JP4411391B2 - 藻類増殖方法及びその方法により得られる藻類培養体 - Google Patents

Description

本発明は、藻類の増殖方法及びその方法により得られる藻類培養体に関するものである。

森林伐採などで陸上生物資源の枯渇が危ぶまれている現在、有用海洋資源を探索し、その利用をはかることは、資源小国日本における重要な課題となっている。特に、海洋という特殊な環境で生育する大型海藻には陸上生物にみられない特殊成分が含まれており、これらの特殊成分が食品や工業製品の原料として利用されているが（非特許文献１、２参照）、近年に至り、大型海藻の分割画分やそれから分離された成分の中から、いくつかの新規生理活性物質が見出され、その結果、大型海藻がファインケミカルの原料として注目されるようになってきている（非特許文献３、４参照）。

ところで、大型海藻由来の成分は、海藻生育時期によって質的変動や量的変動が起こるため（非特許文献５参照）、有用成分生産の目的には生育時期を精密制御した培養方法、例えば環境因子を精密制御した室内培養などが必要になってくるが、海藻の生長速度が遅いことやろ過海水の大量消費などが障害となり大型海藻の大量室内培養は、非常に困難であった。

すなわち、藻類の室内培養には、その条件設定が重要であり、この条件設定のための生長実験用の海藻試料が必要であるが、大型海藻生長評価実験において、天然に生育している大型海藻をそのまま使用することはむずかしい。

その理由は、大型海藻付着共存微生物などの生長速度が人工的培養条件下で大型海藻よりも速い場合が多く、微生物などが異常増殖して大型海藻の生長に影響を及ぼすからである。このような付着共存微生物を除去する方法として、薬剤処理法や単藻培養株作成法が知られているが、藻体のダメージが少ないという点で単藻培養株作成法が好適である。

ところで、藻類の有用成分の開発に際しては、藻類は成熟後枯死するので、毎年単藻培養株を入手しなければならないが、成熟しない培養株があれば、これを長時間連続して培養を継続しても成熟、枯死することがないので、毎年新鮮な培養株を入手しなくてもよくなる。そして、このような成熟しない培養株は、緑藻類においては、例えばアオサ属に属する難成熟性海藻が知られているが、紅藻類については、これまでこの種の単藻培養株は全く知られていなかった。

また、一般に単藻培養株を増殖させる前段階では、直立体を生長の遅い条件に静置して保存し、この直立体から単藻培養株を増殖培養することが行われているが、この直立体から必要量の単藻培養株を増殖させるには、通常かなりの時間、オゴノリ属の海藻の場合２〜４週間を要するため、その間実験が停滞するのを免れない。

このため、単藻培養株での増殖と、直立体からの単藻培養株の増殖を並行的に行って処理時間の節約をはかることも考えられているが、この場合、操作が複雑になる上に、培養設備や労力が増大するという欠点がある。

したがって、この技術分野においては、必要時にすぐに増殖培養でき、あるいは成熟せずに継続的に培養を続けられる単藻培養株とともに、これを用いて効率的に藻類を増殖する方法の出現が強く要望されていた。

そして、このようなことは、静止期にあるリンパ球を成長させ、増殖する引き金となるマイトジェン刺激を起し、エイズを含む種々の疾病の患者の免疫能を判定したり、新しいガンの治療法であるＬＡＫ療法におけるリンパ球の分裂促進を行う赤血球凝集剤の生産量が高い紅藻類について、特に要望が大きい。

徳田廣、大野正夫、小河久朗著、「海藻資源養殖学」、緑書房、１９８７年、ｐ．３５−６６ 「食品開発」、１９８４年、第１９巻、ｐ．４３−４８ 「月刊海洋」、１９９５年、第２７巻、ｐ．１３−２１ 「月刊海洋」、１９９５年、第２７巻、ｐ．３４−３９ 「ハイドロバイオロジア（Ｈｙｄｒｏｂｉｏｌｏｇｉａ）」、１９９３年、第２６０／２６１巻、ｐ．５４１−５４７

本発明は、このような事情のもとで、大型藻類、特に紅藻類について、非成熟性で長期間にわたり保存可能、かつ培養可能であり、しかも（１）生理活性物質の生産量が高い、（２）藻体の生長速度が早い、（３）栄養塩の吸収能力が高い、以上（１）から（３）の性質のうち少なくとも１つ以上の性質を有している新規な単藻培養株を効率的に培養する方法及びそのような方法で培養された大量の藻類を提供することを目的としてなされたものである。

本発明者らは、大型海藻のオゴノリ属紅藻類（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｓｐ．）からの単藻培養株について種々研究を重ね、先に天然で成熟体として雌性配偶体が検出されず、四分胞子体のみの成熟体が検出される特徴をもち、淡水混入天然海水域で繁殖しているオゴノリ属紅藻類由来の単藻培養株は長期間にわたって成熟しないことを見出したが、さらに研究を続けた結果、上記のようにして人工的に培養して得た藻類を切断して藻体切片にして培養することにより、藻類の藻類湿質量を効率的に上昇できること見出し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。

すなわち、本発明は、オゴノリ属紅藻類の人工培養株の、長さ２ｍｍ以下の中間切片を栄養培養することを特徴とする藻類増殖方法及びこのようにして培養した藻類培養体を提供するものである。

本発明方法においては、原料として用いる藻類は、人工培養により得られる単藻培養株であることが必要である。天然生育株の場合は、付着共存している生物の影響により、栄養培養による円滑な増殖が妨げられ、順調な増殖が行われない。

また、この藻類培養株としては、成熟しやすい藻類の培養株でもよいが、非成熟性すなわち成熟しにくい培養株、特に成熟しない培養株が好ましい。
使用できる海藻の形態としては、ヘンペイ型、糸状型などのいずれでもよいが、オゴノリ、オオオゴノリ、ツルシラモなど糸状型の海藻が好ましい。

海藻においては、生長端は海藻の枝に１箇所存在するだけであるので、従来の海藻生長端のみを用いる藻類増殖方法では、培養効率がよくなかった。しかしながら、本発明方法においては、海藻の枝から多数採取しうる中間切片を生長端と同様に用いることができるので、その培養効率を著しく向上することができる。
そして、海藻の中でもオゴノリ属紅藻類は、中間切片における再生力が大きく、生長端と同様の生長を示し、特にオゴノリ及びツルシラモはこの傾向が大きい。

この切片の長さは、できるだけ短い方が効率はよくなる。例えば長さ１００ｍｍ以上のものは、培養効率は低いが、長さ５ｍｍ以下、特に３ｍｍ以下にすると培養効率は著しく向上する。

栄養培養は、室内でも室外でも行うことができるが、光強度、水温など海藻の生長に影響を及ぼす環境因子を制御できる点から室内培養が好ましい。培養は、静置培養、振とう培養、エアレーションによる通気培養などいずれでも行えるが、藻類の生長速度を考えると振とう培養あるいはエアレーションによる通気培養が好ましい。

培地は、人工海水、天然海水、ろ過天然海水、滅菌天然海水、あるいはこれら由来の海水のいずれも使用できるが、人工海水を使用することが好ましい。
人工海水を使用する場合は、人工海水を調製するための塩化ナトリウムとして食塩、難溶解物質生成防止塩化ナトリウムのいずれも使用できるが、難溶解物質生成防止塩化ナトリウムを使用することが好ましい。

特に、２０％濃度の水溶液としたとき、その中のマグネシウムイオン濃度が１０ｐｐｍ以下になる低マグネシウム塩化ナトリウムを２０〜４０ｇ／リットルの割合で含む水を基剤としたものが好ましい。

次に、本発明方法を非成熟性単藻培養株を例として詳細に説明するが、本発明方法はこれに限らず、他の藻類の人工培養株の増殖にも用いることができる。

非成熟性単藻培養株は、淡水混入天然海水域、例えば河川の水が海洋に流れ込む河口域において、天然で成熟体として雌性配偶体が検出されず、四分胞子体のみの成熟体が検出される特徴をもち、繁殖している紅藻類大型海藻を原料として生産することができる。この紅藻類大型海藻としては、オゴノリ（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｖｅｒｒｕｃｏｓａ）、ツルシラモ（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｃｈｏｒｄａ）、それらの亜種が好ましい。

上記のオゴノリ属紅藻類（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｓｐ．）とは、（１）オゴノリ属海藻（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｓｐ．）に分類される海藻、あるいは、（２）Ｇｒａｃｉｌａｒｉｏｐｓｉｓ ｓｐ．に分類される海藻、あるいは、（３）Ｇｒａｃｉｌａｒｉｏｐｓｉｓ ｓｐ．に過去に分類された海藻が含まれる。

例えば、日本産海藻では、オゴノリ属紅藻類（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｓｐ．）とは、「新日本海藻誌日本産海藻類総覧、吉田忠生著、内田老鶴圃発行、１９９８年」においてオゴノリ目（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａｌｅｓ：グラシラリアレス）オゴノリ科（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａｃｅａｅ：グラシラリアシー）に分類されている海藻が含まれる。これらの紅藻類は、寒海にも存在するが、特に暖海に多く、わが国ではほとんどすべての海岸地帯に分布しており、寒天の増量物や刺身のつまなどに用いられている。

このオゴノリ属紅藻類から、非成熟性単藻培養株を製造するには、例えば、天然で成熟体として雌雄配偶体が検出されず、四分胞子体のみの成熟体が検出される特徴をもち、淡水混入天然海水域で繁殖しているオゴノリ属紅藻類の成熟胞子体の成熟部分を２〜５ｃｍ、好ましくは３〜４ｃｍの長さに切断し、滅菌した水又は海水で洗浄後、滅菌海水中に６〜１５時間放置し、胞子を放出させる。

次に、この放出された胞子を分離し、培養液の入った容器に移植し、温度１０〜３０℃において露光下及び暗所で１０〜１５時間ずつ交互に静置培養する。この際の培養液としては、例えば滅菌した海水に普通の海水強化栄養剤を添加したものが用いられる。
このようにして、１５〜２５日間静置培養後、胞子が発芽して生長した海藻直立体の中から、太く、色が濃い直立体を選び、５０〜８０日間、引き続き静置培養すると、長さ１０ｍｍに生長する。
直立体を培養容器の底からピンセットではずしフラスコに移植し、保存培養条件下で培養することにより、藻体が増殖し、その結果一定量以上の単藻培養株を得ることができる。

このようにして、直立体が増殖培養により増殖した藻体が単藻培養株と称される。
この直立体あるいは単藻培養株は、低栄養あるいは低温あるいは低光強度など非増殖培養条件下に置くことによって、藻体生長速度を抑えることができ、保存や低増殖培養が可能である。保存や低増殖培養は、直立体あるいは単藻培養株の使用予定のない場合、あるいは、藻体増殖量の調節を行う場合などに便利である。

上記の低栄養あるいは低温あるいは低光強度など非増殖培養条件とは、例えば（１）硝酸体窒素とアンモニア体窒素の濃度が３μＭ以下、リン酸イオン濃度が１μＭ以下などの栄養塩濃度条件、（２）温度が５〜１４℃の低温条件、（３）光強度が２０〜４０μｍｏｌ／ｍ²ｓｅｃの低光強度条件、（４）及び（１）〜（３）の組合せなどが例に挙げられる。

本発明方法においては、この単藻培養株の切片が原料として用いられる。すなわち、直立体あるいは単藻培養株の藻体を長さ１０ｍｍ以下好ましくは５ｍｍ以下に切断し、この海藻の切片（インターカラリーフラグメント）を、光の照射下及び暗所で１０〜１５時間ずつ交互に繰り返し、エアレーションしながら、適時栄養培地を交換して３０〜５０日間静置培養する。この場合、上記のインターカラリーフラグメントとしては、海藻の主軸以外の生長端から主軸までの間の藻体の枝を用いることが好ましい。また、インターカラリーフラグメントの代りに、あらかじめ調製した非成熟性単藻培養株の長さ１０ｍｍ以下に切断した生長端断片（アピカルフラグメント）を用いてもよい。
このようにして、培養条件下で３年以上継続して培養しても成熟することのない、非成熟性単藻培養株を得ることができる。

本発明方法における切片の栄養培養条件は、例えば、温度が１６〜３０℃、光強度が５０〜１２０μｍｏｌ／ｍ²ｓｅｃ、光周期は８時間明期−１６時間暗期〜２４時間明期−０時間暗期が挙げられる。必要であれば、振とう（５０〜２００ｒｐｍ程度）やエアレーションを行ってもよい。培養液としては、天然海水でもよいし、人工海水でもよい。場合によっては培養液に、Ｐｒｏｖａｓｏｌｉ（プロバゾリ）の海水補強栄養剤［西澤一俊、千原光雄編集、藻類研究法、共立出版、東京（１９７９）、ｐｐ．２８１−３０５］など海藻生長促進成分を添加してもよい。

本発明方法により得られる非成熟性単藻培養株は、培養条件下で３年以上継続して培養しても成熟せず、しかも（１）生理活性物質の生産量が高い、（２）藻体の生長速度が早い、（３）栄養塩の吸収能力が高い、以上（１）から（３）の性質のうち少なくとも１つ以上の性質を有しているオゴノリ続紅藻類であり、長期間にわたって成熟させずに培養あるいは保存することができる。

次に、実施例により本発明を実施するための最良の形態を説明する。

参考例
（１）単藻培養株調製用の胞子採取及び胞子植え付け；
原料としては、天然で成熟体として雌性配偶体が検出されず、四分胞子体のみの成熟体が検出される特徴をもつオゴノリ属紅藻類徳島県徳島市勝浦川河口汽水域（塩濃度０．５質量％）で採取したオゴノリ属大型海藻ツルシラモ（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｃｈｏｒｄａ）の成熟胞子体を用いた。

このようにして得た成熟胞子体の成熟部分を３０ｍｍの長さに切断し、滅菌海水で洗浄後、滅菌海水中で一晩放置することにより胞子を放出させた。放出された胞子を滅菌したパスツールピペットで吸い上げ、保存培養用培養液３０ｍｌの入ったスクリュー管に分離し、１４時間明期、１０時間暗期の周期で光を与えて静置培養を行った。１つのスクリュー管に植え付ける胞子は２０個ずつとした。スクリュー管は全部で１０００個使用した。静置培養は、（ｉ）光強度６０μｍｏｌ／ｍ²ｓｅｃの一定条件で温度６条件（１０℃から３０℃まで４℃変動）、（ｉｉ）温度１８℃の条件で光強度５条件（２０μｍｏｌ／ｍ²ｓｅｃから１００μｍｏｌ／ｍ²ｓｅｃまで２０μｍｏｌ／ｍ²ｓｅｃ変動）の合計１０条件で行った。

この際用いた海水培地は、香川県高松市屋島湾水深約１．５ｍで採取した海水を０．２０μｍのセルロースアセテートメンブランフィルター（アドバンテック東洋社製）でろ過後、１／１０容量の蒸留水を添加し混合した後で、１００℃３０分間滅菌し、あらかじめ滅菌処理したＰｒｏｖａｓｏｌｉ（プロバゾリ）の海水補強栄養剤を添加して調製した。

（２）直立体選別；
２１日間の静置培養をした時点で、胞子の発芽が観察された実験群の中から、直立体が太く、赤色色素が鮮やかで、培養液中の浮遊物がない実験条件、すなわち温度１８℃、光強度４０μｍｏｌ／ｍ²ｓｅｃの条件で発芽した直立体を選んだ。

選ばれた直立体は、静置培養により直立体の長さが１０ｍｍになるまで培養を続ける。この際、培地交換は４週間に１度の割合で行った。このようにして約７０日間で１０ｍｍの長さの直立体を得た。

（３）直立体の増殖培養；
約１０ｍｍに生長した直立体をスクリュー管底からピンセットではずしフラスコに移植し、直立体の増殖培養を行った。直立体の増殖培養は、培養液１リットルの入った１リットル丸底フラスコ中で温度１６℃、光強度４０μｍｏｌ／ｍ²ｓｅｃ（１４時間明期、１０時間暗期の光周期）の条件でエアレーションをしながら行った。培養液交換は２週間に１度行った。増殖培養を７０日間行い、直立体を増殖させた。この工程は、直立体の保存にも適応できるので、直立体の保存培養工程ともいう。１個の丸底フラスコ内で増殖した直立体を数個の培養液１リットルの入った１リットル丸底フラスコ中へ分割することにより、保存培養工程期間を延長することができる。

（４）単藻培養株の予備培養；
前工程で増殖させた直立体を、培養液１リットルの入った１リットル丸底フラスコ中で温度１８℃、光強度４０μｍｏｌ／ｍ²ｓｅｃ（１４時間明期、１０時間暗期の光周期）の条件でエアレーションをしながら行った。培養液交換は２週間に１度行った。予備培養を３５日間行い、単藻培養株を得た。

塩化ナトリウムとして難溶解物質生成防止塩化ナトリウムを用いて、藻類育成用人工海水用塩類組成物を調製した。藻類育成用人工海水用塩類組成物は、２５リットル用の人工海水調製用として塩化ナトリウム５４８ｇ、塩化マグネシウム六水和物２５０ｇ、硫酸ナトリウム９２．５ｇ、塩化カルシウム二水和物３５．０ｇ、塩化カリウム１５．８ｇ、炭酸水素ナトリウム４．５ｇ、臭化カリウム２．２５ｇ、オルトホウ酸０．７５ｇ、塩化ストロンチウム０．２５ｇ、塩化鉄六水和物０．１３ｍｇ、グリセロリン酸ナトリウム五水和物８．７５ｍｇ、硝酸ナトリウム４．０ｍｇを混合し後、ラミネート製袋に密封し２０℃の恒温室内で保存した。

上記難溶解物質生成防止塩化ナトリウムを用いた藻類育成用人工海水用塩類組成物１袋を蒸留水２５リットルに溶解して人工海水を調製した。

参考例で得た紅藻オゴノリ科海藻ツルシラモ［学名：Ｇｒａｃｉｌａｒｉａｃｅａｅ Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｃｈｏｒｄａ：グラシラリアセス グラシラリア コルダ］の単藻培養株から次の４種類（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｄ）の海藻切片を調製した。

この（Ａ）は長さ５ｍｍの生長端（アピカルフラグメントという、）、（Ｂ）は長さ１０ｍｍの生長端から生長端よりの長さ５ｍｍを除いた中間切片（インターカラリーフラグメント）、（Ｃ）は長さ１０ｍｍの生長端から生長端よりの長さ５ｍｍを除いた中間切片（インターカラリーフラグメント）から生長端よりの長さ３ｍｍを切り出した中間切片及び（Ｄ）は長さ１０ｍｍの生長端から生長端よりの長さ５ｍｍを除いた中間切片（インターカラリーフラグメント）から生長端よりの長さ２ｍｍを切り出した中間切片である。

人工海水４００ｍｌの入った三角フラスコにフラスコ当り各種海藻切片６本を添加した。培養条件は、温度２０℃、光強度６０μｍｏｌ／ｃｍ²ｓ、光周期は１４時間明期１０時間暗期に設定した。培養液である人工海水の交換と各三角フラスコ内の海藻切片の湿質量測定は１週間ごとに行い、培養中は１００ｒｐｍの速度でフラスコを撹拌した。
この結果を表１に示す。この数値は実験回数５回の平均値である。

この表から分るように、海藻切片の湿質量は、培養時間とともに増加している。

そして、海藻生長端試料（Ａ）では培養開始前の６本の生長端の湿質量が１．４ｍｇであるのに対して、培養３週目での６本の生長端の湿質量が４３．９４ｍｇと湿質量が培養開始時の３１．４倍に増加し、培養７週目での６本の生長端の湿質量が１２０．２２ｍｇと湿質量が培養開始時の８５．９倍に増加している。また、日間生長率は、２週目と３週目の間で１１．５％／日と高かった。

長さ５ｍｍの海藻中間切片試料（Ｂ）では培養開始前の６本の生長端の湿質量が２．４０ｍｇであるのに対して、培養３週目での６本の生長端の湿質量が４４．８０ｍｇと湿質量が培養開始時の１８．７倍に増加し、培養７週目での６本の生長端の湿質量が１１４．０４ｍｇと湿質量が培養開始時の４７．５倍に増加している。また、日間生長率は、２週目と３週目の間で１０．２％／日と高かった。

長さ３ｍｍの海藻中間切片試料（Ｃ）では培養開始前の６本の生長端の湿質量が１．３６ｍｇであるのに対して、培養３週目での６本の生長端の湿質量が２６．１０ｍｇと湿質量が培養開始時の１９．２倍に増加し、培養７週目での６本の生長端の湿質量が９２．４４ｍｇと湿質量が培養開始時の６８．０倍に増加している。また、日間生長率は、２週目と３週目の間で１０．７％／日と高かった。

長さ２ｍｍの海藻中間切片試料（Ｄ）では培養開始前の６本の生長端の湿質量が０．８８ｍｇであるのに対して、培養３週目での６本の生長端の湿質量が１７．２０ｍｇと湿質量が培養開始時の１９．６倍に増加し、培養７週目での６本の生長端の湿質量が８３．８４ｍｇと湿質量が培養開始時の９５．３倍に増加している。また、日間生長率は、２週目と３週目の間で１０．９％／日と高かった。

４種類の海藻切片のうち、最も短い切片である試料（Ｄ）が最も湿質量増加率が高いことが分る。
同じ長さの生長端試料（Ａ）と海藻中間切片試料（Ｂ）では、湿質量増加率は、生長端試料（Ａ）の方が高かった。
ほぼ同じ質量の長さ５ｍｍ生長端試料（Ａ）と長さ３ｍｍの海藻中間切片試料（Ｃ）では、湿質量増加率は、生長端試料（Ａ）の方が高かった。

実施例１における試料（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）の代りに、長さ１００ｍｍの生長端１本を用いたこと以外は、実施例１と同様にして海藻の栄養培養を行った。その結果、培養開始前の１本の生長端の湿質量が７．８４ｍｇであるのに対して、培養３週目での１本の生長端の湿質量が１７．６０ｍｇと湿質量の増加は２．２倍に留まった。また、日間生長率は、２週目と３週目の間で２．１％／日であった。このことから、長さ１００ｍｍの海藻生長端を用いるよりも実施例１における長さ５ｍｍの短い海藻生長端を用いた場合の方が、湿質量増加率及び日間生長率が高く、効率的な藻類増殖ができることが分る。

比較例
実施例１における人工培養株試料（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）及び（Ｄ）の代りに、天然海域から採取した紅藻オゴノリ科海藻ツルシラモ［学名：Ｇｒａｃｉｌａｒｉａｃｅａｅ Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｃｈｏｒｄａ：グラシラリアセス グラシラリア コルダ］から長さ５ｍｍの生長端試料を調製し使用した以外は、実施例１と同様にして栄養培養を行った。

培養開始後２週間で、海藻切片を入れたフラスコ中に微細藻類が繁殖し、海藻湿重量増加が低減し、培養開始３週間目の海藻湿質量は２週間目の湿質量を下回ってしまった。

この結果より天然採取した海藻からの海藻切片を人工的に培養により増殖する場合は、海藻に付着していたり、共存していたりする微細藻類など他の生物の増殖により、海藻の培養が継続できなくなることが分る。

本発明によれば、赤血球凝集剤のような生理活性物質の製造に有用な非成熟性単藻培養株を効率よく増殖することができる。

Claims (8)

1. オゴノリ属紅藻類の人工培養株の、長さ２ｍｍ以下の中間切片を栄養培養することを特徴とする藻類増殖方法。
2. オゴノリ属紅藻類がオゴノリ（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｖｅｒｒｕｃｏｓａ）又はツルシラモ（Ｇｒａｃｉｌａｒｉａ ｃｈｏｒｄａ）である請求項１記載の藻類増殖方法。
3. 前記人工培養株が単藻培養株である請求項１又は２記載の藻類増殖方法。
4. 前記単藻培養株が非成熟性培養株である請求項３記載の藻類増殖方法。
5. 前記非成熟性培養株が淡水混入天然海水域で繁殖するオゴノリ属紅藻類に由来する請求項４記載の藻類増殖方法。
6. 培養液として人工海水を用いる請求項１ないし５のいずれかに記載の藻類増殖方法。
7. 人工海水が、２０％濃度の水溶液にしたとき、その中のマグネシウムイオン濃度が１０ｐｐｍ以下になる低マグネシウム塩化ナトリウムを２０〜４０ｇ／リットルの割合で含む水を基剤としてなる請求項６記載の藻類増殖方法。
8. 請求項１ないし７記載のいずれかに記載の方法により得られる藻類培養体。