水に懸濁分散させたスラリ
ーにクシダイを混入して、水分量８７．５％にして、１
ｍｌあたり１０万頭のクシダイを含有するスラリー状の
線虫製剤を調整した。

【００３６】この線虫製剤に、サツマイモの苗の下部５
ｃｍを浸漬した後、苗の下部１０ｃｍを圃場に挿入して
植え付けた。（尚、圃場は土壌消毒、施肥後、畝造り、
マルチングを夫々してあり、各苗は３０ｃｍ間隔で植え
付けた。また、使用したサツマイモの品種はベニアズマ
であり、５月１日に植え付け、１０月２５日に収穫し
た。）尚、苗に付着した線虫量は、１株当たり約１０万
頭であることがわかった。

【００３７】こうして得られたサツマイモについて、コ
ガネムシ類の幼虫による被害度を調べた。

【００３８】（２） 前記線虫製剤を、畝造りする前
に、圃場の全面に土壌混和して、サツマイモの苗の下部
１０ｃｍを圃場に挿入して植え付けた。この際、線虫
は、（１）と同様の条件を得るべく、１株あたり１０万
頭になるように混和した。このサツマイモの苗について
も（１）と同様に栽培し、収穫した。こうして得られた
サツマイモについて、コガネムシ類幼虫による被害度を
調べた。

【００３９】（３） 従来行われている方法として、化
学農薬（日本バイエルアグロケム社製バイジット粒剤）
を苗の植え付け前に９ｋｇ／１０ａの割合で圃場の全面
に土壌混和して、サツマイモの苗を植え付け（５月１
日）、さらに６月、７月、８月に各１回、９ｋｇ／１０
ａの割合で、散布して防除しつつ栽培し、１０月２５日
にサツマイモを収穫し、害虫による被害度を調べた。

【００４０】尚、被害度は、収穫した各サツマイモのコ
ガネムシ類幼虫による食害痕数を数え、以下のように食
害指数を求め、被害度を算出する。また被害いも率と
は、食害痕数が１個以上あるいもの割合（％）である。
また圃場の土壌中の温度環境は、図１のようになってい
る。また、株元とは、サツマイモの苗を植えた直下で地
下１０ｃｍの地点を指し、株間とは苗を植えた株元どう
しの中央で地下１０ｃｍの地点を指すものである。

【００４１】 食害痕数 ０ １，２ ３〜６ ７〜１５ １５〜 食害指数 ０ １ ３ ６ ９

【００４２】

【数１】

【００４３】その結果表６のようになった。

【００４４】

【表６】

【００４５】表６から、本発明による線虫製剤を用いれ
ば、苗１株あたり１０万頭のクシダイを用いることで、
従来用いられていた化学農薬よりも高い防除効果を得る
ことが出来、さらに、苗の土中埋込部分に付着させて施
用することにより、より高い防除効果を得られることが
わかる。これは、本発明の線虫製剤を菌の土中埋込部分
に付着させて施用することにより、施用したクシダイ
が、株元に集中してコガネムシ類幼虫に効果的に作用す
るため、サツマイモへの害を効果的に防除出来るものと
考えられる。

【００４６】また、図１から株元は株間に比べて最高地
温、最低地温の変動幅が小さく、線虫の活動に適してい
ると云える。これは苗の植付後次第に繁茂してくるサツ
マイモの葉により太陽光が遮断されることによると考え
られる。

【００４７】つまり、昆虫寄生性線虫の線虫製剤を用い
れば、植物の苗の土中埋込部分に付着させ、土中に植え
付けて用いることで、線虫の活動に適した場所に施用さ
れ高い防除効果が得られることがわかった。

【００４８】尚、落花生のように種子を植付けて栽培す
る植物の場合には、本発明の線虫製剤を種子に付着さ
せ、土中に植付ければ同様に防除効果が得られる。ま
た、同様に、本発明の線虫製剤は昆虫寄生性線虫のみで
はなく、植物寄生性線虫を用いて雑草を除草すること
や、菌食性線虫を用いて土壌病原菌を防除することに用
いることが出来る。

【図面の簡単な説明】

【図１】圃場の温度環境を示すグラフ

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 河杉 忠昭 茨城県竜ケ崎市向陽台５丁目６番地 株式 会社クボタ技術開発研究所つくば研究室内

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 線虫及び粒径３００μｍ以下で水に不溶
   の固形物を、水中に分散させて水分量８５ｗｔ％以上の
   スラリー状にしてある線虫製剤。
2. 【請求項２】 前記固形物がシリカである請求項１記載
   の線虫製剤。
3. 【請求項３】 植物の苗の土中埋込部分や種子に、請求
   項１もしくは請求項２記載の線虫製剤を付着させた後、
   その苗又は種子を土中に植え付ける線虫製剤の使用方
   法。