JP4061672B2 - Angle rotor for centrifuge - Google Patents
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Description
【0001】
【発明の属する技術分野】
本発明は、医学、化学、薬学等の分野にて用いられる遠心分離機のアングルロータに関するものである。
【0002】
【従来の技術】
遺伝子工学分野におけるゲノム解析、クローニングDNAの確認、病因遺伝子の診断等の研究分野において行われるDNAシーケンシングの過程には、血球や細胞からDNAを分離精製し、PCR法と呼ばれる方法により目標遺伝子の複製増幅を行い、その後、増幅産物の精製として余剰蛍光物質の除去や未反応プライマーの除去を行ないDNAを取り出し、DNAシーケンサーなる装置にかけて解析している。この工程において、PCR法で目標遺伝子の複製増幅した試料は、エタノール等を適量添加し遠心分離するエタノール沈殿処理を行うことでDNAを回収している。
【0003】
従来、PCR法による目標遺伝子の複製増幅工程は、サーマルサイクラーと呼ばれる装置を用い、試料容器として2mlから0.5ml程度のプラスチック製試験管(マイクロチューブ)を12本〜48本同時に使用して行っていた。サーマルサイクラーで目標遺伝子の複製増幅後、試験管を取り出し、実公昭57−40112号公報に示されているロータ、例えば図4に示すロータを用いて、増幅産物の精製として12,000rpm程度(10,000×g程度)で10分間ほど遠心分離し、試料内の余剰蛍光物質の除去や未反応プライマーの除去を行いDNAを取り出している。図4は従来のロータを示す縦断側面図であり、図の左側には1.5mlの試験管6Aを挿入し、右側には0.2mlのマイクロ試験管6Bを試験管アダプタを介して挿入している。この方法では、試験管の大きさに制限されるためサーマルサイクラーの試験管同時処理量が少なく、多くても48本程度であった。
【0004】
この改良形として、最近では、容量0.2mlのマイクロ試験管やマイクロプレートと呼ばれる試料注入穴が96個あり各穴の容量が0.2ml程度の角形板状の試料容器が使用できる多試料形サーマルサイクラーが販売され始めている。0.2mlのマイクロ試験管は、サーマルサイクラー用として、ある一定間隔で8本や12本連なったものが販売されている。図3にこれら試験管の外観図を示す。図3において、(A)は従来用いられている1.5ml試験管6Aであり、上端に試験管本体7と細い部材でつながるキャップ8が取付けられている。また図3の(B)は、0.2mlのマイクロ試験管6Bであり、1.5ml試験管6Aと同様に上端に試験管本体7と細い部材でつながるキャップ8が取付けられている。図3の(C)は、0.2mlのマイクロ試験管を12本連ねた構造のマイクロ試験管である。ここで、図3(B)の試験管と形状が若干異なっているが下部の形状は同様である。また、連試験管は試験管本体7で連なっているものと本図のようにキャップ8で連なっているものがあるが、性能、操作性に差はない。また、試験管本体7の隣り合う間隔は同一寸法となっており、各試験管はいずれもプラスチック多くはポリプロピレンで成形して製作され、下部が図のようにほぼ逆円錐形形状になっている。また、0.2mlのマイクロ試験管を8本または12本連ねた構造のマイクロ試験管の試験管間隔は、ある数値に一定しており、これはサーマルサイクラーの試験管の収容部の試験管間隔と一致している。
【0005】
【発明が解決しようとする課題】
従来におけるアングルロータを使用したエタノール沈殿処理においては、試験管を1本1本扱うため操作が大変煩雑であった。また、通常試験管はキャップ部を指でつまんで取出すが、隣合うキャップが支障となり試験管の取り出しが不便であった。これを解決するためには隣合った試験管挿入穴の間隔を広げる必要があるため、結果的に試験管挿入穴を多く設けることができなかった。また、0.2mlのマイクロ試験管を従来のロータにかけるには、試験管外径と試験管挿入穴径にアダプタを設ける必要があるため面倒であった。更に、0.2mlマイクロ試験管の8連形や12連形は、従来におけるロータの試験管挿入穴の配置方法が一直線上でなく円錐面に穴を設けているため、8連や12連の試験管が挿入できないという問題を有していたため、最新のサーマルサイクラーに適用できなかった。更にサーマルサイクラー用試験管は、サーマルサイクラーでの温度制御を正確に行なうため、試験管の肉圧が極薄くできており、遠心分離時に試験管外径部全体を支持するような試験管挿入穴形状を構成しないと遠心分離時に試験管内の液圧で試験管が破損する恐れを有していた。
【0006】
本発明の目的は、上記問題を解消し、多数の試験管を用いて効率良く遠心分離し、且つ操作性に優れたアングルロータを提供することである。
【0007】
【課題を解決するための手段】
上記の目的を達成するために本発明は、一定間隔で8本又は12本のマイクロ試験管を連ねて構成される連試験管を搭載するための遠心分離機用アングルロータであって、該ロータの上面にロータの回転軸を取り囲むように凹部を形成し、該凹部の内面に前記回転軸に対して20°〜70°の範囲にある所定の角度傾斜した傾斜面を形成し、該傾斜面は、前記回転軸を取り囲み、且つ、該回転軸に対して対称な複数の直線に沿って形成し、各傾斜面に前記マイクロ試験管の外形形状にほぼ合致する形状の挿入穴であって、連試験管を形成する前記マイクロ試験管の試験管間隔とほぼ同一の間隔で8個又は12個以上の試験管挿入穴を直線状に設けることにより、前記8本又は12本のマイクロ試験管を連ねた連試験管の着脱を同時に行うことができるようにしたことに一つの特徴を有する。
【0008】
本発明の他の特徴は、前記傾斜面に直線状に形成された試験管挿入穴は、前記傾斜面に対し90°の角度をなす方向に形成されていることにある。
【0009】
【発明の実施の形態】
図1は本発明になるアングルロータを示す縦断側面図、図2は本発明になるアングルロータを示す平面図である。図1において、ロータ1には中心部に遠心機の駆動軸に嵌合し締結される駆動軸穴3を設けている。駆動軸の回転軸5に対してα°の角度を有し配置されている平面4は、回転軸5に対して対称に4面設けている。また、各平面4に対してβ°の角度を有し試験管挿入穴2をそれぞれ12個ずつ配置している。これにより計48本の試験管を挿入できるため処理効率の向上を図ることができる。図中の左側には0.2mlマイクロ試験管6Cが挿入されており、キャップを摘むことによって試験管の着脱を12本同時に行うことができる。また、試験管挿入穴2は図示するように下部がほぼ逆円錐形形状に構成されている。更にロータ1はアルミ合金で製作されており、許容最高回転数が1万2千回転/分で十分な耐久力があるように設計されている。
【0010】
このように構成されたロータ1において、試験管挿入穴2を設けた各平面4は回転軸5から等しい距離にあり、いずれも同数の試験管を収納できる。α°は20〜70°が適当であり、45度が遠心分離の分離状態や加工状から最も適当である。試験管挿入穴2と平面5の角度β°は90°が最も加工製作しやすく、試験管を挿入した時の落ちつき具合も良い。また、各平面4に設けた試験管挿入穴2の間隔は8.95mm±0.1mmにすることが望ましく、この寸法は最新の0.2ml試験管が使用できるサーマルサイクラーの試験管の収容部の試験管間隔と同一であり、一致させることによってより効率的に後工程を進めることができる。また、試験管挿入穴2の下部の逆円錐形形状は、図3の(B)及び(C)に説明する0.2mlマイクロ試験管の外形形状にほぼ合致する形状であり、試験管を挿入した時に穴と試験管との間隙が微少にするのが望ましい。これにより肉圧が極薄い試験管を高速で回転させて遠心分離する際も試験管内の液圧で試験管が破損することを防止することができる。また、ロータ1の強度を8千回転/分以上にしたことから、液体試料としてDNA(核酸)又は蛋白質を含む溶液にアルコールを適量加えた懸濁液を用いてDNAを回収するためのエタノール沈澱処理を0.2mlの8連チューブまたは12連チューブを使用し何ら支障なく行なうことができる。なお、多本処理化作として、試験管の外径や長さが小さいことから、平面4に12連穴を2列,3列と複数設けて処理効率の向上を図ることができる。
【0011】
次に図1に示す遠心分離機用スイングロータを使用して、市販の0.2mlマイクロ試験管、0.2mlマイクロ試験管の8連形及び12連形試験管のそれぞれを回転試験したところ、12,000rpm,14,000×gまで問題なく回転可能であることを確認した。また、実際の遠心分離効果についてもラムダファージのDNAであるラムダDNA溶液(32g/ml)からエタノール沈殿法によりDNAの回収実験を行った。回転数が8,000rpm(最大遠心加速度6,300×g)で30分間,12,000rpm(最大遠心加速度14,000×g)で10分間のいずれの条件でもDNA回収率が100%であり、従来技術のDNAシーケンシング過程の12,000rpmの遠心分離と同様の遠心効果を得ることができた。
【0012】
【発明の効果】
本発明によれば、多数の試験管を用いて効率良く遠心分離し、且つ操作性に優れたアングルロータを提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図1】 本発明になるアングルロータを示す縦断側面図である。
【図2】 本発明になるアングルロータを示す平面図である。
【図3】 本発明になるマイクロ試験管を示す外観図である。
【図4】 従来のアングルロータを示す縦断側面図である。
【符号の説明】
1はロータ、2は試験管挿入穴、3は駆動軸穴、4は平面、5は回転軸、6Aは1.5ml試験管、6Bは0.2mlマイクロ試験管、6Cは12連形マイクロ試験管、7は試験管本体、8はキャップ、9は試験管アダプタである。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to an angle rotor of a centrifuge used in the fields of medicine, chemistry, pharmacy and the like.
[0002]
[Prior art]
In the process of DNA sequencing performed in research fields such as genome analysis in the field of genetic engineering, confirmation of cloned DNA, diagnosis of pathogenic genes, etc., DNA is isolated and purified from blood cells and cells, and the target gene is detected by a method called PCR method. Replication amplification is performed, and then, as the amplification product is purified, excess fluorescent substances are removed and unreacted primers are removed, and DNA is taken out and analyzed by an apparatus called a DNA sequencer. In this step, DNA obtained by replicating and amplifying the target gene by the PCR method is subjected to ethanol precipitation by adding an appropriate amount of ethanol or the like and centrifuging it.
[0003]
Conventionally, the target gene replication amplification process by the PCR method is performed by using a device called a thermal cycler and simultaneously using 12 to 48 plastic test tubes (microtubes) of about 2 ml to 0.5 ml as sample containers. It was. After replication amplification of the target gene with a thermal cycler, the test tube is taken out and purified by using a rotor shown in Japanese Utility Model Publication No. 57-40112, for example, the rotor shown in FIG. And about 10 minutes, and the excess fluorescent substance in the sample is removed and the unreacted primer is removed to take out the DNA. FIG. 4 is a longitudinal side view showing a conventional rotor. A 1.5
[0004]
As an improved version, recently, there are 96 sample injection holes called micro test tubes or microplates with a capacity of 0.2 ml, and a multi-sample type that can use a square plate sample container with a capacity of about 0.2 ml for each hole. Thermal cyclers are beginning to be sold. 0.2 ml micro test tubes are sold for thermal cyclers, with 8 or 12 tubes at regular intervals. FIG. 3 shows an external view of these test tubes. In FIG. 3, (A) is a conventionally used 1.5
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
In the conventional ethanol precipitation process using an angle rotor, the operation is very complicated because each test tube is handled one by one. In addition, the normal test tube is taken out by pinching the cap part with a finger, but the adjacent cap becomes a problem and it is inconvenient to take out the test tube. In order to solve this, it is necessary to widen the interval between adjacent test tube insertion holes, and as a result, many test tube insertion holes cannot be provided. Moreover, in order to put a 0.2 ml micro test tube on a conventional rotor, it is necessary to provide an adapter for the outer diameter of the test tube and the diameter of the test tube insertion hole, which is troublesome. Furthermore, the 8 ml and 12 series of 0.2 ml micro test tubes have holes in the conical surface rather than in a straight line because the conventional method for arranging the test tube insertion holes in the rotor is not in a straight line. Since the test tube could not be inserted, it could not be applied to the latest thermal cycler. In addition, the test tube for the thermal cycler has a very thin wall pressure to accurately control the temperature in the thermal cycler, and the test tube insertion hole supports the entire outer diameter of the test tube during centrifugation. If the shape is not configured, the test tube may be damaged by the liquid pressure in the test tube during centrifugation.
[0006]
An object of the present invention is to provide an angle rotor that solves the above-described problems, efficiently performs centrifugation using a large number of test tubes, and is excellent in operability.
[0007]
[Means for Solving the Problems]
In order to achieve the above object, the present invention provides an angle rotor for a centrifuge for mounting a continuous test tube constituted by connecting 8 or 12 micro test tubes at regular intervals. A recess is formed on the upper surface of the rotor so as to surround the rotation shaft of the rotor, and an inclined surface inclined at a predetermined angle in the range of 20 ° to 70 ° with respect to the rotation shaft is formed on the inner surface of the recess. , the surrounding of the rotating shaft, and, formed along a plurality of straight lines symmetrical with respect to the rotation axis, an insertion hole substantially matching shape to the outer shape of the micro tube to the inclined surfaces, By providing eight or twelve or more test tube insertion holes in a straight line at substantially the same interval as the test tube interval of the micro test tube forming the continuous test tube, the eight or twelve micro test tubes are provided. Attach and remove the connected test tubes at the same time It has one feature in being able to do it.
[0008]
Another feature of the present invention is that the test tube insertion hole formed linearly on the inclined surface is formed in a direction that forms an angle of 90 ° with respect to the inclined surface .
[0009]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
FIG. 1 is a longitudinal side view showing an angle rotor according to the present invention, and FIG. 2 is a plan view showing the angle rotor according to the present invention. In FIG. 1, the
[0010]
In the
[0011]
Next, using the swing rotor for the centrifuge shown in FIG. 1, a rotation test was performed on each of the commercially available 0.2 ml micro test tube, the 0.2 ml micro test tube, and the 8-strip test tube. It was confirmed that rotation was possible without problems up to 12,000 rpm and 14,000 × g. For the actual centrifugation effect, a DNA recovery experiment was performed from a lambda DNA solution (32 g / ml), which is lambda phage DNA, by ethanol precipitation. The DNA recovery rate is 100% at any of the conditions of a rotation speed of 8,000 rpm (maximum centrifugal acceleration 6,300 × g) for 30 minutes and 12,000 rpm (maximum centrifugal acceleration 14,000 × g) for 10 minutes, A centrifugal effect similar to the centrifugal separation at 12,000 rpm in the conventional DNA sequencing process could be obtained.
[0012]
【The invention's effect】
According to the present invention, it is possible to provide an angle rotor that is efficiently centrifuged using a large number of test tubes and that is excellent in operability.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a longitudinal side view showing an angle rotor according to the present invention.
FIG. 2 is a plan view showing an angle rotor according to the present invention.
FIG. 3 is an external view showing a micro test tube according to the present invention.
FIG. 4 is a longitudinal side view showing a conventional angle rotor.
[Explanation of symbols]
1 is a rotor, 2 is a test tube insertion hole, 3 is a drive shaft hole, 4 is a flat surface, 5 is a rotating shaft, 6A is a 1.5 ml test tube, 6B is a 0.2 ml micro test tube, and 6C is a 12-row micro test. A tube, 7 is a test tube body, 8 is a cap, and 9 is a test tube adapter.
Claims (3)
該ロータの上面にロータの回転軸を取り囲むように凹部を形成し、該凹部の内面に前記回転軸に対して20°〜70°の範囲にある所定の角度傾斜した傾斜面を形成し、
該傾斜面は、前記回転軸を取り囲み、且つ、該回転軸に対して対称な複数の直線に沿って形成し、
各傾斜面に前記マイクロ試験管の外形形状にほぼ合致する形状の挿入穴であって、連試験管を形成する前記マイクロ試験管の試験管間隔とほぼ同一の間隔で8個又は12個以上の試験管挿入穴を直線状に設けることにより、
前記8本又は12本のマイクロ試験管を連ねた連試験管の着脱を同時に行うことができるようにしたことを特徴とする遠心分離機用アングルロータ。An angle rotor for a centrifuge for mounting a continuous test tube constituted by connecting 8 or 12 micro test tubes at regular intervals ,
A recess is formed on the upper surface of the rotor so as to surround the rotation shaft of the rotor, and an inclined surface inclined at a predetermined angle in the range of 20 ° to 70 ° with respect to the rotation shaft is formed on the inner surface of the recess,
Inclined surface surrounds the rotating shaft, and, formed along a plurality of straight lines symmetrical with respect to the rotary shaft,
Each inclined surface has an insertion hole having a shape substantially matching the outer shape of the micro test tube, and has eight or twelve or more at substantially the same interval as the test tube interval of the micro test tube forming the continuous test tube. By providing test tube insertion holes in a straight line,
An angle rotor for a centrifuge, wherein the continuous test tubes connected with the 8 or 12 micro test tubes can be attached and detached simultaneously .
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- 1997-07-23 JP JP19713897A patent/JP4061672B2/en not_active Expired - Fee Related
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