JP2016037465A - 中性脂肪蓄積抑制剤、及び中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法 - Google Patents

Abstract

【課題】ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも高い中性脂肪蓄積抑制効果を有する中性脂肪蓄積抑制剤、及び中性脂肪蓄積抑制作用を向上する。【解決手段】中性脂肪蓄積抑制剤は、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物、及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含む。中性脂肪蓄積抑制剤は、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物、及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物が、１００℃以上で加熱殺菌されたものであるのが好ましい。【選択図】図１

Description

本発明は、中性脂肪蓄積抑制剤、ＰＰＡＲα発現促進剤及び中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法に関する。

ウーロン茶又はプーアル茶由来のポリフェノールやカテキン、カフェインは、中性脂肪の蓄積を抑制することが従来より知られており、ウーロン茶又はプーアル茶は、中性脂肪蓄積抑制剤として使用されている。

例えば、特許文献１には、ウーロン茶が、血中の中性脂肪の上昇を抑制することが記載されている。また、非特許文献１には、プーアル茶の摂取により、脂肪組織重量の減少が見られたことが記載されている。

国際公開第２００５−０７７３８４号パンフレット

ＫＵＡＮ−ＬＩ ＫＵＯ，ｅｔ．ａｌ， "Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｈｙｐｏｌｉｐｉｄｅｍｉｃ ａｎｄ Ｇｒｏｗｔｈ Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｏｏｌｏｎｇ， Ｂｌａｃｋ， Ｐｕ−ｅｒｈ， ａｎｄ Ｇｒｅｅｎ Ｔｅａ Ｌｅａｖｅｓ ｉｎ Ｒａｔｓ"， Ｊ． Ａｇｒｉｃ． Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ． ２００５；５３（２）， ｐ．４８０−４８９

ウーロン茶又はプーアル茶を用いて、中性脂肪蓄積抑制の高い効果を得ようとする場合、ウーロン茶又はプーアル茶を多量に摂取する必要がある。

しかしながら、ウーロン茶又はプーアル茶を多量に摂取すると、ウーロン茶又はプーアル茶の味が濃くなりすぎ、香味が低下するという問題が生じる。そのため、従来のウーロン茶又はプーアル茶と同等の量で、より優れた中性脂肪蓄積抑制効果を得られる茶が必要とされる。

本発明は、以上の実情に鑑みてなされたものであり、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも高い中性脂肪蓄積抑制効果を有する中性脂肪蓄積抑制剤、ＰＰＡＲα発現促進剤及び中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法を提供することを目的とする。

本発明者らは、ラットにウーロン茶とプーアル茶を併用して摂取させることで、中性脂肪蓄積抑制効果に優れることを見出し、本発明を完成するに至った。より具体的には、本発明は以下のようなものを提供する。

（１） プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含む中性脂肪蓄積抑制剤。

（２） 前記プーアル茶の茶葉又は前記プーアル茶抽出物及び前記ウーロン茶の茶葉又は前記ウーロン茶抽出物が、１００℃以上で加熱殺菌されたものである、（１）記載の中性脂肪蓄積抑制剤。

（３） 前記プーアル茶抽出物及び前記ウーロン茶抽出物の少なくともいずれか一方が、水によって抽出されたものである、（１）又は（２）に記載の中性脂肪蓄積抑制剤。

（４） プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含むＰＰＡＲα発現促進剤。

（５） 前記プーアル茶の茶葉又は前記プーアル茶抽出物及び前記ウーロン茶の茶葉又は前記ウーロン茶抽出物が、１００℃以上で加熱殺菌されたものである、（４）記載のＰＰＡＲα発現促進剤。

（６） 前記プーアル茶抽出物及び前記ウーロン茶抽出物の少なくともいずれか一方が、水によって抽出されたものである、（４）又は（５）に記載のＰＰＡＲα発現促進剤。

（７） プーアル茶及びウーロン茶のいずれか一方に他方を加えることによって、一方の中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法。

本発明によれば、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも高い中性脂肪蓄積抑制効果を有する中性脂肪蓄積抑制剤、ＰＰＡＲα発現促進剤及び中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法を提供することができる。

実施例、比較例１、２、対照例１、２に係るラットにおける中性脂肪量を示すグラフである。 実施例、比較例１、２、対照例２に係るラットにおけるＰＰＡＲαの発現量を示すグラフである。

以下、本発明の具体的な実施形態について詳細に説明するが、本発明は以下の実施形態に何ら限定されるものではなく、本発明の目的の範囲内において、適宜変更を加えて実施することができる。なお、説明が重複する箇所については、適宜説明を省略する場合があるが、発明の要旨を限定するものではない。

＜中性脂肪蓄積抑制剤＞
本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含む。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも、高い中性脂肪蓄積抑制効果を有する。その理由は、以下のとおりであると推察される。

本発明のプーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物によると、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも、ＰＰＡＲα（ペルオキシゾーム増殖剤応答性受容体-α）の発現を促進することができる。ここで、ＰＰＡＲαは、エネルギー消費や脂肪酸の酸化に関連した遺伝子の発現を促進することが知られており、特に、脂肪酸代謝において、アシルＣｏＡ酸化酵素等のβ酸化に関する遺伝子の発現を促進させ、脂肪燃焼を促進することが知られている。そのため、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも、中性脂肪蓄積抑制効果が高い。

また、より高い中性脂肪蓄積抑制効果を得ることを目的として、ウーロン茶又はプーアル茶を多量に摂取すると、茶由来の味が濃くなりすぎて香味が低下してしまう。本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも、中性脂肪蓄積抑制に優れるため、より低量で中性脂肪蓄積抑制効果を発揮でき、ウーロン茶又はプーアル茶の多量摂取による香味の低下を抑制できる。さらに、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、プーアル茶単独と比較して、同等の量を摂取した場合に、プーアル茶独特の香りと、渋味のない苦い味わいを抑制できる。また、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、ウーロン茶の渋みとプーアル茶の香りが一体化して、従来にない新しい味を与えることができる。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤に含まれるプーアル茶は、プーアル茶の茶葉、プーアル茶抽出物のいずれであってもよい。また、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤に含まれるウーロン茶は、ウーロン茶の茶葉、ウーロン茶抽出物のいずれであってもよい。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、プーアル茶とウーロン茶の含有量は特に限定されないが、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、プーアル茶抽出物中のプーアル茶に由来する成分の固形分含有量と、ウーロン茶抽出物中のプーアル茶に由来する成分の固形分含有量との比が、１：０．１〜１０であることが好ましく、１：０．２〜５であることがより好ましく、１：０．５〜２であることがさらに好ましく、１：０．８〜１．２５であることが最も好ましい。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、総カテキンの固形分含有量（ｗｔ％）は、特に限定されないが、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、総ポリフェノールの固形分含有量（ｗｔ％）に対する比で、０．０１〜２．０が好ましく、０．１〜１．０がより好ましく、０．２〜０．５がさらに好ましい。なお、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の総カテキン量は、ＨＰＬＣ分析により測定する。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、カフェインの固形分含有量（ｗｔ％）は、特に限定されないが、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、総ポリフェノールの固形分含有量（ｗｔ％）に対する比で、０．０１〜２．０が好ましく、０．０５〜１．０がより好ましく、０．２５〜０．４５がさらに好ましい。なお、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中のカフェイン量は、ＨＰＬＣ分析により測定する。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、タンニンの固形分含有量（ｗｔ％）は、特に限定されないが、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、総ポリフェノールの固形分含有量（ｗｔ％）に対する比で、０．２〜２．５が好ましく、０．４〜２．０がより好ましく、０．６〜１．３がさらに好ましく、０．９〜１．１が最も好ましい。なお、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中のタンニン量は、酒石酸鉄法で測定する。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、総ポリフェノールの固形分含有量は、特に限定されないが、量が多いほどＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、１０．０ｇ／１００ｇ以上が好ましく、１５．０ｇ／１００ｇ以上がより好ましく、２０．０ｇ／１００ｇ以上がさらに好ましい。一方、総ポリフェノールの固形分含有量が多すぎると、ウーロン茶、プーアル茶由来の味が濃くなりすぎ、香味が低下することから、総ポリフェノールの固形分含有量は、５０．０ｇ／１００ｇ以下が好ましく、４０．０ｇ／１００ｇ以下がより好ましく、３０．０ｇ／１００ｇ以下がさらに好ましい。なお、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の総ポリフェノール量は、フォーリンチオカルト法で測定する。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、総カテキンの固形分含有量は、特に限定されないが、量が多いほど、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、１．０ｇ／１００ｇ以上が好ましく、４．０ｇ／１００ｇ以上がより好ましく、８．０ｇ／１００ｇ以上がさらに好ましい。一方、総カテキンの固形分含有量が多すぎると、ウーロン茶、プーアル茶由来の味が濃くなりすぎ、香味が低下することから、総カテキンの固形分含有量は、２５．０ｇ／１００ｇ以下が好ましく、１７．０ｇ／１００ｇ以下がより好ましく、１２．０ｇ／１００ｇ以下がさらに好ましい。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、カフェインの固形分含有量は、特に限定されないが、量が多いほど、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、１．０ｇ／１００ｇ以上が好ましく、５．０ｇ／１００ｇ以上がより好ましく、７．０ｇ／１００ｇ以上がさらに好ましい。一方、カフェインの固形分含有量が多すぎると、ウーロン茶、プーアル茶由来の味が濃くなりすぎ、香味が低下することから、カフェインの固形分含有量は、３０．０ｇ／１００ｇ以下が好ましく、２０．０ｇ／１００ｇ以下がより好ましく、１０．０ｇ／１００ｇ以下がさらに好ましい。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、タンニンの固形分含有量は、特に限定されないが、量が多いほど、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、１０．０ｇ／１００ｇ以上が好ましく、２０．０ｇ／１００ｇ以上がより好ましく、２５．０ｇ／１００ｇ以上がさらに好ましい。一方、タンニンの固形分含有量が多すぎると、ウーロン茶、プーアル茶由来の味が濃くなりすぎ、香味が低下することから、タンニンの固形分含有量は、５０．０ｇ／１００ｇ以下が好ましく、４０．０ｇ／１００ｇ以下がより好ましく、３０．０ｇ／１００ｇ以下がさらに好ましい。

プーアル茶の茶葉、ウーロン茶の茶葉の形状は、どのような形状であってもよく、例えば、方形状、円形状等に裁断したものであってもよい。また、茶葉を粉砕して粒状に丸めて成形された粉末状の茶葉であってもよい。

プーアル茶抽出物、ウーロン茶抽出物は、従来の公知の方法により抽出することができる、例えば、プーアル茶の茶葉、ウーロン茶の茶葉を５０〜１００℃（好ましくは、６０〜９７℃、より好ましくは７０〜９５℃、さらに好ましくは、８０〜９３℃）、５〜２０分間、抽出することができる。

抽出に使用する溶媒は、特に限定されないが、水を用いた場合、茶中の総ポリフェノール、総カテキン、カフェイン、タンニンを効率良く抽出できることから、プーアル茶抽出物及びウーロン茶抽出物の少なくともいずれか一方が水によって抽出されたものであるのが好ましく、これらの両方が水によって抽出されたものであるのがさらに好ましい。また、抽出溶媒は、水以外の溶媒であってもよく、例えば、エタノール、ヘキサン、イソプロピルアルコール、液化炭酸ガス等であってもよい。

また、上述の抽出液に、従来の公知の種々の成分を配合してもよい。そのような公知の成分としては、例えば、香料、酸味料（アスコルビン酸、無水クエン酸等）のほか、安定剤、増粘剤、乳化剤、ｐＨ調整剤（重曹等）を任意に使用できる。これら成分はどのように配合してもよく、例えば、溶媒に抽出物を抽出する前に配合してもよく、溶媒に抽出物を抽出した後に配合してもよい。

また、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物は、一般的に、加熱殺菌することで、それぞれの中に含まれるポリフェノールの構造が変わってしまうため、中性脂肪蓄積抑制効果が変化するおそれがある。しかし、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤においては、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含むことで、加熱殺菌されても、中性脂肪蓄積抑制に優れる。具体的には、１００℃以上で加熱殺菌されてもよく、１１０℃以上で加熱殺菌されてもよく、１２０℃以上で加熱殺菌されてもよい。また、加熱殺菌温度の上限は、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤が十分な中性脂肪蓄積抑制効果を奏する範囲内であれば、特に限定されないが、例えば、１５０℃以下であってもよい。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、どのような形態で使用してもよく、例えば、上記のプーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物をそのまま中性脂肪蓄積抑制として使用してもよい。あるいは、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を製剤化したものであってもよい。製剤の形状は、錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の種々の形状であってもよく、また、液体状態であってもよい。あるいは、茶抽出物を粉末化し、凍結乾燥させた状態であってもよい。製剤化を行う場合、一般に使用される結合剤、包含剤、賦形剤、滑沢剤、崩壊剤、湿潤剤のような添加剤を含有してもよい。

また、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤の投与方法は、特に限定されず、例えば、経口投与であっても、非経口投与であってもよい。本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、経口投与しても、プーアル茶又はウーロン茶単独で摂取するよりも、中性脂肪蓄積抑制に優れるため、香味が低下しにくいため、経口投与が好ましい。

＜ＰＰＡＲα発現促進剤＞
本発明は、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含むＰＰＡＲα発現促進剤を包含する。

プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物は、上記のとおり、ＰＰＡＲαの発現を促進することができる。また、ＰＰＡＲαとは、脂肪の燃焼を促進するタンパク質である。そのため、本発明のＰＰＡＲα発現促進剤は、ＰＰＡＲα発現促進することができ、それによって脂肪の燃焼を促進可能である。

ＰＰＡＲα発現促進剤は、上記の中性脂肪蓄積抑制と同様の方法で作製することができる、また、組成、形状、投与方法も中性脂肪蓄積抑制と同様のものであってもよい。

＜中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法＞
本発明は、プーアル茶及びウーロン茶のいずれか一方に他方を加えることによって、一方の中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法を包含する。

本方法におけるプーアル茶及びウーロン茶は、いずれも液状のものであり、例えば、それぞれの茶抽出物を使用してもよい。あるいは、プーアル茶及びウーロン茶は、飲料として使用されるものであってもよく、飲料として使用される従来から公知の成分（例えば、香料、酸味料、安定剤、増粘剤、乳化剤、ｐＨ調整剤等）を含むものであってもよい。

（実施例）
プーアル茶の茶葉とウーロン茶の茶葉とを、茶葉重量として１：１となるように混合し、４０ｇ／Ｌとなるように９０℃１１分間抽出した。その抽出液にアスコルビン酸Ｎａ０．３ｇ／Ｌ、重曹０．１５ｇ／Ｌを添加し、１２１℃２０分相当の殺菌を行った。その茶抽出物を凍結乾燥にてパウダー化し、実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤を調製した。

（比較例１）
プーアル茶のみを用いた点以外は、実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤と同様の手順で、比較例１に係る中性脂肪蓄積抑制剤を調製した。

（比較例２）
ウーロン茶のみを用いた点以外は、実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤と同様の手順で、比較例２に係る中性脂肪蓄積抑制剤を調製した。

実施例、比較例１、２に係る中性脂肪蓄積抑制剤の凍結乾燥物の分析結果及び分析方法を以下の表１に示す。

（投与試験）
３週齢のＷｉｓｔａｒ系雄ラットを使用し、１週間の馴化後、通常脂肪食群（ｎ＝６）、高脂肪食群（ｎ＝６）、高脂肪食に比較例１に係る中性脂肪蓄積抑制剤を１．０％添加したものの群（ｎ＝６）、高脂肪食に比較例２に係る中性脂肪蓄積抑制剤を１．０％添加したものの群（ｎ＝６）、高脂肪食に実施例に係る中性脂肪蓄積抑制を１．０％添加したものの群（ｎ＝６）の５群に分け、８週間飼育した。なお、高脂肪食を摂取させた群には、全てペア−フェッドさせ、通常脂肪食群には、自由摂取させた。飼育終了後、肝臓重量を測定し、肝臓重量中の中性脂肪重量を測定した。投与の期間において、各ラットに摂取させた飼料の摂餌量及びＰＰ（ポリフェノール）量とカフェイン量を以下の表２に示し、肝臓中の中性脂肪重量を図１に示す。なお、表２、図１、後述する図２中の「実施例」は、高脂肪食に実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤を１．０％添加したものを摂取させたラットの群を示し、「比較例１」は、高脂肪食に比較例１に係る中性脂肪蓄積抑制剤を１．０％添加したものを摂取させたラットの群を示し、「比較例２」は、高脂肪食に比較例２に係る中性脂肪蓄積抑制剤を１．０％添加したものを摂取させたラットの群を示し、「対照例１」は、通常脂肪を摂取させたラットの群を示し、「対照例２」は、高脂肪食を摂取させたラットの群を示す。

図１から、比較例１及び２に係るラット群は、対照例２に係るラット群と中性脂肪重量に有意差がなかったのに対し、実施例に係るラット群は、対照例２に係るラット群より、有意に中性脂肪重量が低かった。これにより、プーアル茶とウーロン茶とを併用することによって、それぞれを単独で摂取するよりも中性脂肪重量の蓄積を抑制できることが示された。

（ＰＰＡＲαの発現量の分析）
上記投与試験に用いた各群におけるＰＰＡＲαの発現量の分析を行った。分析は、上記投与試験における飼育終了後の各群のラットを用いて、以下の方法で行った。

各群のラットの肝臓から総ＲＮＡを抽出し、それからｃＤＮＡを調製してｍＲＮＡ発現量の測定に用いた。測定は、定量ＰＣＲ法により行った。ｍＲＮＡの発現量は、ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ７０００ Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍを用いて、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ法にて、内部標準として用いたＧＡＰＤＨ（グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ）との相対比により求めた。使用したＰｒｉｍｅｒの配列を以下の表３に示す。

ＰＰＡＲαの発現量の分析結果を図２に示す。なお、図２中の「ａ」、「ｂ」、「ａｂ」の符号は、共通する符号が付されていないものの間において、有意に差があるものであることを示しており、すなわち、「ａ」、「ｂ」のそれぞれの符号を有するものの間において、有意に差があることを示す。

図２に示すとおり、実施例に係るラット群は、比較例１、２、対照例２に係るラット群より、ＰＰＡＲαの発現量が多かったことが示された。特に、実施例に係るラット群は、比較例２に係るラット群より、有意にＰＰＡＲαの発現量が多かったことが示された。これにより、プーアル茶とウーロン茶とを併用することによって、それぞれを単独で摂取するよりもＰＰＡＲαの発現量が増加することが示された。

ＰＰＡＲαとは、脂肪の燃焼を促進するタンパク質であることが知られている。そのため、図１と図２の結果より、プーアル茶とウーロン茶とを併用することによって、それぞれを単独で摂取するよりもＰＰＡＲαの発現量が増加するために、中性脂肪蓄積抑制効果が高いと考えられる。また、このように、プーアル茶とウーロン茶とを併用すると、高い中性脂肪蓄積抑制効果を得られるため、それぞれを単独で使用するよりも、低量で中性脂肪蓄積抑制効果を発揮できる。そのため、プーアル茶とウーロン茶とを併用すると、より中性脂肪蓄積抑制の効果を得るためにウーロン茶又はプーアル茶の多量摂取による香味の低下を抑制できることが示された。

（官能評価）
実施例、比較例１、２に係る中性脂肪蓄積抑制剤の、高温加熱殺菌の香味について、官能評価を行った。評価基準は、「〇」を「嗜好性が高い」とし、「△」を「嗜好性が高いとは言えないが飲めない味ではない」とし、「×」を「飲める味ではない」とし、また、それぞれについてより詳細な官能性を評価した。その結果を表４に示す。

実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤は、比較例１に係る中性脂肪蓄積抑制剤より、香味の評価が高かった。これにより、実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤は、プーアル茶単独と比較して、同等の量を摂取した場合に、プーアル茶独特の香りと、渋味のない苦い味わいを抑制できることが示された。また、ウーロン茶とプーアル茶を併用することにより、ウーロン茶の渋みとプーアル茶の香りが一体化して、従来ない新しい味を与えることができることが示された。

本発明は、中性脂肪蓄積抑制剤、及び中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法に関する。

ウーロン茶又はプーアル茶由来のポリフェノールやカテキン、カフェインは、中性脂肪の蓄積を抑制することが従来より知られており、ウーロン茶又はプーアル茶は、中性脂肪蓄積抑制剤として使用されている。

例えば、特許文献１には、ウーロン茶が、血中の中性脂肪の上昇を抑制することが記載されている。また、非特許文献１には、プーアル茶の摂取により、脂肪組織重量の減少が見られたことが記載されている。

国際公開第２００５−０７７３８４号パンフレット

ＫＵＡＮ−ＬＩ ＫＵＯ，ｅｔ．ａｌ， "Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｈｙｐｏｌｉｐｉｄｅｍｉｃ ａｎｄ Ｇｒｏｗｔｈ Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｏｏｌｏｎｇ， Ｂｌａｃｋ， Ｐｕ−ｅｒｈ， ａｎｄ Ｇｒｅｅｎ Ｔｅａ Ｌｅａｖｅｓ ｉｎ Ｒａｔｓ"， Ｊ． Ａｇｒｉｃ． Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ． ２００５；５３（２）， ｐ．４８０−４８９

ウーロン茶又はプーアル茶を用いて、中性脂肪蓄積抑制の高い効果を得ようとする場合、ウーロン茶又はプーアル茶を多量に摂取する必要がある。

しかしながら、ウーロン茶又はプーアル茶を多量に摂取すると、ウーロン茶又はプーアル茶の味が濃くなりすぎ、香味が低下するという問題が生じる。そのため、従来のウーロン茶又はプーアル茶と同等の量で、より優れた中性脂肪蓄積抑制効果を得られる茶が必要とされる。

本発明は、以上の実情に鑑みてなされたものであり、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも高い中性脂肪蓄積抑制効果を有する中性脂肪蓄積抑制剤、及び中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法を提供することを目的とする。

本発明者らは、ラットにウーロン茶とプーアル茶を併用して摂取させることで、中性脂肪蓄積抑制効果に優れることを見出し、本発明を完成するに至った。より具体的には、本発明は以下のようなものを提供する。

（１） プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物、及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含む中性脂肪蓄積抑制剤。

（２） 前記プーアル茶の茶葉又は前記プーアル茶抽出物、及び前記ウーロン茶の茶葉又は前記ウーロン茶抽出物が、１００℃以上で加熱殺菌されたものである、（１）記載の中性脂肪蓄積抑制剤。

（３） 前記プーアル茶抽出物、及び前記ウーロン茶抽出物の少なくともいずれか一方が、水によって抽出されたものである、（１）又は（２）に記載の中性脂肪蓄積抑制剤。

（４） プーアル茶及びウーロン茶のいずれか一方に他方を加えることによって、一方の中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法。

本発明によれば、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも高い中性脂肪蓄積抑制効果を有する中性脂肪蓄積抑制剤、及び中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法を提供することができる。

実施例、比較例１、２、対照例１、２に係るラットにおける中性脂肪量を示すグラフである。 実施例、比較例１、２、対照例２に係るラットにおけるＰＰＡＲαの発現量を示すグラフである。

以下、本発明の具体的な実施形態について詳細に説明するが、本発明は以下の実施形態に何ら限定されるものではなく、本発明の目的の範囲内において、適宜変更を加えて実施することができる。なお、説明が重複する箇所については、適宜説明を省略する場合があるが、発明の要旨を限定するものではない。

＜中性脂肪蓄積抑制剤＞
本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物、及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含む。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも、高い中性脂肪蓄積抑制効果を有する。その理由は、以下のとおりであると推察される。

本発明のプーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物、及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物によると、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも、ＰＰＡＲα（ペルオキシゾーム増殖剤応答性受容体-α）の発現を促進することができる。ここで、ＰＰＡＲαは、エネルギー消費や脂肪酸の酸化に関連した遺伝子の発現を促進することが知られており、特に、脂肪酸代謝において、アシルＣｏＡ酸化酵素等のβ酸化に関する遺伝子の発現を促進させ、脂肪燃焼を促進することが知られている。そのため、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも、中性脂肪蓄積抑制効果が高い。

また、より高い中性脂肪蓄積抑制効果を得ることを目的として、ウーロン茶又はプーアル茶を多量に摂取すると、茶由来の味が濃くなりすぎて香味が低下してしまう。本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、ウーロン茶又はプーアル茶をそれぞれ単独で摂取するよりも、中性脂肪蓄積抑制に優れるため、より低量で中性脂肪蓄積抑制効果を発揮でき、ウーロン茶又はプーアル茶の多量摂取による香味の低下を抑制できる。さらに、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、プーアル茶単独と比較して、同等の量を摂取した場合に、プーアル茶独特の香りと、渋味のない苦い味わいを抑制できる。また、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、ウーロン茶の渋みとプーアル茶の香りが一体化して、従来にない新しい味を与えることができる。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤に含まれるプーアル茶は、プーアル茶の茶葉、プーアル茶抽出物のいずれであってもよい。また、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤に含まれるウーロン茶は、ウーロン茶の茶葉、ウーロン茶抽出物のいずれであってもよい。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、プーアル茶とウーロン茶の含有量は特に限定されないが、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、プーアル茶抽出物中のプーアル茶に由来する成分の固形分含有量と、ウーロン茶抽出物中のプーアル茶に由来する成分の固形分含有量との比が、１：０．１〜１０であることが好ましく、１：０．２〜５であることがより好ましく、１：０．５〜２であることがさらに好ましく、１：０．８〜１．２５であることが最も好ましい。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、総カテキンの固形分含有量（ｗｔ％）は、特に限定されないが、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、総ポリフェノールの固形分含有量（ｗｔ％）に対する比で、０．０１〜２．０が好ましく、０．１〜１．０がより好ましく、０．２〜０．５がさらに好ましい。なお、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の総カテキン量は、ＨＰＬＣ分析により測定する。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、カフェインの固形分含有量（ｗｔ％）は、特に限定されないが、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、総ポリフェノールの固形分含有量（ｗｔ％）に対する比で、０．０１〜２．０が好ましく、０．０５〜１．０がより好ましく、０．２５〜０．４５がさらに好ましい。なお、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中のカフェイン量は、ＨＰＬＣ分析により測定する。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、タンニンの固形分含有量（ｗｔ％）は、特に限定されないが、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、総ポリフェノールの固形分含有量（ｗｔ％）に対する比で、０．２〜２．５が好ましく、０．４〜２．０がより好ましく、０．６〜１．３がさらに好ましく、０．９〜１．１が最も好ましい。なお、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中のタンニン量は、酒石酸鉄法で測定する。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、総ポリフェノールの固形分含有量は、特に限定されないが、量が多いほどＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、１０．０ｇ／１００ｇ以上が好ましく、１５．０ｇ／１００ｇ以上がより好ましく、２０．０ｇ／１００ｇ以上がさらに好ましい。一方、総ポリフェノールの固形分含有量が多すぎると、ウーロン茶、プーアル茶由来の味が濃くなりすぎ、香味が低下することから、総ポリフェノールの固形分含有量は、５０．０ｇ／１００ｇ以下が好ましく、４０．０ｇ／１００ｇ以下がより好ましく、３０．０ｇ／１００ｇ以下がさらに好ましい。なお、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の総ポリフェノール量は、フォーリンチオカルト法で測定する。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、総カテキンの固形分含有量は、特に限定されないが、量が多いほど、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、１．０ｇ／１００ｇ以上が好ましく、４．０ｇ／１００ｇ以上がより好ましく、８．０ｇ／１００ｇ以上がさらに好ましい。一方、総カテキンの固形分含有量が多すぎると、ウーロン茶、プーアル茶由来の味が濃くなりすぎ、香味が低下することから、総カテキンの固形分含有量は、２５．０ｇ／１００ｇ以下が好ましく、１７．０ｇ／１００ｇ以下がより好ましく、１２．０ｇ／１００ｇ以下がさらに好ましい。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、カフェインの固形分含有量は、特に限定されないが、量が多いほど、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、１．０ｇ／１００ｇ以上が好ましく、５．０ｇ／１００ｇ以上がより好ましく、７．０ｇ／１００ｇ以上がさらに好ましい。一方、カフェインの固形分含有量が多すぎると、ウーロン茶、プーアル茶由来の味が濃くなりすぎ、香味が低下することから、カフェインの固形分含有量は、３０．０ｇ／１００ｇ以下が好ましく、２０．０ｇ／１００ｇ以下がより好ましく、１０．０ｇ／１００ｇ以下がさらに好ましい。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤中の、タンニンの固形分含有量は、特に限定されないが、量が多いほど、ＰＰＡＲαの発現をより促進でき、高い中性脂肪蓄積抑制効果を奏することから、１０．０ｇ／１００ｇ以上が好ましく、２０．０ｇ／１００ｇ以上がより好ましく、２５．０ｇ／１００ｇ以上がさらに好ましい。一方、タンニンの固形分含有量が多すぎると、ウーロン茶、プーアル茶由来の味が濃くなりすぎ、香味が低下することから、タンニンの固形分含有量は、５０．０ｇ／１００ｇ以下が好ましく、４０．０ｇ／１００ｇ以下がより好ましく、３０．０ｇ／１００ｇ以下がさらに好ましい。

プーアル茶の茶葉、ウーロン茶の茶葉の形状は、どのような形状であってもよく、例えば、方形状、円形状等に裁断したものであってもよい。また、茶葉を粉砕して粒状に丸めて成形された粉末状の茶葉であってもよい。

プーアル茶抽出物、ウーロン茶抽出物は、従来の公知の方法により抽出することができる、例えば、プーアル茶の茶葉、ウーロン茶の茶葉を５０〜１００℃（好ましくは、６０〜９７℃、より好ましくは７０〜９５℃、さらに好ましくは、８０〜９３℃）、５〜２０分間、抽出することができる。

抽出に使用する溶媒は、特に限定されないが、水を用いた場合、茶中の総ポリフェノール、総カテキン、カフェイン、タンニンを効率良く抽出できることから、プーアル茶抽出物、及びウーロン茶抽出物の少なくともいずれか一方が水によって抽出されたものであるのが好ましく、これらの両方が水によって抽出されたものであるのがさらに好ましい。また、抽出溶媒は、水以外の溶媒であってもよく、例えば、エタノール、ヘキサン、イソプロピルアルコール、液化炭酸ガス等であってもよい。

また、上述の抽出液に、従来の公知の種々の成分を配合してもよい。そのような公知の成分としては、例えば、香料、酸味料（アスコルビン酸、無水クエン酸等）のほか、安定剤、増粘剤、乳化剤、ｐＨ調整剤（重曹等）を任意に使用できる。これら成分はどのように配合してもよく、例えば、溶媒に抽出物を抽出する前に配合してもよく、溶媒に抽出物を抽出した後に配合してもよい。

また、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物、及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物は、一般的に、加熱殺菌することで、それぞれの中に含まれるポリフェノールの構造が変わってしまうため、中性脂肪蓄積抑制効果が変化するおそれがある。しかし、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤においては、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物、及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含むことで、加熱殺菌されても、中性脂肪蓄積抑制に優れる。具体的には、１００℃以上で加熱殺菌されてもよく、１１０℃以上で加熱殺菌されてもよく、１２０℃以上で加熱殺菌されてもよい。また、加熱殺菌温度の上限は、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤が十分な中性脂肪蓄積抑制効果を奏する範囲内であれば、特に限定されないが、例えば、１５０℃以下であってもよい。

本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、どのような形態で使用してもよく、例えば、上記のプーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物、及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物をそのまま中性脂肪蓄積抑制として使用してもよい。あるいは、プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物、及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を製剤化したものであってもよい。製剤の形状は、錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の種々の形状であってもよく、また、液体状態であってもよい。あるいは、茶抽出物を粉末化し、凍結乾燥させた状態であってもよい。製剤化を行う場合、一般に使用される結合剤、包含剤、賦形剤、滑沢剤、崩壊剤、湿潤剤のような添加剤を含有してもよい。

また、本発明の中性脂肪蓄積抑制剤の投与方法は、特に限定されず、例えば、経口投与であっても、非経口投与であってもよい。本発明の中性脂肪蓄積抑制剤は、経口投与しても、プーアル茶又はウーロン茶単独で摂取するよりも、中性脂肪蓄積抑制に優れるため、香味が低下しにくいため、経口投与が好ましい。

＜中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法＞
本発明は、プーアル茶及びウーロン茶のいずれか一方に他方を加えることによって、一方の中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法を包含する。

本方法におけるプーアル茶及びウーロン茶は、いずれも液状のものであり、例えば、それぞれの茶抽出物を使用してもよい。あるいは、プーアル茶及びウーロン茶は、飲料として使用されるものであってもよく、飲料として使用される従来から公知の成分（例えば、香料、酸味料、安定剤、増粘剤、乳化剤、ｐＨ調整剤等）を含むものであってもよい。

（実施例）
プーアル茶の茶葉とウーロン茶の茶葉とを、茶葉重量として１：１となるように混合し、４０ｇ／Ｌとなるように９０℃１１分間抽出した。その抽出液にアスコルビン酸Ｎａ０．３ｇ／Ｌ、重曹０．１５ｇ／Ｌを添加し、１２１℃２０分相当の殺菌を行った。その茶抽出物を凍結乾燥にてパウダー化し、実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤を調製した。

（比較例１）
プーアル茶のみを用いた点以外は、実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤と同様の手順で、比較例１に係る中性脂肪蓄積抑制剤を調製した。

（比較例２）
ウーロン茶のみを用いた点以外は、実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤と同様の手順で、比較例２に係る中性脂肪蓄積抑制剤を調製した。

実施例、比較例１、２に係る中性脂肪蓄積抑制剤の凍結乾燥物の分析結果及び分析方法を以下の表１に示す。

（投与試験）
３週齢のＷｉｓｔａｒ系雄ラットを使用し、１週間の馴化後、通常脂肪食群（ｎ＝６）、高脂肪食群（ｎ＝６）、高脂肪食に比較例１に係る中性脂肪蓄積抑制剤を１．０％添加したものの群（ｎ＝６）、高脂肪食に比較例２に係る中性脂肪蓄積抑制剤を１．０％添加したものの群（ｎ＝６）、高脂肪食に実施例に係る中性脂肪蓄積抑制を１．０％添加したものの群（ｎ＝６）の５群に分け、８週間飼育した。なお、高脂肪食を摂取させた群には、全てペア−フェッドさせ、通常脂肪食群には、自由摂取させた。飼育終了後、肝臓重量を測定し、肝臓重量中の中性脂肪重量を測定した。投与の期間において、各ラットに摂取させた飼料の摂餌量及びＰＰ（ポリフェノール）量とカフェイン量を以下の表２に示し、肝臓中の中性脂肪重量を図１に示す。なお、表２、図１、後述する図２中の「実施例」は、高脂肪食に実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤を１．０％添加したものを摂取させたラットの群を示し、「比較例１」は、高脂肪食に比較例１に係る中性脂肪蓄積抑制剤を１．０％添加したものを摂取させたラットの群を示し、「比較例２」は、高脂肪食に比較例２に係る中性脂肪蓄積抑制剤を１．０％添加したものを摂取させたラットの群を示し、「対照例１」は、通常脂肪を摂取させたラットの群を示し、「対照例２」は、高脂肪食を摂取させたラットの群を示す。

図１から、比較例１及び２に係るラット群は、対照例２に係るラット群と中性脂肪重量に有意差がなかったのに対し、実施例に係るラット群は、対照例２に係るラット群より、有意に中性脂肪重量が低かった。これにより、プーアル茶とウーロン茶とを併用することによって、それぞれを単独で摂取するよりも中性脂肪重量の蓄積を抑制できることが示された。

（ＰＰＡＲαの発現量の分析）
上記投与試験に用いた各群におけるＰＰＡＲαの発現量の分析を行った。分析は、上記投与試験における飼育終了後の各群のラットを用いて、以下の方法で行った。

各群のラットの肝臓から総ＲＮＡを抽出し、それからｃＤＮＡを調製してｍＲＮＡ発現量の測定に用いた。測定は、定量ＰＣＲ法により行った。ｍＲＮＡの発現量は、ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ７０００ Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍを用いて、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ法にて、内部標準として用いたＧＡＰＤＨ（グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ）との相対比により求めた。使用したＰｒｉｍｅｒの配列を以下の表３に示す。

ＰＰＡＲαの発現量の分析結果を図２に示す。なお、図２中の「ａ」、「ｂ」、「ａｂ」の符号は、共通する符号が付されていないものの間において、有意に差があるものであることを示しており、すなわち、「ａ」、「ｂ」のそれぞれの符号を有するものの間において、有意に差があることを示す。

図２に示すとおり、実施例に係るラット群は、比較例１、２、対照例２に係るラット群より、ＰＰＡＲαの発現量が多かったことが示された。特に、実施例に係るラット群は、比較例２に係るラット群より、有意にＰＰＡＲαの発現量が多かったことが示された。これにより、プーアル茶とウーロン茶とを併用することによって、それぞれを単独で摂取するよりもＰＰＡＲαの発現量が増加することが示された。

ＰＰＡＲαとは、脂肪の燃焼を促進するタンパク質であることが知られている。そのため、図１と図２の結果より、プーアル茶とウーロン茶とを併用することによって、それぞれを単独で摂取するよりもＰＰＡＲαの発現量が増加するために、中性脂肪蓄積抑制効果が高いと考えられる。また、このように、プーアル茶とウーロン茶とを併用すると、高い中性脂肪蓄積抑制効果を得られるため、それぞれを単独で使用するよりも、低量で中性脂肪蓄積抑制効果を発揮できる。そのため、プーアル茶とウーロン茶とを併用すると、より中性脂肪蓄積抑制の効果を得るためにウーロン茶又はプーアル茶の多量摂取による香味の低下を抑制できることが示された。

（官能評価）
実施例、比較例１、２に係る中性脂肪蓄積抑制剤の、高温加熱殺菌の香味について、官能評価を行った。評価基準は、「〇」を「嗜好性が高い」とし、「△」を「嗜好性が高いとは言えないが飲めない味ではない」とし、「×」を「飲める味ではない」とし、また、それぞれについてより詳細な官能性を評価した。その結果を表４に示す。

実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤は、比較例１に係る中性脂肪蓄積抑制剤より、香味の評価が高かった。これにより、実施例に係る中性脂肪蓄積抑制剤は、プーアル茶単独と比較して、同等の量を摂取した場合に、プーアル茶独特の香りと、渋味のない苦い味わいを抑制できることが示された。また、ウーロン茶とプーアル茶を併用することにより、ウーロン茶の渋みとプーアル茶の香りが一体化して、従来ない新しい味を与えることができることが示された。

Claims (7)

1. プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含む中性脂肪蓄積抑制剤。
2. 前記プーアル茶の茶葉又は前記プーアル茶抽出物及び前記ウーロン茶の茶葉又は前記ウーロン茶抽出物が、１００℃以上で加熱殺菌されたものである、請求項１記載の中性脂肪蓄積抑制剤。
3. 前記プーアル茶抽出物及び前記ウーロン茶抽出物の少なくともいずれか一方が、水によって抽出されたものである、請求項１又は２に記載の中性脂肪蓄積抑制剤。
4. プーアル茶の茶葉又はプーアル茶抽出物及びウーロン茶の茶葉又はウーロン茶抽出物を含むＰＰＡＲα発現促進剤。
5. 前記プーアル茶の茶葉又は前記プーアル茶抽出物及び前記ウーロン茶の茶葉又は前記ウーロン茶抽出物が、１００℃以上で加熱殺菌されたものである、請求項４記載のＰＰＡＲα発現促進剤。
6. 前記プーアル茶抽出物及び前記ウーロン茶抽出物の少なくともいずれか一方が、水によって抽出されたものである、請求項４又は５に記載のＰＰＡＲα発現促進剤。
7. プーアル茶及びウーロン茶のいずれか一方に他方を加えることによって、一方の中性脂肪蓄積抑制作用を向上する方法。

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