JP6051305B2 - プロトポルフィリンｉｘ生成促進用医薬組成物 - Google Patents

Description

本発明は、感染症治療のためのＡＬＡ−ＰＤＴにおける、プロトポルフィリンＩＸ生成促進用医薬組成物に関する。

光線力学的療法（Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ；ＰＤＴ）は、光増感剤を対象に投与し、光励起によって生成される一重項酸素をはじめとする活性酸素種の殺細胞性を利用した治療法である。ＰＤＴは非侵襲的かつ治療跡が残りにくい治療法であるため、近年注目を集めている。

他方、５−アミノレブリン酸類（本明細書において、「ＡＬＡ類」ともいう）は動物や植物や菌類に広く存在する、生体内に含まれる天然のアミノ酸の一種である。ＡＬＡ類はそれ自体には光感受性はないものの、細胞内でヘム生合成経路の一連の酵素群により代謝活性化されたプロトポルフィリンＩＸ（以下「ＰｐＩＸ」ともいう）が４１０ｎｍ、５１０ｎｍ、５４５ｎｍ、５８０ｎｍ、６３０ｎｍ等にピークがある光増感剤として知られており、対象にＡＬＡ類の投与とＰＤＴを組み合わせて行う、５−アミノレブリン酸類−光線力学的療法（以下「ＡＬＡ−ＰＤＴ」ともいう）の研究が進められている。

近年、感染症の治療のためにＡＬＡ−ＰＤＴを用いる研究が行われており、抗菌薬を用いない感染症の治療方法として注目を集めている（非特許文献１）。しかし、本発明者らは、感染症の原因となる一部の病原微生物には、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに対して耐性を示すものが存在すること発見した。とりわけ緑膿菌においては、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに耐性を示すものには、多剤耐性緑膿菌（ｍｕｌｔｉ−ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ：ＭＤＲＰ）が含まれることを見出した。すなわち、本発明者らは、感染症の治療のためにＡＬＡ−ＰＤＴにおける、新規な課題を提示した。しかし、これまで、病原微生物がＡＬＡ−ＰＤＴに耐性を示すメカニズムについては、全く解明されておらず、この課題を解決するためのボトルネックとなっていた。

ＭＤＲＰによる感染症は医療機関において多く発生が報告されている。ＭＤＲＰは免疫抑制剤の使用や後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）等により免疫力の低下した人、長期間の入院や手術などで体力を消耗している人、寝たきりの状態にある老人等に感染し、重篤な症状を引き起こすことが報告されており、極めて大きな社会問題となっている。

これらの問題に対し、２種以上の抗菌薬を併用して、その相乗および相加効果により感染症の治療を行う方法が検討されている（非特許文献２）。また、ＭＤＲＰに対して優れた抗菌活性を有するカルバペネム誘導体等の新規な誘導体を見出すための研究が種々行われている（特許文献１）。しかし、依然として、ＭＤＲＰによる感染症の有効な治療方法は確立されておらず、感染を予防することが主な対策となっている。

また今後、ＭＤＲＰに対して有効な抗菌薬、または、抗菌薬の組合せが開発されたとしても、これらの薬剤に対してさらに耐性を示す緑膿菌が出現することは当然に予測されることである。以上の理由から、抗菌薬のみに頼らない新規なＭＤＲＰの治療方法の開発が強く求められてきた。

特開平７−１３３２７７号公報

Ｃｈｉａ−Ｆｅｎ Ｌｅｅ， Ｃｈｉ−Ｊｕｉ Ｌｅｅ， Ｃｈｉｎ−Ｔｉｎ Ｃｈｅｎ， Ｃｈｉｎｇ−Ｔｓａｎ Ｈｕａｎｇ，"ｄ−Ａｍｉｎｏｌａｅｖｕｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｎ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ｐｌａｎｋｔｏｎｉｃ ａｎｄ ｂｉｏｆｉｌｍ ｃｕｌｔｕｒｅｓ"，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌｏｇｙ Ｂ：Ｂｉｏｌｏｇｙ．Ｖｏｌ．７５，ｐｐ２１−２５（２００４）． 岡陽子，「多剤耐性緑膿菌に対する抗菌薬の併用効果」，日本化学療法学会雑誌，社団法人日本化学療法学会，平成１７年８月，第５３巻，第８号，ｐ．４７６−４８２

本発明は、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに耐性を示す感染症において、その耐性メカニズムを解明し、これらの感染症に対する新規な治療方法を提供することを課題とした。

上記のとおり、本発明者らは、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに対して耐性を示す感染症が存在することを初めて発見した。とりわけ、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに対して耐性を示す感染症には、多剤耐性緑膿菌が含まれることを発見した。すなわち、本発明者らは、感染症の治療のためのＡＬＡ−ＰＤＴにおける、医学上および公衆衛生上、極めて重要な課題を初めて提示した。

本発明者らは、上記の課題を解決すべく、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに対して耐性を示す感染症の、その耐性メカニズムについて鋭意研究を重ねた。その結果、驚くべきことに、そのような感染症の原因となる病原微生物にＡＬＡ類を適用した場合、当該微生物に取り込まれたＡＬＡ類は、ＡＬＡ−ＰＤＴの作用点であるプロトポルフィリンＩＸ（ＰｐＩＸ）にはほとんど変換されず、その前駆体であるコプロポルフィリノーゲンＩＩＩ（ＣＰＩＩＩ）で代謝が止まることを突き止めた。すなわち本発明者らは、この現象こそが、一部の感染症がＡＬＡ−ＰＤＴに対して耐性を示す原因であることを初めて突き止めた（本明細書の実施例１を参照のこと）。

次いで、本発明者らは、上記の知見を基に、ＣＰＩＩＩからＰｐＩＸへの代謝を促進する物質について鋭意探索を行った。その結果、驚くべきことに、所定の物質（例えば、キレート剤、過酸化水素、アスコルビン酸）の対象への投与とＡＬＡ−ＰＤＴとを組み合わせることにより、ＣＰＩＩＩからＰｐＩＸへの変換を促進させることができ、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに耐性を示す感染症に対してもＡＬＡ−ＰＤＴを有効に作用させることができることを見出し、本発明を完成させるに到った（本明細書の実施例２および３を参照のこと）。

すなわち、本発明は、感染症治療のためのＡＬＡ−ＰＤＴにおける、プロトポルフィリンＩＸ生成促進用医薬組成物であって、コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質を含むことを特徴とする、医薬組成物に関する。

ここで、本発明の一実施態様においては、前記「コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質」が、キレート剤、過酸化水素、および、アスコルビン酸からなる群から選択されることを特徴とする。

また、本発明の一実施態様においては、前記キレート剤が、アミノポリカルボン酸系キレート剤、ヒドロキシカルボン酸系キレート剤、デフェロキサミン、デフェラシクロス、および、デフェリプロンからなる群から選択されることを特徴とする。

また、本発明の一実施態様においては、前記アミノポリカルボン酸系キレート剤が、エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレンジアミンジ酢酸、ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、ジヒドロキシエチルエチレンジアミン四酢酸（ＤＨＥＤＤＡ）、ニトリロ酸酢酸（ＮＴＡ）、ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（ＨＩＤＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸、β−アラニンジ酢酸、シクロヘキサンジアミンテトラ酢酸、ニトリロトリ酢酸、イミノジ酢酸、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノジ酢酸、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）エチレンジアミントリ酢酸、グリコールエーテルジアミンテトラ酢酸、グルタミン酸ジ酢酸、アスパラギン酸ジ酢酸、メチルグリシンジ酢酸、イミノジコハク酸、セリンジ酢酸、ヒドロキシイミノジコハク酸、ジヒドロキシエチルグリシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、および、トリエチレンテトラミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’，Ｎ’’’−六酢酸、ならびに、これらの薬学的に許容される塩、からなる群から選択されることを特徴とする。

また、本発明の一実施態様においては、前記ヒドロキシカルボン酸系キレート剤が、リンゴ酸、クエン酸、グリコール酸、グルコン酸、ヘプトン酸、酒石酸、および、乳酸、ならびに、これらの薬学的に許容される塩、からなる群から選択されることを特徴とする。

また、本発明の一実施態様においては、前記感染症治療が、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに耐性を示す感染症の治療であることを特徴とする。

また、本発明の一実施態様においては、前記感染症が、緑膿菌感染症であることを特徴とする。

また、本発明の一実施態様においては、前記緑膿菌感染症が、多剤耐性緑膿菌感染症であることを特徴とする。

また、本発明の一実施態様においては、前記多剤耐性緑膿菌感染症が、少なくともフルオロキノロン系抗菌薬、カルバペネム系抗菌薬、および、アミノグリコシド系抗菌薬に対して抵抗性を示す緑膿菌感染症であることを特徴とする。

本発明の他の実施態様においては、対象における感染症治療のためのＡＬＡ−ＰＤＴにおける、プロトポルフィリンＩＸ生成促進方法であって、治療上有効量の、コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質を対象に投与することを特徴とする、方法を提供する。

本発明の他の実施態様においては、順次または同時に投与する、（１）ＡＬＡ類、および、（２）キレート剤、過酸化水素、および、アスコルビン酸からなる群から選択される物質を含む、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに耐性を示す緑膿菌感染症の治療用の組み合わせ医薬を提供する。

また、本発明の一実施態様においては、前記組み合わせ医薬における前記組み合わせの態様が、配合剤であることを特徴とする。

また、本発明の一実施態様においては、前記組み合わせ医薬における前記組み合わせの態様が、キットであることを特徴とする。

本発明の他の実施態様においては、対象の緑膿菌感染症の治療方法であって、対象に対して、（１）ＡＬＡ類、および、（２）キレート剤、過酸化水素、および、アスコルビン酸からなる群から選択される物質を、順次または同時に投与することを特徴とする、方法を提供する。

以上述べた本発明の一または複数の特徴を任意に組み合わせた発明も、本発明の範囲に含まれる。

本発明によれば、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに耐性を示す感染症の治療を行うことができる。とりわけ、本発明によれば、これまで有効な治療方法が見出されていなかった、ＭＤＲＰ感染症の治療が可能となる。すなわち、本発明は、医学上極めて重要な発明である。

本発明に係る感染症の治療方法は、抗菌薬による感染症の治療方法とは全く異なるメカニズムの治療方法であるため、薬剤耐性菌の出現を心配する必要がない。すなわち、本発明の治療方法によれば、現在大きな社会問題となっている薬剤耐性菌の出現の問題を回避することができる。すなわち、本発明は、公衆衛生上も極めて重要な発明である。

また、本発明よる感染症治療と、抗菌薬による感染症治療を併用することもできる。例えば、重篤な症状を示し、緊急の治療が必要な感染症の患者に対し、２つの異なるメカニズムの治療方法（すなわち、本発明による感染症治療と、抗菌薬による感染症治療）を併用することにより、より高い治療効果をあげることができる。

とりわけ、本発明によれば、緑膿菌がＭＤＲＰか否かに関わらず、緑膿菌感染症の治療を行うことができる。したがって、医療機関において患者の緑膿菌感染症の治療を行う場合に、原因菌がＭＤＲＰか否かを判断することなく、患者に対して本発明を用いて治療を行うことにより、患者の中でＭＤＲＰが出現することを予防することができる。また、万が一、緑膿菌感染症の原因菌がＭＤＲＰであった場合の、症状の重篤化を未然に防ぐこともできる。

さらに、ＭＤＲＰの感染による重篤化は、免疫抑制剤の使用や後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）等により免疫力の低下した人、長期間の入院や手術などで体力を消耗している人、寝たきりの状態にある老人等において多く報告されている。一方、ＡＬＡ−ＰＤＴは非侵襲的な治療方法であるため、上記のような免疫力が低下している対象や、体力が低下している患者に対して、好ましい治療方法であるといえる。また、ＡＬＡ類は人体に対して安全性の高い物質であり、抗菌薬を投与する場合と比較して薬物アレルギー等の心配が少ない。また、患者へのＡＬＡ類の投与方法は、塗布する、飲む等、患者の体調や症状にあわせて選択することができる。すなわち本発明は、偶然にも、ＭＤＲＰ感染による症状の重篤化の危険性が高い患者に対して、特に適した治療方法を提供する。

図１は、ＭＤＲＰに対してＡＬＡおよびＥＤＴＡを添加してＰＤＴを行った場合（ＰＤＴ群）と、ＭＤＲＰに対してＡＬＡおよびＥＤＴＡを添加して、ＰＤＴを行わなかった場合（非ＰＤＴ群）とにおける、処置後のＭＤＲＰの菌数を比較したグラフを示す。

本明細書において、ＡＬＡ類とは、ＡＬＡ若しくはその誘導体又はそれらの塩をいう。

本明細書において、ＡＬＡは、５−アミノレブリン酸を意味する。ＡＬＡは、δ−アミノレブリン酸ともいい、アミノ酸の１種である。

ＡＬＡ誘導体としては、下記式（Ｉ）で表される化合物を例示することができる。式（Ｉ）において、Ｒ^１は、水素原子又はアシル基を表し、Ｒ^２は、水素原子、直鎖若しくは分岐状アルキル基、シクロアルキル基、アリール基又はアラルキル基を表す。なお、式（Ｉ）において、ＡＬＡは、Ｒ^１及びＲ^２が水素原子の場合に相当する。

ＡＬＡ類は、生体内で式（Ｉ）のＡＬＡ又はその誘導体の状態で有効成分として作用すればよく、生体内の酵素で分解されるプロドラッグ（前駆体）として投与することもできる。

式（Ｉ）のＲ^１におけるアシル基としては、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、バレリル、イソバレリル、ピバロイル、ヘキサノイル、オクタノイル、ベンジルカルボニル基等の直鎖又は分岐状の炭素数１〜８のアルカノイル基や、ベンゾイル、１−ナフトイル、２−ナフトイル基等の炭素数７〜１４のアロイル基を挙げることができる。

式（Ｉ）のＲ^２におけるアルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル基等の直鎖又は分岐状の炭素数１〜８のアルキル基を挙げることができる。

式（Ｉ）のＲ^２におけるシクロアルキル基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロドデシル、１−シクロヘキセニル基等の飽和、又は一部不飽和結合が存在してもよい、炭素数３〜８のシクロアルキル基を挙げることができる。

式（Ｉ）のＲ^２におけるアリール基としては、フェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル基等の炭素数６〜１４のアリール基を挙げることができる。

式（Ｉ）のＲ^２におけるアラルキル基としては、アリール部分は上記アリール基と同じ例示ができ、アルキル部分は上記アルキル基と同じ例示ができ、具体的には、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピル、フェニルブチル、ベンズヒドリル、トリチル、ナフチルメチル、ナフチルエチル基等の炭素数７〜１５のアラルキル基を挙げることができる。

好ましいＡＬＡ誘導体としては、Ｒ^１が、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル基等である化合物が挙げられる。また、好ましいＡＬＡ誘導体としては、上記Ｒ^２が、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル基等である化合物が挙げられる。また、好ましいＡＬＡ誘導体としては、上記Ｒ^１とＲ^２の組合せが、（ホルミルとメチル）、（アセチルとメチル）、（プロピオニルとメチル）、（ブチリルとメチル）、（ホルミルとエチル）、（アセチルとエチル）、（プロピオニルとエチル）、（ブチリルとエチル）の各組合せである化合物が挙げられる。

ＡＬＡ類のうち、ＡＬＡ又はその誘導体の塩としては、薬理学的に許容される酸付加塩、金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩等を挙げることができる。酸付加塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、リン酸塩、硝酸塩、硫酸塩等の各無機酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、トルエンスルホン酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、グリコール酸塩、メタンスルホン酸塩、酪酸塩、吉草酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩等の各有機酸付加塩を例示することができる。金属塩としては、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等の各アルカリ金属塩、マグネシウム、カルシウム塩等の各アルカリ土類金属塩、アルミニウム、亜鉛等の各金属塩を例示することができる。アンモニウム塩としては、アンモニウム塩、テトラメチルアンモニウム塩等のアルキルアンモニウム塩等を例示することができる。有機アミン塩としては、トリエチルアミン塩、ピペリジン塩、モルホリン塩、トルイジン塩等の各塩を例示することができる。なお、これらの塩は使用時において溶液としても用いることができる。

以上のＡＬＡ類のうち、もっとも望ましいものは、ＡＬＡ、及び、ＡＬＡメチルエステル、ＡＬＡエチルエステル、ＡＬＡプロピルエステル、ＡＬＡブチルエステル、ＡＬＡペンチルエステル等の各種エステル類、並びに、これらの塩酸塩、リン酸塩、硫酸塩である。とりわけ、ＡＬＡ塩酸塩、ＡＬＡリン酸塩を特に好適なものとして例示することができる。

上記ＡＬＡ類は、例えば、化学合成、微生物による生産、酵素による生産など公知の方法によって製造することができる。また、上記ＡＬＡ類は、水和物又は溶媒和物を形成していてもよく、またＡＬＡ類を単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることもできる。

上記ＡＬＡ類を水溶液として調製する場合には、ＡＬＡ類の分解を防ぐため、水溶液がアルカリ性とならないように留意する必要がある。アルカリ性となってしまう場合は、酸素を除去することによって分解を防ぐことができる。

本明細書において、ＡＬＡ−ＰＤＴとはＡＬＡ類を用いる光線力学的療法（ＰＤＴ）を意味し、最も典型的には、ＡＬＡを用いるＰＤＴを意味する。

上記ＡＬＡ−ＰＤＴは、光に反応する化合物を投与し、光を照射することにより標的箇所を治療するＰＤＴを行う際に、それ自身は光増感作用を有さないＡＬＡ類を投与し、色素生合成経路を経て誘導されたＰｐＩＸを感染症の原因となる微生物に集積させ、微生物に蓄積したＰｐＩＸを励起させることで、周囲の酸素分子を光励起し、その結果生成する一重項酸素が、その強い酸化力による殺細胞効果を有することを利用する感染症の治療剤に用いられる方法である。上記ＰｐＩＸを励起させる光の波長としては、４００ｎｍ〜７００ｎｍが好ましい。

本明細書において、「コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質」とは、生体内でのＡＬＡ類の代謝経路において、特にコプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を直接的にまたは間接的に促進する物質を意味する。

本明細書において、「コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質」の例示としては、キレート剤、過酸化水素、アスコルビン酸を挙げることができるが、これらに限定されない。

本明細書において、キレート剤とは、複数の配位座をもつ配位子（多座配位子）を有することにより、金属イオンに結合（配位）する物質をいう。

上記のキレート剤としては、例えば、アミノポリカルボン酸系キレート剤、芳香族または脂肪族カルボン酸系キレート剤、アミノ酸系キレート剤、エーテルカルボン酸系キレート剤、ホスホン酸系キレート剤、ヒドロキシカルボン酸系キレート剤、高分子電解質（オリゴマー電解質を含む）系キレート剤、ポリアルコール、ジメチルグリオキシム等の窒素含有キレート剤、チオグリコール酸等の硫黄含有キレート剤、デフェロキサミン、デフェラシクロス、デフェリプロンなどが挙げられる。

これらのキレート剤の形態は任意であり、酸系キレート剤の場合には、フリーの酸型であっても、ナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩等の塩の形であってもよい。さらに、それらは、加水分解可能なそれらのエステル誘導体の形であってもよい。

限定されないが、本発明においてはキレート剤としてアミノポリカルボン酸系キレート剤、ヒドロキシカルボン酸系キレート剤、デフェロキサミン、デフェラシクロス、および／または、デフェリプロンを好適に用いることができる。

アミノポリカルボン酸系キレート剤としては、例えば、エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレンジアミンジ酢酸、ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、ジヒドロキシエチルエチレンジアミン四酢酸（ＤＨＥＤＤＡ）、ニトリロ酸酢酸（ＮＴＡ）、ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（ＨＩＤＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸、β−アラニンジ酢酸、シクロヘキサンジアミンテトラ酢酸、ニトリロトリ酢酸、イミノジ酢酸、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノジ酢酸、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）エチレンジアミントリ酢酸、グリコールエーテルジアミンテトラ酢酸、グルタミン酸ジ酢酸、アスパラギン酸ジ酢酸、メチルグリシンジ酢酸、イミノジコハク酸、セリンジ酢酸、ヒドロキシイミノジコハク酸、ジヒドロキシエチルグリシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、および、トリエチレンテトラミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’，Ｎ’’’−六酢酸、ならびにこれらの塩類およびエステル類など誘導体が挙げられる。

ヒドロキシカルボン酸系キレート剤としては、例えば、リンゴ酸、クエン酸、グリコール酸、グルコン酸、ヘプトン酸、酒石酸、および乳酸、ならびにこれらの塩類および誘導体が挙げられる。

デフェロキサミンは、その塩類や誘導体も用いることができるが、特にデフェロキサミンメシル酸塩が好適に用いられる。デフェロキサミンメシル酸塩はデスフェラール（ｄｅｓｆｅｒａｌ）と呼ばれることもある。デフェロキサミンメシル酸塩は生体内への投与（例えば、注射による投与）が認められているため、例えば本発明においてキレート剤を生体内に直接投与する場合に好適に用いることができる。デフェラシロクスやデフェリプロンも生体内への投与（例えば、経口投与）が認められているため、例えば本発明においてキレート剤を生体内に直接投与する場合に好適に用いることができる。

本発明において、キレート剤は１種の化合物から構成されていてもよいし、２種以上の化合物を組み合わせて使用してもよい。

本明細書において、「アスコルビン酸」とは、アスコルビン酸若しくはその誘導体又はその塩を含む概念であり、ビタミンＣともいう。また、天然に存在するのはＬ−アスコルビン酸であるが、本発明ではＬ−アスコルビン酸、化学合成にて得られるＤ−アスコルビン酸のどちらでも好適に使用できる。

本発明を用いるＡＬＡ−ＰＤＴの対象となる疾患は、細菌感染症、真菌感染症、ウイルス感染症、寄生虫感染症などの感染症であれば特に限定されないが、特に細菌感染症に好適に用いられる。本発明の医薬組成物を用いるＡＬＡ−ＰＤＴを好適に用いることができる細菌感染症としては、黄色ブドウ球菌感染症または緑膿菌感染症を挙げることができる。

本明細書において、「ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴ」とは、ＡＬＡ−ＰＤＴにおいて、ＡＬＡ類以外のＡＬＡ−ＰＤＴの効果に影響を与える物質を用いないことを意味する。

本発明において、感染症が「ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに耐性を示す」とは、当該感染症の原因となる病原体に対してＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴを適用しても、ＰＤＴを行わないこと以外は同条件で実験を行った場合と比較して、細菌数がほとんど変わらないことを意味する。例えば、当該感染症の原因となる病原体に対してＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴ（例えば、波長４１０nm、５０Ｊ／ｃｍ^２）を適用しても、ＰＤＴを行わないこと以外は同条件で実験を行った場合と比較して、細菌数が１０％以上残存することを意味し得る。

本発明において、多剤耐性緑膿菌（ＭＤＲＰ）とは、少なくともフルオロキノロン系抗菌薬（例えば、シプロフロキサシン、レボフロキサシン）、カルバペネム系抗菌薬（例えば、イミペネム、メロペネム）、および、アミノグリコシド系抗菌薬（例えば、アミカシン）に対して抵抗性を示す緑膿菌を意味する。すなわち、フルオロキノロン系抗菌薬のうち少なくとも１種、カルバペネム系抗菌薬のうち少なくとも１種、および、アミノグリコシド系抗菌薬のうち少なくとも１種に対して耐性を示す緑膿菌であれば、本発明における「多剤耐性緑膿菌」に含まれるものとする。

対象とする緑膿菌がＭＤＲＰであることは、例えば、対象とする緑膿菌の最小発育阻止濃度（ｍｉｎｉｍａｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ；ＭＩＣ）が、それぞれアミカシン≧３２μｇ／ｍｌ、イミペネム≧１６μｇ／ｍｌ、シプロフロキサシン≧４μｇ／ｍｌであることを確認することによって行うことができる。

本発明を用いてＡＬＡ−ＰＤＴを行う場合、対象へのＡＬＡ類の投与と、「コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質」の投与とは、同時であってもよく、異時であってもよい。すなわち、ＡＬＡ類を先に対象に投与し、その後に「コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質」を投与してもよく、またその逆でもよい。

本発明を用いてＡＬＡ−ＰＤＴを行う場合、ＡＬＡ類の投与法としては、舌下投与も含む経口投与及び点滴を含む静脈注射、パップ剤、座薬、塗布される溶液タイプ等による経皮投与を挙げることができ、これらの中でも経皮投与や経口投与が好ましく、効率性及び簡便性の点から考慮すると、塗布による経皮投与を好適に例示することができる。経口投与剤型の治療剤の剤型としては、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、懸濁液等を挙げることができ、静脈注射剤型の治療剤としては、注射剤、点滴剤等を挙げることができる。また、経皮投与型の治療剤の剤型としては、溶液タイプ、水溶性軟膏溶解タイプ、クリームタイプ、ゼリー剤溶解タイプ、スプレータイプ等を挙げることができる。例えば、塗布される溶液タイプによる経皮投与法としては、ＡＬＡ類溶液を十分含ませたガーゼ、脱脂綿等の液体保持材を、緑膿菌が感染している皮膚に接触させる方法を具体的に挙げることができる。ＡＬＡ類の投与量としては、対象微生物へのＰｐＩＸの集積量がＡＬＡ−ＰＤＴにおける有効量であればよく、具体的なＡＬＡ類の投与量としては、例えば経口投与の場合、ＡＬＡ換算で体重１ｋｇあたり、１ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは５ｍｇ〜１００ｍｇ、より好ましくは１０ｍｇ〜３０ｍｇ、さらに好ましくは１５ｍｇ〜２５ｍｇであり、塗布される溶液タイプによる経皮投与の場合、ＡＬＡ類溶液の濃度が、ＡＬＡ換算で１重量％〜９０重量％、好ましくは２重量％〜４０重量％、より好ましくは１０重量％〜２０重量％である。また、ＡＬＡ類を溶液の形態で使用する場合は、ＡＬＡ類の分解を防ぐため、水溶液がアルカリ性とならないように留意して調製することが好ましい。アルカリ性となってしまう場合は、酸素を除去することによって有効成分の分解を防ぐことができる。

本発明を用いてＡＬＡ−ＰＤＴを行う場合、「コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質」の投与法としては、舌下投与も含む経口投与及び点滴を含む静脈注射、パップ剤、座薬、塗布される溶液タイプ等による経皮投与を挙げることができる。キレート剤、アスコルビン酸の投与方法としては、舌下投与も含む経口投与及び点滴を含む静脈注射、パップ剤、座薬、塗布される溶液タイプ等による経皮投与を挙げることができる。過酸化水素の投与方法としては、点滴を含む静脈注射、パップ剤、座薬、塗布される溶液タイプ等による経皮投与を挙げることができる。経口投与剤型の治療剤の剤型としては、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、懸濁液等を挙げることができ、静脈注射剤型の治療剤としては、注射剤、点滴剤等を挙げることができる。また、経皮投与型の治療剤の剤型としては、溶液タイプ、水溶性軟膏溶解タイプ、クリームタイプ、ゼリー剤溶解タイプ、スプレータイプ等を挙げることができる。例えば、塗布される溶液タイプによる経皮投与法としては、「コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質」を十分含ませたガーゼ、脱脂綿等の液体保持材を、緑膿菌が感染している皮膚に接触させる方法を具体的に挙げることができる。

本発明を用いてＡＬＡ−ＰＤＴを行う場合、ＡＬＡ類の投与方法と、「コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質」の投与法とは、同じでもよく、異なってもよい。例えば、ＡＬＡ類を対象に経口投与し、「コプロポルフィリノーゲンＩＩＩからプロトポルフィリンＩＸへの変換を促進する物質」を経皮投与してもよい。

本発明に係る治療方法の対象は、典型的にはヒトであるが、愛玩動物、実験動物、家畜など非ヒト動物である場合も含む。また、好ましくない場合には、対象からヒトを除くこともできる。

本明細書において、「組み合わせ医薬」とは、２以上の物質や組成物の組み合わせであって、その組み合わせの態様を限定しない医薬を意味する。

本明細書において、（１）ＡＬＡ類、および、（２）キレート剤、過酸化水素、および、アスコルビン酸からなる群から選択される物質、の組み合わせの態様が「配合剤」であるとは、本発明に係る組み合わせ医薬の一実施態様として、（１）および（２）を同時に投与するために、それぞれの物質が同一の組成物中に配合されていることを意味する。

本明細書において、（１）ＡＬＡ類、および、（２）キレート剤、過酸化水素、および、アスコルビン酸からなる群から選択される物質、の組み合わせの態様が「キット」であるとは、本発明に係る組み合わせ医薬の一実施態様として、（１）および（２）が別々に準備されていることを意味する。このような態様においては、（１）および（２）が別々に準備されているので、対象に（１）および（２）を順次または同時に投与することができる。

本明細書において、（１）ＡＬＡ類、および、（２）キレート剤、過酸化水素、および、アスコルビン酸からなる群から選択される物質、を「同時に投与する」とは、例えば、（１）および（２）の組み合わせの態様が配合剤である場合のように、（１）および（２）が同時に含まれる組成物を対象に投与することを含む。また、例えば、（１）および（２）の組み合わせの態様がキットである場合に、別々に準備された（１）および（２）を同時に投与することをも含む。

本明細書において、（１）ＡＬＡ類、および、（２）キレート剤、過酸化水素、および、アスコルビン酸からなる群から選択される物質、を「順次に投与する」とは、例えば、（１）および（２）の組み合わせの態様がキットである場合のように、別々に準備された（１）および（２）を、別々のタイミングで投与することを含む。

本発明に係る医薬組成物または組み合わせ医薬は、必要に応じて他の薬効成分、栄養剤、担体等の他の任意成分を加えることができる。任意成分として、例えば結晶性セルロース、ゼラチン、乳糖、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物性及び動物性脂肪、油脂、ガム、ポリアルキレングリコール等の、薬学的に許容される通常の担体、結合剤、安定化剤、溶剤、分散媒、増量剤、賦形剤、希釈剤、ｐＨ緩衝剤、崩壊剤、可溶化剤、溶解補助剤、等張剤などの各種調剤用配合成分を添加することができる。

本発明を用いて感染症を治療する場合、公知の抗菌薬を併用してもよい。公知の抗菌薬による抗菌効果と、本発明による感染症治療効果とはメカニズムが根本的に異なると考えられるため、相加的な、また、場合によっては、相乗的な効果が期待できる。

本明細書において用いられる用語は、特に定義されたものを除き、特定の実施態様を説明するために用いられるのであり、発明を限定する意図ではない。

また、本明細書において用いられる「含む」との用語は、文脈上明らかに異なる理解をすべき場合を除き、記述された事項（部材、ステップ、要素、数字など）が存在することを意図するものであり、それ以外の事項（部材、ステップ、要素、数字など）が存在することを排除しない。

異なる定義が無い限り、ここに用いられるすべての用語（技術用語及び科学用語を含む。）は、本発明が属する技術の当業者によって広く理解されるのと同じ意味を有する。ここに用いられる用語は、異なる定義が明示されていない限り、本明細書及び関連技術分野における意味と整合的な意味を有するものとして解釈されるべきであり、理想化され、又は、過度に形式的な意味において解釈されるべきではない。

以下において、本発明を、実施例を参照してより詳細に説明する。しかしながら、本発明はいろいろな態様により具現化することができ、ここに記載される実施例に限定されるものとして解釈されてはならない。

実施例１
多剤耐性緑膿菌（ＭＤＲＰ：ＡＴＣＣ ＢＡＡ−２１１０）をトリプティックソイブロス培地（ＴＢＳ：ＤＩＦＣＯ社）に入れ、３７℃で２４時間培養した。吸光光度計を用いて、培養したＭＤＲＰを含むＴＢＳ培地を１Ｘ１０^９ＣＦＵ（Ｃｏｌｏｎｙ ｆｏｒｍｉｎｇ ｕｎｉｔ）／ｍｌに調整した。１２ｗｅｌｌのプレートに、次の（１）〜（３）の溶液をそれぞれ準備し、培養した。（１）：１Ｘ１０^９ＣＦＵ／ｍｌに調整したＭＤＲＰを含むＴＢＳ培地、（２）：（１）にＡＬＡを終濃度０．５ｍｇ/ｍｌとなるように加えた溶液、（３）：（１）にＡＬＡを終濃度０．５ｍｇ/ｍｌとなるように、ＥＤＴＡを終濃度４００ｍｇ/ｍｌとなるように加えた溶液。培養開始から４時間後に溶液を回収し、ペレット状にした菌１ｇあたりＰＢＳ０．２５ｍｌに懸濁した。懸濁液０．２ｍｌに、５０％酢酸０．０１ｍｌ、ＤＭＦ／ＩＰＡ（１００：１）０．９ｍｌを加えてｖｏｒｔｅｘし、遠心分離（１４，０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ、４℃）した。遠心分離後の上清におけるコプロポルフィリノーゲンＩＩＩ（ＣＰＩＩＩ）濃度およびプロトポルフィリンＩＸ（ＰｐＩＸ）濃度を、ＨＰＬＣを用いて測定した。ＨＰＬＣの測定結果を表１に示す。

表１に示すとおり、ＭＤＲＰにＡＬＡを単独で投与した群（すなわち（２））では、ＣＰＩＩＩに対するＰｐＩＸの割合が約５．５％（＝（４９．０／８８９．６）×１００）であり、ＭＤＲＰにＡＬＡを投与しない群（すなわち（１））における割合である約４．７％（＝（１９．７／４２２．２）×１００）と同程度であった。すなわち、驚くべきことに、ＭＤＲＰに取り込まれたＡＬＡは、ＡＬＡ−ＰＤＴの作用点であるＰｐＩＸにはほとんど変換されず、その前駆体であるＣＰＩＩＩで代謝がほぼ停止していることがわかった。

さらに、ＭＤＲＰにＡＬＡおよびＥＤＴＡを投与した群（すなわち（３））では、ＣＰＩＩＩに対するＰｐＩＸの割合が約３０．６％（＝（２３３．１／７６４．８）×１００）まで上昇した。すなわち、驚くべきことに、ＭＤＲＰにＡＬＡおよびＥＤＴＡを添加することによって、ＭＤＲＰ内におけるＣＰＩＩＩからＰｐＩＸへの変換を促進できることがわかった。

実施例２
多剤耐性緑膿菌（ＭＤＲＰ：ＡＴＣＣ ＢＡＡ−２１１０）を、トリプティックソイブロス培地（ＴＢＳ：ＤＩＦＣＯ社）を用いて２４時間、３７℃で培養した。次に、ＭＤＲＰを１Ｘ１０^９ＣＦＵ／ｍｌで含むＴＢＳ培地を１２ｗｅｌｌのプレートに１ｍｌずつ分注し、ＡＬＡを終濃度１ｍｇ／ｍｌとなるように、ＥＤＴＡを終濃度４００ｍｇ／ｍｌとなるように添加した。これらを、ＰＤＴを行う群（ＰＤＴ群）とＰＤＴを行わない群（非ＰＤＴ群）に分けた（それぞれｎ＝１）。Ｃｏｎｔｒｏｌ群は、ＭＤＲＰを１Ｘ１０^９ＣＦＵ／ｍｌで含むＴＢＳ培地１ｍｌに、終濃度１ｍｇ／ｍｌのＡＬＡのみを添加し、ＰＤＴを行わなかった。Ｃｏｎｔｒｏｌ群および非ＰＤＴ群では、これらを１８時間培養して、各ウェルの菌数を数えた。ＰＤＴ群では、１８時間培養後にＬＥＤ（４１０ｎｍ）５０Ｊ／ｃｍ^２を照射した後、菌数を数えた。

図１および表２に示すように、１８時間培養後のＣｏｎｔｒｏｌ群では、菌数は４．２Ｘ１０^９ＣＦＵ／ｍｌであった。非ＰＤＴ群では、菌数は４．４２Ｘ１０^７までしか減少しなかった。一方、ＰＤＴ群では、驚くべきことに、菌数は０．９４Ｘ１０^６ＣＦＵ／ｍｌまで減少した。すなわち、本発明の一実施態様であるＰＤＴ群では、Ｃｏｎｔｒｏｌ群と比較して、菌数が約９９．９８％減少し、非ＰＤＴ群と比較しても、菌数は約９７．９％減少した。以上の結果から、ＡＬＡとＥＤＴＡを添加してＰＤＴを実施することで、ＭＤＲＰを極めて効率的に減少させることができることがわかった。

実施例３
多剤耐性緑膿菌（ＭＤＲＰ：ＢＡＡ−２１１０）をトリプティックソイブロス培地（ＴＢＳ：ＤＩＦＣＯ社）で２４時間３７℃で培養した。次に、ＭＤＲＰの入ったＴＢＳ培地を１２ウェルシャーレに１ｍｌずつ分注した（１Ｘ１０^４〜２Ｘ１０^５ＣＦＵ／ｍＬ）。それぞれのシャーレに、終濃度１ｍｇ／ｍｌのＡＬＡと、ＥＤＴＡ以外のキレート剤（クエン酸２．５ｍｇ／ｍＬ、リンゴ酸２．５ｍｇ／ｍＬ、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）１ｍｇ／ｍＬ、トリエチレンテトラミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’，Ｎ’’’−六酢酸１ｍｇ／ｍＬ、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸１ｍｇ／ｍＬ、デフェロキサミンメシル酸塩１ｍｇ／ｍＬ、それぞれ終濃度）を添加した。Ｃｏｎｔｒｏｌ群は、ＭＤＲＰを含むＴＢＳ培地１ｍｌに、終濃度１ｍｇ／ｍｌのＡＬＡのみを添加した。次に、これらを５時間培養して、各ウェルの菌数を数えた。ＰＤＴ群は、５時間培養後にＬＥＤ（４１０ｎｍ）５０Ｊ／ｃｍ^２を照射した後、菌数を数え、さらに照射１９時間後の菌数も数えた。

表３に示すように、ＭＤＲＰにＡＬＡ １ｍｇ／ｍｌと各種キレート剤を加えた後、ＬＥＤ照射（ＰＤＴ）すると顕著に菌数が減少することが確認された。すなわち、ＥＤＴＡ以外のキレート剤をＰＤＴと併用することによっても、ＭＤＲＰを顕著に減少できることが判明した。

Claims (8)

1. 感染症治療のためのＡＬＡ−ＰＤＴにおける、プロトポルフィリンＩＸ生成促進用医薬組成物であって、
   前記組成物は、アミノポリカルボン酸系キレート剤、ヒドロキシカルボン酸系キレート剤、デフェロキサミン、デフェラシロクス、および、デフェリプロンからなる群から選択されるキレート剤を含み、
   前記感染症治療が、ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに耐性を示す緑膿菌感染症の治療であり、
   前記ＡＬＡ類は、ＡＬＡまたはその塩、ＡＬＡメチルエステル、ＡＬＡエチルエステル、ＡＬＡプロピルエステル、ＡＬＡブチルエステル、または、ＡＬＡペンチルエステルである、
   医薬組成物。
2. 請求項１に記載の医薬組成物であって、前記アミノポリカルボン酸系キレート剤が、エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレンジアミンジ酢酸、ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、ジヒドロキシエチルエチレンジアミン四酢酸（ＤＨＥＤＤＡ）、ニトリロ酸酢酸（ＮＴＡ）、ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（ＨＩＤＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸、β−アラニンジ酢酸、シクロヘキサンジアミンテトラ酢酸、ニトリロトリ酢酸、イミノジ酢酸、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）イミノジ酢酸、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）エチレンジアミントリ酢酸、グリコールエーテルジアミンテトラ酢酸、グルタミン酸ジ酢酸、アスパラギン酸ジ酢酸、メチルグリシンジ酢酸、イミノジコハク酸、セリンジ酢酸、ヒドロキシイミノジコハク酸、ジヒドロキシエチルグリシン、アスパラギン酸、グルタミン酸、および、トリエチレンテトラミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’，Ｎ’’’−六酢酸、ならびに、これらの薬学的に許容される塩、からなる群から選択されることを特徴とする、
   医薬組成物。
3. 請求項１に記載の医薬組成物であって、前記ヒドロキシカルボン酸系キレート剤が、リンゴ酸、クエン酸、グリコール酸、グルコン酸、ヘプトン酸、酒石酸、および、乳酸、ならびに、これらの薬学的に許容される塩、からなる群から選択されることを特徴とする、
   医薬組成物。
4. 請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、
   前記緑膿菌感染症が、多剤耐性緑膿菌感染症であることを特徴とする、
   医薬組成物。
5. 請求項４に記載の医薬組成物であって、
   前記多剤耐性緑膿菌感染症が、少なくともフルオロキノロン系抗菌薬、カルバペネム系抗菌薬、および、アミノグリコシド系抗菌薬に対して抵抗性を示す緑膿菌感染症であることを特徴とする、
   医薬組成物。
6. 順次または同時に投与する、（１）ＡＬＡ類、および、（２）キレート剤を含む、
   ＡＬＡ類を単独使用するＡＬＡ−ＰＤＴに耐性を示す緑膿菌感染症の治療用の組み合わせ医薬であって、
   前記キレート剤は、アミノポリカルボン酸系キレート剤、ヒドロキシカルボン酸系キレート剤、デフェロキサミン、デフェラシロクス、および、デフェリプロンからなる群から選択され、
   前記ＡＬＡ類は、ＡＬＡまたはその塩、ＡＬＡメチルエステル、ＡＬＡエチルエステル、ＡＬＡプロピルエステル、ＡＬＡブチルエステル、または、ＡＬＡペンチルエステルである、
   組合わせ医薬。
7. 請求項６に記載の組み合わせ医薬であって、
   前記組み合わせの態様が、配合剤であることを特徴とする、
   組合せ医薬。
8. 請求項６に記載の組み合わせ医薬であって、
   前記組み合わせの態様が、キットであることを特徴とする、
   組合せ医薬。