JP7120335B2 - 液体クロマトグラフおよび液体クロマトグラフを用いた分析方法 - Google Patents

Description

本発明は、試料の分析を行う液体クロマトグラフおよび液体クロマトグラフを用いた分析方法に関する。

液体クロマトグラフィーの分野において、グラジエント溶離と呼ばれる溶離方法が知られている。グラジエント溶離は、移動相の組成（混合比）を連続的に変化させつつ試料の溶離を行う方法である。グラジエント溶離を行うための送液システムとして、高圧グラジエントシステムおよび低圧グラジエントシステムがある。

例えば、特許文献１には、液体クロマトグラフ分析装置に設けられる２つの流路構成が記載されている。２つの流路構成は、それぞれ高圧グラジエントシステムおよび低圧グラジエントシステムにそれぞれ対応する。

高圧グラジエントシステムは、例えば２つの溶媒瓶および２つのポンプを備える。２つの溶媒瓶には、２つの移動相がそれぞれ貯留されている。２つのポンプは、２つの溶媒瓶から２つの移動相をそれぞれ吸引する。吸引された２つの移動相が混合されることにより任意混合比の混合移動相が生成される。このとき、各ポンプの流量比が混合移動相の混合比となるように各ポンプの流量を制御することにより、混合移動相が生成される。この混合方式を高圧混合方式と呼ぶ。混合移動相の総流量を一定とする条件下で、各ポンプの流量比が時間的に制御されることにより各ポンプの下流に流れる混合移動相の混合比が時間的に変化する。それにより、分析に使用される混合移動相の組成（混合比）が連続的に変化する。この混合移動相の混合比の時間制御を高圧グラジエント方式と呼ぶ（特許文献１の図２（ａ））。

低圧グラジエントシステムは、例えば３つの溶媒瓶、３つのバルブおよび１つのポンプを備える。１つのポンプは、３つのバルブを介して３つの溶媒瓶にそれぞれ接続されている。１つのポンプにより、開放状態にある複数のバルブに接続された溶媒瓶から当該溶媒瓶に貯留された移動相が吸引される。１つのポンプにより吸引された複数の移動相が混合されることにより任意混合比の混合移動相が生成される。このとき、各バルブの単位時間当たりの開放時間比が混合移動相の混合比となるように順次バルブを開放状態にする制御を繰り返すことにより、混合移動相が生成される。この混合方式を低圧混合方式と呼ぶ。また、このような制御が可能に構成されたバルブを低圧混合用バルブと呼ぶ。混合移動相の総流量を一定とする条件下で、各バルブの単位時間当たりの開放時間比が時間的に制御されることにより３つのバルブの下流に流れる混合移動相の混合比が時間的に変化する。それにより、分析に使用される混合移動相の組成（混合比）が連続的に変化する。この混合移動相の混合比の時間制御を低圧グラジエント方式と呼ぶ（特許文献１の図２（ｂ））。
特許第４５２５４００号 特開２００４－１３８４１３号公報 特許第４２２８５０２号

液体クロマトグラフのグラジエントシステムにおいては、試料の分析開始前に予め当該分析に用いる混合移動相が設定される。試料の分析開始時に液体クロマトグラフにおける各流路内に分析開始時の条件として設定された混合移動相とは異なる組成（混合比）の混合移動相が存在すると、分析開始直後は高い精度で分析を行うことができない。

そこで、試料の分析開始前には、液体クロマトグラフ内の複数の流路の各々が、試料の分析開始時に当該流路内に存在すべき移動相または混合移動相（使用されるべき移動相または混合移動相）によりパージされる。特許文献１には、液体クロマトグラフにおける特定の流路を分析開始時に用いられるべき混合移動相で自動パージすることが記載されている。また、特許文献１には、上記の２つの流路構成において溶媒瓶に接続される流路に当該溶媒瓶に貯留された移動相を順次自動パージすることが記載されている。

高圧グラジエントシステムに対応する上記の流路構成においては、試料の分析開始前に、例えば複数のポンプを１つずつ送液状態となるように順次制御することにより各溶液瓶の移動相のパージが行われる。一方、低圧グラジエントシステムに対応する上記の流路構成においては、試料の分析開始前に、例えば１つのポンプが動作する状態で当該ポンプの上流に位置する複数のバルブを１つずつ開放状態となるように順次制御することにより各溶媒瓶の移動相のパージが行われる。

近年、低圧混合用バルブと高圧グラジエントシステムとが上流から下流にこの順で並ぶように設けられた構成を含む液体クロマトグラフが開発されている（例えば、特許文献２参照）。この液体クロマトグラフによれば、多数種類の移動相を所望の混合比で混合することができるので、より多様な移動相を容易に生成することが可能である。このような液体クロマトグラフにおいても、高い精度で試料を分析するために適切なパージが行われることが望まれる。

本発明の目的は、多様な分析用移動相を容易に生成することが可能であるとともに、分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料の分析を行うことが可能な液体クロマトグラフおよび液体クロマトグラフを用いた分析方法を提供することである。

（１）本発明の一局面に従う液体クロマトグラフは、試料の分析を行う液体クロマトグラフであって、複数の移動相源群にそれぞれ対応する複数の流路と、各移動相源群が含む複数の移動相源から１または複数の移動相を中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給する供給装置と、複数の流路にそれぞれ流れる複数の中間混合移動相を混合し、混合された複数の中間混合移動相を分析用移動相として生成する混合器と、試料の分析開始時に分析用移動相における複数の中間混合移動相の混合比が予め設定された初期比に調整されるようにかつ試料の分析期間中に複数の中間混合移動相の混合比が初期比から時間的に変化するように、供給装置および混合器のうち少なくとも一方を制御する分析制御部と、試料の分析開始前に、複数の中間混合移動相の混合比が初期比に調整されるように供給装置および混合器のうち少なくとも一方を制御するパージ制御部とを備え、パージ制御部は、初期比における複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、複数の中間混合移動相の混合比を初期比に調整する制御の前に、複数の中間混合移動相が複数の流路をそれぞれ流れるように供給装置および混合器のうち少なくとも一方を制御する。

その液体クロマトグラフにおいては、試料の分析期間中に、各移動相源群から１または複数の移動相が中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給される。複数の流路に流れる複数の中間混合移動相が混合され、分析用移動相が生成される。これにより、多様な分析用移動相を容易に生成することが可能である。

試料の分析開始時には、分析用移動相における複数の中間混合移動相の混合比が予め設定された初期比に調整される。また、試料の分析期間中には、複数の中間混合移動相の混合比が初期比から時間的に変化するように、複数の中間混合移動相の混合比が調整される。

試料の分析開始前に、複数の中間混合移動相の混合比が初期比に調整されるように分析用移動相が生成される。この場合、複数の流路のうち少なくとも一の流路について、試料の分析開始時に使用されるべき中間混合移動相を用いたパージが行われる。

ここで、上記のパージ動作において、グラジエント溶離等の試料の分析条件によっては、試料の分析開始時に複数の流路を流れる複数の中間混合移動相のうちいずれかの流量が０またはほぼ０に設定される場合がある。これは、初期比における複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に相当する。この場合、上記のパージ動作のみでは、流量が０またはほぼ０に設定された中間混合移動相に対応する流路についてはパージを行うことができない。

そこで、初期比におけるいずれかの項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合には、試料の分析開始前でかつ複数の中間混合移動相の混合比を初期比に調整するパージ動作の前に、複数の中間混合移動相が複数の流路にそれぞれ供給される。これにより、複数の流路が複数の中間混合移動相によりそれぞれパージされる。その後、試料の分析が行われる。

このように、試料の分析開始前に予め複数の流路が複数の中間混合移動相によりパージされる。それにより、試料の分析開始時点で使用されず分析開始後に使用される中間混合移動相が存在する場合でも、予め設定された混合比で正確に生成された分析用移動相を試料の分析期間全体に渡って用いることができる。したがって、分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料を分析することが可能になる。

（２）パージ制御部は、初期比における複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、複数の流路への複数の中間混合移動相の供給が順次行われるように供給装置および混合器のうち少なくとも一方を制御してもよい。この場合、複数の中間混合移動相による複数の流路のパージが個別に行われる。

（３）パージ制御部は、初期比における複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、複数の流路への複数の中間混合移動相の供給が並行して行われるように供給装置および混合器のうち少なくとも一方を制御してもよい。この場合、複数の中間混合移動相による複数の流路のパージが並行して行われる。

（４）液体クロマトグラフは、初期比を設定するとともに、試料の分析期間中に分析用移動相における複数の中間混合移動相の混合比の時間的変化を設定する設定部をさらに備え、分析制御部およびパージ制御部は、設定部により設定された混合比の時間的変化に基づいて供給装置および混合器のうち少なくとも一方を制御してもよい。

この場合、試料の分析期間中に設定された混合比の時間的変化に基づく分析用移動相の生成が適切にかつ自動的に行われるとともに、試料の分析開始前に適切なパージが自動的に行われる。したがって、使用者は、パージのために煩雑な操作を行う必要がない。

（５）パージ制御部は、試料の分析開始前でかつ複数の流路に複数の中間混合移動相が供給される前に、予め定められた移動相の順序に従って各移動相源群の複数の移動相が当該移動相源群に対応する流路に順次供給されるように供給装置および混合器のうち少なくとも一方を制御し、複数の流路にそれぞれ流れるべき複数の中間混合移動相における１または複数の移動相の混合比はそれぞれ予め設定され、予め定められた移動相の順序は、試料の分析に用いられない移動相、試料の分析開始時に用いられない移動相、複数の中間混合移動相に含まれかつ混合比の項がより小さい移動相、および複数の中間混合移動相に含まれかつ混合比の項がより大きい移動相の順であってもよい。

これにより、複数の流路に複数の中間混合移動相をそれぞれ供給するパージの前に、各移動相源群の複数の移動相源と当該移動相源群に対応する流路とをつなぐ他の複数の流路について適切なパージが行われる。

（６）供給装置は、複数の移動相源群および複数の流路にそれぞれ対応する複数のポンプを含み、各ポンプは、対応する移動相源群から複数の移動相をそれぞれ吸引しつつ混合し、混合された複数の移動相を中間混合移動相として対応する流路に供給してもよい。

この場合、複数のポンプにより、高圧グラジエントシステムが構成される。したがって、各ポンプの上流側に低圧混合用バルブを設けることにより、多様なグラジエント溶離が可能となる。

（７）本発明の他の局面に従う液体クロマトグラフは、試料の分析を行う液体クロマトグラフであって、複数の移動相源群にそれぞれ対応する複数の流路と、各移動相源群が含む複数の移動相源から１または複数の移動相を中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給する供給装置と、複数の流路にそれぞれ流れる複数の中間混合移動相のいずれかを分析用移動相として選択する選択器と、試料の分析開始時に分析用移動相として複数の中間混合移動相のうち予め設定された１つが選択されるようにかつ試料の分析期間中に分析用移動相として複数の中間混合移動相のうち予め設定された他の１つが選択されるように、選択器を制御する分析制御部と、試料の分析開始前に、複数の中間混合移動相が複数の流路をそれぞれ流れるように供給装置および選択器のうち少なくとも一方を制御するパージ制御部とを備える。

その液体クロマトグラフにおいては、試料の分析期間中に、各移動相源群から１または複数の移動相が中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給される。試料の分析開始時に複数の流路を流れる複数の中間混合移動相のいずれかが分析用移動相として選択される。試料の分析期間中に複数の中間混合移動相のうち他の１つが分析用移動相として選択される。これにより、多様な分析用移動相を容易に生成することが可能である。

試料の分析開始前に、複数の中間混合移動相が複数の流路にそれぞれ供給される。これにより、複数の流路が複数の中間混合移動相によりそれぞれパージされる。その後、試料の分析が行われる。

このように、試料の分析開始前に予め複数の流路が複数の中間混合移動相によりパージされる。それにより、複数の中間混合移動相のいずれかが試料の分析開始時点で使用されず分析開始後に使用される場合でも、予め設定された混合比で正確に生成された分析用移動相を試料の分析期間全体に渡って用いることができる。したがって、分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料を分析することが可能になる。

（８）本発明のさらに他の局面に従う液体クロマトグラフを用いた分析方法は、試料の分析を行う液体クロマトグラフを用いた分析方法であって、液体クロマトグラフは、複数の移動相源群にそれぞれ対応する複数の流路を有し、分析方法は、試料の分析期間中に、各移動相源群が含む複数の移動相源から１または複数の移動相を中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給するステップと、試料の分析期間中に、複数の流路にそれぞれ流れる複数の中間混同移動相を混合し、混合された複数の中間混同移動相を分析用移動相として生成するステップと、試料の分析開始時に分析用移動相における複数の中間混合移動相の混合比が予め設定された初期比に調整されるようにかつ試料の分析期間中に複数の中間混合移動相の混合比が初期比から時間的に変化するように、複数の中間混合移動相の混合比を調整するステップと、試料の分析開始前に、複数の中間混合移動相の混合比が初期比に調整されるように分析用移動相を生成するステップとを含み、試料の分析開始前に、複数の中間混合移動相の混合比が初期比に調整されるように分析用移動相を生成するステップは、初期比における複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、複数の中間混合移動相の混合比を初期比に調整する前に、複数の中間混合移動相を複数の流路にそれぞれ供給することを含む。

その分析方法においては、試料の分析期間中に、各移動相源群から１または複数の移動相が中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給される。複数の流路に流れる複数の中間混合移動相が混合され、分析用移動相が生成される。これにより、多様な分析用移動相を容易に生成することが可能である。

試料の分析開始時には、分析用移動相における複数の中間混合移動相の混合比が予め設定された初期比に調整される。また、試料の分析期間中には、複数の中間混合移動相の混合比が初期比から時間的に変化するように、複数の中間混合移動相の混合比が調整される。

試料の分析開始前に、複数の中間混合移動相の混合比が初期比に調整されるように分析用移動相が生成される。この場合、複数の流路のうち少なくとも一の流路について、試料の分析開始時に使用されるべき中間混合移動相を用いたパージが行われる。

初期比におけるいずれかの項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合には、試料の分析開始前でかつ複数の中間混合移動相の混合比を初期比に調整するパージ動作の前に、複数の中間混合移動相が複数の流路にそれぞれ供給される。これにより、複数の流路が複数の中間混合移動相によりそれぞれパージされる。その後、試料の分析が行われる。

このように、試料の分析開始前に予め複数の流路が複数の中間混合移動相によりパージされる。それにより、試料の分析開始時点で使用されず分析開始後に使用される中間混合移動相が存在する場合でも、予め設定された混合比で正確に生成された分析用移動相を試料の分析期間全体に渡って用いることができる。したがって、分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料を分析することが可能になる。

（９）初期比における複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、試料の分析開始前に複数の中間混合移動相を複数の流路にそれぞれ供給することは、複数の中間混合移動相の供給を順次行うことを含んでもよい。この場合、複数の中間混合移動相による複数の流路のパージが個別に行われる。

（１０）初期比における複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、試料の分析開始前に複数の中間混合移動相を複数の流路にそれぞれ供給することは、複数の中間混合移動相の供給を並行して行うことを含んでもよい。この場合、複数の中間混合移動相による複数の流路のパージが並行して行われる。

（１１）分析方法は、初期比を設定するとともに、試料の分析期間中に分析用移動相における複数の中間混合移動相の混合比の時間的変化を設定するステップをさらに含み、試料の分析期間中に分析用移動相における複数の中間混合移動相の混合比を調整するステップおよび試料の分析開始前に複数の中間混合移動相の混合比が初期比に調整されるように分析用移動相を生成するステップは、設定するステップにより設定された初期比および混合比の時間的変化に基づいて複数の流路に流れる複数の中間混合移動相の混合比を調整することを含んでもよい。

この場合、試料の分析期間中に設定された混合比の時間的変化に基づく分析用移動相の生成が適切に行われるとともに、試料の分析開始前に適切なパージが行われる。

（１２）分析方法は、複数の流路にそれぞれ流れるべき複数の中間混合移動相における１または複数の移動相の混合比をそれぞれ設定するステップと、試料の分析開始前でかつ複数の流路に複数の中間混合移動相が供給される前に、予め定められた移動相の順序に従って各移動相源群の複数の移動相を当該移動相源群に対応する流路に順次供給するステップをさらに含み、予め定められた移動相の順序は、試料の分析に用いられない移動相、試料の分析開始時に用いられない移動相、複数の中間混合移動相に含まれかつ混合比の項がより小さい移動相、および複数の中間混合移動相に含まれかつ混合比の項がより大きい移動相の順であってもよい。

これにより、複数の流路に複数の中間混合移動相をそれぞれ供給するパージの前に、各移動相源群の複数の移動相源と当該移動相源群に対応する流路とをつなぐ他の複数の流路について適切なパージが行われる。

（１３）本発明のさらに他の局面に従う液体クロマトグラフを用いた分析方法は、試料の分析を行う液体クロマトグラフを用いた分析方法であって、液体クロマトグラフは、複数の移動相源群にそれぞれ対応する複数の流路を有し、分析方法は、試料の分析期間中に、各移動相源群が含む複数の移動相源から１または複数の移動相を中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給するステップと、試料の分析開始時に、複数の流路を流れる複数の中間混合移動相のうち予め設定された１つを分析用移動相として選択するステップと、試料の分析期間中に、複数の中間混合移動相のうち予め設定された他の１つを分析用移動相として選択するステップと、試料の分析開始前に、複数の中間混合移動相を複数の流路にそれぞれ供給するステップとを含む。

その分析方法においては、試料の分析期間中に、各移動相源群から１または複数の移動相が中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給される。試料の分析開始時に複数の流路を流れる複数の中間混合移動相のいずれかが分析用移動相として選択される。試料の分析期間中に複数の中間混合移動相のうち他の１つが分析用移動相として選択される。これにより、多様な分析用移動相を容易に生成することが可能である。

試料の分析開始前に、複数の中間混合移動相が複数の流路にそれぞれ供給される。これにより、複数の流路が複数の中間混合移動相によりそれぞれパージされる。その後、試料の分析が行われる。

このように、試料の分析開始前に予め複数の流路が複数の中間混合移動相によりパージされる。それにより、複数の中間混合移動相のいずれかが試料の分析開始時点で使用されず分析開始後に使用される場合でも、予め設定された混合比で正確に生成された分析用移動相を試料の分析期間全体に渡って用いることができる。したがって、分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料を分析することが可能になる。

本発明によれば、多様な分析用移動相を容易に生成することが可能になるとともに分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料の分析を行うことが可能になる。

図１は本発明の一実施の形態に係る液体クロマトグラフの構成を示す図である。 図２は第１の生成例で生成される分析用移動相に対応するパージの一例を説明するための図である。 図３は第１の生成例で生成される分析用移動相に対応するパージの一例を説明するための図である。 図４は適切なパージが行われない課題を説明するための図である。 図５は第２の生成例で生成される分析用移動相に対応するパージの一例を説明するための図である。 図６は図５の２つの制御を並行して行う場合の一例を説明するための図である。 図７は他の実施の形態に係る液体クロマトグラフの一構成例を示す図である。 図８は他の実施の形態に係る液体クロマトグラフの他の構成例を示す図である。 図９は他の実施の形態に係る液体クロマトグラフのさらに他の構成例を示す図である。

［１］液体クロマトグラフの構成
図１は、本発明の一実施の形態に係る液体クロマトグラフの構成を示す図である。図１に示すように、本実施の形態に係る液体クロマトグラフ１００は、第１の調整部１０、第２の調整部２０、分析用移動相生成部３０、試料導入部４０、カラム５０、検出器６０、制御装置７０、操作部８１および表示部８２を含む。

第１の調整部１０および第２の調整部２０は、それぞれ第１の切替バルブ１１および第２の切替バルブ２１を含む。第１および第２の切替バルブ１１，１２の各々は、いわゆる低圧混合用バルブである。低圧混合用バルブは、複数の入口ポートおよび１つの出口ポートを有し、複数の入口ポートと１つの出口ポートとの間の複数の流路を選択的に開放可能に構成される。また、低圧混合用バルブは、比較的微小な単位時間（例えば、０．６ｓｅｃ程度）当たりの複数の流路間の開放時間を調整することにより複数の液体を任意の比率で排出可能に構成される。分析用移動相生成部３０は、いわゆる高圧グラジエントシステムと基本的に同じ構成を有し、第１のポンプ３１、第２のポンプ３２およびミキサ３３を含む。

第１の調整部１０には、複数の（本例では４個）のボトルＢ１～Ｂ４が設けられている。ボトルＢ１～Ｂ４には、互いに異なる種類の移動相が貯留されている。第１の調整部１０の第１の切替バルブ１１は、複数（本例では４個）の配管ｐ１～ｐ４によりボトルＢ１～Ｂ４にそれぞれ接続されるとともに、配管ｐ１１により分析用移動相生成部３０の第１のポンプ３１の入口ポートに接続されている。第１のポンプ３１の出口ポートは配管ｐ１２によりミキサ３３に接続されている。

第１の切替バルブ１１は、配管ｐ１～ｐ４のうち一の配管の内部空間を配管ｐ１１の内部空間に選択的に連通させる。それにより、第１のポンプ３１の動作時には、ボトルＢ１～Ｂ４のいずれか一のボトルから第１のポンプ３１に当該一のボトルに貯留された移動相が吸引される。ここで、第１の切替バルブ１１の状態は、例えばボトルＢ１～Ｂ４のうちいずれか２以上のボトルに貯留された２以上の移動相が単位時間当たり予め定められた割合で第１のポンプ３１に吸引されるように時分割で切り替えられる。この場合、第１のポンプ３１においては、吸引された２以上の移動相が混合されつつ混合移動相として配管Ｐ１２に供給される。第１のポンプ３１は、後述する制御装置７０の制御に基づいて配管Ｐ１２に供給される混合移動相の量（流量：単位時間あたりに流れる混合移動相の量）を変更可能に構成されている。

第２の調整部２０には、複数の（本例では４個）のボトルＢ５～Ｂ８が設けられている。ボトルＢ５～Ｂ８には、互いに異なる種類の移動相が貯留されている。第２の調整部２０の第２の切替バルブ２１は、複数（本例では４個）の配管ｐ５～ｐ８によりボトルＢ５～Ｂ８にそれぞれ接続されるとともに、配管ｐ２１により分析用移動相生成部３０の第２のポンプ３２の入口ポートに接続されている。第２のポンプ３２の出口ポートは配管ｐ２２によりミキサ３３に接続されている。

第２の切替バルブ２１は、第１の切替バルブ１１と同じ構成を有し、配管ｐ５～ｐ８のうち一の配管の内部空間を配管ｐ２１の内部空間に選択的に連通させる。それにより、第２のポンプ３２の動作時には、ボトルＢ５～Ｂ８のいずれか一のボトルから第２のポンプ３２に当該一のボトルに貯留された移動相が吸引される。ここで、第２の切替バルブ２１の状態は、例えばボトルＢ５～Ｂ８のうちいずれか２以上のボトルに貯留された２以上の移動相が単位時間当たり予め定められた割合で第２のポンプ３２に吸引されるように時分割で切り替えられる。この場合、第２のポンプ３２においては、吸引された２以上の移動相が混合されつつ混合移動相として配管Ｐ２２に供給される。第２のポンプ３２は、後述する制御装置７０の制御に基づいて配管Ｐ２２に供給される混合移動相の流量を変更可能に構成されている。

ミキサ３３においては、基本的に第１のポンプ３１および第２のポンプ３２から配管ｐ２１，ｐ２２を通してそれぞれ供給される２種類の混合移動相が混合されることにより分析に使用される分析用移動相が生成される。なお、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２のうち一のポンプのみが動作する場合には、当該一のポンプから供給される混合移動相が分析用移動相としてミキサ３３を通過する。

ミキサ３３には、配管ｐ３１の一端が接続されている。配管ｐ３１には、試料導入部４０、カラム５０および検出器６０がこの順で設けられている。ミキサ３３から配管ｐ３１を通して試料導入部４０に分析用移動相が供給される。試料導入部４０は、例えばインジェクタであり、供給された分析用移動相に試料を導入する。試料が導入された分析用移動相は、カラム５０に導かれる。カラム５０において、分析用移動相に導入された試料の複数の成分が分離される。検出器６０は、カラム５０により分離された試料の各成分を検出する。検出器６０を通過した分析用移動相は、図示しない排液装置に送られる（特許文献３参照）。

操作部８１は、キーボード、マウスまたはタッチパネル等の入力デバイスであり、制御装置７０に接続される。表示部８２は、液晶表示装置等の表示デバイスであり、制御装置７０に接続される。

制御装置７０は、例えばＣＰＵおよびメモリまたはマイクロコンピュータから構成される。制御装置７０は、図１に一点鎖線の矢印で示すように、第１および第２の切替バルブ１１，１２を制御するとともに、第１および第２のポンプ３１，３２を制御する。また、制御装置７０は、試料導入部４０および検出器６０を制御する。さらに、制御装置７０は、例えば試料の分析条件等の入力を受け付けるための情報を表示部８２に表示させるとともに、使用者による操作部８１の操作に応答して試料の分析条件等の設定を行う。試料の分析条件には、試料の分析に用いる分析用移動相を生成するための情報（以下、移動相生成情報と呼ぶ。）が含まれる。

図１に示すように、制御装置７０は、機能部として分析制御部７１、パージ制御部７２および記憶部７３を含む。記憶部７３は、使用者により設定された試料の分析条件を記憶する。分析制御部７１は、記憶部７３に記憶された分析条件に基づいて、設定された移動相生成情報に従って分析用移動相が生成されるように、第１の切替バルブ１１、第２の切替バルブ２１、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２を制御する。

パージ制御部７２は、試料の分析開始前に、記憶部７３に記憶された分析条件に基づいて、適切な組成（混合比）の混合移動相でミキサ３３の上流側の配管ｐ１１，ｐ１２がパージされるように、第１の切替バルブ１１および第１のポンプ３１を制御する。また、パージ制御部７２は、試料の分析開始前に、記憶部７３に記憶された分析条件に基づいて、適切な組成（混合比）の混合移動相でミキサ３３の上流側の配管ｐ２１，ｐ２２がパージされるように、第２の切替バルブ２１および第２のポンプ３２を制御する。パージ制御部７２による、第１の切替バルブ１１、第２の切替バルブ２１、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２の制御例については後述する。

［２］グラジエント溶離による試料の分析
以下、第１のポンプ３１を動作させつつ第１の切替バルブ１１を制御することによりボトルＢ１～Ｂ４に貯留された４種類の移動相のうち２以上の移動相を予め設定された第１の混合比で混合することにより得られる混合移動相を第１の混合移動相と呼ぶ。また、第２のポンプ３２を動作させつつ第２の切替バルブ２１を制御することによりボトルＢ５～Ｂ８に貯留された４種類の移動相のうち２以上の移動相を予め設定された第２の混合比で混合することにより得られる混合移動相を第２の混合移動相と呼ぶ。

本実施の形態に係る液体クロマトグラフ１００においては、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２を同時に動作させることにより、第１および第２の混合移動相をさらに混合して新たな組成（混合比）の混合移動相を分析用移動相として生成することができる。このとき、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２の動作を時間的に変化させることにより、配管ｐ１２，ｐ２２に供給される第１および第２の混合移動相の混合比を連続的に変化させることができる。それにより、分析用移動相の組成を連続的に変化させるグラジエント溶離による試料の分析を行うことが可能である。

なお、本実施の形態においては、第１の混合移動相を生成するための第１の混合比は、試料の分析中時間的に変化することなく一定に固定されるものとする。また、第２の混合移動相を生成するための第２の混合比も、試料の分析中時間的に変化することなく一定に固定されるものとする。

（ａ）分析用移動相の第１の生成例
グラジエント溶離に用いる分析用移動相の第１の生成例について説明する。以下、図１のボトルＢ１、ボトルＢ２、ボトルＢ５およびボトルＢ６に貯留される移動相をそれぞれ第１の移動相、第２の移動相、第３の移動相および第４の移動相と呼ぶ。また、以下の説明では、試料の分析開始時に対応する分析用移動相における第１および第２の混合移動相の予め設定された混合比を第３の混合比と呼ぶ。また、試料の分析終了時に対応する分析用移動相における第１および第２の混合移動相の予め設定された混合比を第４の混合比と呼ぶ。

移動相生成情報として、第１の移動相と第２の移動相とが第１の混合比（６０：４０）で混合された第１の混合移動相を用いることが設定されているものとする。また、第３の移動相と第４の移動相とが第２の混合比（８０：２０）で混合された第２の混合移動相を用いることが設定されているものとする。さらに、第１の混合移動相と第２の混合移動相との混合比が第３の混合比（９０：１０）から第４の混合比（１０：９０）に連続的に変化するように分析用移動相を生成することが設定されているものとする。

この場合、分析制御部７１は、試料の分析開始時に、ミキサ３３に流入する第１の混合移動相の流量と第２の混合移動相の流量との比が第３の混合比（９０：１０）となるように第１のポンプ３１および第２のポンプ３２を制御する。その後、分析制御部７１は、試料の分析開始から分析終了までの間、第１および第２の混合移動相の混合比が第３の混合比（９０：１０）から第４の混合比（１０：９０）まで連続的に変化するように第１のポンプ３１および第２のポンプ３２を制御する。

なお、分析制御部７１は、第１のポンプ３１が動作する間、第１の移動相と第２の移動相とが第１の混合比（６０：４０）で混合されるように第１の切替バルブ１１を制御する。また、分析制御部７１は、第２のポンプ３２が動作する間、第３の移動相と第４の移動相とが第２の混合比（８０：２０）で混合されるように第２の切替バルブ２１を制御する。

（ｂ）分析用移動相の第２の生成例
グラジエント溶離に用いる分析用移動相の第２の生成例について説明する。第２の生成例においては、第１の混合移動相と第２の混合移動相との混合比が第３の混合比（１００：０）から第４の混合比（０：１００）に連続的に変化するように移動相を生成することを除いて、第１の生成例と同じ移動相生成情報が設定されているものとする。

この場合、分析制御部７１は、試料の分析開始時に、ミキサ３３に流入する第１の混合移動相の流量と第２の混合移動相の流量との比が第３の混合比（１００：０）となるように第１のポンプ３１および第２のポンプ３２を制御する。この開始時に、第２のポンプ３２は停止している。その後、分析制御部７１は、試料の分析開始から分析終了までの間、第１および第２の混合移動相の混合比が第３の混合比（１００：０）から第４の混合比（０：１００）まで連続的に変化するように第１のポンプ３１および第２のポンプ３２を制御する。

なお、分析制御部７１は、第１の生成例と同様に、第１のポンプ３１が動作する間、第１の移動相と第２の移動相とが第１の混合比（６０：４０）で混合されるように第１の切替バルブ１１を制御する。また、分析制御部７１は、第１の生成例と同様に、第２のポンプ３２が動作する間、第３の移動相と第４の移動相とが第２の混合比（８０：２０）で混合されるように第２の切替バルブ２１を制御する。

［３］パージ
試料の分析開始前には、第１の調整部１０、第２の調整部２０および分析用移動相生成部３０の各配管内に予め存在する移動相（以下、残留移動相と呼ぶ。）および気泡が当該分析に用いる組成（混合比）の移動相でパージされる。

ここで、パージ制御部７２は、試料の分析開始時に対応して設定される第３の混合比における第１および第２の混合移動相のうちいずれかに対応する項が０に設定されている場合と、それ以外の場合とで異なる制御を行う。上記の第１の生成例の移動相生成情報が設定されていることは、第３の混合比における第１および第２の混合移動相の項が０以外に設定されている場合に相当する。上記の第２の生成例の移動相生成情報が設定されていることは、試料の分析開始時に対応して設定される第３の混合比における第１および第２の混合移動相のうちいずれかに対応する項が０に設定されている場合に相当する。

（ａ）分析用移動相の第１の生成例に対応するパージ
第３の混合比における第１および第２の混合移動相に対応する項が０以外に設定されている場合の制御例として、第１の生成例に対応するパージの具体例を説明する。

図２および図３は、第１の生成例で生成される分析用移動相に対応するパージの一例を説明するための図である。図２および図３では、パージのための各種移動相の流れが太い実線、太い点線、太い一点鎖線および太い二点鎖線のいずれかの矢印で示される。

図２に示すように、パージ制御部７２は、まずボトルＢ４に貯留された移動相がミキサ３３へ供給されるように、第１のポンプ３１および第１の切替バルブ１１を制御する。この制御を制御Ｃ１とする。これにより、配管ｐ４，ｐ１１，ｐ１２内に既存の残留移動相および気泡等がボトルＢ４に貯留された移動相でパージされる。

次に、パージ制御部７２は、ボトルＢ３に貯留された移動相がミキサ３３へ供給されるように、第１のポンプ３１および第１の切替バルブ１１を制御する。この制御を制御Ｃ２とする。これにより、配管ｐ３，ｐ１１，ｐ１２内に既存の残留移動相および気泡等がボトルＢ３に貯留された移動相でパージされる。

次に、パージ制御部７２は、ボトルＢ２に貯留された第２の移動相がミキサ３３へ供給されるように、第１のポンプ３１および第１の切替バルブ１１を制御する。この制御を制御Ｃ３とする。これにより、配管ｐ２，ｐ１１，ｐ１２内に既存の残留移動相および気泡等がボトルＢ２に貯留された第２の移動相でパージされる。

次に、パージ制御部７２は、ボトルＢ１に貯留された第１の移動相がミキサ３３へ供給されるように、第１のポンプ３１および第１の切替バルブ１１を制御する。この制御を制御Ｃ４とする。これにより、配管ｐ１，ｐ１１，ｐ１２内に既存の残留移動相および気泡等がボトルＢ１に貯留された第１の移動相でパージされる。上記の制御Ｃ１～Ｃ４においては、第２のポンプ３２は停止状態で維持される。

次に、パージ制御部７２は、ボトルＢ８に貯留された移動相がミキサ３３へ供給されるように、第２のポンプ３２および第２の切替バルブ２１を制御する。この制御を制御Ｃ５とする。これにより、配管ｐ８，ｐ２１，ｐ２２内に既存の残留移動相および気泡等がボトルＢ８に貯留された移動相でパージされる。

次に、パージ制御部７２は、ボトルＢ７に貯留された移動相がミキサ３３へ供給されるように、第２のポンプ３２および第２の切替バルブ２１を制御される。この制御を制御Ｃ６とする。これにより、配管ｐ７，ｐ２１，ｐ２２内に既存の残留移動相および気泡等がボトルＢ７に貯留された移動相でパージされる。

次に、図３に示すように、パージ制御部７２は、ボトルＢ６に貯留された第４の移動相がミキサ３３へ供給されるように、第２のポンプ３２および第２の切替バルブ２１を制御する。この制御を制御Ｃ７とする。これにより、配管ｐ６，ｐ２１，ｐ２２内に既存の残留移動相および気泡等がボトルＢ６に貯留された第４の移動相でパージされる。

次に、パージ制御部７２は、ボトルＢ５に貯留された第３の移動相がミキサ３３へ供給されるように、第２のポンプ３２および第２の切替バルブ２１を制御する。この制御を制御Ｃ８とする。これにより、配管ｐ５，ｐ２１，ｐ２２内に既存の残留移動相および気泡等がボトルＢ５に貯留された第３の移動相でパージされる。

次に、パージ制御部７２は、試料の分析開始時と同じ条件で動作するように、第１の切替バルブ１１、第２の切替バルブ２１、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２を制御する。この制御を制御Ｃ９とする。具体的には、パージ制御部７２は、ミキサ３３に流入する第１の混合移動相の流量と第２の混合移動相の流量との比が第３の混合比（９０：１０）となるように、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２を制御する。また、パージ制御部７２は、第１の移動相と第２の移動相とが第１の混合比（６０：４０）で混合されるように、第１の切替バルブ１１を制御する。さらに、パージ制御部７２は、第３の移動相と第４の移動相とが第２の混合比（８０：２０）で混合されるように、第２の切替バルブ２１を制御する。これにより、分析用移動相の第１の生成例に対応するパージが終了する。

本例では、配管ｐ１，ｐ２，ｐ５，ｐ８の内部空間が、それぞれ第１の移動相、第２の移動相、第３の移動相および第４の移動相でパージされる。また、配管ｐ１１，ｐ１２の内部空間が第１の混合移動相によりパージされる。さらに、配管ｐ２１，ｐ２２の内部空間が第２の混合移動相によりパージされる。さらに、図１の配管ｐ３１の内部空間が、第１の混合移動相と第２の混合移動相とが第３の混合比（９０：１０）で混合された分析用移動相によりパージされる。これにより、試料の分析開始時に、予め定められた成分を有する移動相を高い精度でカラム５０に供給することが可能になる。

なお、上記の制御Ｃ１～Ｃ９のうち制御Ｃ１～Ｃ４と制御Ｃ５～Ｃ８とは逆の順に行われてもよい。また、上記の制御Ｃ１～Ｃ９のうち制御Ｃ１～Ｃ４と制御Ｃ５～Ｃ８とは並行して行われてもよい。さらに、上記の制御Ｃ１～Ｃ９のうち制御Ｃ１，Ｃ２，Ｃ５，Ｃ６によるパージで用いられる移動相は、分析用移動相の生成に用いられない。そのため、気泡の残留によるバルブの誤動作等が発生しない条件下では、制御Ｃ１，Ｃ２，Ｃ５，Ｃ６は省略されてもよい。

上記の制御Ｃ１～Ｃ９において、ミキサ３３に供給される各種移動相は、図１の配管ｐ３１を通して試料導入部４０に送られる。試料導入部４０においては、パージ制御時に分析用移動相生成部３０から供給される移動相および混合移動相は、図示しないドレインを通して廃棄される（特許文献３参照）。

（ｂ）分析用移動相の第２の生成例に対応するパージ
第３の混合比における第１および第２の混合移動相のうちいずれかに対応する項が０に設定されている場合の制御例として、第２の生成例に対応するパージの具体例を説明する。

移動相が第２の生成例で生成される場合には、上記の制御Ｃ１～Ｃ９のパージ制御を順次行っても一部の配管内で適切なパージが行われない。この課題について説明する。

図４は、適切なパージが行われない課題を説明するための図である。上記のように、移動相の第２の生成例では、試料の分析開始時に、ミキサ３３に流入する第１および第２の混合移動相の混合比が第３の混合比（１００：０）となるように第１のポンプ３１および第２のポンプ３２が制御される。この場合、パージ制御部７２が上記の制御Ｃ１～Ｃ９を順次行うと、制御Ｃ９で第２のポンプ３２は停止状態となる。そのため、制御Ｃ９で配管ｐ５，ｐ６，ｐ２１，ｐ２２の内部空間には移動相および混合移動相の流れが生じない。したがって、図４に白抜きの矢印で示される配管ｐ２１，ｐ２２の内部空間には、制御Ｃ８によりパージされた第３の移動相のみが残留する。

この状態で、試料の分析が開始されると、第２のポンプ３２の動作開始直後は、配管ｐ２１，ｐ２２に残留する第３の移動相のみがミキサ３３に流れ込む。そのため、第１の混合移動相と第３の移動相との混合液が分析用移動相として生成されることになる。この分析用移動相には、第４の移動相の成分が含まれない。その結果、初期段階における試料の分析精度が低下する。

そこで、パージ制御部７２は、第３の混合比における第１および第２の混合移動相のうちいずれかに対応する項が０に設定されている場合に、第１の混合移動相により配管ｐ１１，ｐ１２をパージする制御を行う。また、パージ制御部７２は、試料の分析開始時に配管ｐ１２，ｐ２２のうち一方を流れる第１または第２の混合移動相の流量が０に設定されている場合に、第２の混合移動相で配管ｐ２１，ｐ２２をパージするための制御を行う。

図５は、第２の生成例で生成される分析用移動相に対応するパージの一例を説明するための図である。図５では、パージのための各種移動相の流れが太い実線および太い点線の矢印で示される。

本例では、パージ制御部７２は、まず図２および図３の制御Ｃ１～Ｃ８を順次行う。その後、パージ制御部７２は、第１の混合移動相が配管ｐ１２に供給されるように、第１のポンプ３１および第１の切替バルブ１１を制御する。この制御を制御Ｃ１１とする。これにより、配管ｐ１１，ｐ１２内に既存の残留移動相および気泡等が第１の混合移動相でパージされる。

次に、パージ制御部７２は、第２の混合移動相が配管ｐ２２に供給されるように、第２のポンプ３２および第２の切替バルブ２１を制御する。この制御を制御Ｃ１２とする。これにより、配管ｐ２１，ｐ２２内に既存の残留移動相および気泡等が第２の混合移動相でパージされる。その後、パージ制御部７２は、図４の制御Ｃ９を行う。すなわち、パージ制御部７２は、試料の分析開始時と同じ条件で動作するように、第１の切替バルブ１１、第２の切替バルブ２１、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２を制御する。

上記の制御Ｃ１１，Ｃ１２によれば、試料の分析開始前に、配管ｐ１２が第１の混合移動相でパージされ、配管ｐ２２が第２の混合移動相でパージされる。それにより、予め設定された成分を有する分析用移動相を、試料の分析開始直後から用いることができる。したがって、初期段階における試料の分析精度の低下が防止され、高い精度で試料を分析することが可能になる。

上記の制御Ｃ１１，Ｃ１２は逆の順に行われてもよい。また、上記の制御Ｃ１１，Ｃ１２は並行して行われてもよい。図６は、図５の２つの制御Ｃ１１，Ｃ１２を並行して行う場合の一例を説明するための図である。図６では、パージのための各種移動相の流れが太い実線、太い点線、太い一点鎖線および太い二点鎖線のいずれかの矢印で示される。

図６に示すように、本例では、図２および図３の制御Ｃ１～Ｃ８が順次行われた後、制御Ｃ９が行われる前に、図５の制御Ｃ１１，Ｃ１２が同時に行われる。この制御を制御Ｃ１３とする。制御Ｃ１３によれば、第１の混合移動相による配管ｐ１２のパージと第２の混合移動相による配管ｐ２２のパージとが並行して行われる。

制御Ｃ１３において、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２は、ともに動作していればよい。制御Ｃ１３により第１のポンプ３１および第２のポンプ３２によりミキサ３３に流入する第１および第２の混合移動相の混合比は例えば（５０：５０）である。この場合、第１のポンプ３１に接続された配管のパージと第２のポンプ３２に接続された配管のパージとを同じ程度の効率で行うことができる。なお、制御Ｃ１３により第１のポンプ３１および第２のポンプ３２によりミキサ３３に流入する第１および第２の混合移動相の混合比は、（５０：５０）には限定されない。この混合比は、使用される移動相の特性（粘度等）および第１のポンプ３１の特性および第２のポンプ３２の特性等に応じて（５０：５０）以外の比に設定されてもよい。

本例においても、上記の制御Ｃ１～Ｃ９のうち制御Ｃ１，Ｃ２，Ｃ５，Ｃ６によるパージで用いられる移動相は、分析用移動相の生成に用いられない。そのため、制御Ｃ１，Ｃ２，Ｃ５，Ｃ６は省略されてもよい。さらに、本例では、制御Ｃ９，Ｃ１１の動作が同じである。したがって、上記の制御Ｃ９，Ｃ１１のうち制御Ｃ１１は、省略されてもよい。この場合、パージに要する時間を短縮することができる。

［４］効果
（ａ）本実施の形態に係る液体クロマトグラフ１００においては、試料の分析期間中に、吸引されつつ混合された第１および第２の移動相が第１の混合移動相として配管ｐ１２に供給される。このとき、第１の混合移動相における第１および第２の移動相の混合比が予め定められた第１の混合比に調整される。また、吸引されつつ混合された第３および第４の移動相が第２の混合移動相として配管ｐ２２に供給される。このとき、第２の混合移動相における第３および第４の移動相の混合比が予め定められた第２の混合比に調整される。さらに、試料の分析期間中には、配管ｐ２１，ｐ２２を流れる第１および第２の混合移動相の混合比が予め設定された混合比に調整され、分析用移動相が生成される。これにより、多様な分析用移動相を容易に生成することが可能である。

配管ｐ２１，ｐ２２に流れる第１および第２の混合移動相の流量は、総流量と混合比の積となるように調整される。総流量は、ミキサ３３の下流に単位時間当たりに流れる移動相（分析用移動相）の量である。分析期間中に生成される分析用移動相における第１および第２の混合移動相の混合比が第３の混合比から第４の混合比にかけて時間的に変化することによりグラジエント溶離が行われる。

試料の分析開始時に対応して設定される第３の混合比における第１および第２の混合移動相のうちいずれかに対応する項が０に設定されている場合には、試料の分析開始前に、第１の混合移動相が配管ｐ１２に供給され、第２の混合移動相が配管ｐ２２に供給される。これにより、配管ｐ１２，ｐ２２が第１および第２の混合移動相によりそれぞれパージされる。その後、試料の分析開始時に設定された第３の混合比で第１または第２の混合移動相が配管ｐ１２，ｐ２２のうちいずれか一方に供給される。これにより、配管ｐ１２，ｐ２２のうち一方が第１または第２の混合移動相によりパージされる。その後、試料の分析が行われる。

一方、試料の分析開始時に対応して設定される第３の混合比における第１および第２の混合移動相に対応する項が０以外に設定されている場合には、試料の分析開始前に、試料の分析開始時に設定された第３の混合比で第１および第２の混合移動相が配管ｐ１２，ｐ２２に供給される。これにより、配管ｐ１２，ｐ２２が第１および第２の混合移動相によりそれぞれパージされる。その後、試料の分析が行われる。

これらの場合、試料の分析開始前に予め配管ｐ１２，ｐ２２が第１および第２の混合移動相によりパージされるので、予め設定された混合比で正確に生成された分析用移動相を分析開始直後から用いることができる。したがって、高い精度でグラジエント溶離を行うことができる。その結果、高い精度で試料を分析することが可能になる。

（ｂ）また、上記の液体クロマトグラフ１００においては、ミキサ３３において混合される第１の混合移動相と第２の混合移動相との混合比の時間的変化を移動相生成情報として設定することが可能である。分析制御部７１は、設定された移動相生成情報に基づいて分析用移動相を生成する。それにより、設定された分析用移動相の生成が適切にかつ自動的に行われる。また、パージ制御部７２は、設定された移動相生成情報に基づいて各種パージを行う。それにより、設定された混合比の時間的変化に基づく適切なパージが自動的に行われる。したがって、使用者は、分析用移動相の生成およびパージのために煩雑な操作を行う必要がない。

（ｃ）図２および図３のパージの例では、第１および第２の混合移動相によるパージが行われる前に、複数のボトルＢ１～Ｂ８に貯留された複数の移動相のパージが予め定められた移動相の順序に従って順次行われている。

ここで、予め定められた移動相の順序は、試料の分析に用いられない移動相、試料の分析開始時に用いられない移動相、第１または第２の混合移動相に含まれかつ混合比の項がより小さい移動相、および第１または第２の混合移動相に含まれかつ混合比の項がより大きい移動相の順である。

これにより、配管ｐ１２，ｐ２２が第１および第２の混合移動相によりパージされる前に、複数のボトルＢ１～Ｂ８につながる複数の配管ｐ１～ｐ８について適切なパージが行われる。

［５］他の実施の形態
（ａ）上記実施の形態においては、第３の混合比におけるいずれかの項が０に設定されているか否かで、第１および第２の混合移動相をそれぞれ配管ｐ１２，ｐ２２に供給するパージの要否が判定されるが、本発明はこれに限定されない。

第３の混合比における全ての項が０でない場合でも、いずれかの項が０に近い値である場合、分析開始時の第３の混合比に従うパージを行っても十分な量で第１および第２の混合移動相を用いたパージを行うことができない可能性がある。そこで、いずれかの項が０を含む予め定められた範囲（例えば、０～５）内に設定されている場合には、第３の混合比に従うパージの前に、第１および第２の混合移動相をそれぞれ配管ｐ１２，ｐ２２に供給するパージが行われてもよい。

上記の範囲は、使用される移動相の特性、配管の長さおよびポンプの特性等を考慮した上で、第３の混合比に従うパージで対象となる配管内の残留移動相および気泡が十分に除去できないと考えられる範囲に定められることが望ましい。

（ｂ）上記実施の形態に係る分析用移動相生成部３０は、２つのポンプを含みかつ各ポンプの入口ポートに低圧混合用バルブが接続された高圧グラジエントシステムの構成を有するが、本発明はこれに限定されない。分析用移動相生成部３０は、上記の構成に代えて、３つ以上のポンプを含みかつ各ポンプの入口ポートに低圧混合用バルブが接続された高圧グラジエントシステムの構成を有してもよい。

この場合、第３および第４の混合比の各々は、２つの混合移動相の混合比ではなく、３つ以上の混合移動相の混合比となる。３つ以上の混合移動相について第３および第４の混合比が設定されることにより、より多数の混合移動相を所望の混合比で混合することができる。したがって、より多様なグラジエント溶離が可能となる。

この場合においても、第３の混合比における３つ以上の混合移動相のうちいずれかに対応する項が０または０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、上記実施の形態における制御Ｃ１１～Ｃ１３と同様のパージ制御を行う。それにより、分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料を分析することが可能になる。

（ｃ）分析用移動相生成部３０は、２つ以上のポンプを有する高圧グラジエントシステムの構成に代えて、１つのポンプを有する低圧グラジエントシステムの構成を有してもよい。具体的には、分析用移動相生成部３０は、低圧混合用バルブと１つのポンプとを含む構成を有してもよい。

図７は他の実施の形態に係る液体クロマトグラフの一構成例を示す図である。図７の液体クロマトグラフ１００は、分析用移動相生成部３０の構成が図１の液体クロマトグラフ１００と異なる。

図７の分析用移動相生成部３０は、第３のポンプ３６、切替バルブ３７およびミキサ３３を含む。切替バルブ３７は、２つの入口ポートと１つの出口ポートとを含む低圧混合用バルブである。切替バルブ３７の一方の入口ポートは、配管ｐ１２を介して第１の切替バルブ１１に接続される。切替バルブ３７の他方の入口ポートは、配管ｐ２２を介して第２の切替バルブ２１に接続される。切替バルブ３７の出口ポートには、配管ｐ３１が接続される。配管ｐ３１には、第３のポンプ３６およびミキサ３３が、上流から下流に向かってこの順に設けられる。この構成においては、第３のポンプ３６の作動時に切替バルブ３７が制御されることにより、単位時間当たりの配管ｐ１２，ｐ３１間の流路開放時間と配管ｐ１２，ｐ３１間の流路開放時間との比が調整される。それにより、第１の混合移動相と第２の混合移動相とを所望の混合比で混合することができる。

この場合においても、上記の実施の形態と同様に、第３の混合比における第１および第２の混合移動相の項に基づくパージの制御を行うことにより、分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料を分析することが可能になる。

なお、図７の液体クロマトグラフ１００においては、単位時間当たりに切替バルブ３７から第３のポンプ３６に供給される第１および第２の混合移動相が第３のポンプ３６内で混合されるのであれば、ミキサ３３は設けられなくてもよい。

（ｄ）分析用移動相生成部３０は、２つ以上のポンプを有する高圧グラジエントシステムの構成に代えて、１つのポンプとセレクトバルブとを含む構成を有してもよい。ここで、セレクトバルブは、複数の入口ポートと１つの出口ポートとの間の複数の流路を選択的に開放可能に構成されるが、複数の流路間の選択的な開放状態の切替を高速（微小周期）で行うことができない点が低圧混合用バルブとは異なる。

図８は、他の実施の形態に係る液体クロマトグラフの他の構成例を示す図である。図８の液体クロマトグラフ１００は、分析用移動相生成部３０の構成が図１の液体クロマトグラフ１００と異なる。

図８の分析用移動相生成部３０は、第４のポンプ３８およびセレクトバルブ３９を含む。セレクトバルブ３９は、２つの入口ポートと１つの出口ポートとを含む。セレクトバルブ３９の一方の入口ポートは、配管ｐ１２を介して第１の切替バルブ１１に接続される。セレクトバルブ３９の他方の入口ポートは、配管ｐ２２を介して第２の切替バルブ２１に接続される。

セレクトバルブ３９の出口ポートには、配管ｐ３１の一端が接続される。配管ｐ３１においては、セレクトバルブ３９と試料導入部４０との間に第４のポンプ３８が取り付けられている。セレクトバルブ３９は、第４のポンプ３８の動作時に、配管ｐ１２を流れる第１の混合移動相と配管ｐ２２を流れる第２の混合移動相とのいずれか一方を分析用移動相として選択する選択器として機能する。

図８の液体クロマトグラフ１００においては、例えば試料の分析開始時に配管ｐ１２，ｐ２２を流れる第１および第２の混合移動相のいずれか一方がセレクトバルブ３９により分析用移動相として選択される。試料の分析期間中に第１および第２の混合移動相のうち他方がセレクトバルブ３９により分析用移動相として選択される。これにより、多様な分析用移動相を容易に生成することが可能である。

ここで、図８の液体クロマトグラフ１００においては、制御装置７０のパージ制御部７２の制御により、試料の分析開始前に、第１の混合移動相が配管ｐ１２に供給され、第２の混合移動相が配管ｐ２２に供給される。これにより、配管ｐ１２，ｐ２２が第１および第２の混合移動相によりそれぞれパージされる。その後、試料の分析が行われる。

このように、試料の分析開始前に予め配管ｐ１２，ｐ２２が第１および第２の混合移動相によりパージされる。それにより、第１および第２の混合移動相のうち一方が試料の分析開始時点で使用されず分析開始後に使用される場合でも、予め設定された混合比で正確に生成された分析用移動相を試料の分析期間全体に渡って用いることができる。したがって、上記の実施の形態と同様に、分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料を分析することが可能になる。

なお、図８の例において、分析用移動相生成部３０のセレクトバルブ３９は、３つ以上の入口ポートを有してもよく、３つ以上の入口ポートにさらに低圧混合用バルブが接続されてもよい。この場合においても、試料の分析開始前に、セレクトバルブ３９の３つ以上の入口ポートに接続された配管が予め設定された混合比で生成された混合移動相によりパージされる。それにより、分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料を分析することが可能になる。

（ｅ）上記実施の形態においては、第１および第２の切替バルブ１１，１２は、低圧混合用バルブであるが、本発明はこれに限定されない。第１の調整部１０は、第１の切替バルブ１１に代えてセレクトバルブを含んでもよい。また、第２の調整部２０は、第２の切替バルブ１２に代えてセレクトバルブを含んでもよい。

図９は他の実施の形態に係る液体クロマトグラフのさらに他の構成例を示す図である。図９の液体クロマトグラフ１００は、第１および第２の調整部１０，２０の構成が図１の液体クロマトグラフ１００と異なる。

図９の第１の調整部１０は、セレクトバルブ１１ｘを含む。セレクトバルブ１１ｘは、３つの入口ポートと１つの出口ポートとを含む。セレクトバルブ１１ｘの３つの入口ポートは、配管ｐ１，ｐ２，ｐ３を介してボトルＢ１，Ｂ２，Ｂ３にそれぞれ接続される。セレクトバルブ１１ｘの出口ポートは、配管ｐ１１を介して第１のポンプ３１の入口ポートに接続される。

図９の第２の調整部２０は、セレクトバルブ２１ｘを含む。セレクトバルブ２１ｘは、３つの入口ポートと１つの出口ポートとを含む。セレクトバルブ２１ｘの３つの入口ポートは、配管ｐ５，ｐ６，ｐ７を介してボトルＢ５，Ｂ６，Ｂ７にそれぞれ接続される。セレクトバルブ２１ｘの出口ポートは、配管ｐ２１を介して第２のポンプ３２の入口ポートに接続される。

この構成においては、第１の調整部１０は、ボトルＢ１，Ｂ２，Ｂ３に貯留された複数の移動相のうちの一の移動相を上記の第１の混合移動相として出口ポートから選択的に流出させる。また、第２の調整部２０は、ボトルＢ５，Ｂ６，Ｂ７に貯留された複数の移動相のうちの一の移動相を上記の第２の混合移動相として出口ポートから選択的に流出させる。

この場合においても、上記の実施の形態と同様に、第３の混合比における第１および第２の混合移動相の項に基づくパージの制御を行うことにより、分析用移動相の成分を変化させつつ高い精度で試料を分析することが可能になる。

なお、各セレクトバルブ１１ｘ，２１Ｘは、３つの入口ポートと１つの出口ポートとを含むように構成されるが、２つの入口ポートと１つの出口ポートとを含むように構成されてもよいし、４つの入口ポートと１つの出口ポートとを含むように構成されてもよい。この場合、各セレクトバルブ１１ｘ，２１ｘには、入口ポートの数に応じた数のボトルを接続することができる。

また、図９の例では、第１および第２の調整部１０がそれぞれセレクトバルブ１１ｘ，２１ｘを含むが、第１および第２の調整部１０のうち一方がセレクトバルブを含み、第１および第２の調整部１０のうち他方が低圧混合用バルブを含んでもよい。すなわち、図９の液体クロマトグラフ１００において、第１の調整部１０のみが図１の第１の調整部１０に置き換えられてもよい。あるいは、図９の液体クロマトグラフ１００において、第２の調整部２０のみが図１の第２の調整部２０に置き換えられてもよい。さらに、図９の液体クロマトグラフ１００においては、分析用移動相生成部３０のみが図７または図８の分析用移動相生成部３０に置き換えられてもよい。

（ｆ）上記実施の形態においては、液体クロマトグラフの一例として一般的な高速液体クロマトグラフを説明したが、本発明はこれに限定されない。上記の第１の調整部１０、第２の調整部２０、分析用移動相生成部３０および制御装置７０を備える構成は、高速液体クロマトグラフに限らず、超臨界流体クロマトグラフにも適用することができる。この場合においても、上記実施の形態の例と同様の効果を得ることができる。したがって、本発明に係る液体クロマトグラフには、超臨界流体クロマトグラフが含まれる。なお、超臨界クロマトグラフにおいては、超臨界流体が気化しないようにバックプレッシャーレギュレータが設けられる。そのため、超臨界クロマトグラフでは、高速液体クロマトグラフに対して比較的低い流量でパージを行う必要がある。

（ｇ）上記実施の形態に係る第１の調整部１０は、低圧混合用バルブである１つの第１の切替バルブ１１によりボトルＢ１～Ｂ４に貯留された複数の移動相を混合するが、本発明はこれに限定されない。例えば、第１の調整部１０は、配管ｐ１，ｐ２，ｐ３，ｐ４を枝管とし、配管ｐ１１を主管とする分岐配管を有するとともに、配管ｐ１，ｐ２，ｐ３，ｐ４にそれぞれ取り付けられた複数のバルブを有してもよい。この場合、各バルブの開閉状態が切り替えられることにより、上記の第１の切替バルブ１１と同様の機能が実現される。

また、上記実施の形態に係る第２の調整部２０は、低圧混合用バルブである１つの第２の切替バルブ２１によりボトルＢ５～Ｂ８に貯留された複数の移動相を混合するが、本発明はこれに限定されない。例えば、第２の調整部２０は、配管ｐ５，ｐ６，ｐ７，ｐ８を枝管とし、配管ｐ２１を主管とする分岐配管を有するとともに、配管ｐ５，ｐ６，ｐ７，ｐ８にそれぞれ取り付けられた複数のバルブを有してもよい。この場合、各バルブの開閉状態が切り替えられることにより、上記の第２の切替バルブ２１と同様の機能が実現される。

（ｈ）上記実施の形態では、第１および第２の調整部１０，２０の各々は、それぞれ４つのボトルを使用可能に構成されるが、本発明はこれに限定されない。第１および第２の調整部１０，２０の各々は、５つ以上のボトルを使用可能に構成されてもよいし、３つ以下のボトルを使用可能に構成されてもよい。

（ｉ）上記実施の形態に係る液体クロマトグラフ１００においては、第１の調整部１０の下流側にさらに第１および第２の調整部１０，２０と同様の機能を実現するための低圧混合用バルブまたはセレクトバルブが設けられてもよい。また、第２の調整部２０の上流にさらに第１および第２の調整部１０，２０と同様の機能を実現するための低圧混合用バルブまたはセレクトバルブが設けられてもよい。この場合、生成可能な移動相のさらなる多様化が実現される。

［６］請求項の各構成要素と実施の形態の各部との対応関係
以下、請求項の各構成要素と実施の形態の各部との対応の例について説明する。

上記実施の形態においては、ボトルＢ１～Ｂ８が複数の移動相源の例であり、ボトルＢ１～Ｂ４からなるボトル群およびボトルＢ５～Ｂ８からなるボトル群がそれぞれ移動相源群の例であり、配管ｐ１２，ｐ２２が流路の例である。

また、図１の第１の切替バルブ１１、第２の切替バルブ２１、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２の組み合わせ、図７の第１の切替バルブ１１、第２の切替バルブ２１および第３のポンプ３６の組み合わせ、図８の第１の切替バルブ１１、第２の切替バルブ２１および第４のポンプ３８の組み合わせ、および図９のセレクトバルブ１１ｘ，２１ｘ、第１のポンプ３１および第２のポンプ３２の組み合わせが供給装置の例である。

また、ミキサ３３が混合器の例であり、第１および第２の混合移動相が中間混合移動相の例であり、第３の混合比が初期比の例であり、セレクトバルブ３９が選択器の例である。

請求項の各構成要素として、請求項に記載されている構成または機能を有する他の種々の要素を用いることもできる。

Claims (13)

1. 試料の分析を行う液体クロマトグラフであって、
   複数の移動相源群にそれぞれ対応する複数の流路と、
   各移動相源群が含む複数の移動相源から１または複数の移動相を中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給する供給装置と、
   前記複数の流路にそれぞれ流れる複数の中間混合移動相を混合し、混合された複数の中間混合移動相を分析用移動相として生成する混合器と、
   前記試料の分析開始時に前記分析用移動相における前記複数の中間混合移動相の混合比が予め設定された初期比に調整されるようにかつ前記試料の分析期間中に前記複数の中間混合移動相の混合比が前記初期比から時間的に変化するように、前記供給装置および前記混合器のうち少なくとも一方を制御する分析制御部と、
   前記試料の分析開始前に、前記複数の中間混合移動相の混合比が前記初期比に調整されるように前記供給装置および前記混合器のうち少なくとも一方を制御するパージ制御部とを備え、
   前記パージ制御部は、前記初期比における前記複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、前記複数の中間混合移動相の混合比を前記初期比に調整する制御の前に、前記複数の中間混合移動相が前記複数の流路をそれぞれ流れるように前記供給装置および前記混合器のうち少なくとも一方を制御する、液体クロマトグラフ。
2. 前記パージ制御部は、前記初期比における前記複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、前記複数の流路への前記複数の中間混合移動相の供給が順次行われるように前記供給装置および前記混合器のうち少なくとも一方を制御する、請求項１記載の液体クロマトグラフ。
3. 前記パージ制御部は、前記初期比における前記複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、前記複数の流路への前記複数の中間混合移動相の供給が並行して行われるように前記供給装置および前記混合器のうち少なくとも一方を制御する、請求項１記載の液体クロマトグラフ。
4. 前記初期比を設定するとともに、前記試料の分析期間中に前記分析用移動相における前記複数の中間混合移動相の混合比の時間的変化を設定する設定部をさらに備え、
   前記分析制御部および前記パージ制御部は、前記設定部により設定された混合比の時間的変化に基づいて前記供給装置および前記混合器のうち少なくとも一方を制御する、請求項１～３のいずれか一項に記載の液体クロマトグラフ。
5. 前記パージ制御部は、前記試料の分析開始前でかつ前記複数の流路に前記複数の中間混合移動相が供給される前に、予め定められた移動相の順序に従って各移動相源群の複数の移動相が当該移動相源群に対応する流路に順次供給されるように前記供給装置および前記混合器のうち少なくとも一方を制御し、
   前記複数の流路にそれぞれ流れるべき複数の中間混合移動相における１または複数の移動相の混合比はそれぞれ予め設定され、
   前記予め定められた移動相の順序は、前記試料の分析に用いられない移動相、前記試料の分析開始時に用いられない移動相、前記複数の中間混合移動相に含まれかつ混合比の項がより小さい移動相、および前記複数の中間混合移動相に含まれかつ混合比の項がより大きい移動相の順である、請求項１～３のいずれか一項に記載の液体クロマトグラフ。
6. 前記供給装置は、
   前記複数の移動相源群および前記複数の流路にそれぞれ対応する複数のポンプを含み、
   各ポンプは、対応する移動相源群から複数の移動相をそれぞれ吸引しつつ混合し、混合された複数の移動相を中間混合移動相として対応する流路に供給する、請求項１～３のいずれか一項に記載の液体クロマトグラフ。
7. 試料の分析を行う液体クロマトグラフであって、
   複数の移動相源群にそれぞれ対応する複数の流路と、
   各移動相源群が含む複数の移動相源から１または複数の移動相を中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給する供給装置と、
   前記複数の流路にそれぞれ流れる複数の中間混合移動相のいずれかを分析用移動相として選択する選択器と、
   前記試料の分析開始時に前記分析用移動相として前記複数の中間混合移動相のうち予め設定された１つが選択されるようにかつ前記試料の分析期間中に前記分析用移動相として前記複数の中間混合移動相のうち予め設定された他の１つが選択されるように、前記選択器を制御する分析制御部と、
   前記試料の分析開始前に、前記複数の中間混合移動相が前記複数の流路をそれぞれ流れるように前記供給装置および前記選択器のうち少なくとも一方を制御するパージ制御部とを備える、液体クロマトグラフ。
8. 試料の分析を行う液体クロマトグラフを用いた分析方法であって、
   前記液体クロマトグラフは、
   複数の移動相源群にそれぞれ対応する複数の流路を有し、
   前記分析方法は、
   前記試料の分析期間中に、各移動相源群が含む複数の移動相源から１または複数の移動相を中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給するステップと、
   前記試料の分析期間中に、前記複数の流路にそれぞれ流れる複数の中間混同移動相を混合し、混合された複数の中間混同移動相を分析用移動相として生成するステップと、
   前記試料の分析開始時に前記分析用移動相における前記複数の中間混合移動相の混合比が予め設定された初期比に調整されるようにかつ前記試料の分析期間中に前記複数の中間混合移動相の混合比が前記初期比から時間的に変化するように、前記複数の中間混合移動相の混合比を調整するステップと、
   前記試料の分析開始前に、前記複数の中間混合移動相の混合比が前記初期比に調整されるように前記分析用移動相を生成するステップとを含み、
   前記試料の分析開始前に、前記複数の中間混合移動相の混合比が前記初期比に調整されるように前記分析用移動相を生成するステップは、前記初期比における前記複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、前記複数の中間混合移動相の混合比を前記初期比に調整する前に、前記複数の中間混合移動相を前記複数の流路にそれぞれ供給することを含む、分析方法。
9. 前記初期比における前記複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、前記試料の分析開始前に前記複数の中間混合移動相を前記複数の流路にそれぞれ供給することは、前記複数の中間混合移動相の供給を順次行うことを含む、請求項８記載の分析方法。
10. 前記初期比における前記複数の中間混合移動相のうちいずれかに対応する項が０を含む予め定められた範囲内に設定されている場合に、前記試料の分析開始前に前記複数の中間混合移動相を前記複数の流路にそれぞれ供給することは、前記複数の中間混合移動相の供給を並行して行うことを含む、請求項８記載の分析方法。
11. 前記初期比を設定するとともに、前記試料の分析期間中に前記分析用移動相における前記複数の中間混合移動相の混合比の時間的変化を設定するステップをさらに含み、
    前記試料の分析期間中に前記分析用移動相における前記複数の中間混合移動相の混合比を調整するステップおよび前記試料の分析開始前に前記複数の中間混合移動相の混合比が前記初期比に調整されるように前記分析用移動相を生成するステップは、前記設定するステップにより設定された前記初期比および前記混合比の時間的変化に基づいて前記複数の流路に流れる前記複数の中間混合移動相の混合比を調整することを含む、請求項８～１０のいずれか一項に記載の分析方法。
12. 前記複数の流路にそれぞれ流れるべき複数の中間混合移動相における１または複数の移動相の混合比をそれぞれ設定するステップと、
    前記試料の分析開始前でかつ前記複数の流路に前記複数の中間混合移動相が供給される前に、予め定められた移動相の順序に従って各移動相源群の複数の移動相を当該移動相源群に対応する流路に順次供給するステップをさらに含み、
    前記予め定められた移動相の順序は、前記試料の分析に用いられない移動相、前記試料の分析開始時に用いられない移動相、前記複数の中間混合移動相に含まれかつ混合比の項がより小さい移動相、および前記複数の中間混合移動相に含まれかつ混合比の項がより大きい移動相の順である、請求項８～１０のいずれか一項に記載の分析方法。
13. 試料の分析を行う液体クロマトグラフを用いた分析方法であって、
    前記液体クロマトグラフは、
    複数の移動相源群にそれぞれ対応する複数の流路を有し、
    前記分析方法は、
    前記試料の分析期間中に、各移動相源群が含む複数の移動相源から１または複数の移動相を中間混合移動相として当該移動相源群に対応する流路に供給するステップと、
    前記試料の分析開始時に、前記複数の流路を流れる複数の中間混合移動相のうち予め設定された１つを分析用移動相として選択するステップと、
    前記試料の分析期間中に、前記複数の中間混合移動相のうち予め設定された他の１つを前記分析用移動相として選択するステップと、
    前記試料の分析開始前に、前記複数の中間混合移動相を前記複数の流路にそれぞれ供給するステップとを含む、分析方法。

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