JP2016165665A - 液体混合方法及び液体混合装置 - Google Patents

Abstract

【課題】ノズル内に充填された作動液と、混合に用いる対象液とが混ざり合うことを抑制し、試料液を精度良く混合することができる液体混合方法及び液体混合装置を提供する。
【解決手段】吸引及び吐出を行う作動液Ｗが充填されたノズル１１２を用いて、試料液Ｓ及び第２液Ｄをそれぞれ吸引した後に混合容器に吐出することにより混合する液体混合方法において、試料液及び第２液の少なくとも一方からなる対象液Ｓを、第１の空気Ａ１、第１の対象液Ｓ１、第２の空気Ａ２、第２の対象液Ｓ２、の順にノズルに吸引し、第２の対象液を混合容器に吐出する。
【選択図】図４

Description

本発明は、例えば液体クロマトグラフにおける試料液の希釈等に好適に使用できる液体混合方法及び液体混合装置に関する。

液体クロマトグラフにおいては、オートサンプラを用いて分析対象となる試料液に希釈液、内部標準物質や反応試薬を混合した後、この混合液を注入ポートからカラムに導入して分析を行う。上述の混合過程では、ノズルにより試料液と希釈液とをそれぞれ別個に吸引して混合容器に吐出し、混合容器内でミキシングを行っている。ところが、ノズル内に試料液が残った状態で希釈液を吸引すると、クロスコンタミネーションが生じて試料液の濃度（希釈率）が変化してしまい、測定が不正確になる。
そこで、クロスコンタミネーションを防止するため、ノズル内を洗浄液で洗浄してから試料液や希釈液を吸引することが行われるが、ノズル内で試料液と洗浄液が混ざってしまうという問題がある。
このようなことから、試料液を吸引する前に予め空気を吸引し、ノズル内で試料液と作動液（洗浄液）とを空気層で分離させることで、クロスコンタミネーションを防止する技術が開発されている（特許文献１〜３参照）。

特開2011-013045号公報 特許2531199号公報 特公平8-10214号公報

しかしながら、空気層におけるノズル内壁には毛管現象により作動液（洗浄液）が残存しており、これら特許文献１〜３記載の技術を用いても、空気層に含まれる作動液（洗浄液）が試料液や希釈液と混ざって希釈率が変化するという問題がある。

本発明は上記の課題を解決するためになされたものであり、ノズル内に充填された作動液と、混合に用いる対象液とが混ざり合うことを抑制し、試料液を精度良く混合することができる液体混合方法及び液体混合装置の提供を目的とする。

上記の目的を達成するために、本発明の液体混合方法は、吸引及び吐出を行う作動液が充填されたノズルを用いて、試料液及び第２液をそれぞれ吸引した後に混合容器に吐出することにより混合する液体混合方法において、前記試料液及び前記第２液の少なくとも一方からなる対象液を、第１の空気、第１の前記対象液、第２の空気、第２の前記対象液、の順に前記ノズルに吸引し、前記第２の前記対象液を前記混合容器に吐出することを特徴とする。
第１の空気は、ノズル内で第１の対象液と作動液とを空気層によって分離させてクロスコンタミネーションを防止するが、第１の空気におけるノズル内壁には毛管現象により作動液が残存しており、この作動液が第１の対象液と混ざって対象液の濃度が変化する。
そこで、第１の対象液と第２の対象液とを第２の空気によって分離することで、第２の空気におけるノズル内壁の作動液が第１の対象液で置換される。この第１の対象液には作動液が若干混入しているものの、作動液自体よりは対象液の濃度に近いので、共洗いの効果が生じる。このため、第１の対象液が第２の対象液に混入しても濃度変化が少なくなり、クロスコンタミネーションをさらに防止することができる。その結果として、試料液を精度良く混合することができる。
ここで第２液とは、希釈液、内部標準物質や反応試薬等が例示される。

前記第２の前記対象液を吸引した後に続けて第３の空気を前記ノズルに吸引することが好ましい。
このようにすると、第２の対象液が第３の空気によってノズルの外部と分離され、ノズルの外壁に付着している対象液を洗浄液で洗浄した際、この洗浄液が第２の対象液に混入することを防止できる。その結果として、試料液ををさらに精度良く混合することができる。

前記第２の前記対象液を吐出する際、前記第２の空気の一部又は全部を吐出し、前記第２の前記対象液の全量を前記混合容器に吐出することが好ましい。
このようにすると、第２の対象液と第２の空気の境界を含むノズル内を完全に吐出するので、第２の対象液の全量を、確実かつ精度よく混合容器に吐出できる。

前記混合容器に吐出された混合液を、第１の空気、第１の前記混合液、第２の空気、第２の前記混合液、の順に前記ノズルに吸引し、前記第２の前記混合液を前記混合容器に吐出することが好ましい。
このようにすると、混合液を再度吸引して混合容器に吐出して混合を促進する際にも、第２の混合液が第２の空気によって第１の混合液と分離され、上述の共洗いの効果により、第１の混合液中の作動液が第２の混合液に混入しても濃度変化が少なくなる。

本発明の液体混合装置は、吸引及び吐出を行う作動液が充填されたノズルと、前記ノズルの流路に接続されて前記作動液を吸引及び吐出するポンプと、試料液及び第２液が混合される混合容器と、前記ポンプを動作させ、前記ノズルを用いて、前記試料液及び前記第２液をそれぞれ吸引した後に前記混合容器に吐出して混合する制御部と、を備えた液体混合装置において、前記制御部は、前記試料液及び前記第２液の少なくとも一方からなる対象液を、第１の空気、第１の前記対象液、第２の空気、第２の前記対象液、の順に前記ノズルに吸引し、前記第２の前記対象液を前記混合容器に吐出することを特徴とする。

前記制御部は、前記第２の前記対象液を吸引した後に続けて第３の空気を前記ノズルに吸引することが好ましい。
前記制御部は、前記第２の前記対象液を吐出する際、前記第２の空気の一部又は全部を吐出し、前記第２の前記対象液の全量を前記混合容器に吐出することが好ましい。
前記制御部は、前記混合容器に吐出された混合液を、第１の空気、第１の前記混合液、第２の空気、第２の前記混合液、の順に前記ノズルに吸引し、前記第２の前記混合液を前記混合容器に吐出することが好ましい。

本発明によれば、液体混合装置のノズル内に充填された作動液と、混合に用いる対象液とが混ざり合うことを抑制し、試料液を精度良く混合することができる。

本発明の実施形態に係る液体混合装置を含む液体クロマトグラフ装置のブロック図である。 試料液と希釈液との混合処理（希釈処理）のフローを示す図である。 サブルーチンであるニードルの洗浄処理のフローを示す図である。 ニードル内に、第１の空気、第１の試料液、第２の空気、第２の試料液、第３の空気がこの順に吸引された状態を示す図である。 ニードルの外壁に付着している試料液を洗浄液で洗浄する状態を示す図である。 第３の空気、第２の試料液、及び第２の空気をニードルから吐出する状態を示す図である。

以下、本発明の実施形態について、図面を参照して説明する。

図１は本発明の実施形態に係る液体混合装置（オートサンプラ）１００を含む液体クロマトグラフ装置２００のブロック図である。図１において、オートサンプラ１００は、液体クロマトグラフ装置２００の主要な構成ユニットであり、後述する混合液Ｍを調製して液体クロマトグラフ装置２００の注入ポート２０２に注入する。
液体クロマトグラフ装置２００は、移動相流路２２０に接続されて複数種類の溶離液（移動相）Ｅをそれぞれ収容する溶離液容器２１０（図１では、１つの容器のみ表示）及び溶離液ポンプ２１２と、検出流路２２２内に接続されたカラムオーブン２１６及び検出器２１８と、、上述のオートサンプラ１００とを備える。
流路切り替えバルブ２０４は、各流路２２０〜２２６、及びサンプルループ２１４に接続される６つのポートを有し、これらポート間の接続を回転式に切り替える。

そして、オートサンプラ１００から注入ポート２０２に注入された混合液Ｍは、流路切り替えバルブ２０４からサンプルループ２１４へ送液されてサンプルループ２１４に一時的に貯留される。この状態で流路切り替えバルブ２０４を切り替え、移動相流路２２０とサンプルループ２１４と検出流路２２２とをこの順で接続する。
次に、溶離液ポンプ２１２によって溶離液容器２１０から吸引された溶離液Ｅは、移動相流路２２０を介してサンプルループ２１４へ送液され、サンプルループ２１４内の混合液Ｍが溶離液Ｅによって検出流路２２２へ送液される。検出流路２２２中のカラムオーブン２１６には、カラムオーブン２１６によって恒温維持された分離カラムが内蔵されている。そして、混合液Ｍに含まれる試料の成分は、カラムオーブン２１６内の分離カラムによって分離された後、検出器２１８によって検出される。
なお、図１の流路切り替えバルブ２０４の各ポート間の実線はポート間が接続された状態を示し、破線はポート間が接続されていない状態を示す。図１では、移動相流路２２０とサンプルループ２１４と検出流路２２２とが接続されている状態を示す。

次に、本発明の特徴部分であるオートサンプラ１００の構成について説明する。
オートサンプラ１００は、流路切り替えバルブ２０４と、流路切り替えバルブ２０４に接続された注入ポート２０２と、サンプルループ２１４と、排出流路２２６と、作動液Ｗを収容する作動液容器１０２と、作動液容器１０２から作動液Ｗを吸引する作動液ポンプ１０４と、液体または空気を吸引または吐出するシリンジ１０６と、切り替えバルブ１０８と、バッファーチューブ１１０と、先端が開口するニードル（ノズル）１１２と、作動液流路１２０と、洗浄ポート１３０と、試料液Ｓを収容する試料容器１３２と、希釈液Ｄを収容する希釈容器１３４と、混合容器１３６と、制御部１４０と、を備える。洗浄ポート１３０には所定の洗浄液（本実施形態では作動液Ｗ）が充填されている。
制御部１４０は、作動液ポンプ１０４及び切り替えバルブ１０８の動作を制御すると共に、シリンジ１０６のピストンに接続されたアクチュエータ１０７の動作を制御してシリンジ１０６から液体または空気を吸引または吐出する。又、制御部１４０は、ニードル１１２に取り付けられた移動機構１１３の動作を制御してニードル１１２を３次元移動させる。制御部１４０としては、例えばＣＰＵ、ＲＯＭ、ＲＡＭ、記憶装置等を備えたマイコンを用いることができる。
なお、作動液ポンプ１０４、希釈液Ｄがそれぞれ特許請求の範囲の「ポンプ」、「第２液」に相当する。

次に、図２を参照し、制御部１４０による、試料液Ｓと希釈液Ｄとの混合処理（希釈処理）のフローについて説明する。なお、試料液Ｓと希釈液Ｄがいずれも特許請求の範囲の「対象液」に相当する。
図２のフローのうち、第１フロー１００ｘは、試料容器１３２から試料液Ｓを吸引し、混合容器１３６に吐出するまでのステップＳ１０〜Ｓ１１０のフローである。第１フロー１００ｘに続く第２フロー２００ｘは、希釈容器１３４から希釈液Ｄを吸引し、混合容器１３６に吐出するまでのステップＳ１０〜Ｓ２１０のフローである。第２フロー２００ｘに続く第３フロー３００ｘは、混合容器１３６に吐出された試料液Ｓおよび希釈液Ｄを混合するステップＳ１０〜Ｓ３１０のフローである。

まず、第１フロー１００ｘについて説明する。
第１フロー１００ｘにおいては、最初にサブルーチンであるニードルの洗浄処理Ｓ１０を行う。具体的には、図３に示すようにしてニードルの洗浄処理Ｓ１０を行う。まず、制御部１４０は、移動機構１１３を動作させてニードル１１２を洗浄ポート１３０に挿入し、洗浄ポート１３０内でニードル１１２の外壁に洗浄液（作動液Ｗ）を吹き付ける等により外壁を洗浄する（ステップＳ１２）。なお、ニードル１１２を洗浄液（作動液Ｗ）に浸漬させてもよい。
次に、制御部１４０は、切り替えバルブ１０８を作動液Ｗ側に切替える（ステップＳ１４）。その後、制御部１４０は、作動液ポンプ１０４を動作させて作動液容器１０２から作動液Ｗを吸引し、作動液流路１２０を介して作動液Ｗをバッファーチューブ１１０及びニードル１１２の内部に流し、ニードル１１２の内壁を洗浄した後、ニードル１１２内を作動液Ｗで充填する。（ステップＳ１６）。
次に、制御部１４０は、切り替えバルブ１０８をシリンジ１０６側に切替え（ステップＳ１８）、メインルーチンに戻る。

図２に戻り、ニードルの洗浄処理Ｓ１０の後、制御部１４０は、移動機構１１３を動作させてニードル１１２を試料容器１３２に挿入する（ステップＳ１０２）。なお、ステップＳ１０２では、ニードル１１２先端の高さを試料容器１３２内の試料液Ｓに浸漬しないように調整する。
次に制御部１４０は、アクチュエータ１０７を動作させ、シリンジ１０６により作動液流路１２０内の作動液Ｗを吸引する（ステップＳ１０４）。このとき、ニードル１１２先端は空気中に配置されているので、ニードル１１２内に第１の空気Ａ１が吸引される。次いて制御部１４０は、移動機構１１３を動作させて、ニードル１１２を試料容器１３２内の試料液Ｓに浸漬させ、再びアクチュエータ１０７を動作させシリンジ１０６により第１の試料液Ｓ１を吸引する。次いで制御部１４０は、移動機構１１３を動作させて、ニードル１１２を試料液Ｓから引き上げ、アクチュエータ１０７を動作させシリンジ１０６により第２の空気Ａ２を吸引した後、試料液Ｓに浸漬させてアクチュエータ１０７を動作させ、シリンジ１０６により第２の試料液Ｓ２を吸引する。そして制御部１４０は最後にニードル１１２を引き上げてアクチュエータ１０７を動作させ、シリンジ１０６により第３の空気Ａ３の吸引を行うことで、第２の空気Ａ２、第２の試料液Ｓ２、第３の空気Ａ３を順に吸引する。このようにしてステップＳ１０４を行う。

図４は、ステップＳ１０４により、ニードル１１２内に、第１の空気Ａ１、第１の試料液Ｓ１、第２の空気Ａ２、第２の試料液Ｓ２、第３の空気Ａ３がこの順に吸引された状態を示す。
第１の空気Ａ１は、ニードル１１２内で第１の試料液Ｓ１と作動液Ｗとを空気層によって分離させてクロスコンタミネーションを防止するが、第１の空気Ａ１におけるニードル１１２内壁には毛管現象により作動液Ｗが残存しており、この作動液Ｗが第１の試料液Ｓ１と混ざって試料液Ｓ１の濃度が変化する。
そこで、第１の試料液Ｓ１と第２の試料液Ｓ２とを第２の空気Ａ２によって分離することで、第２の空気Ａ２におけるニードル１１２内壁の作動液Ｗが第１の試料液Ｓ１で置換される。この第１の試料液Ｓ１には作動液Ｗが若干混入しているものの、作動液Ｗ自体よりは試料液Ｓの濃度に近いので、共洗いの効果が生じる。このため、第１の試料液Ｓ１が第２の試料液Ｓ２に混入しても濃度変化が少なくなり、クロスコンタミネーションをさらに防止することができる。その結果として、第２の試料液Ｓ２を希釈液Ｄと精度良く混合することができる。

次に制御部１４０は、移動機構１１３を動作させてニードル１１２を洗浄ポート１３０に挿入し、ニードル１１２の外壁に洗浄液（作動液Ｗ）を吹き付けて外壁を洗浄する（ステップＳ１０６）。
ここで、上述のように本実施形態では、ステップＳ１０４で第２の試料液Ｓ２を吸引した後に続けて第３の空気Ａ３を吸引している。このため、図５に示すように、第２の試料液Ｓ２が第３の空気Ａ３によってニードル１１２の外部と分離され、ニードル１１２の外壁に付着している試料液Ｓを洗浄液（作動液Ｗ）で洗浄した際、この洗浄液が第２の試料液Ｓ２に混入することを防止できる。その結果として、第２の試料液Ｓ２を希釈液Ｄとさらに精度良く混合することができる。なお、実際の洗浄動作としては、例えばニードル１１２を洗浄ポート１３０に浸漬させ、洗浄ポート１３０内の洗浄液をフローさせることによりニードル１１２の外壁の付着液を拡散および剥ぎ取ることができる。

次に制御部１４０は、移動機構１１３を動作させてニードル１１２を混合容器１３６に挿入し（ステップＳ１０８）、次いでアクチュエータ１０７を動作させてシリンジ１０６により作動液流路１２０内の作動液Ｗを吐出し、第３の空気Ａ３、第２の試料液Ｓ２（全量）、及び第２の空気Ａ２（一部）をニードル１１２から吐出する（ステップＳ１１０）。
ここで、第１の試料液Ｓ１と第２の試料液Ｓ２との間に第２の空気Ａ２を設けることで、図６に示すように、ステップＳ１１０で第２の空気Ａ２を吐出した際に第２の試料液Ｓ２が排出され易くなり、第２の試料液Ｓ２がニードル１１２内に残らずに吐出量が正確になる。

次に、第２フロー２００ｘについて説明する。
ステップＳ１１０に引き続き、制御部１４０は、上記したニードルの洗浄処理Ｓ１０を行った後、移動機構１１３を動作させてニードル１１２を希釈容器１３４に挿入する（ステップＳ２０２）。なお、ステップＳ２０２では、ニードル１１２先端の高さを希釈容器１３４内の希釈液Ｄに浸漬しないように調整する。
次に制御部１４０は、アクチュエータ１０７を動作させ、シリンジ１０６により作動液流路１２０内の作動液Ｗを吸引する（ステップＳ２０４）。このとき、ニードル１１２先端は空気中に配置されているので、ニードル１１２内に第１の空気Ａ１が吸引される。次いて制御部１４０は、移動機構１１３を動作させて、ニードル１１２を希釈容器１３４内の希釈液Ｄに浸漬させ、再びアクチュエータ１０７を動作させ、シリンジ１０６により第１の希釈液Ｄ１を吸引する。次いて制御部１４０は、移動機構１１３を動作させて、ニードル１１２を希釈液Ｄから引き上げ、アクチュエータ１０７を動作させシリンジ１０６により第２の空気Ａ２を吸引した後、希釈液Ｄに浸漬させアクチュエータ１０７を動作させ、シリンジ１０６により第２の希釈液Ｄ２を吸引する。そして制御部１４０は、最後にニードル１１２を引き上げてアクチュエータ１０７を動作させ、シリンジ１０６により第３の空気Ａ３の吸引を行うことで、第２の空気Ａ２、第２の希釈液Ｄ２、第３の空気Ａ３を順に吸引する。このようにしてステップＳ２０４を行う。

ステップＳ２０４においても、第１の希釈液Ｄ１と第２の希釈液Ｄ２とを第２の空気Ａ２によって分離することで、第２の空気Ａ２におけるニードル１１２内壁の作動液Ｗが第１の希釈液Ｄ１で置換される。この第１の希釈液Ｄ１は作動液Ｗ自体よりは希釈液Ｄの濃度に近いので、クロスコンタミネーションをさらに防止することができ、第２の希釈液Ｄ２を試料液Ｓと精度良く混合することができる。

次に制御部１４０は、移動機構１１３を動作させてニードル１１２を洗浄ポート１３０に挿入し、ニードル１１２の外壁に洗浄液（作動液Ｗ）を吹き付けて外壁を洗浄する（ステップＳ２０６）。ステップＳ２０６はステップＳ１０６と同一の処理である。又、本実施形態では第３の空気Ａ３を吸引しているため、上記ステップＳ１０６と同様に、ニードル１１２の外壁に付着している希釈液Ｄを洗浄液（作動液Ｗ）で洗浄した際、この洗浄液が第２の希釈液Ｄ２に混入することを防止できる。

次に制御部１４０は、移動機構１１３を動作させてニードル１１２を混合容器１３６に挿入し（ステップＳ２０８）、次いでアクチュエータ１０７を動作させてシリンジ１０６により作動液流路１２０内の作動液Ｗを吐出し、第３の空気Ａ３、第２の希釈液Ｄ２（全量）、及び第２の空気Ａ２（一部）をニードル１１２から吐出する（ステップＳ２１０）。ステップＳ２０８、Ｓ２１０は、それぞれステップＳ１０８、Ｓ１１０と同様な処理である。これにより、混合容器１３６内に第２の試料液Ｓ２と第２の希釈液Ｄ２とが投入されて混合液Ｍとなる。
又、第２の空気Ａ２を設けることで、ステップＳ２１０で第２の空気Ａ２を吐出した際に第２の希釈液Ｄ２が排出され易くなり、第２の希釈液Ｄ２がニードル１１２内に残らずに吐出量が正確になる。

次に、第３フロー３００ｘについて説明する。
ステップＳ２１０に引き続き、制御部１４０は、上記したニードルの洗浄処理Ｓ１０を行った後、移動機構１１３を動作させてニードル１１２を混合容器１３６に挿入する（ステップＳ３０２）。なお、ステップＳ３０２では、ニードル１１２先端の高さを混合容器１３６内の混合液Ｍに浸漬しないように調整する。
次に制御部１４０は、アクチュエータ１０７を動作させ、シリンジ１０６により作動液流路１２０内の作動液Ｗを吸引する（ステップＳ３０４）。このとき、ニードル１１２先端は空気中に配置されているので、ニードル１１２内に空気が吸引される。次いて制御部１４０は、移動機構１１３を動作させて、ニードル１１２を混合容器１３６内の混合液Ｍに浸漬させ、アクチュエータ１０７を動作させ、シリンジ１０６により混合液Ｍを吸引する。
次に制御部１４０は、アクチュエータ１０７を動作させてシリンジ１０６により作動液流路１２０内の作動液Ｗを吐出し、混合液Ｍ（全量）、及び空気（一部）をニードル１１２から混合容器１３６内に吐出する（ステップＳ３０６）。なお、Ｓ３０４と３０６でニードル１１２高さは変わらない、つまり浸漬したまま吐出する。このとき、ニードル１１２内に空気の一部を残すことで、ニードル１１２内の作動液Ｗと、混合容器１３６内の混合液Ｍとが分離し、作動液Ｗが混合液Ｍに混入することを防止できる。
又、ステップＳ３０４の空気の吸引を、上述の対象液の場合と同様に（図４参照）、第１の空気、第１の混合液、第２の空気、第２の混合液の順で行うと、第２の混合液が第２の空気によって第１の混合液と分離され、上述の共洗いの効果により、第１の混合液中の作動液が第２の混合液に混入しても濃度変化が少なくなるので好ましい。

次に制御部１４０は、カウンタをインクリメントし（ステップＳ３０８）、カウンタが所定の繰返し数ｎになったか否かを判定する（ステップＳ３１０）。そして、ステップＳ３１０で「Ｙｅｓ」であれば混合処理のメインルーチンを終了し、「Ｎｏ」であればステップＳ３０４に戻る。
ステップＳ３０４、Ｓ３０６の処理は、第２の試料液Ｓ２と第２の希釈液Ｄ２をよく撹拌して混合液Ｍを確実に混合する処理であり、ｎ＝２以上とすればステップＳ３０４、Ｓ３０６による撹拌を複数回行うことができ、混合液Ｍをより確実に混合することができる。但し、ｎ＝１（つまり、ステップＳ３０４、Ｓ３０６の処理を１回のみ行う）であってもよい。

なお、希釈液Ｄとしては、液体クロマトグラフで通常用いられる、純水、緩衝液、有機溶媒等を挙げることができる。又、作動液Ｗとしては純水、緩衝液、有機溶媒等を挙げることができる。

本発明は上記実施形態に限定されない。
例えば、上記実施形態では、第２液として希釈液Ｄを用い、試料液Ｓの希釈を行ったが、第２液として内部標準物質又は反応試薬を用い、試料液Ｓにこれらの液を混合してもよい。
又、上記実施形態では、第１フロー１００ｘ、第２フロー２００ｘの順で処理を行ったが、両者の順序を逆にしてもよい。又、本発明の特徴部分である、ステップＳ１０４及びＳ２０４については、試料液Ｓと第２液（希釈液）の少なくともいずれか一方について行えばよいが、両液について行うことが好ましいのはいうまでもない。

１００ 液体混合装置
１０４ 作動液ポンプ（ポンプ）
１１２ ニードル（ノズル）
１２０ 作動液流路（ノズルの流路）
１３６ 混合容器
１４０ 制御部
Ｓ 試料液（対象液）
Ｓ１、Ｄ１ 第１の対象液
Ｓ２、Ｄ２ 第２の対象液
Ａ１ 第１の空気
Ａ２ 第２の空気
Ａ３ 第３の空気
Ｄ 第２液（対象液）
Ｗ 作動液

Claims (8)

1. 吸引及び吐出を行う作動液が充填されたノズルを用いて、試料液及び第２液をそれぞれ吸引した後に混合容器に吐出することにより混合する液体混合方法において、
   前記試料液及び前記第２液の少なくとも一方からなる対象液を、第１の空気、第１の前記対象液、第２の空気、第２の前記対象液、の順に前記ノズルに吸引し、
   前記第２の前記対象液を前記混合容器に吐出することを特徴とする液体混合方法。
2. 前記第２の前記対象液を吸引した後に続けて第３の空気を前記ノズルに吸引する請求項１記載の液体混合方法。
3. 前記第２の前記対象液を吐出する際、前記第２の空気の一部又は全部を吐出し、前記第２の前記対象液の全量を前記混合容器に吐出する請求項１又は２記載の液体混合方法。
4. 前記混合容器に吐出された混合液を、第１の空気、第１の前記混合液、第２の空気、第２の前記混合液、の順に前記ノズルに吸引し、
   前記第２の前記混合液を前記混合容器に吐出する請求項１〜３のいずれか一項記載の液体混合方法。
5. 吸引及び吐出を行う作動液が充填されたノズルと、
   前記ノズルの流路に接続されて前記作動液を吸引及び吐出するポンプと、
   試料液及び第２液が混合される混合容器と、
   前記ポンプを動作させ、前記ノズルを用いて、前記試料液及び前記第２液をそれぞれ吸引した後に前記混合容器に吐出して混合する制御部と、を備えた液体混合装置において、
   前記制御部は、前記試料液及び前記第２液の少なくとも一方からなる対象液を、第１の空気、第１の前記対象液、第２の空気、第２の前記対象液、の順に前記ノズルに吸引し、前記第２の前記対象液を前記混合容器に吐出することを特徴とする液体混合装置。
6. 前記制御部は、前記第２の前記対象液を吸引した後に続けて第３の空気を前記ノズルに吸引する請求項５記載の液体混合装置。
7. 前記制御部は、前記第２の前記対象液を吐出する際、前記第２の空気の一部又は全部を吐出し、前記第２の前記対象液の全量を前記混合容器に吐出する請求項５又は６記載の液体混合装置。
8. 前記制御部は、前記混合容器に吐出された混合液を、第１の空気、第１の前記混合液、第２の空気、第２の前記混合液、の順に前記ノズルに吸引し、
   前記第２の前記混合液を前記混合容器に吐出する請求項５〜７のいずれか一項記載の液体混合装置。

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