JP3014262B2 - 生体触媒固定化用担体および固定化生体触媒 - Google Patents
生体触媒固定化用担体および固定化生体触媒Info
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- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
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- C08F20/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms, Derivatives thereof
- C08F20/52—Amides or imides
- C08F20/54—Amides, e.g. N,N-dimethylacrylamide or N-isopropylacrylamide
- C08F20/56—Acrylamide; Methacrylamide
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、生体触媒固定化用担体
およびこれに生体触媒を固定化させてなる固定化生体触
媒に関する。
およびこれに生体触媒を固定化させてなる固定化生体触
媒に関する。
【０００２】
【従来の技術】生体触媒を工業的に使用する場合、生体
触媒からの不純物溶出の防止、反応生成物からの生体触
媒の分離性の向上、生体触媒の反復利用性の向上、生体
触媒の酵素安定性の増大および操作の連続化等の目的
で、生体触媒を固定化して用いることが広く行われてい
る。
触媒からの不純物溶出の防止、反応生成物からの生体触
媒の分離性の向上、生体触媒の反復利用性の向上、生体
触媒の酵素安定性の増大および操作の連続化等の目的
で、生体触媒を固定化して用いることが広く行われてい
る。
【０００３】生体触媒を固定化する方法としては、担体
結合法、架橋法および包括法等があるが、これらの中で
包括法は、生体触媒の漏洩が少なく、かつ、生体触媒と
担体が結合していないことから、固定化による生体触媒
の活性低下が少ないこと、多くの生体触媒の固定化に適
用できること等の利点がある。
結合法、架橋法および包括法等があるが、これらの中で
包括法は、生体触媒の漏洩が少なく、かつ、生体触媒と
担体が結合していないことから、固定化による生体触媒
の活性低下が少ないこと、多くの生体触媒の固定化に適
用できること等の利点がある。
【０００４】生体触媒の包括固定化に用いられる担体と
しては、合成高分子としてはポリアクリルアミド、ポリ
ビニルアルコール、ポリウレタン、コラーゲン、光硬化
性樹脂等、天然高分子としては、カラギーナン、アルギ
ン酸、アガロース、デンプン、ゼラチン等が知られてい
る。一般的に、合成高分子のものは天然高分子のものに
比べ、強度が高く、耐久性に優れ、かつ、生分解されに
くい等の利点があり、中でも、ポリアクリルアミドは工
業的に安価であること、重合体の強度が高いことおよび
重合時の生体触媒の失活が少ないこと等の理由から特に
よく用いられている。また、ポリアクリルアミド系包括
固定化生体触媒の膨潤度を下げ、反応時の触媒の失活を
低下させるために、アクリルアミド、カチオン性のエチ
レン性不飽和単量体および水溶性の架橋性単量体を共重
合させる方法が提案されている（特公昭５８−３５０７
８号公報参照）。
しては、合成高分子としてはポリアクリルアミド、ポリ
ビニルアルコール、ポリウレタン、コラーゲン、光硬化
性樹脂等、天然高分子としては、カラギーナン、アルギ
ン酸、アガロース、デンプン、ゼラチン等が知られてい
る。一般的に、合成高分子のものは天然高分子のものに
比べ、強度が高く、耐久性に優れ、かつ、生分解されに
くい等の利点があり、中でも、ポリアクリルアミドは工
業的に安価であること、重合体の強度が高いことおよび
重合時の生体触媒の失活が少ないこと等の理由から特に
よく用いられている。また、ポリアクリルアミド系包括
固定化生体触媒の膨潤度を下げ、反応時の触媒の失活を
低下させるために、アクリルアミド、カチオン性のエチ
レン性不飽和単量体および水溶性の架橋性単量体を共重
合させる方法が提案されている（特公昭５８−３５０７
８号公報参照）。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、ポリア
クリルアミド系包括固定化生体触媒も、空気酸化や乾燥
によりその活性が低下し易いため、通常、緩衝液等の水
溶液中に浸漬して保存されるが、その保存が常温下で長
期（例えば１カ月以上）に渉ると、保存液および固定化
生体触媒が次第に腐敗し、悪臭が発生したり保存液が濁
るなどの現象を生じ、延いては活性の低下をもたらし、
触媒として使用に耐えなくなる。そこで、その保存に当
たっては、通常、冷蔵したりあるいは保存液中に防腐剤
を添加するなどの方法が採られている。
クリルアミド系包括固定化生体触媒も、空気酸化や乾燥
によりその活性が低下し易いため、通常、緩衝液等の水
溶液中に浸漬して保存されるが、その保存が常温下で長
期（例えば１カ月以上）に渉ると、保存液および固定化
生体触媒が次第に腐敗し、悪臭が発生したり保存液が濁
るなどの現象を生じ、延いては活性の低下をもたらし、
触媒として使用に耐えなくなる。そこで、その保存に当
たっては、通常、冷蔵したりあるいは保存液中に防腐剤
を添加するなどの方法が採られている。
【０００６】しかし、冷蔵する方法は、固定化生体触媒
を大量に取り扱う工業的場面においては、設備、ユーテ
ィリティー等に膨大なコストを要することになり、ま
た、保存液中に防腐剤を添加する方法は、固定化生体触
媒を用いて反応を行う際、その反応液中に、該防腐剤が
不純物として混入することになり、いずれの方法も好ま
しくない。これらの課題の解決は、特に、固定化生体触
媒の工業的利用において裨益するところが大きい。
を大量に取り扱う工業的場面においては、設備、ユーテ
ィリティー等に膨大なコストを要することになり、ま
た、保存液中に防腐剤を添加する方法は、固定化生体触
媒を用いて反応を行う際、その反応液中に、該防腐剤が
不純物として混入することになり、いずれの方法も好ま
しくない。これらの課題の解決は、特に、固定化生体触
媒の工業的利用において裨益するところが大きい。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、従来のポ
リアクリルアミド系担体のもつ利点に加え、さらに、保
存安定性に優れた生体触媒の固定化技術について鋭意検
討した結果、担体として特定の共重合体の使用が上記課
題の解決に極めて有効であることを見出し、本発明を完
成した。
リアクリルアミド系担体のもつ利点に加え、さらに、保
存安定性に優れた生体触媒の固定化技術について鋭意検
討した結果、担体として特定の共重合体の使用が上記課
題の解決に極めて有効であることを見出し、本発明を完
成した。
【０００８】すなわち、本発明は、下記一般式（１）で
示される単量体、これと共重合可能なカチオン性のアク
リルアミド系単量体および水溶性の架橋性単量体を共重
合させて得られる生体触媒固定化用担体、および該生体
触媒固定化用担体に生体触媒を固定化させてなる固定化
生体触媒、を要旨とするものである。
示される単量体、これと共重合可能なカチオン性のアク
リルアミド系単量体および水溶性の架橋性単量体を共重
合させて得られる生体触媒固定化用担体、および該生体
触媒固定化用担体に生体触媒を固定化させてなる固定化
生体触媒、を要旨とするものである。
【０００９】
【化３】 （式中、Ｒ1 およびＲ2 はメチル基またはエチル基を表
す）
す）
【００１０】一般式（１）で示される化合物は、具体的
には、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエ
チルアクリルアミド、Ｎ−メチル−Ｎ−エチルアクリル
アミドであり、これらは二種以上併用することもでき
る。
には、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジエ
チルアクリルアミド、Ｎ−メチル−Ｎ−エチルアクリル
アミドであり、これらは二種以上併用することもでき
る。
【００１１】一般式（１）で示される単量体と共重合可
能なカチオン性のアクリルアミド系単量体は、例えば、
ジアルキルアミノアルキルメタクリルアミド、ジアルキ
ルアミノアルキルアクリルアミドならびにこれらの４級
化物であり、具体的には、ジメチルアミノプロピルアク
リルアミド、ジメチルアミノプロピルメタクリルアミ
ド、ジエチルアミノプロピルメタアクリルアミド、ジエ
チルアミノプロピルアクリルアミドならびにこれらの４
級化物等を挙げることができる。
能なカチオン性のアクリルアミド系単量体は、例えば、
ジアルキルアミノアルキルメタクリルアミド、ジアルキ
ルアミノアルキルアクリルアミドならびにこれらの４級
化物であり、具体的には、ジメチルアミノプロピルアク
リルアミド、ジメチルアミノプロピルメタクリルアミ
ド、ジエチルアミノプロピルメタアクリルアミド、ジエ
チルアミノプロピルアクリルアミドならびにこれらの４
級化物等を挙げることができる。
【００１２】水溶性の架橋性単量体としては、例えば、
メチレンビスアクリルアミド、メチレンビスメタクリル
アミド、１，２−ヒドロキシエチレンビスアクリルアミ
ド、１，３−ジ−アクリルアミドメチル−２−イミダゾ
リドン、ジアクリルアミドメチルエチレン尿素、１，２
−ヒドロキシエチレンビスアクリルアミド、ジアクリル
アミドメチルエーテル、エチレングリコールジアクリレ
ート、エチレングリコールジメタクリレート、ヘキサヒ
ドロ−１，３，５−トリアシル−Ｓ−トリアジン、ビス
アクリルアミド酢酸等をあげることができ、中でも、メ
チレンビスアクリルアミド、メチレンビスメタクリルア
ミド、１，２−ヒドロキシエチレンビスアクリルアミ
ド、１，３−ジ−アクリルアミドメチル−２−イミダゾ
リドン、ジアクリルアミドメチルエチレン尿素、１，２
−ヒドロキシエチレンビスアクリルアミド等の使用が好
ましい。
メチレンビスアクリルアミド、メチレンビスメタクリル
アミド、１，２−ヒドロキシエチレンビスアクリルアミ
ド、１，３−ジ−アクリルアミドメチル−２−イミダゾ
リドン、ジアクリルアミドメチルエチレン尿素、１，２
−ヒドロキシエチレンビスアクリルアミド、ジアクリル
アミドメチルエーテル、エチレングリコールジアクリレ
ート、エチレングリコールジメタクリレート、ヘキサヒ
ドロ−１，３，５−トリアシル−Ｓ−トリアジン、ビス
アクリルアミド酢酸等をあげることができ、中でも、メ
チレンビスアクリルアミド、メチレンビスメタクリルア
ミド、１，２−ヒドロキシエチレンビスアクリルアミ
ド、１，３−ジ−アクリルアミドメチル−２−イミダゾ
リドン、ジアクリルアミドメチルエチレン尿素、１，２
−ヒドロキシエチレンビスアクリルアミド等の使用が好
ましい。
【００１３】これら単量体の量的関係は、全単量体に対
し、通常、一般式（１）で示される単量体が７０〜９
９．８重量％、好ましくは８０〜９９重量％、カチオン
性のアクリルアミド系単量体が０．１〜１０重量％、好
ましくは０．５〜１０重量％および水溶性の架橋性単量
体が０．１〜２０重量％、好ましくは０．５〜１０重量
％である。尚、必要に応じ、一般式（１）で示される単
量体と共重合可能な上記以外の水溶性単量体を若干量加
えることもできる。
し、通常、一般式（１）で示される単量体が７０〜９
９．８重量％、好ましくは８０〜９９重量％、カチオン
性のアクリルアミド系単量体が０．１〜１０重量％、好
ましくは０．５〜１０重量％および水溶性の架橋性単量
体が０．１〜２０重量％、好ましくは０．５〜１０重量
％である。尚、必要に応じ、一般式（１）で示される単
量体と共重合可能な上記以外の水溶性単量体を若干量加
えることもできる。
【００１４】上記固定化担体に包括固定化される生体触
媒とは、酵素、微生物、オルガネラ、動植物細胞および
これらを精製したもの、あるいは破砕したものであり、
その由来および形態を問わない。例えば、微生物として
は細菌類、放線菌類、酵母類、カビ類等、いずれの類の
微生物でもよく、具体的には、Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ属、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｒｈｏ
ｄｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｇｏｒｄｏｎａ属、Ｖｉｂｒｉｏ
属、Ｎｉｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ属、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏ
ｃｃｕｓ属、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属、Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ属、Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ属、Ｎｏｃａｒｄ
ｉａ属、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｅｎｄｏｍｙ
ｃｅｓ属、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属、Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ属、Ｍｕｃｏｒ属、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ属等に属
する微生物が挙げられる。
媒とは、酵素、微生物、オルガネラ、動植物細胞および
これらを精製したもの、あるいは破砕したものであり、
その由来および形態を問わない。例えば、微生物として
は細菌類、放線菌類、酵母類、カビ類等、いずれの類の
微生物でもよく、具体的には、Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ属、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｒｈｏ
ｄｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｇｏｒｄｏｎａ属、Ｖｉｂｒｉｏ
属、Ｎｉｔｒｏｓｏｍｏｎａｓ属、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏ
ｃｃｕｓ属、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属、Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ属、Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ属、Ｎｏｃａｒｄ
ｉａ属、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｅｎｄｏｍｙ
ｃｅｓ属、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属、Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ属、Ｍｕｃｏｒ属、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ属等に属
する微生物が挙げられる。
【００１５】本発明の固定化生体触媒の調製は、例え
ば、生体触媒懸濁液に、単量体混合物を添加し、これに
通常用いられている重合開始剤および促進剤、例えば、
過硫酸カリウム、およびＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメ
チルエチレンジアミンを加え、ｐＨ５〜１０、好ましく
は６〜８、温度０〜５０℃、好ましくは０〜３５℃に１
５分から１２０分間保って重合、ゲル化させることによ
り行われる。
ば、生体触媒懸濁液に、単量体混合物を添加し、これに
通常用いられている重合開始剤および促進剤、例えば、
過硫酸カリウム、およびＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメ
チルエチレンジアミンを加え、ｐＨ５〜１０、好ましく
は６〜８、温度０〜５０℃、好ましくは０〜３５℃に１
５分から１２０分間保って重合、ゲル化させることによ
り行われる。
【００１６】重合ゲル中の生体触媒の含有量は、使用す
る生体触媒の種類、形態等により異なるが、通常、０．
１〜４０重量％、好ましくは１〜２０重量％である。ま
た、重合反応液体中の単量体の含有量は、通常、２〜３
０重量％、好ましくは５〜１５重量％である。
る生体触媒の種類、形態等により異なるが、通常、０．
１〜４０重量％、好ましくは１〜２０重量％である。ま
た、重合反応液体中の単量体の含有量は、通常、２〜３
０重量％、好ましくは５〜１５重量％である。
【００１７】これら固定化生体触媒の形状は、粒状、膜
状、板状等いかなるものであってもよい。
状、板状等いかなるものであってもよい。
【００１８】
【効果】本発明の生体触媒固定化用担体の使用により、
従来の高分子系担体、就中、ポリアクリルアミド系担体
のもつ強度等の利点に加え、さらに保存安定性に優れた
固定化生体触媒を得ることができる。本発明の固定化生
体触媒は１カ月以上の常温保存においても腐敗が起こら
ず極めて安定である。
従来の高分子系担体、就中、ポリアクリルアミド系担体
のもつ強度等の利点に加え、さらに保存安定性に優れた
固定化生体触媒を得ることができる。本発明の固定化生
体触媒は１カ月以上の常温保存においても腐敗が起こら
ず極めて安定である。
【００１９】
【実施例】以下、本発明を実施例によりさらに具体的に
説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるもの
ではない。なお、部および％は重量基準である。
説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるもの
ではない。なお、部および％は重量基準である。
【００２０】実施例１Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｒｈｏｄｏｃｈｒｕｏｓ Ｊ
−１菌株（微工研条寄第１４７８号 )を好気的に培養
し、洗浄、濃縮した固定化用菌体液（乾燥菌体分１５
％）を調製した。氷冷したこの濃縮菌体液７０部に５０
ｍＭのリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．０、以下同じ）
１６部、Ｎ，Ｎ−ジエチルアクリルアミド、ジメチルア
ミノプロピルアクリルアミド、メチレンビスアクリルア
ミドを各々、９２，３，５％になるように調製した単量
体混合液１０部を加え、氷水中で均一な懸濁液とした。
これに１０％のＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチ
レンジアミン、および１０％の過硫酸アンモニウム水溶
液を２部ずつ加え、３５℃以下に１時間保って重合、ゲ
ル化させた。こうして得られたブッロク状の固定化菌体
を小粒子に裁断後、水洗して評価用固定化菌体試料とし
た。ポリエチレン製瓶に、この試料２０ｇを０．５％の
硫酸ナトリウム水溶液８０ｇに浸漬して密閉し、３０℃
にて１ヶ月保存したが、外観上の変化もなく、雑菌の繁
殖は極めて少なかった。
−１菌株（微工研条寄第１４７８号 )を好気的に培養
し、洗浄、濃縮した固定化用菌体液（乾燥菌体分１５
％）を調製した。氷冷したこの濃縮菌体液７０部に５０
ｍＭのリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．０、以下同じ）
１６部、Ｎ，Ｎ−ジエチルアクリルアミド、ジメチルア
ミノプロピルアクリルアミド、メチレンビスアクリルア
ミドを各々、９２，３，５％になるように調製した単量
体混合液１０部を加え、氷水中で均一な懸濁液とした。
これに１０％のＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチ
レンジアミン、および１０％の過硫酸アンモニウム水溶
液を２部ずつ加え、３５℃以下に１時間保って重合、ゲ
ル化させた。こうして得られたブッロク状の固定化菌体
を小粒子に裁断後、水洗して評価用固定化菌体試料とし
た。ポリエチレン製瓶に、この試料２０ｇを０．５％の
硫酸ナトリウム水溶液８０ｇに浸漬して密閉し、３０℃
にて１ヶ月保存したが、外観上の変化もなく、雑菌の繁
殖は極めて少なかった。
【００２１】比較例１ 比較のため、アクリルアミド系の固定化担体を用いて固
定化菌体試料を調製した。すなわち、単量体混合液が、
アクリルアミド、ジメチルアミノプロピルメタクリレー
ト、メチレンビスアクリルアミド、各々９２，３，５％
である濃度４０％の単量体水溶液を２５部とし、濃縮菌
体液７０部、５０ｍＭのリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ
７．０）１部に、１０％のＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラ
メチルエチレンジアミン、および１０％の過硫酸アンモ
ニウム水溶液を２部ずつ加え、実施例１と同様に、重
合、洗浄した。この試料を実施例１と同様に０．５％の
硫酸ナトリウム水溶液に浸漬して、３０℃にて１ヶ月保
存したところ、雑菌の繁殖が極めて多く、強い腐敗臭、
および液の濁りを生じた。
定化菌体試料を調製した。すなわち、単量体混合液が、
アクリルアミド、ジメチルアミノプロピルメタクリレー
ト、メチレンビスアクリルアミド、各々９２，３，５％
である濃度４０％の単量体水溶液を２５部とし、濃縮菌
体液７０部、５０ｍＭのリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ
７．０）１部に、１０％のＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラ
メチルエチレンジアミン、および１０％の過硫酸アンモ
ニウム水溶液を２部ずつ加え、実施例１と同様に、重
合、洗浄した。この試料を実施例１と同様に０．５％の
硫酸ナトリウム水溶液に浸漬して、３０℃にて１ヶ月保
存したところ、雑菌の繁殖が極めて多く、強い腐敗臭、
および液の濁りを生じた。
【００２２】実施例２〜６および比較例２〜６ 実施例１および比較例１と同様にして、単量体、生体触
媒の種類および濃度を変えて、固定化生体触媒を調製
し、評価した。その結果を表−１に示す。なお、実施例
２〜４および比較例２〜４は１００ｍＭリン酸カリウム
緩衝液（ｐＨ７）に、実施例５〜６および比較例５〜６
は０．９％塩化ナトリウム水溶液に固定化生体触媒を浸
漬し、３０℃で１カ月保存した。また、腐敗性の評価は
臭気および浸漬液の濁りの程度により判定した。表中０
は臭気のないことまたは濁っていないことを意味し、数
値が大きくなるに従い、腐敗臭が強くなるあるいは浸漬
液が濁ることを示し、最大４の５段階評価とした。
媒の種類および濃度を変えて、固定化生体触媒を調製
し、評価した。その結果を表−１に示す。なお、実施例
２〜４および比較例２〜４は１００ｍＭリン酸カリウム
緩衝液（ｐＨ７）に、実施例５〜６および比較例５〜６
は０．９％塩化ナトリウム水溶液に固定化生体触媒を浸
漬し、３０℃で１カ月保存した。また、腐敗性の評価は
臭気および浸漬液の濁りの程度により判定した。表中０
は臭気のないことまたは濁っていないことを意味し、数
値が大きくなるに従い、腐敗臭が強くなるあるいは浸漬
液が濁ることを示し、最大４の５段階評価とした。
【００２３】
【表１】
フロントページの続き (56)参考文献 特開 平１−269493（ＪＰ，Ａ) 特開 昭52−94476（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−9485（ＪＰ，Ａ) 特開 平３−251178（ＪＰ，Ａ) 特開 平５−28106（ＪＰ，Ａ) 特開 平５−79377（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12N 11/08 C12N 11/04 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ) ＷＰＩＤＳ（ＳＴＮ)
Claims (5)
- 【請求項１】下記一般式（１）で示される単量体、これ
と共重合可能なカチオン性のアクリルアミド系単量体お
よび水溶性の架橋性単量体を共重合させて得られる生体
触媒固定化用担体。 【化１】 （式中、Ｒ1 およびＲ2 はメチル基またはエチル基を表
す） - 【請求項２】下記一般式（１）で示される単量体、これ
と共重合可能なカチオン性のアクリルアミド系単量体お
よび水溶性の架橋性単量体を共重合させて得られる生体
触媒固定化用担体に生体触媒を固定化させてなる固定化
生体触媒。 【化２】 （式中、Ｒ1 およびＲ2 はメチル基またはエチル基を表
す） - 【請求項３】一般式（１）で示される単量体がＮ，Ｎ−
ジメチルアクリルアミドまたはＮ，Ｎ−ジエチルアクリ
ルアミドである請求項２記載の固定化生体触媒。 - 【請求項４】カチオン性アクリルアミド系単量体がジア
ルキルアミノアルキルアクリルアミド、ジアルキルアミ
ノアルキルメタクリルアミドまたはこれらの４級化物で
ある請求項２記載の固定化生体触媒。 - 【請求項５】全単量体に対し、一般式（１）で示される
単量体が７０〜９９．８重量％、カチオン性のアクリル
アミド系単量体が０．１〜１０重量％および水溶性の架
橋性単量体が０．１〜２０重量％である請求項２記載の
固定化生体触媒。
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-
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