JP2010511034A - 第Ｘａ因子阻害剤としての（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝ - Google Patents

Abstract

（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝薬剤組成物、方法および哺乳動物における、異常な血栓形成によって特徴付けられる疾患を治療するための化合物またはそれらの薬剤組成物の使用方法。（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の結晶形態もまた記載される。式（Ｉ）：
【化１】

Description

本発明は、第Ｘａ因子阻害剤の鏡像異性体、その鏡像異性体を含む薬剤組成物および哺乳動物における異常な血栓形成によって特徴付けられる疾患を治療する治療薬としてのそれらの使用方法に関する。

全世界において、虚血性心疾患および脳血管疾患は、主要な死亡原因である。血管内での異常な凝固および不適切な血栓形成は、多くの急性の循環器疾患を引き起こす。

トロンビンは、凝固カスケードにおいて鍵酵素または主要な調節酵素とみなすことができる；これは通常の止血において正または負両方のフィードバックレギュレータとして多数の役割を果たす。しかし、いくつかの病状において、正のフィードバック調節は、トロンビン生成に必要な補因子の触媒活性化により広がる。このような補因子としては、第Ｘａ因子、凝固カスケードにおいて極めて重要な位置を占めるセリンプロテアーゼが挙げられる。

血管内での異常な凝固および不適切な血栓形成は、心筋梗塞症、心筋虚血、心房性細動に関連する発作、深部静脈血栓症（ＤＶＴ）、肺塞栓症、脳虚血または梗塞症、末梢動脈障害、再狭窄、アテローム性動脈硬化症および血栓塞栓症のような多くの循環器疾患を引き起こす。さらに、血栓形成は、癌、糖尿病、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および敗血症のような非循環器疾患と関連している。現在のところ、いくつかのこれらの状態は、抗血栓症薬を用いて治療されている。しかし、これらの薬剤の多くは、出血から身を守るために、患者の厳しい監視を必要とする。近年、第Ｘａ因子阻害剤が持続した抗血栓症保護を提供し得ることがわかってきた。動物実験において、第Ｘａ因子への短時間の暴露が持続した抗血栓症効果を提供する。第Ｘａ因子の阻害は、潜在的に抗血栓効果と出血傾向との間の大きな治療域を生じることをデータは示す。その結果として、現在の入手可能な薬物と異なり、出血に対する患者の感受性を同時に増加させることなく第Ｘａ因子阻害が達成される範囲が存在し得る。

敗血症は急性炎症の複合性拡張（ｃｏｍｐｌｅｘ ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ）であり、そして凝固および炎症の進行性の拡大連鎖に関与している。この疾患の進行において、凝固系の深い関与が、抗血栓剤を含む治療につながる。しかし、現在入手可能な抗血栓剤は疾患の適切な治療を提供しない。

悪性腫瘍と血栓形成との間の関連は周知である。新規知見は、第Ｘａ因子が血栓形成および止血におけるその役割とは独立して、腫瘍転移において役割を果たすことを示している。

新規知見は、第Ｘａ因子がタンパク質分解活性受容体（ＰＡＲ）を介して、多くの細胞応答作用に影響し得ることを示している。慢性閉塞性肺疾患ＣＯＰＤにおいて、ＰＡＲは間接的に役割を果たすことを示している。

臨床的な冠動脈疾患を既往していない２型糖尿病患者は、心筋梗塞症の既往がある非糖尿病被験体と同様に冠状動脈性心臓病により瀕死の状態となる可能性を有する。心血管系の危険因子（高血圧症、脂質異常症、高インスリン血症、高血糖症、肥満が挙げられる）ならびにフィブリノゲン過剰血症およびプラスミノーゲン活性化因子阻害剤−１の増大したレベルのような止血危険因子のクラスタリングは、糖尿病における心血管系の増大した危険の一因となる。これらの危険因子が組み合わさることで、致命的な血栓状態をもたらし、この状態は第Ｘａ因子阻害剤を用いる治療により効果的に低減し得る。

従って、第Ｘａ因子のタンパク質分解活性を調節するなお効果的な薬剤が依然として必要とされていることは明白である。

本発明は、（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝およびそれらの薬剤組成物を包含する。本発明はまた、哺乳動物における異常な血栓形成により特徴付けられる疾患を治療するための本発明の化合物の使用方法に関する。本発明は、さらに（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミドの結晶形態に関する。

（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキシ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の式を以下に示す。

本発明の１つの実施形態は、（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋である化合物（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝である。

本発明の別の実施形態は、薬学的に受容可能な担体、添加剤または賦形剤および（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋である（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を含む薬剤組成物である。

本発明の別の実施形態は、血栓性疾患または塞栓性疾患の治療が必要な患者における血栓性疾患または塞栓性疾患の治療方法であり、治療有効量の（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋である（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を投与することを包含する。

本発明の別の実施形態は、転移性疾患（ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）の治療が必要な患者の生存期間を延長するための、転移性疾患を有する患者の治療方法であり、治療有効量の（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋である（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を投与することを包含する。

本発明の別の実施形態は、敗血症の治療が必要な患者における敗血症の治療方法であり、治療有効量の（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋である（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を投与することを包含する。

本発明の別の実施形態は、（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の結晶形態Ａ（形態Ａ）である。形態Ａは、計算粉末Ｘ線回折（計算ＰＸＲＤ）パターン（図４）により特徴付けられる。

時間関数に対するラセミ化合物のキラルクロマトグラフィーからの溶出パターンである。 キラル分離後の時間関数に対する（Ｒ）鏡像異性体の溶出パターンである。 時間関数に対するキラル合成（Ｒ）鏡像異性体のキラルクロマトグラフィーからの溶出パターンである。 形態Ａの計算ＰＸＲＤの回折図形（ｄｉｆｆｒａｃｔｏｇｒａｍ）である。 形態Ａの実験ＰＸＲＤの回折図形である。 形態Ａの計算ＰＸＲＤおよび実験ＰＸＲＤのオーバーレイ回折図形である。

定義
患者は、ヒトさらに他の哺乳動物を含む。

治療は、治療および／または予防的治療を含む。

予防的治療とは、治療が必要な患者における血栓性疾患のリスクを予防または緩和するための治療を意味する。

治療とは、治療が必要な患者における既存の障害の治療を意味する。

患者は治療または予防的治療を必要とし得る。当業者は、治療において、いつ本発明の化合物を投与すべきか、そして血栓性疾患を有する患者を本発明の化合物を用いてどのように治療すべきか承知である。

「ＤＶＴ」とは深部静脈血栓症を意味する。ＰＥとは肺塞栓症を意味する。ＶＴＥとは静脈血栓塞栓症を意味する。

「一次性ＤＶＴ」とは、ＤＶＴの既往歴のない患者において生じるＤＶＴを意味する。

「二次性ＶＴＥ」とは、ＤＶＴまたはＰＥの既往歴のある患者におけるＤＶＴまたはＰＥの再発、またはＤＶＴの既往歴のある患者におけるＰＥの発生を意味する。

「実質的に純粋」とは、（Ｒ）鏡像異性体が（Ｓ）鏡像異性体よりも多く存在する５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の調製のことをいう。

用語「（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝」および「（Ｒ）鏡像異性体」は同じ意味で用いられる。

用語「（Ｓ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝」および「（Ｓ）鏡像異性体」は同じ意味で用いられる。

動脈塞栓症としては、肺塞栓症、心筋梗塞症および脳梗塞が挙げられるが、これらに限定されない。

静脈塞栓症としては、深部静脈血栓症および腹腔内静脈血栓症が挙げられるが、これらに限定されない。

用語「添加剤」とは、本発明の化合物以外の任意の成分を記載するために本明細書中で使用される。添加剤の選択は、特定の投与様式に大きく依存する。

用語「多形体」および「結晶多形」および「結晶形態」は本明細書中で同じ意味で用いられる。

用語「多形相」および「多形体」は本明細書中で同じ意味で用いられる。

「形態Ａ」、「形態Ａ多形体」、「結晶形態Ａ」および「（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の形態Ａ多形体」は同じ意味であり、そして本明細書中で同じ意味で用いられる。

（１，２−ピロリジンジカルボキシアミド，（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝に適用される場合、用語「結晶形態」、「多形相」または「多形体」とは、（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の１分子が、Ｘ線照射を受けた場合、特徴のある回折ピークを生じる区別できる結晶格子を形成するように配置された固体形成をいう。

ＰＸＲＤと関連して用いられ、本明細書中で使用される場合、用語「パターン」および「回折図形」は同じ意味を有する。

「計算ＰＸＲＤ」および「予測ＰＸＲＤ」とは同じ意味であり、そして本明細書中で同じ意味で用いられる。

実験ＰＸＲＤおよび粉末ＰＸＲＤとは同じ意味であり、そして本明細書中で同じ意味で用いられる。

化合物は異なる物理的形状で存在してもよい。例えば、本化合物は、固体、液体またはガスとして存在してもよい。固体形体は、非晶質であっても、または特異的な結晶形態として存在してもよい。異なる結晶形態は、しばしば異なる物理的性質（すなわち、バイオアベイラビリティー、溶解度、融点など）を有する。

これらの異なる結晶形態を多形体と呼ぶ。多形体の構造を決定する方法の１つは、単結晶Ｘ線解析である。この解析において、化合物の結晶状態をいくつかの結晶学的パラメータにより記載し、このパラメータとしては、単位格子寸法、空間群およびその単位格子の基点と比較した化合物における全ての原子の原子配置が挙げられる。単結晶Ｘ線解析のより詳細な議論は、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｔａｂｌｅｓ ｆｏｒ Ｘ−ｒａｙ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｙ，Ｖｏｌ．ＩＶ，ｐｐ．５５，９９，１４９ Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ：Ｋｙｎｏｃｈ Ｐｒｅｓｓ，１９７４，Ｇ．Ｍ．Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，ＳＨＥＬＸＴＬ．Ｕｓｅｒ Ｍａｎｕａｌ，Ｎｉｃｏｌｅｔ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．，１９８１およびＣｒｙｓｔａｌ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｂｙ Ｇｌｕｓｋｅｒ，ａｎｄ Ｔｒｕｅｂｌｏｏｄ，第２編；Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８５に見出され得る。

単結晶Ｘ線解析は、１つの結晶がＸ線ビーム中に配置される場合である。単結晶の構造の決定において生じるデータにより、当業者は粉末Ｘ線回折パターン（計算ＰＸＲＤ）を計算することが可能である。通常、単結晶実験は単位格子寸法、空間群および原子配置を決定するので、この換算は可能である。これらのパラメータは、特定の多形体についての粉末パターンを計算する基礎を提供する。

多形体の構造を決定するための別の方法は、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）である。ＰＸＲＤ解析は、結晶群からの結晶学的データの収集に関連する。ＰＸＲＤ解析を行うために、結晶質の粉末試料をホルダーに置き、次いで回折計に配置する。Ｘ線ビームを始めにホルダーの平面に対して小角度で試料に当て、次いで入射ビームとホルダーの平面との間の角度を連続して増加させ、弧を移動させる。反射される放射線の強度を記録する。これらのデータをＰＸＲＤパターンとしてグラフ形状で表すことができる。

このような粉末Ｘ線解析に関連する測定差は、以下に挙げられる様々な因子に起因する：（ａ）試料調製の誤差（例えば、試料の高さ）、（ｂ）機器誤差（例えば、平面試料の誤差）、（ｃ）較正誤差、（ｄ）操作誤差（ピーク位置を決定する場合に起こる誤差を含む）、（ｅ）物質の性質（例えば、好ましい方向性および透明度の誤差）、（ｆ）化合物ロット間差および（ｇ）機械の種類。較正誤差および試料の高さの誤差、ロット間変動および機械の種類の差は、しばしば、同方向における全ピークのシフトをもたらす。これらのシフトは、Ｘ線回折図形から同定することができ、そしてシフトを補正する（すべてのピーク位置値に系統的補正係数を適用する）または機器を再較正することにより無視することができる。一般に、この補正係数は、０〜０．２度２θの範囲である。

本発明の１つの実施形態は、（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋であり、好ましくは（Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１、より好ましくは１７：３、より好ましくは９：１、より好ましくは１９：１、最も好ましくは９９：１より大きい化合物（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝である。

本発明の１つの実施形態は、薬学的に受容可能な担体、添加剤または賦形剤および（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋であり、好ましくは（Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１、より好ましくは１７：３、より好ましくは９：１、より好ましくは１９：１、最も好ましくは９９：１より大きい（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を含む薬剤組成物である。

本発明の別の実施形態は、血栓性疾患または塞栓性疾患の治療が必要な患者における血栓性疾患または塞栓性疾患の治療方法（予防的治療および治療を含む）であり、治療有効量の（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋であり、好ましくは（Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１、より好ましくは１７：３、より好ましくは９：１、より好ましくは１９：１、そして最も好ましくは９９：１より大きい（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を投与することを包含する。血栓性疾患または塞栓性疾患としては、一次性もしくは二次性静脈血栓症、動脈血栓症、静脈塞栓症、動脈塞栓症、肺塞栓症、肺高血圧症、静脈狭窄症、静脈再狭窄、動脈狭窄症、動脈再狭窄、心房性細動、発作、狭心症、糖尿病、癌、心不全、または外傷性傷害、外科処置もしくは内科的疾患による固定が挙げられるが、これらに限定されない。

本発明の別の実施形態は、転移性疾患の治療が必要な患者の生存期間を延長するための、転移性疾患を有する患者の治療方法であって、治療有効量の（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋であり、好ましくは（Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１、より好ましくは１７：３、より好ましくは９：１、より好ましくは１９：１、最も好ましくは９９：１より大きい（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を投与することを包含する。

本発明の別の実施形態は、敗血症の治療が必要な患者における敗血症の治療方法であって、治療有効量の（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋であり、好ましくは（Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１、より好ましくは１７：３、より好ましくは９：１、より好ましくは１９：１、最も好ましくは９９：１より大きい（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を投与することを包含する。

本発明の別の実施形態は、哺乳動物における血栓性疾患を治療または予防的治療する医薬を製造する医薬を製造するための、好ましくは（Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１、より好ましくは１７：３、より好ましくは９：１、より好ましくは１９：１、最も好ましくは９９：１より大きい、実質的に純粋な（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミドの使用である。

本発明の別の実施形態は、（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］の製造方法であり、以下：
工程（ａ）
（１）溶媒および塩基の存在下、式１１：

の化合物をメタクリロイル（ｍｅｔｈａｃｒｙｏｙｌ）クロリドと反応させるか；または
（２）式１１の化合物を塩化リチウム、トリエチルアミンおよび２−メチルアクリル酸無水物と反応させ；
式１２：

の化合物を得；

工程（ｂ）
式１２の化合物をトリメチルシリルジアゾメタンと反応させ、希酸で処理し、そして単離して、式１３：

の化合物を得；

工程（ｃ）
溶媒中、式１３の化合物をイソシアネートおよび中程度の塩基で処理し、式１４：

の化合物を得；

工程（ｄ）
キラル補助基を除去し、式１５：

の化合物を得；そして

工程（ｅ）
式１５の化合物を式３：

の化合物とカップリングさせ、所望の化合物を得ることを包含する。

本発明の別の実施形態は、（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の結晶形態Ａである。形態Ａは、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンにより特徴付けられる（表４）。

本発明の他の実施形態としては、以下が挙げられるが、これに限定されない：５．４、７．２、９．４、１０．９、１５．６、１９．６、２１．７または２３．３度２θで少なくとも１つのピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態；
１９．６および２１．７でピークを有し、そして７．２、９．４、１０．９、１５．６または２３．３度２θで１つまたはそれ以上のさらなるピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態；
１０．９、１９．６および２１．７でピークを有し、そして７．２、９．４、１５．６または２３．３度２θで１つまたはそれ以上のさらなるピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態。

活性測定
ヒト第Ｘａ因子触媒活性の阻害剤として作用する化合物の能力を、発色性基質Ｓ２７６５（Ｎ−ＣＢｚ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｌ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド．２ＨＣｌ）を切断するヒト第Ｘａ因子の５０％能力（ＩＣ₅₀）で阻害する試験化合物の濃度を測定することによって評価することができる。

製剤
薬物成分
本発明の化合物は、完全な非晶質から完全な結晶の範囲での固体状態の連続体で存在し得る。本発明の化合物はまた、非溶媒和形体および溶媒和形体で存在し得る。用語「溶媒和」は、本発明の化合物および１種またはそれ以上の薬学的に受容可能な溶媒分子（例えば、エタノール）を含む分子複合体を記載するために、本明細書中で使用される。用語「水和物」は、前記溶媒が水である場合に使用される。本発明の化合物はまた、適した条件に曝された場合、中間状態（中間相または液晶）で存在し得る。詳しくは、Ｎ．Ｈ．Ｈａｒｔｓｈｏｒｎｅ ａｎｄ Ａ．ＳｔｕａｒｔによるＣｒｙｓｔａｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ｐｏｌａｒｉｚｉｎｇ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ第４編（Ｅｄｗａｒｄ Ａｒｎｏｌｄ，１９７０）を参照のこと。

個々の鏡像異性体を製造／単離するための従来技術としては、適した光学的に純粋な前駆体からのキラル合成または例えば、キラル相を用いるクロマトグラフィー（擬似移動床（ＳＭＢ）、キラル高速液体クロマトグラフィーが挙げられるが、これらに限定されない）を使用するラセミ体の分割（ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）；適したキラル酸または塩基を用いるジアステレオマー塩の形成および結晶化による鏡像異性（ｅｎａｔｉｏｍｅｒｉｃ）富化が挙げられる。

製剤
本発明の化合物を送達するのに適した薬剤組成物およびそれらの製造方法は、当業者には容易に明らかである。このような組成物およびそれらの製造方法は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１９編（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９５）に見出され得る。本発明の化合物は、任意の適した経路により投与され得る。化合物および組成物は、例えば、経口、経腸、非経口または局所的に投与され得る。本発明の化合物を、即時および／または調節放出するように製剤し得る。調節放出製剤には、遅延放出、持続放出、拍動放出、制御放出、標的放出およびプログラム放出が含まれる。

経口投与
本発明の化合物は、経口投与され得る。経口投与には、化合物を胃腸管に入れるような嚥下、および／または化合物を口から直接血流に入れる口腔内投与、舌もしくは舌下投与が含まれ得る。

経口投与に適した製剤としては、例えば、錠剤のような固体、半固体および液体系；マルチ粒子もしくはナノ粒子、液体または粉末を含む軟または硬カプセル剤；トローチ剤（液体充填を含む）；チュアブル錠（ｃｈｅｗｓ）；ゲル剤；急速分散投与形態；フィルム剤；スプレー剤；およびバッカル剤／粘膜接着貼付剤が挙げられる。

液体製剤としては、懸濁剤、液剤、シロップ剤およびエリキシル剤が挙げられる。このような製剤は、軟または硬カプセル剤（例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース製）中の充填物として使用でき、そして典型的には、担体、例えば水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロースまたは適切な油ならびに１種またはそれ以上の乳化剤および／または懸濁化剤を含む。液体製剤はまた、例えば、サシェから固体を再調製することにより調製し得る。

本発明の化合物はまた、Ｌｉａｎｇ ａｎｄ ＣｈｅｎによるＥｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐａｔｅｎｔｓ、１１（６）、９８１〜９８６（２００１）に記載されている投与形態のような速溶性、速崩壊性の投与形態で使用し得る。

錠剤投与形態のために、用量に応じて、薬物は、投与形態の１質量％〜８０質量％、より典型的には投与形態の５質量％〜６０質量％を構成し得る。薬物に加えて、錠剤は、一般に、崩壊剤を含む。崩壊剤の例としては、デンプングリコール酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、微結晶セルロース、低アルキル置換度ヒドロキシプロピルセルロース、デンプン、α化デンプンおよびアルギン酸ナトリウムが挙げられる。一般に、崩壊剤は、投与形態の１質量％〜２５質量％、好ましくは５質量％〜２０質量％を構成する。

一般に、結合剤は、錠剤製剤に粘着性を付与するのに使用される。適した結合剤としては、微結晶セルロース、ゼラチン、糖、ポリエチレングリコール、天然および合成ゴム、ポリビニルピロリドン、α化デンプン、ヒドロキシプロピルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースが挙げられる。錠剤はまた、ラクトース（一水和物、噴霧乾燥一水和物、無水物など）、マンニトール、キシリトール、デキストロース、スクロース、ソルビトール、微結晶セルロース、デンプンおよび二塩基性リン酸カルシウム二水和物のような賦形剤を含み得る。

錠剤はまた、場合によって、ラウリル硫酸ナトリウムおよびポリソルベート８０のような界面活性剤ならびに二酸化ケイ素およびタルクなどの流動促進剤を含み得る。存在する場合、界面活性剤は、錠剤の０．２質量％〜５質量％を構成し得、そして流動促進剤は、錠剤の０．２質量％〜１質量％を構成し得る。

一般に、錠剤はまた、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリルフマル酸ナトリウムならびにステアリン酸マグネシウムとラウリル硫酸ナトリウムとの混合物のような滑沢剤を含む。滑沢剤は、一般に、錠剤の０．２５質量％〜１０質量％、好ましくは０．５質量％〜３質量％を構成する。

他の可能な成分としては、例えば、抗酸化剤、着色剤、着香剤、保存剤および味マスキング剤が挙げられ得る。

例示的な錠剤は、約８０％までの薬物、約１０質量％〜約９０質量％の結合剤、約０質量％〜約８５質量％の賦形剤、約２質量％〜約１０質量％の崩壊剤および約０．２５質量％〜約１０質量％の滑沢剤を含む。

錠剤ブレンドを、直接またはローラーにより圧縮して、錠剤を成形し得る。代替的には、錠剤ブレンドまたはブレンドの一部を湿潤−、乾燥−もしくは溶融−顆粒化するか、溶融凝固させるか、または押し出して、その後打錠する。最終製剤は、１つまたはそれ以上の層を含んでもよく、そして被覆されていても、被覆されていなくてもよい；これをさらに、カプセル封入してもよい。錠剤の製剤は、Ｈ．Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ ａｎｄ Ｌ．ＬａｃｈｍａｎによるＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，Ｖｏｌ．１（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８０）で議論されている。

ヒトまたは家畜に使用するための消耗性経口フィルムは、典型的には、柔軟な水溶性または水膨潤性薄膜投与形態であり、これは、迅速に溶解するか、粘膜接着性であり得、そして典型的には、本発明の化合物、膜形成ポリマー、結合剤、溶媒、湿潤剤、可塑剤、安定剤または乳化剤、粘度調節剤および溶媒を含む。製剤のいくつかの成分が、２以上の機能を果たし得る。フィルム形成ポリマーは、天然多糖類、タンパク質または合成親水コロイドから選択され得、そして典型的には、０．０１〜９９質量％の範囲、より典型的には、３０〜８０質量％の範囲で存在する。他の可能な成分としては、抗酸化剤、着色剤、着香剤およびフレーバーエンハンサー（ｆｌａｖｏｕｒ ｅｎｈａｎｃｅｒ）、保存剤、唾液刺激剤、冷却剤、共溶媒（油を含む）、皮膚軟化剤、増量剤、消泡剤、界面活性剤および味マスキング剤が挙げられる。

非経口投与
本発明の化合物はまた、血流中、筋肉中または内部器官に直接投与され得る。非経口投与に適した手段としては、静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、心室内、尿道内、胸骨内（ｉｎｔｒａｓｔｅｒｎａｌ）、頭蓋内、筋肉内、滑液嚢内および皮下が挙げられる。非経口投与に適したデバイスとしては、例えば、針（極微針を含む）注射器、針なし注射器、注入技術およびステントが挙げられる。

非経口製剤は、典型的には、塩、炭水化物および緩衝剤（好ましくはｐＨ３から９）のような添加剤を含み得る水溶液であるが、いくつかの用途のために、より適切には、滅菌非水溶液として、または滅菌した発熱物質不含水のような適したビヒクルと共に使用される乾燥形態として製剤され得る。

本発明の化合物を、懸濁剤として、または本発明の化合物の調節放出をもたらす移植デポーとして投与するための固体、半固体またはチキソトロピー液として製剤し得る。このような製剤の例としては、薬物被覆ステントおよび半固体ならびに薬物充填ポリ（ｄｌ−乳酸−コグリコール）酸（ＰＧＬＡ）微小球を含む懸濁液が挙げられる。

局所投与
本発明の化合物はまた、皮膚または粘膜に局所、皮膚（皮内）または経皮投与され得る。この目的ための典型的な製剤としては、ゲル、ヒドロゲル、ローション、溶液、クリーム、軟膏、散布剤、包帯剤、フォーム剤、フィルム剤、皮膚パッチ、ウェハー、インプラント、スポンジ、繊維、帯具およびマイクロエマルションが挙げられる。リポソームもまた使用され得る。典型的な担体としては、アルコール、水、鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、グリセリン、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコールが挙げられる。浸透促進剤を導入してもよい−例えば、Ｆｉｎｎｉｎ ａｎｄ ＭｏｒｇａｎによるＪ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ、８８（１０）、９５５〜９５８（Ｏｃｔｏｂｅｒ １９９９）を参照のこと。

吸入／鼻腔内投与
本発明の化合物はまた、鼻腔内または吸入により、典型的には乾燥粉末吸入器からの乾燥粉末の形態で（単独で、混合物として、例えば、ラクトースとの乾燥ブレンドで、または例えば、ホスファチジルコリンのようなリン脂質と混合した混合成分粒子として）、１，１，１，２−テトラフルオロエタンまたは１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパンのような適した高圧ガスを使用するか、または使用しない、加圧容器、ポンプ、スプレー、噴霧器（好ましくは霧状ミストを生じさせるために電磁流体力学を使用する噴霧器）またはネブライザからのエアロゾルスプレーとして、または点鼻液として投与することができる。鼻腔内使用について、粉末は、生体接着剤、例えば、キトサンまたはシクロデキストリンを含み得る。

投与量
本発明の化合物を、１日当たり０．１〜２，０００ｍｇの範囲の投与量レベルで患者に投与し得る。別の実施形態において、本発明の化合物を、１日当たり０．０１〜３００ｍｇの範囲で患者に投与する。別の実施形態において、本発明の化合物を、１日当たり０．０１〜１５０ｍｇの範囲の投与量レベルで患者に投与する。別の実施形態において、本発明の化合物を、１日当たり０．１〜１００ｍｇ、１日当たり０．１〜５０ｍｇ、１日当たり０．１〜２５ｍｇ、１日当たり０．０１〜１０ｍｇの範囲の投与量レベルで患者に投与する。使用される具体的な投与量は変動することができる。例えば、投与量は、多数の因子（患者の要求、治療される状態を含む）に依存し得る。個々の患者に対する最適な投与量の決定は、当業者に周知されている。

同時投与
本発明の化合物を、種々の状態または病状の治療において、単独または他の治療薬と組み合わせて投与し得る。本発明の化合物および他の治療薬を同時に（同じ剤形または別々の剤形のいずれかで）または連続して投与し得る。２種またはそれ以上の化合物の「組み合わせ」投与とは、一方の存在が他方の生物的効果を変更させるのに厳密に十分な期間内に、２種の化合物を投与することを意味する。２種またはそれ以上の化合物を、同時に、併用してまたは連続して投与し得る。さらに、投与前に化合物を混合することにより、または同じ時点であるが、異なる解剖学的部位に化合物を投与するか、または異なる投薬経路を使用することにより、同時投与し得る。語句「併用投与」、「共同投与（ｃｏ−ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」、「同時投与（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」および「同時に投与した」とは、 化合物を組み合わせて投与することを意味する。

１つの実施形態において、本発明の化合物を経口抗血小板薬と同時投与し得、経口抗血小板薬としては、ジピリダモール、シロスタゾールおよびアナグレリド塩酸塩（ａｎｅｇｒｉｌｉｄｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。なお別の実施形態において、本発明の化合物をアスピリンと同時投与し得る。

別の実施形態において、本発明の化合物を糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ阻害剤と同時投与し得、糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ阻害剤としては、アブシキシマブ、エプチフィバチドおよびチロフィバンが挙げられるが、これらに限定されない。なお別の実施形態において、本発明の化合物をエプチフィバチドと同時投与し得る。別の実施形態において、本発明の化合物を血小板凝集を治療するのに有用な治験化合物と同時投与し得、この治験化合物としては、ＢＡＹ ５９−７９３９、ＹＭ−６０８２８、Ｍ−５５５３２、Ｍ−５５１９０、ＪＴＶ−８０３およびＤＸ−９０６５ａが挙げられるが、これらに限定されない。

本発明の実施形態を説明または記載するが、これらの実施形態は本発明の全ての可能な実施形態を説明および記載しているわけではない。どちらかといえば、本明細書中で使用される語は、限定よりもむしろ説明の語であり、そして本発明の精神および範囲から逸脱することなく種々の変更がなされ得ることが理解される。

一般的な合成スキーム
Ｂｉｇｇｅ ｅｔ ａｌ．に対する米国特許出願番号ＵＳ２００３／０１６２７８７は、５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の合成についての一般的な合成スキームを開示する。

本明細書中で使用される出発物質は、市販されているか、または当該分野で公知の定法（ＣＯＭＰＥＮＤＩＵＭ ＯＦ ＯＲＧＡＮＩＣ ＳＹＮＴＨＥＴＩＣ ＭＥＴＨＯＤＳ，Ｖｏｌ．Ｉ−ＶＩ（Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅにより発行）のような標準参考書に開示される方法のようなもの）により製造し得る。本発明の化合物を、一般的な合成スキームに説明される方法および以下に詳述される実験手順を使用して製造し得る。一般的な合成スキームは説明する目的のために示され、限定するものではない。

（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の製造方法の１つをスキームＡに示す。
スキームＡ

１−Ｈ−ピリジン−２−オン（１）を、ＤＭＦのような溶媒中、２−フルオロ−４−ブロモアニリンおよび炭酸カリウムのような塩基、およびＣｕＩと混合し、１−（４−アミノ−３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピリジン−２−オン（３）を得る。テトラヒドロフランまたは酢酸エチルのような溶媒中、０℃〜室温の温度で、メタクリロイル（ｍｅｔｈａｃｒｙｏｙｌ）（４）クロリドおよび塩基（例えば、飽和含水重炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウム）を添加することにより、アニリン（３）をアクリルアミド（５）に変換する。クロロホルム、塩化メチレンまたは酢酸エチル（ｅｔｈｙｌａｃｅｔｅｔａｔｅ）のような溶媒中、トリメチルシリルジアゾメタンをアクリルアミド（５）に添加する。トリフルオロ酢酸、酢酸またはフッ化水素酸のような酸を添加した後、ピラゾリン（６）を単離する。次いで、トリエチルアミンのようなアミン塩基の存在下、クロロホルムのような溶媒中、ピラゾリンをイソシアネート（７）と反応させ、必要な化合物のラセミ混合物（８）を得る。次いで、例えば、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳカラム^(R)上、アセトニトリル／メタノール中でのクロマトグラフィーにより鏡像異性体の混合物を分離し、（Ｒ）鏡像異性体（９）および（Ｓ）鏡像異性体（１０）を得る。

スキームＢ
（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝のキラル合成をスキームＢに示す。

トルエンのような適した溶媒中の（１Ｓ）−（−）−２，１０−カンファースルタム（１１）の溶液に、水素化ナトリウムを添加し、そして混合物を撹拌した。メタクリロイル（Ｍｅｔｈａｃｒｙｏｙｌ）クロリドを反応混合物に直接添加し、次いで生成物（１２）を酢酸エチルで抽出することによって単離する。あるいは、Ｈｏ，Ｇｕｏ−Ｊｉｅ；Ｍａｔｈｒｅ，Ｄａｖｉｄ Ｊ．Ｌｉｔｈｉｕｍ−Ｉｎｉｔｉａｔｅｄ Ｉｍｉｄｅ Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ．Ａ Ｓｉｍｐｌｅ Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ Ｎ−Ａｃｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ２−Ｏｘａｚｏｌｉｄｉｎｏｎｅｓ ａｎｄ Ｂｏｒｎａｎｅ−２，１０−Ｓｕｌｔａｍ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９５），６０（７），２２７１−３に記載されるのと同様の方法で、−２０℃〜室温で、スルタムのＴＨＦ溶液を塩化リチウム、トリエチルアミンおよび２−メチルアクリル酸無水物と混合し、次いで濾過し、所望の付加物（１２）を得る。Ｍｉｓｈ，Ｍｉｃｈａｅｌ Ｒ．；Ｇｕｅｒｒａ，Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ Ｍ．；Ｃａｒｒｅｉｒａ，Ｅｒｉｃｋ Ｍ．Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ Ｄｉｐｏｌａｒ Ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｍｅ３ＳｉＣＨＮ２．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ａ Ｎｏｖｅｌ Ｃｌａｓｓ ｏｆ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ：Ａｚａｐｒｏｌｉｎｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ ＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ（１９９７），１１９（３５），８３７９−８３８０に記載のと同様の方法で、このメタクリロイルスルタム付加物（１２）をトリメチルシリルジアゾメタン に添加し、そして混合物を数日間撹拌する。トリフルオロ酢酸 またはフッ化水素酸のような希酸での処理する際、ピラゾリン（１３）をクロマトグラフィーにより単離する。イソシアネート、および含水重炭酸塩のような中程度の塩基で処理し、そして塩化メチレンのような適した溶媒中で撹拌する際、尿素付加物（１４）を単離する。水酸化リチウムのような塩基水溶液で加水分解することにより、キラル補助基を除去し、（１５）を形成する。次いで、ピリジンと塩化チオニルのような脱水条件下でカルボン酸をアニリン（３）とカップリングさせ、必要なアミド（９）を得る。

第Ｘａ因子阻害活性
鏡像異性体の合成および分離に従って、各鏡像異性体を実施例３に記載されるように、そのＩＣ₅₀にいついてアッセイし、結果を以下の表１に示す。

単結晶Ｘ線解析
加熱／冷却により、ニトロメタン溶液から（Ｒ）鏡像異性体の単結晶を成長させ、Ｘ線構造測定に適した単結晶を得た。典型的な結晶を調べ、そして周囲温度でＡＰＥＸ（Ｂｒｕｋｅｒ−ＡＸＳ）回折計を使用してデータを収集した。ＳＨＥＬＸＴＬソフトウェアパッケージにより、全ての結晶学的計算を容易にした。結晶構造を解明し、そして単斜晶空間群、Ｐ２₁に精密化した。立体中心をフラックパラメータから決定した。フラックパラメータは、−０．０１３４（この構造について）ｖｓ．０．８１（逆構造について）であった。精密化した構造は、最終Ｒ−指数５．４５％を有するデータと十分適合し、そして最終差フーリエにおいて観察される電子密度は欠けているところがないか、または間違ってはいない。結晶構造からの非対称ユニットにより、分子構造および（Ｒ）鏡像異性体のキラリティーを確認する。

表２〜８は単結晶Ｘ線解析から得られたデータを提供する。

表２は、結晶構造および精密化についての一般的な情報を要約する。

表３は、（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝についての原子座標（１０⁴）および同等の等方性置換パラメータ（Ų×１０³）を提供する。Ｕ（ｅｑ）は、直交化Ｕｉｊテンソルのトレースの３分の１として定義する。

表４は、結合長［Å］および角度［°］を提供する。

表５は、異方性置換パラメータ（Ų×１０³）を提供する。異方性置換因子の指数は、式：−２π²［ｈ²ａ^*2Ｕ¹¹＋…＋２ｈｋａ^*ｂ^*Ｕ¹²］をとる。

表６は、水素座標（×１０⁴）および等方性置換パラメータ（Ų×１０³）を提供する。

表７は、ねじれ角度［°］を提供する。

表８は、水素結合［Åおよび°］を示す。

このデータを使用して、計算粒子パターンを生成した。Ａｃｃｅｌｒｙｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（２００４）によるＭＳ Ｍｏｄｅｌｉｎｇソフトウェアパッケージバージョン４．０．０．０により、図４に示される回折図形を生成した。この試料が多形体の代表的なものであることの証拠として、この計算された粉末パターンをバルク材の以前のロットと比較した。

実験ＰＸＲＤ
試料をバイアルから取り出し、そしてアルミニウムホルダー中のゼロバックグラウンド（ｚｅｒｏ−ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ）シリコン上に押し付けた。試料幅は５ｍｍ。試料を室温で保管し、そして走行させた。データ収集の間、垂直軸の周り、４０ｒｐｍで試料を回転させた。４０ ｋＶおよび４０ｍＡで作動するＣｕＫα放射線を用いるＲｉｇａｋｕ（Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ）Ｕｌｔｉｍａ−ｐｌｕｓ回折計で、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）データを収集した。ＮａＩシンチレーション検出器により、回折放射を検出した。２θ内で３．００°〜４５．００°、１°／分：１．２ 秒／０．０２°ステップの走査速度で連続θ／２θ結合型走査により試料を走査した。６位置のオートサンプラーを備えたＩＢＭコンパチブルインタフェース、ソフトウェア＝Ｒｉｇ Ｍｅａｓ ｖ２．０（Ｒｉｇａｋｕ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ １９９５）およびＥｘｃｅｌ（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｏｆｆｉｃｅ Ｅｘｃｅｌ ２００３ Ｖｅｒｓｉｏｎ １１．６３５５．６３６０）ＣｕＫ_a放射線（４０ｍＡ、４０ｋＶ、λ＝１．５４１９Å）を用いて、データを収集した。０．５°のスリットＩおよびＩＩ、０．６°のスリットＩＩＩ。試料を室温で収集した。

図５は実験ＰＸＲＤの回折図形を示す。下部回折図形（ｄｅｆｒａｃｔｏｇｒａｍ）は計算ＰＸＲＤに対応し、そして上部回折図形（ｄｅｆｒａｃｔｏｇｒａｍ）は実験ＰＸＲＤに対応する実験および計算ＰＸＲＤパターンのオーバーレイを図６に示す。

表９は、計算パターン中で検出された特性ピークを示す。

実施例１
（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝
工程１．１−（４−アミノ−３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピリジン−２−オン（３）の合成

窒素下、機械的撹拌機および還流冷却器を備える３リットルの四つ口フラスコに、ジメチルホルムアミド（１．５Ｌ）中４−ブロモ−２−フルオロアニリン（２）（５１０ｇ、２．６８４ｍｏｌ）、２−ヒドロキシピリジン（１）（２８０ｇ、２．９４９ｍｏｌ）、粉末炭酸カリウム（２２１ｇ、１．６０２ｍｏｌ）およびヨウ化銅（Ｉ）（２５ｇ、０．１３１ｍｏｌ）の混合物を満たした。混合物を１２５〜１３０℃（穏やかな還流）で加熱しながら２２時間撹拌した。反応の進行をＴＬＣにより追跡した。真空中で、溶媒（約８００ｍＬ）を蒸留して除去した。濃厚残留物を室温まで冷却し、そして激しく撹拌しながら１５％ ＮＨ₄ＯＨ（１Ｌ）を添加した。水（１．５Ｌ）を添加し、そして得られた懸濁液を１０〜１５℃（氷浴）で１時間撹拌し、そして濾過した。固体を水（１．５Ｌ）で洗浄し、そして吸引下でプレス乾燥させた。さらに真空中、３５℃で１８時間乾燥させ、生成物（３）（４０４ｇ、７３．８％）を得た。濾液から、さらに生成物を得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）ｐｐｍ：７．５５（ｄ，１Ｈ），７．４（ｔ，１Ｈ），７．０５（２ｄ，１Ｈ），６．７５−６．９（ｍ，２Ｈ），５．３５（ｓ，２Ｈ）。

工程２．Ｎ−［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−２−メチル−アクリルアミド（５）の合成

手順：１０Ｌの容器にテトラヒドロフラン（３．７５Ｌ）中の１−（４−アミノ−３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピリジン−２−オン（３）（３６３ｇ、１．７７ｍｏｌ）の混合物を添加した。機械的に撹拌した混合物を氷−アセトン浴で０℃まで冷却し、そして炭酸カリウム（４５０ｇ、３．２７ｍｏｌ）水溶液（２．２５Ｌ）を添加した。＜１０摂氏温度のメタクリロイルクロリド（４）（３７０ｇ、３．５５ｍｏｌ）をストリームで２時間かけて添加した。添加の終わる頃に、ほとんどの固体が溶液に溶けていった。得られた混合物を０℃で３時間撹拌した。この間に、固体が分離した。固体を濾過して除去し、そして吸引下でプレス乾燥させた。濾液を濃厚スラリーになるまで真空中で濃縮した。スラリーを濾過し、そして固体を吸引下でプレス乾燥させた。２つの固体を合わせ、溶液が形成されるまで３０℃のジクロロメタン（２．５Ｌ）と共に撹拌した。溶液を室温まで冷却し、そしてブライン（１Ｌ）と共に激しく撹拌した。相を分離し、そして有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、そして約１．５Ｌまで濃縮した。得られた懸濁液を週末にかけて５℃で撹拌し、そして濾過した。固体を冷（５℃）ジクロロメタン（１００ｍＬ）、次いでジエチルエーテル（２５０ｍＬ）で洗浄し、そして吸引下でプレス乾燥させた。さらに真空中、３５℃で１８時間乾燥させ、生成物（５）（３１８ｇ、６６％）を得た。濾液からより低い純度のさらなる物質を得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）ｐｐｍ：９．７（ｓ，１Ｈ），７．６−７．６５（ｍ，２Ｈ），７．４−７．５（ｍ，２Ｈ），７．２（２ｄ，１Ｈ），６．４５（ｄ，１Ｈ），６．２５（ｔ，１Ｈ），５．８５（ｓ，１Ｈ），５．５（ｓ，１Ｈ），１．９（ｓ，３Ｈ）。

工程３．３−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド（６）の合成。

手順：窒素下、機械的撹拌機、２０００ｍＬ均圧管付き滴下ロートおよび温度計を備えた１２Ｌフラスコに、（５）（３８７ｇ、１．４２ｍｏｌ）および塩化メチレン（８．０Ｌ）を満たした。２０〜２１℃の撹拌溶液に、ジエチルエーテル中２Ｍ トリメチルシリルジアゾメタン（１０００ｍＬ、２．０ｍｏｌ、１．４当量）を７５分かけて添加した。得られた混合物を２１〜２２℃で１８時間撹拌した。反応混合物のＭＳ分析により、ＴＭＳ−ピラゾール中間体（Ｍ⁺＝３８６）および（５）の混合物の存在を示した。混合物にジエチルエーテル中２Ｍ トリメチルシリルジアゾメタン（４２３ｍＬ、０．８４６ｍｏｌ、０．６当量）の別のアリコートを３０分かけて添加した。２１〜２２℃で、さらに２２時間撹拌し続けた。反応混合物のＭＳ分析により、所望のＴＭＳ−ピラゾール中間体（Ｍ⁺＝３８６）および少量の（５）（Ｍ⁺＝２７２）の存在を示した。溶液を０℃まで冷却し、そして添加の間、温度が８℃以下になるように維持しながら、トリフルオロ酢酸（３４５ｍＬ、２．０ｍｏｌ、１．４当量）を１．５時間かけて添加した。溶液を０〜５℃で３時間撹拌した。温度が１０℃以下になるように維持しながら、トリエチルアミン（１４００ｍＬ、１０１６ｇ、１０ｍｏｌ）を１．５時間かけて添加した。得られた混合物を濃厚ガム状になるまで真空中で濃縮した。濃厚な生成混合物を酢酸エチル（２Ｌ）中に取り出した。溶液が形成された。溶液に結晶種を入れ（ｓｅｅｄ）、そして５℃で一晩放置した。得られた懸濁液を−１０℃で２時間撹拌した。懸濁液を濾過した。濾過ケーキを冷酢酸エチル（２００ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを吸引下でプレス乾燥させた。真空中、３５℃でさらに乾燥させ、最初の得量（ｃｒｏｐ）として生成物（１７３ｇ、３９％）を得た。濾液を水（１×１０００ｍＬ、１×５００ｍＬ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ₄で乾燥させた。生成溶液を濾過し、そして乾燥剤を廃棄した。有機相を乾燥状態まで真空中で濃縮した。残りの油状物を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に取り出した。懸濁液を−１０℃で２時間撹拌した。懸濁液を濾過した。濾過ケーキを冷酢酸エチル（４０ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを吸引下でプレス乾燥させた。濾過ケーキを真空中３５℃で乾燥させ、生成物（６０．５ｇ、１３．５％）を得た。合わせた水洗浄物を塩化メチレン（１×１０００ｍＬ、１×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出液をＭｇＳＯ₄で乾燥させた。生成溶液を濾過し、そして乾燥剤を廃棄した。有機相を乾燥状態まで真空中で濃縮した。残りの油状物を酢酸エチル（８００ｍＬ）中に取り出した。懸濁液を−１０℃で２時間撹拌した。懸濁液を濾過した。濾過ケーキを冷酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを真空中３５℃吸引下でプレス乾燥させ、生成物（６）（１２５ｇ、２８％）を得た。生成物の全量は１７３＋６１＋１２５＝３５９ｇ（８０％）であった。合わせた生成物のＨＰＬＣ分析：９５％（面積／面積）。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）ｐｐｍ：９．６５（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｔ，１Ｈ），７．６５（ｄ，１Ｈ），７．４５−７．５５（ｍ，２Ｈ），７．２５（ｄ，１Ｈ），７．２（ｓ，１Ｈ），６．７５（ｓ，１Ｈ），６．４５（ｄ，１Ｈ），６．３（ｔ，１Ｈ），２．７−２．９５（２ｄ，２Ｈ），１．３５（ｓ，３Ｈ）．

工程４．５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝（８）の合成

手順：３−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド（６）（１５２．５ｇ、０．４８６ｍｏｌ）、４−クロロフェニルイソシアネート（７）（８２．１ｇ、０．５３５ｍｏｌ）およびテトラヒドロフラン（３．５Ｌ）の撹拌混合物に２２〜２３℃のトリエチルアミン（１０７．５ｇ、１．０６ｍｏｌ）を４０分かけて滴下した。得られた混合物を２２〜２３℃で２１時間撹拌した。この間、混合物は濃厚になり、そして溶液は全く形成されなかった。混合物を約２．５Ｌまで濃縮し、そして残留物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈した。得られた濃厚懸濁液を−１０℃で１時間撹拌し、そして濾過した。固体を酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄し、吸引下でプレス乾燥させ、そして真空中３６℃で７時間さらに乾燥させた。生成物（８）（１６２ｇ、７１％）を得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）ｐｐｍ：９．８（ｓ，１Ｈ），９．２（ｓ，１Ｈ），７．６−７．７（ｍ，３Ｈ），７．３５−７．５（ｍ，２Ｈ），７．３（ｍ，２Ｈ），７．２（ｄ，１Ｈ），７．１５（ｓ，１Ｈ），６．４５（ｄ，１Ｈ），６．２５（ｔ，１Ｈ），３．２（２ｄ，２Ｈ），１．６（ｓ，３Ｈ）。

生成物を、周囲温度でＣｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ（２５０×４．６ｍｍ）で分析し、検出器波長は２３０ ｎｍであり、流速は１．００ｍｌ／分であり、そして移動相はメタノールであった。図１は時間関数としての２つの鏡像異性体の溶出パターンを示す。（Ｓ）−鏡像異性体の保持時間は１０．５分であり、そして（Ｒ）−鏡像異性体の保持時間は１７．８分であった。

工程５．（Ｒ）および（Ｓ）５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の分離

手順：ＢｉｏｔａｇｅカラムをＣｈｉｒａｌＰａｋ ＡＳ樹脂で充填した。移動相は８０％ メタノールおよび２０％ アセトニトリル（ｖ／ｖ）で構成されていた。ラセミ体供給物（ｒａｃｅｍｉｃ ｆｅｅｄ）は７５％ アセトニトリルおよび２５％ メタノール（ｖ／ｖ）中２．０ｇ／Ｌの（８）からなり、１．５Ｌ／分の流速および約５．０ｇ／注入のロードであった。所望のストリーム−第二の溶出化合物を回収した。ラセミ体（４９２ｇ）から、（９）（１７０ｇ）を得、次いで塩化メチレンおよび酢酸エチルで処理した。

生成物を、周囲温度でＣｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ（２５０×４．６ｍｍ）で分析し、検出器波長は２３０ｎｍであり、流速は１．００ｍｌ／分であり、そして移動相はメタノールであった。分析により、物質が９９．８％ キラル純度を有することを示した。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）ｐｐｍ：９．８（ｓ，１Ｈ），９．２（ｓ，１Ｈ），７．６−７．７（ｍ，３Ｈ），７．３５−７．５（ｍ，２Ｈ），７．３（ｍ，２Ｈ），７．２（ｄ，１Ｈ），７．１５（ｓ，１Ｈ），６．４５（ｄ，１Ｈ），６．２５（ｔ，１Ｈ），３．２（２ｄ，２Ｈ），１．６（ｓ，３Ｈ）。

実施例２
（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝
工程１．（３ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−１−メタクリロイル−８，８−ジメチルヘキサヒドロ−３ａ，６−メタノ−２，１−ベンゾイソチアゾール２，２−ジオキシドの合成

手順：（１Ｓ）−（−）−２，１０−カンファースルタム（１．１６０ｇ，５．３８８ｍｍｏｌｅ）のトルエン（１０ｍｌ）溶液に、水素化ナトリウム（オイル中６０％、０．３２３ｇ、８．０８ｍｍｏｌｅ）を添加した。１．５時間撹拌し、メタクリロイル（ｍｅｔｈａｃｒｙｏｙｌ）クロリド（１．１２６ｇ、１０．７８ｍｍｏｌｅ）を反応混合物に直接添加した。室温で一晩撹拌し、エバポレートし、酢酸エチルで抽出し、１Ｎ ＨＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空中でエバポレートし、そしてクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜２０％ ＥｔＯＡｃ）により精製し、所望の化合物（１．２４０ｇ、８１％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ ｐｐｍ ０．９０（ｓ，３Ｈ），１．０８（ｓ，３Ｈ），１．２３（ｍ １Ｈ），１．４２（ｍ，１Ｈ），１．７８（ｍ，５Ｈ），１．８１（ｍ，３Ｈ），３．２６（ｓ，４Ｈ），３．５６（ｄ，Ｊ＝１４．０４Ｈｚ，１Ｈ），３．７７（ｄ，Ｊ＝１４．０４Ｈｚ，１Ｈ），３．９１（ｍ，１Ｈ），５．４８（ｓ，１Ｈ），５．６０（ｓ，１Ｈ）

工程２．（３ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−８，８−ジメチル−１−｛［（５Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−３ａ，６−メタノ−２，１−ベンゾイソチアゾール２，２−ジオキシドの合成

手順：（トリメチルシリル）ジアゾメタンのエーテル（２Ｍ；２０ｍｌ）溶液に、固体（３ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−１−メタクリロイル−８，８−ジメチルヘキサヒドロ−３ａ，６−メタノ−２，１−ベンゾイソチアゾール２，２−ジオキシドを添加し、次いで反応混合物を室温で７２時間撹拌した。溶液が形成された。溶液を真空中でエバポレートし、そして塩化メチレン（５０ｍｌ）で希釈し、０℃まで冷却し、次いでトリフルオロ酢酸（１．２ｍｌ）を滴下した。混合物を０℃で２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍｌ）で希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ₃（２００ｍＬ）で洗浄した。有機相をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、次いで硫酸マグネシウムで乾燥させた。有機溶媒を真空中で除去し、そして生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（溶出液ヘキサン中１０〜１００ ＥｔＯＡｃ）により精製し、次いでエーテルで処理した。生成物を固体（２．９０ｇ、５６％収率）として単離した。旋光度＝２ｍｌ中０．０２０ｇ；ｃ＝０．０１ｇ／ｍｌ｛Ｃ＝１（ＣＨＣｌ₃）｝；測定結果−０．２８７；旋光度＝−０．２８７×４０００／１０＝−１１４．８（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ ２４１ Ｐｏｌａｒｉｍｅｔｅｒを使用する）。

１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δｐｐｍ ０．８７（ｍ，３Ｈ），０．９８（ｓ，３Ｈ），１．２１（ｍ，１Ｈ），１．３２（ｓ，３Ｈ），１．４０（ｍ，１Ｈ），１．７１（ｍ，４Ｈ），１．８５（ｄｄ，Ｊ＝１３．３５，７．７０Ｈｚ，１Ｈ），２．５４（ｄｄ，Ｊ＝１７．１６，１．５６Ｈｚ，１Ｈ），３．１３（ｄｔ，Ｊ＝１７．２０，１．３４Ｈｚ，１Ｈ），３．６４（ｄ，Ｊ＝１４．０４Ｈｚ，１Ｈ），３．７４（ｄ，Ｊ＝１４．０４Ｈｚ，１Ｈ），３．８３（ｄｄ，Ｊ＝７．６０，４．６８Ｈｚ，１Ｈ），６．６２（ｔ，Ｊ＝１．４６Ｈｚ，１Ｈ），６．７８（ｓ，１Ｈ）

工程３．（５Ｒ）−Ｎ−（４−クロロフェニル）−５−｛［（３ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−８，８−ジメチル−２，２−ジオキシドテトラヒドロ−３ａ，６−メタノ−２，１−ベンゾイソチアゾール−１（４Ｈ）−イル］カルボニル｝−５−メチル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキシアミドの合成

手順：（３ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−８，８−ジメチル−１−｛［（５Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］カルボニル｝ヘキサヒドロ−３ａ，６−メタノ−２，１−ベンゾイソチアゾール２，２−ジオキシド（０．５１０ｇ、１．５６ｍｍｏｌｅ）の塩化メチレン（２ｍｌ）溶液に、飽和重炭酸ナトリウム（１ｍｌ）、次いで４−クロロフェニルイソシアネート（０．５３０ｇ、３．４４ｍｍｏｌｅ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を塩化メチレン（２０ｍＬ）で希釈し、次いで濾過し、そして濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（溶出液ヘキサン中５〜１００％ ＥｔＯＡｃ）により精製し、必要な化合物（０．７４０ｇ）を得た。ＣＨ₂Ｃｌ₂／メチルｔ−ブチルエーテルから固体を結晶化させた。固体を母液からの第二の得量と合わせ、表題化合物（０．５４０ｇ、７２％ 収率）を得た。
旋光度＝２ｍｌ中０．０２０ｇ；ｃ＝０．０１ｇ／ｍｌ｛Ｃ＝１（ＣＨＣｌ₃）｝；測定結果−０．１２０；旋光度＝−０．１２０×４０００／１０＝−４８．０

１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ ｐｐｍ ０．８６（ｓ，３Ｈ），１．０１（ｓ，３Ｈ），１．２１（ｍ，１Ｈ），１．４１（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，３Ｈ）１．７２（ｍ，３Ｈ）１．８５（ｍ，２Ｈ），２．８６（ｄｄ，Ｊ＝１７．９３，１．７５Ｈｚ，１Ｈ）３．２４（ｄｄ，Ｊ＝１７．９３，１．７５Ｈｚ，１Ｈ），３．６１（ｄ，Ｊ＝１４．０４Ｈｚ，１Ｈ），３．７０（ｄ，Ｊ＝１４．０４Ｈｚ，１Ｈ），３．８７（ｄｄ，Ｊ＝７．０２，５．４６Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｓ，１Ｈ），６．４９（ｍ，１Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ ２Ｈ），９．０７（ｓ，１Ｈ）

工程４：（５Ｒ）−１−｛［（４−クロロフェニル）アミノ］カルボニル｝−５−メチル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸の合成

手順：ＭｅＯＨ（１ｍｌ）、ＴＨＦ（１ｍｌ）、Ｈ₂Ｏ（２ｍｌ）中に（５Ｒ）−Ｎ−（４−クロロフェニル）−５−｛［（３ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−８，８−ジメチル−２，２−ジオキシドテトラヒドロ−３ａ，６−メタノ−２，１−ベンゾイソチアゾール−１（４Ｈ）−イル］カルボニル｝−５−メチル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキシアミド（０．５００ｇ、１．０４ｍｍｏｌｅ）を溶解した。固体ＬｉＯＨ．Ｈ₂Ｏ（０．０９４ｇ、２．２４ｍｍｏｌｅ）を添加し、そして室温で３時間撹拌した。水（２０ｍｌ）で希釈し、次いで１Ｎ ＨＣｌを添加してｐＨ ５に調節した。反応混合物を濾過してスルタムを除去した。水相を凍結乾燥させ、約２０％のスルタムの不純物を含むリチウム塩として所望の生成物を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ ｐｐｍ １．５３（ｓ，３Ｈ），２．９２（ｄｄ，Ｊ＝１８．６２，１．６６Ｈｚ，１Ｈ），３．１９（ｄｄ，Ｊ＝１８．６２，１．６６Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｔ，Ｊ＝１．６６Ｈｚ，１Ｈ）７．２５（ｍ，２Ｈ）７．６２（ｍ，２Ｈ）９．１０（ｓ，１Ｈ）

工程５：（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝の合成

手順：１．０ Ｍ塩化チオニルの乾燥塩化メチレン（０．３１９ｍＬ、０．３１９ｍｍｏｌ）溶液を予め−２０℃（氷−ＮａＣｌ−水−アセトン−ドライアイス）に冷却したＤＭＡＰ（４３．５ｍｇ、０．２１３ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に添加した。混合物を５分間撹拌し、次いで（５Ｒ）−１−｛［（４−クロロフェニル）アミノ］カルボニル｝−５−メチル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸（０．０３０ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を添加した。混合物を２０分間撹拌し、そしてアニリン（０．０４９ｇ、０．２４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液を添加した。混合物を２時間かけて２３℃までゆっくりと温め、次いで２３℃で１６時間撹拌した。反応混合物を重複して行った反応と合わせた。水（５ｍＬ）を添加し、そしてＴＨＦをエバポレートした。残留物をＤＣＭ（８０ｍＬ）と１０％ ＨＣｌ（２０ｍＬ）との間で分配した。相を分離した。水相をＤＣＭ（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を５％ ＨＣｌ（１×２０ｍＬ）、０．５Ｎ ＮａＯＨ（１×２０ｍＬ）およびブライン（１×２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、そして溶媒を除去した。残留物を以下の条件下でＭＰＬＣにより精製した：カラム：ＲｅｄｉＳｅｐ ４０ｇ；溶出液：１５分間でヘプタン中０％ ＥｔＯＡｃ〜ヘプタン中１００％ ＥｔＯＡｃ、次いで４５分間でＥｔＯＡｃ中０％ ＭｅＯＨ〜ＥｔＯＡｃ中５％ ＭｅＯＨ。ＴＬＣにより決定した通り、純粋な画分を合わせ、そして溶媒を除去した。残留物を高真空下で一晩乾燥させた。これにより白色固体（０．０７９ｇ、合わせた反応物について７４％収率）を得た。この化合物のＨＰＬＣ純度は９８．４６％であった。ジエチルエーテルで７時間摩砕して、さらに精製した。濾過の際、白色固体（０．０５９ｇ）を回収した。

１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δ ｐｐｍ １．８８（ｓ，３Ｈ）２．８９（ｄｄ，Ｊ＝１９．２０，１．６６Ｈｚ，１Ｈ）４．１０（ｄｄ，Ｊ＝１９．３０，１．７５Ｈｚ，１Ｈ）６．２１（ｔｄ，Ｊ＝６．７３，１．１７Ｈｚ，１Ｈ）６．６１（ｄ，Ｊ＝８．７７Ｈｚ，１Ｈ）６．９２（ｔ，Ｊ＝１．５６Ｈｚ，１Ｈ）７．１１（ｄｄ，Ｊ＝８．７７，１．３６Ｈｚ，１Ｈ）７．２０−７．２９（ｍ，４Ｈ）７．３１−７．３９（ｍ，１Ｈ）７．４１−７．４６（ｍ，２Ｈ），８．１４（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｔ，，Ｊ＝１９．２Ｈｚ，１Ｈ），１０．８３（ｓ，１Ｈ）

最終生成物について、周囲温度、検出器波長２５２ｎｍ、流速１．００ｍｌ／分、移動相メタノールでＣｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｒ（１５０×４．６ｍｍ）１０ｕｍを行った。物質は９５％（９）および５％（１０）の含有量を示した。図３は時間関数としての溶出パターンを示す。（Ｓ）−鏡像異性体の保持時間は３．４分であり、そして（Ｒ）−鏡像異性体の保持時間は９．４分であった。

最終化合物の光学純度を高めるために、例えば、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳカラムを用いてキラルＨＰＬＣ分取を行ってもよい。

実施例３
工程１．（３ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−１−メタクリロイル−８，８−ジメチルヘキサヒドロ−３ａ，６−メタノ−２，１−ベンゾイソチアゾール２，２−ジオキシドの合成

手順：−２０℃の（１Ｓ）−（−）−２，１０−カンファースルタム（５．０００ｇ、２３．２２ｍｍｏｌｅ）の無水ＴＨＦ（５０ｍｌ）溶液に、塩化リチウム（１．０８ｇ、２５．５ｍｍｏｌｅ、−小球）、トリエチルアミン（４．２１ｍｌ、３０．２ｍｍｏｌｅ、１．３０当量）を添加し、次いで混合物を１０分間撹拌した。塩化リチウムは溶液に溶けなかった。次いで、ＴＨＦ（１５ｍｌ）中２−メチルアクリ酸無水物（４．１５ｍｌ、２７．９ｍｍｏｌｅ、１．２０当量）を添加した。約５分間の添加の間に、内部温度は−２０℃〜−１０℃で変化した。濃厚な白色混合物を冷却浴の中で撹拌し、そして室温にした。一晩撹拌した後、白色の不均一な反応混合物を撹拌しながら水（３５０ｍｌ）に添加した。白色の結晶固体（３ａＳ，６Ｒ，７ａＲ）−１−メタクリロイル−８，８−ジメチルヘキサヒドロ−３ａ，６−メタノ−２，１−ベンゾイソチアゾール２，２−ジオキシド（６．３０２ｇ、９６％ 収率）を回収し、そして真空中で乾燥させた。
−分析用ＨＰＬＣを溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ中０．１％ トリフルオロ酢酸およびＢ：アセトニトリル中０．１％ トリフルオロ酢酸で行うＶｙｄａｃ ２１８ＴＰ５４ Ｃ１８ 逆相カラムで行った。２２分かけてグラジエント（０〜１００％Ｂ）。保持時間１８．１６６分（１００％）。
旋光度＝２ｍｌ中０．０２０ｇ；ｃ＝０．０１ｇ／ｍｌ｛Ｃ＝１（ＣＨＣｌ３）｝；測定結果−０．２２６；旋光度＝−０．２２６×４０００／１０＝−９０．４。

実施例２の通りに工程２〜５を行った。

実施例４
（Ｒ）鏡像異性体のＩＣ₅₀
最終濃度３０ｐＭのヒト第Ｘａ因子（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％ ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含む緩衝液に希釈した、ｐＨ７．４）を使用して、アッセイを三つ組で行った。基質Ｓ−２７６５（Ｎ−ＣＢｚ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｌ−Ｇｌｙ−Ｌ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド．２ＨＣｌ）は、そのＫ_m値に等しい最終濃度で行った。１．０μＭ〜９５８ｆＭの最終濃度まで（Ｒ）鏡像異性体を１００％ ＤＭＳＯに連続希釈した（最終アッセイ濃度＝２％ ＤＭＳＯ）。希釈物を２．５ μＬ／ウェルの容量でブラックポリスチレン９６−プレートマイクロタイターアッセイプレートに移した。ヒト第ＦＸａ因子を含む緩衝液を７３μＬ／ウェルの容量で各ウェルに添加し、次いで穏やかに振とうさせながら、室温で５０分間インキュベートした。５０分経った時点で、両方のプレートおよび緩衝液希釈基質を３７℃で１０分間インキュベートした。予め温めた基質（５０ μＬ）を添加することによって反応を開始し、そして予め３７℃に温めたマイクロプーレートリーダー中に速やかに配置した。

蛍光分析プレートリーダーを使用して、単位時間当たりの相対蛍光単位 （ＲＦＵ）の変化率を連続的にモニターした。アッセイプレートを読み取り前に一旦混合した。蛍光発光を３７℃で３０分間４４秒毎に記録した（λ_ex＝３９０ｎｍおよびλ_ex＝４６０ｎｍの励起／発光；自動遮断＝４５５ｎｍ）。

Claims (23)

1. （Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋である、化合物（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝。
2. （Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１より大きい、請求項１に記載の化合物。
3. （Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が１９：１より大きい、請求項１に記載の化合物。
4. （Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が９９：１より大きい、請求項１に記載の化合物。
5. 薬学的に受容可能な担体、添加剤または賦形剤および（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋である（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を含む薬剤組成物。
6. （Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１より大きい、請求項５に記載の薬剤組成物。
7. （Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が１９：１より大きい、請求項５に記載の薬剤組成物。
8. （Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が９９：１より大きい、請求項５に記載の薬剤組成物。
9. 血栓性疾患または塞栓性疾患の治療が必要な患者における血栓性疾患または塞栓性疾患の治療方法であって、治療有効量の（Ｒ）鏡像異性体が実質的に純粋である（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を投与することを含む、方法。
10. （Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１より大きい、請求項９に記載の方法。
11. （Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が１９：１より大きい、請求項９に記載の方法。
12. （Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が９９：１より大きい、請求項９に記載の方法。
13. 血栓性疾患または塞栓性疾患が、一次性もしくは二次性静脈血栓症、動脈血栓症、静脈塞栓症、動脈塞栓症、静脈狭窄症、静脈再狭窄、動脈狭窄症または動脈再狭窄である、請求項９に記載の方法。
14. 治療が、心房性細動、狭心症、糖尿病、癌または心不全、または外傷性傷害、外科処置もしくは内科的疾患による固定を有する患者の治療である、請求項９に記載の方法。
15. 患者が、一次性ＤＶＴ、二次性ＶＴＥまたは心房性細動を有する患者である、請求項９に記載の方法。
16. 治療が、肺塞栓症、肺高血圧症または発作を予防するための治療である、請求項９に記載の方法。
17. 転移性疾患の治療が必要な患者の生存期間を延長するための、転移性疾患を有する患者の治療方法であって、治療有効量の（Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１より大きい（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を投与することを含む、方法。
18. 敗血症の治療が必要な患者における敗血症の治療方法であって、治療有効量の（Ｒ）鏡像異性体対（Ｓ）鏡像異性体の比が４：１より大きい（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミド｝を投与することを含む、方法。
19. 哺乳動物における血栓性疾患を治療または予防的治療する医薬を製造するための実質的に純粋な（Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］−アミドの使用。
20. 式：
    

    

    （Ｒ）−５−メチル−４，５−ジヒドロ−ピラゾール−１，５−ジカルボン酸１−［（４−クロロ−フェニル）−アミド］５−｛［２−フルオロ−４−（２−オキソ−２Ｈ−ピリジン−１−イル）−フェニル］の製造方法であって、
    以下：
    工程（ａ）
    （１）溶媒および塩基の存在下、式１１：
    

    

    の化合物をメタクリロイルクロリドと反応させるか；または
    （２）式１１の化合物を塩化リチウム、トリエチルアミンおよび２−メチルアクリル酸無水物と反応させ；
    式１２：
    

    

    の化合物を得；
    工程（ｂ）
    式１２の化合物をトリメチルシリルジアゾメタンと反応させ、希酸で処理し、そして単離して、式１３：
    

    

    の化合物を得；
    工程（ｃ）
    溶媒中、式１３の化合物をイソシアネートおよび温和な塩基で処理し、式１４：
    

    

    の化合物を得；
    工程（ｄ）
    キラル補助基を除去し、式１５：
    

    

    の化合物を得；そして
    工程（ｅ）
    式１５の化合物を式３：
    

    

    の化合物とカップリングさせ、所望の化合物を得ることを含む、方法。
21. ５．４、７．２、９．４、１０．９、１５．６、１９．６、２１．７または２３．３度２θで少なくとも１つのピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態。
22. １９．６および２１．７でピークを有し、そして７．２、９．４、１０．９、１５．６または２３．３度２θで１つまたはそれ以上のさらなるピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態。
23. １０．９、１９．６および２１．７でピークを有し、そして７．２、９．４、１５．６または２３．３度２θで１つまたはそれ以上のさらなるピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態。

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