JPH0591886A - ８，１１−エイコサジエン酸及びこれを含有する脂質の製造方法 - Google Patents
８，１１−エイコサジエン酸及びこれを含有する脂質の製造方法Info
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- JPH0591886A JPH0591886A JP3251957A JP25195791A JPH0591886A JP H0591886 A JPH0591886 A JP H0591886A JP 3251957 A JP3251957 A JP 3251957A JP 25195791 A JP25195791 A JP 25195791A JP H0591886 A JPH0591886 A JP H0591886A
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6436—Fatty acid esters
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 ８，１１−エイコサジエン酸及びこれを含有
する脂質の新規な製造方法を提供する。 【構成】 オメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有する
微生物を、Δ５不飽和化酵素阻害剤を添加した培地で培
養するか、あるいは該微生物が培養されている培養液に
Δ５不飽和化酵素阻害剤を添加してさらに培養すること
により、８，１１−エイコサジエン酸または８，１１−
エイコサジエン酸を含有する脂質を生成せしめ、そして
８，１１−エイコサジエン酸又はこれを含有する脂質を
採取することを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸
又はこれを含有する脂質の製造方法。
する脂質の新規な製造方法を提供する。 【構成】 オメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有する
微生物を、Δ５不飽和化酵素阻害剤を添加した培地で培
養するか、あるいは該微生物が培養されている培養液に
Δ５不飽和化酵素阻害剤を添加してさらに培養すること
により、８，１１−エイコサジエン酸または８，１１−
エイコサジエン酸を含有する脂質を生成せしめ、そして
８，１１−エイコサジエン酸又はこれを含有する脂質を
採取することを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸
又はこれを含有する脂質の製造方法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はオメガ９系高度不飽和脂
肪酸生産能を有する微生物を利用した発酵法による８，
１１−エイコサジエン酸またはこれを含有する脂質の製
造方法に関する。
肪酸生産能を有する微生物を利用した発酵法による８，
１１−エイコサジエン酸またはこれを含有する脂質の製
造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】オメガ９系高度不飽和脂肪酸、例えばミ
ード酸、８，１１−エイコサジエン酸等は、必須脂肪酸
欠乏に陥った動物組織の構成脂肪酸のひとつとして存在
することが知られている。しかしながら、その含量はわ
ずかであるため単離精製は大変困難である。また微生物
界におけるその存在は、現在のところ全く知られていな
い。これらの高度不飽和脂肪酸は生体内でロイコトリエ
ン３グループの前駆体になることが可能で、その生理活
性が大いに期待される。このため８，１１−エイコサジ
エン酸を大量に製造する方法を開発することが強く望ま
れている。
ード酸、８，１１−エイコサジエン酸等は、必須脂肪酸
欠乏に陥った動物組織の構成脂肪酸のひとつとして存在
することが知られている。しかしながら、その含量はわ
ずかであるため単離精製は大変困難である。また微生物
界におけるその存在は、現在のところ全く知られていな
い。これらの高度不飽和脂肪酸は生体内でロイコトリエ
ン３グループの前駆体になることが可能で、その生理活
性が大いに期待される。このため８，１１−エイコサジ
エン酸を大量に製造する方法を開発することが強く望ま
れている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】従って本発明は、安価
な常用の培地を用い、Δ５不飽和化酵素阻害剤等の添加
を併用して、簡便に効率よく８，１１−エイコサジエン
酸及び８，１１−エイコサジエン酸含有油脂を製造する
方法を提供しようとするものである。
な常用の培地を用い、Δ５不飽和化酵素阻害剤等の添加
を併用して、簡便に効率よく８，１１−エイコサジエン
酸及び８，１１−エイコサジエン酸含有油脂を製造する
方法を提供しようとするものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者等は上記の目的
を達成するため種々研究した結果、オメガ９系高度不飽
和脂肪酸生産能を有する微生物を、Δ５不飽和化酵素阻
害剤等を添加した培地で培養するとミード酸の割合が下
がり、８，１１−エイコサジエン酸の割合が上昇するこ
とを見出し、本発明を完成するに至った。
を達成するため種々研究した結果、オメガ９系高度不飽
和脂肪酸生産能を有する微生物を、Δ５不飽和化酵素阻
害剤等を添加した培地で培養するとミード酸の割合が下
がり、８，１１−エイコサジエン酸の割合が上昇するこ
とを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００５】従ってこの発明は、オメガ９系高度不飽和
脂肪酸生産能を有する微生物を、Δ５不飽和化酵素阻害
剤を添加した培地で培養するか、あるいは該微生物が培
養されている培養液にΔ５不飽和化酵素阻害剤を添加し
てさらに培養することにより、８，１１−エイコサジエ
ン酸または８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質
を生成せしめ、そして８，１１−エイコサジエン酸を採
取することを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸の
製造方法；及びオメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有
する微生物を、Δ５不飽和化酵素阻害剤を添加した培地
で培養するか、あるいは該微生物が培養されている培養
液にΔ５不飽和化酵素阻害剤を添加してさらに培養し、
８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質を採取する
ことを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸を含有す
る脂質の製造方法を提供しようとするものである。
脂肪酸生産能を有する微生物を、Δ５不飽和化酵素阻害
剤を添加した培地で培養するか、あるいは該微生物が培
養されている培養液にΔ５不飽和化酵素阻害剤を添加し
てさらに培養することにより、８，１１−エイコサジエ
ン酸または８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質
を生成せしめ、そして８，１１−エイコサジエン酸を採
取することを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸の
製造方法；及びオメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有
する微生物を、Δ５不飽和化酵素阻害剤を添加した培地
で培養するか、あるいは該微生物が培養されている培養
液にΔ５不飽和化酵素阻害剤を添加してさらに培養し、
８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質を採取する
ことを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸を含有す
る脂質の製造方法を提供しようとするものである。
【０００６】この発明はさらに、オメガ９系高度不飽和
脂肪酸生産能を有する微生物を、ゴマ油、落花生油、ゴ
マ油に対して実質的に非混和性である有機溶媒によりゴ
マ油から抽出した抽出物、ゴマ種子の溶剤抽出物、五加
皮の抽出物、桐木の抽出物、白果樹皮の抽出物、ヒハツ
の抽出物、細辛の抽出物、タラゴン（Ｔａｒｒａｇｏ
ｎ）の抽出物、イノンド種子（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）の
抽出物、パセリ（Ｐａｒｓｌｅｙ）の抽出物、ウコン
（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）の抽出物、ナツメッグ（Ｎｕｔｍ
ｅｇ）の抽出物を単独でまたは組み合せて添加した培地
で培養するか、あるいは該微生物が培養されている培養
液にゴマ油、落花生油、ゴマ油に対して実質的に非混和
性である有機溶媒によりゴマ油から抽出した抽出物、ゴ
マ種子の溶剤抽出物、五加皮の抽出物、桐木の抽出物、
白果樹皮の抽出物、ヒハツの抽出物、細辛の抽出物、タ
ラゴン（Ｔａｒｒａｇｏｎ）の抽出物、イノンド種子
（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）の抽出物、パセリ（Ｐａｒｓｌ
ｅｙ）の抽出物、ウコン（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）の抽出
物、ナツメッグ（Ｎｕｔｍｅｇ）の抽出物を添加してさ
らに培養することにより、８，１１−エイコサジエン酸
または８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質を生
成せしめ、そして８，１１−エイコサジエン酸を採取す
ることを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸の製造
方法；及びオメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有する
微生物を、ゴマ油、落花生油、ゴマ油に対して実質的に
非混和性である有機溶媒によりゴマ油から抽出した抽出
物、ゴマ種子の溶剤抽出物、五加皮の抽出物、桐木の抽
出物、白果樹皮の抽出物、ヒハツの抽出物、細辛の抽出
物、タラゴン（Ｔａｒｒａｇｏｎ）の抽出物、イノンド
種子（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）の抽出物、パセリ（Ｐａｒ
ｓｌｅｙ）の抽出物、ウコン（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）の抽
出物、ナツメッグ（Ｎｕｔｍｅｇ）の抽出物を単独でま
たは組み合せて添加した培地で培養するか、あるいは該
微生物が培養されている培養液にゴマ油、落花生油、ゴ
マ油に対して実質的に非混和性である有機溶媒によりゴ
マ油から抽出した抽出物、ゴマ種子の溶剤抽出物、五加
皮の抽出物、桐木の抽出物、白果樹皮の抽出物、ヒハツ
の抽出物、細辛の抽出物、タラゴン（Ｔａｒｒａｇｏ
ｎ）の抽出物、イノンド種子（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）の
抽出物、パセリ（Ｐａｒｓｌｅｙ）の抽出物、ウコン
（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）の抽出物、ナツメッグ（Ｎｕｔｍ
ｅｇ）の抽出物を添加してさらに培養し、８，１１−エ
イコサジエン酸を含有する脂質を採取することを特徴と
する８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質の製造
方法を提供しようとするものである。
脂肪酸生産能を有する微生物を、ゴマ油、落花生油、ゴ
マ油に対して実質的に非混和性である有機溶媒によりゴ
マ油から抽出した抽出物、ゴマ種子の溶剤抽出物、五加
皮の抽出物、桐木の抽出物、白果樹皮の抽出物、ヒハツ
の抽出物、細辛の抽出物、タラゴン（Ｔａｒｒａｇｏ
ｎ）の抽出物、イノンド種子（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）の
抽出物、パセリ（Ｐａｒｓｌｅｙ）の抽出物、ウコン
（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）の抽出物、ナツメッグ（Ｎｕｔｍ
ｅｇ）の抽出物を単独でまたは組み合せて添加した培地
で培養するか、あるいは該微生物が培養されている培養
液にゴマ油、落花生油、ゴマ油に対して実質的に非混和
性である有機溶媒によりゴマ油から抽出した抽出物、ゴ
マ種子の溶剤抽出物、五加皮の抽出物、桐木の抽出物、
白果樹皮の抽出物、ヒハツの抽出物、細辛の抽出物、タ
ラゴン（Ｔａｒｒａｇｏｎ）の抽出物、イノンド種子
（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）の抽出物、パセリ（Ｐａｒｓｌ
ｅｙ）の抽出物、ウコン（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）の抽出
物、ナツメッグ（Ｎｕｔｍｅｇ）の抽出物を添加してさ
らに培養することにより、８，１１−エイコサジエン酸
または８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質を生
成せしめ、そして８，１１−エイコサジエン酸を採取す
ることを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸の製造
方法；及びオメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有する
微生物を、ゴマ油、落花生油、ゴマ油に対して実質的に
非混和性である有機溶媒によりゴマ油から抽出した抽出
物、ゴマ種子の溶剤抽出物、五加皮の抽出物、桐木の抽
出物、白果樹皮の抽出物、ヒハツの抽出物、細辛の抽出
物、タラゴン（Ｔａｒｒａｇｏｎ）の抽出物、イノンド
種子（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）の抽出物、パセリ（Ｐａｒ
ｓｌｅｙ）の抽出物、ウコン（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）の抽
出物、ナツメッグ（Ｎｕｔｍｅｇ）の抽出物を単独でま
たは組み合せて添加した培地で培養するか、あるいは該
微生物が培養されている培養液にゴマ油、落花生油、ゴ
マ油に対して実質的に非混和性である有機溶媒によりゴ
マ油から抽出した抽出物、ゴマ種子の溶剤抽出物、五加
皮の抽出物、桐木の抽出物、白果樹皮の抽出物、ヒハツ
の抽出物、細辛の抽出物、タラゴン（Ｔａｒｒａｇｏ
ｎ）の抽出物、イノンド種子（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）の
抽出物、パセリ（Ｐａｒｓｌｅｙ）の抽出物、ウコン
（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）の抽出物、ナツメッグ（Ｎｕｔｍ
ｅｇ）の抽出物を添加してさらに培養し、８，１１−エ
イコサジエン酸を含有する脂質を採取することを特徴と
する８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質の製造
方法を提供しようとするものである。
【０００７】さらに本発明者らは、前記製造方法におい
てオメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有する微生物
が、Δ５不飽和化活性およびΔ６不飽和化活性を有し、
かつΔ１２不飽和化活性の低下または欠損した微生物で
あることを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸また
はこれを含有する脂質の製造方法；及び前記オメガ９系
高度不飽和脂肪酸生産能を有する微生物が、アラキドン
酸（以下、ＡＲＡと称する）生産能を有しかつΔ１２不
飽和化活性の低下または欠損した微生物であることを特
徴とする８，１１−エイコサジエン酸又はこれを含有す
る脂質の製造方法を提供しようとするものである。
てオメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有する微生物
が、Δ５不飽和化活性およびΔ６不飽和化活性を有し、
かつΔ１２不飽和化活性の低下または欠損した微生物で
あることを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸また
はこれを含有する脂質の製造方法；及び前記オメガ９系
高度不飽和脂肪酸生産能を有する微生物が、アラキドン
酸（以下、ＡＲＡと称する）生産能を有しかつΔ１２不
飽和化活性の低下または欠損した微生物であることを特
徴とする８，１１−エイコサジエン酸又はこれを含有す
る脂質の製造方法を提供しようとするものである。
【０００８】
【具体的な説明】本発明においては、オメガ９系高度不
飽和脂肪酸生産能を有する微生物であれば、すべて使用
することができる。さらに具体的には、Δ５不飽和化活
性およびΔ６不飽和化活性を有し、かつΔ１２不飽和化
活性の低下または欠損した微生物を使用することができ
る。このような微生物は、例えばアラキドン酸（ＡＲ
Ａ）生産能を有する微生物に突然変異操作を行い、Δ１
２不飽和化酵素活性が低下又は欠失した変異株を誘発さ
せることによって得られる。ＡＲＡ生産能を有する微生
物としては、例えばモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅ
ｌｌａ）属、コニディオボラス（Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌ
ｕｓ）属、フィチウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）属、フィトフ
トラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属、ペニシリューム
（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属、クラドスポリューム
（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）属、ムコール（Ｍｕｃｏ
ｒ）属、フザリューム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、アスペ
ルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ロードトルラ
（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属またはエントモフトラ
（Ｅｎｔｏｍｏｐｈｔｈｏｒａ）属に属する微生物を挙
げることができる。モルティエレラ属では例えば、モル
ティエレラ・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅ
ｌｏｎｇａｔａ）、モルティエレラ・エキシグア（Ｍｏ
ｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｘｉｇｕａ）、モルティエレラ
・ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｈｙｇｒｏ
ｐｈｉｌａ）、モルティエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉ
ｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）等のモルティエレラ亜属
に属する菌株を挙げることができる。
飽和脂肪酸生産能を有する微生物であれば、すべて使用
することができる。さらに具体的には、Δ５不飽和化活
性およびΔ６不飽和化活性を有し、かつΔ１２不飽和化
活性の低下または欠損した微生物を使用することができ
る。このような微生物は、例えばアラキドン酸（ＡＲ
Ａ）生産能を有する微生物に突然変異操作を行い、Δ１
２不飽和化酵素活性が低下又は欠失した変異株を誘発さ
せることによって得られる。ＡＲＡ生産能を有する微生
物としては、例えばモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅ
ｌｌａ）属、コニディオボラス（Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌ
ｕｓ）属、フィチウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）属、フィトフ
トラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属、ペニシリューム
（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属、クラドスポリューム
（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）属、ムコール（Ｍｕｃｏ
ｒ）属、フザリューム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、アスペ
ルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ロードトルラ
（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属またはエントモフトラ
（Ｅｎｔｏｍｏｐｈｔｈｏｒａ）属に属する微生物を挙
げることができる。モルティエレラ属では例えば、モル
ティエレラ・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅ
ｌｏｎｇａｔａ）、モルティエレラ・エキシグア（Ｍｏ
ｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｘｉｇｕａ）、モルティエレラ
・ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｈｙｇｒｏ
ｐｈｉｌａ）、モルティエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉ
ｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）等のモルティエレラ亜属
に属する菌株を挙げることができる。
【０００９】突然変異操作としては、放射線（Ｘ線、γ
線、中性子線）や紫外線を照射したり、高熱処理を行っ
たり、または微生物を適当なバッファー中などに懸濁
し、変異源を加えて一定時間インキュベート後、適当に
希釈して寒天培地に植菌し、変異株のコロニーを得ると
いった操作を行うこともできる。変異源としては、ナイ
トロジェンマスタード、メチルメタンサルホネート（Ｍ
ＭＳ）、Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロソ−Ｎ−ニトロソグ
アニジン（ＮＴＧ）等のアルキル化剤や、５−ブロモウ
ラシル等の塩基類似体や、マイトマイシンＣ等の抗生物
質や、６−メルカプトプリン等の塩基合成阻害剤や、プ
ロフラビン等の色素類や、４−ニトロキノリン−Ｎ−オ
キシド等のある種の発癌剤や塩化マンガン、重クロム酸
カリウム、亜硝酸、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、
ホルムアルデヒド、ニトロフラン化合物類などを挙げる
ことができる。また使用する微生物は、生育菌体（菌糸
など）でも良いし、胞子でも良い。
線、中性子線）や紫外線を照射したり、高熱処理を行っ
たり、または微生物を適当なバッファー中などに懸濁
し、変異源を加えて一定時間インキュベート後、適当に
希釈して寒天培地に植菌し、変異株のコロニーを得ると
いった操作を行うこともできる。変異源としては、ナイ
トロジェンマスタード、メチルメタンサルホネート（Ｍ
ＭＳ）、Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロソ−Ｎ−ニトロソグ
アニジン（ＮＴＧ）等のアルキル化剤や、５−ブロモウ
ラシル等の塩基類似体や、マイトマイシンＣ等の抗生物
質や、６−メルカプトプリン等の塩基合成阻害剤や、プ
ロフラビン等の色素類や、４−ニトロキノリン−Ｎ−オ
キシド等のある種の発癌剤や塩化マンガン、重クロム酸
カリウム、亜硝酸、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、
ホルムアルデヒド、ニトロフラン化合物類などを挙げる
ことができる。また使用する微生物は、生育菌体（菌糸
など）でも良いし、胞子でも良い。
【００１０】モルティエレラ属の変異株としては例え
ば、本発明者らが誘導した突然変異株モルティエレラ・
アルピナＳＡＭ１８６１（微工研条寄第３５９０号）を
使用することができる。
ば、本発明者らが誘導した突然変異株モルティエレラ・
アルピナＳＡＭ１８６１（微工研条寄第３５９０号）を
使用することができる。
【００１１】本発明に使用される変異株を培養するため
には、その菌株の胞子、菌糸、又は予め培養して得られ
た前培養液を、液体培地又は固形培地に接種し培養す
る。液体培地の場合に、炭素源としてはグルコース、フ
ラクトース、キシロース、サッカロース、マルトース、
可溶性デンプン、糖蜜、グリセロール、マンニトール等
の一般的に使用されているものが、いずれも使用できる
が、これらに限られるものではない。
には、その菌株の胞子、菌糸、又は予め培養して得られ
た前培養液を、液体培地又は固形培地に接種し培養す
る。液体培地の場合に、炭素源としてはグルコース、フ
ラクトース、キシロース、サッカロース、マルトース、
可溶性デンプン、糖蜜、グリセロール、マンニトール等
の一般的に使用されているものが、いずれも使用できる
が、これらに限られるものではない。
【００１２】窒素源としてはペプトン、酵母エキス、麦
芽エキス、肉エキス、カザミノ酸、コーンスティプリカ
ー等の天然窒素源の他に、尿素等の有機窒素源、ならび
に硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム等の無機窒素源を用いることができる。この他必要に
応じリン酸塩、硫酸マグネシウム、硫酸鉄、硫酸銅等の
無機塩及びビタミン等も微量栄養源として使用できる。
芽エキス、肉エキス、カザミノ酸、コーンスティプリカ
ー等の天然窒素源の他に、尿素等の有機窒素源、ならび
に硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム等の無機窒素源を用いることができる。この他必要に
応じリン酸塩、硫酸マグネシウム、硫酸鉄、硫酸銅等の
無機塩及びビタミン等も微量栄養源として使用できる。
【００１３】これらの培地成分は微生物の成育を害しな
い濃度であれば特に制限しない。実用上一般に、炭素源
は０．１〜３０重量％、好ましくは１〜１０重量％、窒
素源は０．０１〜５重量％、好ましくは０．１〜２重量
％の濃度とするのが良い。又、培養温度は５〜４０℃、
好ましくは２０〜３０℃とし、培地のpHは４〜１０、好
ましくは６〜９として通気攪拌培養、振とう培養、又は
静置培養を行う。培養は通常２〜１０日間行う。
い濃度であれば特に制限しない。実用上一般に、炭素源
は０．１〜３０重量％、好ましくは１〜１０重量％、窒
素源は０．０１〜５重量％、好ましくは０．１〜２重量
％の濃度とするのが良い。又、培養温度は５〜４０℃、
好ましくは２０〜３０℃とし、培地のpHは４〜１０、好
ましくは６〜９として通気攪拌培養、振とう培養、又は
静置培養を行う。培養は通常２〜１０日間行う。
【００１４】固体培地で培養する場合は、固形物重量に
対して５０〜１００重量％の水を加えたふすま、もみが
ら、米ぬか等を用い、５〜４０℃、好ましくは２０〜３
０℃の温度において、３〜１４日間培養を行う。この場
合に必要に応じて培地中に窒素源、無機塩類、微量栄養
源を加えることができる。
対して５０〜１００重量％の水を加えたふすま、もみが
ら、米ぬか等を用い、５〜４０℃、好ましくは２０〜３
０℃の温度において、３〜１４日間培養を行う。この場
合に必要に応じて培地中に窒素源、無機塩類、微量栄養
源を加えることができる。
【００１５】また、本発明における８，１１−エイコサ
ジエン酸の蓄積を促進するため、オメガ９系高度不飽和
脂肪酸の基質を培地に添加することができる。基質とし
ては、テトラデカン、ヘキサデカン、オクタデカン等の
炭化水素、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデ
カン酸等の脂肪酸、又はその塩（例えばナトリウム塩ま
たはカリウム塩）、脂肪酸エステル、又は脂肪酸を構成
成分として含む油脂（例えばオリーブ油、大豆油、綿実
油、ヤシ油）等を挙げることができるが、これらに限ら
れるものではない。
ジエン酸の蓄積を促進するため、オメガ９系高度不飽和
脂肪酸の基質を培地に添加することができる。基質とし
ては、テトラデカン、ヘキサデカン、オクタデカン等の
炭化水素、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデ
カン酸等の脂肪酸、又はその塩（例えばナトリウム塩ま
たはカリウム塩）、脂肪酸エステル、又は脂肪酸を構成
成分として含む油脂（例えばオリーブ油、大豆油、綿実
油、ヤシ油）等を挙げることができるが、これらに限ら
れるものではない。
【００１６】本発明において、Δ５不飽和化酵素阻害剤
としてはΔ５不飽和化酵素の活性を阻害するものであれ
ばよい。例えばΔ５不飽和化酵素阻害剤として、次の一
般式（Ｉ）：
としてはΔ５不飽和化酵素の活性を阻害するものであれ
ばよい。例えばΔ５不飽和化酵素阻害剤として、次の一
般式（Ｉ）：
【化３】
【００１７】（式中、Ｒ1 ，Ｒ2 ，Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 、
及びＲ6 はそれぞれ独立に水素原子、炭素数１〜３のア
ルキル基、あるいはＲ1 とＲ2 、及び／又はＲ4 とＲ5
は一緒になってメチレン基もしくはエチレン基を表し、
そしてｎ，ｍ，Ｌは０又は１を表す）で表わされるジオ
キサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体、ピペロニ
ルブトキサイド、クルクミン、又は次の一般式（II）：
及びＲ6 はそれぞれ独立に水素原子、炭素数１〜３のア
ルキル基、あるいはＲ1 とＲ2 、及び／又はＲ4 とＲ5
は一緒になってメチレン基もしくはエチレン基を表し、
そしてｎ，ｍ，Ｌは０又は１を表す）で表わされるジオ
キサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体、ピペロニ
ルブトキサイド、クルクミン、又は次の一般式（II）：
【化４】
【００１８】（式中、Ｒ1 は低級アルキル基を示し、Ｒ
2 は水酸基、アルキル基、アルコキシ基、アルケニル
基、オキシアルキル基を示す。Ｒ2 が複数ある場合に
は、複数のＲ2 は同一であっても異なっていてもよい。
ｎは０〜５の整数を示す。）で表される化合物等が挙げ
られ、これらは単独で又は適宜組み合わせて用いること
ができる。
2 は水酸基、アルキル基、アルコキシ基、アルケニル
基、オキシアルキル基を示す。Ｒ2 が複数ある場合に
は、複数のＲ2 は同一であっても異なっていてもよい。
ｎは０〜５の整数を示す。）で表される化合物等が挙げ
られ、これらは単独で又は適宜組み合わせて用いること
ができる。
【００１９】前記ジオキサビシクロ〔３．３．０〕オク
タン誘導体としては、セサミン、セサミノール、エピセ
サミン、エピセサミノール、セサモリン、２−（３，４
−メチレンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−
４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン、２，６−ビス−（３メトキシ
−４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシク
ロ〔３．３．０〕オクタン、又は２−（３，４−メチレ
ンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−ヒド
ロキシフェノキシ）−３，７−ジオキサビシクロ〔３．
３．０〕オクタン等を挙げることができ、これらを単独
で、又はいずれか２種類以上を組み合せて使用すること
ができる。またこれらの立体異性体あるいはラセミ体も
合わせて使用することができる。
タン誘導体としては、セサミン、セサミノール、エピセ
サミン、エピセサミノール、セサモリン、２−（３，４
−メチレンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−
４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン、２，６−ビス−（３メトキシ
−４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシク
ロ〔３．３．０〕オクタン、又は２−（３，４−メチレ
ンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−ヒド
ロキシフェノキシ）−３，７−ジオキサビシクロ〔３．
３．０〕オクタン等を挙げることができ、これらを単独
で、又はいずれか２種類以上を組み合せて使用すること
ができる。またこれらの立体異性体あるいはラセミ体も
合わせて使用することができる。
【００２０】Δ５不飽和化酵素阻害剤の一つである前記
ジオキサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を得る
方法として次の手順で行うことができる。まず、前記ジ
オキサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を主成分
とする抽出物を胡麻油から得るには、胡麻油とは実質的
に非混和性であり且つ該誘導体を抽出・溶解することが
できる種々の有機溶剤を用いて抽出・濃縮することで得
られる。
ジオキサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を得る
方法として次の手順で行うことができる。まず、前記ジ
オキサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を主成分
とする抽出物を胡麻油から得るには、胡麻油とは実質的
に非混和性であり且つ該誘導体を抽出・溶解することが
できる種々の有機溶剤を用いて抽出・濃縮することで得
られる。
【００２１】このような有機溶剤として、例えばアセト
ン、メチルエチルケトン、ジエチルケトン、メタノー
ル、エタノール等を挙げることができる。前記ジオキサ
ビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を主成分とする
抽出物を得るには、胡麻油と上記の溶剤のいずれかとを
均一に混合した後、低温において静置し、遠心分離等の
常法に従って相分離を行い、溶剤画分から溶剤を蒸発除
去することにより得られる。
ン、メチルエチルケトン、ジエチルケトン、メタノー
ル、エタノール等を挙げることができる。前記ジオキサ
ビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を主成分とする
抽出物を得るには、胡麻油と上記の溶剤のいずれかとを
均一に混合した後、低温において静置し、遠心分離等の
常法に従って相分離を行い、溶剤画分から溶剤を蒸発除
去することにより得られる。
【００２２】さらに具体的には、胡麻油を２〜１０倍、
好ましくは６〜８倍容量のアセトンに溶かし、−８０℃
で一晩放置する。その結果油成分が沈澱となり、濾過に
より得た濾液から有機溶剤を留去して、該誘導体を主成
分とする抽出物が得られる。あるいは、胡麻油を熱メタ
ノール又は熱エタノールで混合した後、室温において静
置し、溶剤画分から溶剤を蒸発除去することにより得ら
れる。
好ましくは６〜８倍容量のアセトンに溶かし、−８０℃
で一晩放置する。その結果油成分が沈澱となり、濾過に
より得た濾液から有機溶剤を留去して、該誘導体を主成
分とする抽出物が得られる。あるいは、胡麻油を熱メタ
ノール又は熱エタノールで混合した後、室温において静
置し、溶剤画分から溶剤を蒸発除去することにより得ら
れる。
【００２３】さらに具体的には、胡麻油を２〜１０倍、
好ましくは５〜７倍容量の熱メタノール（５０℃以上）
又は熱エタノール（５０℃以上）で激しく混合し抽出す
る。室温に静置あるいは遠心分離等の常法に従って相分
離を行い、溶剤画分から溶剤を留去して、該誘導体を主
成分とする抽出物が得られる。また超臨界ガス抽出も利
用できる。
好ましくは５〜７倍容量の熱メタノール（５０℃以上）
又は熱エタノール（５０℃以上）で激しく混合し抽出す
る。室温に静置あるいは遠心分離等の常法に従って相分
離を行い、溶剤画分から溶剤を留去して、該誘導体を主
成分とする抽出物が得られる。また超臨界ガス抽出も利
用できる。
【００２４】この抽出物より、各々の前記ジオキサビシ
クロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を得るためには、抽
出物をカラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグ
ラフィー、再結晶、蒸留、液々向流分配クロマトグラフ
ィー等の常法に従って処理することにより目的とする化
合物を単離すればよい。さらに具体的には、逆相カラム
（５Ｃ18）、溶離液にメタノール／水（６０：４０）を
使って、上記抽出物を高速液体クロマトグラフィーで分
取し、溶媒を留去した後、得られた結晶をエタノールで
再結晶化することでセサミン、エピセサミン、セサミノ
ール、エピセサミノール等の各前記ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン誘導体が得られる。
クロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を得るためには、抽
出物をカラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグ
ラフィー、再結晶、蒸留、液々向流分配クロマトグラフ
ィー等の常法に従って処理することにより目的とする化
合物を単離すればよい。さらに具体的には、逆相カラム
（５Ｃ18）、溶離液にメタノール／水（６０：４０）を
使って、上記抽出物を高速液体クロマトグラフィーで分
取し、溶媒を留去した後、得られた結晶をエタノールで
再結晶化することでセサミン、エピセサミン、セサミノ
ール、エピセサミノール等の各前記ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン誘導体が得られる。
【００２５】用いる胡麻油は精製品でもよく、また胡麻
油の製造過程で脱色工程前のいずれの粗製品でもよく更
に、胡麻種子あるいは胡麻粕（脱脂胡麻種子、残油分８
〜１０％）であってもよい。この場合、胡麻種子あるい
は胡麻粕を必要により破砕した後、任意の溶剤、例えば
胡麻油からの抽出について前記した溶剤を用いて常法に
より抽出することができる。抽出残渣を分離した後、抽
出液から蒸発等により溶剤を除去することにより抽出物
が得られる。
油の製造過程で脱色工程前のいずれの粗製品でもよく更
に、胡麻種子あるいは胡麻粕（脱脂胡麻種子、残油分８
〜１０％）であってもよい。この場合、胡麻種子あるい
は胡麻粕を必要により破砕した後、任意の溶剤、例えば
胡麻油からの抽出について前記した溶剤を用いて常法に
より抽出することができる。抽出残渣を分離した後、抽
出液から蒸発等により溶剤を除去することにより抽出物
が得られる。
【００２６】このように調製された胡麻種子抽出物、胡
麻粕抽出物からはセサミン、セサミノール、エピセサミ
ン、エピセサミノール、セサモリン、２−（３，４−メ
チレンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−
ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン、２，６−ビス−（３メトキシ
−４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシク
ロ〔３．３．０〕オクタン、又は２−（３，４−メチレ
ンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−ヒド
ロキシフェノキシ）−３，７−ジオキサビシクロ〔３．
３．０〕オクタンの前記ジオキサビシクロ〔３．３．
０〕オクタン誘導体が同様の手法で得られる。
麻粕抽出物からはセサミン、セサミノール、エピセサミ
ン、エピセサミノール、セサモリン、２−（３，４−メ
チレンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−
ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン、２，６−ビス−（３メトキシ
−４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシク
ロ〔３．３．０〕オクタン、又は２−（３，４−メチレ
ンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−ヒド
ロキシフェノキシ）−３，７−ジオキサビシクロ〔３．
３．０〕オクタンの前記ジオキサビシクロ〔３．３．
０〕オクタン誘導体が同様の手法で得られる。
【００２７】なお細辛から得られるセサミンも胡麻種
子、胡麻粕及び胡麻油より得られるセサミンと同等の効
果を有する。さらに、胡麻油製造過程の副産物からも前
記ジオキサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を得
ることができる。なお、前記ジオキサビシクロ〔３．
３．０〕オクタン誘導体の精製法及び抽出物を得る方法
は、これに限られるものではない。さらに前記ジオキサ
ビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体及び該誘導体を
主成分とする抽出物は、胡麻油、胡麻粕、及び胡麻種子
から得たものに限定したわけではなく、該誘導体を含む
天然物をすべて使用できるのは明かであり、例えば五加
皮、桐木、白果樹皮、ヒハツ、細辛等を挙げることがで
きる。
子、胡麻粕及び胡麻油より得られるセサミンと同等の効
果を有する。さらに、胡麻油製造過程の副産物からも前
記ジオキサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体を得
ることができる。なお、前記ジオキサビシクロ〔３．
３．０〕オクタン誘導体の精製法及び抽出物を得る方法
は、これに限られるものではない。さらに前記ジオキサ
ビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体及び該誘導体を
主成分とする抽出物は、胡麻油、胡麻粕、及び胡麻種子
から得たものに限定したわけではなく、該誘導体を含む
天然物をすべて使用できるのは明かであり、例えば五加
皮、桐木、白果樹皮、ヒハツ、細辛等を挙げることがで
きる。
【００２８】また、合成により前記ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン誘導体を得る方法としては、以
下のものが挙げられる。例えば、セサミン、エピセサミ
ンについては、Ｂｅｒｏｚａらの方法〔J.Am.Chem.Soc.
78, 1242 (1956) 〕で合成することができる他、ピノレ
シノール（一般式ＩにおいてＲ1 ＝Ｒ4 ＝Ｈ，Ｒ2 ＝Ｒ
5 ＝ＣＨ3 ，ｎ＝ｍ＝Ｌ＝０）はFreundenbergらの方法
〔Chem.Ber.,86,1157(1953)〕によって、シリンガレシ
ノール（一般式ＩにおいてＲ1 ＝Ｒ4 ＝Ｈ，Ｒ 2 ＝Ｒ3
＝Ｒ5 ＝Ｒ6 ＝ＣＨ3 ，ｎ＝０，ｍ＝Ｌ＝１）はFreund
enbergらの方法〔Chem.Ber.,88, 16 (1955) 〕によって
合成することができる。又、前記ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン誘導体は、Δ５不飽和化酵素の
特異的な阻害活性を有している限りその吸収を高めるた
めに例えば、配糖体等の形で使用することができる。
〔３．３．０〕オクタン誘導体を得る方法としては、以
下のものが挙げられる。例えば、セサミン、エピセサミ
ンについては、Ｂｅｒｏｚａらの方法〔J.Am.Chem.Soc.
78, 1242 (1956) 〕で合成することができる他、ピノレ
シノール（一般式ＩにおいてＲ1 ＝Ｒ4 ＝Ｈ，Ｒ2 ＝Ｒ
5 ＝ＣＨ3 ，ｎ＝ｍ＝Ｌ＝０）はFreundenbergらの方法
〔Chem.Ber.,86,1157(1953)〕によって、シリンガレシ
ノール（一般式ＩにおいてＲ1 ＝Ｒ4 ＝Ｈ，Ｒ 2 ＝Ｒ3
＝Ｒ5 ＝Ｒ6 ＝ＣＨ3 ，ｎ＝０，ｍ＝Ｌ＝１）はFreund
enbergらの方法〔Chem.Ber.,88, 16 (1955) 〕によって
合成することができる。又、前記ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン誘導体は、Δ５不飽和化酵素の
特異的な阻害活性を有している限りその吸収を高めるた
めに例えば、配糖体等の形で使用することができる。
【００２９】また前記一般式（II）で表される化合物の
具体例としては、アニソール、メトキシフェノール、ジ
メトキシベンゼン、ジエトキシベンゼン、トリメトキシ
ベンゼン、メトキシトルエン、トリ−ブチルヒドロキシ
アニソール（ＢＨＡ）、オイゲノール等が挙げられる。
具体例としては、アニソール、メトキシフェノール、ジ
メトキシベンゼン、ジエトキシベンゼン、トリメトキシ
ベンゼン、メトキシトルエン、トリ−ブチルヒドロキシ
アニソール（ＢＨＡ）、オイゲノール等が挙げられる。
【００３０】さらに本発明において培地に添加可能なも
のとして、ゴマ油、落花生油、ゴマ油に対して実質的に
非混和性である有機溶媒によりゴマ油から抽出した抽出
物、ゴマ種子の溶剤抽出物、五加皮の抽出物、桐木の抽
出物、白果樹皮の抽出物、ヒハツの抽出物、細辛の抽出
物や香辛性植物、例えばタラゴン（Ｔａｒｒａｇｏ
ｎ）、イノンド種子（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）、パセリ
（Ｐａｒｓｌｅｙ）、ウコン（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）、ナ
ツメッグ（Ｎｕｔｍｅｇ）等からの抽出物を使用するこ
とができる。例えば、ジクロロメタン、エタノール、メ
タノール、エチルエーテル等を用いて調製することがで
きる。
のとして、ゴマ油、落花生油、ゴマ油に対して実質的に
非混和性である有機溶媒によりゴマ油から抽出した抽出
物、ゴマ種子の溶剤抽出物、五加皮の抽出物、桐木の抽
出物、白果樹皮の抽出物、ヒハツの抽出物、細辛の抽出
物や香辛性植物、例えばタラゴン（Ｔａｒｒａｇｏ
ｎ）、イノンド種子（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）、パセリ
（Ｐａｒｓｌｅｙ）、ウコン（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）、ナ
ツメッグ（Ｎｕｔｍｅｇ）等からの抽出物を使用するこ
とができる。例えば、ジクロロメタン、エタノール、メ
タノール、エチルエーテル等を用いて調製することがで
きる。
【００３１】添加物の量はおよそ次の通りである。胡麻
油又は落花生油、あるいはこの両者の総添加量は培地に
対して０．００１〜１０重量％、好ましくは０．５〜１
０重量％である。胡麻油の抽出物を添加する場合、その
添加量は培地に対して３×１０-3〜３×１０-1重量％で
ある。また、セサミン、セサミノール、エピセサミン、
エピセサミノール等の前記ジオキサビシクロ〔３．３．
０〕オクタン誘導体を添加する場合その量（これらの２
種類以上を組み合せて使用する場合はその合計量）は、
培地に対して１×１０-3〜１×１０-1重量％である。
油又は落花生油、あるいはこの両者の総添加量は培地に
対して０．００１〜１０重量％、好ましくは０．５〜１
０重量％である。胡麻油の抽出物を添加する場合、その
添加量は培地に対して３×１０-3〜３×１０-1重量％で
ある。また、セサミン、セサミノール、エピセサミン、
エピセサミノール等の前記ジオキサビシクロ〔３．３．
０〕オクタン誘導体を添加する場合その量（これらの２
種類以上を組み合せて使用する場合はその合計量）は、
培地に対して１×１０-3〜１×１０-1重量％である。
【００３２】これらの添加物類は、生産微生物を接種す
る前又はその直後の培地に加えてもよく、あるいは両時
点で加えてもよい。培養開始後の添加は１回でもよく、
又は複数回に分けて間欠的に添加してもよい。あるい
は、連続的に添加することもできる。
る前又はその直後の培地に加えてもよく、あるいは両時
点で加えてもよい。培養開始後の添加は１回でもよく、
又は複数回に分けて間欠的に添加してもよい。あるい
は、連続的に添加することもできる。
【００３３】このようにして培養して、菌体内に８，１
１−エイコサジエン酸を大量に含有する脂質が生成蓄積
される。液体培地を使用した場合には、培養菌体から、
例えば、次のようにして８，１１−エイコサジエン酸の
採取を行う。
１−エイコサジエン酸を大量に含有する脂質が生成蓄積
される。液体培地を使用した場合には、培養菌体から、
例えば、次のようにして８，１１−エイコサジエン酸の
採取を行う。
【００３４】培養終了後、培養液より遠心分離及び濾過
等の常用の固液分離手段により培養菌体を得る。菌体は
十分水洗いし、好ましくは乾燥する。乾燥は凍結乾燥、
風乾等によって行うことができる。乾燥菌体は、好まし
くは窒素気流下で有機溶媒によって抽出処理する。有機
溶媒としてはエーテル、ヘキサン、メタノール、エタノ
ール、クロロホルム、ジクロロメタン、石油エーテル等
を用いることができ、又メタノールと石油エーテルの交
互抽出やクロロホルム−メタノール−水の一層系の溶媒
を用いた抽出によって良好な結果を得ることができる。
抽出物から減圧下で有機溶媒を留去することにより、高
濃度の８，１１−エイコサジエン酸を含有した脂質が得
られる。
等の常用の固液分離手段により培養菌体を得る。菌体は
十分水洗いし、好ましくは乾燥する。乾燥は凍結乾燥、
風乾等によって行うことができる。乾燥菌体は、好まし
くは窒素気流下で有機溶媒によって抽出処理する。有機
溶媒としてはエーテル、ヘキサン、メタノール、エタノ
ール、クロロホルム、ジクロロメタン、石油エーテル等
を用いることができ、又メタノールと石油エーテルの交
互抽出やクロロホルム−メタノール−水の一層系の溶媒
を用いた抽出によって良好な結果を得ることができる。
抽出物から減圧下で有機溶媒を留去することにより、高
濃度の８，１１−エイコサジエン酸を含有した脂質が得
られる。
【００３５】また、上記の方法に代えて湿菌体を用いて
抽出を行うことができる。メタノール、エタノール等の
水に対して相溶性の溶媒、又はこれらと水及び／又は他
の溶媒とから成る水に対して相溶性の混合溶媒を使用す
る。その他の手順は上記と同様である。
抽出を行うことができる。メタノール、エタノール等の
水に対して相溶性の溶媒、又はこれらと水及び／又は他
の溶媒とから成る水に対して相溶性の混合溶媒を使用す
る。その他の手順は上記と同様である。
【００３６】上記のようにして得られた脂質中には、
８，１１−エイコサジエン酸が脂質化合物、例えば脂肪
の構成成分として含まれている。これらを直接分離する
こともできるが、低級アルコールとのエステル、例えば
８，１１−エイコサジエン酸メチルとして分離するのが
好ましい。このようなエステルにすることにより、他の
脂質成分から容易に分離することができ、また、培養中
に生成する他の脂肪酸、例えばパルミチン酸、オレイン
酸等（これらも、８，１１−エイコサジエン酸のエステ
ル化に際してエステル化される）から容易に分離するこ
とができる。例えば、８，１１−エイコサジエン酸のメ
チルエステルを得るには、前記の抽出脂質を無水エタノ
ール−塩酸５〜１０％、ＢＦ３−メタノール１０〜５０
％等により、室温にて１〜２４時間処理するのが好まし
い。
８，１１−エイコサジエン酸が脂質化合物、例えば脂肪
の構成成分として含まれている。これらを直接分離する
こともできるが、低級アルコールとのエステル、例えば
８，１１−エイコサジエン酸メチルとして分離するのが
好ましい。このようなエステルにすることにより、他の
脂質成分から容易に分離することができ、また、培養中
に生成する他の脂肪酸、例えばパルミチン酸、オレイン
酸等（これらも、８，１１−エイコサジエン酸のエステ
ル化に際してエステル化される）から容易に分離するこ
とができる。例えば、８，１１−エイコサジエン酸のメ
チルエステルを得るには、前記の抽出脂質を無水エタノ
ール−塩酸５〜１０％、ＢＦ３−メタノール１０〜５０
％等により、室温にて１〜２４時間処理するのが好まし
い。
【００３７】前記の処理液から８，１１−エイコサジエ
ン酸メチルエステルを回収するにはヘキサン、エーテ
ル、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出するのが好ましい。
次に、この抽出液を無水硫酸ナトリウム等により乾燥
し、有機溶媒を好ましくは減圧下で留去することにより
主として脂肪酸エステルからなる混合物が得られる。こ
の混合物中には、目的とする８，１１−エイコサジエン
酸メチルエステルの他に、パルミチン酸メチルエステ
ル、ステアリン酸メチルエステル、オレイン酸メチルエ
ステル等が含まれている。これらの脂肪酸メチルエステ
ル混合物から８，１１−エイコサジエン酸メチルエステ
ルを単離するには、カラムクロマトグラフィー、低温結
晶化法、尿素包接法、液々向流分配クロマトグラフィー
等を単独で、又は組み合わせて使用することができる。
ン酸メチルエステルを回収するにはヘキサン、エーテ
ル、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出するのが好ましい。
次に、この抽出液を無水硫酸ナトリウム等により乾燥
し、有機溶媒を好ましくは減圧下で留去することにより
主として脂肪酸エステルからなる混合物が得られる。こ
の混合物中には、目的とする８，１１−エイコサジエン
酸メチルエステルの他に、パルミチン酸メチルエステ
ル、ステアリン酸メチルエステル、オレイン酸メチルエ
ステル等が含まれている。これらの脂肪酸メチルエステ
ル混合物から８，１１−エイコサジエン酸メチルエステ
ルを単離するには、カラムクロマトグラフィー、低温結
晶化法、尿素包接法、液々向流分配クロマトグラフィー
等を単独で、又は組み合わせて使用することができる。
【００３８】こうして単離された８，１１−エイコサジ
エン酸メチルから８，１１−エイコサジエン酸を得るに
は、アルカリで加水分解した後、エーテル、酢酸エチル
等の有機溶媒で抽出すればよい。
エン酸メチルから８，１１−エイコサジエン酸を得るに
は、アルカリで加水分解した後、エーテル、酢酸エチル
等の有機溶媒で抽出すればよい。
【００３９】また、８，１１−エイコサジエン酸をその
メチルエステルを経ないで採取するには、前記の抽出脂
質をアルカリ分解（例えば５％水酸化ナトリウムにより
室温にて２〜３時間）した後、この分解液から、脂肪酸
の抽出・精製に常用されている方法により抽出・精製す
ることができる。
メチルエステルを経ないで採取するには、前記の抽出脂
質をアルカリ分解（例えば５％水酸化ナトリウムにより
室温にて２〜３時間）した後、この分解液から、脂肪酸
の抽出・精製に常用されている方法により抽出・精製す
ることができる。
【００４０】次に、実施例により、この発明をさらに具
体的に説明する。例１ ．グルコース２％及び酵母エキス１％に、表１に示
した、Δ５−不飽和化酵素阻害剤を添加した培地（pH
６．０）２mlを１０mlのエルレンマイヤーフラスコに入
れ、１２０℃で２０分間殺菌した。モルティエレラ・ア
ルピナ（Mortierella alpina) の突然変異体ＳＡＭ１８
６１を培地に１白金耳接種し、レシプロシェーカー（１
１０rpm ）により、２０℃で１０日間培養した。
体的に説明する。例１ ．グルコース２％及び酵母エキス１％に、表１に示
した、Δ５−不飽和化酵素阻害剤を添加した培地（pH
６．０）２mlを１０mlのエルレンマイヤーフラスコに入
れ、１２０℃で２０分間殺菌した。モルティエレラ・ア
ルピナ（Mortierella alpina) の突然変異体ＳＡＭ１８
６１を培地に１白金耳接種し、レシプロシェーカー（１
１０rpm ）により、２０℃で１０日間培養した。
【００４１】培養後、濾過により菌体を回収し、十分水
洗した後、遠心エバポレーター（６０℃，２時間）で乾
燥させ、そして、塩化メチレン２ml、無水メタノール−
塩酸（１０％）２ml加え、５０℃で３時間処理すること
によってメチルエステル化し、ｎ−ヘキサン４ml、水１
mlを加え、２回抽出し溶媒を遠心エバポレーター（４０
℃，１時間）で留去した後、得られた脂肪酸メチルエス
テルをガスクロマトグラフィーで分析した。結果を表１
に示す。
洗した後、遠心エバポレーター（６０℃，２時間）で乾
燥させ、そして、塩化メチレン２ml、無水メタノール−
塩酸（１０％）２ml加え、５０℃で３時間処理すること
によってメチルエステル化し、ｎ−ヘキサン４ml、水１
mlを加え、２回抽出し溶媒を遠心エバポレーター（４０
℃，１時間）で留去した後、得られた脂肪酸メチルエス
テルをガスクロマトグラフィーで分析した。結果を表１
に示す。
【００４２】
【表１】
【００４３】例２．グルコース２％及び酵母エキス１％
に、セサミン０．０１％またはサイシンエタノール抽出
物０．１％を添加した培地（pH６．０）の２．５ｌを５
ｌのジャーファーメンターに入れ、１２０℃で３０分間
殺菌した。モルティエレラ・アルピナの突然変異体ＳＡ
Ｍ１８６１の前培養液４０mlを接種し、２４℃で、通気
量１vvm ，７日間の通気攪拌培養を行なった。培養２日
目から５日目まで毎日１％のグルコースを添加した。培
養終了後、各々の得られた菌体について、実施例１のそ
れぞれの反応試薬量を５００倍にした条件で同様にメチ
ルエステル化し、一部をとってガスクロマトグラフィー
で分析した。表２にその結果を示す。
に、セサミン０．０１％またはサイシンエタノール抽出
物０．１％を添加した培地（pH６．０）の２．５ｌを５
ｌのジャーファーメンターに入れ、１２０℃で３０分間
殺菌した。モルティエレラ・アルピナの突然変異体ＳＡ
Ｍ１８６１の前培養液４０mlを接種し、２４℃で、通気
量１vvm ，７日間の通気攪拌培養を行なった。培養２日
目から５日目まで毎日１％のグルコースを添加した。培
養終了後、各々の得られた菌体について、実施例１のそ
れぞれの反応試薬量を５００倍にした条件で同様にメチ
ルエステル化し、一部をとってガスクロマトグラフィー
で分析した。表２にその結果を示す。
【００４４】
【表２】
【００４５】得られた脂肪酸メチルエステル混合物より
８，１１−エイコサジエン酸を、逆相カラム（５Ｃ１
８）、溶離液アセトニトリル−水（８５：１５）を用い
て高速液体クロマトグラフィーで分取することにより単
離し、質量分析、ＮＭＲ分析等により、構造を同定、確
認した。
８，１１−エイコサジエン酸を、逆相カラム（５Ｃ１
８）、溶離液アセトニトリル−水（８５：１５）を用い
て高速液体クロマトグラフィーで分取することにより単
離し、質量分析、ＮＭＲ分析等により、構造を同定、確
認した。
【手続補正書】
【提出日】平成４年８月３日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項４
【補正方法】変更
【補正内容】
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００８】
【具体的な説明】本発明においては、オメガ９系高度不
飽和脂肪酸生産能を有する微生物であれば、すべて使用
することができる。さらに具体的には、Δ５不飽和化活
性およびΔ６不飽和化活性を有し、かつΔ１２不飽和化
活性の低下または欠損した微生物を使用することができ
る。このような微生物は、例えばアラキドン酸（ＡＲ
Ａ）生産能を有する微生物に突然変異操作を行い、Δ１
２不飽和化酵素活性が低下又は欠失した変異株を誘発さ
せることによって得られる。ＡＲＡ生産能を有する微生
物としては、例えばモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅ
ｌｌａ）属、コニディオボラス（Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌ
ｕｓ）属、フィチウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）属、フィトフ
トラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属、ペニシリューム
（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属、クラドスポリューム
（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）属、ムコール（Ｍｕｃｏ
ｒ）属、フザリューム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、アスペ
ルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ロードトルラ
（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属またはエントモフトラ
（Ｅｎｔｏｍｏｐｈｔｈｏｒａ）属に属する微生物を挙
げることができる。モルティエレラ属では例えば、モル
ティエレラ・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅ
ｌｏｎｇａｔａ）、モルティエレラ・エキシグア（Ｍｏ
ｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｘｉｇｕａ）、モルティエレラ
・ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｈｙｇｒｏ
ｐｈｉｌａ）、モルティエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉ
ｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）等のモルティエレラ亜属
に属する菌株を挙げることができる。
飽和脂肪酸生産能を有する微生物であれば、すべて使用
することができる。さらに具体的には、Δ５不飽和化活
性およびΔ６不飽和化活性を有し、かつΔ１２不飽和化
活性の低下または欠損した微生物を使用することができ
る。このような微生物は、例えばアラキドン酸（ＡＲ
Ａ）生産能を有する微生物に突然変異操作を行い、Δ１
２不飽和化酵素活性が低下又は欠失した変異株を誘発さ
せることによって得られる。ＡＲＡ生産能を有する微生
物としては、例えばモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅ
ｌｌａ）属、コニディオボラス（Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌ
ｕｓ）属、フィチウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）属、フィトフ
トラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属、ペニシリューム
（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属、クラドスポリューム
（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）属、ムコール（Ｍｕｃｏ
ｒ）属、フザリューム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、アスペ
ルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ロードトルラ
（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属またはエントモフトラ
（Ｅｎｔｏｍｏｐｈｔｈｏｒａ）属に属する微生物を挙
げることができる。モルティエレラ属では例えば、モル
ティエレラ・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅ
ｌｏｎｇａｔａ）、モルティエレラ・エキシグア（Ｍｏ
ｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｘｉｇｕａ）、モルティエレラ
・ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｈｙｇｒｏ
ｐｈｉｌａ）、モルティエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉ
ｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）等のモルティエレラ亜属
に属する菌株を挙げることができる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１５】また、本発明における８，１１−エイコサ
ジエン酸の蓄積を促進するため、オメガ９系高度不飽和
脂肪酸の基質を培地に添加することができる。基質とし
ては、テトラデカン、ヘキサデカン、オクタデカン等の
炭化水素、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデ
カン酸等の脂肪酸、又はその塩（例えばナトリウム塩ま
たはカリウム塩）、脂肪酸エステル、又は脂肪酸を構成
成分として含む油脂（例えばオリーブ油、パーム油、ヤ
シ油）等を挙げることができるが、これらに限られるも
のではない。
ジエン酸の蓄積を促進するため、オメガ９系高度不飽和
脂肪酸の基質を培地に添加することができる。基質とし
ては、テトラデカン、ヘキサデカン、オクタデカン等の
炭化水素、テトラデカン酸、ヘキサデカン酸、オクタデ
カン酸等の脂肪酸、又はその塩（例えばナトリウム塩ま
たはカリウム塩）、脂肪酸エステル、又は脂肪酸を構成
成分として含む油脂（例えばオリーブ油、パーム油、ヤ
シ油）等を挙げることができるが、これらに限られるも
のではない。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１９】前記ジオキサビシクロ〔３．３．０〕オク
タン誘導体としては、セサミン、セサミノール、エピセ
サミン、エピセサミノール、セサモリン、２−（３，４
−メチレンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−
４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン、２，６−ビス−（３−メトキ
シ−４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシ
クロ〔３．３．０〕オクタン、又は２−（３，４−メチ
レンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−ヒ
ドロキシフェノキシ）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン等を挙げることができ、これら
を単独で、又はいずれか２種類以上を組み合せて使用す
ることができる。またこれらの立体異性体あるいはラセ
ミ体も合わせて使用することができる。
タン誘導体としては、セサミン、セサミノール、エピセ
サミン、エピセサミノール、セサモリン、２−（３，４
−メチレンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−
４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン、２，６−ビス−（３−メトキ
シ−４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシ
クロ〔３．３．０〕オクタン、又は２−（３，４−メチ
レンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−ヒ
ドロキシフェノキシ）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン等を挙げることができ、これら
を単独で、又はいずれか２種類以上を組み合せて使用す
ることができる。またこれらの立体異性体あるいはラセ
ミ体も合わせて使用することができる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２６】このように調製された胡麻種子抽出物、胡
麻粕抽出物からはセサミン、セサミノール、エピセサミ
ン、エピセサミノール、セサモリン、２−（３，４−メ
チレンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−
ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン、２，６−ビス−（３−メトキ
シ−４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシ
クロ〔３．３．０〕オクタン、又は２−（３，４−メチ
レンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−ヒ
ドロキシフェノキシ）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタンの前記ジオキサビシクロ〔３．
３．０〕オクタン誘導体が同様の手法で得られる。
麻粕抽出物からはセサミン、セサミノール、エピセサミ
ン、エピセサミノール、セサモリン、２−（３，４−メ
チレンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−
ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン、２，６−ビス−（３−メトキ
シ−４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシ
クロ〔３．３．０〕オクタン、又は２−（３，４−メチ
レンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−ヒ
ドロキシフェノキシ）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタンの前記ジオキサビシクロ〔３．
３．０〕オクタン誘導体が同様の手法で得られる。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２９】また前記一般式（II）で表される化合物の
具体例としては、アニソール、メトキシフェノール、ジ
メトキシベンゼン、ジエトキシベンゼン、トリメトキシ
ベンゼン、メトキシトルエン、ｔ−ブチルヒドロキシア
ニソール（ＢＨＡ）、オイゲノール等が挙げられる。
具体例としては、アニソール、メトキシフェノール、ジ
メトキシベンゼン、ジエトキシベンゼン、トリメトキシ
ベンゼン、メトキシトルエン、ｔ−ブチルヒドロキシア
ニソール（ＢＨＡ）、オイゲノール等が挙げられる。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正内容】
【００３６】上記のようにして得られた脂質中には、
８，１１−エイコサジエン酸が脂質化合物、例えば脂肪
の構成成分として含まれている。これらを直接分離する
こともできるが、低級アルコールとのエステル、例えば
８，１１−エイコサジエン酸メチルとして分離するのが
好ましい。このようなエステルにすることにより、他の
脂質成分から容易に分離することができ、また、培養中
に生成する他の脂肪酸、例えばパルミチン酸、オレイン
酸等（これらも、８，１１−エイコサジエン酸のエステ
ル化に際してエステル化される）から容易に分離するこ
とができる。例えば、８，１１−エイコサジエン酸のメ
チルエステルを得るには、前記の抽出脂質を無水エタノ
ール−塩酸５〜１０％、ＢＦ 3 −メタノール１０〜５０
％等により、室温にて１〜２４時間処理するのが好まし
い。
８，１１−エイコサジエン酸が脂質化合物、例えば脂肪
の構成成分として含まれている。これらを直接分離する
こともできるが、低級アルコールとのエステル、例えば
８，１１−エイコサジエン酸メチルとして分離するのが
好ましい。このようなエステルにすることにより、他の
脂質成分から容易に分離することができ、また、培養中
に生成する他の脂肪酸、例えばパルミチン酸、オレイン
酸等（これらも、８，１１−エイコサジエン酸のエステ
ル化に際してエステル化される）から容易に分離するこ
とができる。例えば、８，１１−エイコサジエン酸のメ
チルエステルを得るには、前記の抽出脂質を無水エタノ
ール−塩酸５〜１０％、ＢＦ 3 −メタノール１０〜５０
％等により、室温にて１〜２４時間処理するのが好まし
い。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４４
【補正方法】変更
【補正内容】
【００４４】
【表２】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 7/64 Ｃ１２Ｒ 1:80） (Ｃ１２Ｐ 7/64 Ｃ１２Ｒ 1:66）
Claims (8)
- 【請求項１】 オメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有
する微生物を、Δ５不飽和化酵素阻害剤を添加した培地
で培養するか、あるいは該微生物が培養されている培養
液にΔ５不飽和化酵素阻害剤を添加してさらに培養する
ことにより、８，１１−エイコサジエン酸または８，１
１−エイコサジエン酸を含有する脂質を生成せしめ、そ
して８，１１−エイコサジエン酸を採取することを特徴
とする８，１１−エイコサジエン酸の製造方法。 - 【請求項２】 オメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有
する微生物を、Δ５不飽和化酵素阻害剤を添加した培地
で培養するか、あるいは該微生物が培養されている培養
液にΔ５不飽和化酵素阻害剤を添加してさらに培養し、
８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質を採取する
ことを特徴とする８，１１−エイコサジエン酸を含有す
る脂質の製造方法。 - 【請求項３】 前記Δ５不飽和化酵素阻害剤が、次の一
般式（Ｉ）： 【化１】 （式中、Ｒ1 ，Ｒ2 ，Ｒ3 ，Ｒ4，Ｒ5 、及びＲ6 はそ
れぞれ独立に水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、あ
るいはＲ1 とＲ2 、及び／又はＲ4 とＲ5 は一緒になっ
てメチレン基もしくはエチレン基を表し、そしてｎ，
ｍ，Ｌは０又は１を表す）で表わされるジオキサビシク
ロ〔３．３．０〕オクタン誘導体、ピペロニルブトキサ
イド、クルクミン、又は次の一般式（II）： 【化２】 （式中、Ｒ1 は低級アルキル基を示し、Ｒ2 は水酸基、
アルキル基、アルコキシ基、アルケニル基、オキシアル
キル基を示す。Ｒ2 が複数ある場合には、複数のＲ2 は
同一であっても異なっていてもよい。ｎは０〜５の整数
を示す。）で表わされる化合物であることを特徴とする
請求項１又は２記載の８，１１−エイコサジエン酸また
は８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質の製造方
法。 - 【請求項４】 前記ジオキサビシクロ〔３．３．０〕オ
クタン誘導体がセサミン、セサミノール、エピセサミ
ン、エピセサミノール、セサモリン、２−（３，４−メ
チレンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−
ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシクロ
〔３．３．０〕オクタン、２，６−ビス−（３メトキシ
−４−ヒドロキシフェニル）−３，７−ジオキサビシク
ロ〔３．３．０〕オクタン、又は２−（３，４−メチレ
ンジオキシフェニル）−６−（３−メトキシ−４−ヒド
ロキシフェノキシ）−３，７−ジオキサビシクロ〔３．
３．０〕オクタンであることを特徴とする請求項３記載
の８，１１−エイコサジエン酸または８，１１−エイコ
サジエン酸を含有する脂質の製造方法。 - 【請求項５】 オメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有
する微生物を、ゴマ油、落花生油、ゴマ油に対して実質
的に非混和性である有機溶媒によりゴマ油から抽出した
抽出物、ゴマ種子の溶剤抽出物、五加皮の抽出物、桐木
の抽出物、白果樹皮の抽出物、ヒハツの抽出物、細辛の
抽出物、タラゴン（Ｔａｒｒａｇｏｎ）の抽出物、イノ
ンド種子（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）の抽出物、パセリ（Ｐ
ａｒｓｌｅｙ）の抽出物、ウコン（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）
の抽出物、ナツメッグ（Ｎｕｔｍｅｇ）の抽出物を単独
でまたは組み合せて添加した培地で培養するか、あるい
は該微生物が培養されている培養液にゴマ油、落花生
油、ゴマ油に対して実質的に非混和性である有機溶媒に
よりゴマ油から抽出した抽出物、ゴマ種子の溶剤抽出
物、五加皮の抽出物、桐木の抽出物、白果樹皮の抽出
物、ヒハツの抽出物、細辛の抽出物、タラゴン（Ｔａｒ
ｒａｇｏｎ）の抽出物、イノンド種子（ＤｉｌｌＳｅｅ
ｄ）の抽出物、パセリ（Ｐａｒｓｌｅｙ）の抽出物、ウ
コン（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）の抽出物、ナツメッグ（Ｎｕ
ｔｍｅｇ）の抽出物を添加してさらに培養することによ
り、８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質または
８，１１−エイコサジエン酸を生成せしめ、そして８，
１１−エイコサジエン酸を採取することを特徴とする
８，１１−エイコサジエン酸の製造方法。 - 【請求項６】 オメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能を有
する微生物を、ゴマ油、落花生油、ゴマ油に対して実質
的に非混和性である有機溶媒によりゴマ油から抽出した
抽出物、ゴマ種子の溶剤抽出物、五加皮の抽出物、桐木
の抽出物、白果樹皮の抽出物、ヒハツの抽出物、細辛の
抽出物、タラゴン（Ｔａｒｒａｇｏｎ）の抽出物、イノ
ンド種子（Ｄｉｌｌ Ｓｅｅｄ）の抽出物、パセリ（Ｐ
ａｒｓｌｅｙ）の抽出物、ウコン（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）
の抽出物、ナツメッグ（Ｎｕｔｍｅｇ）の抽出物を単独
でまたは組み合せて添加した培地で培養するか、あるい
は該微生物が培養されている培養液にゴマ油、落花生
油、ゴマ油に対して実質的に非混和性である有機溶媒に
よりゴマ油から抽出した抽出物、ゴマ種子の溶剤抽出
物、五加皮の抽出物、桐木の抽出物、白果樹皮の抽出
物、ヒハツの抽出物、細辛の抽出物、タラゴン（Ｔａｒ
ｒａｇｏｎ）の抽出物、イノンド種子（ＤｉｌｌＳｅｅ
ｄ）の抽出物、パセリ（Ｐａｒｓｌｅｙ）の抽出物、ウ
コン（Ｔｕｒｍｅｒｉｃ）の抽出物、ナツメッグ（Ｎｕ
ｔｍｅｇ）の抽出物を添加してさらに培養し、８，１１
−エイコサジエン酸を含有する脂質を採取することを特
徴とする８，１１−エイコサジエン酸を含有する脂質の
製造方法。 - 【請求項７】 前記オメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能
を有する微生物が、Δ５不飽和化活性およびΔ６不飽和
化活性を有し、かつΔ１２不飽和化活性の低下または欠
損した微生物であることを特徴とする請求項１〜６記載
の８，１１−エイコサジエン酸または８，１１−エイコ
サジエン酸を含有する脂質の製造方法。 - 【請求項８】 前記オメガ９系高度不飽和脂肪酸生産能
を有する微生物が、アラキドン酸生産能を有し、かつΔ
１２不飽和化活性の低下または欠損した微生物であるこ
とを特徴とする請求項１〜６記載の８，１１−エイコサ
ジエン酸または８，１１−エイコサジエン酸を含有する
脂質の製造方法。
Priority Applications (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3251957A JPH0591886A (ja) | 1991-09-30 | 1991-09-30 | ８，１１−エイコサジエン酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
| CA002079366A CA2079366A1 (en) | 1991-09-30 | 1992-09-29 | Process for production of 8,11- eicosadienoic acid |
| US07/953,044 US5376541A (en) | 1991-09-30 | 1992-09-29 | Process for production of 8,11-eicosadienoic acid using Mortierella alpina |
| DK92308929.6T DK0535941T3 (da) | 1991-09-30 | 1992-09-30 | Fremgangsmåde til fremstilling af 8,11-eicosadiensyre |
| EP92308929A EP0535941B1 (en) | 1991-09-30 | 1992-09-30 | Process for production of 8,11-eicosadienoic acid |
| AT92308929T ATE161579T1 (de) | 1991-09-30 | 1992-09-30 | Verfahren zur herstellung von 8,11- eicasodiensäure |
| DE69223722T DE69223722T2 (de) | 1991-09-30 | 1992-09-30 | Verfahren zur Herstellung von 8,11-Eicasodiensäure |
| ES92308929T ES2110474T3 (es) | 1991-09-30 | 1992-09-30 | Procedimiento para la produccion de acido 8,11-eicosadienoico. |
| GR980400395T GR3026216T3 (en) | 1991-09-30 | 1998-02-25 | Process for production of 8,11-eicosadienoic acid |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3251957A JPH0591886A (ja) | 1991-09-30 | 1991-09-30 | ８，１１−エイコサジエン酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0591886A true JPH0591886A (ja) | 1993-04-16 |
Family
ID=17230506
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3251957A Pending JPH0591886A (ja) | 1991-09-30 | 1991-09-30 | ８，１１−エイコサジエン酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5376541A (ja) |
| EP (1) | EP0535941B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0591886A (ja) |
| AT (1) | ATE161579T1 (ja) |
| CA (1) | CA2079366A1 (ja) |
| DE (1) | DE69223722T2 (ja) |
| DK (1) | DK0535941T3 (ja) |
| ES (1) | ES2110474T3 (ja) |
| GR (1) | GR3026216T3 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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