JPH0541981A - 生菌含有液状組成物 - Google Patents
生菌含有液状組成物Info
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- JPH0541981A JPH0541981A JP3228329A JP22832991A JPH0541981A JP H0541981 A JPH0541981 A JP H0541981A JP 3228329 A JP3228329 A JP 3228329A JP 22832991 A JP22832991 A JP 22832991A JP H0541981 A JPH0541981 A JP H0541981A
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- lactoperoxidase
- viable
- liquid composition
- milk
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- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
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- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 液状の組成物中に含まれているビフィズス菌
の生菌及び／又は乳酸菌生菌の生残性を高める。 【構成】 少なくともビフィズス菌の生菌及び／又は乳
酸菌生菌と、10ppm 以上の濃度のラクトパーオキシダー
ゼとを含有する生菌含有液状組成物であって、ラクトパ
ーオキシダーゼにより生菌含有液状組成物中に生成され
る過酸化水素を分解する。 【効果】 有用微生物を長期間生存させることが可能で
あり、天然物を少量添加するのみなので、製造費が安価
であり、かつ衛生上も安全である。
の生菌及び／又は乳酸菌生菌の生残性を高める。 【構成】 少なくともビフィズス菌の生菌及び／又は乳
酸菌生菌と、10ppm 以上の濃度のラクトパーオキシダー
ゼとを含有する生菌含有液状組成物であって、ラクトパ
ーオキシダーゼにより生菌含有液状組成物中に生成され
る過酸化水素を分解する。 【効果】 有用微生物を長期間生存させることが可能で
あり、天然物を少量添加するのみなので、製造費が安価
であり、かつ衛生上も安全である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、少なくとも有用微生物
の生菌及びラクトパーオキシダーゼからなることを特徴
とする有用微生物の生菌を含有する液状組成物に関す
る。
の生菌及びラクトパーオキシダーゼからなることを特徴
とする有用微生物の生菌を含有する液状組成物に関す
る。
【０００２】本発明において有用微生物は、人又は動物
の腸管あるいは他の消化管内に生息し、人又は動物にと
って生理的に有用な微生物（例えば、ビフィズス菌、乳
酸菌等）であり、生菌は生存している有用微生物であ
り、生菌含有液状組成物は、上記有用微生物を利用した
有用微生物の生菌を含有する液状又は半固形状の食品
（例えば、ヨーグルト、乳酸菌飲料等）、医薬品、飼
料、ペットフード、又はこれらの原料等である。
の腸管あるいは他の消化管内に生息し、人又は動物にと
って生理的に有用な微生物（例えば、ビフィズス菌、乳
酸菌等）であり、生菌は生存している有用微生物であ
り、生菌含有液状組成物は、上記有用微生物を利用した
有用微生物の生菌を含有する液状又は半固形状の食品
（例えば、ヨーグルト、乳酸菌飲料等）、医薬品、飼
料、ペットフード、又はこれらの原料等である。
【０００３】
【従来の技術】微生物の生菌を含有する組成物としては
ヨーグルト、チーズ、漬物、納豆等の発酵食品が最も一
般的であるが、近年、有用微生物の生菌を直接摂取し、
それによる生理効果を目的として、特に人及び動物の腸
管あるいは他の消化管に生息するビフィズス菌の生菌及
び又は乳酸菌の生菌等を含む食品、飼料、ペットフード
等が広く市販されている。これらの組成物においては、
目的とする微生物の生菌を可能な限り高濃度で含み、保
存期間中高濃度で生菌の維持が可能であること、及び高
濃度での生菌摂取が可能であることが望ましい。
ヨーグルト、チーズ、漬物、納豆等の発酵食品が最も一
般的であるが、近年、有用微生物の生菌を直接摂取し、
それによる生理効果を目的として、特に人及び動物の腸
管あるいは他の消化管に生息するビフィズス菌の生菌及
び又は乳酸菌の生菌等を含む食品、飼料、ペットフード
等が広く市販されている。これらの組成物においては、
目的とする微生物の生菌を可能な限り高濃度で含み、保
存期間中高濃度で生菌の維持が可能であること、及び高
濃度での生菌摂取が可能であることが望ましい。
【０００４】しかしながら、従来このような生菌を含有
する組成物においては、保存期間中高濃度で生菌数を確
保することが極めて困難であり、生理的効果を得るのに
必要な生菌濃度を維持できない場合が大部分であるとい
っても過言ではなかった。例えば、ビフィズス菌の生菌
を含むヨーグルトでは１ml当たり1000万以上のビフィズ
ス菌の生菌数を維持できることが望ましいといわれてい
るが、保存期間中前記菌数を維持できない場合が多い。
する組成物においては、保存期間中高濃度で生菌数を確
保することが極めて困難であり、生理的効果を得るのに
必要な生菌濃度を維持できない場合が大部分であるとい
っても過言ではなかった。例えば、ビフィズス菌の生菌
を含むヨーグルトでは１ml当たり1000万以上のビフィズ
ス菌の生菌数を維持できることが望ましいといわれてい
るが、保存期間中前記菌数を維持できない場合が多い。
【０００５】上記のような生菌数の維持に影響を及ぼす
因子は多数知られているが、その中でも組成物に含まれ
る酸素の影響を無視することができない。即ち、酸素は
特に嫌気性及び通性嫌気性菌に対して有害であることが
知られており、そのため酸素の影響を排除するためには
生菌含有組成物に対する酸素の溶解を極力防止すること
が、従来一つの解決手段とされていた。例えば、ビフィ
ズス菌の生菌を含有するヨーグルト及び乳製品の容器に
は酸素の透過を遮断する材質を使用し、内容物に対する
酸素の影響を防止しているが、実際のヨーグルト及び乳
製品の製造工程においてはある程度の酸素の溶解を防止
できず、保存期間における生菌の生残に悪影響を与え
る。
因子は多数知られているが、その中でも組成物に含まれ
る酸素の影響を無視することができない。即ち、酸素は
特に嫌気性及び通性嫌気性菌に対して有害であることが
知られており、そのため酸素の影響を排除するためには
生菌含有組成物に対する酸素の溶解を極力防止すること
が、従来一つの解決手段とされていた。例えば、ビフィ
ズス菌の生菌を含有するヨーグルト及び乳製品の容器に
は酸素の透過を遮断する材質を使用し、内容物に対する
酸素の影響を防止しているが、実際のヨーグルト及び乳
製品の製造工程においてはある程度の酸素の溶解を防止
できず、保存期間における生菌の生残に悪影響を与え
る。
【０００６】この酵素の毒性の１つは、有用微生物が所
有するNADHオキシダーゼにより化学式１のように酸素か
ら生成された過酸化水素によるものであり、生成した過
酸化水素により毒性が発揮される。即ち、有用微生物
は、自己の所有する酵素により過酸化水素を生成し、自
己の生存に悪影響を招くのである。
有するNADHオキシダーゼにより化学式１のように酸素か
ら生成された過酸化水素によるものであり、生成した過
酸化水素により毒性が発揮される。即ち、有用微生物
は、自己の所有する酵素により過酸化水素を生成し、自
己の生存に悪影響を招くのである。
【０００７】
【化学式１】
【０００８】一方、ラクトパーオキシダーゼについて
は、次のことが知られている。この酵素は、人及び動物
の乳汁及び体液に存在する酵素であり、生乳中では乳清
蛋白質の約1%（重量。以下特に断りのない限り同じ）を
占めている。ラクトパーオキシダーゼは未加熱の牛乳中
では活性を維持して含まれているが、加熱（例えば、通
常の牛乳の殺菌条件）により失活するので、例えば発酵
乳製品ではこの酵素が完全に失活している。又この酵素
は、酸素受容体の存在下で過酸化水素を分解するが、SC
N - を酸素受容体とする場合は、その生成物である0SCN
- の抗菌性が高いために多くの微生物に対して静菌作用
を示し、ラクトパーオキシダーゼ・システムとして利用
されている。しかしながら、この酵素は、SCN - のみを
特異的な酸素受容体とせず、化学式２のように非特異的
酸素受容体の存在下で過酸化水素を分解する作用を有し
ている。
は、次のことが知られている。この酵素は、人及び動物
の乳汁及び体液に存在する酵素であり、生乳中では乳清
蛋白質の約1%（重量。以下特に断りのない限り同じ）を
占めている。ラクトパーオキシダーゼは未加熱の牛乳中
では活性を維持して含まれているが、加熱（例えば、通
常の牛乳の殺菌条件）により失活するので、例えば発酵
乳製品ではこの酵素が完全に失活している。又この酵素
は、酸素受容体の存在下で過酸化水素を分解するが、SC
N - を酸素受容体とする場合は、その生成物である0SCN
- の抗菌性が高いために多くの微生物に対して静菌作用
を示し、ラクトパーオキシダーゼ・システムとして利用
されている。しかしながら、この酵素は、SCN - のみを
特異的な酸素受容体とせず、化学式２のように非特異的
酸素受容体の存在下で過酸化水素を分解する作用を有し
ている。
【０００９】
【化学式２】
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】以上のように従来から
有用微生物の生菌の生残に有効な手段の開発が待望され
ていた。本発明者等は、ビフィズス菌及び又は乳酸菌等
の有用微生物の生菌を含有する液状組成物において、有
用微生物（特にビフィズス菌）の生菌を長期間生残させ
る方策について鋭意研究を行った結果、有用微生物を含
有する液状組成物中に含まれている酸素から過酸化水素
が生成され、この過酸化水素が有用微生物の生残に有害
であること、及び過酸化水素を有用微生物の生菌を含有
する液状の組成物から除去することによって有用微生物
の生菌を長期間死滅させずに保存し得ることを見出し
た。
有用微生物の生菌の生残に有効な手段の開発が待望され
ていた。本発明者等は、ビフィズス菌及び又は乳酸菌等
の有用微生物の生菌を含有する液状組成物において、有
用微生物（特にビフィズス菌）の生菌を長期間生残させ
る方策について鋭意研究を行った結果、有用微生物を含
有する液状組成物中に含まれている酸素から過酸化水素
が生成され、この過酸化水素が有用微生物の生残に有害
であること、及び過酸化水素を有用微生物の生菌を含有
する液状の組成物から除去することによって有用微生物
の生菌を長期間死滅させずに保存し得ることを見出し
た。
【００１１】本発明は、長期間生存可能であり、製造費
が安価であり、かつ衛生上も安全である有用微生物の生
菌を含有する液状組成物を提供することを課題としてい
る。
が安価であり、かつ衛生上も安全である有用微生物の生
菌を含有する液状組成物を提供することを課題としてい
る。
【００１２】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決する本発
明は、少なくとも有用微生物の生菌及びラクトパーオキ
シダーゼからなることを特徴とする有用微生物の生菌を
含有する液状組成物、であり、詳しくは、少なくともビ
フィズス菌の生菌及び／又は乳酸菌の生菌と、10ppm 以
上の濃度のラクトパーオキシダーゼとを含有する生菌含
有液状組成物、である。
明は、少なくとも有用微生物の生菌及びラクトパーオキ
シダーゼからなることを特徴とする有用微生物の生菌を
含有する液状組成物、であり、詳しくは、少なくともビ
フィズス菌の生菌及び／又は乳酸菌の生菌と、10ppm 以
上の濃度のラクトパーオキシダーゼとを含有する生菌含
有液状組成物、である。
【００１３】本発明に使用するラクトパーオキシダーゼ
は、通常未加熱のホエー又は脱脂乳から次のようにして
工業的に製造される。尚、ラクトパーオキシダーゼは、
試薬として少量では市販されているが、大量では市販さ
れていない。もちろん、価格を無視すれば、試薬として
市販されているラクトパーオキシダーゼを本発明に使用
することもできる。
は、通常未加熱のホエー又は脱脂乳から次のようにして
工業的に製造される。尚、ラクトパーオキシダーゼは、
試薬として少量では市販されているが、大量では市販さ
れていない。もちろん、価格を無視すれば、試薬として
市販されているラクトパーオキシダーゼを本発明に使用
することもできる。
【００１４】未加熱のホエー又は脱脂乳をイオン交換樹
脂［例えば、CMセファデックスC-50（商標。ファルマシ
ア社製）等］に通液し、ラクトパーオキシダーゼをイオ
ン交換樹脂に吸着させ、水で充分洗浄し、のち緩衝液
（例えば、リン酸−食塩緩衝液等）を通液し、イオン交
換樹脂に吸着したラクトパーオキシダーゼを溶出する。
溶出液を限外濃縮装置を用いて濃縮と脱塩を同時に行
い、凍結乾燥し、粉末状のラクトパーオキシダーゼ含有
物を得る。このようにして得られたラクトパーオキシダ
ーゼ含有物中には、次の方法により測定したラクトパー
オキシダーゼが通常45〜50% 含まれている。尚、以下の
記載におけるラクトパーオキシダーゼの純度の測定は、
全てこの方法による。
脂［例えば、CMセファデックスC-50（商標。ファルマシ
ア社製）等］に通液し、ラクトパーオキシダーゼをイオ
ン交換樹脂に吸着させ、水で充分洗浄し、のち緩衝液
（例えば、リン酸−食塩緩衝液等）を通液し、イオン交
換樹脂に吸着したラクトパーオキシダーゼを溶出する。
溶出液を限外濃縮装置を用いて濃縮と脱塩を同時に行
い、凍結乾燥し、粉末状のラクトパーオキシダーゼ含有
物を得る。このようにして得られたラクトパーオキシダ
ーゼ含有物中には、次の方法により測定したラクトパー
オキシダーゼが通常45〜50% 含まれている。尚、以下の
記載におけるラクトパーオキシダーゼの純度の測定は、
全てこの方法による。
【００１５】試料の水溶液をアサヒパックGFA-50（商
標。旭化成工業社製）を用いたゲル濾過法（リン酸−食
塩緩衝液）による溶出曲線の総ピーク面積に対するラク
トパーオキシダーゼ・ピークの面積の百分率を算出し、
ラクトパーオキシダーゼの純度を求めた。尚、市販試薬
（シグマ社製。純度ほぼ100%）を標準として同一条件で
分析し、ラクトパーオキシダーゼの溶出位置を決定し
た。又、上記の方法で得られたラクトパーオキシダーゼ
の純度は、パーパロガリン（Purpurrogallin）法［メソ
ード・イン・エンザイモロジー（Method in Enzymolog
y）、第２巻、769ページ、アカデミック・プレス（Acad
emic Press）、１９５５年］で測定したラクトパーオキ
シダーゼ活性（単位重量当り）を上記市販試薬の活性と
比較した活性比率［（ラクトパーオキシダーゼ含有物の
活性／市販試薬の活性）×１００］とほぼ一致してい
た。
標。旭化成工業社製）を用いたゲル濾過法（リン酸−食
塩緩衝液）による溶出曲線の総ピーク面積に対するラク
トパーオキシダーゼ・ピークの面積の百分率を算出し、
ラクトパーオキシダーゼの純度を求めた。尚、市販試薬
（シグマ社製。純度ほぼ100%）を標準として同一条件で
分析し、ラクトパーオキシダーゼの溶出位置を決定し
た。又、上記の方法で得られたラクトパーオキシダーゼ
の純度は、パーパロガリン（Purpurrogallin）法［メソ
ード・イン・エンザイモロジー（Method in Enzymolog
y）、第２巻、769ページ、アカデミック・プレス（Acad
emic Press）、１９５５年］で測定したラクトパーオキ
シダーゼ活性（単位重量当り）を上記市販試薬の活性と
比較した活性比率［（ラクトパーオキシダーゼ含有物の
活性／市販試薬の活性）×１００］とほぼ一致してい
た。
【００１６】このようにして製造されたラクトーパーオ
キシダーゼを生菌含有液状組成物に添加、混合、分散、
溶解させる場合、ラクトパーオキシダーゼからの雑菌に
よる汚染を防止するためにラクトパーオキシダーゼ溶液
を無菌濾過、又はラクトパーオキシダーゼが失活しない
温度（例えば、70℃で15秒間）での加熱殺菌等により処
理することが望ましい。
キシダーゼを生菌含有液状組成物に添加、混合、分散、
溶解させる場合、ラクトパーオキシダーゼからの雑菌に
よる汚染を防止するためにラクトパーオキシダーゼ溶液
を無菌濾過、又はラクトパーオキシダーゼが失活しない
温度（例えば、70℃で15秒間）での加熱殺菌等により処
理することが望ましい。
【００１７】本発明の生菌含有液状組成物におけるラク
トパーオキシダーゼの濃度は、後記する試験例３から明
らかなように少なくとも10ppm であり、10ppm 未満では
十分な生残効果が得られない。従って、本発明の生菌含
有液状組成物におけるラクトパーオキシダーゼの濃度
は、10ppm 以上であり、製造費及び生菌含有液状組成物
の風味の悪化の点から200ppmが上限である。
トパーオキシダーゼの濃度は、後記する試験例３から明
らかなように少なくとも10ppm であり、10ppm 未満では
十分な生残効果が得られない。従って、本発明の生菌含
有液状組成物におけるラクトパーオキシダーゼの濃度
は、10ppm 以上であり、製造費及び生菌含有液状組成物
の風味の悪化の点から200ppmが上限である。
【００１８】本発明の生菌含有液状組成物の製造法を例
示すれば、次のとおりである。 １）ラクトパーオキシダーゼ含有ビフィズス菌ヨーグル
トの製造法 牛乳を均質化し、殺菌し、約45℃に冷却し、ビフィズス
菌及び乳酸菌カルチャーをスターターとして添加し、更
にラクトパーオキシダーゼ含有水溶液をメンブランフィ
ルターで除菌して添加する。所望の容器に充填し、37〜
39℃の恒温室で４〜５時間発酵させ、のち冷却する。
示すれば、次のとおりである。 １）ラクトパーオキシダーゼ含有ビフィズス菌ヨーグル
トの製造法 牛乳を均質化し、殺菌し、約45℃に冷却し、ビフィズス
菌及び乳酸菌カルチャーをスターターとして添加し、更
にラクトパーオキシダーゼ含有水溶液をメンブランフィ
ルターで除菌して添加する。所望の容器に充填し、37〜
39℃の恒温室で４〜５時間発酵させ、のち冷却する。
【００１９】２）ラクトパーオキシダーゼ含有ビフィズ
ス菌ミルクの製造法 牛乳を均質化し、殺菌し、約10℃に冷却し、ビフィズス
菌及び乳酸菌カルチャーをスターターとして添加し、更
にラクトパーオキシダーゼ含有水溶液を70℃で15秒間殺
菌して添加し、所望の容器に充填する。
ス菌ミルクの製造法 牛乳を均質化し、殺菌し、約10℃に冷却し、ビフィズス
菌及び乳酸菌カルチャーをスターターとして添加し、更
にラクトパーオキシダーゼ含有水溶液を70℃で15秒間殺
菌して添加し、所望の容器に充填する。
【００２０】以上のようにして製造された本発明の生菌
含有液状組成物におけるラクトパーオキシダーゼの生菌
保存性改善効果が発揮される。
含有液状組成物におけるラクトパーオキシダーゼの生菌
保存性改善効果が発揮される。
【００２１】次に試験例を示して本発明を詳述する。 （試験例１）この試験は、生菌を含むヨーグルト中の過
酸化水素の生成及びラクトパーオキシダーゼ添加による
保存効果を調べるために行われた。
酸化水素の生成及びラクトパーオキシダーゼ添加による
保存効果を調べるために行われた。
【００２２】１）試料の調製 乳脂肪含量3.3%、無脂乳固形分含量9.0%の生乳10kgを均
質化し、90℃で10分間殺菌した。約42℃に冷却し、スタ
ーターとしてストレプトコッカス・サーモフィルス［St
reptococcus （以下Str.と略記する）thermophilus］、
ラクトバシラス・ブルガリカス［Lactobacillus （以下
L.と略記する）bulgaricus］及びビフィドバクテリウム
・ロンガム［Bifidobacterium （以下B.と略記する）lo
ngum］の牛乳カルチャーをそれぞれ100g, 100g及び50g
添加した。更に市販のラクトパーオキシダーゼ（シグマ
社製。ロットNo.L-2005 ）の1%水溶液100 mlを0.45μの
マイクロフィルターを通し、除菌して添加した。十分攪
拌し、100 ml容のポリエチレンカップに充填し、密封
し、40〜41℃の恒温室で3.5 時間発酵させ、発酵終了後
冷蔵庫に移し、５〜８℃で保存した。尚、ラクトパーオ
キシダーゼを添加せずに上記と同様の方法で調製した試
料を対照とした。又使用した微生物は、いずれも市販の
ヨーグルト・カルチャーとして、又はATCCから容易に入
手できるものである。
質化し、90℃で10分間殺菌した。約42℃に冷却し、スタ
ーターとしてストレプトコッカス・サーモフィルス［St
reptococcus （以下Str.と略記する）thermophilus］、
ラクトバシラス・ブルガリカス［Lactobacillus （以下
L.と略記する）bulgaricus］及びビフィドバクテリウム
・ロンガム［Bifidobacterium （以下B.と略記する）lo
ngum］の牛乳カルチャーをそれぞれ100g, 100g及び50g
添加した。更に市販のラクトパーオキシダーゼ（シグマ
社製。ロットNo.L-2005 ）の1%水溶液100 mlを0.45μの
マイクロフィルターを通し、除菌して添加した。十分攪
拌し、100 ml容のポリエチレンカップに充填し、密封
し、40〜41℃の恒温室で3.5 時間発酵させ、発酵終了後
冷蔵庫に移し、５〜８℃で保存した。尚、ラクトパーオ
キシダーゼを添加せずに上記と同様の方法で調製した試
料を対照とした。又使用した微生物は、いずれも市販の
ヨーグルト・カルチャーとして、又はATCCから容易に入
手できるものである。
【００２３】２）試験方法 各試料に含まれる乳酸菌数及び酸度を公定法（昭和23年
12月27日厚生省令第52号「乳及び乳製品の成分規格等に
関する省令」）により、ビフィズス菌数を寺口等の方法
（食品衛生学雑誌、第23巻、第39ページ、1982年）によ
り、過酸化水素濃度をオリテクター（商標。オリエンタ
ル電気社製）により、製造１日後、７日後、14日後、及
び21日後に測定し、各微生物の生菌数及び酸度の変化を
比較して試験した。
12月27日厚生省令第52号「乳及び乳製品の成分規格等に
関する省令」）により、ビフィズス菌数を寺口等の方法
（食品衛生学雑誌、第23巻、第39ページ、1982年）によ
り、過酸化水素濃度をオリテクター（商標。オリエンタ
ル電気社製）により、製造１日後、７日後、14日後、及
び21日後に測定し、各微生物の生菌数及び酸度の変化を
比較して試験した。
【００２４】３）試験結果 この試験の結果は表１に示すとおりである。表１から明
らかなように、ラクトパーオキシダーゼを添加すること
により特にビフィズス菌（B. longum）の保存における
生残数の低下が顕著に抑制されることが認められた。又
ラクトパーオキシダーゼを添加した場合、試料の保存中
に過酸化水素の生成は認められなかったが、ラクトパー
オキシダーゼ無添加の場合は、過酸化水素の顕著な生成
が認められた。尚、試験条件（例えば、使用する微生
物、ラクトパーオキシダーゼ等）を変更して試験しても
ほぼ同じ結果が得られた。
らかなように、ラクトパーオキシダーゼを添加すること
により特にビフィズス菌（B. longum）の保存における
生残数の低下が顕著に抑制されることが認められた。又
ラクトパーオキシダーゼを添加した場合、試料の保存中
に過酸化水素の生成は認められなかったが、ラクトパー
オキシダーゼ無添加の場合は、過酸化水素の顕著な生成
が認められた。尚、試験条件（例えば、使用する微生
物、ラクトパーオキシダーゼ等）を変更して試験しても
ほぼ同じ結果が得られた。
【００２５】
【表１】
【００２６】（試験例２）この試験は、ビフィズス菌及
びアシドフィルス菌の生菌を含む乳飲料中の過酸化水素
の生成及びラクトパーオキシダーゼ添加による保存効果
を調べるために行われた。
びアシドフィルス菌の生菌を含む乳飲料中の過酸化水素
の生成及びラクトパーオキシダーゼ添加による保存効果
を調べるために行われた。
【００２７】１）試料の調製 乳脂肪含量3.0%、無脂乳固形分含量8.9%に調整した原料
乳100 kgを常法により均質化し、130 ℃で２秒間殺菌
し、約４〜５℃に冷却した。この原料乳にビフィドバク
テリウム・ブレーベ（ B. breve ）及びラクトバシラス
・アシドフィルス（L. acidophilus）のミルクカルチャ
ー各１kgを添加し、均一に混合し、参考例１と同一の方
法により調製したラクトパーオキシダーゼ（純度50% ）
の1%水溶液４kgをプレート式殺菌機により70℃で15秒間
殺菌して添加した。さらに均一に混合し、200 ml容のポ
リエチレンラミネート紙容器に充填し、密封し、５〜８
℃の冷蔵庫に保存した。尚、ラクトパーオキシダーゼを
添加せずに上記と同様の方法で調製した試料を対照とし
た。又使用した微生物は、いずれも市販のヨーグルト・
カルチャーとして、又はATCCから容易に入手できるもの
である。
乳100 kgを常法により均質化し、130 ℃で２秒間殺菌
し、約４〜５℃に冷却した。この原料乳にビフィドバク
テリウム・ブレーベ（ B. breve ）及びラクトバシラス
・アシドフィルス（L. acidophilus）のミルクカルチャ
ー各１kgを添加し、均一に混合し、参考例１と同一の方
法により調製したラクトパーオキシダーゼ（純度50% ）
の1%水溶液４kgをプレート式殺菌機により70℃で15秒間
殺菌して添加した。さらに均一に混合し、200 ml容のポ
リエチレンラミネート紙容器に充填し、密封し、５〜８
℃の冷蔵庫に保存した。尚、ラクトパーオキシダーゼを
添加せずに上記と同様の方法で調製した試料を対照とし
た。又使用した微生物は、いずれも市販のヨーグルト・
カルチャーとして、又はATCCから容易に入手できるもの
である。
【００２８】２）試験方法 各微生物の生菌数を試験例１と同一の方法で測定し、生
菌数及び酸度の変化を比較して試験した。ただし、酸度
の測定を行わず、試験期間を製造後14日までとした。
菌数及び酸度の変化を比較して試験した。ただし、酸度
の測定を行わず、試験期間を製造後14日までとした。
【００２９】３）試験結果 この試験の結果は、表２に示すとおりであり、酸乳にラ
クトパーオキシダーゼを添加することにより保存中のビ
フィズス菌（ B. breve ）の生残数の低下が顕著に抑制
されることが認められ、更に乳酸菌（ L. acidophilus
）の生菌数の低下もかなり抑制されることが認められ
た。又ラクトパーオキシダーゼを添加した場合、試料の
保存中に過酸化水素の生成は認められなかったが、ラク
トパーオキシダーゼ無添加の場合は、過酸化水素の顕著
な生成が認められた。尚、試験条件（例えば、使用する
微生物、ラクトパーオキシダーゼ等）を変更して試験し
てもほぼ同じ結果が得られた。
クトパーオキシダーゼを添加することにより保存中のビ
フィズス菌（ B. breve ）の生残数の低下が顕著に抑制
されることが認められ、更に乳酸菌（ L. acidophilus
）の生菌数の低下もかなり抑制されることが認められ
た。又ラクトパーオキシダーゼを添加した場合、試料の
保存中に過酸化水素の生成は認められなかったが、ラク
トパーオキシダーゼ無添加の場合は、過酸化水素の顕著
な生成が認められた。尚、試験条件（例えば、使用する
微生物、ラクトパーオキシダーゼ等）を変更して試験し
てもほぼ同じ結果が得られた。
【００３０】
【表２】
【００３１】（試験例３）この試験は、ラクトパーオキ
シダーゼの有効濃度を調べるために行われた。 １）試料の調製 表３に示す濃度でラクトパーオキシダーゼを添加した以
外は、試験例１と同一の方法により試料を調製した。
シダーゼの有効濃度を調べるために行われた。 １）試料の調製 表３に示す濃度でラクトパーオキシダーゼを添加した以
外は、試験例１と同一の方法により試料を調製した。
【００３２】２）試験方法 試験例１と同一の方法によった。ただし、乳酸菌数及び
過酸化水素濃度の測定は行わなかった。
過酸化水素濃度の測定は行わなかった。
【００３３】３）試験結果 この試験の結果は、表３に示すとおりであった。表３か
ら明らかなように、ラクトパーオキシダーゼを10ppm 以
上添加した試料では21日間保存後も1ml 当たり約107 の
生菌数を維持していたが、10ppm 未満の添加量では添加
した場合の約1/10の生菌数であった。従って、ラクトパ
ーオキシダーゼの添加量は少なくとも10ppm であること
が判明した。尚、ラクトパーオキシダーゼ添加量の上限
は、製造費及び風味の点から200ppmであり、又試験条件
（例えば、使用する微生物、ラクトパーオキシダーゼ
等）を変更して試験してもほぼ同じ結果が得られた。
ら明らかなように、ラクトパーオキシダーゼを10ppm 以
上添加した試料では21日間保存後も1ml 当たり約107 の
生菌数を維持していたが、10ppm 未満の添加量では添加
した場合の約1/10の生菌数であった。従って、ラクトパ
ーオキシダーゼの添加量は少なくとも10ppm であること
が判明した。尚、ラクトパーオキシダーゼ添加量の上限
は、製造費及び風味の点から200ppmであり、又試験条件
（例えば、使用する微生物、ラクトパーオキシダーゼ
等）を変更して試験してもほぼ同じ結果が得られた。
【００３４】
【表３】
【００３５】参考例１ 未加熱の脱脂乳1000Kgを10リットルのCM−セファデック
スC-50（商標。ファルマシア社製）を充填したカラム
（直径20cm、長さ32cm）に通液し、セファデックス樹脂
にラクトパーオキシダーゼを吸着させ、のち水50Kgでセ
ファデックス樹脂を洗浄し、0.02モルリン酸二ナトリウ
ム−0.3 モル食塩緩衝液（pH7.0 ）20リットルを通液
し、セファデックス樹脂に吸着したラクトパーオキシダ
ーゼを溶出した。溶出液を分子量分画10,000の限外濾過
装置（DDS 社製）で濃縮と脱塩を同時に行い、得られた
約２リットルの濃縮液を常法により凍結乾燥し、粉末状
のラクトパーオキシダーゼ含有物約22g を得た。
スC-50（商標。ファルマシア社製）を充填したカラム
（直径20cm、長さ32cm）に通液し、セファデックス樹脂
にラクトパーオキシダーゼを吸着させ、のち水50Kgでセ
ファデックス樹脂を洗浄し、0.02モルリン酸二ナトリウ
ム−0.3 モル食塩緩衝液（pH7.0 ）20リットルを通液
し、セファデックス樹脂に吸着したラクトパーオキシダ
ーゼを溶出した。溶出液を分子量分画10,000の限外濾過
装置（DDS 社製）で濃縮と脱塩を同時に行い、得られた
約２リットルの濃縮液を常法により凍結乾燥し、粉末状
のラクトパーオキシダーゼ含有物約22g を得た。
【００３６】得られた粉末状のラクトパーオキシダーゼ
含有物中のラクトパーオキシダーゼの純度は約45% であ
った。
含有物中のラクトパーオキシダーゼの純度は約45% であ
った。
【００３７】参考例２ 未加熱のホエー1000Kgを用いた以外は、参考例１と同一
の方法により粉末状のラクトパーオキシダーゼ含有物約
18g （純度約50% ）を得た。
の方法により粉末状のラクトパーオキシダーゼ含有物約
18g （純度約50% ）を得た。
【００３８】次に実施例を示して本発明を更に詳述する
が、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
が、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００３９】
実施例１ 生乳1000Kg（乳脂肪含量3.5%、無脂乳固形分含量9.2%）
を均質化し、90〜92℃で10分間殺菌し、42〜43℃に冷却
し、市販のストレプトコッカス・サーモフィルス、ラク
トバシラス・ブルガリカス、及びビヒドバクテリウム・
ロンガム（ATCC15707）の牛乳カルチャーをそれぞれ15K
g、10Kg、及び15Kg添加した。更に参考例２と同一の方
法により調製したラクトパーオキシダーゼの2%水溶液10
Kgをメンブラン・フィルター（ミリポア社製）で無菌瀘
過して添加した。約10分間攪拌し、500ml ずつ容器（ポ
リエチレン・紙ラミネート容器）に充填し、密封し、38
〜39℃の恒温室で４時間発酵させ、冷却し、ヨーグルト
2000個を得た。
を均質化し、90〜92℃で10分間殺菌し、42〜43℃に冷却
し、市販のストレプトコッカス・サーモフィルス、ラク
トバシラス・ブルガリカス、及びビヒドバクテリウム・
ロンガム（ATCC15707）の牛乳カルチャーをそれぞれ15K
g、10Kg、及び15Kg添加した。更に参考例２と同一の方
法により調製したラクトパーオキシダーゼの2%水溶液10
Kgをメンブラン・フィルター（ミリポア社製）で無菌瀘
過して添加した。約10分間攪拌し、500ml ずつ容器（ポ
リエチレン・紙ラミネート容器）に充填し、密封し、38
〜39℃の恒温室で４時間発酵させ、冷却し、ヨーグルト
2000個を得た。
【００４０】得られたヨーグルトの製造１日後のビフィ
ズス菌数、乳酸菌数、及び酸度は、それぞれ2.2 ×108
/ml 、5.9 ×108 /ml 、及び0.77% であり、風味は良好
であった。
ズス菌数、乳酸菌数、及び酸度は、それぞれ2.2 ×108
/ml 、5.9 ×108 /ml 、及び0.77% であり、風味は良好
であった。
【００４１】実施例２ 成分を調整した牛乳1000Kg（乳脂肪含量1.5%、無脂固形
分含量8.5%）を均質化し、130 ℃で２秒間殺菌し、約５
℃に冷却し、市販のラクトバシルスス・アシドフィル
ス、及びビヒドバクテリウム・インファンティス（ATCC
15697）の牛乳カルチャーをそれぞれ10Kg添加した。更
に参考例１と同一の方法により調製したラクトパーオキ
シダーゼの2%水溶液５Kgを70℃で15秒間殺菌して添加し
た。約10分間攪拌し、180ml ずつガラス瓶に充填し、紙
キャップを施し、乳飲料5600個を得た。
分含量8.5%）を均質化し、130 ℃で２秒間殺菌し、約５
℃に冷却し、市販のラクトバシルスス・アシドフィル
ス、及びビヒドバクテリウム・インファンティス（ATCC
15697）の牛乳カルチャーをそれぞれ10Kg添加した。更
に参考例１と同一の方法により調製したラクトパーオキ
シダーゼの2%水溶液５Kgを70℃で15秒間殺菌して添加し
た。約10分間攪拌し、180ml ずつガラス瓶に充填し、紙
キャップを施し、乳飲料5600個を得た。
【００４２】得られた乳飲料の製造１日後のビフィズス
菌数、及び乳酸菌数は、それぞれ2.2 ×107 /ml 、及び
1.7 ×107 /ml であり、風味は良好であった。
菌数、及び乳酸菌数は、それぞれ2.2 ×107 /ml 、及び
1.7 ×107 /ml であり、風味は良好であった。
【００４３】
【発明の効果】本発明によって奏せられる効果は、次の
とおりである。 １）有用微生物を長期間生存させることが可能である。 ２）天然物を少量添加するのみなので、製造費が安価で
あり、かつ衛生上も安全である。
とおりである。 １）有用微生物を長期間生存させることが可能である。 ２）天然物を少量添加するのみなので、製造費が安価で
あり、かつ衛生上も安全である。
フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｎ 1/38 7236−4Ｂ 9/08 7823−4Ｂ //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:46 1:225 1:01） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:23 1:01）
Claims (2)
- 【請求項１】 少なくとも有用微生物の生菌及びラクト
パーオキシダーゼからなることを特徴とする生菌含有液
状組成物。 - 【請求項２】 少なくともビフィズス菌の生菌及び／又
は乳酸菌の生菌と、10ppm 以上の濃度のラクトパーオキ
シダーゼとを含有する請求項１記載の生菌含有液状組成
物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3228329A JPH0541981A (ja) | 1991-08-13 | 1991-08-13 | 生菌含有液状組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3228329A JPH0541981A (ja) | 1991-08-13 | 1991-08-13 | 生菌含有液状組成物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0541981A true JPH0541981A (ja) | 1993-02-23 |
Family
ID=16874751
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3228329A Pending JPH0541981A (ja) | 1991-08-13 | 1991-08-13 | 生菌含有液状組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0541981A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002095505A1 (en) | 2001-05-17 | 2002-11-28 | Citizen Watch Co., Ltd. | Tool for wristwatch |
| WO2007083425A1 (ja) | 2006-01-20 | 2007-07-26 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | 腸疾患のための医薬組成物、飲食品、又は飼料 |
| WO2008105113A1 (ja) | 2007-02-28 | 2008-09-04 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | 口腔内用殺菌剤、及び該殺菌剤を含有する食品添加剤 |
| WO2011105431A1 (ja) | 2010-02-24 | 2011-09-01 | 森永乳業株式会社 | 昆布抽出物を有効成分とする抗菌補助剤、抗菌組成物、及び飲食品 |
| CN112438313A (zh) * | 2019-09-02 | 2021-03-05 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | 一种酸奶及其制备工艺 |
-
1991
- 1991-08-13 JP JP3228329A patent/JPH0541981A/ja active Pending
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002095505A1 (en) | 2001-05-17 | 2002-11-28 | Citizen Watch Co., Ltd. | Tool for wristwatch |
| US7121165B2 (en) | 2001-05-17 | 2006-10-17 | Citizen Watch Co., Ltd. | Tool for wristwatch |
| WO2007083425A1 (ja) | 2006-01-20 | 2007-07-26 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | 腸疾患のための医薬組成物、飲食品、又は飼料 |
| WO2008105113A1 (ja) | 2007-02-28 | 2008-09-04 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | 口腔内用殺菌剤、及び該殺菌剤を含有する食品添加剤 |
| WO2011105431A1 (ja) | 2010-02-24 | 2011-09-01 | 森永乳業株式会社 | 昆布抽出物を有効成分とする抗菌補助剤、抗菌組成物、及び飲食品 |
| CN112438313A (zh) * | 2019-09-02 | 2021-03-05 | 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 | 一种酸奶及其制备工艺 |
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