JPH0725687B2 - ギンクゴ・ビロバ葉抽出液、製法および製剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はギングゴ・ビロバ(Ｇink
go biloba：イチョウ)葉からの抽出液、抽出液の製造
方法および抽出液を含む医薬製剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】ギンクゴ・ビロバの葉から得られる抽出
物は、長い間末梢および脳動脈血循環障害の治療に使用
されてきた。有効成分としてフラボン配糖体を非常に豊
富に含むギンクゴ・ビロバ抽出物の製造方法は公知であ
る。ＤＥ−Ｂ１７６７０９８およびＤＥ−Ｂ２１１７４
２９参照。また、これらの抽出物は、ギンクゴ・ビロバ
・モノ抽出物とも呼ばれる。

【０００３】ＥＰ−Ａ０３２４１９７には、葉の抽出後
に得られた低級アルコールまたはケトンの水溶液を微粒
の珪藻土の存在下で濃縮する、ギンクゴ・ビロバの葉の
抽出物の製造方法が記載されている。生成した水性懸濁
液を微粒の珪藻土によりろ過し、ろ液をブタノンで抽出
し、抽出物から溶媒を除く。

【０００４】ＥＰ−Ａ３３０５６７は、粉砕した葉を水
性ケトン化合物により抽出する、ギンクゴ・ビロバの葉
の抽出物の製造方法に関するものである。ビフラボンお
よび疎水性化合物が沈澱するまでこの抽出物を濃縮す
る。ろ過後、水性濃縮物をアルカリ性にすることによ
り、プロアントシアニジンが沈澱する。沈澱物を分離
し、ろ液を酸性化した後、硫酸アンモニウムの存在下Ｃ
₄-₆ケトン化合物により液体−液体−抽出を行う。ケト
ン化合物を除去した後、抽出物が得られる。

【０００５】ＤＥ−Ａ３５１４０５４は、ラクトン構造
を有するテルペノイド物質であるギンクゴ・ビロバ葉の
既知成分、ギングゴリド(中西、「ピュア・アンド・アプ
ライド・ケミストリー」(Pure and Applied Chemistr
y)、第１４巻(１９６７)、８９−１１３、および丸山
等、「テトラヘドロン・レターズ」(Tetrahedron Letter
s)(１９６７)、２９９−３０２および３０３−３１９、
および岡部等、「ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサエ
ティー」(Ｊ．Ｃhem．Ｓoc.)(１９６７)、２２０１−２
２０６参照)が、ＰＡＦ(血小板活性化因子)により誘発
される疾患および類似症状の処置に使用され得ることを
開示している。

【０００６】ギンクゴ・ビロバ葉中に含まれる別の物質
であるビロバリドの使用は、神経障害、脳障害、脊髄障
害および脳浮腫の処置に関するＤＥ−Ａ３３３８９９５
および対応するＵＳ−Ａ４５７１４０７から公知であ
る。ビロバリドはギンクゴリドに構造上関連したセスキ
テルペン・ラクトンである(中西等、メジャー等および
ウェインゲス等、「ジャーナル・オブ・アメリカン・ケ
ミカル・ソサエティー」(Ｊ．Ａm．Ｃhem．Ｓoc.)、第９
３巻(１９７１)、３５４４−３５４６参照)。

【０００７】上記化合物に加えて、ギンクゴ・ビロバの
葉はまた、いわゆるギンクゴール酸(アナカルド酸)を含
む。これらの化合物は、０〜３個の二重結合を有するn
−Ｃ₁₃−〜n−Ｃ₁₉−アルキル基を含む６−アルキルサ
リチル酸である。ゲラーマン等、「フィトケミストリー」
(Ｐhytochemistry)、第１５巻(１９７６)、１９５９−
１９６１頁および「アナリティカル・ケミストリー」(Ａn
alytic．Ｃhem.)、第４０巻(１９６８)、７３９−７４
３頁参照。

【０００８】「ギンクゴール」、すなわち対応するアルキ
ル基により置換されたフェノールは、ギンクゴール酸の
脱カルボキシル化により生合成的に、またはギンクゴ・
ビロバ葉の精製処理中に得られる。河村、日本、「ジャ
ーナル・オブ・ケミストリー」(Ｊ．Ｃhem.)、第３巻(１
９２８)、９１−９３頁参照。

【０００９】ギングゴ・ビロバにおけるギンクゴール酸
およびギンクゴールは、４位に別のフェノール性ヒドロ
キシル基を有する対応する誘導体、６−アルキルレゾル
シン酸または５−アルキルレゾルシンに随伴する。ゲラ
ーマン等、「フィトケミストリー」(Ｐhytochemistry)、
第１５巻(１９７６)、１９５９−１９６１頁参照。これ
らのレゾルシン誘導体は、トキシコデンドロン植物が誘
発する毒性作用並びに特に強いアレルギーおよび接触性
皮膚炎に関与する。ヒル等、「ジャーナル・オブ・アメ
リカン・ケミカル・ソサエティー」(Ｊ．Ａm．Ｃhem．Ｓ
oc.)、第５６巻(１９３４)、２７３６−２７３８頁参
照。

【００１０】イチョウの果実との接触後に生ずる強いア
レルギー反応の症例は周知である。ソウァーズ等、「ア
ーカイブス・オブ・ダーマトロジー」(Ａrch．Ｄermato
l.)、第９１巻(１９６５)、４５２−４５６頁および中
村、「コンタクト・ダーマティティス」(Ｃontact Ｄerma
titis)、第１２巻(１９８５)、２８１−２８２頁参照。
イチョウの果実を食べた後の重い粘膜障害が記載されて
いる。ベッカーおよびスキップワース、「ジャーナル・
オブ・アメリカン・メディカル・アソシエーション」
(Ｊ．Ａm．Ｍed．Ａssoc.)、第２３１巻(１９７５)、１
１６２−１１６３頁参照。また、イチョウの葉を集めた
り手を触れたときにアレルギー性皮膚反応が生じること
も多い。

【００１１】ウルシ科(anacardiaceae)およびイチョウ
科(ginkgoaceae)由来のアルキルフェノール化合物によ
り誘発されるアレルギーの重要性は、アルキルフェノー
ル化合物により誘発されるアレルギーに対する特許文献
に記載された(ＵＳ−Ａ４４２８９６５参照)脱感作の物
質および方法の開発により明白である。

【００１２】ギンクゴ・ビロバ葉から得られた市販の抽
出物は、５０ないし１００００ppmのギンクゴール酸を
含有する。

【００１３】ＤＥ−Ｂ１７６７０９８およびＤＥ−Ｂ２
１１７４２９における公知方法により製造されたギンク
ゴ・ビロバ葉からの抽出物は、抽出物の親油性成分が、
実質的に水非混和性の親油性溶媒、例えば含塩素脂肪族
低級炭化水素、例えば四塩化炭素による水性アセトン抽
出物の液体−液体−抽出により除去されるため、アルキ
ルフェノール化合物を実質的に含まない。しかしなが
ら、この段階で、治療上貴重なギンクゴリドおよびビロ
バリドはまた、かなり低減化されるため、ＤＥ−Ｂ２１
１７４２９の実施例１における最終生成物中のそれらの
含有率は、ギンクゴリドＡ、Ｂ、ＣおよびＪの場合全部
で最大０．５％およびビロバリドの場合約０．３％であ
る。しかしながら、フラボン配糖体の量は、この段階中
にかなりの程度まで、すなわち粗抽出物中３〜４％から
最終生成物中約２４％まで増加する。

【００１４】従って、本発明の目的は、実質的にアルキ
ルフェノール化合物を含まず、フラボン配糖体を多量に
含む、ギンクゴ・ビロバ(Ｇinkgo biloba)葉からの抽
出液を提供するものであり、これは使用した葉中に存在
するすべてのギンクゴリド類およびビロバリド類を含
む。

【００１５】本発明のもう１つの別の目的は実質的にア
ルキルフェノール化合物を含まないギンクゴ・ビロバ葉
からの抽出液−これはフラボン配糖体、ギンクゴリドお
よびビロバリドを多量に含む−の方法を提供するもので
ある。本発明の方法は、周知の方法であるＤＥ−Ｂ１７
６７０９８およびＤＥ−Ｂ２１１７４２９と対照的に、
塩素化脂肪族炭化水素を使用せず、アルキルフェノール
化合物の除去に成功した。技術的操作中の塩素化炭化水
素の使用は、職業的薬害、環境に対するこれらの化合物
の重大な危険および医薬組成物中への望ましくない残留
可能性のために非常に問題が多い。

【００１６】ＤＥ−Ｂ２１１７４２９の方法に比較して
本発明の方法の別の利点は、褐変性を有するポリフェノ
ール化合物(プロアントシアニジン)の除去に鉛化合物を
使用しないということである。鉛化合物は、関与する人
間に対する健康上の危険およびその上、それらの適切な
処分にかかる費用はかなりである。

【００１７】最後の本発明の目的は、フラボン配糖体、
ギンクゴリドおよびビロバリド高含有のギンクゴ・ビロ
バ抽出物を含む医薬製剤を提供するものであり、これに
は、アルキルフェノール化合物が除去されているため、
あきらかにアレルギー反応の実質的な危険性がない。

【００１８】従って、本発明は実質的にアルキルフェノ
ール化合物を含まないギンクゴ・ビロバ葉からの抽出液
に関するものであり、これはフラボン配糖体高含有であ
り、葉中に本来存在する大部分のギンクゴリド類および
ビロバリド類を含む。好ましくは、本発明の抽出物は下
記のものを含む。−フラボン配糖体２０−３０重量％、
特に２２−２６重量％−ギンクゴリドＡ、Ｂ、Ｃおよび
Ｊ(総量)２．５−４．５重量％−ビロバリド２．０−
４．０重量％−アルキルフェノール化合物１０ppm未
満、特に１ppm未満、−プロアントシアニジン１０重量
％未満

【００１９】さらに、本発明は、請求項３−６に記載し
た工程を含むギンクゴ・ビロバ葉からのギンクゴ・ビロ
バ抽出物の製造方法に関する。ＤＥ−Ｂ１７６７０９８
に記載の親油性組成分の分離方法と対照的に、水性アル
コールまたは水性アセトン粗抽出液を塩素化脂肪族炭化
水素での液々抽出を直ちに行なわずに、むしろ、親油性
成分の多くは有機溶媒成分の蒸留と水での稀釈により、
最大１０重量％、好ましくは５重量％まで沈澱させ、濾
過により分離する。アルキルフェノール化合物、クロロ
フィル、脂肪酸誘導体およびビフラボンは水に対する低
溶解性により沈澱し、濾過により分離することができ
る。これらの条件下、ギンクゴ・ビロバ抽出物の目的化
合物は溶解したまま残る。

【００２０】ついで、メチルエチルケトンまたはメチル
エチルメトン／アセトン−抽出物をＤＥ−Ｂ１７６７０
９８およびＤＥ−Ｂ２１１７４２９により製造する。し
かしながら、ＤＥ−Ｂ２１１７４２９の方法とは対照的
に、プロアントシアニジン含量を１０％以下に減らすた
めに鉛化合物またはポリアミドを使用せず、むしろ、ブ
タノン抽出物の分配は水と水と混和可能なＣ₄−Ｃ₅アル
コールの間で行い、この場合はプロアントシアニジンは
水層に残留する。

【００２１】好ましい実施例において、メチルエチルケ
トン、またはメチルエチルケトン／アセトン抽出を直
接、親油性成分を含まない水性抽出液を水と混合可能な
４または５個のＣ−原子を有するアルカノールで抽出す
ることにより代替する。経済的な理由からn−ブタノー
ルは好ましい。塩化ナトリウムまたは硫酸アンモニウム
１０−３０重量％を水性抽出液に添加することができ
る。次に減量工程である、蒸留によりブタノールまたは
ペンタノール抽出物から溶媒を除き、水性エタノールの
２０−６０重量％中に５−２０重量％の固体を含有する
溶液を調製し、この溶液を沸点６０−１００℃の脂肪族
炭化水素で多段階の液々抽出を行うことにより、アルキ
ルフェノール化合物は１０ppm未満の含有量に減少させ
る。

【００２２】さらに、本発明は、請求項７記載のギンク
ゴ・ビロバ抽出物を含有することを特徴とする医薬製剤
に関する。

【００２３】薬理学的実験モデルにおいて、本発明によ
り製造した抽出物は顕著なラジカルスカベンジャー作用
および血液循環の刺激、虚血障害の抑制および血小板凝
集を阻害する性質を有する。

【００２４】本発明のギンクゴ・ビロバ抽出物を医薬組
成物製造のための通常の方法で、溶液、被覆錠、錠剤ま
たは注射製剤を製造することができる。本発明の医薬製
剤は末梢または中枢動脈循環障害の処置に使用する。

【００２５】実施例は本発明を具体的に説明するもので
あり、特にそうでないと言わないかぎり、部および百分
率は重量による。

【００２６】 実施例１ 乾燥ギンクゴ・ビロバ葉１００kgを製粉機中で粉砕し、
４mm未満の粒径にする。６０重量％の水性アセトン７５
０kgを添加後、混合物を３０分間５７−５９℃の温度に
て激しく撹拌する。固体残渣を濾過または遠心分離によ
り分離し、同一条件にてもう一度抽出を行う。第一およ
び二回の抽出工程からの抽出物を一緒にする。ギンクゴ
ール酸量は(乾燥抽出物にもとづき)約１３０００ppmで
ある。得られた抽出物は減圧下で濃縮し、３０−４０％
および最大値約５重量％のアセトンを含む固体に濃縮す
る。撹拌しつつ、水を添加して、濃縮物を２倍容量に稀
釈し、約１２℃に放置冷却する。ギンクゴール酸、すな
わち葉中に存在するアルキルフェノールの大部分を含む
沈澱物が生成する。この温度にて１時間保った後、得ら
れた沈澱物を遠心分離し、捨てる。

【００２７】得られた水性上清液中のギンクゴール酸含
有量(乾燥抽出物をもとに)約３２０ppmである。

【００２８】硫酸アンモニウム３０部を水性溶液１００
部に添加する。混合物を撹拌する。硫酸アンモニウムの
溶解後、液々抽出を６：４−１：１の割合のメチルエチ
ルケトンとアセトンの混合物で２回行うと、添加した有
機溶媒は水性溶液の容積の半分になり、ポンプを使用
し、激しく撹拌した後、混合工程完了後に生成した上層
有機相を除去する。

【００２９】ついで、メチルエチルケトン・アセトン溶
液を減圧下、固体含量５０−７０％まで濃縮する。この
濃縮物を固体含量１０％まで水で稀釈する。

【００３０】この実質的抽出水溶液をそれぞれ水溶液の
容量の半分のn−ブタノール飽和水と３回撹拌する。集
めたブタノール相は減圧下固体含量少なくとも５０％ま
で濃縮する。高濃縮抽出物から共沸蒸留によりn−ブタ
ノールを除去するために、好ましくは水を添加する。得
られた水性濃縮物は水とエタノールで稀釈し、３０重量
％水性エタノール中１０重量％乾燥抽出物の溶液を得
る。

【００３１】アルキルフェノール化合物を残留含量１０
ppm以下に減らすために、この溶液を少なくとも３回室
温にて、各回溶液の容量１／３のn−ヘプタンと撹拌す
る。

【００３２】水層を減圧下固体含量少なくとも５０％以
上まで濃縮し、生成物最大温度約６０−８０℃にて、水
の含有量５％未満の乾燥抽出物に乾燥する。

【００３３】ギンクゴ・ビロバ葉１００kgから、フラボ
ン配糖体２４．８重量％、ギンクゴリド３．２％、ビロ
バリド２．９％、プロアントシアニジド約５％およびア
ルキルフェノール化合物１ppm未満を含むギンクゴ・ビ
ロバ抽出物２．７kgを得る。

【００３４】 実施例２ 実施例１で得られた抽出水溶液を、親油性成分を主成分
とする沈澱物を遠心分離後、３回各回溶液の半分のブタ
ン−２−オール(第２ブチルアルコール)で３回撹拌す
る。

【００３５】得られたブタン−２−オール溶液を減圧下
濃縮し、固体含量少なくとも５０％の濃縮物を得る。高
濃縮物から共沸蒸留によりブタノールを除去するため
に、好ましくは水を添加する。水とエタノールで、溶液
中固体約１０重量％とエタノール３０重量％を含むよう
に稀釈し、溶液を３回各回溶液の１／３容量のシクロヘ
キサンと撹拌する。

【００３６】水層を減圧下固体を少なくとも５０％含む
ように濃縮し、水含量約５％未満の乾燥抽出物になるよ
う最高６０−８０℃の温度で乾燥する。

【００３７】ギンクゴ・ビロバ葉１００kgから、フラボ
ン配糖体２５．３％、ギンクゴリド３．４％、ビロバリ
ド３．１％、プロアントシアニジン４．２％およびアル
キルフェノール化合物１ppm以下を含むギンクゴ・ビロ
バ抽出物２．９kgを得る。

【００３８】 実施例３ 経口投与用溶液 溶液１００ml中 ギンクゴ・ビロバ抽出物 ４．０g エタノール ５０．０g 脱塩水を加えて、 １００．０mlとする。

【００３９】 実施例４ 被覆錠

【００４０】この発明により下記の各事項が可能とな
る。 （１） 本来葉中に存在していたギンクゴリド類および
ビロパリド類の大部分を含むことを特徴とする、実質的
にアルキルフェノール化合物を含まず、フラボン配糖体
含有量が増加している、ギンクゴ・ビロバ(Ｇinkgo ｂ
iloba)葉からの抽出物。 （２） −フラボン配糖体２０−３０重量％、特に２２−２６重
量％−ギンクゴリドＡ、Ｂ、ＣおよびＪ(総量)２．５−
４．５重量％−ビロバリド２．０−４．０重量％−アル
キルフェノール化合物１０ppm未満、特に１ppm未満、お
よび−プロアントシアニジン１０重量％未満を含む１の
抽出物。 （３） 実質的にアルキルフェノール化合物を含まず、
フラボン配糖体を多量および本来葉中に存在する成分の
大部分に相当するギンクゴリド類およびビロパリド類を
含むギンクゴ・ビロバ葉からの抽出液の製造方法であ
り、その方法は、水性アセトン、炭素原子１−３の水性
アルカノールまたは無水メタノールでの葉の抽出、親油
性成分を除去する段階、硫酸アンモニウムで少なくとも
１回処理およびそれに続くメチルエチルケトンまたはメ
チルエチルケトンおよびアセトンの混合物での抽出から
なり、上記方法は、大部分の有機溶媒を水性有機溶媒を
含む葉からの抽出物から分離し、残る水性溶液は５−２
５重量％、好ましくは約１５−２０重量％固体含有率ま
で希釈し、放冷し、水にあまり溶解しない親油性成分か
ら沈殿形成するまで置き、その後この沈殿物を分離する
こと、および、濾液の抽出により直接製造されたブタノ
ールまたはペンタノール抽出液またはブタノールまたは
ペンタノールおよび水の間でのメチルエチルケトン−ア
セトン−抽出液の分配の後で得られた水性アルコール溶
液を、さらにアルキルフェノール化合物を分離するため
におよそ６０−１００℃の沸点をもつ脂肪族またはシク
ロ脂肪族溶媒で抽出することを特徴する製造法。 （４） −フラボン配糖体２０−３０重量％、特に２２−２６重
量％−ギンクゴリドＡ、Ｂ、ＣおよびＪ(総量)２．５−
４．５重量％−ビロバリド２．０−４．０重量％−アル
キルフェノール化合物１０ppm未満、特に１ppm未満、お
よび−プロアントシアニジン１０重量％未満を含み、 （ａ）ギンクゴ・ビロバの生または乾燥緑葉を水性アセ
トン、炭素原子１−３の水性アルカノールまたは無水メ
タノールでおよそ４０−１００℃の温度で抽出し、 （ｂ）有機溶媒の大部分を抽出液から分離して最大量１
０重量％、好ましくは５重量％にし、その際水を蒸留の
最終段階で加えることができ、 （ｃ）残りの濃縮水性溶液を水で希釈して５−２５重量
％、好ましくは１５−２０重量％固体含有率とし、沈殿
物が形成されるまで撹拌しながら２５℃未満、好ましく
は約１０−１２℃の温度に放冷し、水にあまり溶けない
親油性成分から成るこの沈殿物を除去し、 （ｄ）硫酸アンモニウムを残った水性溶液を加え、３０
重量％含量とし、形成した溶液をメチルエチルケトンま
たはメチルエチルケトンとアセトンを９：１−４：６、
好ましくは６：４の割合で含む混合物で抽出し、 （ｅ）得られた抽出液を５０−７０％固体含有率に濃縮
し、生じる濃縮物を水で５−２０％固体含有率に希釈
し、 （ｆ）生ずる溶液を水に混合しないブタノールまたはペ
ンタノールで多段階抽出に付し、 （ｇ）ブタノールまたはペンタノール層を５０−７０％
固体含有率に濃縮し、 （ｈ）濃縮物を十分な水およびエタノールで希釈し、２
０−６０重量％水性エタノール中に５−２０重量％の乾
燥抽出物を含む溶液を得、 （ｉ）水性アルコール溶液をさらにアルキルフェノール
化合物を除去するために沸点が約６０−１００℃の脂肪
族もしくはシクロ脂肪族溶媒で抽出し、 （ｊ）水相を減圧下濃縮し、６０−８０℃の最大温度で
乾燥して含水量５％未満の乾燥抽出物にする ことを特徴とするギンクゴ・ビロバ葉からの抽出液の製
造方法。 （５） 方法段階（ｄ）および（ｅ）を除き、（ｃ）で
得られた水性溶液を段階（ｆ）から（ｊ）によりさらに
続けるが、段階（ｆ）では塩化ナトリウムまたは硫酸ア
ンモニウム１０−３０重量％、好ましくは硫酸アンモニ
ウム２０％を水性溶液に加え得る４の方法。 （６） ｎ−ブタノールを段階（ｆ）で使用する３−５
の何れか１項の方法。 （７） １まは２のギンクゴ・ビロバ抽出物または３−
６の何れか１項により得られる抽出物含有を特徴とする
医薬。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】−フラボン配糖体２０−３０重量％、特に
   ２２−２６重量％ −ギンクゴリドＡ、Ｂ、ＣおよびＪ(総量)２．５−４．
   ５重量％ −ビロバリド２．０−４．０重量％ −アルキルフェノール化合物１０ppm未満、特に１ppm未
   満、および −プロアントシアニジン１０重量％未満 を含み、 （ａ）ギンクゴ・ビロバの生または乾燥緑葉を水性アセ
   トン、炭素原子１−３の水性アルカノールまたは無水メ
   タノールでおよそ４０−１００℃の温度で抽出し、 （ｂ）有機溶媒の大部分を抽出液から分離して最大量１
   ０重量％にし、その際水を蒸留の最終段階で加えること
   ができ、 （ｃ）残りの濃縮水性溶液を水で希釈して５−２５重量
   ％固体含有率とし、撹拌しながら２５℃未満の温度で放
   冷し、沈殿物が形成されるまで放置し、水にあまり溶け
   ない親油性生物から成るこの沈殿物を除去し、 （ｄ）硫酸アンモニウムを残った水性溶液を加え、生成
   した溶液をメチルエチルケトンまたはメチルエチルケト
   ンとアセトンの混合物で抽出し、 （ｅ）得られた抽出液を５０−７０％固体含有率に濃縮
   し、生じる濃縮物を水で５−２０％固体含有率に希釈
   し、 （ｆ）生ずる溶液を水に混合しないブタノールまたはペ
   ンタノールで多段階抽出に付し、 （ｇ）ブタノールまたはペンタノール層を５０−７０％
   固体含有率に濃縮し、 （ｈ）濃縮物を十分な水およびエタノールで希釈し、２
   ０−６０重量％水性エタノール中に５−２０重量％の乾
   燥抽出物を含む溶液を得、 （ｉ）水性アルコール溶液をさらにアルキルフェノール
   化合物を除去するために沸点が約６０−１００℃の脂肪
   族もしくはシクロ脂肪族溶媒で抽出し、 （ｊ）水相を減圧下濃縮し、６０−８０℃の最大温度で
   乾燥して含水量５％未満の乾燥抽出物にする ことを特徴とするギンクゴ・ビロバ（Ｇinkgo ｂilob
   a）葉からの抽出液の製造方法。
2. 【請求項２】請求項１記載の方法により得られ得る抽出
   物を含む、末梢又は脳動脈血流症害の処置に使用する
   剤。