JPH0723792A - ニコチン酸誘導体の製造法及び新規微生物 - Google Patents
ニコチン酸誘導体の製造法及び新規微生物Info
- Publication number
- JPH0723792A JPH0723792A JP19321293A JP19321293A JPH0723792A JP H0723792 A JPH0723792 A JP H0723792A JP 19321293 A JP19321293 A JP 19321293A JP 19321293 A JP19321293 A JP 19321293A JP H0723792 A JPH0723792 A JP H0723792A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- picoline
- nicotinic acid
- microorganism
- derivative
- acid derivative
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 31
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical class OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 25
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 5
- ITQTTZVARXURQS-UHFFFAOYSA-N 3-methylpyridine Chemical class CC1=CC=CN=C1 ITQTTZVARXURQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 47
- 241000316848 Rhodococcus <scale insect> Species 0.000 claims abstract description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 4
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims 2
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 claims 1
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 9
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 239000008096 xylene Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003905 agrochemical Substances 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract 1
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 18
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 241000187562 Rhodococcus sp. Species 0.000 description 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 5
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 2,5-dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=C(C)N=C1 XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine Chemical class CC1=CC=CC=N1 BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M Glycolate Chemical compound OCC([O-])=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000006142 Luria-Bertani Agar Substances 0.000 description 2
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 2
- 241000187654 Nocardia Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229910001410 inorganic ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N (2R,6R)-form-2.6-Diaminoheptanedioic acid Natural products OC(=O)C(N)CCCC(N)C(O)=O GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNTZKNJGAFJMHQ-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound CC1=NC=CC=C1C(O)=O HNTZKNJGAFJMHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZOKQIPOABEQAM-UHFFFAOYSA-N 6-methylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound CC1=CC=C(C(O)=O)C=N1 RZOKQIPOABEQAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 241001478240 Coccus Species 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910004616 Na2MoO4.2H2 O Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 125000000350 glycoloyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 iron ion Chemical class 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N meso-2,6-diaminopimelic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCC[C@@H]([NH3+])C([O-])=O GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940085991 phosphate ion Drugs 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 150000004053 quinones Chemical class 0.000 description 1
- 102220201851 rs143406017 Human genes 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属
に属し、一般式〔Ｉ〕 【化１】 （式中、Ｘは水素，ハロゲン，アルキル基，あるいはア
ルコキシ基を示す）で表される３−ピコリン誘導体から
一般式〔II〕 【化２】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を生成せしめる能力を有する微生物の培養
液、該菌体または該菌体処理物を一般式〔Ｉ〕 【化３】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表される３−ピ
コリン誘導体に作用せしめ、一般式〔II〕 【化４】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を採取することを特徴とするニコチン酸誘導
体の製造法及びロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕ
ｓ）属に属し、３−ピコリン分解能を有する新規微生物
ＮＳ１５６菌及びその突然変異体。 【効果】 農医薬の中間原料として有用であるニコチン
酸誘導体〔II〕をロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕ
ｓ）属に属する微生物を利用して、３−ピコリン誘導体
から簡便に製造することが可能になった。
に属し、一般式〔Ｉ〕 【化１】 （式中、Ｘは水素，ハロゲン，アルキル基，あるいはア
ルコキシ基を示す）で表される３−ピコリン誘導体から
一般式〔II〕 【化２】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を生成せしめる能力を有する微生物の培養
液、該菌体または該菌体処理物を一般式〔Ｉ〕 【化３】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表される３−ピ
コリン誘導体に作用せしめ、一般式〔II〕 【化４】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を採取することを特徴とするニコチン酸誘導
体の製造法及びロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕ
ｓ）属に属し、３−ピコリン分解能を有する新規微生物
ＮＳ１５６菌及びその突然変異体。 【効果】 農医薬の中間原料として有用であるニコチン
酸誘導体〔II〕をロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕ
ｓ）属に属する微生物を利用して、３−ピコリン誘導体
から簡便に製造することが可能になった。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、微生物の培養液、該菌
体または該菌体処理物によるニコチン酸誘導体の製造法
及び３−ピコリン分解能を有する新規微生物に関するも
のである。ニコチン酸誘導体は農医薬の中間原料として
有用な物質である。
体または該菌体処理物によるニコチン酸誘導体の製造法
及び３−ピコリン分解能を有する新規微生物に関するも
のである。ニコチン酸誘導体は農医薬の中間原料として
有用な物質である。
【０００２】
【従来の技術】従来、３−ピコリンをニコチン酸に変換
する微生物として、ミコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ）属やノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）
属〔Ｉｚｖ．Ａｋａｄ．Ｎａｕｋ ＳＳＳＲ，Ｓｅｒ．
Ｂｉｏｌ．，１９６９，（５），６６０， Ｉｚｖ．Ａ
ｋａｄ．Ｎａｕｋ ＳＳＳＲ，Ｓｅｒ．Ｂｉｏｌ．，１
９７６，（６），８３４〕、シュードモナス（Ｐｓｅｕ
ｄｏｍｏｎａｓ）属〔特開平４−２２９１８５、特開平
５−７４９４〕等が知られている。また、３−ピコリン
を完全に分解する能力を有する微生物として純粋に分離
されたものは、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓ）属〔Ｐｒｉｋｌ．Ｂｉｏｋｈｉｍ．Ｍｉｋｒｏｂｉ
ｏｌ．，１７，３８０（１９８１）〕が知られている
が、他の微生物は知られていない。
する微生物として、ミコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ）属やノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）
属〔Ｉｚｖ．Ａｋａｄ．Ｎａｕｋ ＳＳＳＲ，Ｓｅｒ．
Ｂｉｏｌ．，１９６９，（５），６６０， Ｉｚｖ．Ａ
ｋａｄ．Ｎａｕｋ ＳＳＳＲ，Ｓｅｒ．Ｂｉｏｌ．，１
９７６，（６），８３４〕、シュードモナス（Ｐｓｅｕ
ｄｏｍｏｎａｓ）属〔特開平４−２２９１８５、特開平
５−７４９４〕等が知られている。また、３−ピコリン
を完全に分解する能力を有する微生物として純粋に分離
されたものは、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓ）属〔Ｐｒｉｋｌ．Ｂｉｏｋｈｉｍ．Ｍｉｋｒｏｂｉ
ｏｌ．，１７，３８０（１９８１）〕が知られている
が、他の微生物は知られていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】３−ピコリンをニコチ
ン酸に変換する場合、従来知られているミコバクテリウ
ム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ノカルディア
（Ｎｏｃａｒｄｉａ）属やシュードモナス（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ）属は、酵素の誘導や変換の際に難水溶性
のアルカンやトルエン、キシレン等を存在させる必要が
あった。本発明の目的は、酵素の誘導や変換の際に難水
溶性のアルカンやトルエン、キシレン等を必要としな
い、微生物を用いたニコチン酸誘導体の簡便な製造法を
提供することである。
ン酸に変換する場合、従来知られているミコバクテリウ
ム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ノカルディア
（Ｎｏｃａｒｄｉａ）属やシュードモナス（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ）属は、酵素の誘導や変換の際に難水溶性
のアルカンやトルエン、キシレン等を存在させる必要が
あった。本発明の目的は、酵素の誘導や変換の際に難水
溶性のアルカンやトルエン、キシレン等を必要としな
い、微生物を用いたニコチン酸誘導体の簡便な製造法を
提供することである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、微生物を
用いたニコチン酸誘導体の簡便な製造法を提供すべく、
鋭意検討した結果、３−ピコリン資化能を有し、ロドコ
ッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する新規微生
物が、ニコチン酸誘導体を効率よく生産することを見い
出し、本発明を完成した。即ち、本発明は、（１）ロド
コッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属し、一般式
〔Ｉ〕
用いたニコチン酸誘導体の簡便な製造法を提供すべく、
鋭意検討した結果、３−ピコリン資化能を有し、ロドコ
ッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する新規微生
物が、ニコチン酸誘導体を効率よく生産することを見い
出し、本発明を完成した。即ち、本発明は、（１）ロド
コッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属し、一般式
〔Ｉ〕
【化５】 （式中、Ｘは水素，ハロゲン，アルキル基，あるいはア
ルコキシ基を示す）で表される３−ピコリン誘導体から
一般式〔II〕
ルコキシ基を示す）で表される３−ピコリン誘導体から
一般式〔II〕
【化６】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を生成せしめる能力を有する微生物の培養
液、該菌体または該菌体処理物を一般式〔Ｉ〕
ン酸誘導体を生成せしめる能力を有する微生物の培養
液、該菌体または該菌体処理物を一般式〔Ｉ〕
【化７】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表される３−ピ
コリン誘導体に作用せしめ、一般式〔II〕
コリン誘導体に作用せしめ、一般式〔II〕
【化８】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を採取することを特徴とするニコチン酸誘導
体の製造法及び、（２）ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏ
ｃｃｕｓ）属に属し、３−ピコリン分解能を有する新規
微生物ＮＳ１５６菌及びその突然変異体である。
ン酸誘導体を採取することを特徴とするニコチン酸誘導
体の製造法及び、（２）ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏ
ｃｃｕｓ）属に属し、３−ピコリン分解能を有する新規
微生物ＮＳ１５６菌及びその突然変異体である。
【０００５】本発明の微生物は、ロドコッカス（Ｒｈｏ
ｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物であり、本発明者
らが新たに群馬県の土壌より分離した菌株ロドコッカス
エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）ＮＳ１
５６が好適に使用できる。ＮＳ１５６菌の菌学的性質は
以下の通りである。
ｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物であり、本発明者
らが新たに群馬県の土壌より分離した菌株ロドコッカス
エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）ＮＳ１
５６が好適に使用できる。ＮＳ１５６菌の菌学的性質は
以下の通りである。
【０００６】
【表１】 （ａ）形態及び生理学的性質 １）細菌の形 ： 最初、菌糸状に生育して
いたものが、徐々に分裂し、短桿菌状を呈する。 ２）細胞の多形性の有無 ： 有り ３）運動性の有無 ： 無し ４）胞子の有無 ： 無し ５）グラム染色性 ： 陽性 ６）抗酸性 ： 無し ７）集落の色 ： 肌色〜オレンジ ８）カタラーゼ ： ＋ ９）酸素に対する態度 ： 好気性 （ｂ）化学的性質 １）細胞壁のジアミノ酸 ： ｍｅｓｏ−ジアミノピメ
リン酸 ２）全菌体中の糖 ： アラビノース ＋ ガラクトース ＋ ３）グリコレート試験（Ｇｌｙｃｏｌａｔｅ ｔｅｓ
ｔ）：グリコリル型 ４）キノン類の分析 ： ＭＫ−９（Ｈ2 ） ５）ミコール酸の分析 ： 炭素数５６〜６２のミコ
ール酸を検出。二重結合数１〜４個
いたものが、徐々に分裂し、短桿菌状を呈する。 ２）細胞の多形性の有無 ： 有り ３）運動性の有無 ： 無し ４）胞子の有無 ： 無し ５）グラム染色性 ： 陽性 ６）抗酸性 ： 無し ７）集落の色 ： 肌色〜オレンジ ８）カタラーゼ ： ＋ ９）酸素に対する態度 ： 好気性 （ｂ）化学的性質 １）細胞壁のジアミノ酸 ： ｍｅｓｏ−ジアミノピメ
リン酸 ２）全菌体中の糖 ： アラビノース ＋ ガラクトース ＋ ３）グリコレート試験（Ｇｌｙｃｏｌａｔｅ ｔｅｓ
ｔ）：グリコリル型 ４）キノン類の分析 ： ＭＫ−９（Ｈ2 ） ５）ミコール酸の分析 ： 炭素数５６〜６２のミコ
ール酸を検出。二重結合数１〜４個
【０００７】以上の菌学的性質をバージーズ マニュア
ル オブ システマティック バクテリオロジー（BERG
EY'S MAMUAL OF Systematic Bacteriology）に基づ
いて検索した結果、ＮＳ１５６はロドコッカス（Ｒｈｏ
ｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物であると判断され
た。ＮＳ１５６菌が３−ピコリン分解能を有することは
本発明の微生物の特徴である。そこで本発明者らは、Ｎ
Ｓ１５６菌をロドコッカス エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏ
ｃｃｕｓ ｓｐ．）ＮＳ１５６と命名し、工業技術院生
命工学工業技術研究所に寄託した（ＦＥＲＭ Ｐ−１３
７０６）。本発明に従えば、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏ
ｃｏｃｃｕｓ）属菌を適当な培地で培養中、あるいは培
養後に得られた培養物を、３−ピコリン誘導体に作用さ
せて、ニコチン酸誘導体を製造することができる。
ル オブ システマティック バクテリオロジー（BERG
EY'S MAMUAL OF Systematic Bacteriology）に基づ
いて検索した結果、ＮＳ１５６はロドコッカス（Ｒｈｏ
ｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物であると判断され
た。ＮＳ１５６菌が３−ピコリン分解能を有することは
本発明の微生物の特徴である。そこで本発明者らは、Ｎ
Ｓ１５６菌をロドコッカス エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏ
ｃｃｕｓ ｓｐ．）ＮＳ１５６と命名し、工業技術院生
命工学工業技術研究所に寄託した（ＦＥＲＭ Ｐ−１３
７０６）。本発明に従えば、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏ
ｃｏｃｃｕｓ）属菌を適当な培地で培養中、あるいは培
養後に得られた培養物を、３−ピコリン誘導体に作用さ
せて、ニコチン酸誘導体を製造することができる。
【０００８】３−ピコリン誘導体に本微生物を作用させ
る方法は、本微生物を３−ピコリン誘導体を含む培地中
で培養してもよいし、本微生物の菌体または菌体処理物
を水溶液中で３−ピコリン誘導体に接触させてもよい。
本微生物を培養することにより３−ピコリン誘導体をニ
コチン酸誘導体に変換する方法としては、培養当初より
３−ピコリン誘導体を含有する培地で本発明の微生物を
培養してもよいし、培養途中で３−ピコリン誘導体を培
地に添加してもよい。本微生物の培養のために用いられ
る培地は本微生物が資化しうる炭素源、窒素源、無機イ
オンさらに必要ならば有機栄養源を含む通常の培地であ
る。炭素源としては、グルコース等の炭水化物、グリセ
ロール等のアルコール類、有機酸、その他が適宜使用さ
れる。窒素源としては、アンモニウム塩や硝酸塩、その
他が用いられる。無機イオンとしては、マグネシウムイ
オン、鉄イオン、銅イオン、リン酸イオン、その他が必
要に応じ適宜使用される。有機栄養源としては、ビタミ
ン、アミノ酸等およびこれらを含有する酵母エキス、ポ
リペプトン、肉エキス、その他が適宜用いられる。培養
は好気的条件下に、ｐＨ６ないし１０、温度２０ないし
４２℃の適当な範囲に制御しつつ行えば望ましい結果が
得られる。かくして１ないし２０日間も培養を行えば、
３−ピコリン誘導体は効率よくニコチン酸誘導体に変換
される。
る方法は、本微生物を３−ピコリン誘導体を含む培地中
で培養してもよいし、本微生物の菌体または菌体処理物
を水溶液中で３−ピコリン誘導体に接触させてもよい。
本微生物を培養することにより３−ピコリン誘導体をニ
コチン酸誘導体に変換する方法としては、培養当初より
３−ピコリン誘導体を含有する培地で本発明の微生物を
培養してもよいし、培養途中で３−ピコリン誘導体を培
地に添加してもよい。本微生物の培養のために用いられ
る培地は本微生物が資化しうる炭素源、窒素源、無機イ
オンさらに必要ならば有機栄養源を含む通常の培地であ
る。炭素源としては、グルコース等の炭水化物、グリセ
ロール等のアルコール類、有機酸、その他が適宜使用さ
れる。窒素源としては、アンモニウム塩や硝酸塩、その
他が用いられる。無機イオンとしては、マグネシウムイ
オン、鉄イオン、銅イオン、リン酸イオン、その他が必
要に応じ適宜使用される。有機栄養源としては、ビタミ
ン、アミノ酸等およびこれらを含有する酵母エキス、ポ
リペプトン、肉エキス、その他が適宜用いられる。培養
は好気的条件下に、ｐＨ６ないし１０、温度２０ないし
４２℃の適当な範囲に制御しつつ行えば望ましい結果が
得られる。かくして１ないし２０日間も培養を行えば、
３−ピコリン誘導体は効率よくニコチン酸誘導体に変換
される。
【０００９】一方、本微生物の菌体または菌体処理物を
水溶液中にて３−ピコリン誘導体と接触させて作用させ
る場合には、３−ピコリン誘導体と菌体または菌体処理
物を懸濁または溶解した水溶液中で温度１５〜４５℃、
好ましくは２５〜３５℃、ｐＨ５〜１０、好ましくは６
〜９に保ちつつ暫時撹拌または静置すればよい。３−ピ
コリン誘導体の濃度は０．０１〜５％、好ましくは０.
５％以下であり、３−ピコリン誘導体を反応の間追補添
加してもよい。菌体としては、菌体を含む培養液をその
まま用いてもよい。また、これを一旦培養液より分離し
て洗浄または洗浄せずに使用してもよい。このような菌
体を得る方法は前記の培地および培養方法がそのまま採
用できるが、培地にはさらに３−ピコリンを少量添加す
ることが望ましい。また、培養時間はこの場合、微生物
が十分増殖すればよいので、１５ないし７２時間程度で
培養を終えてもよい。水溶液には必要に応じて、グルコ
ース等の炭水化物、グリセロール等のアルコール類、有
機酸、あるいは金属イオン等が添加されると変換効率が
向上する場合がある。かくして１ないし２０日間も経過
すれば、水溶液中の３−ピコリン誘導体は効率よく、ニ
コチン酸誘導体に変換される。
水溶液中にて３−ピコリン誘導体と接触させて作用させ
る場合には、３−ピコリン誘導体と菌体または菌体処理
物を懸濁または溶解した水溶液中で温度１５〜４５℃、
好ましくは２５〜３５℃、ｐＨ５〜１０、好ましくは６
〜９に保ちつつ暫時撹拌または静置すればよい。３−ピ
コリン誘導体の濃度は０．０１〜５％、好ましくは０.
５％以下であり、３−ピコリン誘導体を反応の間追補添
加してもよい。菌体としては、菌体を含む培養液をその
まま用いてもよい。また、これを一旦培養液より分離し
て洗浄または洗浄せずに使用してもよい。このような菌
体を得る方法は前記の培地および培養方法がそのまま採
用できるが、培地にはさらに３−ピコリンを少量添加す
ることが望ましい。また、培養時間はこの場合、微生物
が十分増殖すればよいので、１５ないし７２時間程度で
培養を終えてもよい。水溶液には必要に応じて、グルコ
ース等の炭水化物、グリセロール等のアルコール類、有
機酸、あるいは金属イオン等が添加されると変換効率が
向上する場合がある。かくして１ないし２０日間も経過
すれば、水溶液中の３−ピコリン誘導体は効率よく、ニ
コチン酸誘導体に変換される。
【００１０】
【実施例】以下、実施例によって本発明を更に具体的に
説明する。本発明は、以下の実施例のみに限定されるも
のではなく、本発明の技術分野における通常の変更をす
ることができる。 実施例１ 常法に従い、酵母エキス１０. ０g ／l ，トリプトン１
０. ０g ／l ，ＮａＣｌ １０. ０g ／l ，ＣａＣｌ2
・ ２Ｈ2 Ｏ ０. ４mg／l ，Ｈ3 ＢＯ3 ０. ５mg／l ，
ＣｕＳＯ4 ・ ５Ｈ2 Ｏ ０. ０４mg／l ，ＫＩ ０. １
mg／l ，ＦｅＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ １. ０mg／l ，ＭｎＣ
ｌ2 ・ ４Ｈ2 Ｏ ０. ４mg／l ，ＺｎＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ
０. ４mg／l ，Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・ ２Ｈ2 Ｏ ０. ２mg
／l を含む培地（ｐＨ７. ０）を調製し、滅菌後滅菌済
１００ml容三角フラスコ（バッフル付）に２０ml分注し
た。２, ５−ルチジンを無菌的に８. ４ｍＭになるよう
に添加した。これにＬＢ寒天培地で３０℃にて培養した
ロドコッカス エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓ
ｐ．）ＮＳ１５６菌を接種し、３０℃で２３０時間振盪
培養を行なった後、培養液を高速液体クロマトグラフ法
により分析したところ、６ｍＭの６−メチルニコチン酸
が蓄積していた。収率は７１％であった。生成した６−
メチルニコチン酸の構造は、薄層クロマトグラフ法によ
る分取後、ＮＭＲ、質量スペクトル分析により確認し
た。
説明する。本発明は、以下の実施例のみに限定されるも
のではなく、本発明の技術分野における通常の変更をす
ることができる。 実施例１ 常法に従い、酵母エキス１０. ０g ／l ，トリプトン１
０. ０g ／l ，ＮａＣｌ １０. ０g ／l ，ＣａＣｌ2
・ ２Ｈ2 Ｏ ０. ４mg／l ，Ｈ3 ＢＯ3 ０. ５mg／l ，
ＣｕＳＯ4 ・ ５Ｈ2 Ｏ ０. ０４mg／l ，ＫＩ ０. １
mg／l ，ＦｅＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ １. ０mg／l ，ＭｎＣ
ｌ2 ・ ４Ｈ2 Ｏ ０. ４mg／l ，ＺｎＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ
０. ４mg／l ，Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・ ２Ｈ2 Ｏ ０. ２mg
／l を含む培地（ｐＨ７. ０）を調製し、滅菌後滅菌済
１００ml容三角フラスコ（バッフル付）に２０ml分注し
た。２, ５−ルチジンを無菌的に８. ４ｍＭになるよう
に添加した。これにＬＢ寒天培地で３０℃にて培養した
ロドコッカス エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓ
ｐ．）ＮＳ１５６菌を接種し、３０℃で２３０時間振盪
培養を行なった後、培養液を高速液体クロマトグラフ法
により分析したところ、６ｍＭの６−メチルニコチン酸
が蓄積していた。収率は７１％であった。生成した６−
メチルニコチン酸の構造は、薄層クロマトグラフ法によ
る分取後、ＮＭＲ、質量スペクトル分析により確認し
た。
【００１１】実施例２ 常法に従って、グルコース２. ０g ／l ，リン酸二ナト
リウム６. ０g ／l （別滅菌），リン酸一カリウム３.
０g ／l （別滅菌），３−ピコリン２. ０g ／l ，Ｍｇ
ＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ０. ５g ／l ，ＣａＣｌ2 ・ ２Ｈ2
Ｏ ４mg／l ，Ｈ3 ＢＯ3 ５mg／l ，ＣｕＳＯ4 ・ ５Ｈ
2 Ｏ ０. ４mg／l ，ＫＩ １mg／l ，ＦｅＳＯ4 ・ ７
Ｈ2 Ｏ １０mg／l ，ＭｎＣｌ2 ・ ４Ｈ2 Ｏ ４mg／l
，ＺｎＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ４mg／l ，Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・
２Ｈ2 Ｏ ２mg／l を含む培地（ｐＨ７. ０）を調製
し、滅菌済小型試験管に１ml分注した。これに上記組成
寒天培地で３０℃にて培養したロドコッカス エスピー
（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．） ＮＳ１５６菌を
接種し、３０℃で振盪培養した。培養２０時間後、培養
液のＴＬＣ分析を行ったところ、３−ピコリンは完全に
消失していた。
リウム６. ０g ／l （別滅菌），リン酸一カリウム３.
０g ／l （別滅菌），３−ピコリン２. ０g ／l ，Ｍｇ
ＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ０. ５g ／l ，ＣａＣｌ2 ・ ２Ｈ2
Ｏ ４mg／l ，Ｈ3 ＢＯ3 ５mg／l ，ＣｕＳＯ4 ・ ５Ｈ
2 Ｏ ０. ４mg／l ，ＫＩ １mg／l ，ＦｅＳＯ4 ・ ７
Ｈ2 Ｏ １０mg／l ，ＭｎＣｌ2 ・ ４Ｈ2 Ｏ ４mg／l
，ＺｎＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ４mg／l ，Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・
２Ｈ2 Ｏ ２mg／l を含む培地（ｐＨ７. ０）を調製
し、滅菌済小型試験管に１ml分注した。これに上記組成
寒天培地で３０℃にて培養したロドコッカス エスピー
（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．） ＮＳ１５６菌を
接種し、３０℃で振盪培養した。培養２０時間後、培養
液のＴＬＣ分析を行ったところ、３−ピコリンは完全に
消失していた。
【００１２】実施例３ 常法に従って、グルコース２. ０g ／l ，リン酸二ナト
リウム６. ０g ／l （別滅菌），リン酸一カリウム３.
０g ／l （別滅菌），３−ピコリン２. ０g ／l ，Ｍｇ
ＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ０. ５g ／l ，ＣａＣｌ2 ・ ２Ｈ2
Ｏ ４mg／l ，Ｈ3 ＢＯ3 ５mg／l ，ＣｕＳＯ4 ・ ５Ｈ
2 Ｏ ０. ４mg／l ，ＫＩ １mg／l ，ＦｅＳＯ4 ・ ７
Ｈ2 Ｏ １０mg／l ，ＭｎＣｌ2 ・ ４Ｈ2 Ｏ ４mg／l
，ＺｎＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ４mg／l ，Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・
２Ｈ2 Ｏ ２mg／l を含む培地（ｐＨ７. ０）を調製
し、滅菌済１００ml容三角フラスコ（バッフル付）に２
０ml分注した。これにＬＢ寒天培地で３０℃にて培養し
たロドコッカス エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ
ｓｐ．） ＮＳ１５６菌を接種し、３−ピコリンが消失
するまで３０℃で振盪培養した。培養後、菌体を遠心分
離により採取し、１０mlの０.１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
７. ０）で一回洗浄し、菌体を集めた。この洗浄菌体を
２０mMの３−ピコリンを含む０. １Ｍリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７.０）１０mlに添加して、３０℃で振盪し、反応を
行った。反応２８時間後、反応液を高速液体クロマトグ
ラフ法により分析したところ、３−ピコリンは完全に消
失していた。
リウム６. ０g ／l （別滅菌），リン酸一カリウム３.
０g ／l （別滅菌），３−ピコリン２. ０g ／l ，Ｍｇ
ＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ０. ５g ／l ，ＣａＣｌ2 ・ ２Ｈ2
Ｏ ４mg／l ，Ｈ3 ＢＯ3 ５mg／l ，ＣｕＳＯ4 ・ ５Ｈ
2 Ｏ ０. ４mg／l ，ＫＩ １mg／l ，ＦｅＳＯ4 ・ ７
Ｈ2 Ｏ １０mg／l ，ＭｎＣｌ2 ・ ４Ｈ2 Ｏ ４mg／l
，ＺｎＳＯ4 ・ ７Ｈ2 Ｏ ４mg／l ，Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・
２Ｈ2 Ｏ ２mg／l を含む培地（ｐＨ７. ０）を調製
し、滅菌済１００ml容三角フラスコ（バッフル付）に２
０ml分注した。これにＬＢ寒天培地で３０℃にて培養し
たロドコッカス エスピー（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ
ｓｐ．） ＮＳ１５６菌を接種し、３−ピコリンが消失
するまで３０℃で振盪培養した。培養後、菌体を遠心分
離により採取し、１０mlの０.１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
７. ０）で一回洗浄し、菌体を集めた。この洗浄菌体を
２０mMの３−ピコリンを含む０. １Ｍリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７.０）１０mlに添加して、３０℃で振盪し、反応を
行った。反応２８時間後、反応液を高速液体クロマトグ
ラフ法により分析したところ、３−ピコリンは完全に消
失していた。
【００１３】
【発明の効果】本発明によって、農医薬の中間原料とし
て有用であるニコチン酸誘導体〔II〕をロドコッカス
（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物を利用し
て、３−ピコリン誘導体から簡便に製造することが可能
になった。
て有用であるニコチン酸誘導体〔II〕をロドコッカス
（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属に属する微生物を利用し
て、３−ピコリン誘導体から簡便に製造することが可能
になった。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 児嶋 高和 神奈川県小田原市高田字柳町345 日本曹 達株式会社小田原研究所内
Claims (2)
- 【請求項１】ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）
属に属し、一般式〔Ｉ〕 【化１】 （式中、Ｘは水素，ハロゲン，アルキル基，あるいはア
ルコキシ基を示す）で表される３−ピコリン誘導体から
一般式〔II〕 【化２】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を生成せしめる能力を有する微生物の培養
液、該菌体または該菌体処理物を一般式〔Ｉ〕 【化３】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表される３−ピ
コリン誘導体に作用せしめ、一般式〔II〕 【化４】 （式中、Ｘは前記と同じ意味を示す）で表されるニコチ
ン酸誘導体を採取することを特徴とするニコチン酸誘導
体の製造法。 - 【請求項２】ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）
属に属し、３−ピコリン分解能を有する新規微生物ＮＳ
１５６菌及びその突然変異体。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19321293A JPH0723792A (ja) | 1993-07-08 | 1993-07-08 | ニコチン酸誘導体の製造法及び新規微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19321293A JPH0723792A (ja) | 1993-07-08 | 1993-07-08 | ニコチン酸誘導体の製造法及び新規微生物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0723792A true JPH0723792A (ja) | 1995-01-27 |
Family
ID=16304173
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19321293A Pending JPH0723792A (ja) | 1993-07-08 | 1993-07-08 | ニコチン酸誘導体の製造法及び新規微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0723792A (ja) |
-
1993
- 1993-07-08 JP JP19321293A patent/JPH0723792A/ja active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH067157A (ja) | シュードグルコノバクター属酸化菌 | |
| US4624920A (en) | Process for the preparation of dicarboxylic acid using microorganism | |
| US3234105A (en) | Method for producing 2-keto-lgulonic acid | |
| JPH04365494A (ja) | ヒドロキシル化されたピラジン誘導体を製造するための微生物学的方法 | |
| JPH0738796B2 (ja) | 醗酵法による２−ケト−ｄ−グルカル酸の製造法 | |
| US4933289A (en) | Biologically pure cultures of Pseudomonas sorbosoxidans useful for producing 2-keto-L-gulonic acid | |
| US4892823A (en) | Method for producing 2-keto-L-gulonic acid | |
| KR100248277B1 (ko) | 6-히드록시 질소 함유 6 원환 화합물 제조방법 | |
| JPH0723792A (ja) | ニコチン酸誘導体の製造法及び新規微生物 | |
| JPS61265097A (ja) | 発酵法によるメナキノン−４の製造法 | |
| US4430429A (en) | Production of vitamin B12 -activity substances | |
| JPH08512205A (ja) | アルコール、アルデヒド及びカルボン酸を生物工学的に製造する方法 | |
| JP3754785B2 (ja) | ３−ヒドロキシ含窒素六員環化合物の製造方法 | |
| JPWO1999007872A1 (ja) | ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の製造法 | |
| WO2000043533A1 (fr) | Procede de production d'inhibiteurs de la hmg coa-reducatase | |
| JP2563074B2 (ja) | 天然型β−フェネチルアルコールの製造法 | |
| JPH06303967A (ja) | 新規微生物及びこれを用いるヌートカトンの製造法 | |
| US5763232A (en) | Method for producing 3-hydroxy nitrogen-containing six-membered cylic compound | |
| JPS6221509B2 (ja) | ||
| JP3413294B2 (ja) | ２，５−ジヒドロキシピリジンの製造法および２，５−ジヒドロキシピリジン生産菌 | |
| JP2708536B2 (ja) | ロドコッカス属細菌及びそれを用いる２―ヒドロキシ酪酸の製造法 | |
| JPH0378106B2 (ja) | ||
| JPH1014591A (ja) | ２−ヒドロキシ含窒素６員環化合物の製造方法 | |
| JP3020266B2 (ja) | ホスホマイシンの製造方法 | |
| JP3743172B2 (ja) | Ｌ−ホモシステインの製造方法 |