JP2941778B2

JP2941778B2 - 微生物培地を備える組成物とその使用

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Publication number: JP2941778B2
Application number: JP10122547A
Authority: JP
Inventors: ナタリー・ピノー; リシャール・マルタン; リオネル・ブリトン; ルシャン・オウベール
Original assignee: LOreal SA
Current assignee: LOreal SA
Priority date: 1997-05-05
Filing date: 1998-05-01
Publication date: 1999-08-30
Anticipated expiration: 2018-05-01
Also published as: ES2217517T3; EP0876813B1; CA2234833C; CA2234833A1; DE69822546T2; ATE262312T1; US6242229B1; FR2762782A1; DE69822546D1; EP0876813A1; FR2762782B1; JPH10298085A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、少なくとも１種の
非光合成糸状細菌（filamentous bacterium）のための
培地（culture medium）、上記培地は清浄化及び安定化
されている、の有効量を、活性素因として備える化粧品
又は調剤学的組成物に関する。本発明はまた、上記組成
物を用いた、美容処理方法（cosmetic treatment proce
ss）への同様の上記培地の使用に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来技術において化粧品中又は調剤中へ
の微生物、主に抽出物の形態で、それらのために認識す
ることができる特性のために使用することは知られてい
る。

【０００３】抽出物の語は、培養後及びその培地から一
度分離された微生物バイオマス、上記バイオマスの単純
な凍結から微生物の構成成分の非常に複雑な精製までの
範囲とすることができる各種の処理を経た上記微生物バ
イオマスに相当する生産物に帰すると解される。

【０００４】例えば、化粧品中に使用される酵母エキ
ス、乳製品の調製に使用される細菌、殺菌剤として、瘢
痕化剤として、又は代替的な免疫刺激剤として使用され
る細菌の抽出物が挙げられる。

【０００５】より正確には、例えば細胞成長の刺激と連
結組織の成熟の変更により皮膚の老化を遅延させること
を意図した組成物の調製において、リボゾームの分画
（ribosomal fractions）の化粧品中への使用が挙げら
れる（EP-A-631,773）。

【０００６】医薬品において、免疫防御を強化すること
を意図した組成物、特に危険な感染に罹り且つ細菌、ウ
イルス又はカビによる日和見感染に感受性である患者の
ためのもの（WO 91/11174）又は代替的に耳鼻咽喉科領
域の疾患に関して（FR- 2,253,499、FR 2,360,314、FR
2,388,563、FR 2,674,755及びZA 8801071）、又は代替
的にアレルギー（US 4,946,945）のためのものが知られ
ている。

【０００７】これらの組成物は一般に、微生物リボソー
ム分画の調製に用いる。

【０００８】これは実証される多くの特性と化粧品及び
調剤中の両方に使用するための細菌の部類である。それ
らは、Bergey's Manual of Systematic Bacteriology
（vol.3、sections 22と23、９th edition, 1989）の分
類に従って記載された通り、糸状（filamentous）、非
光合成（non-photosynthetic）な細菌の部類である。

【０００９】それぞれが既に開示されているこれらの細
菌は、一般に水中に生息し、且つ特に海水中又は温泉中
に見出すことができる。

【００１０】これらの細菌又はその抽出物は、それらが
抗炎症性及び瘢痕形成特性を持つこと、及びそれらが抗
ざ瘡及び抗脂漏症力を持ち、且つそれらが皮膚の保湿化
を促進する能力がある点に関し、フランス特許FR-2,28
3,223号中に開示される。

【００１１】特許出願EP-A-0,681,831号には、皮膚の老
化と戦うことを意図した化粧品組成物中にそれらの細菌
又はその抽出物の使用が開示される。これの理由は、こ
れら細菌又はその抽出物が表皮の再生の分野において使
用できることを示しているためである。

【００１２】特許出願EP-A-0,761,204号は、それらの敏
感肌に関する柔軟化特性（soothingproperty）のために
これら細菌又はそれらの抽出物の使用がクレームされ、
この特性はさらに、物質Ｐ-アンタゴニストに通じると
されている。

【００１３】特許出願WO 94/02158号及び特許出願EP-A-
0,765,667号においてそれら細菌又はその抽出物の免疫
刺激特性が化粧品中及び調剤中にクレームされている。

【００１４】これら全ての出願において、その活性剤
は、培養液から分離された細菌のバイオマスからなり、
さらに任意に各種の処理を受けている。

【００１５】

【発明が解決しようとする課題】このバイオマスの生産
は、それがデリケートであるために及びこの出発材料の
コスト的価値と同じくその調製のために要する時間が増
加するために、特有な増殖条件が要求される。

【００１６】出願人は、驚くべきことに且つ思いがけず
に、清浄化及び安定化されている非光合成糸状細菌の培
養液が、培養と分離の終わりとともにもはや利用できな
いと考えられたものがそのバイオマスと類似した特性を
有していることを見出した。その上、より予測し得ない
ことには、その培地によるこれら特性の発現のレベルが
そのバイオマスと完全に匹敵する。

【００１７】そのような発見によって表される有効性
は、特に３００リットルの培養器中での培養により、バ
イオマスの最大乾物重が僅か２７０グラムから３６０グ
ラムの間の製造を管理することが知られる時に、直ちに
理解できる。

【００１８】

【課題を解決するための手段】かくして、本発明の主題
は、化粧学的（cosmetically）及び／又は調剤学的（ph
armaceutically）に許容できる支持体（support）中
に、少なくとも１種の非光合成糸状細菌用の培地（cult
ure medium）、該培地は清浄化及び安定化される、の有
効な量を備える化粧品又は調剤学的組成物である。

【００１９】

【発明の実施の形態】化粧学的及び／又は調剤学的に許
容できる支持体、の表現は、何らかの生理学的に許容で
きる支持体に帰すると解される。

【００２０】清浄化された培地、の表現は、微生物、特
に細菌の増殖に利用され、上記微生物の増殖の後、上記
培地と上記微生物の物理的な分離を備える操作を経てい
る、培地に帰すると解される。

【００２１】安定化された培地、の表現は、それの本質
的な特性を保存する同様の時間、直ぐに与えられる選択
で見出される状態においてその保存を意図する操作を経
ている培地に帰すると解される。特に、これが微生物の
培地である場合、この操作は、例えば上記培地の無菌
化、すなわち保存、例えばそれが有する何らかの生物学
的特性の保存と同時に、微生物の成長をさせることがで
きなくする操作である。

【００２２】本発明に従って使用される非光合成糸状細
菌の中で、ベギアトア（Beggiatoales）目に属する細菌
が特に好適である。さらに好ましくは、Beggiatoa、Vit
reoscilla、Flexithrix 又は Leucothrix属に属する細
菌が好適である。

【００２３】使用することができる細菌の中で、例え
ば： Vitreoscilla filiformis （ATCC 15551） Vitreoscilla beggiatoides （ATCC 43181） Beggiatoa alba （ATCC 33555） Flexithrix dorotheae （ATCC 23163） Leucothrix mucor （ATCC 25107） Sphaerotilus natans （ATCC 13338）を挙げることができる。

【００２４】Vitreoscilla filiformis の株（strain）
が本発明に従い好適に使用される。

【００２５】本発明に従って利用し得る培地を調製する
ために、上記細菌は当業者に周知の方法に従って培養す
ることができる。この点については、これら細菌を培養
するために要求される全ての情報は、Bergey's Manual
of Systematic Bacteriology（9th edition, 1989）中
に見出されるだろう。

【００２６】非光合成糸状細菌は、他と比べて培養が異
なること、及び純粋培養の生産物は同様に異なることが
知られる。我々が最も推奨する貧定義培地（poory defi
nedmedia）の使用は、水を主体として用い各種の解離物
（maceration）を含む。

【００２７】好適には、本発明で使用することのできる
培地は、特許出願WO 94/02158中の出願人によって開示
されたプロセスに従い、非光合成糸状細菌のバイオマス
の調製をさせる培地である。

【００２８】出願人は、糖質に代えて炭素源として酢酸
塩を使用した反-選択により、これらの細菌に適用させ
ることが可能であることを示している。

【００２９】出願人はまた、これらの細菌を完全定義培
地（fully defined culture medium）で培養可能である
ことも示している。培養は特に以下の培地中で実行する
ことができる：自己消化酵母エキス０．５から５ｇ／ｌペプトン０．５から５ｇ／ｌグルコース０．５から７ｇ／ｌヘラー微量要素０．５から５ｇ／ｌＣａＣｌ₂・１０Ｈ₂Ｏ０．０１から０．２０ｇ／ｌ。

【００３０】この混合物は蒸留水で１０００ｍｌとされ
る。使用することのできるペプトンとしては、例えば大
豆パパイン消化ペプトンが挙げられる。

【００３１】この特有な培地は一般に使用されるカタラ
ーゼと硫化物の存在しないことによって異なるが、これ
らの成分はこれまで必須成分として一般に考えられてい
た。

【００３２】ヘラー微量要素（Heller microelements）
は後述で与えられる組成であり、ヘラーによって（Hell
er, Ann Sci. Nat. Biol. Veg. 14: 1-223(1953)）開示
される。

【００３３】これらはヘラーにより認識されている各種
の成分要素の混合物とされ、細菌培養用ではなく、イン
ビトロでの滋養分の多い植物組織の培養のためのもので
ある。それは、ヘラー微量成分が全て必須であるか又は
非光合成糸状細菌の培養に有用であるかの何れか一方を
決定することを示唆することはできないことに注目すべ
きである。しかしながら、ヘラー微量要素を、培養され
るべきと考えられる細菌を有効に培養させるために、上
述した成分中に挙げられた他の成分と組合せ、共同使用
することが見出される。

【００３４】１リットル当たりのヘラー微量要素の組成
は、以下の通りである：ＺｎＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ１ｇＭｎＳＯ₄・Ｈ₂Ｏ０．０７６ｇＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏ０．００３ｇＫＩ０．０１０ｇＨ₃ＢＯ₃ １ｇＡｌＣｌ₃・６Ｈ₂Ｏ０．０５０ｇＮｉＣｌ₂・６Ｈ₂Ｏ０．０３０ｇ。

【００３５】その培養は、その細菌に特有な培養のため
に好適である至適温度で実行することができる。一般
に、この温度は、菌株に基づいて１８から４０℃の間と
される。培地のｐＨは、好ましくは５．５から８の間と
される。

【００３６】その細菌の培養が終末段階、すなわち、一
般に該バイオマスが指数関数的増殖を終えた時点、に到
達していると、上記バイオマスは培地から分離される。
この分離は、例えば遠心分離、濾過、アルコール（エタ
ノール、イソプロパノール、イソブタノール）による凝
固又は予備層（澱粉、珪藻土など）を用いた掻き取りシ
リンダー（scraped cylinder）上での乾燥のような何れ
かの標準的な技法によって行うことができる。

【００３７】遠心分離法が好適に使用される。

【００３８】このケースにおいて、該培地は何れかの周
知の方法によって安定化することができる。実施例のた
めに、滅菌濾過、オートクレーブ処理、超高温（ＵＨＦ
技法）、高圧滅菌、γ線又は凍結が挙げられる。

【００３９】好ましくは、オートクレーブ処理による滅
菌化の方法が使用される。有利には、そのオートクレー
ブ処理は、１１５℃から１２１℃の間の温度で、且つ好
ましくは１５から４０分のピリオドで実行される。

【００４０】本発明に従って使用することのできる培地
の調製の実例は、更に後述の実施例中から与えられる。

【００４１】本発明の組成物中に使用することのできる
少なくとも１種の非光合成糸状細菌の清浄化及び安定化
された培地の量は、勿論、望ましい効果に基づく。かく
してそれは広い範囲内で可変とすることができる。

【００４２】大きさ（magnitude）のオーダーを与える
ために、該組成物は、組成物の全重量の０．０００１重
量％から３０重量％で表される、好ましくは組成物の全
重量の０．０１重量％から１５重量％までの量の、少な
くとも１種の非光合成糸状細菌の培地を含むことができ
る。

【００４３】該組成物は、皮膚（身体の皮膚の何れかの
部位に）、毛髪、爪又は粘膜（口の（buccal）、頬の
（jugal）、歯茎の（gingival）、生殖器の（genital）
又は連結組織（connective）に）に、摂取、注入又は塗
布することができる。投与の態様に従って、本発明によ
る組成物は通常に使用される何れかの調剤学的形態とす
ることができる。

【００４４】皮膚への局部適用のため、該組成物は殊
に、水性又は油性溶液或いはローション又はセラム（se
rum）タイプの分散物、水相中に油相が分散された（Ｏ
／Ｗ）又は逆相（Ｗ／Ｏ）により得られる乳液タイプの
液状又は半液状の濃度の乳化物、又は懸濁物又は水性の
濃度の薄い乳化物又は無水のゲル又はクリームタイプ、
又は代替的にマイクロカプセル又はミクロ粒子又はイオ
ン性及び／又は非イオン性タイプのベシクル分散物の形
態とすることができる。これらの組成物は、通常の方法
に従って調製される。

【００４５】それらはまた、水性、アルコール性又は水
−アルコール溶性の形態において、又はクリーム、ゲ
ル、エマルジョン又はフォームの形態において、又は代
替的に高圧下でプロペラントを備えるエアゾール組成物
の形態において、毛髪用に使用することもできる。

【００４６】注入用として、該組成物は水性又は油性ロ
ーションの形態において又はセラム（serum）の形態と
することができる。眼科用として、滴下薬及び摂取剤の
形態とすることができ、それはウエハ状カプセル、顆
粒、シロップ又は錠剤の形態とすることができる。

【００４７】本発明に従う組成物の各種成分の量は、当
該分野で考慮される通常的に使用される量とされる。

【００４８】これらの組成物は特に、顔用、手用、足
用、主要な解剖学上のシワ又はボディ用のクレンジン
グ、保護用、トリートメント又はケア用クリーム（例え
ばデイクリーム、ナイトクリーム、メークアップ除去ク
リーム、ファンデーションクリーム、又は抗日光用クリ
ーム）、液状ファンデーション、メークアップ除去乳
液、ボディ保護乳液、ボディケア乳液、抗日光乳液、ス
キンケアローション、ゲル又はムース、例えばクレンジ
ングローション、抗日光ローション、人工タンニングロ
ーション、入浴用組成物、殺菌剤を含んだデオドライザ
ー用組成物、アフターシェーブゲル又はローション、脱
毛クリーム、忌虫剤、鎮痛用組成物、湿疹、しゅさ性ざ
瘡、乾癬、苔癬及びそう痒症のようなある種の皮膚疾患
を治療するための組成物を構成する。

【００４９】本発明に従う組成物はまた、クレンジング
石鹸又はバー（bars）を構成する固形調製物を構成する
こともできる。

【００５０】該組成物はまた、高圧下でプロペラントも
含んだエアゾール組成物の形態として包装することもで
きる。

【００５１】本発明に従う組成物はまた、ヘアケア製
品、特に、シャンプー、ヘアーセッティングローショ
ン、処理ローション、スタイリングゲル又はクリーム、
ダイ（dye）組成物（特に酸化ダイ組成物）任意にダイ-
シャンプーの形態で、毛髪用の再構成（restructurin
g）ローション、パーマネントウエーブ用組成物（特に
パーマネントウエーブ操作の最初の段階のための組成
物）、毛髪の欠落を予防するためのローション又はゲ
ル、抗寄生虫シャンプー、など、とすることもできる。

【００５２】該組成物はまた、例えば練り歯磨のような
口腔歯科的な使用とすることもできる。この場合におい
て、該組成物は、アジュバントと、口腔用に使用される
組成物中に通常的である添加剤、特に界面活性剤、シッ
クナー、湿潤剤、シリカのような研磨剤、フッ化物、特
にフッ化ナトリウムのような各種の活性成分、及び任意
的にサッカリン酸ナトリウムのような甘味料を含めるこ
とができる。

【００５３】該組成物がエマルジョンである場合、脂質
相の比率は、全組成物重量に比し、５重量％から８０重
量％の範囲、好ましくは５重量％から５０重量％の範囲
とすることができる。該エマルジョン形態の組成物中に
使用される油分、ロウ、乳化剤及び共乳化物（co-emuls
ifiers）は、化粧品分野において通常的に使用されるそ
れらから選択される。該乳化剤及び共乳化物は、組成物
の全重量に比して０．３重量％から３０重量％、好まし
くは０．５から２０重量％までの範囲の比率において組
成物中に存在させる。該エマルジョンはまた、脂質ベシ
クルを含むこともできる。

【００５４】該組成物が油性ゲル又は溶液である場合、
その脂質相は該組成物の全重量に比し９０重量％以上と
表現することができる。

【００５５】周知の手法において、該化粧品組成物は化
粧品分野では慣例の、親水性又は親油性の添加物、保存
料、抗酸化剤、溶剤、香料、フィラー、サンスクリー
ン、吸臭剤及び染料のようなアジュバントを含めること
もできる。これら各種のアジュバントの量は、化粧品分
野における通常に使用される量とされ、例えば組成物の
全重量の０．０１重量％から１０重量％とされる。それ
らの本質に基づいて、これらのアジュバントは、脂質相
中へ、水相中へ及び／又は脂質粒子中へ導入することが
できる。

【００５６】本発明において使用することのできる油分
又はロウとしては、鉱油（液状石油ジェリー）、植物油
（カリテバター(carite butter)の液状分画、ヒマワリ
油）、動物油（パーヒドロスクワレン）、合成油（パー
セリン(purcellin)油）、シリコーン油又はワックス
（シクロメチコーン）及びフッ素化油（パーフルオロポ
リエーテル）、ミツロウ、カルナウバロウ又はパラフィ
ンワックスが挙げられる。脂肪アルコールと脂肪酸（ス
テアリン酸）をこれらの油分中に添加することができ
る。

【００５７】本発明において使用することのできる乳化
剤としては、グリセリルステアレート、ポリソルベート
６０及び Gattefosse社によってTefose^Rの名称の下に販
売されるPEG-6/PEG-32/グリコールステアレート混合物
を挙げることができる。

【００５８】本発明において使用することにできる溶剤
としては、低級アルコール、特にエタノールとイソプロ
パノール、及びプロピレングリコールが挙げられる。

【００５９】本発明において使用することができる親水
性のゲル化剤の内で、カルボキシビニルポリマー（carb
omer）、アクリレート／アルキルアクリレートコポリマ
ーのようなアクリルコポリマー、ポリアクリルアミド、
ヒドロキシプロピルセルロースのようなポリサッカリ
ド、天然ゴムと粘土が挙げられ、及び、親油性ゲル化剤
としては、ベントナイトのような粘土の修正物、ステア
リン酸アルミニウムのような脂肪酸の金属塩及び疎水性
シリカ、エチルセルロースとポリエチレンを挙げること
ができる。

【００６０】該組成物は、タンパク質又はタンパク加水
分解物、アミノ酸、ポリオール、尿素、アラントイン、
糖質及び糖質誘導体、水溶性ビタミン類、植物抽出物及
びヒドロキシ酸のような他の親水性活性剤を含めること
ができる。

【００６１】レチノール（ビタミンＡ）とその誘導体、
トコフェロール（ビタミンＥ）とその誘導体、必須脂肪
酸、セラミド類、精油及びサリチル酸とそれの誘導体
は、親油性活性剤として使用することができる。

【００６２】本発明に従って、該組成物は、特に皮膚の
病気の予防及び／又は治療を意図した別な活性剤を含む
ことができる。これら活性剤の中で、実例として： − レチノイン酸とその異性体、レチノールとそのエス
テル、ビタミンＤとその誘導体、エストラジオールのよ
うなエストロゲン、コウジ酸又はヒドロキノンのよう
な、皮膚の分化及び／又は増殖及び／又は色素沈着を減
じる薬剤； − クリンダマイシンリン酸、エリスロマイシン又はテ
トラサイクリンのクラスの抗生物質のような抗細菌剤； − 抗寄生虫剤、特にメトロニダゾール、クロタミトン
又はピレスロイド； − 抗カビ剤、特にエコナゾール、ケトコナゾール又は
ミコナゾール又はそれらの塩類のようなイミダゾールの
クラスに属する化合物、アンフォテリシンＢのようなポ
リエン化合物、テルビナフィンのようなアリルアミンフ
ァミリーの化合物、又は代替的なオクトピロックス； − アシクロビルのような抗ウイルス剤； − ヒドロコーチゾン、ベタメタゾンバレレート又はク
ロベタゾールプロピオネート、の様なステロイド系抗炎
症剤、又はイブプロフェンとその塩類、ジクロフェナッ
クとそれの塩類、アセチルサリチル酸、アセトアミノフ
ェン又はグリチルレチン酸のような非−ステロイド系抗
炎症剤； − 塩酸リドカインとその誘導体のような麻酔剤； − セナルジン、トリメプラジン又はシプロヘプタジン
のような抗痒疹剤； − α-及びβ-ヒドロキシカルボン酸又はβ-ケトカル
ボン酸、それらの塩類、アミド又はエステル、特にグリ
コール酸、乳酸、サリチル酸、クエン酸及び一般の果実
酸、及び５−ｎ−オクタノイルサリチル酸のような角質
溶解剤； − α-トコフェロール又はそのエステル、ジスムター
ゼ超酸化物、ある金属キレート剤又はアスコルビン酸と
そのエステルのような抗フリーラジカル剤； − プロゲステロンのような抗脂漏症剤； − オクトピロックス又はジンクピリチオンのような抗
フケ剤； − レチノイン酸又はベンゾイルペロキシドのような抗
ざ瘡剤；を挙げることができる。

【００６３】かくして、本発明に従う組成物はまた、抗
細菌剤、抗寄生虫剤、抗カビ剤、抗ウイルス剤、抗炎症
剤、抗痒疹剤、麻酔剤、角質溶解剤、抗フリーラジカル
剤、抗脂漏症剤、抗フケ剤、抗ざ瘡剤及び／又は皮膚の
分化及び／又は細胞増殖及び／又は色素沈着を修正する
薬剤から選択される少なくとも１種の薬剤を含めること
もできる。

【００６４】年齢のため、又は環境ファクターのような
別の要因の何れかによる皮膚の老化は、皮膚の機械的特
性の悪化、特にシワの出現を伴う弾性と緊張の損失によ
ってもたらされる。この現象は、特に弾性組織における
反対の変化、及び特に弾性繊維の数と直径の減少とが結
びついて考えられる。皮膚の老化はまた、皮膚の成分の
全ての薄化、これの結果、皮膚の壊れ易さの増加も伴っ
て起こる。それらの活動力における反対の変化と一緒に
起こる繊維芽細胞の希薄化は、皮膚の老化のプロセスに
おける非常に重要な規則を演じるように考察される。ま
た、二酸化炭素の除去と酸素の吸収を伴うガス交換が皮
膚の表面で起こることも、知られている。この現象は、
皮膚呼吸として知られ、老化を減じ、且つこの減少は表
皮の活動力を減じる結果であると考察される。

【００６５】本出願人は、少なくとも１種の非光合成糸
状細菌のための清浄化及び安定化された培地が、それを
適用した時に、皮膚の老化を減じ及び／又は遅延できる
ことを見出している。

【００６６】特に、本出願人は、その培地が皮膚を横切
るガス交換を変更し、繊維芽細胞の増殖を刺激し、かく
して表皮の機械的特性を改善することができることを見
出している。

【００６７】かくして本発明はまた、上述した化粧品組
成物を、皮膚へ、頭皮へ及び／又は粘膜に適用（塗布）
することによって、皮膚の老化を減じ及び／又は遅延す
ることを意図した美容処理方法（cosmetic treatment p
rocess）に関する。

【００６８】本発明の主題はまた、上述したような非光
合成糸状細菌のための培地の有効な量を備える、皮膚の
老化を減じ及び／又は遅延することを意図した調剤学的
組成物である。

【００６９】免疫システムは、それらの再生、それらの
活性化及びそれらの分化を確保する制御機能の複数性を
必要とする特殊化された細胞のセットを備え、これらは
免疫担当（immunocompetence）の通常のレベルのために
必須となる。その免疫システムの役割は、自己の識別か
ら病原菌及び自然発生的な腫瘍を排除するための自己か
ら非自己までである。何らかの細胞の減少、何らかの免
疫システムの調整不良又は何らかの機能的な欠陥は、非
自己に反するように自己を認識するためのメカニズムの
破壊によって特徴付けられた病理学的な兆候の発現を促
進を受け易く、且つ微生物の攻撃及び新生物性の処理に
関して大きな感受性を持つ。

【００７０】皮膚は、身体における最も大きな器官を構
成し、且つ免疫防御システムの主要な活性要素の一つと
して認識される。表皮細胞の３つのタイプがこのシステ
ムに関与する：ケラチノサイト、メラノサイト及びラン
ゲルハンス細胞。皮膚中にのみ見出されるこれらの細胞
は、免疫応答、特に抗原提示においての基礎的な役割を
演じる。

【００７１】健康な皮膚は、そのディスポーザルの手段
における効果によって外部からの攻撃に対して、それ自
身防御することができる。しかしながら、それは環境、
化学薬品及び照射の継続的な攻撃であると、特にランゲ
ルハンス細胞は紫外線の好適なターゲットとされる。

【００７２】これらの攻撃のラインは免疫防御の抑制の
効果によってもたらされ、病原菌に対する抵抗力の低下
とある種の癌の発生の増大に至る。

【００７３】その免疫機能を実行する皮膚を保護するた
めに、皮膚免疫システムを刺激するための製品が高い価
値を持つ。

【００７４】さらにまた、特に皮膚の免疫システムは、
時間生物学的な老化の経過において、減じられることに
なる。

【００７５】この減少はまた、光-誘発性の老化の経過
においても発生する。

【００７６】この場合において、免疫刺激の効果は、免
疫機能、より顕著には表皮のそれらを、皮膚の自然な防
御力を強化することによって、再創成することができ
る。

【００７７】本出願人は、少なくとも１種の非光合成糸
状細菌用の清浄化及び安定化された培地の有効な量の適
用が、免疫システム、特に皮膚の免疫システムを刺激す
ることが可能であることを見出している。

【００７８】特に、該培地又は該組成物は、時間生物学
的老化の経過における、同じく光-誘発性老化の経過に
おける免疫防御を刺激するために意図される。

【００７９】かくして本発明の主題はまた、上述した化
粧品組成物が皮膚、毛髪及び／又は粘膜に適用（塗布）
することによって、免疫防御を刺激することを意図した
美容処理方法である。特に、この美容処理方法は、時間
生物学的老化の経過における、同じく光-誘発性老化の
経過における免疫防御を刺激するために意図される。

【００８０】本発明の主題はまた、上述したような、少
なくとも１種の非光合成糸状細菌用の清浄化及び安定化
された培地の有効な量の適用を備える、調剤組成物（ph
armaceutical composition）である。

【００８１】タキキニンファミリーに属するポリペプチ
ドが哺乳類において存在し、これらのポリペプチドは平
滑筋繊維の急激な収縮を誘発する。このファミリーの化
合物として、β-ニューロキニン、α-ニューロキニン及
び物質Ｐを挙げることができる。

【００８２】物質Ｐは、神経終末によって生産され且つ
放出されるポリペプチド（ウンデカペプチド）である。
物質Ｐの局在性は、中枢神経系の中と末梢器官の中の両
方のニューロンのため特有である。かくして、非常に多
くの器官又は組織は、物質Ｐを持つニューロンの導入を
受容し；これら、特に、唾液腺、胃、膵臓、腸（腸にお
いて、物質Ｐの分布はメイシュナー(Meissner)とアワー
バッハ(Auerbach)内在神経叢を重複させる）、心臓血管
系、甲状腺、皮膚、虹彩と毛様体、膀胱及び、もちろ
ん、中枢及び末梢神経系である。

【００８３】物質Ｐの偏在する分布のために、非常に多
くの疾患が物質Ｐの過剰の合成及び／又は放出に関連付
けられる。

【００８４】物質Ｐは、特に中枢神経系の刺激伝達及び
疾患において（例えば不安、精神病、ニューロパシー、
アルツハイマー老人痴呆症のような神経性退歩障害、エ
イズ関連の痴呆症、パーキンソン病、ダウン症、コルサ
コフ症、多発性硬化症、精神分裂病）、呼吸器疾患（例
えば気管支肺炎）及び炎症性疾患（例えばリューマチ性
多発関節炎）において、アレルギー症において（例えば
喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性咽頭炎、蕁麻
疹、湿疹性皮膚炎）、胃腸の病気において（例えば潰
瘍、大腸炎、クローン病のような）、皮膚疾患において
（例えば乾癬、痒疹、ヘルペス、光皮膚炎、アトピー性
皮膚炎、接触性皮膚炎、苔癬、痒疹、そう痒症、虫ささ
れ）、フィブローシスとコラーゲン成熟性の他の疾患に
おいて（例えば硬皮症）、心臓血管疾患において、血管
収縮性疾患（例えば片頭痛、レイナード病(Reynaud's d
isease)）、免疫学的疾患において、尿路の疾患におい
て（例えば失禁、膀胱炎）、リューマチ性疾患におい
て、ある種の皮膚科学的疾患において（湿疹のような）
及び眼科学的障害において（例えば結膜炎、ブドウ膜
炎、眼のそう痒症、目の痛みと刺激）と関係がある。

【００８５】物質Ｐアンタゴニストの使用は、上述した
全ての病気における有効な治療の選択の一つである。

【００８６】物質Ｐアンタゴニストの用語は、物質Ｐの
生物学的効果の部分的又は全般的な阻害が可能な何らか
の化合物に帰すると解される。

【００８７】特に、物質Ｐアンタゴニストとして認識さ
れる物質に関して、論理的な薬学的応答（物質Ｐ受容体
へのそれの結合を含んで良い又は含めない）、特に以下
の試験の一つ、の導入が必要である： − アンタゴニスト物質は、カプサイシンにより又は逆
行性神経刺激、又は代替手段によって誘発された血管壁
を横切るプラズマの浸出を減じる必要がある − アンタゴニスト物質は、物質Ｐの投与によって誘発
された平滑筋の収縮阻害を生じさせる必要がある。

【００８８】本出願人は、少なくとも１種の非光合成糸
状細菌用の清浄化され又は安定化された培地は、物質Ｐ
アンタゴニストの特徴として表される特徴を満足し、且
つそれ故に物質Ｐアンタゴニストとして使用することが
できることを見出している。

【００８９】かくして、本発明は、少なくとも１種の非
光合成糸状細菌用培地の有効な量の使用に関し、上記培
地は、化粧品組成物中の又は調剤組成物の調整のための
物質Ｐアンタゴニストとして清浄化及び安定化される。

【００９０】本発明はまた、上述した通りの化粧品組成
物を皮膚へ、頭皮へ及び／又は粘膜へ適用（塗布）する
ことによって、物質Ｐの過剰な合成及び／又は放出に関
連した疾患の治療を意図する美容処理方法に関する。

【００９１】本発明の主題はまた、物質Ｐの過度の合成
及び／又は放出に関連した疾病の治療を意図した調剤組
成物であり、この組成物は、上述した通りの、少なくと
も１種の非光合成糸状細菌用の培地の有効な量を備え
る。

【００９２】加えて、本発明の主題はまた、上述した通
りの、少なくとも１種の非光合成糸状細菌用培地の有効
な量を備え、中枢神経系の疾患、呼吸器系の病気、アレ
ルギー症候群、炎症、痛み、胃腸の疾患皮膚病、フィブ
ローシス、コラーゲン成熟の疾患、心臓血管疾患、血管
収縮性の疾病、免疫学的疾患及び／又は泌尿管の疾患の
治療を意図する調剤組成物である。

【００９３】皮膚病の分野において、ある種の皮膚のタ
イプが他に比べてより感受性であることが知られる。皮
膚の不寛容の存在の主要な現象、特に必須的な無知覚過
敏（dysaesthesic sensation）である主観的なサインで
ある兆候は知られている。無知覚過敏の用語は、刺痛
（stinging）、刺痛(tingling)、そう痒（itching）又
はそう痒（pruritus）、灼熱感（burning）、熱感（hea
ting）、不快感（discomfort）、緊張（tautness）、な
どのような皮膚の部位において経験する、より痛みのあ
る又はない感覚を意味すると解される。

【００９４】これらの現象は、最も普通には過敏症（ir
ritation）又は炎症として称されるであろう、複数の事
象の帰結とすることができるが、その幾つかは例えば敏
感肌（sensitive skin）のような生理学的な要因、又は
例えばアレルギーのようなさらに病理学的な要因のため
であろう。

【００９５】しかしながら、敏感肌の兆候はこれまで特
徴付けが乏しく、且つこれらの皮膚タイプの問題は結果
として定義が乏しい；皮膚過敏性に含まれるプロセスの
本質は正確に知るすべはない。敏感肌が化粧品に反応す
る皮膚であると考えられる一方で、化粧品との関連付け
が必要でなく、幾つかの外的要因に反応する皮膚である
との別の考えもある。敏感肌はまた、アレルギー性の皮
膚に例えられる。

【００９６】敏感肌を定義するための試験、例えば刺激
性の物質（irritant substances）として知られる乳酸
とDMSOによる試験が開発されている：例えばK.Lamminta
ustaら, Dermatoses, 1988, 36, pages 45-49 による論
文；及び T.Agner と J.Serup, Clinical and Experime
ntal Dermatology, 1989, 14, pages 214-217 参照。

【００９７】敏感肌タイプの特徴の無知のために、これ
まではそれの治療が非常に困難で又は更に不可能であっ
た。それらは、限定的には例えば、化粧品又は皮膚科学
的組成物において、界面活性剤、保存料又は香料のよう
な刺激物質の本質を持った製品の使用、同様にある種の
化粧又は皮膚科学的な活性剤の使用により間接的に処置
される。

【００９８】多くの臨床試験の後、本出願人は敏感肌に
関連する兆候を決定することができた。

【００９９】本出願人は、敏感肌が二つの主要な臨床的
形態：刺激（sirritable）及び／又は反応性（reactiv
e）の肌と、不寛容（intolerant）な肌、に分けること
ができることを見出している。

【０１００】刺激及び／又は反応性の肌は、かゆみ、す
なわち環境、感情、食物、風、摩擦、シェービング、石
鹸、界面活性剤、高カルシウム濃度を持つ硬水、温度変
化又はウールのような各種の要因によるかゆみ（itchin
g）又は刺痛（stinging）によって反応する肌である。

【０１０１】不寛容な肌は、環境、感情、食物及びある
種の化粧品のような各種の要因による熱感、緊張、うず
き（tingling）及び／又は赤みによって反応する肌であ
る。一般に、これらのサインは、過度の脂漏症又は乾燥
したパッチ（patches）を持つ又は持たない、及び紅斑
を持つざ瘡性の皮膚に関連付けられる。

【０１０２】これらの現象は身体全体にわたり総合化す
ることができるが、それらは、例えば頭皮、顔、皮膚の
シワ、などのような輪郭の明らかな一に用いられる。

【０１０３】「過敏な」頭皮は、より明確な臨床的症候
を有する：そう痒の及び／又は刺痛の及び／又は炎症の
感覚は、摩擦、石鹸、界面活性剤、高カルシウム濃度の
硬水、シャンプー又はローションのような局部的な要因
によって必須的に誘発される。これらの感覚はまた、環
境、感情及び／又は食物のような要因によってたびたび
誘発される。頭皮の紅斑及び過度の脂漏症及びフケの存
在は、しばしば上記のサインに関連付けられる。

【０１０４】その上、主要なシワ（鼠径部、生殖器、脇
の下、膝下、口腔及び乳房の下部領域、及び肘のシワ）
及び脚のようなある解剖学的領域において、敏感肌は、
特に汗、摩擦、ウール、界面活性剤、ある種の化粧品調
製物、高カルシウム濃度の硬水及び／又は温度変化に関
連付けられるそう痒的感覚及び／又は知覚鈍麻的な（dy
sesthesic）感覚（熱感、刺痛）によって表される。

【０１０５】不寛容な現象のこのセットは、標準的な炎
症プロセス、特にそれが皮膚神経繊維を含むことからニ
ューロジェニックタイプの炎症反応に常に関連付けられ
る。

【０１０６】本出願人は、敏感肌がアレルギー性皮膚で
ないことも示すことができている。実際は、アレルギー
性皮膚は外部からくる薬剤、アレルギー反応を誘発する
アレルゲンに反応する皮膚である。これは、アレルゲン
が存在し且つ感受性化した個人にのみ影響を及ぼす時、
引き起こされる免疫学的プロセスである。一方、アレル
ギー反応の最終的な結果は、一般的に浮腫に関係付けら
れる急性の炎症反応としても表される。

【０１０７】これに対して、本出願人によれば、敏感肌
の必須的な特徴は、何れかの個人のケースとして良い、
例え個人が他の個人よりそのことにより速く反応する敏
感肌を有すると言っても、外的要因に対する応答のメカ
ニズムである。これは非特異的メカニズムであり、免疫
学的なものではない。

【０１０８】現象を直視することなしに、これらのメカ
ニズムの全てが、ヒスタミン、セロトニン、ヘパリン、
ロイコトリエン、プロスタグランジン、サイトキン、一
酸化窒素又は反応性酸素含有成分のような少なくとも１
種の炎症仲介物の、皮膚中のマストサイト細胞による解
放によって測定される末端面の炎症反応によって表され
る普通の点を有する。

【０１０９】本出願人はまた、皮膚が敏感か否かの何れ
かであるかを測定するための試験をも開発している。敏
感肌の定義付けをねらった多くの試験を実行した後、本
出願人は、驚くべきことに、敏感肌を持つ個人とカプサ
イシンの局部的な適用（塗布）に対し反応する人々との
あいだに関係があることを見出している。

【０１１０】そのカプサイシン試験は、皮膚の約４ｃｍ
²に、０．０７５％のカプサイシンを含むクリームを塗
布し、刺痛（stinging）、灼熱感（burning）及びかゆ
み（itching）のような、これの塗布により誘発される
主観的なサインの出現の有無を調べることから成る。敏
感肌を持つ個人において、これらのサインは塗布後３か
ら２０分の間に出現し、塗布したゾーンの端から始まる
紅斑の出現がそれに伴って起こる。

【０１１１】これまで、カプサイシンは医薬品として、
特に帯状疱疹痛を治療するために使用されていた。カプ
サイシンはニューロペプチド、特に表皮と真皮の神経末
端から生じるタキキニンの放出を誘発する。本出願人
は、敏感肌の全ての状態における通常の生理病理学的な
パターンが、皮膚の内部にタキキニン、特に物質Ｐを放
出する大きな能力に関連付けられることを観測してい
る。その放出によって誘発される知覚不全兆候は、「神
経原性の」であるとして適用される。

【０１１２】物質Ｐと敏感肌との間の関係はこれまで確
立されていなかった。敏感肌の臨床的なサインは本質的
に主観的：刺痛（stinging）、刺痛(tingling)、そう痒
（pruritus）、緊張（tautness）及び熱感（heating）
であり、且つそれらは紅斑と時折関係付けられる。これ
らのサインは非特異的な外部要因のためである。その兆
候は、顔、首及び頭皮に本質的に集中して表れるが、身
体全体にも表れるであろう。

【０１１３】かくして、本出願人は、敏感肌の必須の特
徴の一つが、物質Ｐに関連付けられ、それ故に物質Ｐア
ンタゴニストの使用が敏感肌の予防及び／又は治癒効果
を得ることを可能にできるということを発見している。

【０１１４】出願人は、かくして、敏感肌を治療するた
めに物質Ｐアンタゴニストを使用することを意図する。
出願人は、驚くべきことに、局部使用を意図した組成物
の中への物質Ｐアンタゴニストの合併が皮膚刺激及び／
又は知覚不全性過敏症及び／又はそう痒を回避すること
ができることを観測している。

【０１１５】かくして、本発明はとりわけ、上述した通
りの化粧品組成物が皮膚に、頭皮に及び／又は粘膜に適
用（塗布）されることによって、敏感肌を治療すること
を意図した美容処理方法に関する。

【０１１６】本発明の主題はまた、上述した通りの、少
なくとも１種の非光合成糸状細菌用の培地の有効量を備
え、敏感肌の治療を意図した調剤組成物である。

【０１１７】本発明の更なる主題は、少なくとも１種の
非光合成糸状細菌用の培地の有効量の、化粧品組成物又
は調剤組成物の調製のための使用であり、上記培地は清
浄化及び安定化され、上記培地又は上記組成物は、皮膚
の刺激及び／又は乾燥したパッチ及び／又は紅斑及び／
又は熱感及び／又は知覚不全及び／又は皮膚及び／又は
粘膜のそう痒を予防し及び／又は戦うことを意図してい
る。

【０１１８】本発明の主題はまた、上述した通りの化粧
品組成物が皮膚へ、頭皮へ及び／又は粘膜へ適用される
ことにより、皮膚の刺激及び／又は乾燥したパッチ及び
／又は紅斑及び／又は熱感及び／又は知覚不全及び／又
は皮膚及び／又は粘膜のそう痒を予防し及び／又は戦う
ことを意図した美容処理方法である。

【０１１９】有利には、本発明に従い、少なくとも１種
の非光合成糸状細菌用の培地の有効量、上記培地は清浄
化及び安定化され手いる、は、化粧品又は薬学の分野に
おいて通常使用される刺激効果を持つ製品と組み合わせ
ることができ、これらの製品はかつての化粧品又は調剤
の有効成分である。

【０１２０】刺激効果を有する製品を備える化粧品又は
調剤組成物において、少なくとも１種の非光合成糸状細
菌用の培地、上記培地は清浄化及び安定化されている、
の形態での物質Ｐアンタゴニストの存在は、この相当な
刺激効果を減じること、又はその全体を削除することが
できるようにする。

【０１２１】これは、効能の改善を望むために、通常に
使用差列活性剤の量に比して、刺激効果を持つ活性剤の
量を増加することができるようにする。

【０１２２】かくして、本発明はまた、刺激効果を持つ
少なくとも１種の製品をも備える化粧品又は調剤組成物
において、少なくとも１種の非光合成糸状細菌用の培
地、上記培地は清浄化及び安定化されている、の有効量
の使用にも関する。

【０１２３】本発明はまた、化粧学的又は薬学的に許容
できる媒体中に、少なくとも１種の非光合成糸状細菌用
の培地の有効量、上記培地は清浄化及び安定化されてい
る、及び刺激効果を持つ少なくとも１種の製品をも備え
た化粧品又は薬学的組成物に関する。

【０１２４】刺激効果を持つ製品としては、例えば、界
面活性剤（イオン性又は非イオン性）、保存料、有機溶
媒又はα−ヒドロキシ酸（クエン酸、リンゴ酸、グリコ
ール酸、酒石酸、マンデル酸、乳酸）、β−ヒドロキシ
酸（サリチル酸とその誘導体）、α−ケト酸、β−ケト
酸、レチノイド（レチノール、レチナール、レチノイン
酸）、アントラノイド（ジオキシアントラノール）、ミ
ノキシジル、リチウム塩、拮抗阻害剤（antimetabolite
s）、角質溶解剤、ビタミンＤとその誘導体、ヘアダイ
又は着色料（パラフェニレンジアミンとその誘導体、ア
ミノフェノール）、香料とするアルコール溶液（香水、
オードトワレ、アフターシェーブ、デオドラント）抗発
汗剤（ある種のアルミニウム塩）、脱毛用の活性剤又は
パーマネントウエーブ剤（チオール類）及び脱色素活性
剤（ヒドロキノン）のような活性剤を挙げることができ
る。

【０１２５】物質Ｐアンタゴニストの使用は、上述した
何らかの不快感を経験することなしに、当該技術の状態
に比して２から１０倍の刺激効果を持つ活性剤の量を特
に増大させることを可能にする。かくして、上記ヒドロ
キシ酸は組成物の５０重量％まで、又は５％までのレチ
ノイド、を使用することができ、同時にそれらの刺激性
がかなり減じられる。

【０１２６】本出願人は、少なくとも１種の非光合成糸
状細菌用の清浄化及び安定化された培地が、抗炎症性、
瘢痕形成性、抗ざ瘡及び抗抗脂漏症特性を有し、且つそ
れが皮膚の保湿化を促進することを見出している。

【０１２７】かくして本発明は、上述した通りの化粧品
組成物を皮膚へ、毛髪へ及び／又は粘膜へ適用すること
によって、炎症の鎮静化、瘢痕形成の促進、ざ瘡及び／
又は脂漏症の鎮静及び／又は皮膚の保湿化の促進を意図
した美容処理方法に関する。

【０１２８】本発明の主題はまた、上述した通りの少な
くとも１種の非光合成糸状細菌用の清浄化及び安定化さ
れた培地を備える、炎症の鎮静化、瘢痕形成の促進、ざ
瘡及び／又は脂漏症の鎮静及び／又は皮膚の保湿化の促
進を意図した薬学的組成物である。

【０１２９】本発明の美容処理方法は、衛生学又は上述
した通りの化粧用組成物を、これらの組成物を使用する
ための適用技術に従い：例えば：クリーム、ゲル、セラ
（sera）、ローション、メークアップ除去乳液又は抗日
光組成物の皮膚又は乾燥した毛髪への適用、塗れた髪へ
のヘアーローションの適用、シャンプーの適用、又は代
替的に歯ぐきへの練り歯磨の適用することにより特に実
行することができる。

【０１３０】

【実施例】以下の実施例と組成物は何れかの方向に限定
することなしに本発明を表すものである。その組成物に
おいて、示された比率は、特に断り書きがない限りは重
量パーセントである。

【０１３１】実施例１：少なくとも１種の非光合成糸
状細菌用の清浄化及び安定化した培地の調製： Vitreoscilla filiformis(ATCC 15551)の菌株は、特許
出願WO 94/02158中に開示されたプロセスに従い培養さ
れる。培養は、600nmでの1.5より大きいか又は等しい吸
光度に一致する適当な細胞濃度が得られるまで２６℃で
少なくとも４８時間実行される。その菌株は、安定な培
養が得られるまで新鮮な培地中でそれぞれ４８時間、２
％V/Vで副培養される。２００ｍｌの新鮮な培地を入れ
た１リットル容量のコニカルフラスコ内に上記培養液４
ｍｌを入れて培養される。

【０１３２】コニカルフラスコ中の培養は、１００回転
／分で撹拌する培養台の上で２６℃にて実行される。か
くして得られたベースストックは、１０ｌファーメンタ
ー用の接種物として保管する。培養は２６℃、ｐＨ７、
１００回転／分及びｐＯ2≧１５％で実行される。

【０１３３】４８時間の培養の後、そのバイオマスは同
一の条件下で培養するために、６００リットルの作業容
量を持つファーメンター内に移送される。

【０１３４】次の培地が使用される。 Biokar yeast(Ref.112002) 自己消化エキス 2.0 g/l 大豆パパインペプトン（PPS-USP Biokar Ref. 1 1601より） 2.0 g/l ヘラー微量要素 2.0 g/l 無水グルコース 2.0 g/l ＣａＣｌ₂・１０Ｈ₂Ｏ 0.066 g/l 蒸留水１００．０ｍｌ

【０１３５】そのｐＨは、１２１℃で２０分間の滅菌処
理の前に、１Ｎ水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムの
添加によって７．１５に調整される。

【０１３６】蒸留水１ｌ当たり、ヘラー微量ヨウ素の組
成は、次の通りである：ＺｎＳＯ_４・７Ｈ₂Ｏ１ｇＭｎＳＯ₄・Ｈ₂Ｏ０．０７６ｇＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏ０．００３ｇＫＩ０．０１０ｇＨ₃ＢＯ₃ １ｇＡｌＣｌ₃・６Ｈ₂Ｏ０．０５０ｇＮｉＣｌ₂・６Ｈ₂Ｏ０．０３０ｇ

【０１３７】ポリメチルシロキサンタイプの抗起泡剤
０．２ｇ／ｌがこの培地に添加される。その温度は２６
から３０℃の間、至適は２９℃、に調整される。

【０１３８】完全な増殖サイクルが約４８時間で行われ
る。

【０１３９】エアレーションは、最小限２０％の溶存酸
素を有するようにマスフローメーターによって調節され
る。

【０１４０】増殖の終了時点で実質的に残余のグルコー
スは無くなる。

【０１４１】そのバイオマスは遠心分離によって分離さ
れる。

【０１４２】これは、8000×ｇに等しい分離力を得るこ
とが可能であり、２分間、４℃に冷却されたインダスト
リアル-タイプの遠心分離装置において実行される。

【０１４３】かくして収穫された培地は、後日使用する
ために凍結により保管される。

【０１４４】使用前に、培地は１１４℃から１２１℃の
間、１５分から４０分間滅菌処理される。

【０１４５】実施例２：免疫防御の刺激に関する実施
例１の培地の能力が、この実施例において実験される。

【０１４６】Ａ）マウス脾臓細胞の刺激の研究この研究は、L.E. AverillとN.S. Wolf (1985) Journal
of immunology 134:3859-3863によって開示された手順
に従って実行される。

【０１４７】・マウス脾臓細胞の調整 Balb/C マウスの脾臓が、RPMI 1640培地（シグマ社製）
中に分散される。その細胞懸濁液は、細胞集合体を除去
するために、Nunc社からの「セルストレーナー」タイプ
のフィルターを通して濾過される。その懸濁液は次いで
４℃、1000rpmで１０分間遠心分離される。その細胞ペ
レットは、２ｍＭのＬ-グルタミン、１００単位／ｍｌ
のペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシ
ン、５×１０^-5Ｍの２-メルカプトエタノール、及び１
０％ウシ胎児血清を含む完全RPMI培地中に懸濁される。
その細胞懸濁物は１ｍｌ当たり２．５×１０⁶細胞に調
整される。

【０１４８】・細胞増殖試験上述のように調製した細胞は９６穴のカルチャープレー
ト（Falcon社製）に１穴当たり２．５×１０⁵細胞の割
合で１００μｌの最終容積に分注される。実施例１の、
少なくとも１種の非光合成糸状細菌用の清浄化及び安定
化された培地の２０μｌが、実験すべき最終濃度で添加
される。各穴の容積は、８０μｌの完全RPMI培地の添加
によって２００μｌに調整される。細胞は４８及び７２
時間培養される。培養の終了１８時間前に、８２Ｃｉ／
ｍｍｏｌに等しい特異的活性を持つトリチウム化チミジ
ン（アマシャム社製）の１μＣｉが各穴に添加される。
培養期間の終了時点で、その細胞はフィルター上に捕捉
される。フィルターを乾燥した後、それはＤＮＡ内に編
入された放射活性を測定するために液体シンチレーショ
ンベータ-カウンター内に導入される。

【０１４９】効果の比較のため、同じ試験が Vitreosci
lla filiformisの壁（walls）に関して実行される。こ
れらの壁は、培養および培地の分離の後に得られたバイ
オマスから、１２１℃で１５分間の処理によって調整さ
れる。これらの壁は免疫刺激効果を有することが知られ
る（WO 94/02158）。

【０１５０】ＤＮＡ内に編入された放射活性の測定は脾
臓細胞の増殖のレートを決定することを可能にする。

【０１５１】その結果は次の表に示される：

【表１】

【０１５２】Ａ：実施例１の培地Ｂ：Vitreoscilla filiformisの壁コントロール：細菌を含んでいない培地 [...]％：該試験に使用したＡ又はＢの濃度であり、ａ
％（Ａについては容量／容量及びＢに関しては重量／容
量）として表す。

【０１５３】その結果は、次の式に従って計算された刺
激指数（stimulation index）として表す：試験値／コントロール値×１００。

【０１５４】２０よりも大きな値は、陽性であると判定
される。

【０１５５】実施例１の培地はマウス脾臓細胞の成長を
引き起こす。増殖の最大値は１２．５％濃度での培養の
４８時間で得られた。その結果はVitreoscilla filifor
misの壁で得られたそれらの結果に勝っていた。

【０１５６】Ｂ）イムノグロブリンの生産の研究実施例２において調整した細胞は、６穴のカルチャープ
レート（Falcon社製）に１穴当たり２．５×１０⁵細胞
の割合で１００μｌの最終容積に分注される（穴当たり
２ｍｌの容積）。

【０１５７】各種の試験品の３００μｌが、それらが１
０倍に濃縮されると仮定した、試験濃度に添加される。
各穴の容量は、完全RPMI 1640培地の０．７ｍｌの添加
によって３ｍｌに調節される。その細胞は三日間培養さ
れ、そして培養上清が次いで除去される。免疫グロブリ
ンは、製造元の手順に従って「Mab-based mouse Ig iso
typing kit」（Pharmingen社製）を用いて分析される。

【０１５８】イムノグロブリンは、マクロファージによ
り外来物質として認識及び同定される後者に関する抗原
と結合する、血液中に存在するタンパク質である。

【０１５９】イムノグロブリンは、それらの重鎖の定常
部分の構造に基づいて異なるタイプとサブ-タイプに分
類される。５クラス（ＩｇＭ，Ｇ，Ａ，Ｄ及びＥ）がマ
ウスにおいて記述されている。イムノグロブリンＧは体
液、とりわけ血管外の液体中に、それが微生物と毒と戦
う、最も豊富なイムノグロブリンである。Ｇイムノグロ
ブリンは４つのサブクラスに分類することができる
（１，２，３及び４）。

【０１６０】イムノグロブリンＡは、身体の外表面で防
衛する sero-mucous分泌物中のイムノグロブリンの主な
ものである。

【０１６１】イムノグロブリンＭは免疫応答において非
常に速く生成される非常に効果的な接合剤である。それ
は細菌原に対する防御の第一線を構成する。

【０１６２】イムノグロブリンＧ１，Ｇ２ａ，Ｇ２ｂ，
Ｇ３，Ｍ及びＡのみが、この試験中で分析される。

【０１６３】効果の比較のために、同様の試験がVitreo
scilla filiformisの壁について実行される。これらの
壁は、培養及び培地の分離の後、得られるバイオマス
を、引き続き１２１℃で１５分間熱処理することによっ
て調製される。

【０１６４】陽性コントロールは、良好な免疫刺激であ
ることが知られる大腸菌（Escherichia coli）からのリ
ポポリサッカリド（lipopolysaccharides;ＬＰＳ）で調
製される。

【０１６５】その結果を次の表中に示す：

【表２】

【０１６６】Ａ：実施例１の培地Ｂ：Vitreoscilla filiformisの壁Ｃ：陽性コントロールとして、大腸菌からのＬＰＳ（シ
グマ社の市販品）、１０μｇ／ｍｌで使用。 [...]（％）：該試験に使用したＡ又はＢの濃度であ
り、ａ％（Ａについては容量／容量及びＢとＣに関して
は重量／容量）として表す。

【０１６７】その結果は、次の式に従って計算された生
産指数（production index）として表す：試験値／コントロール値×１００。

【０１６８】１５０よりも大きな値は、陽性であると判
定される。

【０１６９】その清浄化及び安定化された培地は、Ｂ細
胞によるイムノグロブリンの生産を引き起こす。

【０１７０】その清浄化及び安定化された培地は、脾臓
細胞の増殖とイムノグロブリンの生産を増加させる。こ
の培地の２５％の投与までは無毒であることが観測され
た。

【０１７１】これらの結果は、本発明に従う培地の免疫
変調性の役割を示す。

【０１７２】実施例３：本発明を表す製剤（formulat
ions）の実施例。これらの組成物は各種の成分の単純な
混合によって得られる。

【０１７３】・組成物１：クリーム形態における皮膚用組成物実施例１の培地２．０ｇ液状石油ゼリー１５．０ｇヒマワリ油５．０ｇステアリン酸２．０ｇセチルアルコール３．０ｇ１００ＥＯ含有ポリエチレングリコールステアレート５．０ｇプロピレングリコール３．０ｇ保存料０．３ｇ精製水ｑｓ１００．０ｇ

【０１７４】このクリームは瘢痕化促進のために、やけ
ど又は傷に対して一日３回の塗布の割合で適用される。

【０１７５】・組成物２：アフターサン乳液実施例１の培地５．０ｇステアリン酸３．０ｇセチルアルコール１．５ｇ自己乳化性グリセリルモノステアレート３．０ｇヒマワリ油８．０ｇポリアクリルアミド３．０ｇオクチルメトキシシンナメート４．０ｇテレフタリリデンジカンファースルホン酸のトリエタノールアミン塩（Mexoryl SX）２．６ｇグリセリン５．０ｇトコフェロール２．０ｇ保存料０．３ｇエチレンジアミン四メチレンリン酸５ナトリウム０．１ｇ精製水ｑｓ１００．０ｇ

【０１７６】この乳化物は紫外線から皮膚を保護し、日
光に対する免疫システムを維持及び刺激するために使用
される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 7/48 Ａ６１Ｋ 7/48 31/00 ６１７ 31/00 ６１７Ｆ６１７Ｇ６１７Ｈ６２９６２９６３７６３７Ｃ (72)発明者ルシャン・オウベールフランス・06320・カプ・デル・ドメーン・ドュ・シグナル・シュマン・ドュ・ボートゥガン・レ・ロカーユ（番地なし) (56)参考文献特開昭56−109589（ＪＰ，Ａ) 特開平８−59426（ＪＰ，Ａ) 特表平６−511262（ＪＰ，Ａ) 欧州特許出願公開761204（ＥＰ，Ａ１) (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) A61K 35/74 A61K 7/00 - 7/50 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＣＡ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】少なくとも１種の非光合成糸状細菌用培
地の有効量を、皮膚の治療のための活性剤として、化粧
学的及び／又は調剤学的に許容できる支持体中に備える
化粧品又は調剤学的組成物であり、該培地は清浄化され
且つ安定化されたことを特徴とする組成物。
【請求項２】上記細菌がBeggiatoalesの種類に属して
いることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項３】上記細菌が、Beggiatoa、Vitreoscill
a、Flexithrix又はLeucothrix属に属することを特徴と
する請求項１又は２記載の組成物。
【請求項４】上記細菌が、Vitreoscilla Filiformis
の株から選択されることを特徴とする請求項１から３の
いずれか１項記載の組成物。
【請求項５】上記培地が組成物の全重量の０．０００
１から３０％であることを特徴とする請求項１から４の
いずれか１項記載の組成物。
【請求項６】上記培地が組成物の全重量の０．０１か
ら１５％であることを特徴とする請求項１から５のいず
れか１項記載の組成物。
【請求項７】上記培地が、滅菌濾過、オートクレーブ
処理、超高温、高圧滅菌、γ線照射又は凍結によって安
定化されたことを特徴とする請求項１から６のいずれか
１項記載の組成物。
【請求項８】上記培地がオートクレーブ処理によって
安定化されたことを特徴とする請求項１から７のいずれ
か１項記載の組成物。
【請求項９】上記培地が、炭素源として酢酸塩を含む
ことを特徴とする請求項１から８のいずれか１項記載の
組成物。
【請求項１０】上記培地が、炭素源として糖質を含む
ことを特徴とする請求項１から８のいずれか１項記載の
組成物。
【請求項１１】上記培地が、次の組成：自己消化酵母エキス０．５から５ｇ／ｌペプトン０．５から５ｇ／ｌグルコース０．５から７ｇ／ｌヘラー微量要素０．５から５ｇ／ｌＣａＣｌ₂・１０Ｈ₂Ｏ０．０１から０．２０ｇ／ｌ蒸留水ｑｓ１ｌを有する請求項１から８及び１０のいずれか１項記載の
組成物。
【請求項１２】上記ヘラー微量要素が次の組成：ＺｎＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ１ｇＭｎＳＯ₄・Ｈ₂Ｏ０．０７６ｇＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏ０．００３ｇＫＩ０．０１０ｇＨ₃ＢＯ₃ １ｇＡｌＣｌ₃・６Ｈ₂Ｏ０．０５０ｇＮｉＣｌ₂・６Ｈ₂Ｏ０．０３０ｇ蒸留水ｑｓ１ｌを有することを特徴とする請求項１１記載の組成物。
【請求項１３】上記ペプトンが大豆パパイン消化ペプ
トンであることを特徴とする請求項１１又は１２記載の
組成物。
【請求項１４】培養温度が１８から４０℃の間である
ことを特徴とする請求項１から１３のいずれか１項記載
の組成物。
【請求項１５】培地のｐＨが５．５から８の間である
ことを特徴とする請求項１から１４のいずれか１項記載
の組成物。
【請求項１６】請求項１から１５のいずれか１項に記
載された少なくとも１種の非光合成糸状細菌用の培地の
有効量と、刺激作用を持つ少なくとも１種の成分を、化
粧学的又は皮膚科学的に許容できる媒体中に備えること
を特徴とする化粧品又は皮膚科学的組成物。
【請求項１７】皮膚の老化を減じる及び／又は遅らせ
ることを意図する美容処理方法であり、請求項１から１
６のいずれか１項記載の組成物を皮膚、頭皮及び／又は
粘膜に塗布することを特徴とする方法。
【請求項１８】化粧品組成物中の物質Ｐアンタゴニス
トとして又は調剤学的組成物の調製のために、請求項１
から１６のいずれか１項記載の、少なくとも１種の非光
合成糸状細菌用の培養培地の有効量の使用。
【請求項１９】過敏な皮膚の治療方法を除く美容処理
方法であり、請求項１から１６のいずれか１項記載の組
成物を皮膚、頭皮及び／又は粘膜に塗布することを特徴
とする方法。
【請求項２０】皮膚炎症及び／又は乾燥パッチ及び／
又は紅斑及び／又は知覚不全感覚及び／又はほてり感及
び／又は皮膚及び／又は粘膜のそう痒を予防及び／又は
戦うことを意図する、治療方法を除く美容処理方法であ
り、請求項１から１６のいずれか１項記載の組成物を皮
膚、頭皮及び／又は粘膜に塗布することを特徴とする方
法。
【請求項２１】炎症の鎮静化、瘢痕化の促進、ざ瘡及
び／又は脂漏症の減縮及び／又は皮膚の保湿化の促進を
意図する、治療方法を除く美容処理方法であり、請求項
１から１６のいずれか１項記載の組成物を皮膚、頭皮及
び／又は粘膜に塗布することを特徴とする方法。
【請求項２２】皮膚の老化を減じる及び／又は遅延を
意図する、請求項１から１６のいずれか１項による調剤
組成物。
【請求項２３】免疫システムの刺激を意図する、請求
項１から１６のいずれか１項による調剤組成物。
【請求項２４】物質Ｐの過度の合成及び／又は解放に
関連する疾病の治療を意図するための、請求項１から１
６のいずれか１項による調剤組成物。
【請求項２５】中枢神経系の障害、呼吸系疾患、アレ
ルギー症候群、炎症、痛み、胃腸の疾患、皮膚疾患、繊
維組織増殖、コラーゲン成熟分裂の疾患、心臓と血管の
疾患、血管痙攣性疾患、免疫学的疾患及び／又は泌尿器
管の疾患の治療を意図する、請求項１から１６のいずれ
か１項による調剤組成物。
【請求項２６】敏感肌の治療を意図する、請求項１か
ら１６のいずれか１項による調剤組成物。
【請求項２７】炎症の鎮静化、瘢痕化の促進、ざ瘡及
び／又は脂漏症の減縮及び／又は皮膚の保湿化の促進を
意図する、請求項１から１６のいずれか１項による調剤
組成物。