JP7213555B2

JP7213555B2 - 神経学的状態の予防および治療のためのカスパーゼ１の阻害およびその使用

Info

Publication number: JP7213555B2
Application number: JP2019555521A
Authority: JP
Inventors: ルブラン，アンドレア
Original assignee: シーエーエスピー－エイドインク．
Priority date: 2016-12-23
Filing date: 2017-12-20
Publication date: 2023-01-27
Anticipated expiration: 2037-12-20
Also published as: CA3047836A1; DK3558335T3; EP3558335A4; US20190328709A1; KR20190099497A; US20220054454A1; AU2017383127A1; KR102590456B1; CA3047836C; PL3558335T3; WO2018112626A1; ES2950100T3; EP3558335A1; EP3558335B1; PT3558335T; FI3558335T3; JP2020502282A; US11160788B2; CN110545835A; AU2017383127B2

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年１２月２３日に出願された米国仮出願第６２／４３８，５２９号および２０１７年１１月１日に出願された米国仮出願第６２／５７９，９３６号の優先権を主張し、これらの仮出願は参照することによりその全体が本明細書に組み込まれる。

本発明は、概して、神経学的状態、例えば神経変性疾患または認知障害の予防および治療に関し、より具体的には、カスパーゼ１阻害に基づくそのような予防および治療に関する。

神経変性疾患は世界中で数百万人に影響しており、人口集団が増加的に高齢となっていく中でますます目に付くものとなってきている。特にアルツハイマー病（ＡＤ）は、高齢の対象において非常によく見られ、記憶喪失および他の認知機能の進行性の低下により特徴付けられる。疾患の神経病理学としては、神経原線維変化の蓄積、β－アミロイド含有プラーク、ジストロフィー性神経突起、ならびにシナプスおよびニューロンの喪失が挙げられる（Selkoe, D. et al., 1999, Alzheimer's Disease, 2^nd Ed., Terry R. et al., eds. pg. 293-310. Philadelphia: Lippincott, Williams and Wilkins）。

世界保健機関によれば、アルツハイマー病が主要な原因である認知症は、世界中で４７５０万人の個体に影響し、追加的に７７０万の症例が毎年診断されている。ＡＤの症状の治療のために限られた数の薬理剤のみが同定されている。今日、これらのうちで最も目に付くものは、脳において活性のコリンエステラーゼ阻害剤であるガランタミン、リバスチグミン、およびドネペジル塩酸塩、ならびにＮ－メチル－Ｄ－アスパラギン酸グルタミン酸受容体を標的化するメマンチンである。これらの薬物は疾患の進行を緩慢化させる効果が低い。さらには、ＡＤの発生または進行の遮断に効果的な化合物は確立されていない。

認知障害は、米国単独で１６００万人より多くに影響している。認知障害を患う人々は、記憶、新たな事の学習、集中、または日常的な決定に困難を抱える。認知障害はいずれかの１病態により引き起こされるものではなく、特定の年齢群に限定されない。重篤度は、認知機能の変化に気付き始めることがあるがまだ日常の活動を行うことができることがある低いレベルから、物事の意味または重要性を理解する能力および話すまたは書く能力の喪失に繋がる結果、独立して生活することが不可能となり得る重篤なレベルに及ぶ。

したがって、神経学的状態、例えば神経変性疾患または認知障害の治療のための新規の組成物および方法の必要性が存在する。

本明細書は多数の文献を参照、それらの内容は参照することによりその全体が本明細書に組み込まれる。

一態様では、本発明は、対象において神経学的状態（例えば、神経変性疾患）を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、または治療する方法であって、対象にカスパーゼ１阻害剤を投与することを含む、方法に関する。

本発明はまた、対象において神経学的状態（例えば、神経変性疾患）を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、または治療するための、カスパーゼ１阻害剤の使用に関する。

本発明はまた、対象において神経学的状態（例えば、神経変性疾患）を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、または治療するための医薬の調製のための、カスパーゼ１阻害剤の使用に関する。

本発明はまた、対象における神経学的状態（例えば、神経変性疾患）の予防、その発症の遅延もしくはその重篤度の低減、その進行の予防もしくは後退、または治療において使用するためのカスパーゼ１阻害剤に関する。

本発明はまた、対象における神経学的状態（例えば、神経変性疾患）の予防、その発症の遅延もしくはその重篤度の低減、その進行の予防もしくは後退、または治療において使用するための、カスパーゼ１阻害剤、またはカスパーゼ１阻害剤および薬学的に許容される担体を含む組成物を含む、キットに関する。

さらなる態様では、本発明はまた、対象において認知障害を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、または治療する方法であって、対象にカスパーゼ１阻害剤を投与することを含む、方法に関する。

本発明はまた、対象において認知障害を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、または治療するための、カスパーゼ１阻害剤の使用に関する。

本発明はまた、対象において認知障害を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、または治療するための医薬の調製のための、カスパーゼ１阻害剤の使用に関する。

本発明はまた、対象における認知障害の予防、その発症の遅延もしくはその重篤度の低減、その進行の予防もしくは後退、または治療において使用するためのカスパーゼ１阻害剤に関する。

本発明はまた、対象における認知障害の予防、その発症の遅延もしくはその重篤度の低減、その進行の予防もしくは後退、または治療において使用するための、カスパーゼ１阻害剤、またはカスパーゼ１阻害剤および薬学的に許容される担体を含む組成物を含む、キットに関する。

一実施形態では、カスパーゼ１阻害剤は、式Ｉ：

（式中、
Ｒ^１は、

であり、
Ｒ^２およびＲ^３は一緒になって環を形成し、前記環は、

であり、
各環において、任意の水素原子は独立してＲ^７により置換されていてもよく、かつ、同じ原子に結合した２つの水素原子の任意のセットは独立してカルボニルにより置換されていてもよく、
Ｒ^２およびＲ^３により形成される環が、

である場合、
Ｒ^５はＲ^８Ｃ（Ｏ）－であり、かつ
Ｒ^８はフェニル、チオフェン、またはピリジンであり、各環はＲ^９から独立して選択される最大５つの基により置換されていてもよく、かつ、フェニル、チオフェン、またはピリジン上の少なくとも１つの位置はＲ^１０により置換されており、
Ｒ^２およびＲ^３により形成される環が、

である場合、
Ｒ^５はＲ^８Ｃ（Ｏ）－、ＨＣ（Ｏ）、Ｒ^８ＳＯ_２－、Ｒ^８ＯＣ（Ｏ）、（Ｒ^８）_２ＮＣ（Ｏ）、（Ｒ^８）（Ｈ）ＮＣ（Ｏ）、Ｒ^８Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）－、Ｒ^８－、（Ｒ^８）_２ＮＣ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）、（Ｒ^８）（Ｈ）ＮＣ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）、またはＲ^８ＯＣ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）－であり、かつ
Ｒ^８はＣ_１～１２の脂肪族基、Ｃ_３～１０の脂環式基、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロシクリル、５～１０員のヘテロアリール、（Ｃ_３～１０の脂環式基）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（Ｃ_６～１０のアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（５～１０員のヘテロシクリル）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、または（５～１０員のヘテロアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－であり、または、同じ原子に結合した２つのＲ^８基はその原子と共に３～１０員の芳香環または非芳香環を形成し、任意の環はＣ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロアリール、Ｃ_３～１０のシクロアルキル、または５～１０員のヘテロシクリルに縮合していてもよく、最大３つの脂肪族炭素原子は、Ｏ、Ｎ、ＮＲ^１１、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ_２から選択される基により置換されていてもよく、Ｒ^８はＲ^１２から独立して選択される最大６つの置換基により置換されており、
Ｒ^４はＨ、Ｃ_１～１２の脂肪族基、Ｃ_３～１０の脂環式基、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロシクリル、５～１０員のヘテロアリール、（Ｃ_３～１０のシクロアルキル）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、シクロアルケニル－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（Ｃ_６～１０のアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（５～１０員のヘテロシクリル）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、または（５～１０員のヘテロアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－であり、任意の水素原子は独立してＲ^１２により置換されていてもよく、かつ、同じ原子に結合した２つの水素原子の任意のセットは独立してカルボニルにより置換されていてもよく、
Ｒ^６は－Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）（Ｒ^１５）、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロアリール、またはＣ_３～７のシクロアルキルであり、
Ｒ^７はハロゲン、－ＯＲ^１１、－ＮＯ_２－ＣＮ－ＣＦ_３、－ＯＣＦ_１、－Ｒ^１１、１，２－メチレンジオキシ、１，２－エチレンジオキシ、－Ｎ（Ｒ^１１）_２、－ＳＲ^１１、－ＳＯＲ^１１、－ＳＯ_２Ｒ^１１－ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１１）_２、－ＳＯ_３Ｒ^１１，－Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｓ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^１１、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－（ＣＨ_２）_０～２ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）ＣＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）ＣＯＮ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）ＳＯ_２Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｓ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１１）_２－Ｎ（ＣＯＲ^１１）ＣＯＲ^１１、－Ｎ（ＯＲ^１１）Ｒ^１１、－Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ^１１）Ｒ^１１、－Ｃ（＝ＮＯＲ^１１）Ｒ^１１、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１１）_２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１１）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１１）_２、または－Ｐ（Ｏ）（Ｈ）（ＯＲ^１１）であり、
Ｒ^９およびＲ^１２はそれぞれ独立してハロゲン、－ＯＲ^１１、－ＮＯ_２，－ＣＮ、－ＣＦ_３、－ＯＣＦ_３、－Ｒ^１１、１，２－メチレンジオキシ、１，２－エチレンジオキシ、－Ｎ（Ｒ^１１）_２、－ＳＲ^１１、－ＳＯＲ^１１、－ＳＯ_２Ｒ^１１、－ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１１）_２－ＳＯ_３Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｓ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^１１、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－（ＣＨ_２）_０～２ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）ＣＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）ＣＯＮ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）ＳＯ_２Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｓ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（ＣＯＲ^１１）ＣＯＲ^１１、－Ｎ（ＯＲ^１１）Ｒ^１１、－Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ^１１）Ｒ^１１、－Ｃ（＝ＮＯＲ^１１）Ｒ^１１、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１１）_２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１１）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１１）_２、または－Ｐ（Ｏ）（Ｈ）（ＯＲ^１１）であり、
Ｒ^１０はハロゲン、－ＯＲ^１７、－ＮＯ_２－ＣＮ－ＣＦ_３－ＯＣＦ_３、－Ｒ^１７、または－ＳＲ^１１であり、Ｒ^１０は５つ以下の直鎖原子を有し、
Ｒ^１１は水素、Ｃ_１～１２の脂肪族基、Ｃ_３～１０の脂環式基、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロシクリル、５～１０員のヘテロアリール、（Ｃ_３～１０の脂環式基）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（Ｃ_６～１０のアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（５～１０員のヘテロシクリル）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、またはヘテロアリール－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－であり、任意の水素原子は独立してＲ^１８により置換されていてもよく、かつ、同じ原子に結合した２つの水素原子の任意のセットは独立してカルボニルにより置換されていてもよく、
Ｒ^１３はＨまたはＣ_１～６の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルであり、
Ｒ^１４はＨまたはＣ_１～５の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルであり、
Ｒ^１５は－ＣＦ_３、－Ｃ_３～７のシクロアルキル、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロアリール、複素環、またはＣ_１～６の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルであり、アルキルの各炭素原子は独立してＲ^１６により置換されていてもよく、
またはＲ^１３およびＲ^１５は、それらが結合する炭素原子と一緒になって３～１０員の脂環式基を形成し、
Ｒ^１６はハロゲン、－ＯＲ^１７、－ＮＯ_２、－ＣＮ、－ＣＦ_３－ＯＣＦ_３、－Ｒ^１７、または－ＳＲ^１７であり、Ｒ^１７はＣ_１～４の脂肪族基であり、
Ｒ^１７はＣ_１～４の脂肪族基であり、かつ
Ｒ^１８は－ＯＲ^１７、－ＮＯ_２、－ＣＮ、－ＣＦ_３、－ＯＣＦ_３、－Ｒ^１７、１，２－メチレンジオキシ、１，２－エチレンジオキシ、－Ｎ（Ｒ^１７）_２、－ＳＲ^１７、－ＳＯＲ^１７、－ＳＯ_７Ｒ^１７－ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１７）_２－ＳＯ_３Ｒ^１７、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^１７、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１７、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）Ｒ^１７－Ｃ（Ｓ）Ｒ^１７、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^１７、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１７、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－（ＣＨ_２）_０～２ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｎ（Ｒ^１７）ＣＯＲ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｎ（Ｒ^１７）ＣＯＮ（Ｒ^１７）_２、－Ｎ（Ｒ^１７）ＳＯ_２Ｒ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｓ）Ｒ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｎ（ＣＯＲ^１７）ＣＯＲ^１７、－Ｎ（ＯＲ^１７）Ｒ^１７、－Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ^１７）Ｒ^１７、－Ｃ（＝ＮＯＲ^１７）Ｒ^１７、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）_２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１７）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１７）_２、または－Ｐ（Ｏ）（Ｈ）（ＯＲ^１７）であり、Ｒ^１７は水素、Ｃ_１～１２の脂肪族基、Ｃ_３～１０の脂環式基、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロシクリル、５～１０員のヘテロアリール、（Ｃ_３～１０の脂環式基）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）、（Ｃ_６～１０のアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（５～１０員のヘテロシクリル）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、またはヘテロアリール－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－である）
を有する化合物、またはその単一の立体異性体、立体異性体の混合物、もしくは薬学的に許容される塩である。

一実施形態では、カスパーゼ１阻害剤は、式ＩＩ：

の化合物、またはその単一の立体異性体、立体異性体の混合物、もしくは薬学的に許容される塩である。

一実施形態では、カスパーゼ１阻害剤はＶＸ－７６５またはその薬学的に許容される塩である。

一実施形態では、神経変性疾患はアルツハイマー病（ＡＤ）である。

実施形態では、方法、使用およびキットは、神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））に関連する認知障害、例えば記憶障害の後退または予防のためのものである。

実施形態では、方法、使用およびキットは、神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））に関連するΑβ（例えば、Αβ_４２）の産生、形成、凝集および／または沈着の予防、後退、および／または減少のためのものである。一実施形態では、Αβ（例えば、Αβ_４２）の産生、形成、凝集および／または沈着のそのような予防、後退、および／または減少は、ＡＰＰレベルを減少させることなく起こる。

実施形態では、方法、使用およびキットは、神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））に関連する認知障害、例えば記憶障害の進行を後退させまたは予防するため、すなわち、そのような認知障害が進行して認知障害が悪化することを後退させまたは予防するためのものである。

一実施形態では、対象は神経学的状態（例えば、神経変性疾患）の兆候が現れる前の対象である。一実施形態では、対象は主観的認知障害を患っている。一実施形態では、対象は軽度認知障害を患っている。一実施形態では、対象は、
（ａ）脳における増加したアミロイドおよびタウ病理、
（ｂ）萎縮した海馬、
（ｃ）神経変性疾患への進行を指し示すアミロイド、タウおよび／または炎症性バイオマーカープロファイル、
（ｄ）年齢依存性認知障害またはアルツハイマー病を指し示す神経心理学的プロファイル、
（ｅ）年齢依存性認知障害またはアルツハイマー病を指し示す他の神経イメージングまたは生化学的（血液、ＣＳＦ）バイオマーカー、または
（ｆ）（ａ）～（ｅ）のいずれかの組合せ
を有する。

一実施形態では、対象は、認知障害に関連する脳における神経炎症を患っている。

一実施形態では、対象は家族性アルツハイマー病に関連する遺伝子変異を有する。

一実施形態では、認知障害は軽度認知障害である。

一実施形態では、認知障害は主観的認知障害である。

一実施形態では、認知障害は年齢依存性認知障害である。

一実施形態では、認知障害は、記憶障害、顔または場所を認識できないこと、質問を繰り返すこと、学習困難、判断困難、気分または行動の変化、視覚的問題、および日常生活の作業の実行困難の１つまたは複数を含む。

一実施形態では、対象は年齢依存性認知障害を指し示す神経心理学的プロファイルを有する。

一実施形態では、対象は哺乳動物であり、さらなる実施形態では、ヒトである。

一実施形態では、カスパーゼ１阻害剤は、カスパーゼ１阻害剤および薬学的に許容される担体を含む組成物中に含まれる。

本発明の他の目的、利点および特徴は、添付の図面を参照して例としてのみ与えられる本発明の特定の実施形態の以下の非限定的な説明を読めばより明らかとなるであろう。

指し示した通りに腹腔内（ＩＰ）注射によりビヒクルまたは５０ｍｇ／ＫｇのＶＸ－７６５で処置した同腹の野生型（ＷＴ）およびＪ２０マウス（処置群）に対する新規物体認識試験。前曝露：２つの非新規物体を有するＮＯＲボックスへの前曝露、非新規（familiar）：１つの非新規物体および１つの新規物体を用いる試験の間の非新規物体への接触回数、新規：新規物体への接触回数。使用したマウスの数を棒中に指し示す。群当たり１匹のマウスを屠殺した後、ウォッシュアウトして薬物の効率を検証した。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。処置群における小膠細胞Ｉｂａ１、星状膠細胞ＧＦＡＰ、シナプトフィジン、および抗Αβ_４０抗体での免疫組織化学（ｎ＝８のＷＴ、ｎ＝４のＪ２０＋ＶＸ－７６５、ｎ＝５のＪ２０＋Ｖｅｈ）。Ｉｂａ１は分画／分断法（fractionator/dissector method）を使用して定量化し、単一のニューロンを計数することはできないのでＧＦＡＰはデンシトメトリーにより定量化し、Ｉｌ－１βおよびΑβ_{３８，４０，４２}はＭＳＤＥＬＩＳＡにより定量化した。分散分析およびダネットの評価は、Ｉｂａ１についてＷＴからの統計的差異を示す。Ｉｌ－１βおよびＡβについてのＭＳＤＥＬＩＳＡ（ｎ＝１＋分散）をｐｇ／ｍＬで示す。シナプトフィジンレベルの定量は進行中である。処置した兆候が現れる前のＪ２０マウス（予防群）からのＮＯＲおよびオープンフィールド。ＮＯＲ：二元配置分散分析（チューキーの多重比較、ＯＦ：一元配置分散分析、ダネットの多重比較（Ｊ２０＋ビヒクル）。小膠細胞Ｉｂａ－１、星状膠細胞ＧＦＡＰ、およびシナプスシナプトフィジン抗体を用いる４ヶ月齢のマウス海馬（予防群）の免疫染色。ウォッシュアウト前の処置マウス群におけるＡＰＰのＣ末端（Ｃ１１）およびΑβ（６Ｅ１０）領域に対するウエスタンブロット。アガロース染色ゲルは、ＡＰＰ、Ｃａｓｐ６、Ｃａｓｐ１および対照としてのＨｐｒｔｌ（処置群）のＲＴ－ＰＣＲからのアンプリコンを示す。ＶＸ－７６５はヒトＣＮＳのニューロン変性を予防する（実施例８を参照）。ＶＸ－７６５処置はＪ２０マウスにおいて認知機能を回復させる。（ａ）実験パラダイム。腹腔内にビヒクル注射した野生型（ＷＴ＋ビヒクル；ｎ＝１３）およびＪ２０マウス（Ｊ２０＋ビヒクル：ｎ＝９）、ならびにＶＸ－７６５注射Ｊ２０マウス（Ｊ２０＋ＶＸ－７６５：ｎ＝９）の行動を５つの異なる時点に評価した：処置前のベースライン（ベースラインの非処置のＪ２０を一緒にグループ化した；ｎ＝１８）、ＶＸ－７６５またはビヒクルの３回のＩＰ注射／週の後（処置１）、２週にわたる６回の追加の注射後（処置２）、４週のウォッシュアウト期間後、および１週間内の追加の３回の注射後（処置３）。処置３の後に８ヶ月齢でマウスを屠殺した。（ｂ）ＮＯＲ識別指数（処置メイン効果、Ｆ（２，２０）＝８５．８、ｐ＜０．０００１；時間メイン効果、Ｆ（４，８０）＝４．１８８、ｐ＝０．００３９；処置×時間相互作用、Ｆ（８，８０）＝３．５９９、ｐ＝００１３、二元配置反復測定分散分析、Ｊ２０＋ビヒクルに対して比較したダネットの事後解析）、（ｃ）オープンフィールドタスクの間に移動した距離。データを二元配置反復測定分散分析により解析した（処置メイン効果、Ｆ（２，１９）＝１１．４７、ｐ＝０．０００５；処置×時間相互作用、Ｆ（８，７６）＝５．６９、ｐ＜０．０００１、二元配置反復測定分散分析、Ｊ２０＋ビヒクルに対して比較したダネットの事後解析）。（ｄ～ｉ）バーンズ迷路解析。学習習得（ｄ、ｇ）、プローブ試験の初期潜時および誤り（ｅ、ｈ）、および標的穴の選好性（ｆ、ｉ）；処置２（ｄ～ｆ）およびウォッシュアウト（ｇ～ｉ）の後のプローブの間に標的穴の右へ＋１から＋９または左へ－１から－９と標識された各穴の突いた回数。プローブ試験を解析した（処置２初期潜時、Ｆ（２，５２）＝５．８７９、ｐ＝０．００５０；処置２初期誤り、Ｆ（２，５２）＝９．９９８、ｐ＝０．０００２；ウォッシュアウト初期潜時、Ｆ（２，２２）＝４．０７６、ｐ＝０．０３１２；ウォッシュアウト初期誤り、Ｆ（２，２２）＝１０．８４、ｐ＝０．０００５、分散分析、チューキーの事後解析）。＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。同上。ＶＸ－７６５はＪ２０マウスにおいて認知機能を用量依存的に回復させる。（ａ）処置１（Ｆ（３，２４）＝２０．４２、ｐ＜０．０００１、分散分析、０ｍｇ／ｋｇでのＪ２０と比較したダネットの事後解析）、処置２（Ｆ（３，２３）＝１２．８３、ｐ＜０．０００１、分散分析、０ｍｇ／ｋｇでのＪ２０と比較したダネットの事後解析）、ウォッシュアウト、および処置３（Ｆ（３，２３）＝８．８２８、ｐ＝０．０００４、分散分析、０ｍｇ／ｋｇでのＪ２０と比較したダネットの事後解析）におけるＶＸ－７６５用量応答後のＮＯＲ識別指数。なお、５０ｍｇ／ｋｇの用量は同時に行わず、比較目的のためにのみここに設けた。それにもかかわらず、識別指数は実験（ｂ～ｇ）、バーンズ迷路の処置２（ｂ～ｄ）およびウォッシュアウト（ｅ～ｇ）、学習習得（ｂ、ｅ）、プローブ試験（ｃ、ｆ）、および標的穴の選好性（ｄ、ｇ）で安定であった。Ｔ２初期誤りについて、Ｆ（２、１４）＝５．６９、ｐ＝０．０１５５、分散分析、Ｊ２０＋ビヒクルに対して比較したダネットの事後解析。＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。ＶＸ－７６５はＪ２０マウスにおいて神経炎症を後退させる。（ａ）海馬の網状分子区画および皮質のＳ１におけるＩｂａ－１陽性小膠細胞の免疫ヒストグラフ（スケールバー＝５０μｍ）。（ｂ）錐体細胞層から網状分子層への海馬（Ｆ（２、１１）＝５８、ｐ＜０．０００１）および皮質（Ｆ（２、１１）＝３９．９５、ｐ＜０．０００１、分散分析、Ｊ２０＋ビヒクルに対して比較したダネットの事後解析、＊＊＊ｐ＜０．００１）におけるＷＴ＋ビヒクル（ｎ＝６）、Ｊ２０＋ビヒクル（ｎ＝５）、およびＪ２０＋ＶＸ－７６５（ｎ＝４）についてのＩｂａ－１^＋小膠細胞の立体解析学的定量化。（ｃ）形態学的小膠細胞サブタイプ１（黒（一番下）の棒）、２（ライトグレーの棒）、３（ダークグレーの棒）および４（黒（一番上）の棒）の平均パーセンテージ分布。（ｄ）５ヶ月齢の前処置したＪ２０ならびに８ヶ月齢の処置したＷＴおよびＪ２０におけるＥＬＩＳＡにより測定したＩｌ１－βのｐｇ／ｍｇレベル。（ｅ）星状膠細胞のＧＦＡＰ^＋免疫ヒストグラフ。同上。ＶＸ－７６５はＪ２０マウスにおいてΑβの進行を予防する。（ａ）抗Ｆ２５７６抗血清を用いる前処置した５ヶ月齢のＪ２０（ベースライン）および８ヶ月齢のビヒクルまたはＶＸ－７６５処置ＷＴまたはＪ２０マウスの海馬の網状分子層およびＳ１皮質のΑβ免疫ヒストグラフ（スケールバー＝５０μｍ）。（ｂ）錐体細胞層から網状分子層までの海馬（ｐ＝０．００２９）および皮質（ｐ＝０．０３１４、対応のないｔ検定）におけるΑβ免疫染色密度をＪ２０＋ビヒクル（ｎ＝５）マウスとＪ２０＋ＶＸ－７６５（ｎ＝４）マウスとの間で比較する定量的解析。（ｃ）前処置した５ヶ月齢のＪ２０、８ヶ月齢のビヒクルまたはＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスの海馬における総Αβ（Αβ_３８＋Αβ_４０＋Αβ_４２）レベルに対するＲＩＰＡ可溶性Αβ_４２を比較する定量的解析（Ｆ（２，９）＝６．６１４、ｐ＝０．０１７１、分散分析、チューキーの事後解析、＊ｐ＜０．０５）。ＷＴマウスの脳からはＥＬＩＳＡシグナルは得られなかった。（ｄ）ｐｇ／ｍｇの脳組織中のＥＬＩＳＡにより測定されたＲＩＰＡ可溶性の総Αβ。（ｅ、ｆ）ｐｇ／ｍｇの脳組織中のＥＬＩＳＡにより測定された総Αβ（Αβ_３８＋Αβ_４０＋Αβ_４２）に対するギ酸可溶性Αβ_４２（ｅ）および総Αβ（ｆ）レベル。Ｊ２０＋ビヒクルとＪ２０＋ＶＸ－７６５との差異を評価するためにスチューデントｔ検定を使用した。ｐｇ／ｍｇの脳組織中のＥＬＩＳＡにより測定された（ｇ、ｈ、ｉ）ＲＩＰＡ可溶性および（ｊ、ｋ、ｌ）ギ酸可溶性のΑβ_３８、Αβ_４０、およびΑβ_４２。海馬および皮質中の（ｍ）ＡＰＰｍＲＮＡおよびタンパク質レベルならびに（ｎ）インスリン分解酵素（ＩＤＥ）およびネプリライシンのｍＲＮＡレベル（ｏ）。同上。同上。ＶＸ－７６５はＪ２０マウスにおいてシナプトフィジン免疫組織染色の喪失を後退させる。（ａ）前処置した５ヶ月齢のＪ２０および８ヶ月齢のビヒクルまたはＶＸ－７６５処置ＷＴまたはＪ２０マウス海馬および皮質からの免疫組織学的な顕微鏡写真。（ｂ）海馬（Ｆ（２，９）＝７．９７４、ｐ＝０．０１０２、分散分析、チューキーの事後解析、＊ｐ＜０．０５）および皮質におけるシナプトフィジン免疫染色密度をＷＴ＋ビヒクル（ｎ＝４）、Ｊ２０＋ビヒクル（ｎ＝４）、およびＪ２０＋ＶＸ－７６５（ｎ＝４）間で比較する定量的解析。（ｃ）ビヒクルまたはＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスの海馬における有意に変化したシナプスタンパク質のｍＲＮＡレベル。クラスカル・ウォリス（Kruskall-Wallis）はＷＴ＋ビヒクル、Ｊ２０＋ビヒクルおよびＪ２０＋ＶＸ間の有意差を示す。ＶＸ－７６５は、ＡＰＰまたは血清枯渇媒介性の神経突起ビーズ状変性（beading）からＣＮＳ初代ヒトニューロン（ＨＰＮ）を保護する。（ａ）ＶＸ－７６５の用量を増加させるＭＴＴアッセイ。（ｂ）正常なニューロンにおけるＥＧＦＰの均一な分布およびＡＰＰをトランスフェクトしたニューロンにおける神経突起ビーズ状変性を示す蛍光顕微鏡写真。（ｃ）ストレッサーの１時間前および連続的に（前処置）またはストレッサーの４８時間後（ビーズ状変性後処置）に２５もしくは５０μΜのＶＸ－７６５または５μΜのＺ－ＹＶＡＤ－ｆｍｋＣａｓｐ１ペプチド阻害剤で処置した、ＡＰＰをトランスフェクトしたまたは血清を枯渇させたニューロンにおけるビーズ状変性のパーセンテージ。前処置は、ＡＰＰ^ＷＴトランスフェクション（処置メイン効果Ｆ（４，１０）＝１０．１７、ｐ＝０．００１５；時間メイン効果Ｆ（２，２０）＝９３．３２、ｐ＜０．０００１；処置×時間相互作用Ｆ（８，２０）＝６．７３６、ｐ＝０．０００３、二元配置反復測定分散分析、ＡＰＰ^ＷＴ＋ＤＭＳＯと比較したダネットの事後解析）および血清枯渇（処置メイン効果Ｆ（４，１０）＝１０．２、ｐ＝０．００１５；時間メイン効果Ｆ（２，２０）＝３７．６５、ｐ＜０．０００１、二元配置反復測定分散分析、血清－＋ＤＭＳＯと比較したダネットの事後解析）の後に主な効果を示した。ビーズ状変性後処置は、ＡＰＰ^ＷＴトランスフェクション（時間メイン効果Ｆ（４，４０）＝１０２．７、ｐ＜０．０００１、二元配置反復測定分散分析、ＡＰＰ^ＷＴ＋ＤＭＳＯと比較したダネットの事後解析）および血清枯渇（処置メイン効果Ｆ（４，２３）＝１４．１２、ｐ＜０．０００１；時間メイン効果Ｆ（４，２３）＝２４．３５、ｐ＜０．０００１、二元配置分散分析、血清－＋ＤＭＳＯと比較したダネットの事後解析）の後に主な効果を示した。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。（ｄ～ｅ）分泌されたＨＰＮまたは細胞のΑβ_４２／総Αβ_{３８＋４０＋４２}（ｄ）（Ｆ（３，４）＝１２．７３、ｐ＝０．０１６３、分散分析、血清＋ＤＭＳＯと比較したダネットの事後解析、＊ｐ＜０．０５）、および（ｅ）非処置（＋Ｓ）、血清枯渇（－Ｓ）、または２５もしくは５０μＭのＶＸ－７６５で処置した血清を枯渇させたヒトニューロンから分泌されたＩｌ－１β、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、およびＩｌ－６のレベル。同上。ＶＸ－７６５およびＶＲＴ－０４３１９８の選択性および血液脳透過性。（ａ～ｂ）ヒトＣａｓｐ１～１０に対するＶＸ－７６５（ａ）およびＶＲＴ－０４３１９８（ｂ）のＩＣ_５０。（ｃ～ｄ）マウスＣａｓｐ１およびＣａｓｐ１１に対するＶＸ－７６５（ｃ）およびＶＲＴ－０４３１９８（ｄ）のＩＣ_５０。（ｅ）３匹の野生型および４匹のＪ２０マウスの脳皮質および海馬ならびに血漿におけるＶＸ－７６５およびＶＲＴ－０４３１９８の血液脳関門透過性および存在。脳レベル対血漿レベルの比が算出される。同上。ビヒクル処置ＷＴおよびＪ２０マウスならびに５０ｍｇ／ｋｇのＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスの行動評価。図１ａに記載される通りに処置前（ベースライン）、処置１、２、ウォッシュアウト、および処置３における（ａ）動いた時間の％（処置メイン効果、Ｆ（２，２８）＝１０．８９、ｐ＝０．０００３；時間メイン効果、Ｆ（３，８４）＝６．６４４、ｐ＝０．０００４、二元配置反復測定分散分析、Ｊ２０＋ビヒクルに対して比較したダネットの事後解析、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）および辺縁部にいた時間の％（ｂ）。（ｃ）各試験セッションにおいて各個々のマウスについての非新規または新規物体への接触回数は全てのマウス群において一貫した行動を示した。前曝露は２つの同一物体を用いたマウス成績を指し示し、非新規および新規は試験の間のそれぞれ非新規物体および新規物体への接触回数を指し示す。（ｄ）個々のビヒクル処置ＷＴおよびＪ２０マウスならびにＶＸ－７６５処置マウスのオープンフィールドタスクにおける移動距離により実証された過活動性。（ｅ）Ｙ迷路装置における変化の％は、処置１およびウォッシュアウトの後にのみ群間の差異を示す（二元配置反復測定分散分析、Ｊ２０＋ビヒクルに対して比較したダネットの事後解析、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１）。同上。同上。同上。ビヒクル、または２５もしくは１０ｍｇ／ｋｇのＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスの行動評価。ビヒクル（０）、２５または１０ｍｇ／ｋｇのＶＸ－７６５処置マウスの（ａ）動いた時間の％および（ｂ）辺縁部にいた時間の％。（ｃ）処置１の前（ベースライン）ならびにビヒクル（０）、２５または１０ｍｇ／ｋｇのＶＸ－７６５処置の後の処置１、処置２、ウォッシュアウト、および処置３の後の各個々のマウスについての非新規および新規物体のＮＯＲ接触回数。２匹のマウス（Ｊ２０＋ビヒクル、Ｊ２０＋ＶＸ－７６５、１０ｍｇ／ｋｇ）は行動試験の間に応答せず、解析から除外した。（ｄ～ｅ）処置１、処置２（Ｆ（２，１４）＝４．１０６、ｐ＝０．０３９５、分散分析、Ｊ２０＋ビヒクルに対して比較したダネットの事後解析）、ウォッシュアウト、および処置３においてビヒクル（０）、２５または１０ｍｇ／ｋｇのＶＸ－７６５処置マウスにおいてオープンフィールドタスク（ｄ）での移動距離により測定された過活動性。（ｅ）オープンフィールドタスクにおける各個々のマウスの過活動性。２匹のマウス（Ｊ２０＋ビヒクル、Ｊ２０＋１０ｍｇ／ｋｇのＶＸ－７６５）は処置２の後に応答せず、解析から除外した。同上。Ｃａｓｐ１ヌルバックグラウンドでのＪ２０マウスの行動評価。Ｃａｓｐ１遺伝子を有する（Ｃａｓｐ１＋）および有しない（Ｃａｓｐ１－）ＷＴ／ＷＴ（Ｊ２０－）またはＪ２０／ＷＴ（Ｊ２０＋）マウスの（ａ）動いた時間の％、（ｂ）辺縁部にいた時間の％、（ｃ）移動距離（Ｆ（３，１７）＝１０．８６、ｐ＝０．０００３、分散分析、Ｊ２０と比較したダネットの事後解析、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１、（ｄ）ＮＯＲ識別指数（Ｆ（３，１７）＝１０．０２、ｐ＝０．０００５、分散分析、Ｊ２０と比較したダネットの事後解析、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）、および（ｅ）Ｙ迷路における変化の％、（ｆ）８ヶ月齢のビヒクル処置Ｊ２０、Ｊ２０／Ｃａｓｐ１^－／－、およびＶＸ－７６５処置（Ｔ３）マウスの海馬におけるＩｂａ１免疫陽性染色。ビヒクル処置ＷＴおよびＪ２０マウスならびにＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスにおけるサイトカインのＥＬＩＳＡ測定。（ａ）Ｔ３後のマウスにおけるＩｌ－１βの血漿レベル。（ｂ）ビヒクル処置ＷＴおよびＪ２０ならびにＶＸ－７６５処置Ｊ２０の脳の海馬および皮質におけるサイトカインレベル。（ｃ）ビヒクル処置ＷＴ（ｎ＝６）およびＪ２０（ｎ＝５）ならびにＶＸ－７６５処置Ｊ２０（ｎ＝４）の脳の海馬（Ｆ（２，１２）＝５．２３４、ｐ＝０．０２３２、分散分析、ＷＴ＋ビヒクルと比較したダネットの事後解析、＊ｐ＜０．０５）および皮質におけるＧＦＡＰ免疫染色密度。（ｄ）ビヒクル処置ＷＴおよびＪ２０ならびにＶＸ－７６５処置Ｊ２０の脳の海馬および皮質におけるＧＦＡＰのウエスタンブロットおよび定量的解析。マウスの海馬または皮質においてチオフラビンＳまたは抗Ａβ_１－４０Ｆ２５２７６抗血清で染色したΑβ。（ａ）８ヶ月齢のビヒクル処置ＷＴおよびＪ２０ならびにＶＸ－７６５処置Ｊ２０の脳の海馬および皮質（Ｔ３後）における抗Αβ免疫染色とチオフラビンＳ染色Αβとの比較。（ｂ）８ヶ月齢のビヒクル処置Ｊ２０、Ｊ２０／Ｃａｓｐ１^－／－、およびＶＸ－７６５処置（Ｔ３）マウスの海馬における抗Αβ Ｆ２５２７６免疫陽性染色。（ｃ）８ヶ月齢のビヒクル処置Ｊ２０、Ｊ２０／Ｃａｓｐ１^－／－、およびＶＸ－７６５処置（Ｔ３）マウスの海馬におけるΑβおよびＩｂａ１免疫陽性沈着物のより高倍率像。ＶＸ－７６５により阻害される経路を説明するための構成の図解。ＡＰＰ^{Ｓｗ／Ｉｎｄ}導入遺伝子がΑβレベルを増加させ、次にそれが小膠細胞の活性化を通じて炎症を生成すると考えられる（左パネル）。特定の理論に縛られないが、本明細書に記載される結果は、ＡＰＰ^{Ｓｗ／ｌｎｄ}導入遺伝子が最初に炎症を誘導し、次にΑβの増加に繋がるとするモデルに合致する（右パネル）。Ｃａｓｐ１を阻害することにより、ＶＸ－７６５は炎症およびその後のΑβの蓄積を遮断する。Ｊ２０マウスにおける過活動性を評価するためのオープンフィールド評価。２ヶ月齢のマウスを１ヶ月間ビヒクル（ＷＴおよびＪ２０）または５０ｍｇ／ｋｇのＶＸ－７６５（Ｊ２０）で処置した（３回の注射／週×４週＝１２回の注射）。移動距離（ａ）、四半分に入った回数（ｂ）、および動いた時間の％（ｃ）を測定することにより過活動性を評価し、辺縁部で過ごした時間の％（ｄ）により不安を評価した。Ｊ２０マウスにおけるエピソード記憶を評価するための新規物体認識行動アッセイ。２ヶ月齢のマウスを１ヶ月間ビヒクル（ＷＴおよびＪ２０）または５０ｍｇ／ｋｇのＶＸ－７６５（Ｊ２０）で処置した（３回の注射／週×４週＝１２回の注射）。（ａ）研究を実行した方法の図式的描写。（ｂ）識別指数は、新規物体への接触回数から非新規物体への接触回数を引いたものを両物体についての総接触回数により割ったものを指し示す。Ｊ２０＋ビヒクルに対するダネットの比較を伴う二元配置分散分析（Ｆ（２，２４０）＝７５．６２、ｐ＜０．０００１）。＊ｐ＜０．０５、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。（ｃ）異なる時点に試験したマウスの各群におけるＮＯＲに障害があるマウスの％。Ｊ２０マウスにおける空間記憶を評価するためのバーンズ迷路。バーンズ迷路は（ａ～ｃ）１２週（６ヶ月齢）および（ｄ～ｆ）２０週（８ヶ月齢）のウォッシュアウト時に試験した。（ａ、ｄ）４日にわたる脱出口を見付ける学習（秒）。（ｂ、ｅ）脱出口に到達するまでの初期潜時および脱出口を発見するための初期誤り。（ｂ）において一元配置分散分析（Ｆ（２，２９）＝５．９４８、ｐ＝０．００６８）、（ｅ）において一元配置分散分析（Ｆ（２，２２）＝７．２５４５、ｐ＝０．００３８）の後にダネットの事後解析、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１。（ｃ、ｆ）プローブ試験：ハッチ穴を遮断した時のバーンズ迷路の２０個の穴のそれぞれについての突いた回数。Ｔはトレーニングの間にハッチが接近可能な標的穴を指し示す。抗アミロイドベータペプチド１～４０抗血清での８ヶ月齢（２０週のウォッシュアウト）のマウスの脳の免疫染色（ａ）。全ての切片を一緒かつＤａｋｏ免疫測定装置を用いて自動的に免疫染色し、抗ウサギＨＲＰおよびジアミノベンジジンを用いて免疫反応性を明らかにした。（ｂ）マウスが４、５、６、７、および８ヶ月の時のＶＸ－７６５のそれぞれ４、８、１２、１６、および２０週のウォッシュアウトでのアミロイド染色の免疫陽性密度の定量。（ｃ）ＲＩＰＡ可溶性およびギ酸可溶性の海馬および皮質組織のタンパク質抽出物のＥＬＩＳＡ分析。同上。異なる時点のウォッシュアウトにおけるマウスの脳海馬のＩｂａ１免疫陽性染色（ａ、ｂ）。全ての切片を一緒かつＤａｋｏ免疫測定装置を用いて自動的に免疫染色し、Ｉｂａ１免疫陽性ニューロンの数を立体解析学的に計数した。統計学は図１０ｂに記載の通りに行った。（ｃ）図１０ｃに記載の通りのＩｂａ１免疫陽性小膠細胞のサブタイプの解析。同上。同上。異なる時点のウォッシュアウトにおけるマウスの脳の海馬におけるＧＦＡＰ免疫陽性染色（ａ、ｂ）。全ての切片を一緒かつＤａｋｏ免疫測定装置を用いて自動的に免疫染色した。ＧＦＡＰ免疫陽性星状細胞の定量は上記の通りに行った。同上。異なる時点のウォッシュアウトにおけるマウスの脳の海馬におけるシナプトフィジン免疫陽性染色。全ての切片を一緒かつＤａｋｏ免疫測定装置を用いて自動的に免疫染色した。ＶＸ－７６５でのＪ２０マウスの予防的処置（実施例１４を参照）。データは各群内の個々のマウスのＮＯＲ成績を示す。同上。同上。

発明の開示
本発明は、カスパーゼ１阻害に基づいて、神経学的状態（例えば、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病（ＡＤ））を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、または治療することに関する。本発明はまた、カスパーゼ１阻害に基づいて、認知障害を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、または治療することに関する。実施形態では、本明細書に記載される方法、使用およびキットは、発症を遅延させ、重篤度を低減させ、または、一部の場合には神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））に関連し得る、認知障害、例えば記憶障害を後退させるためのものである。

カスパーゼ１（Ｃａｓｐ１、インターロイキン１変換酵素またはＩＣＥとしても公知；ＥＣ３．４．２２．３６；総説については、Caspase-1: the inflammasome and beyond. Sollberger G. et al. Innate Immun. 20(2): 115-25 (2014)を参照）は、免疫機能において重大な役割を有するサイトカインであるＩＬ－１βおよびＩＬ－１８のタンパク質分解活性化（それらの前駆体を切断して成熟ペプチドをもたらす）に関与するプロテアーゼである。カスパーゼ１は、切断されて２つのサブユニット、ｐ２０およびｐ１０を産生するチモーゲンとして存在し、活性酵素は、それぞれがｐ２０およびｐ１０サブユニットを含有する２つのヘテロ二量体のヘテロ四量体である。さらに、様々なカスパーゼ１アイソフォームが存在する（例えば、Ｕｎｉｐｒｏｔ－Ｐ２９４６６を参照）。

カスパーゼ１阻害剤
本明細書で使用される場合、「カスパーゼ１阻害剤」は、カスパーゼ１の発現および／または活性を直接的または間接的に阻害する任意の化合物または組成物を指す。そのように限定されないが、カスパーゼ１の発現および／または活性をモジュレ―トする候補化合物は、様々な方法およびアッセイを使用して試験される。それは、分子、例えば、そのように限定されないが、ｓｉＲＮＡ、アンチセンス分子、タンパク質、ペプチド、小分子、抗体などを含む。

本明細書で使用される場合、カスパーゼ１の発現および／または活性の「阻害」または「減少」は、参照カスパーゼ１の発現および／または活性（例えば、カスパーゼ１阻害剤で処理する前の対象の細胞または組織中のカスパーゼ１の発現および／または活性の測定値）と比較して少なくとも５％のカスパーゼ１の発現レベルまたは活性レベルの低減を指す。一実施形態では、カスパーゼ１の発現レベルまたは活性レベルの低減は、少なくとも１０％低く、さらなる実施形態では、少なくとも１５％低く、さらなる実施形態では、少なくとも２０％低く、さらなる実施形態では、少なくとも３０％低く、さらなる実施形態では、少なくとも４０％低く、さらなる実施形態では、少なくとも５０％低く、さらなる実施形態では、少なくとも６０％低く、さらなる実施形態では、少なくとも７０％低く、さらなる実施形態では、少なくとも８０％低く、さらなる実施形態では、少なくとも９０％低く、さらなる実施形態では、１００％低い（完全な阻害）。

好ましくは、カスパーゼ１阻害剤は、低いレベルの細胞毒性を有する化合物である。
一実施形態では、カスパーゼ１阻害剤は、その活性代謝物に変換されるプロドラッグの形態で投与するためのものである。

カスパーゼ１の様々な阻害剤が公知であり（例えば、米国特許第９，３５２，０１０号明細書および米国特許第７，４１７，０２９号明細書を参照）、研究のために市販されているが、臨床的に現在使用されているものはない。

例えば、カスパーゼ１阻害剤としては、プラルナカサン（ＶＸ－７４０）、ＩＤＮ－６５５６およびＶＸ－７６５が挙げられる。

ペプチドベースのカスパーゼ１阻害剤としては、Ａｃ－ＹＶＡＤ－ｃｍｋ（Ａｃ－Ｔｙｒ－Ｖａｌ－Ａｌａ－Ａｓｐ－クロロメチルケトン）、Ａｃ－ＷＥＨＤ－ＣＨＯ（Ｎ－アセチル－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ｈｉｓ－Ａｓｐ－ａｌ）、およびＺ－ＶＡＤ－ＦＭＫ（Ｚ－Ｖａｌ－Ａｌａ－Ａｓｐフルオロメチルケトン）が挙げられる。

一実施形態では、カスパーゼ１阻害剤は、式Ｉ：

（式中、
Ｒ^１は、

である場合、
Ｒ^５はＲ^８Ｃ（Ｏ）－、ＨＣ（Ｏ）、Ｒ^８ＳＯ_２－、Ｒ^８ＯＣ（Ｏ）、（Ｒ^８）_２ＮＣ（Ｏ）、（Ｒ^８）（Ｈ）ＮＣ（Ｏ）、Ｒ^８Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）－、Ｒ^８－、（Ｒ^８）_２ＮＣ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）、（Ｒ^８）（Ｈ）ＮＣ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）、またはＲ^８ＯＣ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）－であり、かつ
Ｒ^８はＣ_１～１２の脂肪族基、Ｃ_３～１０の脂環式基、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロシクリル、５～１０員のヘテロアリール、（Ｃ_３～１０の脂環式基）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（Ｃ_６～１０のアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（５～１０員のヘテロシクリル）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、または（５～１０員のヘテロアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－であり、または、同じ原子に結合した２つのＲ^８基はその原子と共に３～１０員の芳香環または非芳香環を形成し、任意の環はＣ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロアリール、Ｃ_３～１０のシクロアルキル、または５～１０員のヘテロシクリルに縮合していてもよく、最大３つの脂肪族炭素原子は、Ｏ、Ｎ、ＮＲ^１１、Ｓ、ＳＯ、およびＳ０_２から選択される基により置換されていてもよく、Ｒ^８はＲ^１２から独立して選択される最大６つの置換基により置換されており、
Ｒ^４はＨ、Ｃ_１～１２の脂肪族基、Ｃ_３～１０の脂環式基、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロシクリル、５～１０員のヘテロアリール、（Ｃ_３～１０のシクロアルキル）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、シクロアルケニル－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（Ｃ_６～１０のアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（５～１０員のヘテロシクリル）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、または（５～１０員のヘテロアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－であり、任意の水素原子は独立してＲ^１２により置換されていてもよく、かつ、同じ原子に結合した２つの水素原子の任意のセットは独立してカルボニルにより置換されていてもよく、
Ｒ^６は－Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）（Ｒ^１５）、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロアリール、またはＣ_３～７のシクロアルキルであり、
Ｒ^７はハロゲン、－ＯＲ^１１、－ＮＯ_２－ＣＮ－ＣＦ_３、－ＯＣＦ_１、－Ｒ^１１、１，２－メチレンジオキシ、１，２－エチレンジオキシ、－Ｎ（Ｒ^１１）_２、－ＳＲ^１１、－ＳＯＲ^１１、－ＳＯ_２Ｒ^１１－ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１１）_２、－ＳＯ_３Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｓ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^１１、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－（ＣＨ_２）_０～２ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）ＣＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）ＣＯＮ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）ＳＯ_２Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｓ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１１）_２－Ｎ（ＣＯＲ^１１）ＣＯＲ^１１、－Ｎ（ＯＲ^１１）Ｒ^１１、－Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ^１１）Ｒ^１１、－Ｃ（＝ＮＯＲ^１１）Ｒ^１１、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１１）_２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１１）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１１）_２、または－Ｐ（Ｏ）（Ｈ）（ＯＲ^１１）であり、
Ｒ^９およびＲ^１２はそれぞれ独立してハロゲン、－ＯＲ^１１、－ＮＯ_２、－ＣＮ、－ＣＦ_３、－ＯＣＦ_３、－Ｒ^１１、１，２－メチレンジオキシ、１，２－エチレンジオキシ、－Ｎ（Ｒ^１１）_２、－ＳＲ^１１、－ＳＯＲ^１１、－ＳＯ_２Ｒ^１１、－ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１１）_２－ＳＯ_３Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｓ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^１１、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－（ＣＨ_２）_０～２ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）ＣＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｎ（Ｒ^１１）ＣＯＮ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）ＳＯ_２Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｓ）Ｒ^１１、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（Ｒ^１１）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｎ（ＣＯＲ^１１）ＣＯＲ^１１、－Ｎ（ＯＲ^１１）Ｒ^１１、－Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｒ^１１）_２、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ^１１）Ｒ^１１、－Ｃ（＝ＮＯＲ^１１）Ｒ^１１、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１１）_２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１１）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１１）_２、または－Ｐ（Ｏ）（Ｈ）（ＯＲ^１１）であり、
Ｒ^１０はハロゲン、－ＯＲ^１７、－ＮＯ_２－ＣＮ－ＣＦ_３－ＯＣＦ_３、－Ｒ^１７、または－ＳＲ^１１であり、Ｒ^１０は５つ以下の直鎖原子を有し、
Ｒ^１１は水素、Ｃ_１～１２の脂肪族基、Ｃ_３～１０の脂環式基、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロシクリル、５～１０員のヘテロアリール、（Ｃ_３～１０の脂環式基）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（Ｃ_６～１０のアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（５～１０員のヘテロシクリル）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、またはヘテロアリール－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－であり、任意の水素原子は独立してＲ^１８により置換されていてもよく、かつ、同じ原子に結合した２つの水素原子の任意のセットは独立してカルボニルにより置換されていてもよく、
Ｒ^１３はＨまたはＣ_１～６の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルであり、
Ｒ^１４はＨまたはＣ_１～６の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルであり、
Ｒ^１５は－ＣＦ_３、－Ｃ_３～７のシクロアルキル、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロアリール、複素環、またはＣ_１～６の直鎖もしくは分岐鎖のアルキルであり、アルキルの各炭素原子は独立してＲ^１６により置換されていてもよく、
またはＲ^１３およびＲ^１５は、それらが結合する炭素原子と一緒になって３～１０員の脂環式基を形成し、
Ｒ^１６はハロゲン、－ＯＲ^１７、－ＮＯ_２、－ＣＮ、－ＣＦ_３－ＯＣＦ_３、－Ｒ^１７、または－ＳＲ^１７であり、Ｒ^１７はＣ_１～４の脂肪族基であり、
Ｒ^１７はＣ_１～４の脂肪族基であり、かつ
Ｒ^１８は－ＯＲ^１７、－ＮＯ_２、－ＣＮ、－ＣＦ_３、－ＯＣＦ_３、－Ｒ^１７、１，２－メチレンジオキシ、１，２－エチレンジオキシ、－Ｎ（Ｒ^１７）_２、－ＳＲ^１７、－ＳＯＲ^１７、－ＳＯ_７Ｒ^１７－ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１７）_２－ＳＯ_３Ｒ^１７、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^１７、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１７、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７、－Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）Ｒ^１７－Ｃ（Ｓ）Ｒ^１７、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^１７、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１７、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－（ＣＨ_２）_０～２ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｎ（Ｒ^１７）ＣＯＲ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｎ（Ｒ^１７）ＣＯＮ（Ｒ^１７）_２、－Ｎ（Ｒ^１７）ＳＯ_２Ｒ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｓ）Ｒ^１７、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｎ（Ｒ^１７）Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｎ（ＣＯＲ^１７）ＣＯＲ^１７、－Ｎ（ＯＲ^１７）Ｒ^１７、－Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ（Ｒ^１７）_２、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ^１７）Ｒ^１７、－Ｃ（＝ＮＯＲ^１７）Ｒ^１７、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１７）_２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１７）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１７）_２、または－Ｐ（Ｏ）（Ｈ）（ＯＲ^１７）であり、Ｒ^１７は水素、Ｃ_１～１２の脂肪族基、Ｃ_３～１０の脂環式基、Ｃ_６～１０のアリール、５～１０員のヘテロシクリル、５～１０員のヘテロアリール、（Ｃ_３～１０の脂環式基）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）、（Ｃ_６～１０のアリール）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、（５～１０員のヘテロシクリル）－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－、またはヘテロアリール－（Ｃ_１～１２の脂肪族基）－である）
を有する化合物、またはその単一の立体異性体、立体異性体の混合物、もしくは薬学的に許容される塩である。

一実施形態では、カスパーゼ１阻害剤は、式ＩＩ：

またはその単一の立体異性体、立体異性体の混合物、もしくは薬学的に許容される塩である。

一実施形態では、カスパーゼ１阻害剤はＶＸ－７６５またはその薬学的に許容される塩である。ＶＸ－７６５（例えば、参考文献１および国際公開第２０１１／０９４４２６号パンフレットを参照）、または（Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－｛［１－（４－アミノ－３－クロロ－フェニル）－メタノイル］－アミノ｝－３，３－ジメチル－ブタノイル）－ピロリジン－２－カルボン酸（（２Ｒ，３Ｓ）－２－エトキシ－５－オキソ－テトラヒドロ－フラン－３－イル）－アミドは以下の構造：

を有する。

ＶＸ－７６５は、５－エトキシジヒドロフラン－２（３Ｈ）－１部分のエステラーゼ切断を介してその活性代謝物ＶＲＴ－０４３１９８に変換されるプロドラッグである。ＶＲＴ－０４３１９８には２つの互変異性体として閉環形態および開環形態があり、これらは相互変換する。

ＶＲＴ－０４３１９８の閉環形態、または（２Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（４－アミノ－３－クロロベンズアミド）－３，３－ジメチルブタノイル）－Ｎ－（（３Ｓ）－２－ヒドロキシ－５－オキソテトラヒドロフラン－３－イル）ピロリジン－２－カルボキサミドは以下の構造：

を有する。

ＶＲＴ－０４３１９８の開環形態、または（Ｓ）－３－（（Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（４－アミノ－３－クロロベンズアミド）－３，３－ジメチルブタノイル）ピロリジン－２－カルボキサミド）－４－オキソ酪酸は以下の構造：

を有する。

本明細書で使用される場合、「アルキル」または接頭語「アルカ」（alk）は、置換されていてもよい直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素基を指す。直鎖または分岐鎖のアルキル基の例としては、メチル、トリフルオロメチル、エチル、１－プロピル、２－プロピル、１－ブチル、２－ブチル、２－メチル－１－プロピル、２－メチル－２－プロピル、１－ペンチル、２－ペンチル、３－ペンチル、２－メチル－１－ブチル、３－メチル－１－ブチル、２－メチル－３－ブチル、２，２－ジメチル－１－プロピル、１－ヘキシル、２－ヘキシル、３－ヘキシル、２－メチル－１－ペンチル、３－メチル－１－ペンチル、４－メチル－１－ペンチル、２－メチル－２－ペンチル、３－メチル－２－ペンチル、４－メチル－２－ペンチル、２，２－ジメチル－１－ブチル、３，３－ジメチル－１－ブチル、２－エチル－１－ブチル、１－ヘプチル、および１－オクチルが挙げられるがこれらに限定されない。置換されているアルキルは、１つまたは複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、または７つ）の置換基、例えば、ハロゲン、－ＮＨ_２、－ＮＨ（Ｃ_１～Ｃ_１２のアルキル）、－Ｎ（Ｃ_１～Ｃ_１２のアルキル）_２、－ＯＨ、－Ｏ－（Ｃ_１～Ｃ_１２のアルキル）、もしくはＣ_６～Ｃ_１０のアリール基、例えばフェニルもしくはナフチル基、または本明細書に記載される任意の他の置換基で置換されていてもよい。一実施形態では、アルキル基は、１～１２個の炭素、さらなる実施形態では、１～８個、１～６個または１～３個の炭素を含有する。

本明細書で使用される場合、「アリール」は、置換されていてもよい単環式または多環式の構造であって、全ての環が、縮合して一緒になっているか（例えば、ナフタレン）または連結されて一緒になっており（例えば、ビフェニル）、かつ炭素原子により形成された芳香族であるものを指す。例示的なアリール基としては、フェニル、ナフチル、およびビフェニルが挙げられる。アリール基が置換されている場合、置換基は、本明細書に記載される任意の置換基を含むことができる。一実施形態では、アリールは、６～１５個の炭素（Ｃ_６～Ｃ_１５のアリール）、さらなる実施形態では、６～１０個の炭素（Ｃ_６～Ｃ_１０のアリール）を含む。

本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」または「複素環式芳香族」は、１つまたは複数の炭素原子がヘテロ原子、例えばＮ、Ｏ、またはＳにより置換されたアリールを指す。一実施形態では、ヘテロアリールは５～１０員である。

本明細書で使用される場合、「シクロアルキル」は、置換されていてもよい、脂肪族の、飽和または不飽和の単環式または多環式（例えば、二環式または三環式）の炭化水素環系を指す。多環式シクロアルキルは、線状であってよく、縮合されていてよく、架橋されていてよく、またはスピロ環状であってよい。一実施形態では、シクロアルキルは、３～１２個の炭素原子（Ｃ_３～Ｃ_１２のシクロアルキル）、さらなる実施形態では、３～１０個の炭素原子（Ｃ_３～Ｃ_１０のシクロアルキル）、さらなる実施形態では、３～７個の炭素原子（Ｃ_３～Ｃ_７のシクロアルキル）を含有する。

本明細書で使用される場合、「アルケニル」は、置換されていてもよい不飽和の、直鎖または分岐鎖の炭化水素基であって、少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を含有するものを指す。一実施形態では、アルケニルは、２～８個の炭素原子「Ｃ_２～Ｃ_８のアルケニル」、さらなる実施形態では、２～６個または２～４個の炭素原子を含む。

本明細書で使用される場合、「アルキニル」は、置換されていてもよい不飽和の、直鎖または分岐鎖の炭化水素基であって、少なくとも１つの炭素－炭素三重結合を含有するものを指す。一実施形態では、アルキニルは、２～８個の炭素原子「Ｃ_２～Ｃ_８のアルキニル」、さらなる実施形態では、２～６個、または２～４個の炭素原子を含む。

本明細書で使用される場合、「ハロゲン」は－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、または－Ｉを指す。

本明細書で使用される場合、「複素環」または「ヘテロシクリル」は、置換されていてもよい芳香族または脂肪族の単環式または二環式の環系であって、１つまたは複数の炭素原子およびヘテロ原子（例えば、１つ、２つ、３つ、または４つのヘテロ原子）、例えば酸素、窒素、および硫黄を含むものである。脂肪族複素環は１つまたは複数の二重結合を有してよい。二重結合の例としては、炭素－炭素二重結合（Ｃ＝Ｃ）、炭素－窒素二重結合（Ｃ＝Ｎ）、および窒素－窒素二重結合（Ｎ＝Ｎ）が挙げられる。３～９員の複素環の例としては、アジリジニル、オキシラニル、チイラニル、アジリニル、ジアジリジニル、ジアジリニル、オキサジリジニル、アゼチジニル、アゼチジノニル、オキセタニル、チエタニル、ジアジナニル、ピペリジニル、テトラヒドロピリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、アゼピニルまたはその任意の部分的もしくは全体的に飽和した誘導体、ジアゼピニルまたはその任意の部分的もしくは全体的に飽和した誘導体、ピロリル、オキサジニル、チアジニル、ジアジニル、トリアジニル、テトラジニル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、テトラゾリル、インドリル、イソキノリニル、キノリニル、キナゾリニル、ピロリジニル、プリニル、イソキサゾリル、ベンズイソキサゾリル、フラニル、フラザニル、ピリジニル、オキサゾリル、ベンゾオキサゾリル、チアゾリル、ベンズチアゾリル（benzthiazolyl）、チオフェニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ベンゾジアゾリル、ベンゾトリアロリル、ピリミジニル、イソインドリル、およびインダゾリルが挙げられるがこれらに限定されない。複素環が置換されている場合、置換基は本明細書に記載される任意の置換基を含むことができる。実施形態では、複素環は３～１０員、５～１０員または３～９員の複素環である。

本明細書で使用される場合、「芳香族」は、共役した（４ｎ＋２）個のπ電子（ｎは１、２、または３である）を有するシクロ環系を指す。

本明細書に記載される任意の基は置換されていてもよいし、非置換であってもよい。置換されている場合、それらは化合物の所望の活性に負に影響しない任意の所望の（１つまたは複数の）置換基を有してよい。好ましい置換基の例は、本明細書に開示される例示的な化合物および実施形態に見られるものの他に、ハロゲン（クロロ、ヨード、ブロモ、またはフルオロ）；Ｃ_１～１２のアルキル；Ｃ_１～６のアルキル；Ｃ_２～６のアルケニル；Ｃ_２～６のアルキニル；ヒドロキシル；Ｃ_１～６のアルコキシル；アミノ（一級、二級、または三級）；ニトロ；チオール；チオエーテル；イミン；シアノ；アミド；カルバモイル；ホスホナト；ホスフィン；リン（Ｖ）含有基；カルボキシル；チオカルボニル；スルホニル；スルホンアミド；ケトン；アルデヒド；エステル；オキソ；ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）；単環式もしくは縮合もしくは非縮合の多環式であってよいシクロアルキル（例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシル）、または単環式もしくは縮合もしくは非縮合の多環式であってよい脂肪族複素環（例えば、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、またはチアジニル）；および芳香族炭素環または複素環の、単環式または縮合もしくは非縮合の多環式（例えば、フェニル、ナフチル、ピロリル、インドリル、フラニル、チオフェニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、キノリニル、イソキノリニル、アクリジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾチオフェニル、またはベンゾフラニル）などの置換基である。特定の置換基としては、ベンジルオキシ；－Ｎ（ＣＨ_３）_２；Ｏ－アルキル（Ｏ－ＣＨ_３）；Ｏ－アリール；アリール；アリール－低級アルキル；－ＣＯ_２ＣＨ_３；－ＯＣＨ_２ＣＨ_３；メトキシ；－ＣＯＮＨ_２；－ＯＣＨ_２ＣＯＮＨ_２；－ＳＯ_２ＮＨ_２；－ＯＣＨＦ_２；－ＣＦ_３；および－ＯＣＦ_３が挙げられる。置換されている基は、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、または８つの置換基を有してよい。これらの置換基は、本明細書に列記される置換基でさらに置換されていてもよい。置換基はまた、縮合環構造または架橋、例えば－ＯＣＨ_２Ｏ－により置換されていてもよい。他の実施形態では、これらの置換基はさらに置換されていない。

一実施形態では、神経変性疾患はアルツハイマー病である。アルツハイマー病（ＡＤ）は、主にΑβ原線維から構成される、アミロイド（Αβ）プラークとして公知の脳におけるタンパク質の異常な沈着物の蓄積により引き起こされると考えられる神経学的疾患である。プラーク中のベータアミロイドペプチドの産生および蓄積の増加は神経細胞死に繋がり、それがＡＤの発生および進行に寄与する。プラークの生成に主に関与するタンパク質としては、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）、ベータおよびガンマセクレターゼが挙げられる。プレセニリンＩはガンマセクレターゼ複合体の部分である。

酵素βおよびγセクレターゼによるＡＰＰの逐次的な切断は、プラーク中に凝集する傾向を有する３８～４２（例えば、３８、４０または４２）アミノ酸のΑβペプチドの放出に繋がる。

特にΑβ_４２ペプチドはそのような凝集の高い傾向を有し、したがってＡＤにおけるプラーク形成の開始の中心となると考えられている。

ＡＤを定義する他の病理としては、神経原線維変化（ニューロン内；高リン酸化タウタンパク質から作られる）、ニューロピルスレッド（変性性神経突起であり、これも高リン酸化タウを含有する）、およびシナプスの変性または喪失が挙げられる。最近、海馬および皮質の萎縮がＡＤ病理の初期事象として加えられ、これはＭＲＩにより同定される。

一実施形態では、認知障害は軽度認知障害である。さらなる実施形態では、認知障害は主観的認知障害である。さらなる実施形態では、認知障害は年齢依存性認知障害である。さらなる実施形態では、認知障害は記憶障害を含む。さらなる実施形態では、対象は、年齢依存性認知障害を指し示す神経心理学的プロファイルを有する。さらなる実施形態では、対象は、認知障害に関連する脳における神経炎症を患っている。

本発明はまた、対象における神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））の予防、その発症の遅延もしくはその重篤度の低減、その進行の予防もしくは後退、または治療において使用するための、カスパーゼ１阻害剤、またはカスパーゼ１阻害剤および薬学的に許容される担体を含む組成物を含む、キットに関する。本発明はまた、対象における認知障害の予防、その発症の遅延もしくはその重篤度の低減、その進行の予防もしくは後退、または治療において使用するための、カスパーゼ１阻害剤、またはカスパーゼ１阻害剤および薬学的に許容される担体を含む組成物を含む、キットに関する。そのようなキットの構成および構築は当業者に従来公知である。そのようなキットは、例えば、剤もしくは剤の組合せまたは組成物を含有するための容器（例えば、注射器および／またはバイアルおよび／またはアンプル）、治療剤および／または組成物および／または希釈剤を投与するための他の装置を含んでよい。キットは、使用説明書をさらに含んでもよい。使用説明書は、剤および希釈剤をどのように混合して医薬配合物を形成させるべきかを記載したものであってよい。使用説明書はまた、結果として生じた医薬配合物を対象にどのように投与すべきかを記載したものであってもよい。一実施形態では、上記のキットは、対象において神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、もしくは治療するため、または認知障害を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、もしくは治療するための使用説明書を含む。

本明細書で使用される「進行」は、疾患または状態（例えば、神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ）、認知障害など）の経時的な進展または悪化を指す。

一実施形態では、対象は、神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））の兆候が現れる前の対象である。本明細書で使用される「兆候が現れる前」は、知覚可能かつ測定可能な神経機能（例えば、記憶などの認知能力）の低下を患っているが、神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））に特徴的なより著しいまたは重篤な症状を示さない対象を指す。例えば、そのような対象は、その年齢について通常期待されるよりも乏しい認知能力を呈するが、それ以外に神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））の診断を確定的なものとする明確な症状を示さない。低い認知性能としては、エピソード記憶、意味記憶、空間記憶、および作業記憶が挙げられるがこれらに限定されない。ＡＤの場合、兆候が現れる前または無症候性はまた、知覚可能な認知障害の非存在下での脳におけるＡＤ病理の存在を定義する。これは、弧発性および家族性の両方の形態のＡＤにおいて起こることがある。実施形態では、対象は、（ａ）脳における増加したアミロイドおよびタウ病理、（ｂ）萎縮した海馬、および／または（ｃ）神経学的状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））への進行を指し示すアミロイド、タウおよび／または炎症性バイオマーカープロファイルを有する。アミロイドは、例えばＰＥＴイメージングによりまたはＣＳＦのより低いレベルにより検出することができ、タウは、ＰＥＴまたはＣＳＦ中の総タウと比較したリン酸化タウのレベルの増加により検出することができ、ＣＳＦ中の総タウの増加もまた疾患に関連する［Jack CR Jr., et al., An unbiased descriptive classification scheme for Alzheimer disease biomarkers. Neurology 87(5): 539-47 (2016)を参照］。萎縮は磁気共鳴イメージングにより認識することができる。ＣＳＦまたは末梢血単核細胞中のサイトカイン、ケモカイン、または補体因子の異常なレベルもまたバイオマーカーと考えられる；Milan Fiala and Robert Veerhuis, Biomarkers of inflammation and amyloid-β phagocytosis in patients at risk of Alzheimer disease, Experimental Gerontology 45(1): 57-63 (2010)。

軽度認知障害（ＭＣＩ）は、認知能力、例えば記憶および思考能力のわずかだが知覚可能かつ測定可能な低下として最も一般的に定義される総称である。ＭＣＩを有する人は、加齢から通常予測されるより大きい認知能力のそのような低下を経験するが（すなわち、その年齢の正常より悪い）、神経学的状態の他のより重篤な症状、例えば認知症などのＡＤを示さない。ＭＣＩは、ＡＤの増加したリスク因子と考えられる。

主観的認知障害は、ＭＣＩの診断のために充分な低下ではない、認知能力、例えば記憶および思考能力のわずかだが知覚可能な低下として最も一般的に定義される総称である。主観的認知障害を有する人は、認知能力の差異に気付くが、それ以外には日常的な活動において通常通りに機能することが可能である。

年齢依存性認知障害は、加齢と共に進行する認知能力の低下である。

記憶障害／喪失に加えて、認知障害の他の症状としては、顔または場所を認識できないこと、質問を繰り返すこと、学習困難、判断困難、気分または行動の変化、視覚的問題、日常生活の作業（例えば、支払い、レシピに従う、食料品の買い物）の実行困難が挙げられる。

一実施形態では、対象は、早期発症家族性アルツハイマー病（ＥＯＦＡＤ）などの家族性ＡＤに関連する遺伝子変異を有する。３つの遺伝子がＥＯＦＡＤの素因に関連付けられている：プレセニリン１（ＰＳ１）、プレセニリン２（ＰＳ２）、およびアミロイド前駆体タンパク質遺伝子（ＡＰＰ）。これらの遺伝子の全ては、アミロイド前駆体タンパク質のプロセシングに影響し、毒性ベータアミロイド（Αβ_４２）の生成を増加させ、それがＡＤにおけるプラークを生成させる。これらの遺伝子の３つ全ては、常染色体顕性遺伝子として遺伝する。

本発明は、カスパーゼ１阻害剤を含む（医薬）組成物をさらに提供する。そのような組成物は、本明細書に記載される方法および使用、例えば、神経変性疾患を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、もしくは治療するため、または認知障害を予防し、その発症を遅延させもしくはその重篤度を低減させ、その進行を予防しもしくは後退させ、もしくは治療するための方法および使用において使用することができる。

活性成分（例えば、カスパーゼ１阻害剤、例えば、式ＩもしくはＩＩを有する化合物、またはその単一の立体異性体、立体異性体の混合物、もしくは薬学的に許容される塩、例えばＶＸ－７６５、またはその薬学的に許容される塩）に加えて、医薬組成物は、好適な薬学的に許容される担体または賦形剤を含有してよい。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」または「賦形剤」は、生理学的に適合性であり、かつ薬学的に使用できる、任意のおよび全ての溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。賦形剤が希釈剤として働く場合、それは、活性成分のビヒクル、担体または媒体として作用する、固体、半固体、または液体材料であり得る。したがって、組成物は、錠剤、丸剤、散剤、ロゼンジ、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル、懸濁液、エマルション、溶液、シロップ、エアゾール（固体としてまたは液体培地中）、例えば最大１０質量％の活性化合物を含有する軟膏、軟および硬ゼラチンカプセル、坐剤、滅菌注射溶液、および滅菌包装粉末の形態であり得る（Remington: The Science and Practice of Pharmacy by Alfonso R. Gennaro, 2003, 21^th edition, Mack Publishing Companyを参照）。実施形態では、担体は、神経内、非経口、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、舌下または経口投与のために好適なものであってよい。

好適な賦形剤の一部の例としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、レシチン、ホスファチジルコリン、アカシアガム、リン酸カルシウム、アルギネート、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップおよびメチルセルロースが挙げられる。配合物は、潤滑剤、例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、および鉱油；湿潤剤；乳化剤および懸濁化剤；保存剤、例えば、メチルおよびプロピルヒドロキシベンゾエート；甘味剤；および香味剤を追加的に含むことができる。本発明の組成物は、当該技術分野において公知の手順を用いることにより患者への投与の後に活性成分の迅速な持続または遅延放出を提供するように配合することができる。

本発明において使用するために好適な医薬組成物は、意図する目的（例えば、疾患を予防しかつ／または改善しかつ／または阻害すること）を達成するために有効な量で活性成分が含有された組成を含む。効果的な用量の決定は、充分に当業者の能力の範囲内である。任意の化合物について、治療的に効果的な用量は、最初に細胞培養アッセイ（例えば、細胞株）または動物モデル、通常、マウス、ウサギ、イヌもしくはブタのいずれかにおいて推定することができる。動物モデルを使用して適切な濃度範囲および投与経路を決定してもよい。次にそのような情報を使用して、ヒトでの投与のために有用な用量および経路を決定することができる。効果的な用量または量は、特定の疾患または状態（例えば、神経変性疾患（例えば、ＡＤ））を治療するために充分な１つまたは複数の活性成分、例えばカスパーゼ１阻害剤の量を指す。治療効果および毒性は、細胞培養物または実験動物において標準的な薬学的手順、例えばＥＤ_５０（集団の５０％において治療効果がある用量）およびＬＤ_５０（集団の５０％に対して致死的な用量）により決定されてよい。治療効果と毒性効果との用量比は治療指数であり、比ＬＤ_５０／ＥＤ_５０として表すことができる。大きい治療指数を呈する医薬組成物が好ましい。細胞培養アッセイおよび動物研究から得られたデータは、ヒトでの使用のための投与量の範囲の配合において使用される。そのような組成物中に含有される投与量は、好ましくは、ほとんどまたは全く毒性を有しないＥＤ_５０を含む循環濃度の範囲内である。投与量は、用いる投与剤形、患者の感受性、および投与経路に応じてこの範囲内で変化する。正確な投与量は、治療を必要とする対象に関する要因を考慮して医師により決定される。投与量および投与は、充分なレベルの活性部分を提供するようにまたは所望の効果を維持するように調整される。考慮され得る要因としては、病態の重篤度、対象の全般的健康、対象の年齢、体重、および性別、食事、投与の時間および頻度、薬物の組合せ、反応感受性、および療法への忍容性／応答が挙げられる。特定の投与量および送達の方法に関するガイダンスは文献に提供されており、当該技術分野の実施者に一般に利用可能である。実施形態では、（一実施形態では、１日当たり）約０．０１～約１００ｍｇ／ｋｇ体重の活性成分（例えば、カスパーゼ１阻害剤、例えば、式ＩもしくはＩＩを有する化合物、またはその単一の立体異性体、立体異性体の混合物、もしくは薬学的に許容される塩、例えばＶＸ－７６５、またはその薬学的に許容される塩）の投与量を使用することができる。さらなる実施形態では、約０．５～約７５ｍｇ／ｋｇ体重の投与量を使用することができる。さらなる実施形態では、約１～約５０ｍｇ／ｋｇ体重の投与量を使用することができる。さらなる実施形態では、約１０～約５０ｍｇ／ｋｇ体重、さらなる実施形態では、約１０、約２５または約５０ｍｇ／ｋｇ体重の投与量を使用することができる。

一実施形態では、本明細書に記載される活性成分（例えば、カスパーゼ１阻害剤、例えば、式ＩもしくはＩＩを有する化合物、またはその単一の立体異性体、立体異性体の混合物、もしくは薬学的に許容される塩、例えばＶＸ－７６５、またはその薬学的に許容される塩）は、ＣＮＳ組織またはＣＮＳニューロンと接触するように投与されるまたは投与されるためのものである。本明細書で使用される場合、「中枢神経系」またはＣＮＳは、脳および脊髄を含む神経系の部分である。対照的に、「末梢神経系」またはＰＮＳは、脳および脊髄以外の神経系の部分である。一実施形態では、ＣＮＳ組織は、大脳皮質であり、さらなる実施形態では、海馬である。そのため、実施形態では、本明細書に記載される活性成分（例えば、カスパーゼ１阻害剤、例えば、式ＩもしくはＩＩを有する化合物、またはその単一の立体異性体、立体異性体の混合物、もしくは薬学的に許容される塩、例えばＶＸ－７６５、またはその薬学的に許容される塩）は、直接的な頭蓋内注射または髄腔内注射または脳脊髄液への注射を介してｉｎｖｉｖｏでＣＮＳ細胞を治療するために投与することができる。あるいは、本明細書に記載される活性成分（例えば、カスパーゼ１阻害剤、例えば、式ＩもしくはＩＩを有する化合物、またはその単一の立体異性体、立体異性体の混合物、もしくは薬学的に許容される塩、例えばＶＸ－７６５、またはその薬学的に許容される塩）は、血液脳関門を越えてＣＮＳに入ることができる形態で（またはｉｎｖｉｖｏでそのような形態に変換される）全身投与（例えば、静脈内、腹腔内、または経口）することができる。

「治療有効量」は、所望の治療結果を達成するために必要な投与量および期間として効果的な量を指す。「予防有効量」は、所望の予防結果、例えば、上記の状態の発症または進行を予防しまたはその速度を阻害することを達成するために必要な投与量および期間として効果的な量を指す。予防有効量は、治療有効量について上記される通りに決定することができる。

本明細書で使用される場合、「対象」または「患者」という用語は交換可能に使用され、任意の動物、例えば、ヒトおよび非ヒト霊長類動物を含む哺乳動物を意味するために使用される。一実施形態では、上記の対象は哺乳動物である。さらなる実施形態では、上記の対象はヒトである。

本発明を以下の非限定的な例によりさらに詳細に説明する。

実施例１：試験薬物
本明細書に記載される研究において使用される化合物は、ＶＸ－７６５とも称される（Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－｛［１－（４－アミノ－３－クロロ－フェニル）－メタノイル］－アミノ｝－３，３－ジメチル－ブタノイル）－ピロリジン－２－カルボン酸（（２Ｒ，３Ｓ）－２－エトキシ－５－オキソ－テトラヒドロ－フラン－３－イル）－アミドである。ＶＸ－７６５は以下の構造を有する。

実施例２：材料および方法
実験の設計：５ヶ月齢の症候性マウスの処置。５０ｍｇ／ＫｇのＶＸ－７６５またはビヒクルを注射した２０（症状の全発症）週齢のＪ２０および同腹のＷＴ対照に対して研究を開始した。２０週齢のマウスを、「ＶＸ－７６５はＪ２０マウスにおいてエピソード記憶障害を後退させる」のセクションのパラダイムにしたがって処置した。

実験の設計：２ヶ月齢の兆候が現れる前のマウスの予防。５０ｍｇ／ＫｇのＶＸ－７６５またはビヒクルを注射した８（兆候が現れる前）週齢のＪ２０および同腹のＷＴ対照に対して研究を行った。８週齢のマウスに４週（週当たり３回の注射）にわたって注射をし、１６週齢時およびその後マウスが８ヶ月齢に達するまで４週毎に記憶障害についてモニターした。ＶＸ－７６５はＪ２０マウスにおいて少なくとも５ヶ月認知障害の発症を遅延させる。

マウスの行動に対するＶＸ－７６５の効果。不安および過活動性をオープンフィールドパラダイムで、エピソード記憶をＮＯＲで、空間記憶をバーンズ迷路で、短期または長期作業記憶をＹ迷路で処置の前および後にモニターした。ＮＯＲ、バーンズおよびＹ迷路について反復測定が許容される^２～４。

ＡＤ様病理を評価するために、免疫組織化学解析を行って、冠状脳切片（coronal brain sections）でのアミロイド沈着（抗Αβ Ｆ２５２７６）^５、６、小膠細胞（Ｉｂａ１）活性化^７、アストログリオーシス（ＧＦＡＰ）、シナプトフィジンタンパク質レベルを検出した。マルチプレックスＭＳＤＥＬＩＳＡを使用して、Αβレベルならびに３８、４０、および４２サブタイプ、およびＩｌ－１βの脳レベルを評価した。ＲＴ－ＰＣＲを使用してヒトＡＰＰ^{Ｓｗ／ｌｎｄ}のレベルを評価した。

実施例３：ＶＸ－７６５はＪ２０マウスにおいてエピソード記憶障害を後退させる
Ｊ２０および同腹のＷＴマウス（２０週）を最初に、新規物体認識（ＮＯＲ）ならびにオープンフィールドパラダイムにおける不安および過活動性によりエピソード記憶障害について試験した。処置の前に（処置前）、ＷＴマウス（ｎ＝６）は通常通り行動したが、Ｊ２０（ｎ＝８）は、予想の通り、ＮＯＲ試験において障害を示した（図１：処置前）。水中で調製した２５％のＣｒｅｍｏｐｈｏｒｅ中の予め決定された用量の５０ｍｇ／Ｋｇ（マウス１ｇ当たり０．０１μｌ）のＶＸ－７６５^１、またはビヒクルのみを用いてマウスに４８時間毎に３回の注射を与え、最後の注射の４８時間後に再試験を行った。ビヒクル注射ＷＴマウスは正常なＮＯＲ行動を保持したが、ビヒクル注射Ｊ２０は欠陥のあるままであり、ＶＸ－７６５注射Ｊ２０マウスは正常に戻った。注射を２週間、週当たり３回の注射（注射間に４８時間の間隔および週間に３日の間隔）で続け、マウスを再試験した。ＷＴおよびＶＸ－７６５注射Ｊ２０マウスは通常通りの行動を続けたが、ビヒクル注射Ｊ２０はＮＯＲ障害を保持した。次に、４週のウォッシュアウト期間にわたって薬物を除去したところ、以前にＶＸ－７６５を注射したＪ２０マウスにおいてＮＯＲ障害が再び現れ、ビヒクル注射Ｊ２０マウスにおいては異常なままであった。次に、マウスに３回の注射を４８時間毎に再び注射したところ、ＶＸ－７６５注射はＮＯＲ障害を減弱させたが、ビヒクル注射Ｊ２０マウスはＮＯＲ障害を保持した。Ｊ２０マウスはオープンフィールドパラダイムにおいて過活動性を示し、それは３週間の処置の後にようやく減弱された。いずれのマウスも接触走性により不安を示さなかった（図示せず）。

実施例４：ＶＸ－７６５腹腔内注射は脳小膠細胞活性化、シナプトフィジンのＩｌ－１β喪失、およびΑβ_４２産生を予防する
最後の行動解析の後、マウスを屠殺し、脳を組織学的検査に供した。ＷＴマウスと比較して、Ｊ２０ビヒクル注射マウスからの脳ＣＡ１は増加したＩｂａ１陽性小膠細胞を示し、それはＶＸ－７６５注射Ｊ２０マウスにおいて正常であった（図２）。ＧＦＡＰはビヒクル処置Ｊ２０において増加し、ＶＸ－７６５処置Ｊ２０の皮質において低減したが、データは統計的有意性に達しなかった。抗Ｆ２５２７６抗アミロイド（１～４０）抗体での免疫組織化学は、Ｊ２０脳における高レベルのアミロイド沈着物を示し、ＷＴマウス対照の脳においてはそれを示さなかった。Ｊ２０＋ＶＸ－７６５処置マウスにおいて、脳のみがアミロイドプラークに類似する希少なアミロイド沈着物を保持した。ＲＩＰＡ抽出脳タンパク質のＥＬＩＳＡにより、Ｊ２０の皮質における増加したＩｌ－１βおよびΑβ_４２レベルはＶＸ－７６５により低減されたことが確認された。ＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスにおける認知障害の後退は低減したＩｌ－１βおよびΑβ_４２レベルならびに増加したシナプトフィジンレベルに関連することをこれらの結果は示す。したがって、Ｊ２０の脳は、ＶＸ－７６５の１２回の注射後に炎症、アミロイド蓄積、およびシナプス機能障害に関して迅速に正常に戻る。

実施例５：ＶＸ－７６５での兆候が現れる前の処置はＪ２０のＮＯＲ障害および過活動性を遅延させる。
ＶＸ－７６５がＪ２０マウスにおいてＡＤ様認知障害および病理の出現を遅延させることができるかどうかを決定するために、２ヶ月齢から開始してＪ２０マウスに週に３回、４週にわたって注射を行った。薬物を用いない１ヶ月後の４ヶ月齢時にＮＯＲ試験を開始し、その後８ヶ月齢まで毎月再試験を行った（図３）。ビヒクル注射ＷＴおよびＶＸ－７６５注射Ｊ２０マウスはＮＯＲにおいて通常通り行動する一方、ビヒクル注射Ｊ２０は４、５、および６ヶ月齢（それぞれ１、２、および３ヶ月のウォッシュアウト）時にＮＯＲ障害を示すことを結果は示す。７ヶ月齢（４ヶ月のウォッシュアウト）時に、６匹のＶＸ－７６５注射マウスのうちの３匹がＮＯＲ障害を発症し、平均で、この群はＮＯＲ障害を示した。８ヶ月齢時に、３匹のマウスのうちの１匹のみがＮＯＲ障害を有し、平均で正常な行動の結果となる。なお、４、５、および６ヶ月時に群当たり２匹のマウスならびに７および８ヶ月に群当たり３匹のマウスを屠殺したので、確固とした結論のためにはより高齢の群の結果はより多くの実験データを必要とする。オープンフィールドにおいて、マウスは４ヶ月齢時に正常な行動を示したが、５ヶ月齢までに過活動性が戻った。

実施例６：ＶＸ－７６５での兆候が現れる前の処置は４ヶ月齢のＪ２０マウスの脳において炎症およびシナプトフィジンの喪失を遅延させる
ＶＸ－７６５でのＪ２０マウスの前処置は小膠細胞のＩｂａ１陽性炎症を低減させ、またＧＦＡＰアストログリオーシスを低減させる可能性がある（図４）。ビヒクル処理と比較してＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスの脳においてシナプトフィジンレベルの顕著な保存があった。Αβのレベルは４ヶ月齢時に検出できなかった。

実施例７：ＡＰＰタンパク質レベルはＶＸ－７６５処置により維持される
ウエスタンブロットにより、ビヒクル注射およびＶＸ－７６５注射の両方のＪ２０マウスの前頭前皮質においてトランスジェニックＡＰＰ^{Ｓｗ／ｌｎｄ}はまだ過剰発現されたことが確認され、それにより、Ｊ２０＋ＶＸ－７６５マウスにおけるアミロイドレベルの減少の理由として処置によるＡＰＰ遺伝子発現の阻害の可能性が除外される（図５）。

ヒトおよびマウスの脳においてＮｌｒｐ１がＣａｓｐ１を活性化させ、それがＣａｓｐ６を活性化させることを我々は立証した。さらには、我々の事前の証拠は、Ｊ２０の脳におけるＣａｓｐ１およびＣａｓｐ６ｍＲＮＡの増加およびＪ２０＋ＶＸ－７６５におけるこれらの低減を示す（図６）。したがって、特定の理論に縛られないが、ヒトの年齢依存性認知障害およびアルツハイマー病に関連することを我々が発見したＣａｓｐ１－Ｃａｓｐ６神経変性経路がＪ２０マウスにおいて記憶障害および／または病理に寄与する可能性がこれにより生じる。

実施例８：ニューロンのビーズ状変性の研究
方法
ＥＧＦＰ標識化ヒト初代ニューロンにＡＰＰ^ＷＴをトランスフェクトしたか、または血清を枯渇させた。２つの処理戦略を用いてニューロン変性に対するＶＸ－７６５の効果を決定した：前処理戦略では、ＡＰＰ^ＷＴトランスフェクションまたは血清枯渇の１時間前に投与された時にＶＸ－７６５はニューロン変性を遮断できるかどうかに注目し、後退処理戦略では、ＡＰＰ^ＷＴトランスフェクションまたは血清枯渇の４８時間後に投与された時にＶＸ－７６５は変性効果を後退させることができるかどうかに注目した。ビーズ状形態を示すニューロンをライブイメージングで計数し、処理の２４～７２時間後のｅＧＦＰ＋ニューロンの総数のパーセンテージとして測定した。非可逆的カスパーゼ１阻害剤ＹＶＡＤ－ｆｍｋを実験の陽性対照として使用した。３つの独立したニューロン調製物において実験当たり少なくとも１００個のｅＧＦＰ＋ニューロンについて数を平均することにより結果を得た。結果を図７に示す。

結果
図７の上部挿入図は、ｅＧＦＰをトランスフェクトしたニューロンの例である。健常なニューロンにおいて、ｅＧＦＰはその神経突起中に伸びる細胞体内に均一に分布した。ストレッサー（ＡＰＰ^ＷＴトランスフェクションまたは血清枯渇）の導入はｅＧＦＰの再分布を結果としてもたらし、神経突起内の紐でつながったビーズとして徐々に現れた（ビーズ状変性ニューロン）。

ＶＸ－７６５前処理（Ｎ＝３）
ＶＸ－７６５前処理は、ＤＭＳＯ処理したＡＰＰ^ＷＴをトランスフェクトしたニューロンと比較して、ＡＰＰ^ＷＴをトランスフェクトしたニューロンにおいてトランスフェクションの４８時間および７２時間後に神経突起ビーズ状変性の４０％の低減を結果としてもたらした（図７、左上パネル）。ＶＸ－７６５誘導性の低減は、ｅＧＦＰおよびＹＶＡＤカスパーゼ１ペプチド阻害剤の両対照群と同等であった。血清枯渇はより持続性の応答を示した。ＥＧＦＰ＋ＤＭＳＯは、全ての時点にわたってＡＰＰ^ＷＴ＋ＤＭＳＯ群と比較して有意に低減した神経突起ビーズ状変性を示したが、Ｘ－７６５処理は７２時間時に神経突起ビーズ状変性の低減において特に効果的であった（図７、左下パネル）。

ＶＸ－７６５後退処理（Ｎ＝３）
ストレッサー（ＡＰＰ^ＷＴまたは血清枯渇）の４８時間後にＶＸ－７６５を投与する後退処理戦略は、全ての処理群にわたって全体的により大きいパーセンテージのビーズ状変性ニューロンを結果としてもたらした。ＡＰＰ^ＷＴトランスフェクションは４０～８０％のビーズ状変性を結果としてもたらし、７２～１２０時間でｅＧＦＰ＋ＤＭＳＯ群と比較して有意に増加した（図７、右上パネル）。ＶＸ－７６５処理は、１２０時間時（または処理の７２時間後）にビーズ状変性を減少させることができた。カスパーゼ１ペプチド阻害剤ＹＶＡＤはいかなる時点においても神経突起ビーズ状変性を後退させることができなかった。血清枯渇（右下図）は、７２～１２０時間で血清＋対照群と比較して神経突起ビーズ状変性の有意な増加を結果としてもたらした。しかしながら、ＹＶＡＤおよびＶＸ－７６５のいずれも神経突起ビーズ状変性を後退させることができなかった。

実施例９：ＶＸ－７６５は症候性ＡＰＰ^{Ｓｗ／Ｉｎｄ}Ｊ２０マウスにおいて認知障害および過活動性をレスキューする
ＶＸ－７６５は、ヒトＣａｓｐ２～１０と比べて組換えヒトＣａｓｐ１を強くかつ特異的に阻害した（ＩＣ_５０３．６８ｎＭ）（図１４ａ）。同様に、マウス組換えＣａｓｐ１（ＩＣ_５０５２．１ｎＭ）は炎症性マウスＣａｓｐ１１と比較して強く阻害された（図１４ｃ）。代謝型ＶＸ－７６５プロドラッグＶＲＴ－０４３１９８は、ヒトＣａｓｐ１に対して９．９１ｎＭ、マウスＣａｓｐ１に対して１８ｎＭのＩＣ_５０を有した（図１４ｂおよびｄ）。ＶＸ－７６５はＷＴおよびＪ２０マウスの血液脳関門を越え、ＶＲＴ－０４３１９８に代謝され、海馬および皮質の両方において生理活性濃度に達した（図１４ｅ）。

図８ａに示されるように、８ヶ月齢でマウスを屠殺する前に、５ヶ月齢のマウスを、処置前（ベースライン）、５０ｍｇ／ＫｇのＶＸ－７６５の週当たり３回の注射後（処置１；Ｔ１）、追加の２週間の注射後（処置２；Ｔ２）、処置なしの４週後（ウォッシュアウト；ＷＯ）、および週当たり３回のさらなる注射後（処置３；Ｔ３）に行動的および縦断的評価を行った。ベースラインにおいて、Ｊ２０および同腹のＷＴマウスは正常な動機付け行動を示し（図１５ａ）、不安を指し示す接触走性を呈しなかったが（図１５ｂ）、新規物体認識（ＮＯＲ）エピソード（保持）記憶試験において強い障害を示した（図８ｂ）。Ｊ２０のＮＯＲ障害はＶＸ－７６５のＴ１およびＴ２後に後退し、正常レベルの近くに達した。Ｊ２０のＮＯＲ障害はＷＯ期間後に再び現れ、Ｔ３後に再び消失した。結果は個々のマウスにわたって一貫していた（図１５ｃ）。オープンフィールドタスクにおいて移動距離により測定したＪ２０マウスの過活動性は、Ｔ２後に初めてＶＸ－７６５により減弱し、ＷＯ後に再び現れ、Ｔ３後に再び有意に低減した（図８ｃおよび図１５ｄ）。４日のトレーニング期間中、３つの群にわたってＴ２においてバーンズ迷路空間記憶試験において有意な学習障害は観察されなかった（図８ｄ）。しかしながら、プローブ試験中、初期潜時、初期誤り（図８ｅ）および標的（Ｔ）脱出口を見付ける能力（図８ｆ）はＷＴ同腹子と比較してビヒクル注射Ｊ２０において明確に障害があった。ＶＸ－７６５はＪ２０マウスにおいてこれらの空間記憶障害を取り除いた。ＷＯの後、全てのマウスはバーンズ迷路のトレーニング期間中に良好に行動した（図８ｇ）。ビヒクル注射Ｊ２０マウスはそうでなかったが、ＶＸ－７６５注射Ｊ２０マウスは初期潜時および誤りにおいて正常に見え、薬物なしでの１ヶ月の期間後でさえも空間記憶を保持したことを示唆した（図８ｈ）。ＶＸ－７６５注射マウスはまた、標的ハッチを見付ける能力においてビヒクル注射Ｊ２０マウスより良好に行動した（図８ｉ）。Ｙ迷路作業記憶タスクにおけるＪ２０マウスの成績は一貫して低かったが、ＷＴまたは処置Ｊ２０マウスと必ずしも統計的に異ならなかった（図１５ｅ）。

ＶＸ－７６５を２５および１０ｍｇ／ｋｇで投与して、ＶＸ－７６５に対するＪ２０の用量応答を評価した（図９）。マウスの全ての群は正常な動機付け（図１６ａ）および接触走性（図１６ｂ）行動を示した。ＮＯＲ識別指数はＴ１およびＴ２において２５ｍｇ／ｋｇの用量で正常となり、障害はＷＯ後に再び現れ、Ｔ３で正常に戻り、これは５０ｍｇ／Ｋｇの用量での結果と類似した（図９ａおよび図１６ｃ）。１０ｍｇ／ｋｇで処置したマウスはＴ２後に初めて正常なＮＯＲ行動を示し、効果はウォッシュアウトされ、Ｔ３後に再び現れた。Ｊ２０の過活動性は２５ｍｇ／ｋｇでＴ２において有意でない改善を示したが、１０ｍｇ／ｋｇでは改善を示さなかった（図１６ｄおよびｅ）。Ｔ２後に評価したバーンズ迷路において、トレーニングにおける有意差は観察されず（図９ｂ）、Ｊ２０は２５および１０ｍｇ／ｋｇの両用量において初期潜時に障害があるままであった（図９ｃ）。しかしながら、初期誤りは２５ｍｇ／ｋｇで減少し、両方の用量はプローブ試験中に脱出口を認識する能力が改善したマウスを示した（図９ｄ）。ウォッシュアウト期間後、脱出口を見付けるマウスの潜時は最初により迅速であり、Ｔ２後に試験したナイーブマウスのそれと時間的に類似していた（図９ｅ）。プローブ試験中に薬物を用いてまたは用いずに、初期潜時および誤りにおいて有意差は観察されなかった（図９ｆ）。さらには、２５ｍｇ／ｋｇで処置したマウスは脱出口の位置を認識する能力を保持したが、１０ｍｇ／ｋｇで処置したマウスは保持しなかった（図９ｇ）。合わせると、これらの結果は、Ｊ２０のエピソードおよび空間記憶障害を後退させるＶＸ－７６５の用量応答効果を実証する。

Ｊ２０マウスにおいて正常な認知を再確立するＶＸ－７６５の効果がＣａｓｐ１阻害によることを確認するために、Ｃａｓｐ１ヌルバックグラウンド（Ｊ２０／Ｃａｓｐ１^－／－）でＪ２０マウスを生成し、ＶＸ－７６５Ｔ３後のＪ２０マウスの年齢に対応する８ヶ月齢時に行動を評価した。５ヶ月齢のＪ２０マウスと類似して、８ヶ月齢のＪ２０は正常な移動活性を示し、不安を欠き（図１７ａおよびｂ）、過活動性であり（図１７ｃ）、強いＮＯＲ障害を有した（図１７ｄ）。Ｊ２０／Ｃａｓｐ１^－／－マウスは過活動性を保持したが（図１７ｃ）、ＮＯＲ（図１７ｄ）およびＹ迷路（図１７ｅ）において通常通りに行動した。合わせると、これらの結果は、ＶＸ－７６５はＪ２０マウスにおいてＣａｓｐ１を阻害することによりエピソードおよび空間記憶障害を後退させることを指し示す。

実施例１０：ＶＸ－７６５はＪ２０マウスにおいて神経炎症を後退させる
ビヒクル処置Ｊ２０マウスの海馬および皮質において増加したＩｂａ－１陽性小膠細胞が観察されたが、ＶＸ－７６５処置Ｊ２０の海馬のＣＡ１放線層においてＷＴのレベルまで低減した（図１０ａ）。ＶＸ－７６５処置の海馬におけるＩｂａ１陽性小膠細胞は前処置した５ヶ月齢のＪ２０マウスの脳のそれより低く、この領域におけるＶＸ－７６５処置による炎症の後退を指し示した（Ｊ２０のベースライン；図１０ａ）。全体的に、海馬ＣＡ１領域の錐体細胞層から網状分子層までで測定されたＩｂａ１＋小膠細胞の数はＶＸ－７６５処置後に正常に戻った（図１０ｂ）。しかしながら、Ｉｂａ１陽性小膠細胞は、海馬のＣＡ１網状分子層および歯状回領域においていまだに著明であり、残存しているΑβプラークに関連した（図１７ｆ）。Ｃａｓｐ１の阻害を介する小膠細胞活性化の低減がＪ２０／Ｃａｓｐ１^－／－海馬において確認された（図１７ｆ）。しかしながら、ＶＸ－７６５処置脳におけるよりもＪ２０／Ｃａｓｐ１^－／－脳において、特に海馬の網状分子層および歯状回領域に、より活性化された小膠細胞が残存した。形態学的に測定^３７した小膠細胞活性化は、ビヒクル処置Ｊ２０におけるよりもＶＸ－７６５処置Ｊ２０の海馬および皮質において、より休止状態の、より低い活性化の小膠細胞を指し示した（図１０ｃ）。ＷＴと比較して、海馬のＩｌ－１βはＪ２０において増加し、ＶＸ－７６５処置後に低減した（図１０ｄ）。皮質または血漿のＩｌ－１βレベルに変化は見られなかったが、ＶＸ－７６５処置の皮質はＩｌ－１βの低減の傾向があった（図１０ｄおよび図１８ａ）。他の炎症性タンパク質レベルに有意差は観察されなかったが、ＴＮＦ－α、ＫＣ－ＧＲＯ、およびＩＦＮ－γはビヒクル処置Ｊ２０においてわずかに上昇し、ＶＸ－７６５処置Ｊ２０において正常となった（図１８ｂ）。ＥＬＩＳＡアッセイはプロおよび成熟Ｉｌ－１βの両方を測定し、Ｃａｓｐ１阻害は成熟Ｉｌ－１βおよび他のサイトカインの放出を妨害し、それによりそれらの迅速なターンオーバーを防止する^８ことを考慮することは重要である。Ｊ２０マウスの皮質および海馬において増加したＧＦＡＰ^＋アストログリオーシスもまたＶＸ－７６５処置でほぼＷＴのレベルに戻った（図１０ｅならびに図１８ｃおよびｄ）。ＶＸ－７６５処置はＪ２０の脳において小膠細胞および星状膠細胞の両方の活性化を後退させたことをこれらの結果は指し示す。

実施例１１：ＶＸ－７６５はＪ２０マウスの脳において可溶性および沈着Αβの蓄積を予防する
増加した沈着チオフラビンＳ（図１９ａ）および免疫陽性Αβレベルはビヒクル注射Ｊ２０マウスの脳と比較してＶＸ－７６５処置した海馬および皮質において実質的に低減した（図１１ａ～ｂ）。しかしながら、Αβ沈着物は完全には消失せず、前処置した５ヶ月齢のＪ２０マウスの脳において観察されたものと同等であった（図１１ａ）。これらの残存したΑβ沈着物は海馬の網状分子層および歯状回領域に主に局在し、まれに皮質において沈着物があった（図１９ｂ）。Αβ沈着物がびまん性で現れ、海馬のほとんどを覆うＪ２０／Ｃａｓｐ１^－／－マウスの脳と比較して、ＶＸ－７６５処置後に残存した沈着物はより密であり、より少ない活性化小膠細胞を有した（図１７ｆ、図１９ｂおよびｃ）。総Αβ_{３８＋４０＋４２}レベルに対するＲＩＰＡ可溶性およびギ酸可溶性Αβ４２もＶＸ－７６５処置マウスの海馬および皮質（ＲＩＰＡ可溶性についてのみ）において低減し、５ヶ月齢の前処置したＪ２０の脳において測定されたものと同等であった（図１１ｃ、ｅ）。ＲＩＰＡ可溶性の総Αβ（図１１ｄ）またはΑβ_３８（図１１ｇ）は８ヶ月齢のビヒクルまたはＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスにおけるよりも５ヶ月齢の海馬において高かった一方、Αβ_４０レベルは全ての群において類似していた（図１１ｈ）。しかしながら、Αβ_４２はＶＸ－７６５処置後の海馬において低減した（図１１ｉ）。ギ酸可溶性の総Αβは海馬および皮質において強く減少し（図１１ｆ）、Αβの３つ全てのサブタイプはＶＸ－７６５Ｊ２０の海馬および皮質組織においてより少なかった（図１１ｊ～ｌ）。可溶性または沈着Αβ_４２レベルの低減はＪ２０マウスにおけるＡＰＰｍＲＮＡまたはタンパク質のレベルの減少によるものではなく、実際、ＡＰＰレベルはＶＸ－７６５処置の海馬および皮質において増加した（図１１ｍ）。インスリン分解酵素（ＩＤＥ）のレベルまたはネプリライシンのｍＲＮＡレベルの有意な変化は観察されなかったのでΑβの分解の増加の可能性は低い（図１１ｎおよびｏ）。合わせると、ＶＸ－７６５処置は、恐らく総Αβレベルに対するΑβ_４２の比を低減させることにより、Ｊ２０の脳においてΑβの進行性の沈着を停止させたことをこれらの結果は指し示す。

実施例１２：ＶＸ－７６５はＪ２０マウスの脳において免疫組織化学によるシナプトフィジンの検出を正常化させる
５ヶ月齢時に、Ｊ２０の海馬において免疫陽性シナプトフィジンレベルの有意な減少があった（図１２ａ）。シナプトフィジンレベルは８ヶ月齢のビヒクル処置Ｊ２０の海馬において低いままであったが、ＶＸ－７６５処置マウスの海馬において有意に増加し、正常レベルに戻った（図１２ａおよびｂ）。３匹のビヒクル処置および３匹のＶＸ－７６５処置マウスの海馬における８４個の異なるシナプス遺伝子ｍＲＮＡレベルの測定は、シナプス機能に関与する４つの追加の遺伝子：Ｃａｍｋ２ａ、Ｇｒｉｎ２ｂ、Ｋｉｆ１７、およびＴＮＦ－αのｍＲＮＡレベルにおける有意差を明らかにした（図１２ｃ）。ＴＮＦαタンパク質レベルはＪ２０マウスの海馬においてわずかに増加し、ＶＸ－７６５処置で正常に戻った（図１８ｂ）。これらの結果は、正常な認知への復帰を説明し得るいくつものシナプス成分に対するＶＸ－７６５の正常化効果を指し示す。

実施例１３：ＶＸ－７６５はヒトＣＮＳニューロン培養物において軸索変性を予防する
ＶＸ－７６５が神経変性からヒトニューロンを保護できるかどうかを決定するために、ＶＸ－７６５を初代ヒト胎児ＣＮＳニューロン培養物において評価した。７２時間の２５、５０、１００、または２００μＭのＶＸ－７６５でのＨＰＮの処理は毒性ではなかった（図１３ａ）。ＥＧＦＰはＣＮＳヒト初代ニューロン（ＨＰＮ）の細胞体および神経突起内で均一に分布した一方、ＡＰＰ^ＷＴの共発現は、神経変性を指し示すＥＧＦＰ陽性ビーズ状変性を結果としてもたらした（図１３ｂ）。ＡＰＰのトランスフェクションの前に１時間ＨＰＮをＶＸ－７６５で前処置し、その後に処理を続けた。２５および５０μＭの濃度でのＶＸ－７６５処理はＡＰＰ^ＷＴをトランスフェクトしたニューロンにおいてトランスフェクションの４８および７２時間後に神経突起ビーズ状変性を予防し、これはＣａｓｐ１Ｚ－ＹＶＡＤ－ｆｍｋペプチド阻害剤と類似していた（図１３ｃ）。同様に、ＶＸ－７６５は、より弱かったが、血清枯渇誘導性の神経突起ビーズ状変性から保護した。神経突起ビーズ状変性が可逆的かどうかを評価するために、ＡＰＰ^ＷＴトランスフェクションまたは血清枯渇の４８時間後にＶＸ－７６５を投与した。ＶＸ－７６５処理はＡＰＰをトランスフェクトしたニューロンにおいて神経突起ビーズ状変性を後退させなかったが、さらなる神経突起ビーズ状変性を予防した。対照的に、ＹＶＡＤ－ｆｍｋはいずれの時点においても神経突起ビーズ状変性を後退させることも予防することもできなかった。ｉｎｖｉｖｏで観察されたように、５０μＭのＶＸ－７６５は、分泌および細胞Αβ_４２／総Αβレベルを低減させた。２５μＭの濃度は分泌Αβ_４２／総Αβレベルを低減させたが、細胞Αβ_４２／総Αβレベルを低減させなかった。Ｉｌ－１β、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、およびＩＩ－６のレベルもまた、両方の濃度のＶＸ－７６５で低減されたが、異なるニューロン調製物間のばらつきは統計的に有意な結果よりもむしろ傾向を結果としてもたらした。ＶＸ－７６５はヒトニューロン変性を予防できることをこれらの結果は指し示す。

ＶＸ－７６５の効果はエピソードおよび空間記憶障害に対して申し分なく迅速であり、これらはそれぞれ１（３回の注射）または３（９回の注射）週間の処置のみの後で正常化されることを本明細書に記載される研究の結果は示す。認知障害の後退には、小膠細胞および星状膠細胞の反応性およびシナプトフィジン免疫組織化学染色の正常化、４つの異なるシナプス成分の遺伝子発現の正常化、および脳における進行性のアミロイド病理の予防が付随する。

ＶＸ－７６５処置マウスにおけるΑβレベルの低減は予想外であった。３ヶ月の期間にわたるわずか１２回の処置の後に、ＲＩＰＡ可溶性の、免疫染色された、チオフラビンＳ陽性のΑβのレベルはビヒクル処置Ｊ２０マウスにおけるよりもかなり低く、前処置した５ヶ月齢のＪ２０におけるレベルに類似したままであった。ＶＸ－７６５はΑβの進行性の蓄積および沈着を停止させることをこれらの結果は指し示す。ＶＸ－７６５は炎症性Ｃａｓｐ１を阻害するので、Αβが炎症を推進するというより普及した見解とは対照的に、Ｊ２０マウスモデルにおいて炎症がΑβの蓄積を推進していることを結果は指し示す（図２０）。

Ｊ２０は家族性ＡＤマウスモデルであるが、軽度認知障害ならびに弧発性ヒトＡＤの初期および後期ステージにおけるＮｌｒｐ１－Ｃａｓｐ１－Ｃａｓｐ６経路の存在は、本明細書に記載される処置が弧発性ＡＤにおいても機能することを示唆する。

ＡＤに対する効率的な治療はニューロン変性を予防するための早期治療を必然的に伴う可能性がある。これを念頭に置いて、認知低下の発症のわずか１ヶ月後のマウスを治療することを選択した。アウトカムは予想外なことに良好であり、軽度認知障害の個体または臨床的に診断されたＡＤの非常に早期の発症時にＶＸ－７６５を治療のために使用し得ることを指し示す。

実施例１４：ＶＸ－７６５はＪ２０アミロイド前駆体タンパク質Ｓｗｅｄｉｓｈ／ＩｎｄｉａｎａＡＤマウスモデルにおいてアルツハイマー病（ＡＤ）関連行動および記憶障害ならびに病理を予防することができる
アルツハイマー病のマウス遺伝学的モデルにおける炎症の兆候が現れる前の阻害は記憶および行動障害、ならびにアルツハイマー病様の病理の進行を取り除くことができるかどうかを直接的に試験した。Ｊ２０アミロイド前駆体タンパク質Ｓｗｅｄｉｓｈ／Ｉｎｄｉａｎａ変異体マウスを２ヶ月齢時に１ヶ月の期間にわたり５０ｍｇ／Ｋｇのカスパーゼ１阻害剤ＶＸ－７６５で処置した（図２２ａ）。薬物を停止し、マウスがＮＯＲ障害を呈する齢である４ヶ月齢時（１ヶ月のウォッシュアウト）、およびその後マウスが８ヶ月齢に達するまで毎月、動物の行動を評価した。

Ｊ２０の過活動性をオープンフィールドを用いて評価した。４ヶ月齢時（４週のウォッシュアウト）に、ビヒクル処置Ｊ２０マウスはビヒクル処置野生型（ＷＴ）マウスよりも移動距離（図２１ａ）および四半分に入った回数（図２１ｂ）において有意な増加を有する。対照的に、ＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスはビヒクル処置ＷＴマウスのように行動する。しかしながら、過活動性に対するＶＸ－７６５の予防的処置の有益な効果は８週のウォッシュアウト評価およびその後に失われる。さらには、ＶＸ－７６５は８週から２０週のウォッシュアウト期間のアッセイ中にＪ２０において移動時間のより高い％を変化させなかった（図２１ｃ）。ＷＴマウスが辺縁部にいる時間量がより少ないことにより、両方のＪ２０群において４週のウォッシュアウト時に接触走性により測定される不安が観察された（図２１ｄ）。その後、全ての群は辺縁部にいる同一の時間量を示した。Ｊ２０マウスの過活動性は短期間にわたり取り除くことができるが持続しないことをこれらの結果は指し示す。症候性マウスの治療は過活動性を取り除くために３週間のＶＸ－７６５処置を必要とするという我々の先行するデータにこれらの結果は合致する。

新規物体認識（ＮＯＲ）アッセイを用いてエピソード記憶を評価し、結果を識別指数として表した。ビヒクル処置Ｊ２０は評価時点のそれぞれにおいてＮＯＲに強い障害がある（図２２ｂ）。対照的に、ビヒクル処置ＷＴマウスは各時点において非常に良好に行動するが、２０週のウォッシュアウトの時点において識別指数の減少があり、これは恐らく試験に対する慣れによる。平均で、ＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスは各ウォッシュアウトの時点においてＷＴマウスのように行動する。１６および２０週のウォッシュアウト後にＶＸ－７６５処置Ｊ２０はより低い成績を呈するが、それらはまだビヒクル処置Ｊ２０マウスより良好に行動している。個々のマウスを見ると、全ての群はＮＯＲに障害がある数匹のマウスを含有する（図２８ａ～ｃ）。しかしながら、障害のあるＶＸ－７６５処置マウスのパーセンテージはビヒクル処置ＷＴマウスと有意に異ならず（図２２ｃ）、これらの２つの群におけるＮＯＲ障害の増加はマウスがアッセイに慣れたことによる可能性があることを示唆する。ＶＸ－７６５による予防的処置はＪ２０マウスにおいてエピソード記憶障害の発症の遅延に高い効率を持つことをこれらの結果は指し示す。

Ｊ２０が空間記憶障害を獲得する年齢である６ヶ月齢時（１２週のウォッシュアウトの時点）のマウスに対してバーンズ迷路を用いて空間記憶を評価した。マウスの３つ全ての群はトレーニングの４日目までタスクの学習において効率的であった（図２３ａ）。プローブの日に、標的に到達するまでの初期潜時は群間で有意に異ならなかったが、ＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスはより良好な成績の傾向があった（図２３ｂ）。しかしながら、標的への到達における初期誤りはビヒクル処置マウスと比較してビヒクル処置Ｊ２０マウスにおいて有意に増加した。ＶＸ－７６５による予防的処置はこの障害を直した。さらには、ＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスはビヒクル処置Ｊ２０マウスと比較して標的区画を区別するより良好な能力を示した（図２３ｃ）。２０週のウォッシュアウトの時点において第２のバーンズ迷路を行った。ＶＸ－７６５処置マウスは学習期に通常通り行動したが、ビヒクル処置Ｊ２０マウスは学習の遅延を示した（図２３ｄ）。しかしながら、ＶＸ－７６５処置マウスにおいて初期潜時および初期誤りの改善の傾向があったが、これらは統計的有意性に達しなかった（図２３ｅ）。それにもかかわらず、ＶＸ－７６５処置マウスはプローブ試験における標的区画の同定においてビヒクル処置Ｊ２０マウスより良好に行動した（図２３ｆ）。合わせると、ＶＸ－７６５での前処置は処置の５ヶ月後までエピソードおよび空間記憶障害の発症を有意に遅延させることができるが、過活動性症状を遅延させることはできないことをこれらの結果は指し示す。

行動解析後、マウスを屠殺し、組織切片に対して免疫組織染色を行った。ビヒクル処置Ｊ２０マウスの脳の海馬は神経突起中のアミロイドおよびプラーク様沈着物に対して多くの免疫染色を示す（図２４ａ）。驚くべきことに、ＶＸ－７６５処置マウスの脳の海馬の少数は抗アミロイド抗血清に対して免疫陽性反応性をほぼ有しなかった。より少ない密なプラークおよびアミロイド沈着物があり、その大部分は海馬の網状分子層の区画に制限されている。しかしながら、他のＶＸ－７６５処置（treatted）Ｊ２０マウスの脳において、アミロイドのレベルは有意に減少しない。研究した全てのマウスのアミロイド染色の免疫陽性密度の定量は、１６および２０週のウォッシュアウトの時点においてＶＸ－７６５処置マウスの海馬および皮質中にわずかに少ないアミロイドを指し示す（図２４ｂ）。海馬組織タンパク質抽出物のＥＬＩＳＡ分析はＲＩＰＡ可溶性Αβ_３８、Αβ_４０、およびΑβ_４２、総Αβ、およびΑβ_４２／総Αβの大きな差異を検出しないが、１６週のウォッシュアウトの時点においてこれらのΑβのより低いレベルの傾向がある（図２４ｃ）。２０週のウォッシュアウトの時点においてビヒクル処置Ｊ２０の海馬と比べてΑβ_４２／総Αβレベルはわずかに減少する（ｐ≦０．０７０）。皮質組織ＲＩＰＡ可溶性タンパク質抽出物中のアミロイドレベルのいかなる測定に対してもＶＸ－７６５処置は効果がない。ギ酸可溶性アミロイドは、概して、１６週および２０週のウォッシュアウトの時点において皮質におけるよりも海馬において高い。Αβ_４２／総ΑβレベルはＶＸ－７６５処置Ｊ２０の海馬における２０週のウォッシュアウトの時点においてより低い（ｐ≦０．０５）。Αβ測定のいずれのギ酸可溶性皮質レベルもＶＸ－７６５処置で低減しない。兆候が現れる前の１ヶ月のＶＸ－７６５での処置はＲＩＰＡ可溶性およびギ酸可溶性の凝集Αβ_４２の蓄積をわずかに低減させることをこれらの結果は指し示す。ＶＸ－７６５処置マウスにおいて認知は損なわれないままであったので、アミロイドはＪ２０マウスにおける認知障害に関与する可能性は低いことをこれらの結果は指し示す。

活性化小膠細胞を明らかにするためのＩｂａ１陽性免疫染色は、ＶＸ－７６５での兆候が現れる前の処置はまたＪ２０の脳の海馬および皮質において小膠細胞の炎症が強く減少することを示す（図２５ａおよびｂ）。小膠細胞のサブタイプの解析は、ＶＸ－７６５は海馬および皮質の両方において１２週のウォッシュアウトの時点まで休止状態の小膠細胞数（＋）を回復させ、より活性化した小膠細胞（＋＋、＋＋＋）を減少させることを指し示す（図２５ｃ）。その後、（＋＋＋＋）貪食小膠細胞の増加がＶＸ－７６５処置で認められることを除いて、ビヒクル処置Ｊ２０マウスの脳とＶＸ－７６５処置Ｊ２０マウスの脳との間で大きな差異はない。効果は薬物の２０週間のウォッシュアウト後に維持される。星状細胞ＧＦＡＰ免疫染色について類似の結果が得られたが、差異はＩｂａ１についてほどは顕著でなく、統計的有意性に達していない（図２６ａおよびｂ）。

シナプトフィジン免疫染色はビヒクル処置Ｊ２０マウスの海馬において激しく低下する（図２７）。シナプトフィジン免疫染色はＶＸ－７６５処置の海馬において部分的に再確立される。

合わせると、アルツハイマー病の記憶および行動障害ならびにアルツハイマー病様病理は、マウスが症状を示す前の５０ｍｇ／ｋｇのＶＸ－７６５での１ヶ月の予防的処置により６ヶ月間強く低減できることをこれらの結果は指し示す。

ＶＸ－７６５での定期的な治療はヒトにおいて認知障害および進行性のＡＤの病理を予防できる可能性を前臨床の結果は指し示す。処置のマウスの年齢および時間のヒトの年齢への変換は、ヒトにおける３～４年の兆候が現れる前の処置は約１０～１５年間疾患の進行を予防できる可能性があることを指し示す。したがって、ＶＸ－７６５は、予防的処置として兆候が現れる前の高齢個体を処置するために使用することができる。

本発明をその特定の実施形態により本明細書に上記したが、本発明は、添付の特許請求の範囲に定義される主題の発明の精神および性質から離れることなく改変することができる。特許請求の範囲において、「含む」という語はオープンエンドの用語として使用され、「含むが限定されない」という語句に実質的に相当する。単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が明らかにそうでないことを規定しない限り、複数への言及を包含する。

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Claims

カスパーゼ１阻害剤を含み、前記カスパーゼ１阻害剤がＶＸ－７６５またはその薬学的に許容される塩である、対象における認知障害の進行の後退において使用するための、組成物。
前記認知障害が軽度認知障害である、請求項１に記載の組成物。
前記認知障害が主観的認知障害である、請求項１または２に記載の組成物。
前記認知障害が年齢依存性認知障害である、請求項１～３のいずれか１項に記載の組成物。
前記認知障害が、記憶障害、顔または場所を認識できないこと、質問を繰り返すこと、学習困難、判断困難、気分または行動の変化、視覚的問題、および日常生活の作業の実行困難の１つまたは複数を含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の組成物。
前記認知障害が記憶障害を含む、請求項５に記載の組成物。
前記記憶障害が、エピソード記憶、意味記憶、空間記憶、および作業記憶の１以上の障害を含む、請求項５に記載の組成物。
前記対象が、年齢依存性認知障害を指し示す神経心理学的プロファイルを有する、請求項１～７のいずれか１項に記載の組成物。
前記対象が、認知障害に関連する脳における神経炎症を患っている、請求項１～８のいずれか１項に記載の組成物。
前記対象がヒトである、請求項１～９のいずれか１項に記載の組成物。
認知障害の後退に用いられる、請求項１～１０のいずれか１項に記載の組成物。
前記認知障害が記憶障害である、請求項１～１１に記載の組成物。
前記記憶障害が、エピソード記憶、意味記憶、空間記憶、および作業記憶の１以上の障害を含む、請求項１２に記載の組成物。
対象における認知障害の進行の後退において使用するための、カスパーゼ１阻害剤、または前記カスパーゼ１阻害剤および薬学的に許容される担体を含む組成物を含み、
前記カスパーゼ１阻害剤がＶＸ－７６５またはその薬学的に許容される塩である、キット。