JP2019010025A - Tyrosinase activity inhibitor and food and drink containing the same - Google Patents
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Abstract
【課題】優れたチロシナーゼ活性阻害作用を有し、食品や化粧品の分野において、広く使用することができるチロシナーゼ活性阻害剤を提供することを目的とする。【解決手段】キク科シカギク属カミツレ花部の抽出物と、バラ科モモ属モモ蕾部の抽出物とを質量比25:75〜75:25で配合することにより、優れたチロシナーゼ活性阻害剤を提供することができる。【選択図】なしAn object of the present invention is to provide a tyrosinase activity inhibitor that has an excellent tyrosinase activity inhibitory action and can be widely used in the field of food and cosmetics. An excellent tyrosinase activity inhibitor is prepared by blending an extract of a chamomileaceae chamomile flower part and an extract of a rose family peach genus bud part at a mass ratio of 25:75 to 75:25. Can be provided. [Selection figure] None
Description
本発明は、チロシナーゼ活性阻害剤に関する。さらに詳しくは、メラニン生成の原因となるチロシナーゼの活性を有意に抑制することができることを特徴とするチロシナーゼ活性阻害剤に関する。 The present invention relates to a tyrosinase activity inhibitor. More specifically, the present invention relates to a tyrosinase activity inhibitor characterized by being able to significantly suppress the activity of tyrosinase that causes melanin production.
近年、平均寿命の延長に伴い、アンチエージングへの関心が非常に高まっている。人体のアンチエージングへの鍵である抗酸化成分は、化粧品やサプリメントの形で適用されるが、より自然な形で人体に適用される植物抽出物に対して需要が高まっている。たとえば、美白成分として、特許文献1においては、多種多様な植物抽出物についてスクリーニングが行われ、ドラゴンフルーツ抽出物の優位な美白効果が導き出されている。サプリメントとして飲食される植物抽出物については、より高い生理活性が求められている。 In recent years, interest in anti-aging has increased greatly with the extension of the average life. Antioxidant components, which are the key to human anti-aging, are applied in the form of cosmetics and supplements, but there is an increasing demand for plant extracts that are applied to the human body in a more natural form. For example, in Patent Document 1, as a whitening component, screening is performed on a wide variety of plant extracts, and the whitening effect superior to the dragon fruit extract is derived. For plant extracts eaten or consumed as supplements, higher physiological activity is required.
植物抽出物は、植物特有の風味を有しており、サプリメントとしたときにも特有の風味が付与され、心地良い自然さを提供する。しかしながら、人間の味覚は敏感であり、飲食物として繰り返し摂取されるので、植物抽出物の生理活性が十分でない場合には、効能に対して過度の風味が付与されることになり、自然な心地良さを逸脱し「飽き」の感覚を呼び起こしてしまう。皮膚に適用される化粧品には無いサプリメント特有の課題である。
特に、花部や蕾部の植物抽出物は抗酸化剤としての機能は従来から知られているが(例えば、特許文献2)、美白成分としてサプリメントの形で用いるに十分な植物抽出物は未だ見出されておらず、良好な風味を有しながら高い美白性能を有する植物抽出物が望まれている。
The plant extract has a flavor peculiar to plants, and when it is used as a supplement, a peculiar flavor is imparted to provide a pleasant naturalness. However, since human taste is sensitive and is repeatedly consumed as food and drink, if the physiological activity of the plant extract is not sufficient, an excessive flavor is imparted to the effect, which is a natural comfort. It deviates from goodness and arouses a sense of “getting bored”. This is a problem unique to supplements not found in cosmetics applied to the skin.
In particular, although plant extracts of flower parts and buttocks have been known to function as antioxidants (for example, Patent Document 2), plant extracts sufficient for use in the form of supplements as a whitening ingredient are still not available. A plant extract that has not been found and has a high whitening performance while having a good flavor is desired.
本発明は、優れたチロシナーゼ活性阻害作用を有し、食品や化粧品の分野において、広く使用することができるチロシナーゼ活性阻害剤を提供することを目的とする。 An object of the present invention is to provide a tyrosinase activity inhibitor that has an excellent tyrosinase activity inhibitory action and can be widely used in the field of foods and cosmetics.
本発明者らは、上記課題に対して鋭意検討を重ねた結果、カミツレ花部の抽出物とモモ蕾部の抽出物を特定の割合で併用することにより、上記課題を解決できるとの知見を見出して、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、以下の〔1〕〜〔2〕である。
As a result of intensive studies on the above problems, the present inventors have found that the above problems can be solved by using a chamomile flower part extract and a peach cocoon part extract at a specific ratio. As a result, the present invention has been completed.
That is, this invention is the following [1]-[2].
〔1〕キク科シカギク属カミツレ花部の抽出物と、バラ科モモ属モモ蕾部の抽出物とを質量比25:75〜75:25で含有することを特徴とするチロシナーゼ活性阻害剤。
〔2〕〔1〕記載のチロシナーゼ活性阻害剤を含有することを特徴とする飲食品。
[1] A tyrosinase activity inhibitor comprising an extract of a chamomileae chamomile flower part and an extract of a rose family peach genus bud part at a mass ratio of 25:75 to 75:25.
[2] A food or drink comprising the tyrosinase activity inhibitor according to [1].
本発明によれば、食品や化粧品の分野において、広く使用することができるチロシナーゼ活性阻害剤を提供することができる。 ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the tyrosinase activity inhibitor which can be widely used in the field | area of a foodstuff or cosmetics can be provided.
本発明は、「キク科シカギク属カミツレ花部の抽出物(以下、「カミツレ抽出物」と略すことがある。)」と、「バラ科モモ属モモ蕾部の抽出物(以下、「モモ抽出物」と略すことがある。)」とを質量比25:75〜75:25で含有することを特徴とするチロシナーゼ活性阻害剤(以下、「本発明のチロシナーゼ活性阻害剤」と略すことがある。)である。
本発明において用いる「カミツレ花部の抽出物」の「カミツレ」とは、キク科(Asterales)シカギク属(Matricaria)カミツレ(Chamomilla recutita L.)であり、「バラ科モモ属モモ蕾部の抽出物」の「モモ」とは、バラ科(Rosales)モモ属(Amygdalus)モモ(Prunus persica Batsch)である。
また、「抽出物」は、植物の成分を抽出するために利用される公知の抽出方法によって得られた液体、固体、又はこれらの混合物を意味し、抽出に利用した抽出溶媒を除去されて、実質的に抽出溶媒を含まない状態を意味するものとする。
抽出方法としては、浸漬抽出法、連続抽出法、水蒸気蒸留抽出法(常圧、減圧)、超臨界流体抽出法、圧搾抽出法等が挙げられるが、この中でも浸漬抽出法等の抽出溶媒を使用した抽出方法が特に好ましい。
以下、浸漬抽出法等の抽出溶媒を使用した抽出方法について、具体例を挙げて詳細に説明する。
The present invention relates to an "extract of asteraceae chamomile chamomile flower part (hereinafter abbreviated as" camomile extract ")" and "extract of rosaceae peach genus cocoon part (hereinafter" peach extract "). ) "In a mass ratio of 25:75 to 75:25 (hereinafter sometimes referred to as" tyrosinase activity inhibitor of the present invention "). .)
The “camomile” of the “extract of chamomile flower part” used in the present invention is an Asterales (Matricaria) chamomile (Chamomilla recutita L.), "Peach" is a Rosarys peach genus (Amygdalus) peach (Prunus persica Batsch).
Further, the “extract” means a liquid, solid, or a mixture obtained by a known extraction method used for extracting plant components, and the extraction solvent used for extraction is removed, It shall mean the state which does not contain an extraction solvent substantially.
Extraction methods include immersion extraction method, continuous extraction method, steam distillation extraction method (normal pressure, reduced pressure), supercritical fluid extraction method, squeeze extraction method, etc. Among them, extraction solvents such as immersion extraction method are used. The extraction method is particularly preferred.
Hereinafter, an extraction method using an extraction solvent such as an immersion extraction method will be described in detail with specific examples.
浸漬抽出法の具体的手順としては、カミツレの花部やモモの蕾部を抽出溶媒に浸漬して抽出し、ろ過等の公知の固液分離方法によってカミツレの花部やモモの蕾部と抽出液とを分離し、抽出溶媒を留去して濃縮したり、カラムクロマトグラフィーや溶媒分画等の処理により精製・濃縮したりする方法が挙げられる。
抽出に使用するカミツレの花部やモモの蕾部は、抽出効率を高めるために乾燥させたものであることが好ましい。乾燥方法としては、天日干し、風乾、加熱乾燥、真空乾燥、気流乾燥等が挙げられる。
また、抽出に使用するカミツレの花部やモモの蕾部は、抽出効率を高めるために粗く破砕されたものであることが好ましい。破砕方法としては、一軸型破砕機や二軸型破砕機等の破砕機を用いて行うことが挙げられる。
As a specific procedure of the immersion extraction method, the chamomile flower part and the peach cocoon part are extracted by immersing them in an extraction solvent, and the chamomile flower part and the peach cocoon part are extracted by a known solid-liquid separation method such as filtration. Examples of the method include separating the liquid and concentrating by distilling off the extraction solvent, or purifying and concentrating by a process such as column chromatography or solvent fractionation.
It is preferable that the chamomile flower part and the peach cocoon part used for extraction are dried in order to improve extraction efficiency. Examples of the drying method include sun drying, air drying, heat drying, vacuum drying, and airflow drying.
Moreover, it is preferable that the chamomile flower part and the peach cocoon part used for extraction are coarsely crushed in order to improve extraction efficiency. Examples of the crushing method include using a crusher such as a uniaxial crusher or a biaxial crusher.
抽出溶媒の種類は、特に限定されず、植物抽出に用いられる公知の溶媒を適宜選択することができるが、具体的なものとしてヘキサン、シクロヘキサン、ヘプタン等の脂肪族炭化水素類;ベンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素類;酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル類;メチルエチルケトン、アセトン等のケトン類;ジエチルエーテル、メチル−t−ブチルエーテル等のエーテル類;ジクロロメタン、トリクロロエチレン等のハロゲン化炭化水素類;エタノール、プロピレングリコール、1、3−ブチレングリコール等のアルコール類;水等が挙げられる。なお、溶媒は2種類以上を組み合わせた混合溶媒であってもよい。アルコール類を含む抽出溶媒であると、有効成分の抽出効率が高くなり、またエタノール等の殺菌作用のある溶媒を含む抽出溶媒であると、腐敗が生じにくい抽出物を得ることができる。さらに製造過程においては、抽出液の濃縮時間が短い、抽出後の容器の洗浄性に優れるなどの利点がある。 The type of the extraction solvent is not particularly limited, and a known solvent used for plant extraction can be appropriately selected. Specific examples thereof include aliphatic hydrocarbons such as hexane, cyclohexane, and heptane; benzene, toluene, and the like. Aromatic hydrocarbons; Esters such as ethyl acetate and butyl acetate; Ketones such as methyl ethyl ketone and acetone; Ethers such as diethyl ether and methyl-t-butyl ether; Halogenated hydrocarbons such as dichloromethane and trichloroethylene; , Propylene glycol, 1,3-butylene glycol and other alcohols; water and the like. The solvent may be a mixed solvent in which two or more types are combined. When the extraction solvent contains alcohols, the extraction efficiency of the active ingredient is increased, and when the extraction solvent contains a bactericidal solvent such as ethanol, an extract that is less susceptible to spoilage can be obtained. Furthermore, in the production process, there are advantages such as a short concentration time of the extract and excellent washability of the container after extraction.
抽出溶媒が水を含む混合溶媒である場合の抽出溶媒における水の含有量は、通常1質量%以上、好ましくは5質量%以上、より好ましくは10質量%以上、さらに好ましくは30質量%以上であり、通常99質量%以下、好ましくは95質量%以下、より好ましくは90質量%以下、さらに好ましくは70質量%以下である。
抽出溶媒がアルコール類を含む混合溶媒である場合の抽出溶媒におけるアルコール類の含有量は、通常1質量%以上、好ましくは5質量%以上、より好ましくは10質量%以上、さらに好ましくは30質量%以上であり、通常99質量%以下、好ましくは95質量%以下、より好ましくは90質量%以下、さらに好ましくは70質量%以下である。
抽出溶媒が水とアルコール類の混合溶媒である場合、水とアルコールの質量比率(水/アルコール類)は、通常0.01以上、好ましくは0.1以上、より好ましくは0.4以上であり、通常100以下、好ましくは10以下、より好ましくは2.0以下である。
上記の範囲内であると、チロシナーゼ活性阻害作用に優れた抽出物を得やすくなる。
When the extraction solvent is a mixed solvent containing water, the content of water in the extraction solvent is usually 1% by mass or more, preferably 5% by mass or more, more preferably 10% by mass or more, and further preferably 30% by mass or more. In general, it is 99% by mass or less, preferably 95% by mass or less, more preferably 90% by mass or less, and further preferably 70% by mass or less.
When the extraction solvent is a mixed solvent containing alcohols, the content of alcohol in the extraction solvent is usually 1% by mass or more, preferably 5% by mass or more, more preferably 10% by mass or more, and further preferably 30% by mass. These are usually 99% by mass or less, preferably 95% by mass or less, more preferably 90% by mass or less, and still more preferably 70% by mass or less.
When the extraction solvent is a mixed solvent of water and alcohol, the mass ratio of water and alcohol (water / alcohol) is usually 0.01 or more, preferably 0.1 or more, more preferably 0.4 or more. Usually, it is 100 or less, preferably 10 or less, more preferably 2.0 or less.
Within the above range, it becomes easy to obtain an extract excellent in tyrosinase activity inhibitory action.
カミツレ抽出物を得る場合には、水とアルコール類の混合溶媒を使用することが好ましく、水とエタノールの混合溶媒を使用することが特に好ましい。水とアルコールの質量比率(水/アルコール類)は、好ましくは0.1以上10以下である。下限値としては、好ましくは0.4以上であり、より好ましくは0.7以上であり、特に好ましくは0.9以上である。上限値としては、好ましくは2.5以下であり、より好ましくは1.4以下であり、特に好ましくは1.1以下である。 When obtaining a chamomile extract, it is preferable to use a mixed solvent of water and alcohols, and it is particularly preferable to use a mixed solvent of water and ethanol. The mass ratio of water to alcohol (water / alcohols) is preferably 0.1 or more and 10 or less. The lower limit is preferably 0.4 or more, more preferably 0.7 or more, and particularly preferably 0.9 or more. The upper limit is preferably 2.5 or less, more preferably 1.4 or less, and particularly preferably 1.1 or less.
モモ抽出物を得る場合には、水又は水とアルコールの混合溶媒を使用することが好ましく、水を使用することが特に好ましい。
水とアルコールの混合溶媒を使用する場合には、水とエタノールの混合溶媒を使用することがより好ましい。水とアルコールの質量比率(水/アルコール類)は、好ましくは2以上であり、より好ましくは10以上であり、更に好ましくは15以上であり、特に好ましくは30以上である。
When obtaining a peach extract, it is preferable to use water or a mixed solvent of water and alcohol, and it is particularly preferable to use water.
When a mixed solvent of water and alcohol is used, it is more preferable to use a mixed solvent of water and ethanol. The mass ratio of water to alcohol (water / alcohols) is preferably 2 or more, more preferably 10 or more, still more preferably 15 or more, and particularly preferably 30 or more.
抽出における抽出溶媒の使用量は、カミツレの花部やモモの蕾部に対して質量換算で、通常1倍以上、好ましくは2倍以上、より好ましくは5倍以上、さらに好ましくは10倍以上であり、通常10000倍以下である。上記の範囲内であると、チロシナーゼ活性阻害作用に優れた抽出物を得やすくなる。 The amount of the extraction solvent used in the extraction is usually at least 1 time, preferably at least 2 times, more preferably at least 5 times, and even more preferably at least 10 times in terms of mass relative to the chamomile flower or peach cocoon. Yes, usually 10,000 times or less. Within the above range, it becomes easy to obtain an extract excellent in tyrosinase activity inhibitory action.
抽出温度は、抽出溶媒の種類等に応じて適宜選択されるべきであるが、通常0℃よりも大きく、好ましくは5℃以上、より好ましくは20℃以上、さらに好ましくは50℃以上であり、通常200℃以下、好ましくは150℃以下、より好ましくは100℃以下である。
抽出時間は、抽出温度等に応じて適宜選択されるべきであるが、通常1分以上、好ましくは10分以上、より好ましくは30分以上、さらに好ましくは1時間以上であり、通常1週間以下である。
The extraction temperature should be appropriately selected according to the type of the extraction solvent, etc., but is usually greater than 0 ° C., preferably 5 ° C. or higher, more preferably 20 ° C. or higher, more preferably 50 ° C. or higher, Usually, it is 200 ° C. or lower, preferably 150 ° C. or lower, more preferably 100 ° C. or lower.
The extraction time should be appropriately selected according to the extraction temperature and the like, but is usually 1 minute or longer, preferably 10 minutes or longer, more preferably 30 minutes or longer, more preferably 1 hour or longer, usually 1 week or shorter. It is.
上記の抽出操作により抽出されたカミツレ抽出物、モモ抽出物は、抽出溶媒中に分散した抽出液の状態として使用してもよいし、蒸発乾固により抽出溶媒を除去した固形分(高沸点の油分等も含むもの。)として使用してもよい。また、抽出溶媒を除去する場合には、デキストリン、澱粉、乳糖等の不活性粉末に含浸させた粉末組成物とすることが好ましい。粉末組成物は、抽出液に所定量の不活性粉末を投入した後、抽出溶媒を蒸発乾固することにより得ることができる。
不活性粉末の投入量は、抽出液中の抽出物の含有量に応じて適宜決定され、通常、抽出物100質量部に対して、1〜10000質量部である。下限として、好ましくは5以上であり、より好ましくは10以上であり、特に好ましくは25以上である。上限として、好ましくは1000以下であり、より好ましくは400以下であり、更に好ましくは200以下であり、特に好ましくは110以下である。なお、抽出液中の抽出物の含有量は、固形分含量を測定することにより算出することができる。
The chamomile extract and peach extract extracted by the above extraction operation may be used as the state of the extract dispersed in the extraction solvent, or the solid content (high boiling point) from which the extraction solvent has been removed by evaporation to dryness. It may also be used as oil). Moreover, when removing an extraction solvent, it is preferable to set it as the powder composition impregnated with inert powders, such as dextrin, starch, and lactose. The powder composition can be obtained by pouring a predetermined amount of inert powder into the extract and then evaporating and drying the extraction solvent.
The input amount of the inert powder is appropriately determined according to the content of the extract in the extract, and is usually 1 to 10000 parts by mass with respect to 100 parts by mass of the extract. The lower limit is preferably 5 or more, more preferably 10 or more, and particularly preferably 25 or more. As an upper limit, Preferably it is 1000 or less, More preferably, it is 400 or less, More preferably, it is 200 or less, Most preferably, it is 110 or less. In addition, content of the extract in an extract can be computed by measuring solid content.
本発明のチロシナーゼ活性阻害剤は、カミツレ抽出物とモモ抽出物とを質量比25:75〜75:25で含有することを特徴とするが、カミツレ抽出物とモモ抽出物の質量比は、好ましくは40:60〜75:25であり、より好ましくは40:60〜60:40である。上記の範囲内であると、チロシナーゼ活性阻害作用により優れたチロシナーゼ活性阻害剤となり得る。 The tyrosinase activity inhibitor of the present invention is characterized by containing a chamomile extract and a peach extract in a mass ratio of 25:75 to 75:25. The mass ratio of chamomile extract and peach extract is preferably Is 40:60 to 75:25, more preferably 40:60 to 60:40. Within the above range, a tyrosinase activity inhibitor excellent in tyrosinase activity inhibitory action can be obtained.
本発明のチロシナーゼ活性阻害剤は、飲食品、医薬品、医薬部外品、化粧品として利用することができるが、飲食品として利用することが好ましい。なお、本発明のチロシナーゼ活性阻害剤は、経口摂取用であっても、経皮摂取用であってもよい。さらにチロシナーゼ活性阻害剤が経皮摂取用である場合、その剤形はローション、乳剤、ゲル、クリーム、粉末、顆粒、カプセル、シート、スプレー、エアゾール、ペースト、パック等の公知のものを適宜採用することができ、剤形に応じて公知の成分を適宜含むものであってもよい。 Although the tyrosinase activity inhibitor of this invention can be utilized as food / beverage products, a pharmaceutical, a quasi-drug, and cosmetics, it is preferable to utilize as food / beverage products. The tyrosinase activity inhibitor of the present invention may be for oral intake or for percutaneous intake. In addition, when the tyrosinase activity inhibitor is for transdermal intake, the dosage form may be a known one such as lotion, emulsion, gel, cream, powder, granule, capsule, sheet, spray, aerosol, paste, pack, etc. And may contain known components as appropriate according to the dosage form.
本発明のチロシナーゼ活性阻害剤を飲食品、医薬品、医薬部外品、化粧品等の製品として利用する場合、チロシナーゼ活性阻害剤の添加量は特に制限されないが、カミツレ抽出物とモモ抽出物を合わせた総含有量として、製品中に0.0001〜10質量%程度添加することが好ましい。その下限としては、より好ましくは0.01質量%以上であり、更に好ましくは0.05質量%以上であり、特に好ましくは0.1質量%以上である。上限としては、より好ましくは5質量%以下であり、更に好ましくは3質量%以下であり、特好ましくは1質量%以下である。 When the tyrosinase activity inhibitor of the present invention is used as a product such as a food or drink, a pharmaceutical product, a quasi-drug, or a cosmetic, the addition amount of the tyrosinase activity inhibitor is not particularly limited, but the chamomile extract and the peach extract are combined. As a total content, it is preferable to add about 0.0001-10 mass% in a product. The lower limit is more preferably 0.01% by mass or more, still more preferably 0.05% by mass or more, and particularly preferably 0.1% by mass or more. As an upper limit, More preferably, it is 5 mass% or less, More preferably, it is 3 mass% or less, Most preferably, it is 1 mass% or less.
以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example is given and this invention is demonstrated, this invention is not limited to these Examples.
(調製例1)
カミツレの花部100gを50質量%含水エタノール900gに加え、60℃で3時間加熱撹拌し、ろ過して得られたろ液を減圧濃縮した。ろ液中の固形分(カミツレ抽出物)3.5gに対して、デキストリン1gを加えて混合し、凍結乾燥した。次いで、凍結乾燥物を粉砕してカミツレ抽出物の粉末組成物を得た。
(Preparation Example 1)
100 g of the chamomile flower part was added to 900 g of 50% by mass water-containing ethanol, heated and stirred at 60 ° C. for 3 hours, and the filtrate obtained by filtration was concentrated under reduced pressure. 1 g of dextrin was added to and mixed with 3.5 g of the solid content (the chamomile extract) in the filtrate and lyophilized. The freeze-dried product was then pulverized to obtain a chamomile extract powder composition.
(調製例2)
白桃花の蕾部100gをイオン交換水900gに加え、80℃で3時間加熱撹拌し、ろ過して得られたろ液を減圧濃縮した。ろ液中の固形分(モモ抽出物)3.3gに対して、デキストリン1gを加えて混合し、凍結乾燥した。次いで、凍結乾燥物を粉砕してモモ抽出物の粉末組成物を得た。
(Preparation Example 2)
100 g of white peach blossom was added to 900 g of ion-exchanged water, heated and stirred at 80 ° C. for 3 hours, and the filtrate obtained by filtration was concentrated under reduced pressure. 1 g of dextrin was added to 3.3 g of the solid content (peach extract) in the filtrate, mixed and freeze-dried. Next, the freeze-dried product was pulverized to obtain a peach extract powder composition.
(調製例3)
タイム、セイヨウネズについても調製例2と同様にして、抽出物を得た。但し、デキストリンの投入量は、ろ液中の固形分と等量とした。
(Preparation Example 3)
Extracts were obtained in the same manner as in Preparation Example 2 for thyme and gerbil. However, the input amount of dextrin was the same as the solid content in the filtrate.
(実施例1:チロシナーゼ活性阻害の測定)
まず、0.3Mリン酸緩衝液(pH6.8)を用いて各抽出物を所定の濃度に調製し、サンプル溶液とした。
(Example 1: Measurement of tyrosinase activity inhibition)
First, each extract was prepared to a predetermined concentration using 0.3 M phosphate buffer (pH 6.8), and used as a sample solution.
酵素溶液の調製は以下のように行った。チロシナーゼ(マッシュルーム由来、シグマ製)を、0.3Mリン酸緩衝液(pH6.8)を用いて0.01質量%となるように調製し、酵素溶液とした。 The enzyme solution was prepared as follows. Tyrosinase (derived from mushrooms, manufactured by Sigma) was prepared to be 0.01% by mass using a 0.3 M phosphate buffer (pH 6.8) to obtain an enzyme solution.
基質溶液の調製は以下のように行った。L−DОPA(シグマ製)を、0.3Mリン酸緩衝液(pH6.8)を用いて0.02質量%となるように調製し、基質溶液とした。 The substrate solution was prepared as follows. L-DOPA (manufactured by Sigma) was prepared using a 0.3 M phosphate buffer (pH 6.8) so as to be 0.02% by mass, and used as a substrate solution.
被験溶液の調製は以下のように行った。96ウェルプレートにサンプル溶液を50μl/wellで添加した後、酵素溶液を25μl/wellで添加し、さらに、基質溶液を25μl/wellで添加し、プレートをプレートリーダーにセットして37℃で60分間インキュベートを行った後、475nmにおける吸光度を測定した。 The test solution was prepared as follows. After adding the sample solution to the 96-well plate at 50 μl / well, the enzyme solution is added at 25 μl / well, the substrate solution is added at 25 μl / well, and the plate is set on a plate reader at 37 ° C. for 60 minutes. After incubation, the absorbance at 475 nm was measured.
被験blank溶液の調製は以下のように行った。96ウェルプレートにサンプル溶液を50μl/wellで添加した後、酵素溶液を25μl/wellで添加し、さらに、基質溶液に変えて0.3Mリン酸緩衝液(pH6.8)を25μl/wellで添加し、37℃で60分間インキュベートを行った後、475nmにおける吸光度を測定した。 The test blank solution was prepared as follows. After adding the sample solution to the 96-well plate at 50 μl / well, add the enzyme solution at 25 μl / well, and then add 0.3 M phosphate buffer (pH 6.8) at 25 μl / well instead of the substrate solution. After incubation at 37 ° C. for 60 minutes, the absorbance at 475 nm was measured.
対照溶液の調製は以下のように行った。96ウェルプレートに0.3Mリン酸緩衝液(pH6.8)を50μl/wellで添加した後、酵素溶液を25μl/wellで添加し、さらに、基質溶液を25μl/wellで添加し、37℃で60分間インキュベートを行った後、475nmにおける吸光度を測定した。 The control solution was prepared as follows. After adding 0.3 M phosphate buffer (pH 6.8) to a 96-well plate at 50 μl / well, add an enzyme solution at 25 μl / well, and further add a substrate solution at 25 μl / well at 37 ° C. After incubation for 60 minutes, the absorbance at 475 nm was measured.
チロシナーゼ活性阻害は、次の式から求められる阻害率で表にした。
チロシナーゼ活性阻害率(%)={1−(A−B)/C}×100
A:被験溶液の475nmにおける吸光度
B:被験blank溶液の475nmにおける吸光度
C:対象溶液の475nmにおける吸光度
結果を表1に示した。
The inhibition of tyrosinase activity was tabulated by the inhibition rate obtained from the following formula.
Tyrosinase activity inhibition rate (%) = {1− (A−B) / C} × 100
A: Absorbance at 475 nm of the test solution B: Absorbance at 475 nm of the test blank solution C: Absorbance at 475 nm of the target solution The results are shown in Table 1.
実施例1〜3と比較例1〜8の結果から、カミツレ抽出物とモモ抽出物を質量比25:75〜75:25で配合することにより、チロシナーゼ活性阻害作用に関して相乗効果を奏することが明らかである。また、カミツレ抽出物とモモ抽出物の質量比が40:60〜60:40であると、顕著に優れたチロシナーゼ活性阻害作用を発揮することが明らかである(実施例2参照。) From the results of Examples 1 to 3 and Comparative Examples 1 to 8, it is clear that a chamomile extract and a peach extract are combined at a mass ratio of 25:75 to 75:25, thereby producing a synergistic effect on the tyrosinase activity inhibitory action. It is. In addition, when the mass ratio of the chamomile extract and the peach extract is 40:60 to 60:40, it is clear that a remarkably excellent tyrosinase activity inhibitory effect is exhibited (see Example 2).
Claims (2)
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-
2017
- 2017-06-29 JP JP2017127711A patent/JP2019010025A/en active Pending
Cited By (2)
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