JP2012501328A

JP2012501328A - Ｃｒｔｈ２アンタゴニストとしての同位体富化されたピリミジン−５−イル酢酸誘導体

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Publication number: JP2012501328A
Application number: JP2011525017A
Authority: JP
Inventors: ウエイリタイ
Original assignee: アクチミスファーマシューティカルズインコーポレーテッド
Priority date: 2008-09-02
Filing date: 2009-09-01
Publication date: 2012-01-19
Anticipated expiration: 2029-09-01
Also published as: EP2328876A1; JP5586606B2; WO2010027448A1; US8541419B2; WO2010027448A8; CA2735722A1; EP2328876B1; US20110172250A1

Abstract

本明細書で提供されるのは、式(I)又は(II)の²H-及び¹³C-富化化合物である;式中、Rは、本明細書で定義される通りであり、少なくとも1つの水素原子、ある種の実施態様では3個又はそれ以上の水素原子は、重水素原子である、又は、少なくとも1つの炭素原子は炭素-13原子である。例えば喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性結膜炎、チャーグ・ストラウス症候群、副鼻腔炎、好塩基球性白血病、慢性蕁麻疹、又は好塩基球性白血球増加症などのCRTH2関連の疾患又は障害を治療するのに有用な²H-及び¹³C-富化化合物を使用する医薬組成物及び方法も提供される。
【化１】

【選択図】なし

Description

(優先権の主張)
2008年9月2日に出願された「CRTH2アンタゴニストとしての同位体富化されたピリミジン-5-イル酢酸誘導体(Isotopically Enriched Pyrimidin-5-yl Acetic Acid Derivatives as CRTH2 Antagonists)」というタイトルの米国仮特許出願第61/190,870号に対する優先権を、本明細書で主張する。上で述べた出願は、その内容全体を、参照によって本明細書に組み込む。

本明細書では、例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性結膜炎(allergic conjuvatitis)、チャーグ・ストラウス症候群、副鼻腔炎、好塩基球性白血病、慢性蕁麻疹、又は好塩基球性白血球増加症などの疾患又は障害の治療に有用な、CRTH2(Th2細胞上に発現される、G-タンパク質共役型の化学誘引物質受容体)拮抗活性を有する²H-及び¹³C-富化されたピリミジン-5-イル酢酸誘導体が提供される。

(背景)
CRTH2は、プロスタグランジンD₂(PGD₂)の効果を仲介する、Th2細胞、好酸球、及び好塩基球上に発現されるG-タンパク質共役型受容体である。CRTH2は、喘息、運動誘発喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性結膜炎などのアレルギー性疾患、並びにチャーグ・ストラウス症候群、副鼻腔炎、好塩基球性白血病、慢性蕁麻疹、及び好塩基球性白血球増加症、を含めたある種の疾患の治療標的である。国際特許出願公開WO 2004/096777(2004年11月11日に公開)に、又はWO 2005/073234(2005年8月11日に公開)に記載されるものを含めたピリミジン-5-イル酢酸誘導体は、CRTH2の有効なアンタゴニストであり、CRTH2関連の疾患又は障害の治療に使用するための有望な候補である。限定はされないが、ピリミジン-5-イル酢酸誘導体の薬理学的有効寿命の延長、及び/又はインビボでの代謝障害(metabolic liability)の低下を含めた、治療薬の改善が求められている。

(概要)
一態様では、本明細書では、式I又はIIの同位体富化された化合物、或いは医薬として許容し得るその塩が提供される:

式中、Rは、水素;C_1〜6アルキル;C_1〜6アルキルによって任意に置換されたC_3〜8シクロアルキル;又はハロゲン、モノ-、ジ-、又はトリ-ハロゲンで任意に置換されたC_1〜4アルキル、及びC_1〜4アルコキシから選択される1〜4個の置換基で任意に置換されたフェニル;であり、ここでは、1以上の水素原子は、重水素原子によって置き換えられる、又は1以上の炭素原子は、炭素-13原子によって置き換えられる。

ある実施態様では、提供される化合物は、式III又はIVである:

式中、各Y原子は、水素原子又は重水素原子であり;各X原子は、炭素-12原子又は炭素-13原子であり、ここでは、少なくとも1つのY原子が重水素である、又は少なくとも1つのX原子が炭素-13原子である。ある種の実施態様では、少なくとも1、2、3、4、5、6、もしくはそれ以上、又はすべてのY原子が重水素である。他の実施態様では、少なくとも1、2、3、4、5、6、7、もしくはそれ以上、又はすべてのX原子が炭素-13原子である。

ある実施態様では、本明細書で提供される化合物は、式V又はVIである:

式中、各Y原子は、水素又は重水素であり、かつ少なくとも1つのY原子は重水素である。

ある種の実施態様では、本明細書で提供されるのは、式I〜VIのいずれか1つに記載の²H-及び/又は¹³C-同位体富化された酸化合物と、医薬として許容し得るアミンとを含むアミン塩である。

ある実施態様では、アミン塩は結晶性である。

別の態様では、本明細書で提供されるのは、本発明開示の化合物と、医薬として許容し得る賦形剤とを含む医薬組成物である。

さらに別の態様では、本明細書で提供されるのは、CRTH2関連の疾患又は障害を、治療の必要のある対象において治療する方法である。こうした方法は、本発明開示の有効量の化合物を、投与の必要のある対象に投与することを含む。ある実施態様では、CRTH2関連の疾患又は障害は、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性結膜炎、チャーグ・ストラウス症候群、副鼻腔炎、好塩基球性白血病、慢性蕁麻疹、又は好塩基球性白血球増加症である。

一態様では、本明細書で提供されるのは、CRTH2関連の疾患又は障害を治療するための医薬品の調製に使用するための、本発明開示の化合物である。ある実施態様では、CRTH2関連の疾患又は障害は、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性結膜炎、チャーグ・ストラウス症候群、副鼻腔炎、好塩基球性白血病、慢性蕁麻疹、又は好塩基球性白血球増加症である。

一態様では、本明細書で提供されるのは、CRTH2の活性を調節する方法であって、本発明開示の化合物を、CRTH2活性をアンタゴナイズするのに有効な量で、投与の必要のある対象に投与することを含む前記方法である。

別の態様では、本明細書で提供されるのは、その内容全体がそれぞれ、あらゆる目的のために、参照により本明細書に組み込まれる、WO 2004/096777(2004年11月11日に公開)に、又はWO 2005/073234(2005年8月11日に公開)に記載されている通りの化合物の²H-及び/又は¹³C-富化アイソトポローグ(isotopologue)(ここでは、少なくとも1つの水素原子が重水素原子によって置き換えられる、又は、少なくとも1つの炭素原子が炭素-13原子によって置き換えられる、又は、少なくとも1つの水素原子が重水素原子によって置き換えられ、かつ少なくとも1つの炭素原子が炭素-13原子によって置き換えられる)である。

別の態様では、本明細書で提供されるのは、その内容全体が、あらゆる目的のために、参照により本明細書に組み込まれる2007年6月21日に出願された米国仮出願第60/936,736号に記載されている通りのアミン塩化合物の²H-及び/又は¹³C-富化アイソトポローグ(ここでは、少なくとも1つの水素原子が重水素原子によって置き換えられる、又は、少なくとも1つの炭素原子が炭素-13原子によって置き換えられる、又は、少なくとも1つの水素原子が重水素原子によって置き換えられ、かつ1つの炭素原子が炭素-13原子によって置き換えられる)である。こうした²H-及び/又は¹³C-富化アイソトポローグを使用する医薬組成物及び方法は、本明細書に提供される。

(詳細な説明)
(用語)
別段の定義のない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語は、この開示が属する分野の当業者によって普通に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書で、ある用語について複数の定義が存在する場合には、別段の記述のない限り、この節の用語が優先される。

本明細書では、アルキルそれ自体、及び、アルコキシ又はアルキルアミノなどの組み合わせで使用される「アルコ(alk)」及び「アルキル」は、他に指定がなければ、1から6個の炭素原子を有する、直鎖又は分枝のアルキルラジカルを表す。アルキル基における炭素原子の数は、例えば「C_1〜4アルキル」(この例では、これは、1から4個の炭素原子を有するアルキルラジカルを表す)などの用語によって指定される。例示的なアルキル基としては、例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、tert-ブチル、n-ペンチル、及びn-ヘキシルが挙げられる。

「アルコキシ」は、本明細書では、Rが上で定義した通りである-ORを表す。例示的なアルコキシ基としては、例えば、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ、n-ペントキシ、及びn-ヘキソキシが挙げられる。

「シクロアルキル」は、本明細書では、他に指定がなければ、3から8個の炭素原子を有する、飽和した環状アルキル基を表す。例示的なシクロアルキル基としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びシクロヘプチルが挙げられる。

本明細書に列挙される「アルキル」、「アルコキシ」、及び「シクロアルキル」基は、1以上の重水素原子(ここでは、この1つ又は複数の原子の重水素組成は、天然の同位体組成ではない)で任意に置換される。

本明細書に列挙される「アルキル」、「アルコキシ」、及び「シクロアルキル」基の炭素原子は、炭素原子について天然の同位体組成よりも多い量の炭素-13を任意に含む。

本明細書では、「ハロ」、「ハロゲン」、又は「ハロゲン化物」は、F、Cl、Br、又はIを指す。

別段の記述のない限り、「H」又は「水素」と示される場合、又は、本明細書で提供される化学構造中のある位置が、暗黙のうちに水素原子によって占められる場合、その位置は、天然の同位体組成の水素を有するものと理解されよう。

別段の記述のない限り、ある位置が「C」又は「炭素」と示される場合、又は、本明細書で提供される化学構造中のある位置が炭素原子であると当業者に理解される場合、その位置は、天然の同位体組成の炭素を有するものと理解されよう。

「²H」と「D」は両方とも、重水素を指す。

本明細書では、「同位体組成」は、所与の原子に関する、存在する各同位体の量を指す。「天然の同位体組成」は、所与の原子に関する、天然に存在する同位体組成を意味する。別段の指示のない限り、本明細書に列挙される化合物の原子は、その原子の安定な同位体を表す。

合成された化合物では、合成に使用される化学材料の起源に応じて、天然の同位体存在度の若干の変化が生じるということが認識されるであろう。したがって、通常、ある化合物のいずれの調製物も、少量の重水素化及び/又は¹³C含有アイソトポローグを本質的に含有することとなる。この変化にもかかわらず、天然に豊富な安定な水素及び炭素同位体の濃度は、本明細書で提供される化合物の安定な同位体置換の程度と比べると、小さく、取るに足らない。

本明細書では、「同位体富化された」は、その原子の天然の同位体組成ではない同位体組成を有する原子を指す。「同位体富化された」はまた、その原子の天然の同位体組成ではない同位体組成を有する少なくとも1つの原子を含有する化合物を指す可能性もある。例えば、本明細書で提供される化合物では、ある位置が重水素を有すると示される場合、その位置での重水素の存在度が、約0.015%である重水素の天然の存在度よりも実質的に大きいことが理解されよう。本明細書で提供される化合物では、ある位置が炭素-13(¹³Cとも呼ばれる)を有すると示される場合、その位置での炭素-13の存在度が、約1.109%である炭素-13の天然の存在度よりも実質的に大きいことが理解されよう。したがって、「同位体富化」は、原子の天然の同位体存在度の代わりに、分子中の所与の原子での、ある量の特定の同位体の組み込みの割合に関して表すことができる。例えば、所与の位置での1%の重水素富化とは、特定の位置で、所与のサンプル中の1%の分子が、重水素を含有していることを意味する。

用語「同位体富化係数」は、本明細書では、特定の同位体の、同位体存在度と天然の存在度との比を意味する。

重水素を有すると示される、本明細書で提供される化合物は、通常、化合物中に示される各原子における最小同位体富化係数が、少なくとも3000(45%の重水素富化)である。他の実施態様では、本明細書で提供される化合物は、各々の指定される重水素原子について、同位体富化係数が、少なくとも3500(52.5%重水素富化)、少なくとも4000(60%重水素富化)、少なくとも4500(67.5%重水素富化)、少なくとも5000(75%重水素富化)、少なくとも5500(82.5%重水素富化)、少なくとも6000(90%重水素富化)、少なくとも6333.3(95%重水素富化)、少なくとも6466.7(97%重水素富化)、少なくとも6600(99%重水素富化)、又は少なくとも6633.3(99.5%重水素富化)である。

炭素-13を有すると示される、本明細書で提供される化合物は、通常、化合物中に示される各原子における最小同位体富化係数が、少なくとも40(44.4% ¹³C富化)である。他の実施態様では、本明細書で提供される化合物は、各々の指定される炭素-13原子について、同位体富化係数が、少なくとも45(50% ¹³C富化)、少なくとも54.1(60% ¹³C富化)、少なくとも60.9(67.5% ¹³C富化)、少なくとも67.6(75% ¹³C富化)、少なくとも74.4(82.5% ¹³C富化)、少なくとも81.1(90% ¹³C富化)、少なくとも85.7(95% ¹³C富化)、少なくとも87.5(97% ¹³C富化)、少なくとも89.3(99% ¹³C富化)、又は少なくとも89.7(99.5% ¹³C富化)である。

本明細書で提供される化合物の同位体富化は、質量分析法及び磁気共鳴法を含めた、当業者に知られている従来の分析方法を使用して決定することができる。

用語「アイソトポローグ」は、本明細書では、所与の別の種の化合物とは同位体組成のみが異なる特定の化合物の種を指す。

用語「化合物」は、本明細書では、その化合物のいずれの塩、又は水和物を含めた溶媒和化合物も含むものとする。

用語「医薬として許容し得る」は、本明細書では、医薬組成物の他の成分と適合性があり、かつ、妥当なベネフィット/リスク比に見合い、過度の毒性、刺激性、アレルギー反応、免疫原性、又は他の合併症を伴わずに、対象の組織と接触して使用するのに適した成分を指す。

本明細書では、用語「溶媒和化合物」は、非共有結合的分子間力によって結合された、水、アセトン、エタノール、メタノール、ジクロロメタン、2-プロパノールなどの化学量論的又は非化学量論量的溶媒をさらに含む化合物を意味する。用語「水和物」は、溶媒が水である場合に用いられる。医薬として許容し得る溶媒和化合物及び水和物は、化合物と、1以上の溶媒又は水分子、或いは1から約100、又は1から約10、又は1から約2、3、もしくは4個の溶媒又は水分子との複合体である。

本明細書で提供される化合物の塩は、化合物の塩基性基(例えばアミノ官能基など)と酸との間に、又は、化合物の酸性基(例えばカルボキシル官能基など)と塩基との間に形成される。

本明細書で提供される化合物の塩としては、それだけには限らないが、アミン塩(それだけには限らないが、N,N'-ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、アンモニア、ジエタノールアミン及び他のヒドロキシアルキルアミン、エチレンジアミン、N-メチルグルカミン、プロカイン、N-ベンジルフェネチルアミン、1-パラ-クロロベンジル-2-ピロリジン-1'-イルメチル-ベンズイミダゾール、ジエチルアミン及び他のアルキルアミン、ピペラジン、及びトリス(ヒドロキシメチル)アミノメタンなど);アルカリ金属塩(それだけには限らないが、リチウム、カリウム、及びナトリウムなど);アルカリ土類金属塩(それだけには限らないが、バリウム、カルシウム、及びマグネシウムなど);遷移金属塩(それだけには限らないが、亜鉛など);並びに他の金属塩(それだけには限らないが、リン酸水素ナトリウム及びリン酸二ナトリウムなど);並びに、それだけには限らないが、無機酸の塩(それだけには限らないが、塩酸塩及び硫酸塩など)や有機酸の塩(それだけには限らないが、酢酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、酪酸塩、吉草酸塩、及びフマル酸塩など)を含めた塩;が挙げられる。

適切な酸塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。例としては、それだけには限らないが、酢酸塩、アジピン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、炭酸水素塩/炭酸塩、重硫酸塩/硫酸塩、ホウ酸塩、カンシル酸塩、クエン酸塩、シクラミン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩(esylate)、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、塩酸塩/塩化物、臭化水素酸塩/臭化物、ヨウ化水素酸塩/ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフチル酸塩(naphthylate)、2-ナプシル酸塩(napsylate)、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロト酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩/リン酸水素/リン酸二水素、ピログルタミン酸塩、サッカリン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、トリフルオロ酢酸塩、及びキシノホ酸塩(xinofoate)が挙げられる。

適切な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。例としては、それだけには限らないが、アルミニウム塩、アルギニン塩、ベンザチン塩、カルシウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、ジオールアミン塩、グリシン塩、リジン塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、オラミン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、トロメタミン塩、及び亜鉛塩が挙げられる。

適切な塩に関する概説については、「医薬塩のハンドブック:性質、選択、及び使用(Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties, Selection, and Use)」、Stahl及びWermuth(編)、Verlag Helvetica Chimica Acta/Wiley-VCH, Zurich 2002を参照されたい。

「対象」は、本明細書では、例えばイヌ、ネコ、マウス、ラット、ウサギ、又はヒトなどの哺乳類を含めた動物を指す。

本明細書では、用語「治療する」、「治療すること」、及び「治療」は、疾患又は障害の1以上の症状の改善又は有益な変化を指す。

用語「治療有効量」は、投与された場合に、治療される疾患もしくは障害の1以上の症状を改善する、又は別様式で有益に変化させるのに十分な化合物の量を指す。用語「治療有効量」はまた、研究者、獣医師、医師、又は臨床医によって探求される、細胞、組織、系、動物、又はヒトの生物学的又は医学的応答を誘発するのに十分な化合物の量を指す。

本明細書では、「IC₅₀」は、CRTH2活性の調節などの最大応答の50%阻害を、こうした応答を測定するアッセイにおいて実現するような、ある特定の試験化合物の量、濃度、又は投薬量を指す。

本明細書では、「実質的に純粋な」は、こうした純度を評価するために当業者によって使用される、薄層クロマトグラフィー(TLC)、ゲル電気泳動、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)、赤外分光法(IR)、ガスクロマトグラフィー(GC)、紫外分光法(UV)、核磁気共鳴(NMR)、及び質量分析法(MS)などの分析の標準方法によって決定される限りは、容易に検出可能な不純物を含まないように見えるほど十分に均質である、或いは、物質の酵素的及び生物学的活性などの物理及び化学的特性が、さらに精製を行っても、検出可能な程度に変化しないであろう程度に十分に純粋であることを意味する。ある種の実施態様では、「実質的に純粋な」は、標準の分析方法によって決定される場合に、少なくとも約50%、少なくとも約70%、少なくとも約80%、少なくとも約90%、少なくとも約95%、少なくとも約98%、少なくとも約99%、又は少なくとも約99.5%の分子が単一の化合物である、或いは、単一のアイソトポローグ(そのラセミ混合物又は単一の立体異性体を含めて)であるような分子の集合を指す。実質的に化学的に純粋な化合物を生成するための化合物の精製方法は、当業者に知られている。しかし、実質的に化学的に純粋な化合物は、立体異性体の混合物であり得る。こうした場合には、さらなる精製によって、特定の活性の化合物を増大できるであろう。

(実施態様)
本明細書で提供されるのは、CRTH2活性の調節に有用な化合物、組成物、及び方法である。本明細書で提供される化合物は、重水素又は炭素-13について同位体富化されており、この化合物は、哺乳類のCRTH2タンパク質の少なくとも1つの機能を阻害し、かつ、例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性結膜炎、チャーグ・ストラウス症候群、副鼻腔炎、好塩基球性白血病、慢性蕁麻疹、又は好塩基球性白血球増加症などの疾患又は障害の治療に対する有用性を有する。本明細書で提供される化合物の、CRTH2タンパク質の機能を阻害する能力は、結合アッセイ(例えば、リガンド結合又はアゴニスト結合)、シグナル伝達アッセイ(例えば、G-タンパク質の活性化又はカルシウム動員)、細胞応答アッセイ(例えば、好酸球遊走又はCD4+T細胞遊走)、及び/又は生理反応アッセイ(例えば、接触過敏症動物モデル)で実証することができる。例示的なアッセイ、並びに、こうしたアッセイにおける、本明細書で提供される例示的な化合物及びアミン塩の同位体富化されていないアイソトポローグの代表的な活性は、国際特許出願公開WO 2004/096777及びWO 2005/073234に、また、2007年6月21日に出願された米国仮出願第60/936,736号(その内容全体を、あらゆる目的のために、参照により本明細書に組み込む)に記載されている。

いずれの理論や機構にも制限されることを意図しないが、本明細書で提供される化合物における、水素又は炭素よりも原子質量が大きい重水素又は炭素-13は、こうした化合物の所望の薬理学的効果を損なわずに、こうした化合物が代謝される速度を低下させることができ、その結果、対象へのこうした化合物の1クールの投与に必要とされる用量が低く又は少なくなると考えられる。

(化合物)
一態様では、本明細書で提供されるのは、式I又はIIの同位体富化された化合物である:

式中、Rは、以下で定義され、ここでは、式I又はII中の1以上の水素原子は、重水素原子によって置き換えられる、或いは式I又はII中の1以上の炭素原子は、炭素-13原子によって置き換えられる。ある種の実施態様では、該化合物は、重水素について同位体富化される。他の実施態様では、該化合物は、炭素-13について同位体富化される。さらに他の実施態様では、該化合物は、重水素及び炭素-13について同位体富化される。

式I及びIIでは、Rは、水素;C_1〜6アルキル;C_1〜6アルキルによって任意に置換されたC_3〜8シクロアルキル;又はハロゲン、モノ-、ジ-、又はトリ-ハロゲンで任意に置換されたC_1〜4アルキル、及びC_1〜4アルコキシから選択される1〜4個の置換基で任意に置換されたフェニル;であり、ここでは、任意の水素は、重水素原子によって任意に置き換えられる、又は任意の炭素原子は、炭素-13原子によって任意に置き換えられる。ある種の実施態様では、Rは、置換されたフェニルである。

ある種の実施態様では、提供される化合物は、各水素が重水素原子によって置き換えられた式Iの化合物である。

ある種の実施態様では、提供される化合物は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、又はそれ以上の水素が重水素によって置き換えられた式Iの化合物である。

ある種の実施態様では、提供される化合物は、各水素が重水素原子によって置き換えられた式IIの化合物である。

ある種の実施態様では、提供される化合物は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、又はそれ以上の水素が重水素によって置き換えられた式IIの化合物である。

水素が所与の位置で重水素と置き換えられる上の実施態様では、重水素の同位体富化係数は、その位置で一般に少なくとも3000である。

ある種の実施態様では、提供される化合物は、1、2、3、4、5、6、7、8、又はそれ以上の炭素が炭素-13によって置き換えられた式Iの化合物である。

ある種の実施態様では、提供される化合物は、1、2、3、4、5、6、7、8、又はそれ以上の炭素が炭素-13によって置き換えられた式IIの化合物である。

炭素が所与の位置で炭素-13と置き換えられる上の実施態様では、炭素-13の同位体富化係数は、その位置で一般に少なくとも40である。

さらなる実施態様では、本明細書で提供されるのは、式III又はIVの化合物である:

式中、各Y原子は、水素原子又は重水素原子であり;各X原子は、炭素原子又は炭素-13原子であり、ここでは、少なくとも1つのYが重水素である、又は少なくとも1つのXが炭素-13原子である。式III又はIV中には、XともYとも示されない水素又は炭素はいずれも、その天然の同位体存在度で存在することが理解されよう。

ある種の実施態様では、提供される化合物は、各Yが重水素原子である式IIIの化合物である。ある実施態様では、少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、又は17個のY原子が重水素である。

ある種の実施態様では、提供される化合物は、各Yが重水素原子である式IVの化合物である。ある実施態様では、少なくとも1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、又は11個のY原子が重水素である。

ある実施態様では、提供される化合物は、各Xが炭素-13である式IIIの化合物である。ある実施態様では、1、2、3、4、5、6、又は7個のX原子が炭素-13である。

他の実施態様では、提供される化合物は、各Xが炭素-13である式IVの化合物である。ある実施態様では、1、2、3、4、5、又は6個のX原子が炭素-13である。

所与のY原子が重水素である式III又はIVのある種の実施態様では、重水素の同位体富化係数は、その位置で少なくとも3000である。

所与のX原子が炭素-13である式III又はIVのある実施態様では、炭素-13の同位体富化係数は、その位置で少なくとも40である。

さらに他の実施態様では、本明細書で提供される化合物は、式V又はVIの化合物である:

さらに他の実施態様では、本明細書で提供される化合物は、以下からなる群から選択される。

他の実施態様では、本明細書で提供される化合物は、以下からなる群から選択される。

ある種の実施態様では、本明細書で提供されるのは、²H-又は¹³C-同位体富化された{4,6-ビス(ジメチルアミノ)-2-(4-(4-(トリフルオロメチル)ベンズアミド)ベンジル)ピリミジン-5-イル}酢酸、又は²H-又は¹³C-同位体富化された{4,6-ビス(ジメチルアミノ)-2-(4-(4-(トリフルオロメチル)ベンズアミド)ベンジル)ピリミジン-5-イル}酢酸のアミン塩である。

ある種の実施態様では、本明細書で提供されるのは、式I〜VIのうちのいずれか1つの化合物の医薬として許容し得る塩である。

ある種の実施態様では、本明細書で提供されるのは、式I〜VIのうちのいずれか1つに記載の²H-及び/又は¹³C-同位体富化された酸化合物と、医薬として許容し得るアミンとを含むアミン塩である。アミンに対する、式I〜VIのうちのいずれか1つの酸のモル比は、約0.5から約10、約0.5から約5、約0.5から約3、約0.5から約2、又は約0.8から約1.2、又は約1である。本明細書で提供されるアミン塩に使用するのに適したアミンとしては、それだけには限らないが、メチルアミン、エチルアミン、エタノールアミン、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン、及びエチレンジアミンを含めた第一級アミン;ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ジブチルアミン、ジ-sec-ブチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジエタノールアミン、メグルミン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、及びベンザチンを含めた第二級アミン;トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリエタノールアミン、及び1-(2-ヒドロキシエチル)-ピロリジンを含めた第三級アミン;コリン、テトラ-メチルアンモニウム、及びテトラエチルアンモニウムを含めた第四級アンモニウムが挙げられる。さらなるアミンに関する概説については、Stahl及びWermuthによる「医薬塩のハンドブック:性質、選択、及び使用(Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties, Selection, and Use)」(Wiley-VCH、2002)を参照されたい。ある実施態様では、アミン塩におけるアミンは、エタノールアミン、トリエチルアミン、及びトリス(ヒドロキシ-メチル)アミノメタンではない。

別の実施態様では、医薬として許容し得るアミンは、ジアミンである。この医薬として許容し得るジアミンは、各々が独立に、第一級、第二級、もしくは第三級アミノ基、又は第四級アンモニウム基である、第1のアミノ基と第2のアミノ基を有する。ジアミン塩に使用するのに適したジアミンとしては、それだけには限らないが、エチレンジアミン、ピペラジン、及びベンザチンが挙げられる。式I〜VIのうちのいずれか1つの酢酸のジアミン塩は、1モル当量のジアミンに対して、約1から約3、約1.5から約2.5、約1.75から約2.25、又は約2モル当量の、式I〜VIのうちのいずれか1つの酸を含む。この実施態様の、ある群のジアミン塩では、ジアミンの第1のアミノ基は、第一級アミノ基であり、第2のアミノ基は独立に、第一級、第二級、もしくは第三級アミノ基、又は第四級アンモニウムである。別の群のジアミン塩では、第1のアミノ基は独立に、第二級アミノ基であり、第2のアミノ基は、第一級、第二級、もしくは第三級アミノ基、又は第四級アンモニウムである。ジアミン塩のさらに別の群では、第1のアミノ基は独立に、第三級アミノ基であり、第2のアミノ基は、第一級、第二級、もしくは第三級アミノ基、又は第四級アンモニウムである。ジアミン塩のさらに別の群では、第1のアミノ基は、第四級アンモニウムであり、第2のアミノ基は独立に、第一級、第二級、もしくは第三級アミノ基、又は第四級アンモニウムである。

さらに他の実施態様では、アミン塩は、式I〜VIのうちのいずれか1つに記載の²H-及び/又は¹³C-同位体富化された酸化合物と、モノアミンとを含む。これらの実施態様内の例示的な群では、モノアミン塩は、1モル当量のモノアミンに対して、約0.5から約1.5、約0.75から約1.25、又は約1モル当量の、式I〜VIのうちのいずれか1つに記載の酸を含む。

これらの実施態様の、ある群のモノアミン塩では、モノアミン塩のモノアミンは、第一級アミノ基を有する。別の群のモノアミン塩では、モノアミンは、第二級アミノ基を有する。モノアミン塩のさらに別の群では、モノアミンは、第三級アミノ基を有する。モノアミン塩のさらに別の群では、モノアミンは、第四級アンモニウム基を有する。

別の態様では、本明細書で提供されるのは、その内容全体がそれぞれ、あらゆる目的のために、参照により本明細書に組み込まれる、WO 2004/096777(2004年11月11日に公開)に、又はWO 2005/073234(2005年8月11日に公開)に記載されている通りの化合物の²H-及び/又は¹³C-富化アイソトポローグ(ここでは、少なくとも1つの水素原子が重水素原子によって置き換えられる、又は、少なくとも1つの炭素原子が炭素-13原子によって置き換えられる、又は、少なくとも1つの水素原子が重水素原子によって置き換えられ、かつ少なくとも1つの炭素原子が炭素-13原子によって置き換えられる)である。

別の態様では、本明細書で提供されるのは、その内容全体が、あらゆる目的のために、参照により本明細書に組み込まれる、2007年6月21日に出願された米国仮出願第60/936,736号に記載されている通りのアミン塩化合物の²H-及び/又は¹³C-富化アイソトポローグ(ここでは、少なくとも1つの水素原子が重水素原子によって置き換えられる、又は、少なくとも1つの炭素原子が炭素-13原子によって置き換えられる、又は、少なくとも1つの水素原子が重水素原子によって置き換えられ、かつ1つの炭素原子が炭素-13原子によって置き換えられる)である。

本明細書で提供される化合物はまた、エステルを含めたプロドラッグの形で使用することができる。カルボキシル基を含有する化合物のプロドラッグとして有用なこうしたエステルの例は、参照により本明細書に組み込まれる「薬剤設計におけるバイオリバーシブルキャリア:理論と応用(Bioreversible Carriers in Drug Design: Theory and Application)」、E.B. Roche編(Pergamon Press、New York、1987)の14〜21ページに出ている。代表的なカルボキシ保護基は、C_1〜8アルキル(例えば、メチル、エチル、又はtert-ブチルなど);ハロアルキル;アルケニル;シクロアルキルアルキル及び置換されたその誘導体(シクロヘキシルメチル、シルコペンチルメチル(cylcopentylmethyl)など);アリールアルキル、例えば、フェネチル又はベンジル及びその置換された誘導体(アルコキシベンジル基など);アリールアルケニル、例えば、フェニルエチニルなど;アリール及び置換されたその誘導体、例えば、5-インダニルなど;ジアルキルアミノアルキル(例えば、ジメチルアミノエチルなど);アルカノイルオキシアルキル基(アセトキシメチル、ブチリル-オキシメチル、バレリルオキシメチル、イソブチリルオキシメチル、イソバレリルオキシメチル、1-(プロピオニルオキシ)-1-エチル、1-(ピバロイルオキシル)-1-エチル、1-メチル-1-(プロピオニルオキシ)-1-エチル、ピバロイルオキシメチル、プロピオニル-オキシメチルなど);シクロアルカノイルオキシアルキル基(シクロプロピルカルボニルオキシメチル、シクロブチルカルボニルオキシメチル、シクロペンチルカルボニルオキシメチル、シクロヘキシルカルボニルオキシメチルなど);アロイルオキシアルキル(ベンゾイルオキシメチル、ベンゾイルオキシエチルなど);アリールアルキル-カルボニルオキシアルキル(ベンジルカルボニルオキシメチル、2-ベンジルカルボニルオキシエチルなど);アルコキシカルボニルアルキル(メトキシカルボニルメチル、シクロヘキシルオキシカルボニルメチル、1-メトキシカルボニル-1-エチルなど);アルコキシカルボニルオキシアルキル(メトキシカルボニルオキシメチル、t-ブチルオキシカルボニルオキシメチル、1-エトキシカルボニルオキシ-1-エチル、1-シクロヘキシルオキシカルボニルオキシ-1-エチルなど);t-ブチルオキシカルボニルアミノメチルなどのアルコキシカルボニル-アミノアルキル;メチルアミノカルボニルアミノメチルなどのアルキルアミノカルボニルアミノアルキル;アセチル-アミノメチルなどのアルカノイルアミノアルキル;4-メチルピペラジニル-カルボニルオキシメチルなどの複素環式カルボニルオキシアルキル;ジアルキルアミノカルボニルアルキル(ジメチルアミノカルボニルメチル、ジエチルアミノカルボニルメチルなど);(5-t-ブチル-2-オキソ-1,3-ジオキソレン-4-イル)メチルなどの(5-(低級アルキル)-2-オキソ-1,3-ジオキソレン-4-イル)アルキル;及び(5-フェニル-2-オキソ-1,3-ジオキソレン-4-イル)メチルなどの(5-フェニル-2-オキソ-1,3-ジオキソレン-4-イル)アルキルなどである。

(化合物の調製)
本明細書で提供される化合物は、それだけには限らないが、様々な既知の方法を組み合わせることによって調製することができる。例示的な合成を、下に提供されるスキーム及び実施例に記載する。ある種の実施態様では、出発材料又は中間体として使用される化合物のアミノ基、カルボキシル基、及びヒドロキシル基などの1以上の置換基は、当業者に知られている保護基によって保護されることが好都合である。保護基の例は、参照により本明細書に組み込まれるGreene及びWutsによる「有機合成における保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)」(第3版)(John Wiley and Sons, New York 1999)に記載されている。例えば、以下のスキームIは、式IIの例示的な化合物の合成の非限定的な例を提供する。

スキームIでは、例えば、参照により本明細書に組み込まれるWO 2005/073234中の方法Iに従って、出発材料、すなわち2-(7-クロロ-5-(4-ニトロベンジル)イミダゾ[1,2-c]ピリミジン-8-イル)酢酸メチルを調製することができる。Rは、上で定義したのと同じであり、Zは、当業者に知られているものなどの保護基である。保護基、すなわちZを除去し、例えば水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、及び水酸化カリウムを含めた塩基、又は、例えばHCl、HBr、トリフルオロ酢酸、及びBBr₃を含めた酸を使用することによって、カルボキシル官能基を有する化合物をもたらすことができる。

スキームIIは、式IIの例示的な化合物の合成の非限定的な例を提供する。

スキームIIでは、例えば、WO 2005/073234中の方法Iに従って、出発材料、すなわち2-(7-クロロ-5-(4-ニトロベンジル)イミダゾ[1,2-c]ピリミジン-8-イル)酢酸メチルを調製することができる。

スキームIIIは、式Iの例示的な化合物の合成の非限定的な例を提供する。

スキームIIIでは、出発材料、すなわちブロモメチルベンゼンは、市販品として入手できる。「Ar」は、アリール基、ある種の実施態様では、置換又は非置換のフェニルであり得る。スキームIIIに示される¹³Cの代わりに¹⁴Cが存在するような化合物12の変形も、例えば、スキームIVに示す通り、¹³C-標識された2-フェニルアセトニトリルではなく¹⁴C-標識された2-フェニルアセトニトリルを作製するために、例えば、ステップaにおいて[¹⁴]シアン化カリウム及びテトラブチルアンモニウムブロミドを使用することによって、同様に調製することができる。

さらに、本明細書で提供される化合物は、²H及び/又は¹³C同位体富化された出発材料又は試薬を組み込むためのわずかな改変を伴う、WO 2004/096777及びWO 2005/073234(その内容全体をそれぞれ、あらゆる目的のために、参照により本明細書に組み込む)に提供される例示的な方法に従って、或いは、化学構造に同位体原子を導入するための当技術分野で知られている標準の合成プロトコルを実施して調製することができる。

²H及び/又は¹³C同位体富化された出発材料又は試薬の市販業者としては、特に、Icon Services Inc.(Summit,New Jersey USA)、Cambridge Isotope Laboratories(Andover, Massachusetts USA)、及びSigma-Aldrich Corp. (St. Louis, Missouri USA)が挙げられる。標的化合物に重水素及び/又は炭素-13を組み込む方法は、広く記載されている。生理活性のある有機分子への重水素及び/又は炭素-13の組み込みに関する詳細な実験的記述を提供する多数の刊行物については、例えば、「標識化合物と放射性医薬品の専門誌(Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals)」(John Wiley & Sons Ltd.)を参照のこと。

別の態様では、式I〜VIのうちのいずれか1つの酸化合物のアミン塩を調製するプロセスが、本明細書で提供される。こうしたプロセスは、例えば、参照により本明細書に組み込まれる2007年6月21日に出願された米国仮出願第60/936,736号に記載及び言及される手順に従って実施することができる。

(組成物)
一態様では、本明細書で提供されるのは、活性成分、すなわち、本発明開示の化合物、及び/又は医薬として許容し得るその塩、アミン塩、溶媒和化合物、又はプロドラッグと、1以上の医薬として許容し得る賦形剤とを含む医薬組成物である。賦形剤は、限定はされないが、担体、希釈剤、充填剤、着色剤、着香料、甘味料、滑沢剤、可溶化剤、懸濁化剤、結合剤、ビヒクル、湿潤剤、錠剤崩壊剤、及びカプセル化材料などの不活性物質である。賦形剤の選択は、投与の特定の様式、活性成分の溶解性及び安定性に対する賦形剤の影響、及び剤形の性質などの因子に、大いに依存する。

したがって、本明細書で提供される医薬組成物は、上で述べた治療有効量の化合物を、1以上の医薬として許容し得る賦形剤と組み合わせることによって調製される。医薬組成物の作製では、活性成分を、希釈剤と混合する、又は担体(これは、カプセル、小袋、紙、又は他の容器の形であり得る)内に封入することができる。以下に説明する通り、該医薬組成物は、対象への経口、非経口、又は他の様式の投与に適している。医薬組成物は、固体、半固体、又は液体形で、例えば、錠剤、ソフト又はハードゼラチンカプセル剤、デポー、丸剤、散剤、ロゼンジ、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、スラリー、液剤、滅菌注射液、滅菌包装粉末(packaged powder)、座剤、懸濁液、シロップ、エアロゾル、軟膏などの形であり得る。ある種の実施態様では、医薬組成物は、例えば、重量で0.5%まで、1%まで、もしくは10%まで、又はそれ以上の活性成分を含有する。本明細書で提供される医薬組成物は、従来の医薬的手法(例えば、Remington:「薬学の科学と実践(The Science and Practice Pharmacy)」、第21版、A.R. Gennaro編(Lippincott Williams & Wilkins、Phildelphia PA、2005)及び「製薬技術の百科事典(Encyclopedia of Pharmaceutical Technology)、第3版、J. Swarbrick編(Informa Healthcare USA, Inc.、New York、2006)を参照のこと)に従って製剤化することができる。

粉末形態では、担体は、細かく分割された活性成分と混合された、細かく分割された固体であり得る。活性成分を、結合特性を有する担体と適切な割合で混合し、所望の形状及びサイズに圧縮して、錠剤を製造することもできる。

散剤及び錠剤は、ある種の実施態様では、約1から約99重量パーセントの活性成分を含有する。適切な固体担体は、カルボキシメチルセルロースマグネシウム、低融点ワックス、及びカカオ脂である。

滅菌液体製剤としては、懸濁剤、乳剤、シロップ、及びエリキシル剤が挙げられる。活性成分は、滅菌水、滅菌有機溶媒、又は滅菌水と滅菌有機溶媒との混合物などの、医薬として許容し得る担体に、溶解又は懸濁させることができる。

活性成分はまた、例えば、水性のプロピレングリコール水溶液などの、適切な有機溶媒に溶解することもできる。他の組成物は、細かく分割された活性成分を、デンプン又はカルボキシメチルセルロースナトリウム水溶液に、又は適切なオイルに分散させることによって作製することができる。

医薬組成物は、対象に投与するのに適した、単位用量あたりに予め決定された量の活性成分を含有する単位用量剤形で提供することができる。こうした単位は、治療される状態、投与経路、及び患者の年齢、体重、及び状態に応じて、例えば、0.5mgから1200mg、ある実施態様では1mgから1000mg、ある種の実施態様では5mgから400mgの、本明細書に記載の化合物を含有することができる。単位用量剤形は、本明細書では、ヒト及び動物対象への投与に適し、当技術分野で知られている通りに個々に包装される、物理的に不連続の単位を指す。各単位用量は、所望の治療的効果をもたらすのに十分な、予め決定された量の活性成分(1種又は複数)を、医薬用賦形剤と共に含有する。単位用量剤形の例としては、アンプル、シリンジ、及び個々に包装された錠剤及びカプセル剤が挙げられる。単位用量剤形は、その分数量又は倍数量で投与することができる。

(方法)
本発明の開示の化合物は、CRTH2関連の疾患又は障害の治療のために、対象に投与することができる。ある種の態様では、本発明開示の化合物を、CRTH2関連の疾患又は障害の治療に有効な量で、投与の必要のある対象に投与することを含む方法が提供される。本発明開示の化合物は、例えば、上で述べた通りの、医薬として許容し得る塩、アミン塩、溶媒和化合物、もしくはプロドラッグの形、又は医薬組成物もしくは単位用量剤形で投与することができる。

本明細書で提供される1種以上の化合物で治療可能な障害及び疾患としては、それだけには限らないが、喘息、アレルギー性喘息、運動誘発喘息、アレルギー性鼻炎、通年性アレルギー性鼻炎、季節性アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、接触過敏症、接触性皮膚炎、結膜炎、アレルギー性結膜炎、好酸球増加性気管支炎、食物アレルギー、好酸球性胃腸炎、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、肥満細胞症、高IgE症候群、全身性エリテマトーデス、乾癬、ざ瘡、多発性硬化症、同種移植拒絶、再灌流傷害、慢性閉塞性肺疾患、チャーグ・ストラウス症候群、副鼻腔炎、好塩基球性白血病、慢性蕁麻疹、好塩基球性白血球増加症、乾癬、湿疹、COPD(慢性閉塞性肺障害)、関節炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎、及び変形性関節炎が挙げられる。

ある種の実施態様では、CRTH2関連の疾患又は障害は、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性結膜炎、チャーグ・ストラウス症候群、副鼻腔炎、好塩基球性白血病、慢性蕁麻疹、又は好塩基球性白血球増加症である。

本明細書で提供される化合物は、一度に、又は間隔をあけて複数回で投与することができる。厳密な投薬量及び治療期間は、治療される患者の年齢、体重、及び状態によって変動する可能性があり、既知の試験プロトコルを使用して、或いはインビボもしくはインビトロ試験又は診断データからの推定によって経験的に決定することができることを理解されたい。任意の特定の個人について、具体的な投薬レジメンが、個々の必要性や、製剤の投与を管理又は監督する人物の専門的判断に従って、時間とともに調節されるべきであることをさらに理解されたい。

好都合なことに、本明細書で提供される²H-及び/又は¹³C-富化化合物は、対象に対する、対応する非-²H-及び/又は¹³C-富化アイソトポローグ(例えば、WO 2004/096777、WO 2005/073234、及び2007年6月21日に出願された米国仮出願第60/936,736号に記載されているもの)よりも少ない用量での投与にも適しているし、より少ない回数の投与にも適している。

ある種の実施態様では、本発明開示の化合物は、限定はされないが、通常の又は腸溶性の錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ、液剤、懸濁剤、シロップ、固体及び液体エアロゾル、乳剤、その他などの経口の形で対象に投与される。経口投与としては、例えば、口腔内、舌(lingual)、又は舌下(sublingual)投与を挙げることができる。

ある種の実施態様では、経口投与のために、活性成分を、限定はされないが、ラクトース、デンプン、スクロース、グルコース、炭酸ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、メチルセルロースなどの医薬として許容し得る経口用の非毒性担体と;また、任意に、限定はされないが、トウモロコシ、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム、アルギン酸などの崩壊剤と;また、任意に、結合剤、例えば、限定はされないが、ゼラチン、天然の糖、ベータ-ラクトース、トウモロコシ甘味料、天然及び合成のゴム、アラビアゴム、トラガカントゴム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどと;また、任意に、滑沢剤、例えば、限定はされないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、タルクなどと;組み合わせることができる。

他の実施態様では、該化合物は、限定はされないが、医薬分野の当業者に周知の、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内などの形など、非経口形で投与される。本明細書で提供される化合物は、非経口投与に適した任意の剤形(液剤、懸濁剤、乳剤、ミセル、リポソーム、ミクロスフェア、ナノシステム(nanosystem)、及び、注入前に液体中に溶解又は懸濁するのに適した固体の形を含めて)に製剤化することができる。こうした剤形は、医薬科学分野の当業者に知られている従来の方法に従って調製することができる。

本発明開示の化合物は、適切な鼻腔内ビヒクルの局所的使用を介する、又は当業者に周知の経皮送達系を使用する経皮経路を介する、鼻腔内の形で投与することができる。

本明細書で提供される化合物の使用を伴う投薬レジメンは、限定はされないが、レシピエントの年齢、体重、性別、及び医学的状態、治療される状態の重症度、投与経路、レシピエントの代謝及び排出機能のレベル、用いられる剤形、用いられる特定の化合物及びその塩、を含めた様々な因子を考慮して、当業者によって選択される。

本明細書で提供される化合物の通常の投薬量は、示された効果のために使用される場合、約0.01mg/kg/日から約10mg/kg/日の範囲となる。ある種の実施態様では、投薬量は、約1mg/kg/日から約10mg/kg/日の範囲であり得る。

本明細書で提供される化合物を、1日1回投与で投与することもできるし、1日の総用量を、1日につき2回、3回、又はそれ以上の回数で、分割量で投与することもできる。送達が経皮剤形を介する場合には、当然、投与は連続的である。

本明細書で提供される²H-及び¹³C-富化化合物はまた、溶液中の同位体富化されていない化合物の濃度を決定するための分析用試薬としても有用である。

以下で提供されるのは例であり、これらの例は、決して、本明細書に述べる任意の発明の境界及び範囲を限定するものと解釈されるべきではない。

以下の実施例では、すべての量的データは、他に記述がなければ、重量百分率に関連していた。別段の記述のない限り、反応及び操作は、不活性ガス雰囲気(アルゴン)中で室温で実施した。非標識試薬及び溶媒は、市販業者から購入し、さらに精製することなく使用した。高圧液体クロマトグラフィー(HPLC)スペクトルを実施し、HP 1050 SERIES II液体クロマトグラフィーシステム(Hewlett-Packard;Waldbronn,Germany)を使用して記録し、UVシグナルは、クロマトグラフのワークステーションによって記録した。ガスクロマトグラフィー(GC)スペクトルは、キャリアガスとしてヘリウムを使用する、EZ-FLASH GCアクセサリー(ThermoScientific;Breda、Netherlands;10m RTX-1キャピラリー、内径0.25mm)を備え付けた、HP 5890ガスクロマトグラフ(Hewlett-Packard;Waldbronn,Germany)を使用して得た。ガスクロマトグラフ-質量分析法(GC/MS)分析は、内径が0.2mmである25m溶融シリカキャピラリーを有するHP 5973質量分析計(Hewlett-Packard;Waldbronn,Germany)を備え付けた、HP 6890 GCシステムを使用して達成された。固定相は、架橋されたメチルシリコーン(Hewlett-Packard;Waldbronn,Germany)であった。キャリアガスとして、ヘリウムを使用した。質量分析法の分析は、APIソース(SCIEX,Toronto,Canada)を用いるQ-Star-Pulsar質量分析計を使用して達成された。核磁気共鳴(NMR)スペクトルを、Bruker DRX 400分光計(Bruker;Rheinstetten,Germany)で記録した。調製用HPLCは、WELLCHROM MAXI-STAR K 1000ポンプ(Knauer;Berlin,Germany)、検出器としてのKNAUER Variable Wavelengthモニター(Knauer;Berlin,Germany)、及びインテグレーターとしてのMERCK/HITACHI D-2500A Chromato-Integrator(Merck;Darmstadt,Germany)を備え付けた複合システムを使用して実施した。

(実施例1)
[4,6-ビス([²H₆]ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸(1)

ジメチルアミン部分に12個の重水素標識を含有する重水素化[4,6-ビス([²H₆]ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸(1)を、以下で述べる通りに、純度＞97%で合成した。

ステップ1:塩酸2-(4-ニトロフェニル)エタンイミドアミドの合成

250mL丸底フラスコ中の、(4-ニトロフェニル)アセトニトリル(4.86g、30.0mmol)のエタノール(6mL、99mmol)懸濁液を、室温でゆっくりと、4N塩酸をジオキサン(38mL、152mmol)に入れたもので処理し、22時間撹拌した。40℃で水流吸引真空中で溶媒を慎重に除去した後、得られた湿った淡黄色生成物を、エタノール21mLに懸濁した。次いで、得られた薄灰色懸濁液に、7Nアンモニア溶液(メタノール中)(12mL、84mmol)を、ゆっくりと加えた。2時間撹拌後、追加の7Nアンモニア溶液2mL(14mmol)(メタノール中)を加えた。室温でさらに1時間撹拌した後、すべての揮発性物質を40℃で水流吸引真空中で除去した。残りのエタノール及びジオキサンを除去するために、メチルt-ブチルエーテル(30mL)を加え、もう一度、すべての揮発性物質を40℃で水流吸引真空中で除去すると、オフホワイトの固体が与えられた。この粗製生成物を、精製せずに、次のステップで使用した。

ステップ2:[4,6-ジヒドロキシ-2-(4-ニトロベンジル)-ピリミジン-5-イル]酢酸メチルの合成

250mL丸底フラスコに、塩酸2-(4-ニトロフェニル)エタンイミドアミド(約6.47g、30.0mmol、純度48%)と、エタン-1,1,2-トリカルボン酸トリエチル(7.60mL、33.0mmol)と、メタノール(43mL)とを装入した。この溶液に、25%ナトリウムメトキシド溶液(メタノール中) (24.0mL、105.2mmol)を加えると、すぐに、濃紫色の濃厚な懸濁液がもたらされた。還流下で3時間撹拌した後、この濃紫色の混合物を、氷浴を使用して0℃に冷却し、水30mLで慎重に処理した。この混合物を、6N塩酸35mLでゆっくりと処理すると、薄緑色の懸濁液が与えられた。この懸濁液を、さらに30分撹拌し、濾過し、得られた淡黄褐色の固体を、水100mLで洗浄した。生成物を、2日間、デシケーター中で真空中で乾燥させた。この粗製生成物を、精製せずに、次のステップで使用した。

ステップ3:[4,6-ジクロロ-2-(4-ニトロベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸メチルの合成

500mL丸底フラスコに、[4,6-ジヒドロキシ-2-(4-ニトロベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸メチル(7.62g、23.87mmol)と、トルエン(20mL)と、塩化ホスホリル(46mL、493mmol)とを装入した。この溶液に、N,N-ジメチルアニリン(17.1mL、134.9mmol)をゆっくりと加えると、暗色の溶液が与えられた(警告:煙の放出)。還流下で3時間撹拌した後(浴温度:130℃)、混合物を室温に冷却させ、揮発性物質を、50℃で水流吸引真空中で、可能な限り除去した。得られた黒色オイルを120mL酢酸エチルに溶解し、炭酸水素ナトリウム飽和溶液40mLで、0℃(氷浴冷却)でゆっくりと処理した(警告:気体発生、溶液の温度上昇)。水相が分離した後、有機相を、追加の炭酸水素ナトリウム飽和溶液40mL、水30mL、及びブライン30mLで上手く洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、揮発性物質を40℃で減圧下で除去した。この粗製生成物を、溶離剤として酢酸エチル/n-ヘプタン混合物(1:3、v/v)を使用する300×50mmカラム上のシリカゲル上でのクロマトグラフィーと、検出装置(100mL分画)としての薄層クロマトグラフィーとによって精製した。所望の生成物を含有する分画をプールし、溶媒を約40℃で減圧下で慎重に除去すると、橙色の固体が与えられた。収量:3.15g(37.0%)。純度:90%(GC)。LC-MS:m/z =356.0[(M+H)]⁺。

ステップ4:[4,6-ビス([²H₆]ジメチルアミノ)-2-(4-ニトロベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸メチルの合成

30mL長頸フラスコに、[4,6-ジクロロ-2-(4-ニトロベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸メチル(1050mg、2.95mmol、90%)と[²H₆]塩酸ジメチルアミン(790mg、8.84mmol、Aldrich 27,946-3)とを装入した。室温で、撹拌しながら、1,3-ジメチルテトラヒドロ-2-(1H)-ピリミジノン(8.0mL、Aldrich 25、156-9)とN,N-ジイソプロピルエチルアミン(2.57mL、14.74mmol、Aldrich D12580-6)とを加えた。得られた濃紫色の溶液を、85℃で40分間、勢いよく撹拌した。追加の[²H₆]塩酸ジメチルアミン(258mg、2.75mmol)と、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.51mL、2.94mmol)とを加え、温度を145℃に上げた。HPLCによって反応をモニタリングすると、145℃で3時間撹拌した後、生成物:特定されていない副生成物:一置換型生成物が9.4:3.4:3.4であると示された。室温に冷却した後、反応混合物を水50mLに加え、水相を酢酸エチル(8×10mL)で抽出した。合わせた有機相を、ブライン10mLで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。40℃で水流吸引真空中で慎重に溶媒を蒸発させると、褐色のオイルが与えられた。クロマトグラフィー精製のために、この粗製生成物を、溶離剤として酢酸エチル/n-ヘプタン混合物(30:70、v/v)を使用する300×50mmカラム上のシリカゲル上でのクロマトグラフィーと、検出装置(100mL分画)としての薄層クロマトグラフィーとにかけた。[4,6-ビス([²H₆]ジメチルアミノ)-2-(4-ニトロベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸メチルのすべての分画をプールし、溶媒を約40℃で減圧下で慎重に除去すると、橙褐色の粘着質のオイルが与えられた。収量660mg(54.6%)。純度94%(HPLC)。LC-MS:m/z =386.2[(²H₁₂-M)+H]⁺。

ステップ5:[2-(4-アミノベンジル)-4,6-ビス([²H₆]ジメチル-アミノ)ピリミジン-5-イル]酢酸メチルの合成

250mL丸底フラスコ内で、[4,6-ビス([²H₆]ジメチルアミノ)-2-(4-ニトロベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸メチル(660mg、1.71mmol)を、メタノール(20mL)に溶解した。この橙色の溶液に、木炭上のパラジウム触媒(50mg、0.05mmol、10%)を加え、フラスコを、水素で10分間パージした。室温で水素を充填した3Lの風船を使用して、水素雰囲気中で3時間撹拌した後、HPLCによって、完全な転換が示された。得られた淡黄色の溶液をセライトで濾過し、セライトをメタノール30mLで洗浄した。合わせたメタノール溶液を40℃で減圧下で蒸発させると、淡褐色の粘着質のオイルが与えられた。収量:590mg(93.2%)。純度96%(GC)。GC-MS:m/z =355[(²H₁₂-M)]⁺。

ステップ6:[4,6-ビス([²H₆]ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸メチルの合成

250mL丸底フラスコ内で、[2-(4-アミノベンジル)-4,6-ビス([²H₆]ジメチルアミノ)ピリミジン-5-イル]酢酸メチル(590mg、1.66mmol、純度96%)を、使用前に、(10g酸化アルミニウム、507Cタイプ、Aldrich 19、997-4で)乾燥させた塩化メチレン(15mL、Merck 106044、＞99.3%)に溶解した。トリエチルアミン(0.68ml、4.85mmol)を加えた後、この混合物を、0℃に冷却し、塩化メチレン1mLに溶解した4-(トリフルオロメチル)塩化ベンゾイル(0.30mL、2.00mmol)を、ゆっくりと加えると、黄色がかった橙色の溶液が与えられた。この混合物を、室温で30分間撹拌し、その後、水12mLで処理した。有機相を分離し、水相を塩化メチレン(3×5mL)で抽出した。プールした有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、合わせた有機相から、すべての揮発性物質を40℃で水流吸引真空中で除去した。この粗製生成物を、溶離剤として酢酸エチル/n-ヘプタン混合物(2:3、v/v)を使用する300×50mmカラム上のシリカゲル上でのクロマトグラフィーと、検出装置(100mL分画)としての薄層クロマトグラフィーとによって精製した。所望の生成物を含有する分画をプールし、溶媒を約40℃で減圧下で慎重に除去すると、白色の微結晶性固体が与えられた。収量:1629:770mg(83.3%)。純度91%(LC)。LC-MS:m/z=528.2[(²H₁₂-M)+H]⁺。

ステップ7:次式の1の合成

250mL丸底フラスコ内で、[4,6-ビス([²H₆]ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸メチル(770mg、1.46mmol、91%)を、(使用前に、酸化アルミニウムで乾燥させた)テトラヒドロフラン12.5mLに溶解し、メタノール4mLと1N水酸化ナトリウム溶液(4.48mL、4.48mmol)を室温で加えた。還流下(浴温度95℃)で90分撹拌した後(HPLC、生成物:遊離体の比=97:3)、揮発性物質を、40℃で減圧下で、可能な限り除去した。残留物を水10mLで処理した。tert-ブチルメチルエーテル(Merck 1.01845、99.8%)15mLを用いる水相の抽出後、ほぼ5mLの1N塩酸を0℃で水相に加えると、白色懸濁液(pH6)が与えられた。テトラヒドロフラン/酢酸エチル混合物(2:3、v/v、10×8mL)を用いる抽出後、懸濁液は、透明になった。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を、乾燥するまで、40℃で減圧下で蒸発させると、淡黄色固体が残った。クロマトグラフィー精製のために、この粗製生成物を、溶離剤としてテトラヒドロフラン/アセトニトリル/酢酸混合物(70:30:0.005、v/v)を使用する400×50mmカラム上のシリカゲル上でのクロマトグラフィーと、検出装置(50mL分画)としての薄層クロマトグラフィーとにかけた。1の分画をプールし、溶媒を40℃で減圧下で慎重に除去すると、濃縮された酢酸溶液が与えられた。この酢酸溶液に水300mLを加えた後、得られた濁った懸濁液を、逆相カートリッジC-18(Phenomenex、20g)を通過させた。生成物を、テトラヒドロフラン/アセトニトリル混合物(v/v、1:1)で洗い流した。溶媒を40℃で減圧下で除去すると、白色微結晶性固体として、所望の生成物が得られた。1の総収量:606mg(80.8%)、純度97.2%。LC-MS:m/z = 514.2[(²H₁₂-M)+H]⁺。

質量分布:98.7%(d-12)、1.3%(d-11)。

(実施例2)
[4,6-ビス([¹³C₂]ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸(2)

ステップ4で[²H⁶]塩酸ジメチルアミンの代わりに[¹³C₂]塩酸ジメチルアミンが使用されること以外は上の実施例1に述べた合成に従って、[4,6-ビス([13C2]ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸(2)を調製する。

(実施例3)
[4,6-ビス(ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸(3)

[4,6-ビス(ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸(2)は、次の通りの9個のステップで調製することができる。

ステップ1:フェニル-[1-¹³C]アセトニトリルの合成

500mL丸底フラスコに、[¹³]シアン化カリウム及びテトラブチルアンモニウムブロミドを装入する。塩化メチレン、水(警告:H¹³CN発生の危険性!)、及びベンジルブロミドの添加後、相移動反応システム(phase-transfer reaction system)によって、室温で終夜、勢いよく撹拌する。その後、有機相を水相から慎重に分離し(警告:H¹³CN発生の危険性!)、乾燥のために硫酸ナトリウムを装入したカラム上に移す。水相を、塩化メチレンで抽出し、有機相を、硫酸ナトリウムカラム上に慎重に移す。このカラムを、塩化メチレンですすぎ、溶媒を20℃で減圧下で慎重に除去すると、粗製生成物がもたらされ、これをクロマトグラフィーによって精製する。クロマトグラフィー精製のために、粗製生成物を塩化メチレンに溶解し、溶離剤としての流速20mL/分の酢酸エチル/n-ヘプタン混合物(1:4、v/v)、及び検出波長254nmを使用する、LiChrosorb(登録商標)Si 60カラム(40〜63μm、サイズC、440×37mm、Merck 1.10402)に注入する。生成物を、25〜30分間、こうした条件で溶出させる(注意:生成物のUV最小は254nm付近である!)。生成物分画を合わせ、溶媒を約20℃で減圧下で慎重に除去すると、ほぼ無色のオイルが与えられた。

ステップ2:(4-ニトロフェニル)-[1-¹³C]アセトニトリルの合成

警告:次の手順には、精製されたフェニル-[1-¹³C]アセトニトリルが必要である。フェニル-[1-¹³C]アセトニトリルを、塩化メチレンに溶解し、0℃に冷却する。塩化メチレンに溶解させた硝酸を、この温度で直ちに加えると、短時間沸騰する赤色の溶液が得られる。室温まで温め、1時間撹拌した後、この溶液を、塩化メチレンで希釈し、10%硫酸ナトリウム溶液で洗浄する。有機相を、10g硫酸ナトリウムを含有するカラムで乾燥させる。カラムを塩化メチレンですすぎ、40℃で水流吸引真空中で慎重に溶媒を蒸発させる。乾燥させた生成物を、塩化メチレンに溶解し、溶離剤としての流速20mL/分の酢酸エチル/n-ヘプタン混合物(1:4、v/v)、及び検出波長254nmと共に、LiChrosorb(登録商標)Si 60カラム(40〜63μm、サイズC、440×37mm、Merck 1.10402)を使用するクロマトグラフィーによって精製することができる。所望の生成物を含有する分画をプールし、溶媒を約40℃で減圧下で除去し、これを、さらに精製することなく、次のステップで使用することができる。主な不純物は、非硝酸(non-nitrated)フェニル-[1-¹³C]アセトニトリル及びメタ硝酸(meta-nitrated)(3-ニトロフェニル)-[1-¹³C]アセトニトリルである。

ステップ3:塩酸2-(4-ニトロフェニル)-[1-¹³C]エタンイミドアミドの合成

250mL丸底フラスコに入れた、(4-ニトロフェニル)-[1-¹³C]アセトニトリルのエタノール懸濁液を、4N塩酸(ジオキサン中)で、室温でゆっくりと処理し、22時間撹拌する。40℃で水流吸引真空中で慎重に溶媒を除去した後、得られた湿った淡黄色生成物を、24mLエタノールに懸濁する。次いで、7Nアンモニア溶液(メタノール中)をゆっくりと加えると、薄灰色の懸濁液が与えられる。2時間撹拌した後、追加の7Nアンモニア溶液(メタノール中)を加える。室温で30分間さらに撹拌した後、すべての揮発性物質を、40℃で水流吸引真空中で除去する。残りのエタノール及びジオキサンを除去するために、メチルt-ブチルエーテルを加え、もう一度、すべての揮発性物質を40℃で水流吸引真空中で除去する。この粗製生成物を、精製せずに、次のステップで使用する。

ステップ4:[4,6-ジヒドロキシ-2-(4-ニトロベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸メチルの合成

250mL丸底フラスコに、塩酸2-(4-ニトロフェニル)-[1-¹³C]エタンイミドアミドと、エタン-1,1,2-トリカルボン酸トリエチルと、メタノールとを装入する。この溶液に、25%ナトリウムメトキシド溶液(メタノール中)を加える。還流下で30分間撹拌した後、追加の25%ナトリウムメトキシド溶液(メタノール中)を加える。還流下でさらに30分撹拌した後、より優れた撹拌挙動を得るために，追加のメタノールを加えることができる。還流下で撹拌しながら、合わせて90分経過後、氷浴を使用して、混合物を0℃に冷却し、水30mLで慎重に処理する。この混合物を6N塩酸26mLでゆっくりと処理すると、懸濁液が生じた。この懸濁液を、さらに30分間撹拌し、濾過すると、固体が生じ、これを、水で洗浄することができる。生成物を、デシケーター中で真空中で終夜乾燥させる。この粗製生成物(ジメチルスルホキシド以外の最も一般的な溶媒にはほとんど溶解しない)を、精製せずに、次のステップで使用することができる。

ステップ5:[4,6-ジクロロ-2-(4-ニトロベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸メチルの合成

500mL丸底フラスコに、[4,6-ジヒドロキシ-2-(4-ニトロベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸メチルと、トルエンと、塩化ホスホリルとを装入する(警告:湿った出発材料が原因の、溶液の加熱の可能性)。この溶液に、N,N-ジメチルアニリンをゆっくりと加える(警告:煙の放出)。還流下(浴温度:120℃)で2時間撹拌した後、混合物を室温に冷却させ、すべての揮発性物質を、50℃で水流吸引真空中で、可能な限り除去する。得られた黒色オイルを酢酸エチルに溶解し、炭酸水素ナトリウム飽和溶液で、0℃(氷浴冷却)でゆっくりと処理する。水相が分離した後、有機相を、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、水、及びブラインで上手く洗浄することができる。合わせた水相を酢酸エチルで再抽出し、プールした有機相を硫酸ナトリウムカラムで乾燥させる。カラムを酢酸エチルですすぎ、揮発性物質を40℃で減圧下で除去する。所望の生成物に加えて、対応するピリミジニル酢酸が存在する可能性がある。酸を所望のエステルに転換するために、粗製生成物を、塩化チオニルと共に30分間還流させる(浴温度:120℃)。過剰な塩化チオニルを40℃で減圧で除去した後、残留物を5℃でメタノールで慎重に処理する。揮発性物質を20℃で水流吸引真空中で除去する。クロマトグラフィー精製のために、この粗製生成物を塩化メチレンに溶解し、溶離剤としての流速20mL/分の酢酸エチル/n-ヘプタン混合物(1:4、v/v)、及び検出波長254nmを使用する、LiChrosorb(登録商標)Si 60カラム(40〜63μm、サイズC、440×37mm、Merck 1.10402)に、別々の実施のためのバッチで注入することができる。所望の生成物は、75〜90分で、こうした条件で溶離するはずである。所望の生成物の分画をプールし、溶媒を約40℃で減圧下で慎重に除去する。

ステップ6:[4,6-ビス(ジメチルアミノ)-2-(4-ニトロベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸メチルの合成

20mL長頸フラスコに入れた、固体の[4,6-ジクロロ-2-(4-ニトロベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸メチルと塩酸ジメチルアミンに、室温で、1,3-ジメチルテトラヒドロ-2-(1H)-ピリミジノン(「DMPU」)とN,N-ジイソプロピル-エチルアミンを加える。(注意:この手順は、出発固体がDMPUにあらかじめ溶解される場合には行われない)。この溶液を、85℃で30分間、勢いよく撹拌する。追加の塩酸ジメチルアミンとN,N-ジイソプロピルエチルアミンを加え、温度を150℃に上昇させ、約4時間撹拌する。この反応は、HPLCによってモニタリングすることができる。室温に冷却した後、反応混合物を水60mLに加え、水相を酢酸エチルで抽出する。合わせた有機相をブラインで抽出し、また、合わせた水相を酢酸エチルで再抽出することができる。プールした有機相を、硫酸ナトリウム及び硫酸マグネシウムを含有するカラムで乾燥させる。カラムを酢酸エチルですすぎ、40℃で水流吸引真空中で慎重に溶媒を蒸発させる。クロマトグラフィー精製のために、この粗製生成物を塩化メチレンに溶解し、検出波長254nmと共に、溶離剤としての流速15mL/分の酢酸エチル/n-ヘプタン混合物(28:72、v/v)を使用する、LiChrosorb(登録商標)Si 60カラムに注入する。所望の生成物の分画をプールし、溶媒を約40℃で減圧下で慎重に除去する。

ステップ7:[2-(4-アミノベンジル)-4,6-ビス(ジメチルアミノ)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸メチルの合成

250mL丸底フラスコ内で、[4,6-ビス(ジメチルアミノ)-2-(4-ニトロベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸メチルをメタノールに溶解する。この溶液に木炭上のパラジウム触媒を加え、フラスコを、水素で10分間パージする。室温で水素を充填した3Lの風船を使用して、水素雰囲気中で3時間撹拌する。完全な転換を確かめるために、HPLCを使用することができる。得られた淡黄色の溶液をセライトで濾過し、セライトをメタノールで洗浄する。合わせたメタノール溶液を40℃で減圧下で蒸発させると、淡褐色の粘着質のオイルが与えられる。

このステージでは、上のステップ2で述べたニトロ化に起因するメタ置換型の副生成物から、所望のパラ置換型の化合物を分離することが可能である。粗製生成物を、n-ヘプタン:酢酸エチル:トリエチルアミン(1:1:0.001、v/v/v)混合物に溶解し、この溶液を、クロマトグラフィー精製のために、流速15mL/分の、溶離剤としての75分間のn-ヘプタン:酢酸エチル:トリエチルアミン(1:1:0.001、v/v/v)混合物、続いて20分間のn-ヘプタン:酢酸エチル:トリエチルアミン(1:3:0.001、v/v/v)混合物、及び検出波長254nmを使用する、LiChrosorb(登録商標)Si 60カラムに注入する。サンプルを装填する前に、n-ヘプタン:酢酸エチル:トリエチルアミン(1:1:0.001、v/v/v)混合物を用いて、カラムを30分較正した。所望の生成物の分画をプールし、溶媒を約40℃で減圧下で除去する。

ステップ8:[4,6-ビス(ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸メチルの合成

250mL丸底フラスコ内で、[2-(4-アミノベンジル)-4,6-ビス(ジメチルアミノ)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸メチルを、塩化メチレンに溶解する。トリエチルアミンを加えた後、混合物を0℃に冷却し、塩化メチレンに溶解した4-(トリフルオロメチル)塩化ベンゾイルをゆっくりと加える。混合物を、室温で1時間撹拌し、その後、水で処理する。有機相を分離し、水相を塩化メチレンで抽出する。プールした有機相を、10g硫酸ナトリウムを含有するカラムで乾燥させる。カラムを塩化メチレン20mLですすいだ後、合わせた有機相から、40℃で水流吸引真空中で揮発性物質を除去する。クロマトグラフィー精製のために、得られた粗製生成物を塩化メチレンに溶解し、溶離剤としての流速15mL/分のn-ヘプタン:酢酸エチル(63:27、v/v)混合物、及び検出波長254nmを使用する、LiChrosorb(登録商標)Si 60カラムに注入する。所望の生成物を含有する分画をプールすることができ、溶媒を約40℃で減圧下で慎重に除去すると、固体としての生成物がもたらされる。

ステップ9:[4,6-ビス(ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]酢酸(3)の合成

酢酸[4,6-ビス(ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)-[2-¹³C]ピリミジン-5-イル]を、室温で、テトラヒドロフランと、メタノールと、1N水酸化ナトリウム溶液とに溶解する。還流下(浴温度95℃)で90分撹拌した後、揮発性物質を、40℃で減圧下で、可能な限り除去した。残留物に水と水酸化ナトリウムとを加える。tert-ブチルメチルエーテルを用いる水相の抽出後、1N塩酸を0℃で水相に加えると、白色懸濁液(pH6)が与えられる。テトラヒドロフラン/酢酸エチル混合物(22:78、v/v、10×15mL)を用いる抽出後、懸濁液は、透明になるはずである(pH7〜8)。追加の1N塩酸を水相に加え(pH5)、続いて、水相のHPLCが、それ以上の生成物を示さなくなるまで、テトラヒドロフラン/酢酸エチル混合物(22:78、v/v、5×15mL)でさらに抽出する。合わせた有機相は、50g硫酸ナトリウム(KMF KMF.03-020)、それに続いて硫酸ナトリウム(15g)カラムで乾燥させることができる。カラムをテトラヒドロフラン/酢酸エチル混合物(22:78、v/v)ですすぐ。溶媒を、乾燥するまで、40℃で減圧下で蒸発させると、固体の粗製生成物が残る。この粗製生成物を、アセトニトリル/テトラヒドロフラン混合物(95:5、v/v)に懸濁し、懸濁液を、カートリッジSI60(Varian、10g)に加える。カートリッジを20mLのアセトニトリル/テトラヒドロフラン混合物(95:5、v/v)ですすぎ、副生成物を溶離(HPLCによって制御)する。250mLのアセトニトリル/テトラヒドロフラン/酢酸混合物(60:40:0.1)で生成物3を溶離する。乾燥するまで蒸発させた後、メタノール130mLから、3を再結晶化させることができる。-20℃で2日間放置した後、白色の微結晶性の3を得ることができ、これをろ過し、冷メタノール25mLで洗浄する。酸化アルミニウムで乾燥させ、直ちにテトラヒドロフランに溶解することによって、化合物3を、UV、TLC、HPLC、NMR、又は質量分析法によって特徴付けることができる。

本明細書で提供される化合物は、¹³C標識された出発材料の代わりに¹⁴Cを使用する、本明細書で述べる次の合成手順によって、¹³Cの代わりに¹⁴Cを有するように調製することができる。

(実施例4)
[4,6-ビス([²H₆]ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸(1)の薬物動態、生体利用効率、及び阻害活性。
[4,6-ビス([²H₆]ジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸(1)と、[4,6-ビスジメチルアミノ)-2-(4-{[4-(トリフルオロメチル)ベンゾイル]アミノ}ベンジル)ピリミジン-5-イル]酢酸(「非重水素化類似体」)との薬物動態及び生体利用効率を、オスのHan Wistarラットで、静脈内(「IV」)及び経口(「PO」)投与後に比較した。

この研究では、次のさらなる頭字語及び定義が使用される:
AUC0-∞-時間0から無限大までの血漿濃度時間曲線下面積
AUC0-t-時間0から数量化可能な最後の時点までの血漿濃度時間曲線下面積
AUMC-1次モーメント曲線下面積
CL-総血漿クリアランス
Cmax-最大血漿濃度
MRT-平均滞留時間
PEG-ポリエチレングリコール
t1/2-排出半減期
tmax-最大血漿濃度の時間
Vss-定常状態分布容積

化合物1(1.02mg/kg)及び非重水素化類似体(1.0mg/kg)を、PEG 400:エタノール:水(40:10:50)中の溶液として、静脈内と経口(胃管栄養法による)の両方によって、投与経路ごとに4匹のオスラットに、同時に投与した。用量は、モル基準に相当するものであった。血液サンプルを、投与48時間後まで連続的に収集した。各化合物の血漿濃度を、どちらの分析物についても1.00ng/mLの定量下限値(「LLOQ」)(基準化合物については1.99nM、1については1.95nM)を用いるLC/MS/MS方法によって測定した。非区分薬物動態パラメータを算出し、両方の化合物の同時投与により、各ラットが、それ自身、対照としての役割を果たしていることから、対応のあるt検定を使用して、結果を統計学的に比較した。

1の血漿濃度は、どちらの投与経路でも、すべてのラットのすべての時点で、非重水素化類似体の血漿濃度よりも高かった。

IV投与後、1のAUC_0-∞は、非重水素化類似体のAUC_0-∞よりも28%高かった。クリアランスは、非重水素化類似体の80%であった。これらの差は、統計学的に有意であった(p＜0.05)。さらに、重水素化類似体の平均滞留時間(「MRT」)の増大は、辛うじて有意であった(p=0.061)。

PO投与後、1のAUC_0-tは、非重水素化類似体のAUC_0-tよりも71%高かった。この差は、統計学的に有意であった(p＜0.05)。さらに、1のC_max及びAUC_0-∞は、非重水素化類似体の対応する値よりも42%及び63%高かった。しかし、これらの値は、辛うじて有意であるに過ぎなかった(それぞれ、p=0.066及びp=0.053)。IV投与と比較して、PO投与後にAUCが大きく増大したのは、重水素化類似体の生体利用効率がより高いことが原因と考えられ、その値は、1と非重水素化類似体について、それぞれ52.5%と45.6%であった。この差は、統計学的に有意であった(p＜0.01)。

1の薬物動態は、非標識薬物よりも低いクリアランスと、より優れた生体利用効率との両方を示した。

この研究で決定された薬物動態パラメータを、以下の表に示す:

静脈内及び経口投与後の、質量単位とモル単位で表される、個々の血漿濃度と平均血漿濃度を、以下の表に示す:

1(1.02mg/kg)及び非重水素化類似体(1mg/kg)の静脈内同時投与後の、オスのHan Wistarラットにおける、1及び非重水素化類似体の個々の血漿濃度と平均血漿濃度(質量単位)

1(1.02mg/kg)及び非重水素化類似体(1mg/kg)の静脈内同時投与後の、オスのHan Wistarラットにおける、1及び非重水素化類似体の個々の血漿濃度と平均血漿濃度(モル単位)

1(1.02mg/kg)及び非重水素化類似体(1.01mg/kg)の口腔内同時投与後の、オスのHan Wistarラットにおける、1及び非重水素化類似体の個々の血漿濃度と平均血漿濃度(質量単位)

1(1.02mg/kg)及び非重水素化類似体(1.01mg/kg)の口腔内同時投与後の、オスのHan Wistarラットにおける、1及び非重水素化類似体の個々の血漿濃度と平均血漿濃度(モル単位)

オスのHan Wistarラットにおける1(「D」)及び非重水素化類似体(「H」)に関する、1(1.02mg/kg)及び非重水素化類似体(1.01mg/kg)の静脈内同時投与後の、個々の薬物動態パラメータと平均薬物動態パラメータ

オスのHan Wistarラットにおける1(「D」)及び非重水素化類似体(「H」)に関する、1(1.02mg/kg)及び非重水素化類似体(1.01mg/kg)の経口同時投与後の、個々の薬物動態パラメータと平均薬物動態パラメータ

本出願人等はまた、化合物1が、インビトロで、非重水素化類似体に匹敵する生物学的阻害活性を有することを発見している。この結果は、同様の血漿濃度又は全身暴露で比較した場合、化合物1のインビボでの生物学的阻害活性も、非重水素化類似体と同様となるであろうことを示唆する。

上で述べた実施例は、当業者に、実施態様の作製及び使用方法の完全な開示及び説明を与えるために提供されるものであり、開示の範囲を限定するものではない。当業者に明らかである開示を実施するための上で述べた様式の改変は、以下の特許請求の範囲の範囲内であることが意図される。この明細書に引用されたすべての刊行物、特許、及び特許出願を、まるで、こうした各刊行物、特許、又は特許出願が、具体的かつ個々に、参照により本明細書に組み込まれることが示されるかのように、参照により本明細書に組み込むものとする。

Claims

式I又はIIの同位体富化された化合物或いは医薬として許容し得るその塩:

(式中、Rは、水素;C_1〜6アルキル;C_1〜6アルキルによって任意に置換されたC_3〜8シクロアルキル;又はハロゲン、モノ-、ジ-、又はトリ-ハロゲンで任意に置換されたC_1〜4アルキル、及びC_1〜4アルコキシから選択される1〜4個の置換基で任意に置換されたフェニル;であり、ここでは、1以上の水素原子は、重水素原子によって置き換えられる、又は1以上の炭素原子は、炭素-13原子によって置き換えられる)。
Rがフェニルである、請求項1記載の化合物。
式III又はIVの請求項1記載の化合物:

(式中、各Y原子は、水素原子又は重水素原子であり;各X原子は、炭素-12原子又は炭素-13原子であり、ここでは、少なくとも1つのY原子が重水素である、又は少なくとも1つのX原子が炭素-13原子である。)。
少なくとも1つのY原子が重水素原子である、請求項1から3のいずれか一項記載の化合物。
少なくとも3個のY原子が重水素原子である、請求項1から4のいずれか一項記載の化合物。
少なくとも1つのX原子が炭素-13原子である、請求項3記載の化合物。
少なくとも2個のX原子が炭素-13原子である、請求項3記載の化合物。
各Y原子が水素又は重水素であり、かつ少なくとも1つのY原子が重水素である、式V又はVIの、請求項1から3のいずれか一項記載の化合物：

。
請求項1から4及び請求項8のいずれか一項記載の次式の化合物、又は医薬として許容し得るその塩：

。
請求項1から4及び請求項8のいずれか一項記載の次式の化合物、又は医薬として許容し得るその塩：

。
請求項1から10のいずれか一項記載の酸化合物と医薬として許容し得るアミンとを含むアミン塩化合物。
アミン塩化合物が、請求項1から10のいずれか一項記載の約2モル当量の酸化合物と1モル当量のジアミンとを含むジアミン塩を含む、請求項11記載のアミン塩化合物。
請求項1から10のいずれか一項記載の化合物と、医薬として許容し得る賦形剤とを含む医薬組成物。
対象におけるCRTH2関連の疾患又は障害を治療する方法であって、請求項1から10のいずれか一項記載の有効量の化合物を、投与の必要のある対象に投与することを含む、前記方法。
CRTH2関連の疾患又は障害が、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性結膜炎、チャーグ・ストラウス症候群、副鼻腔炎、好塩基球性白血病、慢性蕁麻疹、又は好塩基球性白血球増加症である、請求項14に記載の方法。
CRTH2関連の疾患又は障害が、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、又はアレルギー性結膜炎である、請求項15に記載の方法。
前記化合物が式Iを有する、請求項15に記載の方法。
前記化合物が式IIを有する、請求項15に記載の方法。
喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性結膜炎、チャーグ・ストラウス症候群、副鼻腔炎、好塩基球性白血病、慢性蕁麻疹、又は好塩基球性白血球増加症の治療のための、請求項1から10のいずれか一項記載の化合物。