JP6283665B2 - Ｇｄ２陽性癌を治療するための方法 - Google Patents

Description

本発明は、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を一日あたり２４時間の連続静脈内輸注として患者へ投与することにより、ＧＤ２陽性の癌を治療する方法に関する。

神経芽細胞腫は、脳がんの後、５歳未満の小児で最も頻度の高い固形癌である。危険度の高い神経芽細胞腫では、標準的な治療を受けている患者の半数以上は、再発があり、最終的にこの疾患で死亡する。９０％が０〜６歳の間に発症する。先進国での世界的な発生率は年間約２０００例である。

腫瘍学における特定の抗原に対するモノクローナル抗体の使用は増えてきている。トラスツズマブ、セツキシマブ、ベバシズマブ、リツキシマブなどで示されるように、細胞毒性の治療法と比べて作用様式の全く異なることにより有用である。ジシアロガングリオシドＧＤ２は、主に細胞表面上に発現するスフィンゴ糖脂質である。正常組織におけるＧＤ２の発現はまれで、主に中枢神経系（ＣＮＳ）、末梢神経およびメラノ部位に限定される。癌細胞では、ＧＤ２は神経芽細胞腫およびほとんどのメラノーマにおいては均一に、そして骨および軟組織肉腫、小細胞肺癌、腎細胞癌、および脳腫瘍では様々な程度で表現する（Navid et al., Curr Cancer Drug Targets 2010）。ＧＤ２は、細胞表面上のその存在と組み合わせて比較的腫瘍選択的に発現するため、抗体ベースの癌免疫療法のための標的としては有望である。

したがって、いくつかの抗ＧＤ２抗体は、神経芽細胞腫、メラノーマおよび他のＧＤ２関連癌における前臨床および臨床試験の対象となる。

ＡＰＮ３１１は、市販の抗体を製造するための標準的な哺乳動物細胞系であるチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞中で組換え的に産生されるキメラモノクローナル抗ＧＤ２抗体ｃｈ１４．１８の調製物である。再発／難治性神経芽細胞腫患者の寛解の第Ｉ相臨床試験では、この抗体を単剤として用いて行われた。ＡＰＮ３１１での治療を含む第ＩＩＩ相試験は、小児腫瘍学欧州神経芽腫学会（ＳＩＯＰＥＮ）により２００６年に開始され、現在、イソトレチノイン（シス−レチノイン酸（シスＲＡ））併用のＡＰＮ３１１での治療（皮下ＩＬ−２ありまたはなし）に関連するイベントフリーおよび全生存率に対する効果を調べている。４つの薬物（即ち、ＳＰ２／０マウスハイブリドーマ細胞中で産生される関連する抗体と、静脈インターロイキン−２（ＩＬ−２）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）およびイソトレチノイン）の治療パッケージを用いた対応する米国試験では、神経芽細胞腫の小児において興味深い生存率の改善が初期治療後に完全寛解の形でみられ、疾患の兆候は認められなかった。

ＡＰＮ３０１は、融合タンパク質として、ヒト化抗ＧＤ２抗体（ｈｕ１４．１８）およびＩＬ−２を含む免疫サイトカインの調製物である。抗体部分は、神経芽細胞腫やいくつかの他の癌で強く発現されるＧＤ２抗原に特異的に結合する。ＩＬ−２は、複数の免疫エフェクター細胞タイプを補充するサイトカインである。神経芽細胞腫の患者では、ＡＰＮ３０１を、抗体成分を介して、ＧＤ２陽性腫瘍細胞に局在化するように設計される。融合したＩＬ−２は、ＮＫおよびＴ細胞両方の活性化によって腫瘍に対する患者の免疫系を刺激し、一方、抗体のＦｃ部分は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）と補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）による腫瘍細胞死滅を誘発するように設計される。免疫サイトカインは、再発／難治性神経芽細胞腫の小児における第ＩＩ相臨床試験（Shustermanら、JCO 2010）において活性を示し、また、後期の悪性メラノーマにおける第Ｉ／ＩＩ相試験でも試験され免疫活性を示した。

研究または開発中の他の抗ＧＤ２抗体には、例えば、モノクローナル抗体３Ｆ８（第ＩＩ相マウス、および第Ｉ相ヒト化抗体）、及び８Ｂ６（Ｏ−アセチル化ＧＤ２に特異的、前臨床）がある。さらに、抗イディオタイプ抗体（例えば４Ｂ５、１Ａ７、およびＡ１Ｇ４など）が潜在的な腫瘍ワクチンとして検討されていたが、その開発は中止されているようである。ＷＯ２００８／０４９６４３には、ＧＤ２エピトープを模擬する（すなわちＧＤ２ミモトープ）抗イディオタイプ抗体が記載されている。

１４．１８抗ＧＤ２抗体の別のバージョンはｈｕ１４．１８Ｋ３２２Ａ（ＷＯ２００５／０７０９６７に記載）であり、これは、例えば、ＡＤＣＣ増強に適切な細胞株（例えば、ＹＢ２／０）での発現によって、ＣＤＣが減少するがＡＤＣＣは維持されるようなＦｃ領域中の点突然変異を有している。ＣＤＣの減少は、抗体治療に伴う疼痛の減少をもたらすと考えられている。

抗体の抗腫瘍活性は、一般に、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣまたは補体結合）または抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）のいずれかを介して起こる。これらの２つの活性は、「エフェクター機能」として当該分野で公知であり、特にＩｇＧクラスの抗体によって媒介される。ＩｇＧ４以外のＩｇＧサブクラスは（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３）はいずれも、ＡＤＣＣとある程度の補体結合を媒介し、ＩｇＧ１およびＩｇＧ３は両方の活性についてもっとも強い。ＡＤＣＣは、ナチュラルキラー上のＦｃ受容体（ＮＫ）細胞および／または免疫細胞（エフェクター細胞）を有する他のＦｃ受容体が細胞表面上の抗原に結合した抗体のＦｃ領域に結合した場合に起きると考えられている。Ｆｃ受容体結合がエフェクター細胞にシグナルを伝達し、標的細胞を死滅させる。ＣＤＣは複数のメカニズムによって起こると考えられており、その１つは抗体が細胞表面上の抗原に結合すると開始される。抗原−抗体複合体が形成されると、Ｃ１ｑ分子は、抗原−抗体複合体に結合すると考えられている。次いで、Ｃ１ｑは自分自身を切断して他の補体タンパク質の酵素的活性化および切断のカスケードを開始し、それらは標的細胞表面に結合し、例えば、細胞溶解および／またはマクロファージによる摂取を介して細胞死を促進する。

しかし、ＣＤＣは、特に抗ＧＤ２抗体について、痛みの副作用を引き起こすと考えられている。ＷＯ２００５／０７０９６７に記載されるように、このプロセスは、制御されないイオン流束を可能にする細胞膜内のチャネルの作成が含まれているため、ニューロンは、補体結合に特に敏感である。痛みを感じるニューロンでは、補体結合がたとえ少ない量であっても、作用を生じるには十分であり得る。即ち、神経細胞に結合する抗ＧＤ２抗体から生じるＣＤＣは、いかなる量であっても痛みを引き起こす。

したがって、従来技術は、補体結合を副作用のレベルを低減するよう減らすことが有利であること、そしてＧＤ２抗体の抗腫瘍活性が、実質的に補体結合からではなく、主にＡＤＣＣから生じるものであることを教示している（例えば、ＷＯ２００５／０７０９６７参照）。

対照的に、本発明の重要な態様は、ＣＤＣアッセイまたは全血液検査（ＷＢＴ）によって測定される抗ＧＤ２抗体の細胞溶解能力が、抗ＧＤ２抗体の抗腫瘍効果に不可欠であるということである。ＣＤＣまたはＡＤＣＣアッセイとは対照的に、そのようなＷＢＴアッセイは、ヘパリン化全血試料の溶解能を測定する。このように、単独のエフェクターメカニズムに焦点を当てるだけでなく、ＡＤＣＣ及びＣＤＣの組み合わせ（さらに、腫瘍細胞に対する溶解能力に関連するヘパリン化全血試料中に存在する任意の他の構成要素および／またはメカニズム）を生理学的に測定する。したがって、本発明の方法により、抗体の投与量を、ＣＤＣアッセイまたはＷＢＴによって決定される標的細胞の溶解のために必要最小限の用量に低減することができる。さらに、本発明の方法は、考慮患者の抗腫瘍応答の個人差を考慮し、個別に有効な抗体の量を決定することが可能である。本発明のもう１つの重要な側面は、ＣＤＣ及び／又は全血細胞溶解活性を誘発するために投与する抗ＧＤ２抗体の閾値用量を決定することによって、痛みの副作用を軽減し、管理することが可能であるということである。本発明のもう１つの重要な知見は、患者の既定の総用量が投与されるまで、抗ＧＤ２抗体を連続輸注として投与することによって、疼痛の副作用を実質的に減少させることができるということである。したがって、本発明の方法によって、抗体治療中、鎮痛投与、特にモルヒネなどの強力な鎮痛薬の投与、を実質的に低減することが可能であり、したがって、そのような鎮痛薬の投与の副作用を実質的に低減する。

一態様において、本発明は、一日あたり２４時間の連続静脈内輸注として抗ＧＤ２抗体を含む調製物を患者へ投与することにより、ＧＤ２陽性の癌を治療するための方法に関する。抗ＧＤ２抗体を含む調製物はミニポンプを用いて投与することができ、患者の既定の総用量が投与されるまでの処置期間にわたって投与することができる。

別の態様において、本発明は、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を患者へ投与することにより、ＧＤ２陽性の癌を治療するための方法であって、該調製物が、腫瘍細胞溶解を誘導するのに十分な用量（細胞溶解の閾値用量）で投与され、該細胞溶解の閾値用量が、患者の既定の総用量が投与されるまでの処置期間にわたって投与される方法に関する。

関連する態様において、本発明は、前記治療において使用するための抗ＧＤ２抗体を提供する。さらなる関連する態様において、本発明は、前記治療のための医薬の製造における抗ＧＤ２抗体の使用を提供する。本発明はさらに、特許請求の範囲によって定義される。本明細書にさらに記載された本発明の好ましい実施形態はいずれも、同様に本発明の全ての態様に関連している。

意外にも、細胞溶解能力（例えばＣＤＣアッセイによりまたはＷＢＴによって測定された）によって決定された用量での抗ＧＤ２抗体を含む調製物による治療は、癌の治療において、特に、痛みなどの副作用に対して、有益な効果を有することが分かった。
抗ＧＤ２抗体を含む調製物を、ＣＤＣ及び／又は全血細胞溶解を誘導するのに十分であるが、可能な限り低い用量で投与され、そして、患者の総用量が投与されるまで処置期間にわたってその細胞溶解の閾値用量にて投与される場合、痛みを実質的に低減することができ、したがってモルヒネまたは他の鎮痛訳の投与を実質的に減らす、さらには止めることができる。

図１は、ＡＰＮ３１１の存在下で２人の健康なドナーのＷＢＴ（^５１Ｃｒ標識標的ヒト神経芽腫細胞を用いたヘパリン化全血）およびＣＤＣアッセイ（^５１Ｃｒ標識標的ヒト神経芽腫細胞を用いたヘパリン血漿）の結果を示す。図から分かるように、２人のドナーの間でＷＢＴ溶解に実質的な差がある：２ｎｇ／ｍＬ（全血）対１０ｎｇ／ｍＬ（全血）のＡＰＮ３１１濃度で５０％の溶解に到達する。しかし、ＣＤＣには差がなく、いずれのドナーも１０００ｎｇ／ｍｌ（血漿）のＡＰＮ３１１濃度で５０％の溶解に到達する。どちらのアッセイ（ＷＢＴ及びＣＤＣアッセイ）も、同じインキュベーション時間（２０時間）と補体の最終濃度を用いた。 図２は、ＡＰＮ３１１またはＡＰＮ３０１の存在下で１人の健康なドナーのＷＢＴ（^５１Ｃｒ標識標的ヒト神経芽腫細胞を用いたヘパリン化全血）およびＣＤＣアッセイ（^５１Ｃｒ標識標的ヒト神経芽腫細胞を用いたヘパリン血漿）の結果を示す。２つの調製物間でＷＢＴ溶解に実質的な違いがある：ＡＰＮ３１１は２１ｎｇ／ｍＬ（全血）の濃度、ＡＰＮ３０１は２３４ｎｇ／ｍＬ（全血）の濃度で５０％の溶解に達する。しかし、ＣＤＣの差は実質的により少なく：ＡＰＮ３１１は４７０ｎｇ／ｍＬ（血漿）の濃度でＡＰＮ３０１は６１９ｎｇ／ｍＬ（血漿）の濃度で５０％の溶解に達する。 図３は、５ｇ／ｍＬのＡＰＮ３１１を添加した健康なドナーの全血または血漿を、ＡＰＮ３１１で治療された患者の全血または血漿と比較した、ＷＢＴとＣＤＣアッセイの結果を示す。患者の試料は、この場合、処置サイクルの第１７日（即ち、ＡＰＮ３１１による処置期間（この場合の処置期間は第８日〜第１８日）の終了時）に採取した。 図４は、図３に示したのと同様のＷＢＴを、標的細胞の溶解を阻害する特異的な抗イディオタイプ（抗ＩＤ）抗体を５倍過剰で添加した同じサンプルと比較した結果を示す。 図５は、図３に示したのと同様のＣＤＣアッセイを、標的細胞の溶解を阻害する特異的な抗イディオタイプ（抗ＩＤ）抗体を５倍過剰で添加した同じサンプルと比較した結果を示す。 図６は、患者の血清中のＡＰＮ３１１の薬物動態を示す。平均血清レベルの上の数字は、サンプル収集のこの日における当該平均に含まれる患者の数を示す。ＡＰＮ３１１による処置期間は、第８日〜第１８日とし、ＩＬ−２による２つの処置期間は、処置サイクルの第１日〜第５日と第１２日〜第１８日とした。 図７は、ＡＰＮ３１１で処置した３７人の患者の処置サイクルの第１日、第８日および第１５日での、カルセイン放出ＣＤＣアッセイによって測定される、ＣＤＣアッセイの結果を示す。ＡＰＮ３１１による処置期間は、ＩＬ−２による２つの処置期間を、第１日〜第５日と第８日〜第１２日とした。 他の治療と組み合わせた抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療のための治療スケジュール例の概略を示す。 他の治療と組み合わせた抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療のための治療スケジュール例の概略を示す。 図１０は、３７人の患者の規定の標準輸注速度（３０ｍｃｇ／ｋｇ／ｈ）のＡＰＮ３１１連続輸注中に使用したモルヒネ量（平均値）を％で示したものである。抗体輸注は常に第８日に開始した。 図１１は、それぞれ処置サイクルのステージが異なる患者の血液サンプルで得た細胞溶解結果を示す。データは、適用した治療スケジュールを標準化した形式で示す。即ち、ＡＰＮ３１１（用量１００ｍｇ／ｍ^２／サイクル、ミニポンプによる連続輸注を１０日間、静脈内）；アルデスロイキン（ＩＬ２）（用量６０×１０^６ＩＵ／ｍ^２／サイクル、１サイクルにつき１０日間、５日間を２回、６×１０^６ＩＵ／ｍ^２／日（皮下）；および１３−シスレチノイド酸（イソトレチノイン）（用量２２４０ｍｇ／ｍ^２／日／サイクル、１４日間投与（１日１回、１６０ｍｇ／ｍ^２／日、経口）。全体的な処置期間は、３５日間の１サイクルを５サイクル行い、３６日目は、第２の処置サイクルの初日である。ＡＰＮ３１１による処置期間の初め（すなわち、初日）に採取した血液試料は、ＡＰＮ３１１治療を開始する前に採取した（処置サイクルの８日目に相当）（表８も参照）。 図１２は、それぞれ処置サイクルのステージが異なる患者の血液サンプルで得た細胞溶解結果を示す。データは、適用した治療スケジュールを標準化した形式で示す。即ち、ＡＰＮ３１１（用量１００ｍｇ／ｍ^２／サイクル、ミニポンプによる連続輸注を１０日間、静脈内）；アルデスロイキン（ＩＬ２）（用量６０×１０^６ＩＵ／ｍ^２／サイクル、１サイクルにつき１０日間、５日間を２回、６×１０^６ＩＵ／ｍ^２／日（皮下）；および１３−シスレチノイド酸（イソトレチノイン）（用量２２４０ｍｇ／ｍ^２／日／サイクル、１４日間投与（１日１回、１６０ｍｇ／ｍ^２／日、経口）。全体的な処置期間は、３５日間の１サイクルを５サイクル行い、３６日目は、第２の処置サイクルの初日である。ＡＰＮ３１１による処置期間の初め（すなわち、初日）に採取した血液試料は、ＡＰＮ３１１治療を開始する前に採取した（処置サイクルの８日目に相当）（表８も参照）。 図１３は、それぞれ処置サイクルのステージが異なる患者の血液サンプルで得た細胞溶解結果を示す。データは、適用した治療スケジュールを標準化した形式で示す。即ち、ＡＰＮ３１１（用量１００ｍｇ／ｍ^２／サイクル、ミニポンプによる連続輸注を１０日間、静脈内）；アルデスロイキン（ＩＬ２）（用量６０×１０^６ＩＵ／ｍ^２／サイクル、１サイクルにつき１０日間、５日間を２回、６×１０^６ＩＵ／ｍ^２／日（皮下）；および１３−シスレチノイド酸（イソトレチノイン）（用量２２４０ｍｇ／ｍ^２／日／サイクル、１４日間投与（１日１回、１６０ｍｇ／ｍ^２／日、経口）。全体的な処置期間は、３５日間の１サイクルを５サイクル行い、３６日目は、第２の処置サイクルの初日である。ＡＰＮ３１１による処置期間の初め（すなわち、初日）に採取した血液試料は、ＡＰＮ３１１治療を開始する前に採取した（処置サイクルの８日目に相当）（表８も参照）。 図１４は、それぞれ処置サイクルのステージが異なる患者の血液サンプルで得た細胞溶解結果を示す。データは、適用した治療スケジュールを標準化した形式で示す。即ち、ＡＰＮ３１１（用量１００ｍｇ／ｍ^２／サイクル、ミニポンプによる連続輸注を１０日間、静脈内）；アルデスロイキン（ＩＬ２）（用量６０×１０^６ＩＵ／ｍ^２／サイクル、１サイクルにつき１０日間、５日間を２回、６×１０^６ＩＵ／ｍ^２／日（皮下）；および１３−シスレチノイド酸（イソトレチノイン）（用量２２４０ｍｇ／ｍ^２／日／サイクル、１４日間投与（１日１回、１６０ｍｇ／ｍ^２／日、経口）。全体的な処置期間は、３５日間の１サイクルを５サイクル行い、３６日目は、第２の処置サイクルの初日である。ＡＰＮ３１１による処置期間の初め（すなわち、初日）に採取した血液試料は、ＡＰＮ３１１治療を開始する前に採取した（処置サイクルの８日目に相当）（表８も参照）。 図１５は、それぞれ処置サイクルのステージが異なる患者の血液サンプルで得た細胞溶解結果を示す。データは、適用した治療スケジュールを標準化した形式で示す。即ち、ＡＰＮ３１１（用量１００ｍｇ／ｍ^２／サイクル、ミニポンプによる連続輸注を１０日間、静脈内）；アルデスロイキン（ＩＬ２）（用量６０×１０^６ＩＵ／ｍ^２／サイクル、１サイクルにつき１０日間、５日間を２回、６×１０^６ＩＵ／ｍ^２／日（皮下）；および１３−シスレチノイド酸（イソトレチノイン）（用量２２４０ｍｇ／ｍ^２／日／サイクル、１４日間投与（１日１回、１６０ｍｇ／ｍ^２／日、経口）。全体的な処置期間は、３５日間の１サイクルを５サイクル行い、３６日目は、第２の処置サイクルの初日である。ＡＰＮ３１１による処置期間の初め（すなわち、初日）に採取した血液試料は、ＡＰＮ３１１治療を開始する前に採取した（処置サイクルの８日目に相当）（表８も参照）。 図１６は、それぞれ処置サイクルのステージが異なる患者の血液サンプルで得た細胞溶解結果を示す。データは、適用した治療スケジュールを標準化した形式で示す。即ち、ＡＰＮ３１１（用量１００ｍｇ／ｍ^２／サイクル、ミニポンプによる連続輸注を１０日間、静脈内）；アルデスロイキン（ＩＬ２）（用量６０×１０^６ＩＵ／ｍ^２／サイクル、１サイクルにつき１０日間、５日間を２回、６×１０^６ＩＵ／ｍ^２／日（皮下）；および１３−シスレチノイド酸（イソトレチノイン）（用量２２４０ｍｇ／ｍ^２／日／サイクル、１４日間投与（１日１回、１６０ｍｇ／ｍ^２／日、経口）。全体的な処置期間は、３５日間の１サイクルを５サイクル行い、３６日目は、第２の処置サイクルの初日である。ＡＰＮ３１１による処置期間の初め（すなわち、初日）に採取した血液試料は、ＡＰＮ３１１治療を開始する前に採取した（処置サイクルの８日目に相当）（表８も参照）。 図１７は、異なる２つのスケジュールにおける抗体輸注の間に投与したモルヒネの初期輸注速度（ＳＩＯＰＥＮ第Ｉ相試験用：８時間の抗体輸注をその後５日間；持続輸注パイロットスケジュールとして２４時間抗体輸注をその後１０日間）、並びに必要とされた追加のモルヒネ投与（ボーラスとして）およびモルヒネ輸注速度またはモルヒネの投与量の増加を示す。

一態様において、本発明は、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を一日あたり２４時間の連続静脈内輸注として患者へ投与することにより、ＧＤ２陽性の癌を治療する方法に関する。抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、患者の既定の総用量が投与されるまでの処置期間にわたって投与することができる。

別の態様において、本発明は、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を患者へ投与することにより、ＧＤ２陽性の癌を治療するための方法であって、該調製物が、腫瘍細胞溶解を誘導するのに十分な用量（細胞溶解の閾値用量）で投与され、該細胞溶解の閾値用量が、患者の既定の総用量が投与されるまでの処置期間にわたって投与される方法に関する。

いくつかの実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、腫瘍細胞溶解を誘発するのに十分な用量（細胞溶解の閾値用量）で患者に投与され、調製物は、一日あたり２４時間の連続静脈内輸注として投与される。他の実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、腫瘍細胞溶解を誘発するのに十分な用量（細胞溶解の閾値用量）で患者に投与され、調製物は、一日あたり２４時間の連続静脈内輸注として投与され、該細胞溶解の閾値用量が、患者の既定の総用量が投与されるまでの処置期間にわたって投与される。

ある特定の実施形態では、細胞溶解閾値用量は、抗ＧＤ２抗体を含む調製物の治療的有効量である。この治療有効量は、患者の血清または血漿またはヘパリン化全血を用いてＣＤＣアッセイまたはＷＢＴによって決定することができる。いくつかの実施形態では、細胞溶解閾値用量は、例えばＣＤＣアッセイまたはＷＢＴで細胞溶解をある一定レベルで誘導すると判断される、最小の細胞溶解閾値用量である。一実施形態では、細胞溶解の閾値用量は、ＣＤＣアッセイまたはＷＢＴのそれぞれのアッセイで最大限可能な標的細胞溶解の３０％を誘導すると決定された用量である。特定の実施形態では、細胞溶解閾値用量は、
それぞれのアッセイ（具体的なＣＤＣアッセイまたはＷＢＴ）で最大限可能な標的細胞溶解の３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％またはこれらのレベルの間の任意の範囲を達成する用量である。例えば、実施例２および３で実施したように、また図１、２及び７に示すように、ＣＤＣまたは全血の溶解曲線を決定するために、抗ＧＤ２抗体を含む調製物のいくつかの濃度を、ドナーの血液または血漿中に加えるか、または抗ＧＤ２抗体を含む調製物で処置された患者の血液または血漿中に既に存在する。抗ＧＤ２抗体の測定された濃度間の曲線を描くことによって、ある特定の閾値細胞溶解（例えば、最大限可能な標的細胞溶解の５０％）を達成する抗ＧＤ２抗体の用量または濃度を決定することができる。図１の例では、５０％の細胞溶解（例えば最大限可能な標的細胞溶解の５０％）の閾値は、ＷＢＴでは各ドナーの２〜１０ｎｇ／ｍＬ（全血）の濃度、ＣＤＣアッセイでは１０００ｎｇ／ｍＬ（血清または血漿）で達成される。この例では、閾値細胞溶解は５０％である。

本明細書で使用される用語「閾値細胞溶解」および／または「細胞溶解のレベル」は、ＣＤＣアッセイまたはＷＢＴにおける、血清、血漿又は全血中の細胞溶解の閾値用量を決定するために特定される、具体的なＣＤＣアッセイまたはＷＢＴにおける標的細胞の溶解のレベルを意味する。

いくつかの実施形態では、閾値細胞溶解は、全処置期間において、患者が抗ＧＤ２抗体を含む調製物で処理されていない１またはそれ以上の時点（即ち、その患者が全処置期間にわたって抗ＧＤ２抗体を含む調製物で継続的に治療されるわけではない場合があるとすれば、抗ＧＤ２抗体を含む調製物で治療される期間の間のインターバル）でさえ維持される。ある特定の実施形態では、細胞溶解のレベルはその処置サイクルの全体にわたって維持される。幾つかの実施形態では、細胞溶解のレベルはその処置期間の全体にわたって維持される。

図１１、図１３、および図１５に示されるように、３０％〜５０％の増大した細胞溶解のレベルが、患者が抗ＧＤ２抗体を含む調製物で処理されていないインターバル期間中にも維持されている。

一実施形態では、細胞溶解の閾値用量は患者ごとに個別に決定される。

本明細書で使用される「患者の既定の総用量」なる用語は、以下でさらに特定されるように、処置サイクルあたりの患者の総用量を意味するものとする。

本明細書で用いられる「患者」という用語は、癌、特にＧＤ２陽性癌、に罹患している動物またはヒトの対象を意味する。

範囲が記載されている場合、そのような範囲は、与えられた範囲（すなわち範囲の下限および上限）内の任意の範囲を含むものとする。例えば、範囲を１〜５日とした場合、１、２、３、４、５日が含まれるものとする。このことは、他の任意の範囲（時間単位、例えば輸注時間）、任意の用量範囲（例えば、体表面積１ｍ^２あたり、体重１ｋｇあたり、１日あたり、処置サイクルあたり）、輸注速度、濃度、パーセント、倍数、比、および数などが挙げられるがこれらに限定されない任意の他の範囲についても同様である。

細胞溶解の閾値用量は、補体依存性細胞溶解（ＣＤＣ）アッセイまたは全血液検査（ＷＢＴ）によって決定することができる。ＷＢＴは、標的細胞または標的成分（すなわち、細胞、リポソームまたは溶解される他の細胞様コンパートメント）を患者由来の適切に抗凝固処理した全血と接触させるアッセイである。ＣＤＣアッセイは、例えば、当技術分野で知られているような標準的なＣＤＣアッセイ（例えば、Indusogie et al., J Immunol 2000, Zeng et al., Molecular Immunology 2005、またはＷＯ２００５／０７０９６７に記載のような）でありうる。ＣＤＣアッセイおよび／またはＷＢＴは、治療すべきＧＤ２陽性癌の腫瘍細胞株等のＧＤ２陽性標的細胞を用いて行うことができる。例えば、治療されるべき患者が神経芽腫に罹患している場合は、細胞株は、例えばＬＡＮ−１ヒト神経芽細胞腫細胞などの神経芽細胞腫細胞株であってもよい。別の例では、治療されるべき患者がメラノーマに罹患している場合、細胞株は、例えばＭ２１ヒトメラノーマ細胞などのメラノーマ細胞株であってもよい。さらに別の実施形態では、ＣＤＣアッセイおよび／またはＷＢＴの標的細胞は、患者から得られた腫瘍細胞、すなわちその患者の自己腫瘍細胞である。別の実施形態では、ＣＤＣアッセイおよび／またはＷＢＴの標的成分は、表面にＧＤ２を提示しているリポソームである。標的細胞または標的成分は、シグナル成分（例えば^5１Ｃｒ等の放射性成分またはカルセインなどの蛍光成分）で標識される。シグナリング成分は、標的細胞または標的成分によって構成される、即ち、標的細胞または標的成分の内部に存在し（例えば、シグナル成分で充填され、表面にＧＤ２を提示するリポソーム）、標的細胞の溶解の際に放出される。シグナリング化合物をロードした標的細胞または成分を特定の比率で全血、血清、または血漿と接触させる。全血、血漿または血清は、サンプルに加える前に、例えば１：２以上（例えば１：４、１：５あるいは１：１０）またはこれらの比の間の任意の範囲の割合でＣＤＣまたはＷＢＴのために希釈してもよい。但し、希釈していないサンプルに加えてもよい。ＣＤＣまたはＷＢＴにおける全血、血漿または血清の最終濃度は、例えば、１０〜５０％の範囲であってよい。標的細胞または標的成分の溶解は、シンチレーションカウンターまたは分光光度法により、該シグナリング成分の放出によって測定することができる。例えば、標的細胞または標的成分の溶解は、シンチレーションカウンターにより、上清中に放出された⁵¹Ｃｒの量を決定することにより測定することができる。溶解のパーセンテージは、以下の式により求めることができる：１００×（実験での放出−自発的な放出）／（最大放出−自然的な放出）。

ＣＤＣアッセイのための細胞溶解成分（またはエフェクター成分）は、補体系の成分を含む患者またはドナーから得られた血清または適切に抗凝固処理した血漿により提供される。ＷＢＴのための細胞溶解成分（またはエフェクター成分）は、補体系の成分、並びに全ての細胞成分、またその標的細胞の溶解に関与し得る全血中に含まれる任意のさらなる成分、並びにすべての成分の相互作用（例えば、補体活性化は、顆粒球などの特定のエフェクター細胞を活性化することが知られている）を含む、患者またはドナーから得られた適切に抗凝固処理された全血により提供される。ＣＤＣおよび／またはＷＢＴでは、血清、血漿又は全血は異なる希釈率で標的細胞または標的成分に添加してよい。

さらに、例えば標準曲線の生成のために、ＣＤＣアッセイおよび／またはＷＢＴの１つ以上のサンプルには抗ＧＤ２抗体を異なる希釈率で加えることができる。

別の実施形態では、抗ＧＤ２抗体の可変ドメインを認識する１つ以上の抗イディオタイプ（抗−ｉｄ）抗ＧＤ２抗体を、抗体によって媒介される標的細胞の溶解を阻害するため（例えばネガティブコントロールとして）、あるいはアッセイの特異性と抗−ｉｄ抗体なしで測定される標的細胞の溶解が、抗体が媒介するものかまたは抗体に依存するものかを証明するため、サンプルに添加してもよい。

細胞溶解の閾値用量を、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療を開始する前の患者について決定する場合、抗ＧＤ２抗体又は抗ＧＤ２抗体を含む調製物を、（患者の血清、血漿、または血液に加えて）種々の希釈率でＣＤＣアッセイおよび／またはＷＢＴ試料に加え、細胞溶解の閾値用量を決定することができるようにする。

本明細書にさらに記載するように、閾値用量の決定のための標的細胞は、同じ適応症（例えば神経芽細胞腫患者の場合、ヒト神経芽細胞腫細胞）のヒト腫瘍細胞株か、または、適していれば、その患者の自己腫瘍細胞であってもよい。

細胞溶解の閾値用量を、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療中の患者について決定する場合、患者の血清、血漿又は全血（抗ＧＤ２抗体を含む）を、（別途抗ＧＤ２抗体を添加することなく）種々の希釈率でＣＤＣアッセイおよび／またはＷＢＴ試料に加え、細胞溶解の閾値用量を決定することができるようにする。

ＣＤＣおよび／または全血の細胞溶解を誘導するのに十分な用量は、それぞれのアッセイ（具体的なＣＤＣアッセイまたはＷＢＴ）での最大限可能な細胞溶解の、少なくとも２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％または５０％、またはこれらのレベルの間の任意の範囲を達成する用量として定義することができる。一実施形態では、用量は、それぞれのアッセイ（具体的なＣＤＣアッセイまたはＷＢＴ）において最大限可能な細胞溶解の、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも、９０％、少なくとも９５％、または１００％、あるいはこれらのレベルの間の任意の範囲を達成する用量として定義される。

具体的なＣＤＣアッセイまたはＷＢＴで決定される細胞溶解の閾値用量は、抗ＧＤ２抗体の血清、血漿および／または血液でのレベルである。血液、血漿および／または血清での抗体レベルを達成するために患者に投与される抗ＧＤ２抗体を含む調製物の投与量は薬物動態学的データに基づいて決定する必要がある。図１及び図２に示すように、血清または血漿中４７０〜１０００ｎｇ／ｍＬ程度の低い抗体レベルで、ＣＤＣアッセイにおいて少なくとも５０％の腫瘍細胞溶解を誘導するのに十分である（例えば、ＡＰＮ３１１：４７０ｎｇ／ｍＬ（図２）、１０００ｎｇ／ｍＬ（図１）、およびＡＰＮ３０１：６１９ｎｇ／ｍＬ（図２））。従って、本発明の一実施形態では、細胞溶解の閾値用量は、４７０〜１０００ｎｇ／ｍＬ（血清または血漿）、または４７０ｎｇ〜１００００／ｍＬ（血清または血漿）、あるいはこれらのレベルの間の任意の範囲である。

特定の細胞溶解の閾値用量をＣＤＣアッセイまたはＷＢＴ（特に、患者のがん細胞以外の標的細胞を用いるアッセイ）において決定する場合、インビトロで決定したこの細胞溶解の閾値用量（インビトロ細胞溶解閾値）を安全性が許容する範囲で増加して、患者の腫瘍細胞の細胞溶解を誘導するのに十分な抗体の投与量（インビボ細胞溶解閾値）としてよい。
従って、インビトロでの細胞溶解閾値用量を１〜１０倍あるいはこれら倍数の間の範囲の倍数で増加することができる。

特定の実施形態では、細胞溶解閾値用量は１４１０〜３０００ｎｇ／ｍＬ（血清または血漿）または２３５０〜５０００ｎｇ／ｍＬ（血清または血漿）、またはこれらのレベルの間の任意の範囲である。

患者に投与される抗ＧＤ２抗体を含む調製物の投与量はしかるべく決定される、即ち、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療の最初の１〜４日以内（例えば、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた処置期間の１日目、２日目、３日目、または４日目）に前記の血清または血漿レベルを達成する用量として投与され、この血清または血漿レベルが抗ＧＤ２抗体を含む調製物による全処置期間にわたって維持される。図１及び図２に示すように、全血における２〜２３４ｎｇ／ｍＬ程度の低い抗体レベル（例えば、ＡＰＮ３１１：２ｎｇ／ｍＬ（図１）、１０ｎｇ／ｍＬ（図１）、または２１ｎｇ／ｍＬ（図２）、およびＡＰＮ３０１：２３４ｎｇ／ｍＬ（図２））は、ＷＢＴにおいて少なくとも５０％の腫瘍細胞溶解を誘導するのに十分である。従って、本発明の一実施形態では、細胞溶解の閾値用量は２〜２５０ｎｇ／ｍＬ（全血）、または２〜２５００ｎｇ／ｍＬ（全血）、またはこれらのレベルの間の任意の範囲である。特定の実施形態では、細胞溶解の閾値用量は、２〜１００ｎｇ／ｍＬ（全血）、５〜２００ｎｇ／ｍＬ（全血）またはこれらのレベルの間の任意の範囲である。いくつかの実施形態では、細胞溶解閾値用量は６〜７５０、６〜７５００、１０〜１２５０、１０〜１２５００、６〜３００、１０〜５００、１５〜６００、２５〜１０００ｎｇ／ｍＬ（全血）である。

患者に投与される抗ＧＤ２抗体を含む調製物の投与量はしかるべく決定される、即ち、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療の最初の１〜４日以内（例えば、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた処置期間の１日目、２日目、３日目、または４日目）に前記の全血中レベルを達成する用量として投与され、この血清または血漿レベルが抗ＧＤ２抗体を含む調製物による全処置期間にわたって維持される。図６に示すように、血清濃度１０００ｎｇ／ｍＬ（即ち１μｇ／ｍＬ）は、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を１０ｍｇ／ｍ²／日の用量で連続静脈内（ｉｖ）の輸注（即ち、ミニポンプを用いて、１日２４時間）として投与する場合、抗ＧＤ２抗体処置の最初の１〜２日以内に達成することができる。したがって、一実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は５，７，１０または１５ｍｇ／ｍ²／日、特に１０ｍｇ／ｍ²／日、またはこれらの用量の間の任意の範囲の用量で連続静脈内輸注（１日２４時間）として投与される。一実施形態では、細胞溶解の閾値用量は、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療の第１日、第２日、第３日または第４日以内に達成される。図７は、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を１０ｍｇ／ｍ²の用量で、ミニポンプを用い、連続静脈内（ｉｖ）輸注として（すなわち、１日２４時間）する場合に、細胞溶解の５０％が抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療の最初の３〜４日以内に達成され得ることを示す。

本発明の方法を用いれば、抗体の投与量を、ＣＤＣアッセイまたはＷＢＴによって決定される腫瘍細胞溶解および／または標的細胞の溶解に必要な最小用量に低減することができる。特定の実施形態では、ＣＤＣアッセイおよび／またはＷＢＴによって決定される抗体の細胞溶解閾値用量は、５０、４０、３０、２５、２０、１５、１０、７、５ｍｇ／ｍ²／日より低く、またはこれらの用量間の任意の範囲より低い。さらに、本発明の方法は、ＣＤＣアッセイおよび／またはＷＢＴにより、細胞溶解の閾値用量を個別に決定することが可能であり、したがって、患者の腫瘍細胞に対する溶解能の個体差を考慮に入れる。したがって、各患者は、潜在的な副作用、特に痛み、を最小限に抑えるできるだけ少ない用量で、且つ腫瘍細胞の溶解に有効である、自分の最適な抗体用量を投与され得る。調製物は、それを必要とする対象に投与することができる。一実施形態では、対象は、ＧＤ２陽性癌患者である。ＧＤ２陽性癌は、ＧＤ２が腫瘍細胞上に発現しているタイプの癌であり、例えば、神経芽細胞腫、神経膠芽腫、髄芽腫、星状細胞腫、メラノーマ、小細胞肺癌、線維形成性小円形細胞腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、およびその他の軟部肉腫が含まれる。一実施形態では、患者は、一次不応性または再発の高リスクの神経芽細胞腫、または高リスクの神経芽細胞腫における微小な残存疾患に罹患している。患者は、それ以前に処置されていてもよく、または他の治療（例えば外科手術、化学療法、放射線治療、幹細胞移植、サイトカイン治療（例えば、ＩＬ−２および／またはＧＭ−ＣＳＦによる）および／またはレチノイド治療（例えばイソトレチノインによる）と同時に処置される。

抗体は、単鎖抗体、哺乳動物抗体、ヒト抗体またはヒト化抗体を含む、組換えまたは人工の群から選択することができる。抗体は、特に、Ｆｃ、Ｆｃ様、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ）２、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ｓｃｆｃ、ＶＨＨから選択される、抗体の定常および／または可変部分を含んでなるかまたはそれらから選択してもよい。但し、そのような抗体フラグメントは、補体結合に関与するＦｃ部分を含むべきであり、それにより、天然の（またはインビボの）エフェクター機能を媒介することができる。好ましくは、抗体は、抗体の軽鎖および重鎖を含む。抗体は、特異的に結合することができる同一のまたは異なる抗原（例えばＧＤ２）と結合することができる１つまたは２つの抗原結合領域を含むことができる。本発明の抗体は、上記で定義された抗原に対する抗体−例えばその抗原に対して免疫によって作製された−でありうる。抗ＧＤ２抗体は、ヒト化またはキメラＧＤ２抗体、例えばヒト化またはキメラ１４．１８、３Ｆ８または８Ｂ６抗体、あるいは天然のエフェクター機能を媒介するその抗原結合フラグメントであってよい。抗ＧＤ２抗体は、１つまたは複数のアミノ酸修飾（例えば修飾されたＦｃ領域）を有してもよい。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体はｈｕ１４．１８Ｋ３２２Ａである。別の実施形態では、抗ＧＤ２抗体は、キメラ１４．１８抗体である。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体は、配列番号１の軽鎖ヌクレオチド配列（実施例１も参照）と配列番号２の重鎖ヌクレオチド配列（実施例１も参照）を有する。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体は、配列番号３の軽鎖アミノ酸配列（実施例１も参照）と配列番号４の重鎖アミノ酸配列（実施例１も参照）を有する。２つの軽鎖および２つの重鎖を含む抗体の相対分子量は約１５０，０００ダルトンであり得る。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体はＡＰＮ３１１である。抗ＧＤ２抗体は、ＣＨＯ細胞中で、ＳＰ２／０細胞内で、または他の適当は細胞系（例えばＨＥＫ−２９３、ＭＲＣ−５、Ｖｅｒｏ、ＰｅｒＣ６またはＮＳ０）内で発現させることができる。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体はＳＰ２／０細胞で発現するキメラ１４．１８抗体である。別の実施形態では、抗ＧＤ２抗体はＣＨＯ細胞中で発現するキメラ１４．１８抗体である。

抗ＧＤ２抗体はまた、抗ＧＤ２抗体（または天然のエフェクター機能を媒介する抗原結合フラグメント）とサイトカインの融合タンパク質を含む免疫サイトカインであってもよい。免疫サイトカインの抗体部分は、ヒト化またはキメラＧＤ２抗体（例えば、ヒト化またはキメラ１４．１８、３Ｆ８または８Ｂ６抗体）であってもよい。免疫サイトカインタンパク質の抗体部分は、１つまたは複数のアミノ酸修飾（例えば修飾されたＦｃ領域）を有してもよい。一実施形態では、免疫サイトカインの抗体部分はｈｕ１４．１８Ｋ３２２Ａである。別の実施形態では、免疫サイトカインの抗体部分は、ヒト化１４．１８抗体である。抗ＧＤ２抗体−サイトカイン融合タンパク質のサイトカイン部分は、例えば、ＩＬ−２またはインターロイキン１２（ＩＬ−１２）、またはＩＬ−１５またはＧＭ−ＣＳＦであってよい。抗体およびサイトカインは共に融合され、リンカー配列を含んでいてもよい。一実施形態では、免疫サイトカインは、配列番号５の軽鎖ヌクレオチド配列（実施例１も参照）及び配列番号６の重鎖ヌクレオチド配列（実施例１も参照）を有する。一実施形態では、免疫サイトカインは、配列番号７の軽鎖アミノ酸配列（実施例１も参照）及び配列番号８の重鎖アミノ酸配列（実施例１も参照）を有する。一実施形態では、免疫サイトカインはＡＰＮ３０１である。免疫サイトカインは、ＮＳ０細胞内、または他の適当な細胞系（例えばＣＨＯ、ＨＥＫ−２９３、ＭＲＣ−５、Ｖｅｒｏ、またはＰｅｒＣ６）内で発現させることができる。

特定の実施形態では、抗ＧＤ２抗体は、任意の他の部分に融合されていない。特定の実施形態では、抗ＧＤ２抗体は免疫サイトカインではない。

抗ＧＤ２抗体を含む調製物はさらに、塩およびＷＦＩを含んでいてもよい。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、さらに、そのような塩およびＷＦＩを含む緩衝液（例えばリン酸緩衝生理食塩水）を含んでいてもよい。

抗ＧＤ２抗体を含む調製物はさらに、安定化剤、保存剤および他の担体または賦形剤を含んでいてもよい。抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、凍結乾燥されていてもよい。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、抗ＧＤ２抗体−サイトカイン融合体（例えばｈｕ１４．１８−ＩＬ−２）、さらにスクロース、Ｌ−アルギニン、クエン酸一水和物、ポリソルベート２０、および塩酸を含む。ある実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、ＡＰＮ３０１、抗ＧＤ２抗体はｈｕ１４．１８−ＩＬ−２であり、調製物は４ｍｇ／ｍＬの免疫サイトカイン、２０ｍｇ／ｍＬのスクロース、１３．９ｍｇ／ｍＬのＬ−アルギニン、２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート２０、及び２．１ｍｇ／ｍＬのクエン酸一水和物を含む。ある実施形態では、免疫サイトカインおよび他の賦形剤を含む前記の調製物は凍結乾燥されており、４ｍＬの０．９％塩化ナトリウムで再構成することができ、得られた溶液は５．５のｐＨを有する。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、安定化剤、保存剤および他の賦形剤を含まない。抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、輸液バッグ（例えば、２０％ヒトアルブミン５ｍＬと０．９％ＮａＣｌ １００ｍＬを含有する輸液バッグ）に添加することができる。

抗ＧＤ２抗体又は抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、１〜３０ｍｇ／ｍ²、１〜３５ｍｇ／ｍ²、１〜５０ｍｇ／ｍ²、１〜６０ｍｇ／ｍ²、（例えば、１、２、３、４、５、６、７、７．５、８、９、１０、１２、１５、２０、２５、３０、３２、３５、４０、４５、５０または６０ｍｇ／ｍ²）またはこれらの期間の間で任意の範囲の抗体の日用量で投与することができる。例えば、１０ｍｇ／ｍ²という日用量は、患者が１日に体表面積１ｍ²あたり１０ｍｇの抗ＧＤ２抗体を投与されることを意味する。本明細書で使用される用量（例えば、ミリグラムまたはマイクログラムで表示される）は、活性成分の用量、即ち、調製物中の活性成分の量を意味する。例えば、用量とは、抗ＧＤ２抗体を含む調製物中の抗ＧＤ２抗体の量、免疫サイトカインを含有する調製物中の免疫サイトカインの量、またはサイトカインを含有する調製物中のサイトカインの量を指す。上記の例で記載しているように、１０ｍｇ／ｍ²という日用量は、患者が１日に体表面積１ｍ²あたり１０ｍｇの抗ＧＤ２抗体（必要に応じて特定の体積の抗ＧＤ２抗体を含む調製物に含まれる）を投与されることを意味する。本明細書で用いられる、１ｍ²あたりの投与量は、患者の体表面積（ＢＳＡ）１ｍ²あたりの投与量を指す。本明細書で用いられる、１ｋｇあたりの投与量は、患者の体重１ｋｇあたりの投与量を意味する。

いくつかの実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、１〜１５ｍｇ／ｍ²、１〜２０ｍｇ／ｍ²、１〜２５ｍｇ／ｍ²、１〜３０ｍｇ／ｍ²、または１〜３５ｍｇ／ｍ²、あるいはこれらの日用量の間の任意の範囲の用量で投与される。特定の実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、５０ｍｇ／ｍ²未満、４０ｍｇ／ｍ²未満、３０ｍｇ／ｍ²未満、または２５ｍｇ／ｍ²未満の日用量で投与される。特定の実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、最大７、１０、１５または２０ｍｇ／ｍ²での日用量で投与される。抗ＧＤ２抗体は、１０、２０、２５、５０、６０、７５、８０、１００、１２０、１５０、２００、２１０、２５０または３００ｍｇ／ｍ²／サイクルまたはこれらの用量間の任意の範囲の用量で投与することができる。処置サイクルあたりの患者あたりの総投与量は、既定の患者の総用量と定義することができる。

いくつかの実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を、特定の治療効果に達するまでの処置期間にわたって投与される。いくつかの実施形態では、治療効果は、例えば、免疫系バイオマーカー（例えばリンパ球数および／またはＮＫ細胞数および／またはサイトカイン等の血液パラメータ）の増大によって測定される、腫瘍に対する免疫応答の増大であり得る。いくつかの実施形態では、治療効果は、腫瘍マーカー（例えば、カテコールアミン）の減少であってもよい。いくつかの実施形態では、治療効果は、メタヨードベンジルグアニジンシンチグラフィー（ｍｌＢＧ）、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）またはＸ線コンピュータ断層撮影（ＣＴ）および／または骨髄組織学（穿刺又はトレフィン生検によって評価）などの
方法によって測定することができる。

ある特定の実施形態では、治療効果は、疾患の安定（すなわち、病変、腫瘍組織および／またはサイズがそれ以上増大しないこと）、部分寛解（すなわち、病変、腫瘍組織および／またはサイズの減少）、および／または完全寛解（すなわち、すべての病変および腫瘍組織の完全な寛解）として定義することができる。

完全寛解（ＣＲ）はさらに以下のとおり定義することができる：
・測定および評価可能なあらゆる疾患の完全な消失、
・新たな病変がみられないこと、
・疾患に関連する症状がみられないこと、および／または
・例えば、マーカーおよび／または他の異常な検査値の正常化などを含め、評価可能な疾患の証拠がみとめられないこと。

いくつかの実施形態では、測定可能な、評価可能なおよび非評価可能な病変、並びに部位は、ベースラインとして同じ技術を使用して評価されなければならない。

部分寛解（ＰＲ）はさらに以下のとおり定義することができる：
・少なくとも１つの測定可能な病変を有する患者にのみ適用される、
・測定可能なあらゆる病変の垂直直径の積和でベースラインよりも５０％以上の減少、
・評価可能な疾患の進行が認められないこと、
・新たな病変が認められないこと。

いくつかの実施形態では、全ての測定および評価可能な病変および部位は、ベースラインと同じ技術を用いて評価しなければならない。抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、１日２４時間の連続静脈内輸注として投与することができる。抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、１０、１４、１５または２１日間連続して、またはこれらの期間の間の任意の範囲にわたって投与することができる。抗ＧＤ２抗体を含む調製物はまた、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１日間、またはそれ以上の連続した日数の間にわたって投与することができる。ある特定の実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、全処置サイクル（例えば３５日間）にわたって投与することもできる。いくつかの実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を、５回の処置サイクル（それぞれ３５日間）、すなわち合計１８０日間にわたって、投与される。抗体の日用量は、その患者の所定の抗体用量が投与されるように、それに応じて減らすことができる。一実施形態では、患者の所定の抗体用量は、１００ｍｇ／ｍ²／サイクルである。一実施形態では、全体処置期間は５サイクルを含む。したがって、この例では、全処置期間あたりの抗体用量は、５００ｍｇ／ｍ²である。ある実施形態では、この全処置期間あたりの総抗体用量５００ｍｇ／ｍ²を、１８０日間にわたって、すなわち２．７７ｍｇ／ｍ²／日で投与する。抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、１日あたり２４時間にわたって連続静脈内輸注として投与することができる。そのような連続的な輸注のために、浸透圧ミニポンプを用いてもよい。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を１日あたり２４時間連続静脈内輸注として、１０、１４、１５または２１日間、あるいはこれら期間の間の任意の範囲の期間にわたり、上記で特定した日用量（例えば、７、１０または１５ｍｇ／ｍ²／日）で投与される（例えば１０ｍｇ／ｍ²／日で１０日間、１５ｍｇ／ｍ²／日で１０日間、７ｍｇ／ｍ²／日で１４日間、１５ｍｇ／ｍ²／日で１４日間、１０ｍｇ／ｍ²／日で１５日間、７ｍｇ／ｍ²／日で２１日間、１０ｍｇ／ｍ²／日で２１日間、またはこれらの用量の間の任意の範囲）。特定の実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、４０ｍｇ／ｍ²の日用量では５日間も連続静脈内輸注として投与はされない。ある特定の実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、５日間も連続静脈内輸注として投与（すなわち１２０時間の輸注）はされない。いくつかの実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、５日を超える期間、連続静脈内輸注として投与される。いくつかの実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物は、６日間以上にわたって連続静脈内輸注として投与される。

免疫サイトカインまたは免疫サイトカインを含む調製物は、０．８〜５０ｍｇ／ｍ²（例えば、例えば０．８、１．６、２、３．２、４、４．８、５、６、７、７．５、８、９、１０、１２、１４．４、１５、２０、２５、３０、３２、４０、４５、または５０ｍｇ／ｍ²あるいはこれらの用量の間で任意の範囲）の免疫サイトカインの日用量で投与することができる。例えば、１０ｍｇ／ｍ²の日用量とは、患者が１日あたり体表面積１ｍ²あたり１０ｍｇの免疫サイトカイン投与されることを意味する。一実施形態では、融合タンパク質１ｍｇは、約０．８ｍｇのｈｕ１４．１８抗体と約３×１０⁶ＵのＩＬ−２を含む。免疫サイトカインを含む調製物は、皮下又は静脈内輸注（例えば一日一回）として投与され得る。免疫サイトカインを含む調製物は、１日に２４時間にわたって静脈内投与してもよい。免疫サイトカインを含む調製物は、２、３、４、５、１０、１４、１５、または２１日間またはこれらの期間の間の任意の範囲の期間連続して投与することができる。別の実施形態では、免疫サイトカインを含有する調製物は、１日あたり２４時間にわたって、１０、１４、１５または２１日間連続して連続静脈内輸注として投与される。そのような連続的な輸注のために、浸透圧ミニポンプを用いてもよい。一実施形態では、免疫サイトカインは、１２ｍｇ／ｍ²／日の用量で２８日サイクル（最大１０サイクル）のうちの連続３日間にわたり投与される。

抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた処置期間は、サイトカインによる１以上の処置期間の前および／またはその期間と伴っていてもよい。一実施形態では、サイトカインは、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−１２および／またはＩＬ−１５である。サイトカインは、皮下投与（例えば、一日一回）、または静脈内輸注としてもよい。一実施形態では、サイトカインはＩＬ−２であり、６×１０⁶ＩＵ／ｍ²／日の用量で、１日１回皮下投与される（例えば、処置サイクルの第１日、第２日および第８〜１４日、または処置サイクルの第１〜５日および第８〜１２日）。一実施形態では、ＩＬ−２の患者の総用量は、６０×１０⁶ＩＵ／ｍ²／サイクルである。別の実施形態では、サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦであり、２５０ｍｇ／ｍ²の用量で２時間かけて一日一回静脈内投与される（例えば、処置サイクルの第１日、第２日および第８〜１４日）。

抗ＧＤ２抗体を含む調製物による処置期間の後に、レチノイドを有する１以上の処置期間が続いてもよい。一実施形態では、レチノイドは、レチノイン酸（ＲＡ）、例えばイソトレチノインである。

そのような処置期間は繰り返すことができる。また、そのような処置期間の後には、同じおよび／または異なる薬物または治療による処置を行わないインターバル期間があってよい。一実施形態では、インターバル期間は、なんら治療を行わない期間であってもよい。別の実施形態では、インターバル期間は、同じ調製物または治療の投与を行わないが、その期間に他の調製物の投与または治療を行うことができる。

また、本発明に係る方法は、先だっておよび伴って、１つ以上の鎮痛剤（例えば、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ、例えば、インドメタシン）、および／または１以上のオピオイド、および／または１つ以上の他の鎮痛剤、またはそれらの任意の組み合わせ、による処置を行うことができる。一実施形態では、鎮痛剤は、オピオイド（例えば、モルヒネ、および／または、例えばヒドロモルホン等のモルヒネ誘導体）である。他のオピオイドとしては、例えば、トラマドール、ペチジン、コデイン、ピリトラミド、レボメタドン、ならびにフェンタニル、アルフェンタニル、レミフェンタニルおよびスフェンタニルが挙げられる。

いくつかの実施形態では、１つ以上の鎮痛剤は、ＧＡＢＡ類似体（例えばガバペンチン）から選択することができる。したがって、患者は、例えば抗体処置期間の開始前の３日間、ガバペンチンで処理することができる。ガバペンチンは、１０ｍｇ／ｋｇ／回の用量で１日に１回、２回または３回、経口投与することができる。ガバペンチンは、最大３００ｍｇ／ｋｇ／回の用量まで投与することができる。ガバペンチンは入手可能であり、２５０ｍｇ／５ｍＬのガバペンチンを含む経口溶液として、またはカプセル（１００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ）として投与することができる。ガバペンチンの処置は、モルヒネおよび／または他の鎮痛剤による治療に加えて投与することができる。さらに、患者は、パラセタモール（１０〜１５ｍｇ／ｋｇ／回、４時間毎または１日４回、経口または静脈内）、イブプロフェン（５〜１０ｍｇ／ｋｇ／回、６〜１２時間毎に経口）、メタミゾール（１０〜１５ｍｇ／ｋｇ／回、４時間毎に経口）、ジフェンヒドラミン（０．５〜１ｍｇ／ｋｇ／回、経口または静脈内）、および／またはインドメタシン（例えば０．３〜０．５ｍｇ／ｋｇ／回、または２５または５０ｍｇ／回、６時間毎に経口または静脈内）で処置することができる。パラセタモール、イブプロフェン、メタミゾール、および／またはインドメタシンでの処置は、モルヒネおよび／またはガバペンチン、および／または他の鎮痛剤による治療に加えて投与してもよい。

１つ以上の鎮痛剤は、静脈内輸注、特に、１日に２４時間にわたって連続静脈内輸注、として投与することができる。１つ以上の鎮痛剤による処置期間は、抗ＧＤ２抗体を含む調製物による処置期間に先立っておよび／またはそれと伴っていてもよい。

本発明に係る方法によれば、用量を減らすこと、投与経路を変更すること（例えば、静脈内輸注から経口に）、鎮痛処置期間の期間を短くすること、および／または１つ以上の鎮痛薬の調製物の種類を変更することが可能である。従って、本発明は、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療を受けている患者の処置サイクルの少なくとも一部を、外来治療とすることも可能である。

いくつかの実施形態では、本発明による抗体での治療日（連続輸注）に投与する、１以上の鎮痛薬の日用量は、非連続的な静脈内輸注として投与される抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療で投与される通常の日用量よりも低いか、４０ｍｇ／ｍ²での日用量で５日間連続静脈内輸注として投与される用量よりも低い。

ある特定の実施形態では、１以上の鎮痛薬（例えば、モルヒネ）の用量（例えば、日用量）を一定の期間（例えば、全処置期間、処置サイクルの期間、処置サイクル期間中の抗体処置期間、処置サイクル期間中のある抗体治療日から次の抗体治療日まで、および／またはある処置サイクルから次の処置サイクルまで）にわたって減らす。モルヒネの投与量の削減例を表９に示す。例えば、モルヒネの投与量は、３回目の処置サイクルの９日目から１０日目に１０％減らす（即ち、標準の輸注速度（この例では３０ｍｃｇ／ｋｇ／時）の２８％から１８％に、８．１から４．５３ｍｇ／ｋｇ／時に、あるいは０．１９から０．１１ｍｇ／ｋｇ／日に）ことができる。いくつかの実施形態では、モルヒネの投与量は、処置サイクルの期間、処置サイクル期間中の抗体処置期間の間、および／または処置期間中のある抗体治療日から次の項対治療日まで、継続的に減らす。

例えば、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた、非連続輸注（またはボーラス輸注、すなわち、１日に２４時間未満の輸注）による処置期間の前および／またはその期間中に投与されるこのような通常のモルヒネ用量を表１に示す。この例では、ｃｈ１４．１８／ＣＨＯ（ＡＰＮ３１１）を１日あたり８時間の輸注として、その後の５日間にわたって投与（２０ｍｇ／ｍ²の用量で５サイクル、従って１００ｍｇ／ｍ²／サイクル）し、モルヒネ塩酸塩は各抗体治療日にＡＰＮ３１１輸注を開始する前の２時間、０．０５ｍｇ／ｋｇ／時の用量でボーラス投与、ＡＰＮ３１１輸注を行っている間は０．０３ｍｇ／ｋｇ／時の輸注速度で８時間、およびＡＰＮ３１１処置の最日に０．０１ｍｇ／ｋｇ／時のインターバル輸注速度で１４時間、そして（１０時間のモルヒネ非処置のインターバルをおいて）許容できる場合、次の治療日に４時間投与される。用量を増加し（例えば、抗体輸注の間の輸注速度の増加）および／またはさらなるボーラス用量を、必要に応じて投与した。従って、所定のモルヒネの用量は、１日あたり少なくとも０．３８ｍｇ／ｋｇ、処置サイクル当たり少なくとも２ｍｇ／ｋｇ（抗体治療日５日間含む）であり、全処置期間あたり少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ（３サイクルを含む）であった。

ある特定の実施形態では、１以上のモルヒネの日用量および／または１以上のモルヒネ輸注速度および／または標準的なモルヒネの投与量の１以上の百分率は表９で特定される。例えば、一実施形態では、最初の処置サイクルの１２日目に投与される標準的なモルヒネ投与量の百分率は４１％であり、最初の処置サイクルの１２日目に投与されるモルヒネ輸注速度は１２，２６ｍｇ／ｋｇ／時であり、最初の処置サイクルの１２日目に投与されるモルヒネ日用量は０．２９ｍｇ／ｋｇである。

別の例では、ＡＰＮ３１１を１０、２０および３０ｍｇ／ｍ²／日および５０、１００、１５０ｍｇ／ｍ²／サイクルの用量で、１日あたり８時間の輸注として、５日間を３サイクル投与し、モルヒネ塩酸塩を、０．５〜１．０ｍｇ／ｋｇ／回の用量にてボーラス投与（抗体の輸注開始の直前）し、ＡＰＮ３１１輸注の間は０．０５ｍｇ／ｋｇ／時間の連続輸注の速度で投与する。必要に応じ、用量を増加（例えば、抗体輸注の間の輸注速度の増加）および／または追加のボーラス用量を投与する。従って、規定のモルヒネの用量は、少なくとも０．９ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４．５ｍｇ／ｋｇ／処置サイクル（５日間の抗体治療日数含む）、および少なくとも１３．５ｍｇ／ｋｇ／全処置期間（３サイクルを含む）である。

ｃｈ１４．１８の非連続的な（またはボーラス）輸注のさらに別の例では、モルヒネを２４時間にわたって１．２ｍｇ／ｋｇ／時までの輸注速度で投与した。

さらに別の例では、ｃｈ１４．１８／Ｓｐ２／０は、２５ｍｇ／ｍ²の用量で４日間連続して投与される。ｃｈ１４．１８／Ｓｐ２／０を、静脈内輸注にて、はじめは１．２５ｍｇ／ｍ²／時間×０．５時間、次に２．５０ｍｇ／ｍ²／時間×０．５時間、次に３．７５ｍｇ／ｍ²／時間×０．５時間、次いで許容できれば５ｍｇ／ｍ²／時間を残りの時間投与する。この例では、各処置サイクルは０日目に開始し、処置サイクルの０日目は、それぞれのサイトカインを用いた治療の最初の日である。

Ｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０治療を、５サイクルすべてについて、２８日ごとに２５ｍｇ／ｍ²／日にて４日間；ＧＭ−ＣＳＦを２５０ｍｇ／ｍ²／日にて１４日間；アルデスロイキン（ＩＬ−２）を第１週目に３ＭＩＵ／ｍ²／日にて、第２週目に４．５ＭＩＵ／ｍ²／日にて投与する。
注：上記の治療スキームへの変形例では、ＲＡ処置を、最初のサイクルの１１日目に開始するが、上記スキームでは第３及び第５サイクルの１０日目となっている。従って、上記処理スキーマの変形例では、最初の処置サイクルの２４日目は、最初のサイクルのＲＡ処置の最終日でもある。

ＧＭ−ＣＳＦの投与は、０〜１３日目に、２５０μｇ／ｍ²／日にて皮下注射（強く推奨）または１日あたり２時間の輸注として静脈内投与を行う（抗体治療の３日前から７日後まで毎日ｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０の輸注）。
アルデスロイキンサイクルの２８〜３１日目には治療を行わない。３２日目に、（ＧＭ−ＣＳＦによる）次の処置サイクルを開始する（３２日目＝次のサイクルの０日目）。

アルデスロイキン（インターロイキン−２、ＩＬ−２）の投与を、各サイクルの第１週目の４日間（０〜３日目）に、３ＭＩＵ／ｍ²／日にて連続輸注により行う（ＣＡＤＤ（登録商標）Amburatory Infusion Pumpを用いて）。各サイクルの第２週目に、アルデスロイキン（ＩＬ−２）を４．５ＭＩＵ／ｍ²／日にて、４日間（７〜１０日目）に投与する（ｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０の輸注を７〜１０日目に）。アルデスロイキンは、５％デキストロース水溶液（必要に応じて０．１％ヒト血清アルブミンを含んでいてもよい）中で、携帯型輸注ポンプによりカテーテルを介して９６時間かけて静脈内に連続輸注される（総体積はポンプに依存する）。

無治療の１４日間（第５サイクルの２４日目、即ち第６サイクルの０日目に開始）の後イソトレチノインのみの投与を１４日間行う第６の処置サイクルを加えてもよい。

この例では、ヒドロキシジン（１ｍｇ／ｋｇ、最大用量５０ｍｇ）またはジフェンヒドラミン（０．５〜１．０ｍｇ／ｋｇ；最大用量５０ｍｇ）を、ｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０輸注の２０分前に１０分かけて静脈内投与を開始；ｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０輸注の２０分前にアセトアミノフェン（１０ｍｇ／ｋｇ；最大用量６５０ｍｇ）を経口投与する；および／またはｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０輸注の直前に硫酸モルヒネ（５０ｍｃｇ／ｋｇ）その後２０〜５０μｇ／ｋｇ／時の輸注速度でｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０輸注の完了２時間後まで硫酸モルヒネの点滴を継続する。さらに、ヒドロモルホンまたはフェンタニルなどの他の麻薬を用いることができる。あるいは、必要に応じて、リドカイン輸注は、モルヒネの静脈内ボーラス投与と併用することができる。リドカイン輸注のための投与ガイドラインを以下に示す。

リドカインの投与：
ａ．ｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０輸注の開始前に３０分かけて５０ｃｃの生理食塩水（ＮＳ）中２ｍｇ／ｋｇにてリドカインを静脈内ボーラス投与。
ｂ．ｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０輸注の開始時に、１ｍｇ／ｋｇ／時にて静脈内リドカイン輸注を開始し、ｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０の輸注完了の２時間後まで継続。
ｃ．必要に応じて、２時間ごとに２５〜５０μｇ／ｋｇにてモルヒネの静脈内ボーラス投与。

この例では、モルヒネの用量投与とともにガバペンチンの投与を検討してもよく、必要に応じて、モルヒネ輸注／ボーラスを投与し；ガバペンチン１０ｍｇ／ｋｇ／日にて開始し、臨床応答に応じて３０〜６０ｍｇ／ｋｇ／日まで漸増することができる。

この例では、ヒドロキシジン（またはジフェンヒドラミン）およびアセトアミノフェンの投与を、必要に応じ、静脈内又は経口で６時間毎に繰り返すことができる。

この例では、神経因性疼痛を処置するためモルヒネの追加投与をｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０輸注中に行った後、硫酸モルヒネ輸注速度の増加することができるが、患者を注意深く監視すべきである。患者がモルヒネ（例えば、かゆみ）に耐えることができない場合は、フェンタニルまたはヒドロモルフォンをモルヒネの代わりに使用することができる。あるいは、必要に応じて、リドカイン輸注を、モルヒネの静脈内ボーラス投与と併用することができる。

本明細書で使用する用語「モルヒネ用量」とは、患者の体重１ｋｇ当たりのモルヒネの量（ｍｇまたはｍｃｇ）を意味する。従って、モルヒネの日用量を指す場合、その量は１日あたりの、患者の体重１ｋｇあたりのモルヒネの量（ｍｇまたはｍｃｇ）であり、または１時間あたりのモルヒネ用量を指す場合は、それは１時間あたりの患者の体重１ｋｇあたりのモルヒネの量（ｍｇまたはｍｃｇ）であり、処置サイクルあたりのモルヒネ用量を指す場合は、処置サイクルあたりの患者の体重１ｋｇあたりのモルヒネの量（ｍｇまたはｍｃｇ）であり、または全処置期間あたりのモルヒネ用量を指す場合は、それは全処置期間あたりの患者の体重１ｋｇあたりのモルヒネの量（ｍｇまたはｍｃｇ）である。

いくつかの実施形態では、本発明の抗体の連続静脈内輸注の１日以上の間でおよび／またはモルヒネ治療日（例えば、上述の例の１つ以上において）に投与されるモルヒネの日用量は、抗体の非連続的な投与の場合のモルヒネの日用量よりも低い。ある特定の実施形態では、連続的な抗体輸注スケジュールで投与されるモルヒネの日用量は、最初の処置サイクルでは非連続的な抗体の輸注スケジュールにおいてまたはそれについて規定されるモルヒネ用量の８０％以下、第２の処置サイクルでは５８％以下、第３の処置サイクルでは５７％以下であり、第４の処置サイクルでは４２％以下、第５の処置サイクルでは３４％以下である。一実施形態では、本発明による抗体の治療スケジュールで投与されるモルヒネの日用量は、４０ｍｇ／ｍ²での日用量で５日間の連続静脈内抗体輸注の抗体の治療スケジュールで投与されるモルヒネの日用量よりも低い。いくつかの実施形態では、本発明による抗体の連続静脈内輸注の１日以上の間および／またはすべてのモルヒネ処置日に投与されるモルヒネの日用量は、０．９、０．７２、０．４８、０．３８、０．４３７５、および／または０．２０５ｍg／ｋｇ／日未満である。

ある特定の実施形態では、最初の処置サイクルにおける抗体の投与の第５日目、第６日目、第７日目、第８日目、第９日目および／または第１０日目のモルヒネの日用量（本発明による抗体の連続的な静脈内輸注を適用する）は、非連続的な輸注スケジュールにおけるモルヒネの日用量より低い（例えば７８％以下）。ある特定の実施形態では、処置サイクルの上記の日およびその後のいずれかの日および／または全処置期間の投与されるモルヒネ用量は、非連続的な輸注スケジュールにおけるモルヒネの日用量より低い。ある特定の実施形態では、第２の処置サイクルにおける抗体の投与の第３日目、第５日目、第６日目、第７日目、第８日目、第９日目および／または第１０日目に投与されるモルヒネの日用量（本発明による抗体の連続的な静脈内輸注を適用する）は、非連続的な輸注スケジュールにおけるモルヒネの日用量より低い（例えば６０％以下）。ある特定の実施形態では、処置サイクルの上記の日およびその後のいずれかの日および／または全処置期間の投与されるモルヒネ用量は、非連続的な輸注スケジュールにおけるモルヒネの日用量より低い。ある特定の実施形態では、第３の処置サイクルおよびその後の処置サイクルにおける抗体の投与の第１日目に投与されるモルヒネの日用量（本発明による抗体の連続的な静脈内輸注を適用する）は、非連続的な輸注スケジュールにおけるモルヒネの日用量より低い（例えば５７％以下）。ある特定の実施形態では、処置サイクルの上記の日およびその後のいずれかの日および／または全処置期間の投与されるモルヒネ用量は、非連続的な輸注スケジュールにおけるモルヒネの日用量より低い。

いくつかの実施形態では、モルヒネは、抗体が投与される日すべてではなく何日間かのみ投与される（例えば２、３、４または５の処置サイクルにおける、連続的な抗体の輸注の最初の１、２、３、４、５、６または７日間のみ）。いくつかの実施形態では、連続的な抗体輸注のサイクル６において、モルヒネは全く投与されない。

いくつかの実施形態では、モルヒネ輸注速度、即ち、本発明の抗体の連続静脈内輸注の１時間以上または数日間および／またはモルヒネ治療の全ての時間または日に投与される、１時間あたりの患者の体重１ｋｇあたりのモルヒネの量（即ちモルヒネ用量）は、上のスケジュールについて規定される標準のモルヒネ輸注速度および／または上の例に記載した抗体の非連続的な投与の間のモルヒネ輸注速度よりも低い（例えば、第１の処置サイクルにおいて、第２日目で９６％以下、第３日目で８４％以下、第４日目で６５％以下、第５日目で４１％以下、第６日目で１４％以下、第７日目で５％以下、第８日目で３％以下、第９日目で２％以下および／または第１０日目で１％以下、第２の処置サイクルにおいて７２％以下、第３の処置サイクルにおいて３０％以下、第４の処置サイクルにおいて２２％以下、第５の処置サイクルにおいて１８％以下である）。いくつかの実施形態では、本発明による抗体の連続静脈内輸注の１以上の日数にわたっておよび／またはモルヒネ治療の全ての時間または日に投与されるモルヒネ輸注速度は、５０、４０、３０、２０、１０および／または５ｍｃｇ／ｋｇ／時未満、および／またはこれら輸注速度の間の任意の範囲より低い。いくつかの実施形態では、本発明による抗体の連続静脈内輸注の１以上の日数にわたっておよび／またはモルヒネ治療の全ての時間または日に投与されるモルヒネ輸注速度は、第１および場合によりそれ以降の任意の処置サイクルにおいて３０ｍｃｇ／ｋｇ／時未満、第２および場合によりそれ以降の任意の処置サイクルにおいて２２ｍｃｇ／ｋｇ／時未満、
第３および場合によりそれ以降の任意の処置サイクルにおいて１０ｍｃｇ／ｋｇ／時未満、第４および場合によりそれ以降の任意の処置サイクルにおいて７ｍｃｇ／ｋｇ／時未満、第５および場合によりそれ以降の任意の処置サイクルにおいて６ｍｃｇ／ｋｇ／時未満である。

特定の実施形態では、本発明による抗体の連続的な静脈内輸注を含む１つ以上の処置サイクルの間に投与される処置サイクルあたりモルヒネの投与量は、非連続的な輸注スケジュールにおける処置サイクルあたりのモルヒネの用量よりも低く、例えば第１の処置サイクルでは６６％以下、第２の処置サイクルでは２８％以下、第３の処置サイクルでは２９％以下または１３％以下、第４の処置サイクルでは１６％以下または７％以下、第５の処置サイクルでは１５％以下または６％以下である。ある特定の実施形態では、本発明による抗体の連続的な静脈内輸注を含む１以上の処置サイクルの間に投与される、第２および場合によりそれ以降の任意の処置サイクルの処置サイクルあたりのモルヒネ用量は、非連続輸注スケジュールにおける処置サイクルあたりのモルヒネ用量よりも低い。ある特定の実施形態では、該処置サイクルおよび場合によりそれ以降の任意の処置サイクルおよび／または全処置期間のモルヒネ用量は、非連続輸注スケジュールにおける処置サイクルあたりのモルヒネ用量よりも低い。いくつかの実施形態では、本発明による抗体の連続的な静脈内輸注を含む１以上の処置サイクルの間に投与される処置サイクルあたりのモルヒネ用量は、７．２、４．８、４．５、２、１．７５および／または０．８２ｍｇ／ｋｇ／サイクル未満、あるいはこれらの用量の間の任意の範囲より低い。

いくつかの実施形態では、全処置期間のモルヒネ用量（本発明による抗体の連続的な静脈内輸注を適用）は、非連続的な輸注スケジュールにおける全処置期間のモルヒネ用量よりも低い。一実施形態では、全処置期間のモルヒネ用量（本発明による抗体の連続的な静脈内輸注を適用）は、非連続的な輸注スケジュールにおける全処置期間のモルヒネ用量の５５％以下、５０％以下、４５％以下または４０％以下である。いくつかの実施形態では、全処置期間のモルヒネ用量（本発明の抗体の連続的な静脈内輸注を適用）は、全処置期間あたり４３．２、２８．８、１３．５、１０、８．７５および／または４．１ｍｇ／ｋｇ／日未満、および／またはこれらの用量の間の任意の範囲より低い。

いくつかの実施形態では、本発明に係る連続輸注スケジュールにおけるモルヒネ用量と比較して本明細書で言及される、非連続的な輸注スケジュールにおける参照モルヒネ用量とは、該スケジュールについての標準的なモルヒネ用量または該スケジュールについて規定されるモルヒネ用量（例えば、臨床研究プロトコルにおいて特定される）を指す。いくつかの実施形態では、本明細書において言及する参照モルヒネ用量は、連続および／または非連続的な抗体の輸注スケジュールでの処置サイクルにおける、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた治療の最初の日に投与されるモルヒネ用量を指し、「初発モルヒネ用量」と呼ぶ。

したがって、本明細書で使用する用語「参照モルヒネ用量」は、本発明に係るもの以外の治療スケジュールのモルヒネ用量および／または初発モルヒネ用量を含んでなり；本発明に係る連続輸注スケジュールの他のモルヒネ用量と比較して本明細書で言及される、そのようなモルヒネ用量の全ての例を包含するものとする。

ある特定の実施形態では、抗体の投与期間中の、輸注１時間あたりの参照モルヒネ用量、即ち参照輸注速度、は５０ｍｃｇ／ｋｇ／時である。ある特定の実施形態では、抗体の投与期間中の、輸注１時間あたりの参照モルヒネ用量、即ち参照輸注速度、は３０ｍｃｇ／ｋｇ／時である。ある特定の実施形態では、参照モルヒネ用量は５０、４０、３０および／または２０ｍｃｇ／ｋｇ／時である。ある特定の実施形態では、参照モルヒネ用量は、０．９、０．７２、０．４８、０．３８、０．４３７５および／または０．２０５ｍｇ／ｋｇ／日である。ある特定の実施形態では、参照モルヒネ用量は、７．２、４．８、４．５、２、１．７５および／または０．８２ｍｇ／ｋｇ／サイクルである。ある特定の実施形態では、参照モルヒネ用量は、全処置期間あたり４３．２、２８．８、１３．５、１０、８．７５および／または４．１ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、参照インドメタシン用量は、経口または静脈内にて６時間毎に、０．３〜０．５ｍｇ／ｋｇ／回、または２５または５０ｍｇ／回である。ある特定の実施形態では、本発明に係る連続輸注スケジュールにおけるモルヒネ用量と比較して言及される、非連続的な輸注スケジュールにおける参照モルヒネ用量は、実際に患者に投与されるモルヒネ用量を指す（例えば、臨床試験の治療を受けた全患者に投与されたモルヒネ用量のそれぞれの平均）。

非連続的な輸注スケジュールにおけるモルヒネの投与量と比較して本明細書で言及される、本発明に係る連続輸注スケジュールにおけるモルヒネ用量は、該スケジュールについての標準的なモルヒネ用量、または該スケジュールについて規定される（例えば臨床研究プロトコルで特定された）モルヒネ用量を指すこともある。ある特定の実施形態では、１時間以上または数日間の抗体の連続投与の輸注１時間あたりモルヒネ用量、即ち輸注速度、は、５０ｍｃｇ／ｋｇ／時未満である。特定の実施形態では、１時間以上または数日間の抗体の連続投与の輸注１時間あたりモルヒネ用量、すなわち輸注速度、は３０ｍｃｇ／ｋｇ／時未満である。いくつかの実施形態では、非連続的な輸注スケジュールにおけるモルヒネの投与量と比較して上記で言及される、本発明の連続的な輸注スケジュールにおけるモルヒネ用量は、実際に患者に投与されたモルヒネの投与量を指す（例えば、臨床試験の治療を受けた全患者に投与されたモルヒネ用量のそれぞれの平均）。

一般に、個々の鎮痛薬の投与量は、個々の患者の疼痛耐性に応じて変わり得る。投与は、最適な鎮痛が得るように適合させてよい。

抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた処置期間は、サイトカインでの１以上の処置期間、レチノイドでの１以上の処置期間、および／または鎮痛剤での１以上の処置期間と組み合わせてもよい。一実施形態では、このような他の処置期間と組み合わせた、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた処置期間は１処置サイクルとして表す。

一実施形態では、本発明による方法で処置された患者はまた、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２および／またはイソトレチノイン、および場合によりモルヒネ、および／または１つ以上のモルヒネ誘導体、および／または１以上の他の鎮痛薬で処置される。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた処置期間には、サイトカインによる処置期間が先行する。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた処置期間は、サイトカインによる処置期間が伴う。一実施形態では、抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた処置期間には、サイトカインによる処置期間が先行し、別途サイトカインでの処置期間が伴う。

本明細書で用いられる、特定の調製物または処置での「処置期間」は、その特定の調製物または処置が、その患者に投与されている期間、即ちその後も処置が続く日の期間、を意味する。例えば、サイトカインを含有する調製物を５日間連続して投与し、その後、その後サイトカインを含有する調製物の投与を１日以上行わない場合は、サイトカインを含む調製物を用いた処置期間は５日間である。別の例として、抗ＧＤ２抗体を含む調製物の２４時間にわたる連続輸注を１０日間連続して行った後、抗ＧＤ２抗体を含有する調製物の投与を１日以上行わない場合は、抗ＧＤ２抗体を含有する調製物を用いた処置期間は１０日間である。さらに別の例として、イソトレチノインの投与を１日２回１４日間行った後、イソトレチノインの投与を１日以上行わない場合は、イソトレチノインでの処置期間は１４日間である。このような処置期間は反復および／または重複していてもよい。例えば、図８および図９に示されるように、治療スケジュールは、ＩＬ−２での５日間の処置期間が２回あり、２回目の処置期間は、ｃｈ１４．１８（ＡＰＮ３１１）による１０日間（または１４−、１５−、または２１日間）の処置期間と重複しており、その後にイソトレチノインによる１４日間の処置期間が続く。

処置期間に関連して本明細書で使用される用語「組み合わせて」または「組み合わせ」は、同じおよび／または異なる薬物または処置での２以上の処置期間が、１つの処置サイクルに含まれることを意味する。この異なる薬物または処置での２以上の処置期間は、一部または全部が重複してもよいし、重複していなくてもよい。そのような処置期間は、同一および／または異なる薬物または処置を行わないインターバル期間によって分けられていてもよい。

本明細書で用いられる用語「処置サイクル」とは、その間の休止期間とともに定期的に反復される、１つまたはそれ以上の処置の過程または処置期間を意味する。例えば、１週間の処置に休止期間が３週間続く場合は１処置サイクルである。一実施形態では、１つの処置サイクルは、抗ＧＤ２抗体を含む調製物での１つの処置期間を含んでなる。処置サイクルは、場合により、サイトカインでの１以上の処置期間、レチノイドでの１以上の処置期間、および／または鎮痛剤での１以上の処置期間を含んでいてもよい。

一実施形態では、１つの処置サイクルは、２８日〜４９日、例えば２８、３５、４２または４９日、またはこれらの期間の間の任意の範囲を含んでなる。処置サイクルは、患者がそのサイクルに含まれるいずれかの処置（例えば、抗ＧＤ２抗体を含む調製物、および／またはサイトカイン、および／または任意の他の調製物の投与または処置）を初めて受ける日（即ち第１日目）をもって始まる。

抗ＧＤ２抗体および／またはサイトカインでの処置期間に、レチノイド（例えば、トレチノイン）による処置期間が直接または１日以上の無処置のインターバル期間（例えば、１、２、３、４または５日間の無処置期間）を伴って続いてもよい。一実施形態では、イソトレチノインは、１６０ｍｇ／ｍ²／日での用量で一日二回、１４日間（例えば、処置サイクルの第１９日目〜３２日目）経口投与される。イソトレチノインでの処置期間に、１日以上の無処置のインターバル期間（例えば、１、２、３、４または５日間の無処置期間）が続いていてもよい。

一実施形態では、処置サイクルは、サイトカインでの５日間の処置期間を２回含み（例えば処置サイクルの第１〜５日目および第８〜１２日目）、抗ＧＤ２抗体での１０日間の処置期間が１回（例えば、処置サイクルの第８〜１７日目に、１０または１５ｍｇ／ｍ²／日にて用量１００または１５０ｍｇ／ｍ²／サイクルを投与する）、そしてイソトレチノインでの１４日間の処置期間が１回（例えば、処置サイクルの第１９〜３２日目、その後第３６日目（第２の処置サイクルの第１日目）から始まる次のサイクルまでの３日間の無処置期間）続く。

一実施形態では、処置サイクルは、サイトカインでの５日間の処置期間を２回含み（例えば処置サイクルの第１〜５日目および第８〜１２日目）、抗ＧＤ２抗体での１４日間の処置期間が１回（例えば、処置サイクルの第８〜２１日目に、７または１５ｍｇ／ｍ²／日にて用量１００または２１０ｍｇ／ｍ²／サイクルを投与する）、そしてイソトレチノインでの１４日間の処置期間が１回（例えば、処置サイクルの第２６〜３９日目、その後第４３日目（第２の処置サイクルの第１日目）から始まる次のサイクルまでの３日間の無処置期間）が続く。

一実施形態では、処置サイクルは、サイトカインでの５日間の処置期間を２回含み（例えば処置サイクルの第１〜５日目および第８〜１２日目）、抗ＧＤ２抗体での１５日間の処置期間が１回（例えば、処置サイクルの第８〜２２日目に、１０ｍｇ／ｍ²／日にて用量１５０ｍｇ／ｍ²／サイクルを投与する）、そしてイソトレチノインでの１４日間の処置期間が１回（例えば、処置サイクルの第２６〜３９日目、その後第４３日目（第２の処置サイクルの第１日目）から始まる次のサイクルまでの３日間の無処置期間）が続く。

一実施形態では、処置サイクルは、サイトカインでの５日間の処置期間を２回含み（例えば処置サイクルの第１〜５日目および第８〜１２日目）、抗ＧＤ２抗体での２１日間の処置期間が１回（例えば、処置サイクルの第８〜２８日目に、７または１０ｍｇ／ｍ²／日にて用量１５０または２１０ｍｇ／ｍ²／サイクルを投与する）、そしてイソトレチノインでの１４日間の処置期間が１回（例えば、処置サイクルの第３３〜４６日目、その後第５０日目（第２の処置サイクルの第１日目）から始まる次のサイクルまでの３日間の無処置期間）が続く。

一実施形態では、処置サイクルは、免疫サイトカイン（例えばＡＰＮ３０１）での３日間の処置期間を１回含み（例えば処置サイクルの第４〜６日目）、サイトカイン（例えばＧＭ−ＣＳＦ）での処置期間が２回（例えば、処置サイクルの第１日目、第２日目、および第８〜１４日目）、そしてイソトレチノインでの１４日間の処置期間が１回（例えば、処置サイクルの第１１〜２４日目、その後第２９日目（第２の処置サイクルの第１日目）から始まる次のサイクルまでの４日間の無処置期間）が続く。

一実施形態では、処置サイクルは、抗ＧＤ２抗体を含む調製物（例えばｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０）の４日間の処置期間を１回（例えば、例えば用量２５ｍｇ／ｍ²／日にて、第０日目からはじまる２４日間の処置サイクル（ＧＭ−ＣＳＦをサイトカインとして用いる場合）の第３〜６日目、または第０日目からはじまる３２日間の処置サイクル（ＩＬ−２をサイトカインとして用いる場合）の第７〜１０日目；これを５サイクル（例えは、第１サイクルではＧＭ−ＣＳＦ、第２サイクルではＩＬ−２、第３サイクルではＧＭ−ＣＳＦ、第４サイクルではＩＬ−２、第５サイクルではＧＭ−ＣＳＦを使用））、サイトカインでの処置期間を２回（例えば、ＧＭ−ＣＳＦを２５０μｇ／ｍ²／日にて１４日間（第０日目からはじまる処置サイクルの第０〜１３日目）；またはアルデスロイキン（ＩＬ−２）を３ＭＩＵ／ｍ²／日（第０日目からはじまる処置サイクルの第０〜３日目）および４．５ＭＩＵ／ｍ²／日（第０日目からはじまる処置サイクルの第７〜１０日目）にて）、そしてＲＡ（例えばイソトレチノイン）での処置期間が１回（第０日目からはじまる処置サイクルの第１０〜２３日目（ＧＭ−ＣＳＦをサイトカインとして用いる場合）、または第０日目からはじまる処置サイクルの第１４〜２７日目（ＩＬ−２をサイトカインとして用いる場合））含んでなる。ある実施形態では、治療スケジュールは表２、３および／または４に示すとおりである。

処置サイクルは、同一か、または変更を加えた形（例えば、異なる用量若しくはスケジュールで、あるいは異なったさらなる処置（例えば、１以上の他のサイトカインによる）により）で繰り返すことができる。したがって、全処置期間（即ち、後続するすべての処置サイクルを含む期間、または全体の連続した処置期間を含む期間）は、少なくとも１または２あるいはそれ以上のサイクル、または１０サイクルまで含んでもよい。一実施形態では、全処置期間は３、４、５、６、７、８、９または１０サイクルを含む。上述したように、処置サイクルは無処置の期間（患者に処置を行わない、即ち、抗体、サイトカイン、他の薬物を投与しない、インターバル期間）を含んでいてもよい。従って、本明細書において用いられる、全体の治療時間は、処置サイクルに治療を行わない該インターバル期間を含んでいてもよい。

一実施形態では、上記で特定した３５、４２または４９日間の処置サイクルを、４または５回繰り返し、全体の連続的な処置期間は５または６の処置サイクルを含む。

好ましくは、本発明は以下のとおり定義される：
定義１：１日あたり２４時間の連続静脈内輸注として患者に抗ＧＤ２抗体を含む調製物を投与することによる、ＧＤ２陽性癌を治療するための方法。

定義２：抗ＧＤ２抗体を含む調製物が、腫瘍細胞溶解を誘導するのに十分な用量（細胞溶解の閾値用量）で投与される、定義１に記載の方法。

定義３：細胞溶解の閾値用量が患者ごとに個別に決定される定義２に記載の方法。

定義４：細胞溶解の閾値用量が補体依存性細胞溶解アッセイによって決定される、定義２または３に記載の方法。

定義５：細胞溶解の閾値用量が全血液検査によって決定される、定義２または３に記載の方法。

定義６：細胞溶解の閾値用量が、具体的なＣＤＣアッセイまたはＷＢＴにおいて、それぞれのアッセイにおいて最大限可能な標的細胞溶解の、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または１００％を誘導すると決定される用量である、定義１〜５のいずれかに記載の方法。

定義７：細胞溶解の閾値用量が、具体的なＣＤＣアッセイまたはＷＢＴにおいて、それぞれのアッセイにおいて最大限可能な標的細胞溶解の３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％または１００％を誘導すると決定される用量である、定義１〜６のいずれかに記載の方法。

定義８：細胞溶解閾値用量が４７０〜１０００、４７０〜１００００、１４１０〜３０００、または２３５０〜５０００ｎｇ／ｍＬ（血清または血漿）である、定義１〜７のいずれかに記載の方法。

定義９：細胞溶解の閾値用量が２〜２５０、２〜２５００、２〜１００、５〜２００、６〜７５０、６〜７５００、１０〜１２５０、１０〜１２５００、６〜３００、１０〜５００、１５〜６００または２５〜１０００ｎｇ／ｍＬ（全血）である、定義１〜８のいずれかに記載の方法。

定義１０：抗ＧＤ２抗体を含む調製物が、患者の血清、血漿又は全血における細胞溶解の閾値用量を抗ＧＤ２抗体を含む調製物を用いた処置の１、２、３または４日以内に達成する用量で投与される、定義１〜９のいずれかに記載の方法。

定義１１：前記細胞溶解の閾値が、全処置期間内の抗ＧＤ２抗体を含む調製物で処置されていない１以上の期間についても維持される、定義１〜１０のいずれかに記載の方法。

定義１２：細胞溶解のレベルが全体の処置サイクルにわたって維持される、定義１〜１１のいずれかに記載の方法。

定義１３：細胞溶解のレベルが全処置期間にわたって維持される、定義１〜１２のいずれかに記載の方法。

定義１４：抗ＧＤ２抗体を含む調製物が、１〜３０ｍｇ／ｍ²、１〜３５ｍｇ／ｍ²、１〜５０ｍｇ／ｍ²または１〜６０ｍｇ／ｍ²の日用量で投与される、定義１〜１３のいずれかに記載の方法。

定義１５：抗ＧＤ２抗体を含む調製物が、１、２、３、４、５、６、７、７．５、８、９、１０、１２、１５、２０、２５、３０、３２、３５、４０、４５、５０、または６０ｍｇ／ｍ²の日用量で投与される、定義の１〜１４のいずれかに記載の方法。

定義１６：抗ＧＤ２抗体を含む調製物を、患者の既定の総用量が投与されるまでの処置期間投与する、定義１〜１５のいずれかに記載の方法。

定義１７：抗ＧＤ２抗体を含む調製物を、特定の治療効果に達するまでの処置期間投与する、定義１〜１６のいずれかに記載の方法。

定義１８：抗ＧＤ２抗体を含む調製物をミニポンプを用いることにより投与する、定義１〜１７のいずれかに記載の方法。

定義１９：抗ＧＤ２抗体がキメラまたはヒト化抗体である、定義１〜１８のいずれかに記載の方法。

定義２０：抗ＧＤ２抗体がｃｈ１４．１８／ＣＨＯまたはｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０である定義の１〜１９のいずれかに記載の方法。

定義２１：抗ＧＤ２抗体を含む調製物がＡＰＮ３１１またはＡＰＮ３０１である、定義１〜２０のいずれかに記載の方法。

定義２２：抗ＧＤ２抗体を含む調製物が、７、１０、１５または２５ｍｇ／ｍ²／日の用量で投与される、定義１〜２１のいずれかに記載の方法。

定義２３：抗ＧＤ２抗体を含む調製物が、４、１０、１４、１５または２１日間連続して投与される定義１〜２２のいずれかに記載の方法。

定義２４：抗ＧＤ２抗体を含む調製物が、３、４、５または６つの処置サイクルについて投与される定義１〜２３のいずれかに記載の方法。

定義２５：抗ＧＤ２抗体を含む調製物が、ＡＰＮ３１１であり、６つの処置サイクルについて１０ｍｇ／ｍ²／日の用量で１０日間連続して投与される、定義１〜２４のいずれかに記載の方法。

定義２６：抗ＧＤ２抗体がｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０であり、５つの処置サイクルについて、２５ｍｇ／ｍ²／日の用量で４日間連続して投与される、定義１〜２４のいずれかに記載の方法。

定義２７：抗ＧＤ２抗体を含む調製物の投与に先行して、またはそれと共にＩＬ−２および／またはＧＭ−ＣＳＦまたは他のサイトカインの投与を行う、定義１〜２６のいずれかに記載の方法。

定義２８：抗ＧＤ２抗体を含む調製物の投与期間の後に、イソトレチノインまたは他のレチノイドの投与期間が続いてもよい、定義１〜２７のいずれかに記載の方法。

定義２９：抗ＧＤ２抗体を含む調製物の投与を、モルヒネおよび／または１以上の他の鎮痛薬の投与とともに行う、定義１〜２８のいずれかに記載の方法。

定義３０：本発明による抗体の１日以上の連続静脈内輸注の間におよび／または全てのモルヒネ処置日に投与されるモルヒネの日用量が、抗体の非連続的な投与の間のモルヒネの日用量よりも低い、定義１〜２９いずれかに記載の方法。

定義３１：モルヒネが、抗体が投与される日のすべてではなく何日間かのみ投与される、定義１〜３０のいずれかに記載の方法。

定義３２：本発明による抗体の連続的な静脈内輸注を含む１つ以上の処置サイクルの間に投与される処置サイクルあたりのモルヒネ用量が、非連続的な輸注スケジュールでの処置サイクルあたりのモルヒネ用量よりも低い、定義１〜３１のいずれかに記載の方法。

定義３３：全処置期間のモルヒネ投与量が、非連続的な輸注スケジュールにおける全処置期間のモルヒネ用量よりも低い、定義１〜３２のいずれかに記載の方法。

定義３４：本発明による１時間以上または１日以上の抗体の連続静脈内輸注の間におよび／またはモルヒネ処置の全ての時間または日に投与されるモルヒネ用量が、５０ｍｃｇ／ｋｇ／時よりも低い、または３０ｍｃｇ／ｋｇ／時よりも低い、定義１〜３３のいずれかに記載の方法。

定義３５：本発明による抗体の１日以上の連続静脈内輸注の間におよび／またはモルヒネ処置の全ての日に投与されるモルヒネの日用量が、０．９、０．７２、０．４８、０．３８、０．４３７５および／または０．２０５ｍｇ／ｋｇ／日よりも低い、定義１〜３４のいずれかに記載の方法。

定義３６：１つ以上の鎮痛剤、特にモルヒネ、の用量を、全処置期間に、処置サイクルにおいて、処置サイクルの抗体処置期間に、ある抗体処置日から次の抗体処置日までの間に、および／またはある処置サイクルから次の処置サイクルまでの間に、減少させる、定義１〜３５のいずれかに記載の方法。

定義３７：モルヒネの用量を、処置サイクルにおいて、処置サイクルの抗体処置期間に、および／または処置サイクルのある抗体処置日から次の抗体処置日までの間に、継続的に減少させる、定義１〜３６のいずれかに記載の方法。

定義３８：定義１〜３７のいずれかに記載の処置に使用するための抗ＧＤ２抗体。

定義３９：定義１〜３７のいずれかに記載の治療のための医薬の製造における抗ＧＤ２抗体の使用。

実施例１：ＡＰＮ３１１およびＡＰＮ３０１の配列および関連データ
ＡＰＮ３１１配列データ
1) http://web.expasy.org/compute_pi/により計算
2) 色素の分子量に起因して、２Ｄ−ＤＩＧＥの分子量は予想される分子量よりも高分子量側にシフトする

ヌクレオチド配列（ｃＤＮＡ、リーダー配列含む）
「ＴＡＧ」は、「終止コドン」として機能するので、ペプチド配列には翻訳されない。


ヌクレオチド１〜６０（取消し線）：リーダー配列
最後のヌクレオチド（取消し線）：終止コドン

ペプチド配列（シグナルペプチド含む）
シグナルペプチドは、翻訳後プロセシングの間に開裂し、最終の組換えタンパク質の一部とはならない。


アミノ酸１〜２０（取消し線）：リーダー配列

ＡＰＮ３０１配列データ

1) http://web.expasy.org/compute_pi/により計算
2) 色素の分子量に起因して、２Ｄ−ＤＩＧＥの分子量は予想される分子量よりも高分子量側にシフトする
3）ＩＬ−２はリンカーを介してＦｃ部分と共有結合しているので、還元的条件下では免疫サイトカインを開裂せず、従って、重鎖、抗体（１／２）および抗体は２Ｄ−ＤＩＧＥ上には存在しない。

ヌクレオチド配列（ｃＤＮＡ、リーダー配列含む）
「ＴＡＧ」および「ＴＧＡ」は、「終止コドン」として機能するので、ペプチド配列には翻訳されない。


ヌクレオチド１〜５７（取消し線）：リーダー配列
ヌクレオチド１３８７〜１３８５：ＩＬ−２配列
最後のヌクレオチド（取消し線）：終止コドン

ペプチド配列（シグナルペプチド含む）
シグナルペプチドは、翻訳後プロセシングの間に開裂し、最終の組換えタンパク質の一部とはならない。



アミノ酸１〜１９（取消し線）：リーダー配列
アミノ酸４６３〜５９５：ＩＬ−２配列

ｃｈ１４．１８／ＣＨＯ（ＡＰＮ３１１）抗体の２つのＧＭＰ準拠バッチを製造した。これら製造した２つの薬物のバッチは、ロットＴ６５１２０４−Ａ（抗体４．３ｍＬ（４．６ｍｇ／ｍＬ）を含有する）およびロットＴ９００３１０−Ａ（抗体４．５ｍＬ（４．５ｍｇ／ｍＬ）を含有する）であった。ＡＰＮ３１１モノクローナル抗体バルク調製物は、静脈内輸注用の濃縮液として製造される。

調製手順
抗体は、無菌条件下で準備する必要がある。適切な体積のｃｈ１４．１８／ＣＨＯ抗体（ＡＰＮ３１１）をバイアルからとる。抗体溶液が患者に輸注される前に、輸注中にインラインフィルターを用いる（いくつかのセンターでは、日常的にそうであるように）か、または粒子フィルター（例えばフィルターＮｒ．ＭＦ１８３０、Ｉｍｐｒｏｍｅｄｉｆｏｒｍ、ドイツ）を用いて、濾過（０．２〜１．２μｍ）することが推奨される。抗体の体積を１００ｍｌの０．９％ＮａＣｌおよび５ｍＬの２０％ヒトアルブミンを含有する輸液バッグに加える。

希釈するｃｈ１４．１８／ＣＨＯ（ＡＰＮ３１１）量の計算
投与するｃｈ１４．１８／ＣＨＯ（ＡＰＮ３１１）の量は以下のとおり計算する：
：投与量：１０ｍｇ／ｍ²／日、８−１７日目、２４時間の輸注として。

計算例：患者の体表面積（ＢＳＡ）が０．７の場合、その患者は１日あたり７ｍｇ（１０×０．７）、即ち１０日間の処置（１サイクル）で７０ｍｇを必要とする。

実施例２：ＣＤＣアッセイ法
ＣＤＣの原理（補体依存性細胞傷害）
ＧＤ２抗原陽性のＬＡＮ−１神経芽細胞腫癌細胞株（標的細胞）に対するＡＰＮ３０１またはＡＰＮ３１１の存在下での、正常なヒト血清または血漿の、またはこれら抗体の輸注後の患者の血清または血漿の、腫瘍細胞細胞毒性の誘導について、⁵¹クロム放出アッセイにて測定した。

標的細胞を、Ｎａ₂ ⁵¹Ｃｒ（ＶＩ）Ｏ₄（細胞膜を透過し、細胞質タンパク質に還元型のＣｒ−ＩＩＩ価の形で結合し、それによってもはやインタクトな細胞から漏出しない）とともにインキュベーションした。これらの細胞が、血清または血漿及び抗体または患者の血清または血漿とのインキュベーション後に溶解する場合は、試験した試料中の溶解能に依存して、放射能が上清中に放出される。

界面活性剤による自発的なバックグラウンド溶解及び全溶解（最大達成可能な細胞溶解または最大限可能な標的細胞溶解）を各実験について測定した。自発的な溶解を差し引いた後、試験した試料により誘導される溶解を全溶解の％として計算した。

血清または血漿のサンプリング：
血漿にはヘパリン処理したバキュテナーバイアルを、または血清には血清凝固バイアルを用いて、正常なヒトのドナーまたは患者からの全血を採取した。バイアルを２０００ｇで２０分間遠心分離した。上清の血漿または血清を直ちにアッセイに使用するか、または−２０℃で保存した（融解−再凍結はできない）。

⁵¹クロムによる標的細胞の標識：
ＬＡＮ−１細胞を、１０％熱不活化ＦＣＳを添加したＲＰＭＩ１６４０中で培養した。アッセイの前日に細胞を新しいフラスコと新しい培地に移した。

アッセイは、９６ウェル平底細胞培養プレートにて、各ウェルあたり８００ｎＣｉの⁵¹Ｃｒ活性を有する４×１０＃４個／ウェルの標識細胞を用いて、行った。

必要な量の細胞を培養フラスコから回収し、上清を遠心し、０．１％ＥＤＴＡ、１％ＦＣＳを添加したＰＢＳ １ｍｌ中に再懸濁した。計算された体積の⁵¹Ｃｒ溶液を添加し、細胞を３７℃で９０分間、５％ＣＯ₂にて、試験管を穏やかに回転させながらインキュベーションした。

次いで、細胞懸濁液を、細胞培養培地で２回洗浄して、細胞外の放射能を除去した。この培地にはさらに、１００Ｕ／ｍＬのペニシリンＧおよび１００μｇ／ｍＬの硫酸ストレプトマイシンを含有させた。洗浄後の標識細胞のペレットを、所望の４×１０⁵／ｍＬの濃度になるように再懸濁した。

アッセイ手順：
抗体の細胞溶解能を評価するために、下記をピペットで加えた。

５０μＬの試料（抗体希釈液）
１００μＬの１：４に予め希釈した正常なヒト血清または血漿
１００μＬの⁵¹Ｃｒ標識細胞懸濁液（４×１０⁵／ｍＬ）

ＣＤＣ用のアッセイプレートをＣＯ₂インキュベーター内で３７℃、５％ＣＯ₂にて４時間、あるいはＷＢＴと直接比較する場合は２０時間インキュベーションした。

次いで、各ウェルの上清を吸着カートリッジおよびハーベスティング・プレス（スカトロン）付きの回収フレームを用いて回収する。これらのカートリッジを細胞上清に浸し、ガンマカウンターの計数バイアルに移した。すべてのサンプルからの放射能（標識した標的細胞の損傷後のクロムの放出に比例する）を測定し、１分あたりのカウント（ｃｐｍ）で表す。結果は、界面活性剤用いて達成可能な最大の溶解のｃｐｍを１００％とした場合の、全てのサンプル値から自然溶解のｃｐｍを引いた％溶解として計算される。

１００×（試料のｃｐｍ−自然溶解のｃｐｍ）／（最大溶解のｃｐｍ−自然溶解のｃｐｍ）＝試料の％溶解

図１、図２、図３、及び図５に示す結果は、上述のＣＤＣアッセイ法を用いて得られた。

図７に示す結果は、同様のＣＤＣアッセイ法を用いて得たが、ＬＡＮ−１細胞のラベルとしてクロムの代わりにカルセインを使用した。

実施例３：ＷＢＴ方法
ＷＢＴ（全血試験）の原理：
ＧＤ２抗原陽性のＬＡＮ−１神経芽細胞腫癌細胞株（標的細胞）に対するＡＰＮ３０１またはＡＰＮ３１１の存在下での、正常なヒト全血の、またはこれら抗体の輸注後の患者の全血の、腫瘍細胞細胞毒性の誘導について、⁵¹クロム放出アッセイにて測定した。

標的細胞を、Ｎａ₂ ⁵¹Ｃｒ（ＶＩ）Ｏ₄（細胞膜を透過し、細胞質タンパク質に還元型のＣｒ−ＩＩＩ価の形で結合し、それによってもはやインタクトな細胞から漏出しない）とともにインキュベーションした。これらの細胞が、全血及び抗体または患者の全血とのインキュベーション後に溶解する場合は、試験した試料中の溶解能に依存して、放射能が上清中に放出される。

界面活性剤による自発的なバックグラウンド溶解及び全溶解（最大達成可能な細胞溶解または最大限可能な標的細胞溶解）を各実験について測定した。自発的な溶解を差し引いた後、試験した試料により誘導される溶解を全溶解に対する％として計算した。

採血：
正常なヒトのドナーまたは患者からの全血をヘパリン処理したバキュテナーバイアルを使用して採取した。

⁵¹クロムによる標的細胞の標識：
ＬＡＮ−１細胞を、１０％熱不活化ＦＣＳを添加したＲＰＭＩ １６４０中で培養した。アッセイの前日に細胞を新しいフラスコと新しい培地に移した。

アッセイは、９６ウェル平底細胞培養プレートにて、各ウェルあたり８００ｎＣｉの⁵¹Ｃｒ活性を有する４×１０＃４個／ウェルの標識細胞を用いて行った。

必要な量の細胞を培養フラスコから回収し、上清を遠心し、０．１％ＥＤＴＡ、１％ＦＣＳを添加したＰＢＳ １ｍｌ中に再懸濁した。計算された体積の⁵¹Ｃｒ溶液を添加し、細胞を３７℃で９０分間、５％ＣＯ₂にて、試験管を穏やかに回転させながらインキュベーションした。

次いで、細胞懸濁液を、細胞培養培地で２回洗浄して、細胞外の放射能を除去した。この培地にはさらに、１００Ｕ／ｍＬのペニシリンＧおよび１００μｇ／ｍＬの硫酸ストレプトマイシンを含有させた。洗浄後の標識細胞のペレットを、所望の４×１０⁵／ｍＬの濃度になるように再懸濁した。

アッセイ手順：
抗体の細胞溶解能を評価するために、下記をピペットで加えた。

５０μＬの試料（抗体希釈液）
１００μＬの１：２に予め希釈した正常なヒト全血
１００μＬの⁵¹Ｃｒ標識細胞懸濁液（４×１０⁵／ｍＬ）

患者の全血の細胞溶解能を評価するために、下記をピペットで加えた。

５０μＬの培地
１００μＬの１：２に予め希釈した正常なヒト全血
１００μＬの⁵¹Ｃｒ標識細胞懸濁液（４×１０⁵／ｍＬ）

アッセイプレートをＣＯ₂インキュベーター内で３７℃、５％ＣＯ₂にて２０時間インキュベーションした。

次いで、各ウェルの上清を吸着カートリッジおよびハーベスティング・プレス（スカトロン）付きの回収フレームを用いて回収する。これらのカートリッジを細胞上清に浸し、ガンマカウンターの計数バイアルに移した。すべてのサンプルからの放射能（標識した標的細胞の損傷後のクロムの放出に比例する）を測定し、１分あたりのカウント（ｃｐｍ）で表す。結果は、界面活性剤用いて達成可能な最大の溶解のｃｐｍを１００％とした場合の、全てのサンプル値から自然溶解のｃｐｍを引いた％溶解として計算される。

１００×（試料のｃｐｍ−自然溶解のｃｐｍ）／（最大溶解のｃｐｍ−自然溶解のｃｐｍ）＝試料の％溶解

図１、図２、図３、及び図４に示す結果は、上述のＷＢＴ法を用いて得られた。

実施例４：抗ＧＤ２抗体を含む調製物の連続静脈内輸注による患者の処置
再発性または難治性の神経芽細胞腫患者４１例に対し、ｃｈ１４．１８／ＣＨＯ（ＡＰＮ３１１）による処置の例外的使用を実施するに際し、抗ＧＤ２抗体免疫療法に常に伴う痛みを軽減するために、持続輸注様式を、皮下ＩＬ２およびイソトレチノインと組み合わせて行った。臨床応答は、メタヨードベンジルグアニジンシンチグラフィー（ｍｌＢＧ）、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）またはＸ線コンピュータ断層撮影（ＣＴ）、骨髄組織学（穿刺又はトレフィン生検によって評価）およびカテコールアミンの評価に基づいて、地元の医師が判断した。
ｍＬＢＧ：患者４１名のうち３１名が免疫療法の前にｍｌＢＧで検出された疾患を有していた。
これら３１名の患者のうち５名（１６％）が完全寛解（ＣＲ）、７名（２３％）が部分寛解（ＰＲ）、４名（１３％）が疾患の安定（ＳＤ）、および１３名（４２％）が疾患の進行（ＰＤ）を示した。２名の患者（６％）は評価不能であった。１名は免疫療法が利用可能であったがｍｌＢＧ検査を実施せず、もう１名の患者は免疫療法を実施した後に評価を行う前に、手術によって残っていた腫瘍を切除していた。

全体として、免疫療法前にｍｌＢＧで検出可能な疾患を有する３１名の患者のうち１２名（３９％）について、免疫療法後の寛解（ＣＲまたはＰＲ）が検出された。
さらに、３１名の患者のうち免疫療法の完了後に疾患の進行を示した３名（２３％）では、３回目の免疫療法サイクルの後に部分寛解が検出された。

ＭＲＩ／ＣＴ：４１名の患者のうち１３名は、免疫療法の前に、軟組織にＭＲＩまたはＣＴで検出可能な疾患を有していた。
ベースライン時に陽性のＭＲＩの示したもう１名の患者は、最終的なステージ再評価の前に、残っていた腫瘍を完全に切除していたために評価不能であった。３回の免疫療法サイクルの後、この患者は疾患の安定（ＳＤ）を示した。
ＭＲＩまたはＣＴで検出可能な疾患を持つ１３名の患者のうち５名（３８％）が部分寛解（ＰＲ）、４名（３１％）が疾患の安定（ＳＤ）、および３名（２３％）が疾患の進行（ＰＤ）を示した。１名（８％）の評価は保留されている。

骨髄：患者４１名のうち１９名は、免疫療法の前に骨髄に検出可能な疾患を持っていた。これらの１９名のうち４名（２１％）は各試験において免疫療法後の寛解を示した。さらに、６名（３２％）は３回の免疫療法サイクル後に寛解が検出された。しかし、３回のサイクル後、これら患者のうち４名（２１％）は他の検査で、２名は免疫療法の終了時に、疾患の進行（ＰＤ）を示した。

カテコールアミン：患者４１名のうち１８名は、免疫療法の前に、カテコールアミンレベル（バニルマンデル酸（ＶＭＡ）および／またはホモバニリン酸（ＨＶＡ））が増加していた。これらの１８名のうち７名（３９％）で、正常なカテコールアミンレベルが、３回の免疫療法サイクル後および／または免疫療法の終了後に検出された。

持続輸注様式での例外的使用の設定で処置した再発／難治性の患者において観察されるこれらの顕著な寛解率に加え、これらの患者のすべてにおいて、モルヒネによる処置を実質的に減少あるいはさらには完全に回避することを可能にする、痛みの副作用の優れた減少が認められた：
このスケジュールのモルヒネの静脈投与の標準用量は、３０μｇ／ｋｇ／時である。ｃｈ１４．１８／ＣＨＯ（ＡＰＮ３１１）の連続輸注を受けている患者では、ｃｈ１４．１８／ＣＨＯ（ＡＰＮ３１１）のボーラス輸注を受けた患者に比べて、静脈内投与に使用したモルヒネは有意に少なかった。多くの患者では、静脈内モルヒネ投与を完全に中止し、経口ガバペンチンのみで痛みを治療することも可能であった。ｃｈ１４．１８／ＣＨＯ（ＡＰＮ３１１）連続輸注中に用いたモルヒネは、図１０および表９に示す。抗体輸注は常に８日目に開始した。いずれも非連続的な抗体輸注スケジュールによる、以前のＩ相臨床試験での既定のモルヒネ用量１３．５ｍｇ／ｋｇ（０．９ｍｇ／ｋｇ／日、１サイクルにつき、１日８時間の輸注を５日間、これを３サイクル）、実施中の第ＩＩＩ相臨床試験の１０ｍｇ／ｋｇ（初日に８ｍｇ／ｋｇ／日、その後の処置日に０．３８ｍｇ／ｋｇ／日、１サイクルにつき、１日８時間の輸注を５日間、これを５サイクル）と比較して、全処置期間（全６処置サイクルからなる）あたりの実際のモルヒネ用量（３７名の患者の平均）は５．４ｍｇ／ｋｇであった。

また、第Ｉ／ＩＩ相試験（原発性の難治性または再発神経芽腫の患者における皮下アルデスロイキン（ＩＬ−２）と組み合わせた連続輸注によるＡＰＮ３１１投与）を下記のとおり設定した：
・固定した用量の皮下ＩＬ２と組み合わせてｃｈ１４．１８／ＣＨＯモノクローナル抗体（ＡＰＮ３１１）処置の免疫調節効果を維持しつつ、毒性（痛み）プロファイルを減らす。
・最大３つの用量レベル（総用量：１００ｍｇ／ｍ²−１５０ｍｇ／ｍ²−２００ｍｇ／ｍ²）までの、１０〜２１日間の持続輸注スキームを確立することにより、毒性（痛み）を低減する。
・患者のコンプライアンスを改善する。
・免疫療法の有効性を維持あるいはさらに改善する。

この第Ｉ／ＩＩ相試験の予備的結果は、ＧＤ２特異的抗体（ＡＰＮ３１１含む）を用いた治療中に頻繁に発生する動けない程の強い痛みを抑えるためのオピオイド、特にモルヒネ、の使用が、これらの患者において、最初の輸注サイクル中既に有意に少ないことを示している。３回目のサイクル以降は、改善された適用スキームにより患者の投薬に対する認容性が高まり、モルヒネを必要としなくなるため標準のモルヒネ投与を完全にやめることも可能である。

モルヒネの有意に減少した投与量は、オピオイド治療に関連する副作用を少なくし、従って、したがって外来治療さえも可能になり、ひいては小児患者が普通の子どもの生活が送れる能力（例えば遊んだり学校に通うなど）に良い影響を与える。

ＡＰＮ３１１による処置期間の初め（即ち第１日目）（処置サイクルの８日目に相当）に採取した血液試料は、ＡＰＮ３１１治療の開始前に採取した。

Claims (16)

1. １〜２５ｍｇ／ｍ²の日用量で且つ５０〜１５０ｍｇ／ｍ²／サイクルの用量で、１日あたり２４時間の連続静脈内輸注として患者に投与することによるＧＤ２陽性癌の処置において用いるための、ｃｈ１４．１８抗体を含む調製物であって、ｃｈ１４．１８抗体を含む医薬組成物の非連続な輸注スケジュールと比較して疼痛の副作用が実質的に減少する、調製物。
2. 調製物が、５０、６０、７５、８０、１００、１２０または１５０ｍｇ／ｍ²／サイクルの用量で患者に投与される、請求項１記載の調製物。
3. 調製物が、１〜１５または１〜２０ｍｇ／ｍ²の日用量で患者に投与される、請求項１または２に記載の調製物。
4. 調製物が、１、２、３、４、５、６、７、７．５、８、９、１０、１２、１５、２０または２５ｍｇ／ｍ²の日用量で患者に投与される、請求項１〜３のいずれかに記載の調製物。
5. 調製物が、２５ｍｇ／ｍ²未満の日用量で患者に投与される、請求項１〜４のいずれかに記載の調製物。
6. 調製物が、１０ｍｇ／ｍ²／日の用量で１０日間連続して、または１５、２０または２５ｍｇ／ｍ²／日の用量で４日間連続して患者に投与される、請求項１〜５のいずれかに記載の調製物。
7. ｃｈ１４．１８抗体がｃｈ１４．１８／ＣＨＯまたはｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０である請求項１〜６のいずれかに記載の調製物。
8. ｃｈ１４．１８抗体が配列番号３の軽鎖アミノ酸配列と配列番号４の重鎖アミノ酸配列を有する請求項１〜７のいずれかに記載の調製物。
9. ｃｈ１４．１８抗体を含む調製物が２以上の処置サイクルで投与される、請求項１〜８のいずれかに記載の調製物。
10. ｃｈ１４．１８抗体を含む調製物が、３、４、５、６、７、８、９または１０の処置サイクルで投与される、請求項１〜８のいずれかに記載の調製物。
11. ｃｈ１４．１８抗体を含む調製物が、ＡＰＮ３１１であって２以上の処置サイクルについて１０ｍｇ／ｍ²／日の用量で１０日間連続して投与される、またはｃｈ１４．１８抗体がｃｈ１４．１８／ＳＰ２／０であって２以上の処置サイクルについて１５、２０または２５ｍｇ／ｍ²／日の用量で４日間連続して患者に投与される、請求項１〜１０のいずれかに記載の調製物。
12. ｃｈ１４．１８抗体を含む調製物の投与に先行して、またはそれと共にＩＬ−２および／またはＧＭ−ＣＳＦまたは他のサイトカインの投与を行う、請求項１〜１１のいずれかに記載の調製物。
13. ａ）本発明のｃｈ１４．１８抗体を含有する調製物の１日以上の連続静脈内輸注の間におよび／または全てのモルヒネ処置日に投与されるモルヒネの日用量が、抗体の非連続的な投与の間のモルヒネの日用量よりも低い；
    ｂ）モルヒネが、ｃｈ１４．１８抗体を含有する調製物が投与される日のすべてではなく何日間かのみ投与される；
    ｃ）本発明のｃｈ１４．１８抗体を含有する調製物の連続的な静脈内輸注を含む１つ以上の処置サイクルの間に投与される処置サイクルあたりのモルヒネ用量が、ｃｈ１４．１８抗体を含有する調製物の非連続的な輸注スケジュールでの処置サイクルあたりのモルヒネ用量よりも低い；
    ｄ）全処置期間のモルヒネ投与量が、非連続的な輸注スケジュールにおける全処置期間のモルヒネ用量よりも低い；
    ｅ）本発明のｃｈ１４．１８抗体を含有する調製物の１時間以上または１日以上の抗体の連続静脈内輸注の間におよび／またはモルヒネ処置の全ての時間または日に投与されるモルヒネ用量が、５０ｍｃｇ／ｋｇ／時よりも低い、または３０ｍｃｇ／ｋｇ／時よりも低い；または
    ｆ）本発明のｃｈ１４．１８抗体を含有する調製物の１日以上の連続静脈内輸注の間におよび／またはモルヒネ処置の全ての日に投与されるモルヒネの日用量が、０．９、０．７２、０．４８、０．３８、０．４３７５および／または０．２０５ｍｇ／ｋｇ／日よりも低い、請求項１〜１２のいずれかに記載の調製物。
14. １つ以上の鎮痛剤、特にモルヒネ、の用量が、全処置期間に、処置サイクルにおいて、処置サイクルの抗体処置期間に、ある抗体処置日から次の抗体処置日までの間に、および／またはある処置サイクルから次の処置サイクルまでの間で、減少する、請求項１〜１３のいずれかに記載の調製物。
15. ＧＤ２陽性癌が、神経芽細胞腫、神経膠芽腫、髄芽腫、星状細胞腫、メラノーマ、小細胞肺癌、線維形成性小円形細胞腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、またはその他の軟部肉腫である、請求項１〜１４のいずれかに記載の調製物。
16. 患者が、一次不応性または再発の高リスクの神経芽細胞腫、または高リスクの神経芽細胞腫における微小な残存疾患に罹患している、請求項１〜１５のいずれかに記載の調製物。