JP7631651B2 - スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進のための菌量調整剤 - Google Patents
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Description
例えば、特許文献2には、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)を有効成分とした、アトピー性皮膚炎の治療用途が開示されている。
高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、
テンニンカ抽出物と、
を有効成分として含む、
スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)の菌量抑制のための菌量調整剤である。
高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、
キシリトールと、
を有効成分として含む、
スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)及び/又はプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量抑制のための菌量調整剤である。
キシリトールと、
を含むことを特徴とする、皮膚外用組成物でもある。
テンニンカ抽出物と、
を含むことを特徴とする、皮膚外用組成物でもある。
また、本発明の好ましい実施の形態によれば、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)及び/又はプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量抑制作用に優れた剤を提供することができる。
また、植物原料を扱う会社より販売されている市販の高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物を購入し、使用することもできる。
また、高麗ニンジン抽出物は、日本において自生又は生育された高麗ニンジンの根を抽出することで、作製することができる。
中でも、抽出溶媒としてエタノールを好ましく挙げることができる。
また、チンピ抽出物は、日本において自生又は生育されたミカン科植物(例えば、マンダリンオレンジ)の果皮を抽出することで、作製することができる。
中でも、抽出溶媒としてエタノールを好ましく挙げることができる。
また、植物原料を扱う会社より販売されている市販のテンニンカ抽出物を購入し、使用することもできる。
中でも、抽出溶媒としてエタノールを好ましく挙げることができる。
また、高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物の含有量は、2質量%以下、好ましくは1.5質量%以下、より好ましくは1.2質量%以下である。
また、テンニンカ抽出物の含有量は、2質量%以下、好ましくは1.5質量%以下、より好ましくは1.2質量%以下である。
高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、テンニンカ抽出物とを組み合わせることで、特定の菌体の量を特異的にコントロールすることができる。
より具体的には、高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、テンニンカ抽出物とを組み合わせることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)の菌量抑制を両立することができる。
また、本発明の菌量調整剤におけるチンピ抽出物と、テンニンカ抽出物の含有比は、好ましくは1:2~1:0.5、より好ましくは、1:1.5~1:0.5、さらに好ましくは1:1.2~1:0.8である。
より具体的には、高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、テンニンカ抽出物の含有量を上記範囲とすることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)の菌量抑制を両立することができる。
高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、キシリトールとを組み合わせることで、特定の菌体の量を特異的にコントロールすることができる。
より具体的には、高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、キシリトールとを組み合わせることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)及び/又はプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量抑制を両立することができる。
また、本発明の菌量調整剤におけるキシリトールの含有量は、2質量%以下、好ましくは1.5質量%以下、より好ましくは1.2質量%以下である。
また、本発明の菌量調整剤におけるチンピ抽出物と、キシリトールの含有比は、好ましくは1:2~1:0.5、より好ましくは、1:1.5~1:0.5、さらに好ましくは1:1.2~1:0.8である。
より具体的には、高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、キシリトールの含有量を上記範囲とすることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)及び/又はプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量抑制を両立することができる。
中でも、本発明の菌量調整剤は、皮膚外用組成物の形態とすることが好ましい。
また、皮膚外用組成物における高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物の含有量は、2質量%以下、好ましくは1.5質量%以下、より好ましくは1.2質量%以下である。
また、皮膚外用組成物におけるテンニンカ抽出物の含有量は、2質量%以下、好ましくは1.5質量%以下、より好ましくは1.2質量%以下である。
また、皮膚外用組成物におけるキシリトールの含有量は、2質量%以下、好ましくは1.5質量%以下、より好ましくは1.2質量%以下である。
より具体的には、高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、キシリトールの含有量を上記範囲とすることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)及び/又はプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量抑制を両立することができる。
より具体的には、高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、テンニンカ抽出物の含有量を上記範囲とすることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)の菌量抑制を両立することができる。
また、後述の実施例に示すように、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進により、目立つ毛穴個数の増加、メラニン量の増加、シワ本数の増加の何れかに基づく肌状態を予防又は改善することができる。
また、メラニン量の増加により引き起こされる皮膚の状態としては、シミ、くすみ、色素沈着、炎症後色素沈着、日光色素斑などを挙げることができる。
また、シワ本数の増加により引き起こされる皮膚の状態としては、シワを挙げることができる。
具体的には、一般食品、錠剤、顆粒剤、ドリンク剤等の剤形を有するサプリメントの形態とすることができる。
高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物を含む組成物と、キシリトールを含む組成物とを含むキットにおける、高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物を含む組成物と、キシリトールを含む組成物とを混合したときの各有効成分の含有量は、前述の事項を適用することができる。
高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物を含む組成物と、テンニンカ抽出物を含む組成物とを含むキットにおける好ましい実施の形態は、前述の説明を援用することができる。
より具体的には、高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、キシリトールとを皮膚に適用することで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)及び/又はプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量抑制をすることができる。
本発明の方法によれば、高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、キシリトールとを皮膚に適用し上述の菌量調整をすることにより、より効果的に目立つ毛穴個数の増加、メラニン量の増加、シワ本数の増加の何れかに基づく肌状態を予防又は改善することができる。
高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、テンニンカ抽出物とを皮膚に適用することを特徴とする、皮膚上の菌量調整方法における好ましい実施の形態は、前述の説明を援用することができる。
(1)試験例1:スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)量の推移の検討
まず、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)GTC485株(以下、単にS.hominisとも表記する)を37℃の好気条件で、pH7.0の802培地(下表 参照)を用いて培養した。
ここで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)GTC485株は、日本細菌学会(郵便番号:170-0003、住所:東京都豊島区駒込1-43-9 駒込TSビル (一財)口腔保健協会内)を通じて購入した。
前述の方法で用意した細菌懸濁液を表1に示す実施例用培地(表1 実施例1)及び比較例用培地(表1 比較例1)に、その全体量が5mLとなるよう、添加した。
細菌添加後の培地における、菌体の量は5×107cellsであった。
計測した時間のOD660の測定値を、振とう培養開始時のOD660の測定値で引くことにより、OD660の測定値の変化量(OD660Δ初期値)を算出した。
試験培地を比較例用培地(表1 比較例1)、参考例用培地(表1 参考例1)に変更した以外は、前述の(1)と同様の方法により、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)量の推移について検証を行った。
計測した時間のOD660の測定値を、振とう培養開始時のOD660の測定値で引くことにより、OD660の測定値の変化量(OD660Δ初期値)を算出した。
また、上記と同様の方法により、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)量の推移についても、試験を行った(試験例2)。
ここで、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)として、スタフィロコッカス・アウレウスATCC6538株(以下、単にS.aureusとも表記する)を用いた。ここで、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)ATCC6538株は、製品評価技術基盤機構(郵便番号:292-0818、住所:千葉県木更津市かずさ鎌足2丁目5-8)を通じて購入した。
なお、結果は、N=3の平均±標準偏差(s.d.)で表した。
また、統計処理はt-検定に基づいて行った(*P<0.05)。
まず、プロピオバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)を37℃の嫌気条件で、pH7.0のGAM培地(下表3 参照)を用いて培養した。
ここで、プロピオバクテリウム・アクネス(Propionibacterium Acnes)として、プロピオバクテリウム・アクネスATCC6919株(以下、単にP.acnesとも表記する)を用いた。ここで、プロピオバクテリウム・アクネスATCC6919株は、住商ファーマインターナショナル株式会社(郵便番号:100-0003、住所:東京都千代田区一ツ橋一丁目2番2号 住友商事竹橋ビル12階)を通じて購入した。
前述の方法で用意した細菌懸濁液を表に示す実施例用培地10mL(実施例3)及び比較例用培地10mL(比較例3)に移し替えた。
ここで、他の糖類による影響を排除するため、実施例用培地及び比較例用培地として、GAM培地から糖類を除いた培地(糖類非含有培地)を用いた。
計測した時間のOD660の測定値を、培養開始時のOD660の測定値で引くことにより、OD660の測定値の変化量(OD660Δ初期値)を算出した。
なお、結果は、N=3の平均±標準偏差(s.d.)で表した。
また、統計処理はt-検定に基づいて行った(*P<0.05)。
実施例1の表2、表4の結果から、高麗ニンジン抽出物とキシリトールとを組み合わせて用いることで、特定の菌体の量を特異的にコントロールすることができることがわかった。
より具体的には、高麗ニンジン抽出物とキシリトールとを組み合わせて用いることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)及び/又はプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量抑制を両立することができることがわかった。
(1)試験例4、5:スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)及び、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)の培養試験
実施例1の表3のニンジンLAH-2-A(高麗ニンジンエキス、丸善製薬)を、チンピ抽出液-J(チンピエキス、丸善製薬)に置き換え、実施例1と同様の方法により、プロピオバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)量の推移を計測した。
実施例2の結果から、キシリトールとチンピ抽出物とを組み合わせて用いることで、特定の菌体の量を特異的にコントロールすることができることがわかった。
より具体的には、キシリトールとチンピ抽出物とを組み合わせて用いることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)及び/又はプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量抑制を両立することができることがわかった。
(1)試験の方法
(1-1)被験者
被験者となる男性は20-40代の健常日本人男性6名である。
(1-2-1)有効成分含有化粧料(実施例)及び有効成分非含有化粧料(比較例、プラセボ化粧料)の製造
PBS40mLに、ニンジンLAH-2-A(高麗ニンジンエキス、丸善製薬)が1質量%、キシリトールが1質量%となるよう混合し、有効成分含有化粧料(実施例)を製造した。
併せて、ニンジンLAH-2-A(高麗ニンジンエキス、丸善製薬)、キシリトールの代わりにPBSを混合し、有効成分非含有化粧料(比較例、プラセボ化粧料)を製造した。
被験者の左右頬部の一方に有効成分含有化粧料(実施例)を、他方に有効成分非含有化粧料(比較例、プラセボ化粧料)を、0.2mLずつ塗布した。
化粧料の塗布開始から8時間後に、以下の方法により、頬部における菌量の測定を行った。
化粧料塗布開始前及び、化粧料塗布試験終了時(化粧料の塗布開始から8時間後)に、以下の方法により、各頬部における菌量を測定した。
フォワードプライマー(配列番号1);5-TAGATGGATCTGAAACAGTAGTAT-3
リバースプライマー(配列番号2);5-CCTTCAACAATACCAAATTCGTC-3
プローブ(配列番号3);5-AGGTGCTTCATGTACTACAAACTCATTG-3
フォワードプライマー(配列番号4);5-AACTGTTGGCCACTATGAGT-3
リバースプライマー(配列番号5);5-CCAGCATTACCTGTAATCTCG-3
フォワードプライマー(配列番号6);5-AGGGCTCGTAGGTGGTTG-3
リバースプライマー(配列番号7);5-CCGTTTACAGCGTGGACTA-3
プローブ(配列番号8);5-AGGTGCTTCATGTACTACAAACTCATTG-3
なお、結果は各被験者の平均±標準偏差(s.d.)で表した。
ここで、高麗ニンジン抽出物のみを適用した場合には、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)とプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量は増加する。
以上より、実施例3の結果から、キシリトールと高麗ニンジン抽出物とを含む皮膚外用組成物を用いることで、特定の菌体の量を特異的にコントロールすることができることがわかった。
より具体的には、キシリトールと高麗ニンジン抽出物とを含む皮膚外用組成物を用いることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)及び/又はプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量抑制を両立することができることがわかった。
以下、本発明の好ましい実施の形態における、用途を裏付ける各種試験結果を示す。
なお、以下に記載の菌量は、特に断りのない限り、リード数であり、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis、S.hominis)の存在量を表す。
本実施例では、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)として、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)GTC485株(以下、単にS.hominisとも表記する)を用いた。
ここで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)GTC485株は、日本細菌学会(郵便番号:170-0003、住所:東京都豊島区駒込1-43-9 駒込TSビル (一財)口腔保健協会内)を通じて購入した。
(1)被験者
被験者となる女性は30代のアトピーなどの疾患を有しない健常日本人女性11名である。
(2-1)S.hominis含有化粧料(実施例)及びS.hominis非含有化粧料(比較例、プラセボ化粧料)の製造
前述のS.hominis凍結乾燥物を10mL蒸留水に懸濁させ懸濁液(S.hominis含有量:約1010CFU/mL)を調製した。
調製した懸濁液1mLと、化粧水(ポリエチレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリン、ジグリセリン、水酸化カリウム、水を含む)1mLを混和し、S.hominis含有化粧料(実施例、S.hominis含有量:約5×109CFU/mL)を製造した。
併せて、S.hominis非含有スキムミルク凍結乾燥品をS.hominis凍結乾燥物の代わりに用い、S.hominis含有化粧料と同様の方法により、S.hominis非含有化粧料(比較例、プラセボ化粧料)を製造した。
被験者の左右頬部の一方にS.hominis含有化粧料(実施例)を、他方にS.hominis非含有化粧料(比較例、プラセボ化粧料)を、一回あたり0.2mL(一回あたりのS.hominis適用量:109CFU個)、週2回、1ヶ月間塗布した。
化粧料の塗布開始から1ヶ月後に、以下の方法により、頬部における肌状態及びS.hominis量の測定を行った。
(1) 頬部におけるS.hominis量の測定及び評価
化粧料塗布開始前及び、化粧料塗布期間中、化粧料塗布試験終了時(化粧料の塗布開始から1ヶ月後)に、以下の方法により、各頬部におけるS.hominis量を測定した。
なお、結果は各被験者(N=11)の平均±標準誤差(s.e)で表した。また、統計処理は二元配置分散分析に基づいて行った(*P<0.05)。
化粧料塗布開始前及び、化粧料塗布試験終了時(化粧料の塗布開始から1ヶ月後)に、以下の方法により、頬部における目立つ毛穴個数の評価を行った。
また、結果は、ウィルコクソンの符号順位検定 (Wilcoxon signed rank test)に基づき、各被験者(N=11)の目立つ毛穴個数の変化量の平均±標準誤差(s.e)で表した(*P<0.05)。
化粧料塗布開始前及び、化粧料塗布試験終了時(化粧料の塗布開始から1ヶ月後)に、以下の方法により、頬部におけるメラニン指数の評価を行った。
また、結果は、ウィルコクソンの符号順位検定 (Wilcoxon signed rank test)に基づき、各被験者(N=11)の平均±標準誤差(s.e)で表した(*P<0.05)。
化粧料塗布開始前及び、化粧料塗布試験終了時(化粧料の塗布開始から1ヶ月後)に、以下の方法により、頬部における目立つシワ本数の評価を行った。
また、結果は、ウィルコクソンの符号順位検定 (Wilcoxon signed rank test)に基づき、各被験者(N=11)のシワ本数の変化量(Δシワ本数)の平均±標準誤差(s.e)で表した(*P<0.05)。
結果を、表8、表9及び図11~図14に示す。
まず、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)を、pH7.0の802培地(下表 参照)を用い培養した。
前述の方法で用意した細菌懸濁液を表10に示す実施例用培地及び比較例用培地に、その全体量が5mLとなるよう、添加した。
細菌添加後の培地における、菌体の量は5×107cellsであった。
計測した時間のOD660の測定値を、振とう培養開始時のOD660の測定値で引くことにより、OD660の測定値の変化量(OD660Δ初期値)を算出した。
また、統計処理はt-検定に基づいて行った(*P<0.05)。
表11の結果から、テンニンカ抽出物には、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)の菌量抑制作用があることがわかった。
前述の方法で用意した細菌懸濁液を表12に示す実施例用培地及び比較例用培地に、その全体量が5mLとなるよう、添加した。
細菌添加後の培地における、菌体の量は5×107cellsであった。
計測した時間のOD660の測定値を、振とう培養開始時のOD660の測定値で引くことにより、OD660の測定値の変化量(OD660Δ初期値)を算出した。
結果を表13、図16~図21に示す。
なお、結果は、N=3の平均±標準偏差(s.d.)で表した。
また、統計処理はt-検定に基づいて行った(*P<0.05)。
表13の結果から、高麗ニンジン抽出物とテンニンカ抽出物とを組み合わせて用いることで、特定の菌体の量を特異的にコントロールすることができることがわかった。
より具体的には、高麗ニンジン抽出物とテンニンカ抽出物とを組み合わせて用いることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)の菌量抑制を両立することができることがわかった。
より具体的には、チンピ抽出物とテンニンカ抽出物とを組み合わせて用いることで、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)の菌量抑制を両立することができることがわかった。
Claims (5)
- 高麗ニンジン抽出物及び/又はチンピ抽出物と、
キシリトール及び/又はテンニンカ抽出物と、を有効成分とし、
菌量調整剤における前記高麗ニンジン抽出物及び/又は前記チンピ抽出物の含有量が、0.02質量%以上かつ2質量%以下であり、
前記キシリトールを含む場合には、菌量調整剤における前記キシリトールの含有量が、0.5質量%以上かつ2質量%以下であり、
前記テンニンカ抽出物を含む場合には、菌量調整剤における前記テンニンカ抽出物の含有量が、0.02質量%以上かつ2質量%以下である、
スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進のための菌量調整剤。 - 前記高麗ニンジン抽出物を含む場合には、菌量調整剤における前記高麗ニンジン抽出物と、前記キシリトール及び/又は前記テンニンカ抽出物の含有比が1:1.5~1:0.5であり、
前記チンピ抽出物を含む場合には、菌量調整剤における前記チンピ抽出物と、前記キシリトール及び/又は前記テンニンカ抽出物の含有比が1:2~1:0.5である、請求項1に記載の菌量調整剤。 - 前記高麗ニンジン抽出物及び/又は前記チンピ抽出物と、
前記キシリトールと、
を有効成分として含む、
スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)及び/又はプロピオニバクテリウム・アクネス(Propionibacterium acnes)の菌量抑制のための、請求項1又は2に記載の菌量調整剤。 - 前記高麗ニンジン抽出物及び/又は前記チンピ抽出物と、
前記テンニンカ抽出物と、
を有効成分として含む、
スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進と、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)の菌量抑制のための、請求項1~3の何れか一項に記載の菌量調整剤。 - 請求項1~4の何れか一項に記載の菌量調整剤を含む、スタフィロコッカス・ホミニス(Staphylococcus hominis)の菌量促進のための菌量調整用皮膚外用組成物。
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