JPH05201860A - 神経成長因子生合成促進剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 ニコチンを有効成分とする神経成長因子生合
成促進剤。ニコチンはＤ体，Ｌ体のいずれでもよくこれ
らのラセミ体でもよい。 【効果】 この促進剤は、脳内に存在する神経成長因子
の生合成を促進させ、アルツハイマー病の治療や脳機能
改善剤としての用途に供することができる。たばこの形
態で使用することもできる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、脳内に存在する神経成
長因子の生合成を促進させる神経成長因子生合成促進剤
に関するものである。

【０００２】

【発明の背景】神経成長因子（nerve growth factor;Ｎ
ＧＦ）は、末梢の交感神経ニューロンに作用する神経栄
養因子（neurotrophic factor)として既に知られてい
る。近年、神経成長因子は脳内の特に海馬や大脳皮質に
多く、小脳・中脳・大細胞性基底核にもそのレベルは低
いが存在していること、ＮＧＦｍＲＮＡレベルも海馬や
大脳皮質で高いことが明らかになった。これらの結果
は、神経成長因子が大細胞性コリン作動性神経の投射し
ている領域で合成され、前脳基底のコリン作動性神経系
の栄養因子として作用している可能性を強く示唆してい
る。このように神経成長因子はコリン作動性ニューロン
の生存・機能の維持に必須の栄養因子と考えられている
ことから、このニューロンの変性脱落が主要な病変とさ
れるアルツハイマー病の治療薬として活用し得る可能性
が生まれている（林恭三：化学 第44巻 第10号、700
頁、1989年) 。

【０００３】しかし、神経成長因子は分子量約13,000の
蛋白質であり、脳血液関門を通過するとは考えにくい。
この観点からは、末梢投与により脳血液関門を通過し得
る低分子量化合物であって、脳内での神経成長因子生合
成を促進する化合物を見つけることができれば、これら
化合物により機能低下した前脳基底核コリン作動性神経
細胞を賦活化し、脳の機能障害を改善できると期待でき
る。

【０００４】本発明者らはこの観点から研究を進めた結
果、マウス脳のアストログリア細胞が神経成長因子を合
成・分泌すること（Hayashi et al. "Natural Product
andBiological Activities" p259-269,University of T
okyo Press (1986)）、並びに神経成長因子の生合成能
がカテコールやベンゾキノン関連化合物により高められ
ることを見出した(Furukawa et al.: J.Biol.Chem., 25
9, 1259 (1984), Furukawa et al.: Biochem.Biophys.
Res.Commun., 147, 1048 (1987), Takeuchi etal.: FEB
S Lett., 261, 63 (1990)）。

【０００５】さらに、本発明者は、各種多価フェノール
類（カテコール化合物、ハイドロキノン化合物他）が含
まれていることが知られているたばこ燃焼煙タール中の
化合物について研究を進め、たばこ燃焼煙タールのフェ
ノール画分に神経成長因子の生合成促進効果が見られる
こと並びに、そのフェノール画分中にある１，２，４−
トリハイドロオキシベンゼン、２−イソプロピルハイド
ロキノン、エスクレチン及びクロロゲン酸が著しい神経
成長因子生合成促進効果があることを見出した（特願平
２−４０９６４５）。本発明者はこのような知見に基づ
きさらに研究を進めた結果、ニコチンにも著しい神経成
長因子生合成促進効果があることを新たに見出した。本
発明はこのような知見に基づきなされたものであり、ア
ルツハイマー病の治療や、各種脳機能改善剤としての用
途が期待出来る神経成長因子生合成促進剤を提供するも
のである。

【０００６】

【発明の目的】本発明は、神経成長因子の生合成を促進
させる神経成長因子生合成促進剤を提供することを目的
とする。

【０００７】

【発明の構成】このような本発明の目的は、ニコチンを
有効成分とする神経成長因子生合成促進剤により達成さ
れる。

【０００８】ニコチンはＤ体，Ｌ体のいずれでもよくこ
れらのラセミ体でも、本発明の神経成長因子生合成促進
剤として使用できる。

【０００９】この神経成長因子生合成促進剤を投与する
場合には、通常用いられる医薬担体（結合剤、賦形剤
等）を用いて適当な製剤、例えば経口用の錠剤やニコチ
ン含有のチューインガムとしてもよい。これらの有効成
分は燃焼前のたばこの葉の中にも存在しており、たばこ
の葉のままで使用することもできる。例えば、たばこの
形態で喫煙または噛みたばこ等の形態で服用（チューイ
ング）により摂取させるようにしてもよい。

【００１０】

【実施例１】ＩＣＲマウス（８日齢）の脳から常法（Ge
rshman et al.: J.Cell Sci., 37,243 (1979)）に従っ
てアストログリア細胞を単離し、10％ＦＣＳ（ウシ胎児
血清）、グルタミン、ペニシリン、ストレプトマイシン
を含むＤＥＭＥ(Dulbecco'sModified Eagle Medium)で
培養した後、数回継代した。細胞を24ウェルのプレート
に播種し、コンフルエント（細胞数：約1.5 ×10⁶cells
/cm²）に達した後、ＦＣＳの代わりに0.5 ％ＢＳＡ（牛
血清アルブミン）を含むＤＭＥＭ中で約８日間培養し静
止期に導入した。静止期の細胞を用いた理由は、増殖期
の細胞より静止期の細胞の方が成熟期や老年期の脳内細
胞の性状に近いと考えられるからである。

【００１１】この細胞を、各濃度のニコチン含有試料を
添加した0.5ml のＤＭＥＭ（0.5 ％ＢＳＡ含有）中で、
さらに24時間培養し、その培養上清を集め、その中に含
まれるＮＧＦ量を発明者らの開発した酵素免疫測定法
（Furukawa et al.: J.Neurochem., 40, 734-744,(198
3))で測定した。この酵素免疫測定法は、サンドウィッ
チ法（Two-site EIA) であり、抗マウス顎下腺のβＮＧ
Ｆ抗体ＩｇＧを１次抗体としてコートしたポリスチレン
チューブと、β-D- ガラクトシダーゼで標識した抗βＮ
ＧＦ抗体Ｆab' を２次抗体として用いたものである。な
お測定はトリプリケートで行なった。図１に示すよう
に、ｌ−ニコチンでは3.5 〜4.0mM で約３５〜４０倍、
ｄ−ニコチンではより低濃度の3.0 〜3.5mM で約３０倍
という高いＮＧＦ生合成促進効果が認められた。

【００１２】

【実施例２】ニコチンのＮＧＦ生合成促進効果を他の化
合物と比較するため、一定濃度の各化合物を培養アスト
ログリア細胞に添加し、一定時間毎に培養液の一部を採
り、その中のＮＧＦ量を測定した。細胞培養方法及びＮ
ＧＦ測定方法は実施例１と同様である。比較した化合物
は特願平2-409645においてその効果が確認された２−イ
ソプロピルハイドロキノンとエスクレチン（esculetin
e; 6,7-dihydroxy-2H-1-benzopyran-2-one)であり、そ
の濃度はそれぞれ最もＮＧＦ生合成促進効果の高かった
濃度とした。すなわち、２−イソプロピルハイドロキノ
ンは0.1mM 、エスクレチンは0.3mM とした。ｄ−ニコチ
ンは3.0mM とした。図２に示すように、ｄ−ニコチンは
添加１５時間後より顕著なＮＧＦ生合成促進効果を示
し、他の比較化合物よりも優れていた。

【００１３】

【発明の効果】以上のように、ニコチンには著しい神経
成長因子生合成促進作用が存在する。従って、これらの
化合物を有効成分として含有する本発明の神経成長因子
生合成促進剤は、アルツハイマー病の治療や、各種脳機
能改善剤としての用途に供することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】ニコチンによるＮＧＦ生合成促進効果を示す図
である。

【図２】ニコチンによるＮＧＦ生合成促進効果を培養時
間を追って追跡した結果を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:91）

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ニコチンを有効成分とする神経成長因子
   生合成促進剤。
2. 【請求項２】 ニコチンを有効成分として含有するたば
   この形態にある請求項１記載の神経成長因子生合成促進
   剤。