JP6920093B2 - 植物活力剤 - Google Patents
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Description
特許文献1には、部分的に腐植化された天然有機物によって特徴付けられる有機物質の農学的に許容される複合混合物を含むリグニン等の成分と接触した粒状形態物を含む肥料組成物が記載されている。
本発明の植物活力剤は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であるリグニン分解物(以下、本発明のリグニン分解物という場合もある)を有効成分とする。本発明は、本発明のリグニン分解物からなる植物活力剤を包含する。
天然のリグニンはβ−O−4結合を主に、巨大高分子を形成している。リグニンは、植物系バイオマスから抽出される過程でβ−O−4結合の分解と、様々な縮合反応が進行し、リグニン中の結合の組成が変化する。アルカリニトロベンゼン酸化はリグニン中のβ−O−4結合を分解し、生成するアルデヒドモノマーからβ−O−4結合の量を定量する手法である。つまり、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率は、リグニン変性の程度を示し、その値が高ければ高いほど変性の程度が低いことを示す。リグニンは低変性であるほど、脂肪族OH基やフェノール性OH基の含有量が高く、反応性が高い。本発明では、低変性のリグニンを植物に用いることで、植物に対する生長促進効果を向上できるものと推測される。
本発明では、具体的には、以下の条件で測定したアルデヒド収率を、リグニン分解物のアルデヒド収率として採用する。
〔リグニン分解物のアルデヒド収率の測定方法〕
測定対象のリグニン分解物50〜200mg、2M 水酸化ナトリウム水溶液6〜10ml、ニトロベンゼン0.4mlを20mlのバイアルに入れ、900rpmで撹拌しながら170℃で2.5時間加熱する。加熱終了後冷却し、5〜15mlのジエチルエーテルで3回抽出し、ニトロベンゼン還元物と余分なニトロベンゼンを除去する。残った水層側に濃塩酸を加えてpH1〜3に調整し、さらに5〜15mlのジエチルエーテルで3回抽出する。このジエチルエーテル抽出液を減圧下で留去し、酸化混合物を得る。この酸化混合物をジクロロメタン20mLでメスアップする。そのうち2mlをミリポアHVHP膜(日本ミリポア株式会社製、孔径0.45μm)でろ過し、ガスクロマトグラフィ(GC)に供する。
ガスクロマトグラフィは、AgilentJ&W GCカラム DB−5(アジレント・テクノロジー株式会社製)を装着したGC装置(アジレント・テクノロジー株式会社製)を用いる。ガスクロマトグラフィの条件は、試料量は1.0μL、ヘリウム流速は10ml/分、抽入口温度200℃、スプリット比10:1とする。温度条件は、60℃で1分間保持した後、60〜250℃まで5℃/分で昇温し、250℃で10分保持する。定量は、バニリン、シリンガアルデヒド、パラヒドロキシベンズアルデヒドの3つのアルデヒドを試薬として用い、含有量に対するピーク面積で検量線を作成し、リグニン分解物中の前記3つのアルデヒド収量をそれぞれ求める。次式でアルデヒド収率(%)を算出する。アルデヒド収率(%)=(3つのアルデヒド量を合算したアルデヒド収量/リグニン分解物質量)×100
〔リグニン分解物の重量平均分子量の測定方法〕
リグニン分解物の重量平均分子量は、ゲル浸透クロマトグラフィー(GPC)により下記操作及び条件で測定する。
〔GPC操作〕
リグニン分解物を含有する試料溶液(1mg/mL)を100μL注入して測定を行う。試料の分子量は、あらかじめ作成した検線に基づき算出する。
〔GPC条件〕
機種:HLC−8120GPC(東ソー株式会社)
検出器:RI検出器
分離カラム:TSK−GEL α−M 2本(東ソー株式会社)
ガードカラム:TSKgel guardcolumn α(東ソー株式会社)
カラム温度:40℃
溶離液:60mmol/LのH3PO4と50mmol/LのLiBrを添加したN,N−ジメチルホルムアミド溶液
溶離液流量:1mL/min
標準試料:単分散ポリスチレン混合溶液〔東ソー株式会社製のA−500(分子量5.0×102)、F−10(分子量9.64×104)、F−850(分子量8.42×106)、Pressure Chemical社製(分子量4.0×103、3.0×104、9.29×105)
本発明のリグニン分解物を含有する植物活力剤を製造する方法として、下記工程1、及び工程2aを有する植物活力剤の製造方法、又は、下記工程1、及び工程2bを有する植物活力剤の製造方法が挙げられる。
工程1:植物系バイオマスを、該植物系バイオマスの固形分100質量部に対し、8質量部以上70質量部以下の塩基性化合物、及び10質量部以上10,000質量部以下の水により、H−ファクターが3,000以下の条件で処理する工程
工程2a:前記工程1を経た植物系バイオマスから、水溶性成分としてリグニン分解物を得、酸を加えてリグニン分解物を含む懸濁液を得る工程。
工程2b:前記工程1を経た植物系バイオマスから、水溶性成分としてリグニン分解物を得、有機溶媒を加えて精製した後、酸を加えてリグニン分解物を含む懸濁液を得る工程。
植物系バイオマスとしては、草本系バイオマス、木質系バイオマスが挙げられる。これらの中でも、好ましくは草本系バイオマスである。
イネ科の植物原料としては、例えばサトウキビバガス、ソルガムバガス等のバガス、スイッチグラス、エレファントグラス、コーンストーバー、コーンコブ、イナワラ、ムギワラ、オオムギ、ススキ、芝、ジョンソングラス、エリアンサス、ネピアグラスが挙げられる。アオイ科の植物原料としては、例えばケナフ、ワタが挙げられる。マメ科の植物原料としては、例えばアルファルファが挙げられる。ヤシ科の植物の非木質原料としては、例えばパームヤシ空果房が挙げられる。
これらの中でも、生産性及び取扱い性の観点から、好ましくはイネ科の植物原料であり、より好ましくはサトウキビバガス、コーンコブ、又はイナワラであり、更に好ましくはサトウキビバガスである。
これらの植物系バイオマスは、1種単独でも、又は2種以上を組み合わせて用いてもよい。
工程1の処理は温度が高いと反応が促進されるとともに時間も同時に関係するため、100℃の脱リグニン反応速度を1として、他の温度における相対速度をArrheniusの式より求め、その温度における時間との積であるHFによって算出される。
本発明においては、HFはバイオマスの塩基化合物を用いた処理で反応系に与えられた熱の総量を表す指標であり、下記式(1)により表される。HFはバイオマスと塩基化合物水溶液が接触している時間tを積分することで算出する。
当該水溶性成分は、例えば、アルカリ処理バイオマスの液部を分離することで取り出すことができる。当該水溶性成分は、前記分離に加えて、分離したアルカリ処理バイオマスの固形部中に存在するリグニン分解物を水で洗浄し、水中に溶解させて抽出し、取り出すことが好ましい。更に、得られた水溶性成分に酸を加え、pH1〜5に調整し、リグニン分解物を析出させる。得られたリグニン分解物は、遠心分離やろ過して、更に水洗し、塩基物を加えてpH6〜8に調整する。更に、透析膜等により塩基性化合物を除いてもよい。このようにして得られたリグニン分解物は、濃縮され、水やその他の有機溶剤と混合して液状として使用しても良く、溶媒を蒸発させ、固体として使用することができる。
当該水溶性成分は、例えば、工程1のアルカリ処理バイオマスの液部を分離することで取り出すことができる。
当該水溶性成分は、前記分離に加えて、分離したアルカリ処理バイオマスの固形部中(固体相中)に存在するリグニン分解物を水で洗浄し、水中に溶解させて抽出し、取り出すことができる。
更には、工程1の反応液から回収した水相及び工程1のアルカリ処理バイオマスの固形部から回収した水相に、有機溶媒、好ましくは炭素数1以上3以下のアルコールから選ばれる少なくとも1種を含む有機溶媒を混合し、該混合物中で不純物を析出させる工程、析出した不純物を取り除く工程、及び、前記混合物から有機溶媒を取り除く工程、酸の添加によりリグニン分解物を析出させる工程、により、本発明のリグニン分解物を得ることができる。更に、得られたリグニン分解物は、透析膜等により酸又は塩基性化合物を除いてもよい。このようにして得られたリグニン分解物は、水やその他の溶剤と共に分散された状態でも良く、また、溶媒を蒸発させて、固体としても良い。
工程3:工程2a又は工程2bで得られたリグニン分解物を加熱する工程
工程3は、無溶媒下で行うことが好ましい。
工程3での加熱温度は、好ましくは60℃以上、より好ましくは120℃以上、そして、好ましくは170℃以下、より好ましくは140℃以下である。
また、工程3での加熱時間は、好ましくは1分以上、より好ましくは3分以上、そして、好ましくは30分以下、より好ましくは10分以下である。
本発明の植物活力剤組成物は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であるリグニン分解物、すなわち本発明のリグニン分解物を含有する。本発明の植物活力剤組成物に用いるリグニン分解物の好ましい態様は、本発明の植物活力剤と同じである。
界面活性剤としては、非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤及び両性界面活性剤から選ばれる1種以上の界面活性剤が挙げられる。界面活性剤としては、非イオン界面活性剤が好ましい。
水溶性ポリマーとしては、天然、半合成及び合成ポリマーが何れも使用でき、その中でも多糖類系水溶性ポリマーが好ましい。多糖類系水溶性ポリマーの具体例としては、グアーガム、キサンタンガム、でんぷん、セルロース、タラガム、ローストビーンガム、カラギーナン、及びこれらの誘導体が挙げられる。グアーガム誘導体としては、例えば、ヒドロキシプロピルグアーガム、カルボキシメチルヒドロキシプロピルグアーガム、カチオン化グアーガム等が挙げられる。キサンタンガム誘導体としては、例えば、ヒドロキシプロピルキサンタンガム等が挙げられる。でんぷん誘導体としては、例えば、カルボキシメチル化でんぷん、ヒドロキシアルキル化でんぷん、ヒドロキシプロピル架橋でんぷん、クラフト化でんぷん、酢酸でんぷん等が挙げられる。セルロース誘導体としては、例えば、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース等が挙げられる。多糖類系水溶性ポリマーとしては、ヒドキシプロピルメチルセルロースがより好ましい。
本発明の植物活力剤組成物が水溶性ポリマーを含有する場合、本発明のリグニン分解物100質量部に対し、水溶性ポリマーを好ましくは1質量部以上、より好ましくは10質量部以上、更に好ましくは50質量部以上、そして、好ましくは1,900質量部以下、より好ましくは600質量部以下、更に好ましくは300質量部以下含有する。
本発明の植物の育成方法では、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であるリグニン分解物、すなわち本発明のリグニン分解物を植物に接触させる。本発明の植物の育成方法に用いるリグニン分解物の好ましい態様は、本発明の植物活力剤と同じである。本発明の植物の育成方法を適用できる植物も、本発明の植物活力剤と同じである。
本発明の植物の育成方法では、本発明のリグニン分解物と水とを含有する処理液を、植物の地下部又は地上部に接触させることができる。
前記処理液は、植物活力剤で述べたリグニン分解物以外の成分、例えば、界面活性剤、水溶性ポリマー、肥料成分などを含有することができる。
本発明は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であるリグニン分解物の、植物活力剤としての使用に関する。
また、本発明は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であるリグニン分解物を含有する組成物の、植物活力剤組成物としての使用に関する。
本発明は、植物活力剤として使用される、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であるリグニン分解物に関する。
また、本発明は、植物活力剤組成物として使用される、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であるリグニン分解物を含有する組成物に関する。
これらで用いるリグニン分解物は、本発明のリグニン分解物であり、その好ましい態様は、本発明の植物活力剤や植物活力剤組成物と同じである。
アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であるリグニン分解物を有効成分とする植物活力剤。
前記リグニン分解物のアルデヒド収率が、10質量%以上、好ましくは12質量%以上、より好ましくは15質量%以上、更に好ましくは20質量%以上、更により好ましくは21質量%以上、更により好ましくは22質量%以上、そして、好ましくは40質量%以下、より好ましくは35質量%以下、更に好ましくは30質量%以下である、前記<1>に記載の植物活力剤。
前記リグニン分解物の重量平均分子量が、好ましくは1,000以上、より好ましくは3,000以上、更に好ましくは4,500以上、より更に好ましくは8,000以上、そして、好ましくは100,000以下、より好ましくは50,000以下、更に好ましくは30,000以下、より更に好ましくは26,000以下、より更に好ましくは20,000以下である、前記<1>又は<2>に記載の植物活力剤。
アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上、好ましくは12質量%以上、より好ましくは15質量%以上、更に好ましくは20質量%以上、更により好ましくは21質量%以上、更により好ましくは22質量%以上、そして、好ましくは40質量%以下、より好ましくは35質量%以下、更に好ましくは30質量%以下であるリグニン分解物を含有する植物活力剤組成物。
前記リグニン分解物の重量平均分子量が、好ましくは1,000以上、より好ましくは3,000以上、更に好ましくは4,500以上、より更に好ましくは8,000以上、そして、好ましくは100,000以下、より好ましくは50,000以下、更に好ましくは30,000以下、より更に好ましくは26,000以下、より更に好ましくは20,000以下である、前記<4>に記載の植物活力剤組成物。
前記リグニン分解物を、好ましくは5質量%以上、より好ましくは15質量%以上、更に好ましくは30質量%以上、そして、好ましくは90質量%以下、より好ましくは80質量%以下、更に好ましくは70質量%以下含有する、前記<4>又は<5>に記載の植物活力剤組成物。
界面活性剤を含有する、前記<4>〜<6>の何れかに記載の植物活力剤組成物。
界面活性剤が、非イオン界面活性剤である、前記<7>に記載の植物活力剤組成物。
前記リグニン分解物100質量部に対し、界面活性剤を好ましくは1質量部以上、より好ましくは10質量部以上、更に好ましくは50質量部以上、そして、好ましくは1,900質量部以下、より好ましくは600質量部以下、更に好ましくは300質量部以下含有する、前記<7>又は<8>に記載の植物活力剤組成物。
水溶性ポリマーを含有する、前記<4>〜<9>の何れかに記載の植物活力剤組成物。
水溶性ポリマーが、多糖類系水溶性ポリマーである、前記<10>に記載の植物活力剤組成物。
前記リグニン分解物100質量部に対し、水溶性ポリマーを好ましくは1質量部以上、より好ましくは10質量部以上、更に好ましくは50質量部以上、そして、好ましくは1,900質量部以下、より好ましくは600質量部以下、更に好ましくは300質量部以下含有する、前記<10>又は<11>に記載の植物活力剤組成物。
アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上、好ましくは12質量%以上、より好ましくは15質量%以上、更に好ましくは20質量%以上、更により好ましくは21質量%以上、更により好ましくは22質量%以上、そして、好ましくは40質量%以下、より好ましくは35質量%以下、更に好ましくは30質量%以下であるリグニン分解物を植物に接触させる、植物の育成方法。
前記リグニン分解物と水とを含有する処理液を植物に接触させる、前記<13>に記載の植物の育成方法。
前記処理液が、前記<1>〜<3>の何れかに記載の植物活力剤又は前記<4>〜<12>の何れかに記載の植物活力剤組成物と水とを混合して得られた処理液である、前記<14>に記載の植物の育成方法。
前記処理液中の前記リグニン分解物の含有量が1ppm以上、より好ましくは8ppm以上、更に好ましくは20ppm以上、更により好ましくは40ppm以上、そして、好ましくは5,000ppm以下、より好ましくは1,000ppm以下、更に好ましくは500ppm以下、更により好ましくは300ppm以下である、前記<14>又は<15>に記載の植物の育成方法。
前記処理液を、植物の地下部又は地上部に接触させる、前記<14>〜<16>の何れかに記載の植物の育成方法。
前記処理液を、養液栽培の培養液として用いて、前記リグニン分解物を植物に接触させる、前記<14>〜<17>の何れかに記載の植物の育成方法。
前記処理液を、養液栽培の培養液として植物の地下部に接触させる、前記<14>〜<18>の何れかに記載の植物の育成方法。
前記処理液中の前記リグニン分解物の含有量が、好ましくは1ppm以上、より好ましくは4ppm以上、更に好ましくは8ppm以上、より更に好ましくは20ppm以上、そして、好ましくは3,000ppm以下、より好ましくは1,000ppm以下、更に好ましくは100ppm以下、より更に好ましくは80ppm以下である、前記<18>又は<19>に記載の植物の育成方法。
前記処理液を、葉面散布して前記リグニン分解物を植物に接触させる、前記<14>〜<17>の何れかに記載の植物の育成方法。
前記処理液の散布量が、好ましくは3L/10a以上、より好ましくは5L/10a以上、更に好ましくは20L/10a以上、より更に好ましくは30L/10a以上、より更に好ましくは40L/10a以上、より更に好ましくは50L/10a以上、そして、好ましくは1,000L/10a以下、より好ましくは500L/10a以下、更に好ましくは300L/10a以下、より更に好ましくは100L/10a以下である、前記<21>に記載の植物の育成方法。
植物が、果菜類、葉菜類、根菜類、花卉類、及び豆類から選ばれる1種以上である、好ましくは豆類である、前記<13>〜<22>の何れかに記載の植物の育成方法。
下記工程1、及び工程2aを有する植物活力剤の製造方法。
工程1:植物系バイオマスを、該植物系バイオマスの固形分100質量部に対し、8質量部以上70質量部以下の塩基性化合物、及び10質量部以上10,000質量部以下の水により、H−ファクターが3,000以下の条件で処理する工程
工程2a:前記工程1を経た植物系バイオマスから、水溶性成分としてリグニン分解物を得、酸を加えてリグニン分解物を含む懸濁液を得る工程。
下記工程1、及び工程2bを有する植物活力剤の製造方法。
工程1:植物系バイオマスを、該植物系バイオマスの固形分100質量部に対し、8質量部以上70質量部以下の塩基性化合物、及び10質量部以上10,000質量部以下の水により、H−ファクターが3,000以下の条件で処理する工程
工程2b:前記工程1を経た植物系バイオマスから、水溶性成分としてリグニン分解物を得、有機溶媒を加えて精製した後、酸を加えてリグニン分解物を含む懸濁液を得る工程。
工程2bでリグニン分解物を無溶媒下で加熱する、前記<25>記載の植物活力剤の製造方法。
有機溶媒が炭素数1以上3以下のアルコールから選ばれる少なくとも1種を含む溶媒である、前記<25>又は<26>に記載の植物活力剤の製造方法。
工程2a又は工程2bの後に、以下の工程3を行う、前記<24>〜<27>の何れかに記載の植物活力剤の製造方法。
工程3:工程2a又は工程2bで得られたリグニン分解物を加熱する工程
工程1の植物系バイオマスが草本系バイオマスである、前記<24>〜<28>の何れかに記載の植物活力剤の製造方法。
前記<1>〜<3>の何れかに記載の植物活力剤の製造方法である、前記<24>〜<30>の何れかに記載の植物活力剤の製造方法。
アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上、好ましくは12質量%以上、より好ましくは15質量%以上、更に好ましくは20質量%以上、更により好ましくは21質量%以上、更により好ましくは22質量%以上、そして、好ましくは40質量%以下、より好ましくは35質量%以下、更に好ましくは30質量%以下であるリグニン分解物の、植物活力剤としての使用。
アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上、好ましくは12質量%以上、より好ましくは15質量%以上、更に好ましくは20質量%以上、更により好ましくは21質量%以上、更により好ましくは22質量%以上、そして、好ましくは40質量%以下、より好ましくは35質量%以下、更に好ましくは30質量%以下であるリグニン分解物を含有する組成物の、植物活力剤組成物としての使用。
植物活力剤として使用される、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上、好ましくは12質量%以上、より好ましくは15質量%以上、更に好ましくは20質量%以上、更により好ましくは21質量%以上、更により好ましくは22質量%以上、そして、好ましくは40質量%以下、より好ましくは35質量%以下、更に好ましくは30質量%以下であるリグニン分解物。
植物活力剤組成物として使用される、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上、好ましくは12質量%以上、より好ましくは15質量%以上、更に好ましくは20質量%以上、更により好ましくは21質量%以上、更により好ましくは22質量%以上、そして、好ましくは40質量%以下、より好ましくは35質量%以下、更に好ましくは30質量%以下であるリグニン分解物を含有する組成物。
測定対象のリグニン分解物50mg、2M 水酸化ナトリウム水溶液7ml、ニトロベ
ンゼン0.4mlを20mlのバイアルに入れ、900rpmで撹拌しながら170℃で2.5時間加熱する。加熱終了後冷却し、10mlのジエチルエーテルで3回抽出し、ニトロベンゼン還元物と余分なニトロベンゼンを除去する。残った水層側に濃塩酸を加えてpH1に調整し、さらに10mlのジエチルエーテルで3回抽出する。このジエチルエーテル抽出液を減圧下で留去し、酸化混合物を得る。この酸化混合物をジクロロメタン20mLでメスアップする。そのうち2mlをミリポアHVHP膜(日本ミリポア株式会社製、孔径0.45μm)でろ過し、ガスクロマトグラフィ(GC)に供する。
ガスクロマトグラフィは、AgilentJ&W GCカラム DB−5(アジレント・テクノロジー株式会社製)を装着したGC装置(アジレント・テクノロジー株式会社製)を用いる。ガスクロマトグラフィの条件は、試料量は1.0μL、ヘリウム流速は10ml/分、抽入口温度200℃、スプリット比10:1とする。温度条件は、60℃で1分間保持した後、60〜250℃まで5℃/分で昇温し、250℃で10分保持する。定量は、バニリン、シリンガアルデヒド、パラヒドロキシベンズアルデヒドの3つのアルデヒドを試薬として用い、含有量に対するピーク面積で検量線を作成し、リグニン分解物中の前記3つのアルデヒド収量をそれぞれ求める。次式でアルデヒド収率(%)を算出する。アルデヒド収率(%)=(3つのアルデヒド量を合算したアルデヒド収量/リグニン分解物質量)×100
下記工程1、2aにより、植物活力剤となるリグニン分解物1を製造した。
(工程1)
草本系バイオマスとして、サトウキビバガスを、乾燥質量として30gガラス瓶に入れ、固形分含有量が10質量%になるように、1.6質量%水酸化ナトリウム水溶液を加えた。ガラス瓶を、オートクレーブ(株式会社トミー精工、LSX−700)を用いて、95℃、6時間、常圧にて加熱し、反応物を得た。工程1でのHFは3.5であった。
工程1で得られた反応物を、400メッシュのSUSメッシュとヌッチェを用いて減圧濾過した。残渣を、90℃のイオン交換水300mLで洗浄した。ろ液と洗浄液を集め、1.0M 塩酸にてpH4にしてリグニン分解物を含む懸濁液を得た。
遠心分離は、日立工機株式会社製「himac CR 20G III」を用いて、10,000rpm、20分の条件で行った。
遠心分離後、上澄みを除き、イオン交換水300mLを加え、撹拌した後、再度、前記と同じ条件で遠心分離し、洗浄を行った。洗浄処理を2回行い、得られた沈殿物に対し1.0M水酸化ナトリウム水溶液を加え、pH7とした。続いて透析処理を行い中和塩を除去し、得られた水溶液を凍結乾燥し、粉体状のリグニン分解物1を得た。透析処理にはSpectrum Laboratories Inc.社製のSpectra/Por6標準RC湿潤処理済透析チューブ(MWCO;1kD)を用いた。
リグニン分解物1は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が24.6質量%、重量平均分子量が12,700であった。
また、リグニン分解物1中の有効分含有率は83質量%であった。該有効分は、クラーソン・リグニン法によって求めた。すなわち、TAPPI公式分析法T222om−83に従って、酸不溶性リグニン率と酸可溶性リグニン率の和で全体のリグニン含有率を算出した。
製造例1と同様に、ただし、工程2aを下記工程2bに変更し、植物活力剤となるリグニン分解物2を製造した。
(工程2b)
工程1で得られた反応物を、400メッシュのSUSメッシュとヌッチェを用いて減圧濾過した。残渣を、90℃のイオン交換水300mLで洗浄した。ろ液と洗浄液を集め、メタノール(和光純薬工業株式会社、特級)2.4Lを加えた。析出物を減圧濾過し(東洋濾紙株式会社製、ろ紙No.2)、ろ液からメタノールを減圧留去し、1.0M 塩酸にてpH4にしてリグニン分解物を含む懸濁液を得た。
遠心分離は、日立工機株式会社製「himac CR 20GIII」を用いて、10,000rpm、20分の条件で行った。
遠心分離後、上澄みを除き、イオン交換水300mLを加え、撹拌した後、再度、前記と同じ条件で遠心分離し、水洗を行った。水洗を2回行い、得られた沈殿物を凍結乾燥し、粉体状のリグニン分解物2を得た。
製造例2と同様に、ただし、工程1における、オートクレーブの条件を120℃、1時間、処理時の水酸化ナトリウム水溶液の濃度を5.0質量%として、植物活力剤となる粉体状のリグニン分解物3を製造した。工程1でのHFは12.8であった。また、製造例1と同様にリグニン分解物3中の有効分含有率を測定したところ、54質量%であった。
リグニン分解物3は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が12.9質量%、重量平均分子量が8,125であった。これらの物性値は、リグニン分解物1と同様に測定した。
製造例2と同様に、ただし、工程1における、オートクレーブの条件を135℃、7時間、処理時の水酸化ナトリウム水溶液の濃度を5.0質量%として、植物活力剤となる粉体状のリグニン分解物4を製造した。工程1でのHFは64.4であった。また、製造例1と同様にリグニン分解物4中の有効分含有率を測定したところ、53質量%であった。
リグニン分解物4は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が13.4質量%、重量平均分子量が4,559であった。これらの物性値は、リグニン分解物1と同様に測定した。
製造例2と同様に、ただし、工程1における、オートクレーブの条件を25℃、2時間として、植物活力剤となる粉体状のリグニン分解物5を製造した。工程1でのHFは0.0であった。また、製造例1と同様にリグニン分解物5中の有効分含有率を測定したところ、41.7質量%であった。
リグニン分解物5は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が26.0質量%、重量平均分子量が9,994であった。これらの物性値は、リグニン分解物1と同様に測定した。
製造例2で得たリグニン分解物2に対して、下記工程3の処理を行い、植物活力剤となる粉体状のリグニン分解物6を製造した。
(工程3)
ハロゲン水分計HG63(メトラー・トレド株式会社製)を用いて、無溶媒中、120℃、5分間の加熱処理を行った。加熱処理時間は120℃に到達してからの時間とし、昇温は機器内部温度が120℃に到達するまでの時間とし、降温は加熱処理終了後、素早く室温に晒し、成り行きで行った。
製造例1と同様にリグニン分解物6中の有効分含有率を測定したところ、66.9質量%であった。
リグニン分解物6は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が15.4質量%、重量平均分子量が18,289であった。これらの物性値は、リグニン分解物1と同様に測定した。
製造例6と同様に、ただし、工程3における、加熱処理の条件を140℃、5分間として、植物活力剤となる粉体状のリグニン分解物7を製造した。製造例1と同様にリグニン分解物7中の有効分含有率を測定したところ、69.8質量%であった。
リグニン分解物7は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が14.4質量%、重量平均分子量が25,663であった。これらの物性値は、リグニン分解物1と同様に測定した。
製造例2で得たリグニン分解物2に対して、下記工程4の処理を行い、植物活力剤となる粉体状のリグニン分解物8を製造した。
(工程4)
リグニン分解物2をイオン交換水に対して、0.2%の懸濁液として、No.2濾紙(ADVANTEC社製)を用いて、濾過を行い、濾液を得た。得られた濾液に対しペンシル型モジュール(AsahiKASEI社製、型式;SIP−0013(UF))を用いて分画処理を行った。
製造例1と同様にリグニン分解物8中の有効分含有率を測定したところ、78.7質量%であった。
リグニン分解物8は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が12.6質量%、重量平均分子量が14,491であった。これらの物性値は、リグニン分解物1と同様に測定した。
製造例2と同様に、ただし、工程1における、オートクレーブの条件を135℃、7時間として、粉体状のリグニン分解物9を製造した。工程1でのHFは64.4であった。また、製造例1と同様にリグニン分解物9中の有効分含有率を測定したところ、66質量%であった。
リグニン分解物9は、アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が9.0質量%、重量平均分子量が5,121であった。これらの物性値は、リグニン分解物1と同様に測定した。
本発明のリグニン分解物を植物活力剤として水耕栽培における培養液に添加して用いた場合の、大豆の生長促進効果を評価した。
大豆品種『フクユタカ』を用い、第2〜3本葉展開期まで予備栽培(人工土壌であるバーミキュライトに播種、栽培)を行い、生育が揃った苗を選抜して根を洗って土壌を除去した。続いて大豆の側根を全て切断除去し、1日間、苗の馴化のために水道水にて水耕栽培を実施した。馴化した各苗の初期生質量を測定し、初期生質量が軽い苗から順に並べ、各試験区の質量平均値が一定となる様に苗を分配した。生質量は、測定対象物の表面に付着した水気を除去して測定した質量である。
表1に示す含有量(残部は水)で植物活力剤であるリグニン分解物1を含有する培養液250mlを入れたプラスチック(高密度ポリエチレン)製ボトル容器(ニッコー・ハンセン社製のJボトル 丸型 広口 ナチュラル、容量250ml品)に、大豆の苗を子葉が容器の縁に引っかかる様に挿し、水耕栽培を開始した。
水耕栽培は、温度、湿度、光量が調整可能な温室内で行った。温度、湿度は、外環境を基準とし、気温が15〜30℃の範囲を外れた場合は、自動的に温度が調整されるようにした。また日照条件においても基本は外環境に準じるが、照度や日の入り時刻に関わらず、16時より20時までは補助照明が点灯する設定とした。
栽培開始から10日後、大豆苗を取り出し、地下部の乾燥質量を測定した。1種類の培養液当たり、ポット数(反復数)は7個とし、その平均値を求めた。各平均値を、対照の乾燥質量を100とする相対値で表1に示した。対照は、植物活力剤を添加せずに実施した。ここで、大豆についての地下部は、子葉節にて大豆苗を切断し、下部に相当する部分を地下部とした。また、乾燥質量は、測定対象物を80℃にて1日間乾燥させ、室温に戻した後、測定した質量である。
〔実施例2a及び比較例2a〕
本発明のリグニン分解物などを植物活力剤として葉面散布して用いた場合の、大豆の生長促進効果を評価した。
実施例1と同様に大豆の苗を用意した。
大豆の苗を、肥料溶液(商品名ハイポニカ、協和株式会社製、500倍希釈にて使用)250mlを入れたプラスチック(高密度ポリエチレン)製ボトル容器を用いて供した。
平面からみて長さ1.0m×幅0.5mの領域を試験領域(0.5m2)として、苗を入れたボトル容器を6個ずつ配置した。
配置後、直ちに、1回目の散布として、試験領域あたり、表2の組成の処理液(残部は水)25mlを均一に苗の上方から散布した。散布後、水耕栽培を行った。次いで、1週間後に、2回目の散布を、1回目の散布と同様に行った。なお、試験領域0.5m2に対し25mlの散布は50L/10aの散布に相当する。また、本例での合計散布量は、100L/10aであった。
2回目の散布処理の後、1週間栽培を継続し、試験終了(1回目の散布より2週間で終了)とした。
使用した容器及び水耕栽培は、実施例1と同様の条件で行った。
栽培の終了後、実施例1と同様に大豆苗の地下部の乾燥質量を測定した。結果を、対照の乾燥質量を100とする相対値で表2aに示した。なお、本例では、1種類の処理液当たり、ポット数(反復数)は6個とし、その平均値を求めた。
・リグニンスルホン酸Na塩:試薬、Sigma Aldrich社製
・黒液リグニン:アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が9.9質量%、重量平均分子量が5,300
・非イオン界面活性剤1:モノオレイン酸ポリオキシソルビタン(エチレンオキシド平均付加モル数20)、レオドールTW−O120、花王株式会社製
・HPMC1:ヒドキシプロピルメチルセルロース、METOLOSE 60SH10000、信越化学工業株式会社製、水溶性ポリマー
本発明のリグニン分解物などを植物活力剤として葉面散布した場合の、大豆の側根発根数増加効果を評価した。
実施例2と同様に大豆の苗、肥料溶液、および容器を用意し水耕栽培を開始した。配置後、直ちに、表2bに示す組成の処理液(残部は水)を、実施例2a及び比較例2aの散布と同様の処理量、処理方法にて散布した。ただし、散布処理は1回とし、散布処理の後、5日間栽培を継続し、試験終了とした。
栽培の終了時、大豆主根から新規に発生した側根発根数を測定した。結果を、対照の発根数を100とする相対値で表2bに示した。なお、本例では、1種類の処理液当たり、ポット数(反復数)は5個とし、その平均値を求めた。
本発明のリグニン分解物などを植物活力剤として葉面散布した場合の、大豆の分枝発現数増加効果を評価した。
実施例1と同様に大豆の苗を用意した。
大豆の苗を、栽培土壌(商品名タキイ育苗培土、タキイ種苗株式会社製)で満たした育苗用ポリエチレン製ポット(直径9cm)に定植し栽培を続けた。その後、分枝発現開始時期(第4〜6本葉展開期)に、1試験区として、縦横1.0mの平面(試験領域(1.0m2)当たりに苗(栽培中のポリエチレン製ポット5個)を均等に配置した。配置後、直ちに、表2cに示す組成の処理液(残部は水)を、実施例2a及び比較例2aと同様の処理方法にて、ただし処理量は100mlとして、苗の10〜15cm上方より均一に散布した。次いで、1週間後に、2回目の散布を、1回目の散布と同様に行った。なお、試験領域1.0m2に対し100mlの散布は100L/10aの散布に相当する。また、本例での合計散布量は、200L/10aであった。
2回目の散布処理の後、1週間栽培を継続し、試験終了とした。栽培の終了時、大豆苗から発現している分枝の総数を測定した。結果を、対照の分岐発現数を100とする相対値で表2cに示した。なお、本例では、1種類の処理液当たり、ポット数(反復数)は5個とし、その平均値を求めた。
本発明のリグニン分解物などを植物活力剤として葉面散布した場合の、大豆の着花数増加効果を評価した。
実施例1と同様に大豆の苗を用意した。大豆の苗を、栽培土壌(商品名タキイ育苗培土、タキイ種苗株式会社製)で満たした育苗用ポリエチレン製ポットに定植した。その後ポットでの栽培を続け、更に、ポット定植後1ヶ月経過を目途に1/5,000aワグネルポット、NF−5型(アズワン株式会社製)に鉢替えを行った。
その後、葉の状態は第6〜9本葉展開期で開花初期時期に相当し、1試験区として、縦横1.0mの平面(試験領域(1.0m2)当たりに苗(栽培中のワグネルポット4〜5個)を均等に配置した。配置後、直ちに、表2dに示す組成の処理液(残部は水)を、実施例2a及び比較例2aと同様の処理方法にて、ただし処理量は100mlとして、苗の10〜15cm上方より均一に散布した。次いで、1週間後に、2回目の散布を、1回目の散布と同様に行った。
2回目の散布処理の後、栽培を継続し、着花数を葉齢位ごとに測定した。1回目処理時の葉齢位における着花数の測定結果を、対照の着花数を100とする相対値で表2dに示した。なお、測定時期は、着莢開始時期(散布後2〜6週間経過後)である。なお、本例では、1種類の処理液当たり、ポット数(反復数)は4〜5個とし、その平均値を求めた。
本発明のリグニン分解物を植物活力剤として水耕栽培における培養液に添加して用いた場合の、トマトの生長促進効果を評価した。
トマト品種『桃太郎』を用い、第2〜3本葉展開期まで予備栽培(人工土壌であるバーミキュライトに播種、栽培)を行い、生育が揃った苗を選抜して根を洗って土壌を除去した。続いてトマトの側根を全て切断除去し、1日間、苗の馴化のために水道水にて水耕栽培を実施した。馴化した各苗の初期生質量を測定、初期生質量が軽い苗から順に並べ、各試験区の質量平均値が一定となる様に苗を分配した。
表3に示す含有量(残部は水)で植物活力剤であるリグニン分解物1を含有する培養液250mlを入れたプラスチック(高密度ポリエチレン)製ボトル容器にトマトの苗を挿し、水耕栽培を開始した。使用した容器及び水耕栽培は実施例1と同様の条件で行った。
栽培開始から7日後、トマト苗を取り出し、地下部の乾燥質量を測定した。1種類の培養液当たり、ポット数(反復数)は7個とし、その平均値を求めた。各平均値を、対照の乾燥質量を100とする相対値で表3に示した。対照は、植物活力剤を添加せずに実施した。ここで、トマトについての地下部は、トマトの側根を全て切断し集めたものを地下部とした。また、乾燥質量は、測定対象物を80℃にて1日間乾燥させ、室温に戻した後、測定した質量である。
本発明のリグニン分解物を植物活力剤として葉面散布して用いた場合の、トマトの生長促進効果を評価した。
実施例3と同様にトマトの苗を用意した。
トマトの苗を、肥料溶液(商品名ハイポニカ、協和株式会社製、500倍希釈にて使用)250mlを入れたプラスチック(高密度ポリエチレン)製ボトル容器に供した。
表4の組成の処理液(残部は水)25mlを、実施例2と同様の条件で葉面散布した。使用した容器及び水耕栽培は実施例1と同様の条件にて行った。
栽培の終了後、実施例3と同様にトマト苗の地下部の乾燥質量を測定した。結果を、対照の乾燥質量を100とする相対値で表4に示した。なお、本例では、1種類の処理液当たり、ポット数(反復数)は6個とし、その平均値を求めた。
Claims (14)
- アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であり、重量平均分子量が1,000以上100,000以下であるリグニン分解物を有効成分とする植物活力剤。
- アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であり、重量平均分子量が1,000以上100,000以下であるリグニン分解物を含有する植物活力剤組成物。
- 界面活性剤を含有する、請求項2に記載の植物活力剤組成物。
- 界面活性剤が、非イオン界面活性剤である、請求項3に記載の植物活力剤組成物。
- 前記リグニン分解物100質量部に対し、界面活性剤を1質量部以上1,900重量部以下含有する、請求項3又は4に記載の植物活力剤組成物。
- 水溶性ポリマーを含有する、請求項2〜5の何れか1項に記載の植物活力剤組成物。
- 水溶性ポリマーが、多糖類系水溶性ポリマーである、請求項6に記載の植物活力剤組成物。
- 前記リグニン分解物100質量部に対し、水溶性ポリマーを1質量部以上1,900重量部以下含有する、請求項6又は7に記載の植物活力剤組成物。
- アルカリニトロベンゼン酸化によるアルデヒド収率が10質量%以上であり、重量平均分子量が1,000以上100,000以下であるリグニン分解物を植物に接触させる、植物の育成方法。
- 前記リグニン分解物と水とを含有する処理液を植物に接触させる、請求項9に記載の植物の育成方法。
- 前記処理液が、請求項1記載の植物活力剤又は請求項2〜8の何れか1項に記載の植物活力剤組成物と水とを混合して得られた処理液である、請求項10に記載の植物の育成方法。
- 前記処理液中の前記リグニン分解物の含有量が1ppm以上5,000ppm以下である、請求項10又は11に記載の植物の育成方法。
- 前記処理液を、養液栽培の培養液として用いて、前記リグニン分解物を植物に接触させる、請求項10〜12の何れか1項に記載の植物の育成方法。
- 前記処理液を、葉面散布して前記リグニン分解物を植物に接触させる、請求項10〜12の何れか1項に記載の植物の育成方法。
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