JPH06506236A - 非経口的に適用可能な腎臓診断剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発熱物質不含の良水溶性フルクタンの製造方法ならびにかかるフルクタンを含有 する腎臓診断剤本発明は、発熱物質不含の良水溶性フルクタンの製造方法、なら びにかかるフルクタンを主剤とする非経口的に適用可能な腎臓診断剤に関する。

フルクタン（ポリフルクトサンとも呼ばれる）は、基本分子サッカロースに直鎖 または分枝鎖のフルクトース鎖をグラフトして構成されたオリゴ糖類または多糖 類である。枝分れおよび重合度により、たとえば水溶解度のようなその物理的性 質に著しい相違が出現しつる。多数のフルクタンは植物内に、貯蔵炭水化物とし て蓄積され、なかんずくキク科、キキョウ科、イネ科およびユリ科の地下部分中 に存在する。

フルクタンは、殊に糸球体の濾過率を測定するため、腎臓診断剤中に使用される 。このためには通常イヌリン、キクジノヤ、ダリャおよびキクイモのような種々 のキク科の根からのフルクタンが標準試験物質として使用される（＾Ｎ、　Ｒｉ ｃｈａｒｄ、　Ｂ、　Ｂ、　１ｅｓｔｆａ１１．　Ｐ、　Ａ、　ＢｏｔｔＰｒｏ ｃ、　Ｓａｃ、　ｅｘｐ、　Ｂｉｏｌ、　、　＝　ニーヨーク、第３２巻（１９ ３４年）、第７３頁およびＯ，５ｃｈｕｅｃｋ：Ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ　 Ｋｉｄｎｅｙ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ、Ｍａｒｔｉｎｕｓ　Ｎ１ｊｎｈｏｆｆ出版、 ボストン１９８４年、第９頁以降）。イヌリンは、非経口的適用後は、物質代謝 によって変化せず、器管内に貯蔵されないで、腎臓糸球体により濾過され、細管 中で再び再吸収されないという利点を有する（ＬＡ、　５ｈａｎｎｏｎ。

Ｈ，ｆ、　Ｓｍ１ｔｈ：Ｊ、　Ｃ１１ｎ、　Ｉｎｖ、　、第１４巻（１９３５年 ）、第３９３頁）。しかしイヌリンは、日常の臨床的常套手段のためには水に極 めて難溶であり、従って水性製剤が貯蔵の際に晶出し、適用前に長時間加熱する ことによって改めて溶解しなければならないという欠点を有する。しかし、この 手段によっても、イヌリンは熱の作用時間により加水分解作用を受け、場合によ りフルクトースにまで分解される。もう１つの欠点は、不十分な溶解の場合、不 溶のイヌリン粒子の残分が製剤中に残存し、容易に認められず、注射後に重大な 循環障害を惹起しうるということである。従って、オーストリア国特許第３０４ ７６９号明細書には、イヌリンを他の水溶性フルクタン、しかもユリ科、ヒガン バナ科およびイネ科からの植物の貯蔵器管からのフルクタン、たとえばンニスト リンおよびフレインをイヌリンの代替物として使用することが提案されている。

これらは、イヌリンと同様、約１０〜４０フルクトース単位に構成されており、 約１６００〜６５００の分子量に相 当する。

従前の文献（０，Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇ：Ｈｏｐｐｅ　５ｅｙｌｅｒｓのｚ 、ｐｈｙｓｔｏｌ、　Ｃｈｅｗ、　、第３巻（１９７９年）、第１１２頁および Ｇ、Ｋｌｅｉｎ：Ｈａｎｄｂｕｃｈ　ｄｅｒ　Ｐｆｌａｎｚｅｎａｎａｌｙｓｅ 、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ１９３２年、１部、第８６６〜第８７３頁）では、これらの フルクタンは、適当な植物組織の水抽出物から、たとえば鉛塩のような沈殿剤で 精製後、メタノール　・、エタノールまたはアセトンのような有機溶剤で数回繰 返し再沈することによって得られる。上記に引用したオーストリア国特許明細書 は有害な重金属塩の使用を、ｐＨＨＩ３０〜３．０の酸性媒体中での上記溶剤で の沈殿によって代える。この場合、易加水分解性フルクタン鎖の部分的分解、平 均分子量の低下および収率の損失を考慮しなければならない。さらに、従来公知 のすべての方法においては可燃性および爆発の危険のため費用のかかる安全手段 が必要であり、製品中に好ましくない溶剤残分を考慮しなければならない。

従って、本発明の目的は、有機溶剤または有害な重金属塩を使用する必要がなく かつ収率の改善が達成される、フルクタンの製造方法を提供することである。

さらに、本方法は発熱物質の分離も確保されるので、汚染および感染された原料 も使用することができる。

この目的は本発明によれば、フルクタン含有植物部分から自体公知の方法で得ら れる水性抽出物に、高分子の炭水化物およびタンパク質、発熱物質ならびに場合 により他の抽出物を保持するが、フルクタンをなお透過する第１膜での限外濾過 を実現することを特徴とする、良木溶性で発熱物質不含のフルクタンの製造方法 によって達成される。こうして得られた限外濾過物を用いて、フルクタンを保持 するが、塩、単糖類および低分子オリゴ糖類を透過する膜での第２の限外濾過を 実施する。こうして得られたフルクタンは発熱物質および有機溶剤を含有しない 。フルクタンが含有されている本発明による第２の限外濾過の保持物は、直接腎 臓診断剤に処理するかまたは自体公知の方法でさらに精製し、単離することもで きる。これは、有利には、イオン交換体であらかじめ精製するかまたは精製せず に、溶液を乾燥することによ７て実施される。

とくに、本発明方法において第１の限外濾過に、３００００〜１０００００ドル トン、殊に３００００〜５００００ドルトンの排除限度を有するような膜が使用 される。かかる膜によって、タンパク質、発熱物質および高分子多糖類は有効に 保持される。濾液は、抽出されたフルクタンを低分子随伴物質と一緒に完全に含 有する。第２の限外濾過には、本発明によりと（に、８００〜２０００ドルトン 、殊に１０００〜１５００ドルトンの排除限度を有するような膜が使用される。

かかる膜によって、単離すべきフルクタンは保持されるが、塩類、七ツマ−およ びオリゴマーの炭水化物のような望ましくない低分子物質は濾液と共に除去され る。次いで、十分に精製されたフルクタンは、場合により水供給下の透析によっ て保持物中に好収率で存在する。引き続き、生成物はなお、付加的脱色および／ または脱塩工程で自体公知の方法でさらに精製することができる。

適当な限外濾過膜は、たとえば第１膜にはバダーリン社（Ｆｉｒｍａ　Ｐａｔｅ ｒｓｏｎ、キャンディ−１英国）の筒形膜であり、第２膜にはデサリネーンヲン 　システムズ社（Ｆｉｒｓａ　Ｄｅｓａｌｉｎａｔｉｏｎ　５ｙｓｔｅ＠ｓ、キ ャリフ、米国）のらせん形膜である。

こうして得られた純粋なフルクタン溶液は、直接に所望濃度に調節し、アンプル および注入びんのような滅菌可能な容器に充填するかまたは慎重に乾燥し、あと での使用のために保存することができる。慎重な乾燥法としては、本発明方法に は凍結乾燥、真空乾燥または噴霧乾燥が適当である。

また、本発明は、少なくとも１種の本発明により製造したフルクタンを浸透作用 のある、生理的認容性の緩衝部質と一緒に含有する腎臓診断剤に関する。緩衝液 のｐＨは５．０〜７．０の間、とくに６．０〜６゜５の間にあり、２５０〜３５ ０、殊に２８０〜３２０諺オスモル／に９　Ｈ，Ｏの浸透性が達成されるような 量で腎臓診断剤中に含有されている。

生理的に認容性の緩衝剤としては本発明によれば弱酸、殊に弱有機酸、ならびに そのアルカリまたはアルカリ土類金属塩の混合物が使用される。望ましい酸は酢 酸および乳酸およびそのナトリウム塩である。本発明によれば、認容性緩衝剤と して弱塩基、殊に有機塩基、およびその塩、とくにその塩酸塩を使用することも 可能である。望ましい塩基はトリエタノールアミンおよび塩基性アミノ酸である 。

本発明による腎臓診断剤は、通常、他の添加物を有しないイヌリン、ないしは水 溶性フルクタンの滅菌水溶液からなる先行技術の製剤とは異なり、異常に良好な 相容性および保存性を有する。

先行技術の腎臓診断剤においては製剤を迅速に適用する場合、疼痛および溶血の 危険が生じる。さらに、かかる系では高温滅菌の間および温かい環境中で長（貯 蔵する場合、ｐＨ値の低下が起き、フルクタンの強い分解が生じることが判明し た。

本発明を次の実施例につき詳説する。

例１ ニンニクからのフルクタン（シニストリン）の製造市販の乾燥ニンニク粒１０に ９を脱塩水３０７中の亜硫酸ナトリウム１０ｇの溶液と共に均一に撹拌し、密閉 容器中で２４時間膨潤させた。この物質をパーコレータ中で脱塩水で、濾液１０ ０１が存在するまで、流量４１／　ｈで抽出した。このものを、５００００ドル トンの排除限度を有する現外濾適用巻きモジュール１を通して濾過し、濾液を中 間容器を経て直ちに再び、１０００ドルトンの排除限度を有する限外濾過巻きモ ジュール２に装入した。全抽出物がモジュール１に装入された後、水約５１で後 洗浄し、モジュール１の保持物を捨てた。モジュール２の保持物を、濾液容積を 脱塩水により連続的に置換しながら、濾液中の導電率が２００μｓ／ｃｍよりも 小さくなるまで透析濾過した。

塩類、モノマーおよびオリゴマーの炭水化物および他の低分子物質を含有するモ ジュール２のすべての濾液を捨てた。保持物は、フルクタン７．４％を有する既 に非常に純粋な溶液５５＆ｇ（乾燥物４．０７＆ｇ相当）からなっていた。痕跡 の悪臭および着色物質を除去してさらに精製するために、活性炭５０９を混入し 、１時間の作用時間後に、活性炭を分離するために後洗浄下に濾過層に通して濾 過した。無色無臭の濾液を、真空中ンロツブの軟度になるまで濃縮し、タブに入 れ真空乾燥器中で８０℃で乾燥して白色の泡状物を得た。

純粋および充填した後の収率　３．９５＆ｇ比旋光［α］、＝３９．０°　（ｃ 　＝　１０　；　ＨｚＯ）分子量Ｍ　ｗ　（ゲル浸透クロマトグラフィー）＝３ ６５０ヨーロッパ薬局方によるウサギでの試験において、物質は発熱物質不含で あることが立証された。

例２ 赤色海葱からのフルクタン（シニストリン）の製造市販の乾燥赤色海葱１ａｋｅ を粗砕し、例１におけるように抽出および２回限外濾過を実施した。保持物は、 フルクタン９．０％を有する弱赤色の溶液４９　ＪＩ９　（感想物４．４１Ｊ１ ９）に相当）がらなっていた。

さらに精製するために、溶液を、強酸性Ｈ４型の陽イオン交換体およびＯＨ−型 の中強度の塩基性陰イオン交換体それぞれ２００ｍ／からなる混合層交換体系に 装入した。完全に無色の溶液を、例１におけるように真空中で濃縮した後に乾燥 した。

粉砕および充填した後の収率　４，２ｋｑ比旋光［α］。＝−３９，５６（ｃ　 ＝　１０　：　Ｈ２０）分子量Ｍｗ　（ゲル浸透クロマトグラフィー）＝３８２ ０ヨーロンパ薬局方によるウサギでの試験において、物質は発熱物質不含である ことが立証された。

例３ 非経口適用のため乳酸塩ｌ！衝した等張腎臓診断剤の製造 ＤＡ８９　５０％の乳酸ナトリウム溶液１３．４９を注射のため蒸留水７００ｓ ／と混合し、例１により得たニンニクのフルクタン２５０ｇを完全に溶解するま で撹拌混入し、０．１０のカセイソーダ６．８＋１’の添加によりｐＨ値を６． ３０に調節した。

最後に、蒸留水で１１にした。

この溶液を除菌のため０．２μのメンブランフィルタ−を通して濾過し、２０■ ｌ宛アンプルに充填し、アンプルを密閉し、１２１℃で８分間滅菌した。発熱物 質不含の無色の滅菌溶液が得られ、この溶液はヒトおよび動物に静脈内注射した 場合、反応および疼痛なしに認容され、すべての品質上の要求を満足した。

浸透性（凝固点法）：　３１１　ｍ　オスモｈ７’ｋｇ　Ｈ２０例４ 非経口的適用のための、酢酸塩緩衝の等張腎臓診断剤の製造 酢酸ナトリウム３水和物８．Ｏｙに、注射のため蒸留水７００　ｍｌを混合し、 例２により得た海葱からのフル。

クタン２５０ｇを完全に溶解するまで撹拌混入し、１゜のカセイソーダ９．０ｍ ｌの添加によりｐＨ値を６．３０に調節した。

最後に、除菌のため０．２μのメンブランフィルタ−に通して濾過し、２０ｚｌ 宛アンプルに充填し、アンプルを密閉し、１２１℃で８分間滅菌した。発熱物質 不含の無色の滅菌溶液が得られ、該溶液はヒトおよび動物に静脈内注射の際反応 および疼痛なしに認容され、かつすべての品質上の要求を満足した。

浸透性（凝固点法）＋　３０３．オスモＪ！ｖ　／　４９　Ｈｚ　Ｏ国際調査報 告 １！瞥嚇噸−−１−・−１−１１−９１喝１噸＾咄１ｉＩ−−噌ド曙−ＰＣＴ／ ＥＰ９２１０Ｃ１２０国際調査報告 フロントページの続き （８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＳＥ）、０Ａ（ＢＦ 、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ、ＣＩ、ＣＭ、ＧＡ、ＧＮ、ＭＬ、ＭＲ，ＳＮ、ＴＤ、ＴＧ ）、ＡＴ、　ＡＵ、　ＢＢ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ、　ＣＨ，Ｃ３，ＤＥ。

ＤＫ、　ＥＳ、　ＦＩ、　ＧＢ、　ＨＵ、ＪＰ、　ＫＰ、　ＫＲ，ＬＫ、　ＬＵ 、　ＭＧ、　ＭＮ、　ＭＷ、　ＮＬ、　ＮＯ，ＰＬ、Ｒ○、　ＲＵ、　ＳＤ、　 ＳＥ、　ＵＳ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．フルクタン含有植物部分を水で自体公知の方法で抽出することにより発熱物 質不含の良水溶性フルクタンを製造する方法において、水性抽出物を、高分子炭 水化物およびタンパク質を保持するが、フルクタンを透過する第１膜で限外濾過 し、次いで濾液を、フルクタンを保持するが、塩類、単糖類および低分子オリゴ 糖類を透過する第２膜で限外濾過することを特徴とする発熱物質不含の良水溶液 フルクタンの製造方法。 ２．３００００〜１０００００の間にある分子排除範囲を有する第１膜を使用す ることを特徴とする請求項１記載の方法。 ３．３００００〜５００００の間にある分子排除範囲を有する第１膜を使用する ことを特徴とする請求項１または２記載の方法。 ４．８００〜２０００の間にある分子排除範囲を有する第２膜を使用することを 特徴とする請求項１から３までのいずれか１項記載の方法。 ５．１０００〜１５００の間のある分子排除範囲を有する第２膜を使用すること を特徴とする請求項１から４までのいずれか１項記載の方法。 ６．第２限外濾過の保持物を活性炭および／またはイオン交換体でさらに精製す ることを特徴とする請求項１から５までのいずれか１項記載の方法。 ７．得られる溶液を蒸発濃縮し、乾燥することを特徴とする請求項１から６まで のいずれか１項記載の方法。 ８．フルクタン含有植物部分としてユリ科、ヒガンバナ科およびイネ科の貯蔵器 管を使用することを特徴とする請求項１から７までのいずれか１項記載の方法。 ９．フルクタンとしてシニストリンを使用することを特徴とする請求項１から７ までのいずれか１項記載の方法。 １０．請求項１から９までのいずれか１項記載の方法により得られるフルクタン 、および５．０〜７．０のｐＨを有する生理的に懸念のない緩衝系を、完成溶液 が血液等張性であるような量で含有することを特徴とする非経口的に適用可能な 腎臓診断剤。 １１６．０〜６．５のｐＨを有することを特徴とする請求項１０記載の非経口的 に適用可能の腎臓診断剤。 １２．緩衝系が生理的に懸念のない有機酸およびそのアルカリ塩および／または アルカリ土類塩からなることを特徴とする請求項１０または１１記載の腎臓診断 剤。 １３．緩衝系として乳酸および乳酸ナトリウムを含有することを特徴とする請求 項１０から１２までのいずれか１項記載の腎臓診断剤。 １４．緩衝系として酢酸および酢酸ナトリウムを含有することを特徴とする請求 項１０から１２までのいずれか１項記載の腎臓診断剤。 １５．緩衝系として生理的に懸念のない有機塩基およびその塩を含有することを 特徴とする請求項１０および１１のいずれか１項記載の腎臓診断剤。 １６．緩衝系がトリエタノールアミンおよびその塩酸塩であることを特徴とする 請求項１５記載の腎臓診断剤。 １７．緩衝系が塩基性アミノ酸およびその塩酸塩であることを特徴とする請求項 １０，１１および１５のいずれか１項記載の腎臓診断剤。 １８．塩基性アミノ酸がりシンおよび／またはオルニチンであることを特徴とす る請求項１７記載の腎臓診断剤。 １９．緩衝系を、完成溶液が２５０〜３５０ｍオスモル／ｋｇＨ２Ｏの浸透性を 有するような濃度で含有することを特徴とする請求項１０から１８までのいずれ か１項記載の腎臓診断剤。 ２０．浸透性が２８０〜３２０ｍオスモル／ｋｇＨ２Ｏであることを特徴とする 請求項１９記載の腎臓診断剤。