JP2009501744A - 化合物 - Google Patents

Abstract

本発明は、式（Ｉ）の化合物、およびその塩、その調製方法、これらを含有する組成物、ならびにアレルギー性鼻炎などの各種の障害の治療におけるそれらの使用に関する。

【選択図】 なし

Description

本発明は、化合物群、それらの調製方法、それらを含有する組成物、ならびに気道の各種の障害、特に炎症性および／またはアレルギー性障害の治療におけるそれらの使用に関する。

アレルギー性鼻炎、肺炎症およびうっ血は、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、季節性アレルギー性鼻炎および通年性アレルギー性鼻炎などのその他の症状に関係することが多い、医学的症状である。一般的にこれらの症状は少なくとも部分的には各種の細胞、特にマスト細胞からのヒスタミンの放出に関係する炎症が介在する。

「花粉症」としても知られているアレルギー性鼻炎は、世界人口の大部分に影響を与えている。アレルギー性鼻炎には、季節性および通年性の２つのタイプがある。季節性アレルギー性鼻炎の臨床症候として、典型的には鼻そう痒および炎症、くしゃみならびに水様鼻漏が含まれ、これには鼻うっ血を伴うことが多い。通年性アレルギー性鼻炎の臨床症候は鼻閉がさらに顕著である以外は同様である。いずれのタイプのアレルギー性鼻炎も、喉および／または目のそう痒感、流涙ならびに目のまわりの浮腫などのその他の症候を引き起こす。アレルギー性鼻炎の症候は不快程度から衰弱まで、強度に差異がある。

アレルギー性鼻炎およびその他のアレルギー性症状は、各種の細胞タイプ、特にマスト細胞からのヒスタミンの放出に関係する。ヒスタミンの生理学的作用は古典的にＨ１、Ｈ２およびＨ３の名称がある３つの受容体サブタイプによって仲介される。Ｈ１受容体はＣＮＳおよび末梢系中に広範に分布しており、不眠および急性炎症に関与する。Ｈ２受容体はヒスタミンに応答して胃酸の分泌を仲介する。Ｈ３受容体はＣＮＳおよび末梢系の両方の神経末端に存在し、神経伝達物質放出の阻害を仲介する（非特許文献１）。最近、Ｈ４受容体と称される第４のメンバーのヒスタミン受容体ファミリーが同定された（非特許文献２）。Ｈ４受容体の分布は免疫および炎症系の細胞に限定されているものと見られるが、この受容体に関する生理学的役割には特定すべきことが残っている。

血管および神経末端でのＨ１受容体の活性化は多くのアレルギー性鼻炎の症候の原因となり、これらの症候としてそう痒感、くしゃみ、および水様鼻漏の生成が含まれる。抗ヒスタミン化合物、すなわちクロルフェニラミンおよびセチラジンなどの選択的Ｈ１受容体アンタゴニストである薬剤は、アレルギー性鼻炎に関係するそう痒、くしゃみおよび鼻漏の治療に効果的であるが、鼻うっ血症候には効果がない（非特許文献３）。

ヒスタミンＨ３受容体はＣＮＳおよび末梢神経末端の両方で広範に発現され、神経伝達物質の放出の阻害に介在する。単離したヒト伏在静脈での末梢交感神経のｉｎ ｖｉｔｒｏ電気刺激の結果、ノルアドレナリン放出および平滑筋収縮の増加をもたらすが、これはヒスタミンＨ３受容体アゴニストによって阻害することができる（非特許文献４、５）。Ｈ３受容体アゴニストはブタ鼻粘膜の血管緊張に及ぼす交感神経活性化の効果も阻害する（非特許文献６）。ｉｎ ｖｉｖｏでは、Ｈ３受容体アゴニストは交感神経活性化がもたらす鼻腔抵抗の低下を阻害する（非特許文献７）。ヒト鼻粘膜でのヒスタミンＨ３受容体の活性化は交感神経の血管収縮を抑制する（非特許文献８）。さらに、Ｈ３受容体アンタゴニストはヒスタミンＨ１受容体アンタゴニストとの組み合わせで、鼻腔抵抗および鼻うっ血の指標である鼻腔体積に対するマスト細胞活性化の作用を逆行させることが示され（非特許文献９）、ヒスタミンが誘発する鼻閉に対するＨ３受容体の寄与についてのさらなる証拠が、正常ヒト被験体で実施したヒスタミン鼻負荷の研究によって提供されている（非特許文献１０）。
Hill et al., Pharmacol. Rev. 49:253-278 (1997) Hough, Mol. Pharmacol. 59:415-419, (2001) Aaronson, Ann. Allergy, 67:541-547, (1991) Molderings et al., Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol., 346:46-50, (1992) Valentine et al., Eur. J. Pharmacol., 366:73-78, (1999) Varty & Hey, Eur. J. Pharmacol., 452:339-345, (2002) Hey et al., Arzneim-Forsch Drug Res., 48:881-888 (1998) Varty et al., Eur. J. Pharmacol., 484:83-89, (2004) Mcleod et al., Am. J. Rhinol., 13:391-399, (1999) Taylor-Clark et al., Br. J. Pharmacol., 1-8 (2005)

本発明は、ヒスタミンＨ３アンタゴニストおよび／または逆アゴニストである化合物（またはその塩）に関する。これらの化合物（またはその塩）は、マスト細胞などの細胞からのヒスタミン放出に関係する、各種の障害、特に気道の炎症性および／またはアレルギー性障害、例えばアレルギー性鼻炎などの、炎症性および／またはアレルギー性障害の治療に有用であるものと見られる。さらに、本発明の化合物（またはその塩）は以下の特性の１つ以上を有する点で、既知のＨ３アンタゴニスト／逆アゴニストよりも改善されたプロファイルを示す。

（ｉ）強力なＨ３アンタゴニスト／逆アゴニスト活性；
（ｉｉ）Ｈ１受容体よりもＨ３受容体に対して少なくとも１００倍の選択性；
（ｉｉｉ）低ＣＮＳ侵入；
（ｉｖ）改善されたバイオアベイラビリティ；および
（ｖ）血液中での低クリアランスおよび／または長い半減期。

こうしたプロファイルを持つ化合物は、経口上効果的となり得、かつ／または１日１回の投与が可能であり、かつ／またはその他の現状の治療に比較して改善された副作用プロファイルを有し得る。

こうして本発明は、第１の態様として、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容される塩などの、その塩を提供する。

式（Ｉ）の化合物は不斉炭素原子を有するので、光学異性体、例えば鏡像体が形成され得ることが理解されよう。本発明は、実質的にその他の異性体を含まないように単離された個別の（すなわち純粋な）異性体であるか、それらの混合物であるかにかかわらず、式（Ｉ）の化合物のすべての光学異性体を包含する。実質的にその他の異性体を含まないように単離された個別の（すなわち純粋な）異性体は、その他の異性体の存在量が約１０％未満、特に約１％未満、例えば約０．１％未満となるように単離される。

こうして本発明には、ラセミ体４−［（２，４−ジフルオロフェニル）カルボニル］−１−［４−（｛３−［２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−２−ピペラジノン、Ｒ異性体４−［（２，４−ジフルオロフェニル）カルボニル］−１−［４−（｛３−［（２Ｒ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−２−ピペラジノン、およびＳ異性体４−［（２，４−ジフルオロフェニル）カルボニル］−１−［４−（｛３−［（２Ｓ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−２−ピペラジノンならびにそれらの塩または溶媒和物が含まれる。

さらに、本発明は遊離塩基として、および薬学的に許容される塩など、その塩としての式（Ｉ）の化合物を網羅するものと解釈されたい。

さらに、式（Ｉ）の化合物または本発明の化合物のこれ以降の言及は、遊離塩基、または塩として、または溶媒和物としての式（Ｉ）の化合物を意味するものと解釈されたい。

本発明の化合物は薬学的に許容される塩の形態でもよく、かつ／または薬学的に許容される塩の形態で投与してもよい。薬学的に許容される塩として酸付加塩が含まれる。好適な塩の概説については、Berge et al., J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1977)を参照されたい。

薬学的に許容される酸付加塩は適宜所望の酸を使用して、容易に調製することができる。塩は溶液から沈殿させて、ろ過によって採取するか、溶媒の蒸発によって回収することができる。典型的には、薬学的に許容される酸付加塩は、場合によって有機溶媒などの好適な溶媒中で、式（Ｉ）の化合物を好適な無機または有機酸（臭素酸、塩酸、ギ酸、硫酸、硝酸、リン酸、コハク酸、マレイン酸、酢酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸、安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸またはナフタレンスルホン酸など）と反応させて、塩を生成させ、通常これを例えば結晶化およびろ過によって単離して、形成させることができる。こうして、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される酸付加塩として、例えば臭素酸塩、塩酸塩、ギ酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、安息香酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩またはナフタレンスルホン酸塩が可能である。

その他の製薬上許容されない塩、例えばシュウ酸塩またはトリフルオロ酢酸塩は、例えば本発明の化合物の単離で使用することができるので、本発明の範囲に含まれる。本発明はその範囲内に、式（Ｉ）の化合物の塩のすべての可能な化学量論的および非化学量論的形態を含む。

多くの有機化合物は、これを反応させる際の、またはこれを沈殿または結晶化させる際の溶媒と複合体を形成することがあることを理解すべきである。これらの複合体は「溶媒和物」として知られている。例えば、水との複合体は「水和物」として知られている。水、キシレン、Ｎ−メチルピロリジノンメタノールなどの高沸点の溶媒および／または水素結合を形成する性向が強い溶媒を使用することによって、溶媒和物が形成されることがある。溶媒和物の同定方法として、限定するわけではないが、ＮＭＲおよび微量分析が含まれる。本発明の化合物の溶媒和物は本発明の範囲内である。

式（Ｉ）の化合物は結晶でも非晶形でもよい。さらに、結晶形の式（Ｉ）の化合物の中で、多形体として存在するものもあり、これは本発明の範囲内に含まれる。式（Ｉ）の化合物の熱力学的に最も安定な多形体が、特に対象となる。

多形体の式（Ｉ）の化合物は、多くの従来の分析技法、例えば、限定するわけではないが、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン、赤外線（ＩＲ）スペクトル、ラマンスペクトル、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）および固体核磁気共鳴（ＮＭＲ）などを用いて特性決定および分別することができる。

一定の式（Ｉ）の化合物はいくつかの互変異性体の１つとして存在してもよい。本発明は個別の互変異性体であれ、それらの混合物であれ、式（Ｉ）の化合物のすべての互変異性体を包含するものと理解すべきである。

前述のように、本発明の範囲内に含まれるのは、本発明の化合物のすべての溶媒和物、水和物、複合体、異性体および多形体ならびにそれらの塩であるものと解釈すべきである。

本発明は式（Ｉ）の化合物またはその塩の調製方法をも提供する。

すなわち、第１の方法Ａにしたがって、式（ＩＩ）の化合物またはその塩と２，４−ジフルオロ安息香酸（これは例えばＡｌｄｒｉｃｈから購入可能である）とを反応させることにより、式（Ｉ）の化合物を調製することができる。

この反応はジクロロメタンまたはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒中、トリエチルアミンなどの好適な塩基およびＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）などの好適なカップリング剤の存在中で、実施することができる。

式（ＩＩ）の化合物は、以下またはこれと類似の反応スキームにしたがって調製することができる。

試薬および条件：ａ）塩化クロロアセチル、炭酸カリウム、テトラヒドロフラン；ｂ）エタノールアミン、６０℃；ｃ）Ｂｏｃ_２Ｏ、ジクロロメタン、４−ジメチルアミノピリジン；ｄ）塩化メタンスルホニル、トリエチルアミン、ジクロロメタン；ｅ）ＮａＨ、ジメチルホルムアミド；ｆ）Ｈ_２、炭素上１０％パラジウム、エタノール；ｇ）１−ブロモ−３−クロロプロパン、炭酸カリウム、２−ブタノン；ｈ）２−メチルピロリジン、２（Ｒ）−メチルピロリジンまたは２（Ｓ）−メチルピロリジン、炭酸カリウム、ヨウ化カリウム、２−ブタノン；ｉ）トリフルオロ酢酸、ジクロロメタン。

ステップｄおよびｅは、化合物（ＶＩＩ）を単離しないで１ステップで実施することができる。あるいは、化合物（ＶＩＩ）を単離し、その後これを使用して化合物（ＶＩ）を調製してもよい。

上で具体的に述べた溶媒、塩基、保護基などは、その他の適当な試薬に置き換えることができるものと解釈すべきである。その上、選定した試薬に応じて、温度および反応時間などの反応条件を、本明細書に記載した特定の条件から、適宜、変更させることができるものと解釈すべきである。

こうして、例えば化合物（ＩＸ）は、ベンジルオキシカルボニルまたは２’，２’，２’−トリクロロエトキシカルボニル基で保護してもよい。化合物（ＶＩＩＩ）の活性化は、ピリジンまたはジクロロメタン中、かつジイソプロピルエチルアミンなどの塩基の存在中で、トシルクロリドまたはトリフルオロメタンスルホン酸無水物と反応させて、対応するｐ−トルエンスルホン酸エステルまたはトリフルオロメタンスルホン酸エステルを提供することによって、達成することができる。化合物（ＶＩＩ）の化合物（ＶＩ）への環化は、テトラヒドロフラン中のナトリウムビス（トリメチルシリル）アミドなどの別の動力学的塩基の存在中で達成することができる。（ＩＩＩ）からの保護基の開裂は、塩、例えばＢＯＣ保護基のトリフルオロ酢酸による開裂の場合ならば、トリフルオロ酢酸塩が生成する。その後、ＳＣＸ−２カートリッジ上のイオン交換クロマトグラフィーによって、その遊離塩基を単離することができる。あるいは、この塩を、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンまたはポリマーに担持されたジイソプロピルエチルアミンなどの塩基の存在中でのアシル化反応に使用することができる。

第２の方法Ｂによれば、式（Ｉ）の化合物の塩は、対イオンの交換によるか、または遊離塩基からの所望の塩の沈殿によって、調製することができる。

本明細書に記載した合成経路で使用することができる保護基およびその除去方法は、T. W. Greene 'Protective Groups in Organic Synthesis' (3rd edition, J. Wiley and Sons, 1999)から知ることができる。好適なアミン保護基としてスルホニル（例えばトシル）、アシル（例えばアセチル、２’，２’，２’−トリクロロエトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルまたはｔ−ブトキシカルボニル）およびアリールアルキル（例えばベンジル）が含まれ、これらは加水分解（例えばジオキサン中の塩化水素またはジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸などの酸を使用する）によるか、あるいは適宜還元的に除去することができる（例えばベンジル基の水素化分解または酢酸中の亜鉛を使用する２’，２’，２’−トリクロロエトキシカルボニル基の還元的除去）。その他の好適なアミン保護基として、トリフルオロアセチル（−ＣＯＣＦ_３）（これは塩基によって触媒される加水分解によって除去することができる）またはＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂結合２，６−ジメトキシベンジル基（Ｅｌｌｍａｎリンカー）などの固相樹脂結合ベンジル基（これは、酸が触媒する加水分解、例えばトリフルオロ酢酸によって除去することができる）が含まれる。

さらに、ＲおよびＳ鏡像体は、ラセミ体から以下のような従来の方法によって単離することができるものと理解されたい：キラル固定相を用いる調製用ＨＰＬＣ、遊離塩基のキラル酸との塩の分別晶出をする分離によるもの、キラル補助基を使用するジアステレオ異性体への化学的転換後、クロマトグラフィーによる異性体の分離、そしてその後のキラル補助基除去および純粋な鏡像体の再生によるもの、または総合的不斉合成によるもの。

本発明の化合物の調製のために使用するすべての新規中間体は本発明のさらに別の態様を形成するものと解釈すべきである。

式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるそれらの塩が有益な抗炎症性および／または抗アレルギー性効果を発揮する可能性がある疾病症状の例として以下が含まれる：気管支炎（慢性気管支炎など）、喘息（アレルゲン誘発喘息性反応など）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、嚢胞性線維症、副鼻腔炎およびアレルギー性鼻炎（季節性および通年性）などの気道疾患。その他の疾病症状として、炎症性腸疾患（例えばクローン病または潰瘍性大腸炎）および放射線被曝またはアレルゲン被曝による二次的腸炎症性疾患を含む腸炎症性疾患などの、消化管の疾患が含まれる。

さらに、本発明の化合物を腎炎、乾癬、湿疹、アレルギー性皮膚炎および過敏性反応などの皮膚疾患を治療するために使用することができる。

本発明の化合物はまた、鼻ポリープ症、結膜炎または掻痒症の治療にも使用することができる。

その他の疾患として、炎症性腸疾患などの消化管の炎症性疾患が含まれる。

特に対象とする疾患はアレルギー性鼻炎である。

Ｈ３受容体アンタゴニストおよび／または逆アゴニストである化合物は、Ｈ３受容体の活性化が関係すると見られるその他の疾患でも使用することができる。こうした疾患として非アレルギー性鼻炎が含まれる。

当業者は、治療または治療法に関する本明細書の言及を、確定した症状と同様に予防に拡張されることを理解できるはずである。

上記のように、式（Ｉ）の化合物は治療薬として有用である。したがって、本発明のさらなる態様として、治療に使用するための式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。

本発明の別の態様によれば、上記の疾患のいずれかを治療するための医薬の製造用の、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩の使用が提供される。

別の態様では、上記のいずれかの疾患の治療を必要とするヒトまたは動物被験体における、その治療方法であって、有効量の式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩の投与を含む治療方法が提供される。

治療に使用する場合、式（Ｉ）の化合物は通常、好適な医薬組成物に製剤化される。こうした組成物は標準的な手順を用いて調製することができる。

こうして、本発明はさらに、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩を、場合によって１種以上の薬学的に許容される担体および／または賦形剤とともに含む、医薬組成物を提供する。

本発明の組成物は、好適には環境温度および大気圧下で混合することによって調製することができ、通常は経口、腸管外または直腸投与に適合するものである。またそれ自体を以下の形態とすることができる：錠剤、カプセル、経口液状調製品、粉剤、顆粒、トローチ、再構成可能な粉剤、注射用または注入用溶液もしくは懸濁液または坐剤。経口投与可能な組成物が一般的に好ましい。

経口投与用の錠剤およびカプセルは単位投与剤形とすることができ、結合剤、充填剤、錠剤化用潤滑剤、崩壊剤および許容される湿潤剤などの常用の賦形剤を含有させてもよい。錠剤は通常の製薬プラクティスで周知の方法にしたがってコーティングしてもよい。

経口液状調製品は例えば、水性もしくは油性懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップまたはエリキシルの形態とするか、使用前に水もしくはその他の好適なベヒクルで再構成するための乾燥製品とすることができる。こうした液状調製品には以下のような常用の添加剤を含有させることができる：懸濁剤、乳化剤、非水性ベヒクル（これには食用油が含まれる）、保存剤、および所望ならば、常用の香味剤または着色剤。

腸管外投与のためには、本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩と滅菌ベヒクルを利用して、液状単位投与剤形を調製する。化合物はベヒクルおよび使用濃度に応じて、ベヒクル中に懸濁させるか、または溶解させることができる。溶液の調製では、化合物を注射用に溶解させ、フィルター滅菌した後、好適なバイアルまたはアンプルに充填して、密封することができる。有益なのは、ベヒクル中に局所麻酔剤、保存剤およびバッファー剤などのアジュバントを溶解させるものである。安定性を強化するため、組成物をバイアルに充填した後、凍結させて、水を真空下で除去することができる。腸管外懸濁液は、化合物をベヒクルに溶解させるのではなくて懸濁させること、またろ過による滅菌はできないことを除いて、実質的に同一の様式で調製する。化合物をエチレンオキシドへの曝露によって滅菌した後、滅菌ベヒクル中に懸濁させることができる。化合物の均一な分布を助長するため、組成物に界面活性剤または湿潤剤を含ませてもよい。

組成物には、投与方法に応じて、約０．１％〜９９重量％、例えば約１０〜６０重量％の活性物質を含有させることができる。前記の障害の治療に使用する化合物の用量は通常のように、その障害の重篤度、患者の体重、およびその他の同様の要因によって変更されることとなる。しかし、一般的指針として、好適な単位用量は約０．０５〜１０００ｍｇ、より好適には約１．０〜２００ｍｇであり、こうした単位用量を１日に１回より多く、例えば１日に２または３回投与する。こうした治療を多くの週または月数まで延長することができる。１実施形態中、本発明の化合物および組成物は経口投与にとって好適であって、かつ／または１日１回の投与が可能である。

本発明の化合物および組成物を例えば以下から選択されるその他の治療薬の１種以上と併用して使用するか、またはこれらを含ませることができる：抗炎症薬、抗コリン作動薬（特にＭ_１／Ｍ_２／Ｍ_３受容体アンタゴニスト）、β_２−アドレナリン受容体アゴニスト、抗感染薬（例えば抗生物質、抗ウイルス薬）、または抗ヒスタミン薬。別の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩と、例えば以下から選択されるその他の１種以上の治療上活性な薬剤を含む組み合わせを提供する：抗炎症薬（例えば別のコルチコステロイドまたはＮＳＡＩＤ）、抗コリン作動薬、β_２−アドレナリン受容体アゴニスト、抗感染薬（例えば抗生物質もしくは抗ウイルス薬）、または抗ヒスタミン薬。式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩と、β_２−アドレナリン受容体アゴニスト、および／または抗コリン作動薬、および／またはＰＤＥ−４阻害薬を含む組み合わせは、本発明のさらに別の態様を形成する。本発明の組み合わせは１種以上のその他の治療薬を含むが、場合によっては１種以上の薬学的に許容される担体および／または賦形剤を所望に応じて含ませる。

当業者にとって、それが適切ならば、その他の治療薬成分（群）を塩（例えばアルカリ金属もしくはアミン塩または酸付加塩）、またはプロドラッグ、またはエステル（例えば低級アルキルエステル）、または溶媒和物（例えば水和物）の形態で使用して、その治療薬成分の活性および／または安定性および／または物理的特性（例えば溶解性）を最適化することができるのは、明白なことである。また、それが適切ならば、治療薬成分を光学的に純粋な形態で使用するのがよいことも明白になるはずである。

β_２−アドレナリン受容体アゴニストの例として以下が含まれる：サルメテロール（例えばラセミ体またはＲ−鏡像体もしくはＳ−鏡像体などの単一鏡像体）、サルブタモール（例えばラセミ体またはＲ−鏡像体などの単一鏡像体）、フォルモテロール（例えばラセミ体またはＲ−鏡像体などの単一鏡像体）、サルメファモール、フェノテロール、カルモテロール、エタンテロール、ナミンテロール、クレンブテロール、ピルブテロール、フレルブテロール、レプロテール、バンブテロール、インダカテロール、テルブタリンおよびそれらの塩、例えばサルメテロールのキシナホ酸塩（１−ヒドロキシ−２−ナフタレンカルボキシレート）塩、サルブタモールの硫酸塩もしくは遊離塩基またはフォルモテロールのフマル酸塩。本発明の化合物と長期作用性β_２−アドレナリン受容体アゴニストとの組み合わせは、約１２時間またはそれより長期の効果的な気管支拡張を提供するので、特に対象となり得る。

その他のβ_２−アドレナリン受容体アゴニストとして以下に記載されているものが含まれる：国際公開第０２／０６６４２２号パンフレット、国際公開第０２／０７０４９０号パンフレット、国際公開第０２／０７６９３３号パンフレット、国際公開第０３／０２４４３９号パンフレット、国際公開第０３／０７２５３９号パンフレット、国際公開第０３／０９１２０４号パンフレット、国際公開第０４／０１６５７８号パンフレット、国際公開第０４／０２２５４７号パンフレット、国際公開第０４／０３７８０７号パンフレット、国際公開第０４／０３７７７３号パンフレット、国際公開第０４／０３７７６８号パンフレット、国際公開第０４／０３９７６２号パンフレット、国際公開第０４／０３９７６６号パンフレット、国際公開第０１／４２１９３号パンフレットおよび国際公開第０３／０４２１６０号パンフレット。

代表的なβ_２−アドレナリン受容体アゴニストとして以下が挙げられる：
３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）ベンゼンスルホンアミド；
３−（３−｛［７−（｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［４−ヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル）フェニル］エチル｝−アミノ）ヘプチル］オキシ｝プロピル）ベンゼンスルホンアミド；
４−｛（１Ｒ）−２−［（６−｛２−［（２、６−ジクロロベンジル）オキシ］エトキシ｝ヘキシル）アミノ］−１−ヒドロキシエチル｝−２−（ヒドロキシメチル）フェノール；
４−｛（１Ｒ）−２−［（６−｛４−［３−（シクロペンチルスルホニル）フェニル］ブトキシ｝ヘキシル）アミノ］−１−ヒドロキシエチル｝−２−（ヒドロキシメチル）フェノール；
Ｎ−［２−ヒドロキシｌ−５−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−［［２−４−［［（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル］アミノ］フェニル］エチル］アミノ］エチル］フェニル］ホルムアミド；
Ｎ−２｛２−［４−（３−フェニル−４−メトキシフェニル）アミノフェニル］エチル｝−２−ヒドロキシ−２−（８−ヒドロキシ−２（１Ｈ）−キノリノン−５−イル）エチルアミン；および
５−［（Ｒ）−２−（２−｛４−［４−（２−アミノ−２−メチル−プロポキシ）−フェニルアミノ］−フェニル｝−エチルアミノ）−１−ヒドロキシ−エチル］−８−ヒドロキシ−１Ｈ−キノリン−２−オン。

抗炎症剤としてコルチコステロイドが挙げられる。本発明の化合物と併用して使用することができるコルチコステロイドは、経口および吸入コルチコステロイドならびに抗炎症活性を持つそのプロドラッグである。例として以下が挙げられる：メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−［（４−メチル−１，３−チアゾール−５−カルボニル）オキシ］−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステル、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステル、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−（２−オキソ−テトラヒドロ−フラン−３Ｓ−イル）エステル、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−（２，２，３，３−テトラメチシクロプロピルカルボニル）オキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−シアノメチルエステル、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７β−（１−メチシクロプロピルカルボニル）オキシ−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステル、ベクロメタゾンエステル類（例えば、その１７−プロピオン酸エステルまたは１７，２１−ジプロピオン酸エステル）、ブデソニド、フルニソリド、モメタゾンエステル類（例えばそのフロ酸エステル）、トリアムシノロンアセトニド、ロフレポニド、シクレソニド（１６α，１７−［［（Ｒ）−シクロヘキシルメチレン］ビス（オキシ）］−１１β，２１−ジヒドロキシ−プレグナ−１，４−ジエン−３，２０−ジオン）、プロピオン酸ブチキソコルト、ＲＰＲ−１０６５４１、およびＳＴ−１２６。対象とするコルチコステロイドとして以下が挙げられる：プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−［（４−メチル−１，３−チアゾール−５−カルボニル）オキシ］−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステルおよび６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステル、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−（２，２，３，３−テトラメチシクロプロピルカルボニル）オキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−シアノメチルエステルおよび６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−（１−メチシクロプロピルカルボニル）オキシ−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステル、特に６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステル。

トランスアクチベーションよりもトランスリプレッションに対して選択性を持ち、併用治療に有用であると見られる、グルココルチコイドアゴニスト作用を持つ、非ステロイド化合物として、以下の特許の範囲内に入るものが挙げられる：国際公開第０３／０８２８２７号パンフレット、国際公開第０１／１０１４３号パンフレット、国際公開第９８／５４１５９号パンフレット、国際公開第０４／００５２２９号パンフレット、国際公開第０４／００９０１６号パンフレット、国際公開第０４／００９０１７号パンフレット、国際公開第０４／０１８４２９号パンフレット、国際公開第０３／１０４１９５号パンフレット、国際公開第０３／０８２７８７号パンフレット、国際公開第０３／０８２２８０号パンフレット、国際公開第０３／０５９８９９号パンフレット、国際公開第０３／１０１９３２号パンフレット、国際公開第０２／０２５６５号パンフレット、国際公開第０１／１６１２８号パンフレット、国際公開第００／６６５９０号パンフレット、国際公開第０３／０８６２９４号パンフレット、国際公開第０４／０２６２４８号パンフレット、国際公開第０３／０６１６５１号パンフレット、国際公開第０３／０８２７７号パンフレット。

抗炎症剤として非ステロイド抗炎症性薬（ＮＳＡＩＤ）が含まれる。ＮＳＡＩＤとして、以下が挙げられる：クロモグリケートナトリウム、ネドクロミルナトリウム、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）阻害剤（例えばテオフィリン、ＰＤＥ４阻害剤または混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４阻害剤）、ロイコトリエンアンタゴニスト、ロイコトリエン合成の阻害剤（例えばモンテルカスト）、ｉＮＯＳ阻害剤、トリプターゼおよびエラスターゼ阻害剤、ベータ−２インテグリンアンタゴニストおよびアデノシン受容体アゴニストまたはアンタゴニスト（例えばアデノシン２ａアゴニスト）、サイトカインアンタゴニスト（例えばケモカインアンタゴニスト、ＣＣＲ３アンタゴニストなど）またはサイトカイン合成の阻害剤、あるいは５−リポキシゲナーゼ阻害剤。ｉＮＯＳ阻害剤として以下に開示されているものが挙げられる：国際公開第９３／１３０５５号パンフレット、国際公開第９８／３０５３７号パンフレット、国際公開第０２／５００２１号パンフレット、国際公開第９５／３４５３４号パンフレットおよび国際公開第９９／６２８７５号パンフレット。ＣＣＲ３阻害剤として国際公開第０２／２６７２２号パンフレットに開示されているものが挙げられる。アデノシン２ａアゴニストとして国際公開第０５／１１６０３７号パンフレットに開示されているものが挙げられる。

本発明の併用に有用なＰＤＥ４特異的阻害剤として、ＰＤＥ４酵素を阻害することが知られているか、またはＰＤＥ４阻害剤として作用することが発見されたあらゆる化合物が含まれるが、これらはＰＤＥ４阻害剤のみであって、ＰＤＥ４と同様にＰＤＥ３およびＰＤＥ５などのその他のＰＤＥファミリーのメンバーを阻害する化合物は含まれない。

ＰＤＥ４阻害剤として以下が挙げられる：ｃｉｓ−４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸、２−カルボメトキシ−４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オンおよびｃｉｓ−［４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オール］。さらに、ｃｉｓ−４−シアノ−４−［３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］シクロヘキサン−１−カルボン酸（シロミラストとしても知られている）およびその塩、エステル、プロドラッグまたは物理的形態。これらは米国特許第５，５５２，４３８号明細書（１９９６年９月０３日交付）に記載されている。

その他のＰＤＥ４阻害剤として以下が挙げられる：ＡＷＤ−１２−２８１（Ｅｌｂｉｏｎ）（Hofgen, N. et al., 15th EFMC Int. Symp. Med. Chem. (Sept 6-10, Edinburgh) 1998, Abst. P.98；ＣＡＳ番号２４７５８４０２０−９）；ＮＣＳ−６１３と命名された９−ベンジルアデニン誘導体（ＩＮＳＥＲＭ）；Ｄ−４４１８（ＣｈｉｒｏｓｃｉｅｎｃｅおよびＳｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）；ＣＩ−１０１８として同定され、Ｐｆｉｚｅｒに帰属するベンゾジアゼピンＰＤＥ４阻害剤（ＰＤ−１６８７８７）；協和発酵によって国際公開第９９／１６７６６号パンフレットに開示されたベンゾジオキソール誘導体；Ｋ−３４（協和発酵）；Ｖ−１１２９４Ａ（Ｎａｐｐ）（Landells, L.J. et al., Eur. Resp. J. [Ann. Cong. Eur. Resp. Soc. (Sept 19-23, Geneva) 1998] 1998, 12 (Suppl. 28): Abst P2393）；ロフルミラスト（ＣＡＳ番号１６２４０１−３２−３）およびプタラジノン（国際公開第９９／４７５０５号パンフレット）（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ）；プマフェントリン、（−）−ｐ−［（４ａＲ^＊，１０ｂＳ^＊）−９−エトキシ−１，２，３，４，４ａ，１０ｂ−ヘキサヒドロ−８−メトキシ−２−メチルベンゾ［ｃ］［１，６］ナフチリジン−６−イル］−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルベンズアミド（これは混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４阻害剤であって、Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ、現在のＡｌｔａｎａによって調製および公開されている）；Ａｌｍｉｒａｌｌ−Ｐｒｏｄｅｓｆａｒｍａが開発中のアロフィリン；ＶＭ５５４／ＵＭ５６５（Ｖｅｒｎａｌｉｓ）；またはＴ−４４０（田辺製薬；Fuji, K. et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 284(1):162, 1998）およびＴ２５８５。

別の対象化合物が、公開された国際特許出願である国際公開第０４／０２４７２８号パンフレット（Ｇｌａｘｏ Ｇｒｏｕｐ Ｌｔｄ）、ＰＣＴ／ＥＰ２００３／０１４８６７号明細書（Ｇｌａｘｏ Ｇｒｏｕｐ Ｌｔｄ）およびＰＣＴ／ＥＰ２００４／００５４９４号明細書（Ｇｌａｘｏ Ｇｒｏｕｐ Ｌｔｄ）に開示されている。

抗コリン作動薬は、ムスカリン受容体でアンタゴニストとして作用する化合物、特にＭ_１もしくはＭ_３受容体のアンタゴニスト、Ｍ_１／Ｍ_３もしくはＭ_２／Ｍ_３の二重アンタゴニスト、Ｍ_１／Ｍ_２／Ｍ_３受容体の受容体またはパン−アンタゴニストである化合物である。吸入によって投与するための代表的な化合物として以下が挙げられる：イプラトロピウム（例えば臭化物として、ＣＡＳ２２２５４−２４−６、Ａｔｒｏｖｅｎｔの名称で販売されている）、オキシトロピウム（例えば臭化物として、ＣＡＳ３０２８６−７５−０）およびチオトロピウム（例えば臭化物として、ＣＡＳ１３６３１０−９３−５、Ｓｐｉｒｉｖａの名称で販売されている）。また対象となるのは、レバトロペート（例えば臭素酸化物として、ＣＡＳ２６２５８６−７９−８）およびＬＡＳ−３４２７３（国際公開第０１／０４１１８号パンフレットに開示されている）。代表的な経口投与用の化合物として以下が挙げられる：ピレンゼピン（ＣＡＳ２８７９７−６１−７）、ダリフェナシン（ＣＡＳ１３３０９９−０４−４、もしくは臭素酸化物としてＣＡＳ１３３０９９−０７−７、Ｅｎａｂｌｅｘの名称で販売されている）、オキシブチニン（ＣＡＳ５６３３−２０−５、Ｄｉｔｒｏｐａｎの名称で販売されている）、テロジリン（ＣＡＳ１５７９３−４０−５）、トルテロジン（ＣＡＳ１２４９３７−５１−５、または酒石酸塩としてＣＡＳ１２４９３７−５２−６、Ｄｅｔｒｏｌの名称で販売されている）、オチロニウム（例えば臭化物として、ＣＡＳ２６０９５−５９−０、Ｓｐａｓｍｏｍｅｎの名称で販売されている）、トロスピウムクロリド（ＣＡＳ１０４０５−０２−４）およびソリフェナシン（ＣＡＳ２４２４７８−３７−１、またはコハク酸塩としてＣＡＳ２４２４７８−３８−２、ＹＭ−９０５としても知られており、Ｖｅｓｉｃａｒｅの名称で販売されている）。

その他の抗コリン作動薬として式（ＸＸＩ）の化合物が含まれるが、これは米国特許出願第６０／４８７９８１号明細書に開示されている。

式中、
トロパン環に付着したアルキル鎖の配向性はｅｎｄｏ；
Ｒ^３１およびＲ^３２は独立して以下からなる群から選択され：例えば、１〜６炭素原子の直鎖または分枝鎖低級アルキル基、５〜６炭素原子のシクロアルキル基、６〜１０炭素原子のシクロアルキル−アルキル、２−チエニル、２−ピリジル、フェニル、４炭素原子以下のアルキル基で置換されたフェニルおよび４炭素原子以下のアルコシキ基で置換されたフェニル；
Ｘ⁻はＮ原子の陽性電荷と結合するアニオンであり、Ｘ⁻は限定するわけではないが、塩素、臭素、ヨウ素、硫酸、ベンゼンスルホン酸、およびトルエンスルホン酸であって、
例えば以下が挙げられる：
（３−ｅｎｄｏ）−３−（２，２−ジ−２−チエニルエテニル）−８，８−ジメチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンブロミド；
（３−ｅｎｄｏ）−３−（２，２−ジフェニルエテニル）−８，８−ジメチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンブロミド；
（３−ｅｎｄｏ）−３−（２，２−ジフェニルエテニル）−８，８−ジメチル−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタン４−メチルベンゼンスルホナート；
（３−ｅｎｄｏ）−８，８−ジメチル−３−［２−フェニル−２−（２−チエニル）エテニル］−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンブロミド；および／または
（３−ｅｎｄｏ）−８，８−ジメチル−３−［２−フェニル−２−（２−ピリジニル）エテニル］−８−アゾニアビシクロ［３．２．１］オクタンブロミド。

別の抗コリン作動薬として式（ＸＸＩＩ）または（ＸＸＩＩＩ）の化合物が含まれ、これは米国特許出願第６０／５１１００９号明細書に開示されている。

式中、
指定したＨ原子はｅｘｏ位にあり；
Ｒ^４１はＮ原子の陽性電荷と結合するアニオンであって、Ｒ^４１は限定するわけではないが、塩素、臭素、ヨウ素、硫酸、ベンゼンスルホン酸およびトルエンスルホン酸；
Ｒ^４２およびＲ^４３は独立して以下からなる群から選択され：直鎖または分枝鎖低級アルキル基（例えば、１〜６炭素原子を持つ）、シクロアルキル基（５〜６炭素原子を持つ）、シクロアルキル−アルキル（６〜１０炭素原子を持つ）、ヘテロ原子としてＮまたはＯを持つヘテロシクロアルキル（５〜６炭素原子を持つ）、ヘテロ原子としてＮまたはＯを持つヘテロシクロアルキル−アルキル（６〜１０炭素原子を持つ）、アリール、場合によって置換されたアリール、ヘテロアリール、および場合によって置換されたヘテロアリール；
Ｒ^４４は以下からなる群から選択され：（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_３〜Ｃ_１２）シクロアルキル、（Ｃ_３〜Ｃ_７）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_１２）シクロアルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_７）ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル−アリール、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル−ヘテロアリール、−ＯＲ^４５、−ＣＨ_２ＯＲ^４５、−ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＮ、−ＣＦ_３、−ＣＨ_２Ｏ（ＣＯ）Ｒ^４６、−ＣＯ_２Ｒ^４７、−ＣＨ_２ＮＨ_２、−ＣＨ_２Ｎ（Ｒ^４７）ＳＯ_２Ｒ^４５、−ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^４７）（Ｒ^４８）、−ＣＯＮ（Ｒ^４７）（Ｒ^４８）、−ＣＨ_２Ｎ（Ｒ^４８）ＣＯ（Ｒ^４６）、−ＣＨ_２Ｎ（Ｒ^４８）ＳＯ_２（Ｒ^４６）、−ＣＨ_２Ｎ（Ｒ^４８）ＣＯ_２（Ｒ^４５）、−ＣＨ_２Ｎ（Ｒ^４８）ＣＯＮＨ（Ｒ^４７）；
Ｒ^４５は以下からなる群から選択され：（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_１２）シクロアルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_７）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル−アリール、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル−ヘテロアリール；
Ｒ^４６は以下からなる群から選択され：（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_３〜Ｃ_１２）シクロアルキル、（Ｃ_３〜Ｃ_７）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_１２）シクロアルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_７）ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル−アリール、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル−ヘテロアリール；
Ｒ^４７およびＲ^４８は独立して、以下からなる群から選択され：Ｈ、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_３〜Ｃ_１２）シクロアルキル、（Ｃ_３〜Ｃ_７）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_１２）シクロアルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_７）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル−アリール、および（Ｃ_１〜Ｃ_６）アルキル−ヘテロアリール、であって、
例えば以下が挙げられる：
（ｅｎｄｏ）−３−（２−メトキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨージド；
３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオニトリル；
（ｅｎｄｏ）−８−メチル−３−（２，２，２−トリフェニル−エチル）−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン；
３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオンアミド；
３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオン酸；
（ｅｎｄｏ）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨージド；
（ｅｎｄｏ）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンブロミド；
３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロパン−１−オール；
Ｎ−ベンジル−３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピオンアミド；
（ｅｎｄｏ）−３−（２−カルバモイル−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨージド；
１−ベンジル−３−［３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−尿素；
１−エチル−３−［３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−尿素；
Ｎ−［３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−［３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−ベンズアミド；
３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−プロピオニトリル；
（ｅｎｄｏ）−３−（２−シアノ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨージド；
Ｎ−［３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−ベンゼンスルホンアミド；
［３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−尿素；
Ｎ−［３−（（ｅｎｄｏ）−８−メチル−８−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，２−ジフェニル−プロピル］−メタンスルホンアミド；および／または
（ｅｎｄｏ）−３−｛２，２−ジフェニル−３−［（１−フェニル−メタノイル）−アミノ］−プロピル｝−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンブロミド。

本発明の併用に有用であると見られる、特に対象とする化合物として、以下が挙げられる：
（ｅｎｄｏ）−３−（２−メトキシ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨージド；
（ｅｎｄｏ）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨージド；
（ｅｎｄｏ）−３−（２−シアノ−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンブロミド；
（ｅｎｄｏ）−３−（２−カルバモイル−２，２−ジフェニル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨージド；
（ｅｎｄｏ）−３−（２−シアノ−２，２−ジ−チオフェン−２−イル−エチル）−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンヨージド；および／または
（ｅｎｄｏ）−３−｛２，２−ジフェニル−３−［（１−フェニル−メタノイル）−アミノ］−プロピル｝−８，８−ジメチル−８−アゾニア−ビシクロ［３．２．１］オクタンブロミド。

特に対象とするのは、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩とＨ１アンタゴニストとを含む組み合わせである。好適なＨ１アンタゴニストとして、限定するわけではないが、以下が挙げられる：アメレキサノクス、アステミゾール、アザタジン、アゼラスチン、アクリバスチン、ブロムフェニルアミン、セチリジン、レボセチリジン、エフレチリジン、クロルフェニルアミン、クレマスチン、シクリジン、カレバスチン、シプロヘプタジン、カルビノキサミン、デスカルボエトキシロラタジン、ドキシルアミン、ジメチンデン、エバスチン、エピナスチン、エフレチリジン、フェキソフェナジン、ヒドロキシジン、ケトチフェン、ロラタジン、レボカバスチン、ミゾラスチン、メキタジン、ミアンセリン、ノベラスチン、メクリジン、ノラステミゾール、オロパタジン、ピクマスト、ピリラミン、プロメタジン、テルフェナジン、トリペレナミン、テメラスチン、トリメプラジンおよびトリプロリジン、特にセチリジン、レボセチリジン、エフレチリジンおよびフェキソフェナジン。単独で、またはＨ３受容体アンタゴニストと併用して使用することができるその他のヒスタミン受容体アンタゴニストとして、Ｈ４受容体のアンタゴニスト（および／または逆アゴニスト）、例えばJablonowski et al., J. Med. Chem. 46:3957-3960 (2003)に開示されている化合物が挙げられる。

こうして別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩とＰＤＥ４阻害剤とを含む組み合わせを提供する。

こうして別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩とβ_２−アドレナリン受容体アゴニストとを含む組み合わせを提供する。

こうして別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩と抗コリン作動薬とを含む組み合わせを提供する。

こうして別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩とＨ１受容体アンタゴニストとを含む組み合わせを提供する。

こうして別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩とコルチコステロイドとを含む組み合わせを提供する。

こうして別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容されるその塩とＡ２ａ受容体アゴニストとを含む組み合わせを提供する。

上記の組み合わせは組成物の形態での使用に好都合なように提供されるので、上記定義の組み合わせを場合によって薬学的に許容される希釈剤、担体または賦形剤とともに含む組成物が本発明の別の態様となる。

こうした組み合わせの個々の化合物は、別個のまたは配合した組成物として、順次または同時に投与することができる。好適には、個々の化合物を配合組成物として同時に投与することとなる。既知の治療薬の適切な用量は当業者が容易に理解できるものである。

当業者にとって、それが適切ならば、その他の治療薬成分を塩（例えばアルカリ金属もしくはアミン塩または酸付加塩）、またはプロドラッグ、またはエステル（例えば低級アルキルエステル）、または溶媒和物（例えば水和物）の形態で使用して、その治療薬成分の活性および／または安定性および／または物理的特性（例えば溶解性）を最適化することができるのは、明白なことである。また、それが適切ならば、治療薬成分を光学的に純粋な形態で使用するのがよいことも明白になるはずである。

本発明の化合物を以下に記載する方法または類似の方法によって調製することができる。すなわち、以下の説明および実施例は本発明の化合物の調製を説明するものである。実施例は本発明の範囲を限定するものと決して考えるべきではない。

実験概要

実施例の中で、以下の省略語を使用する：
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ｈ：時間
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィーマススペクトロメトリー
ｍｉｎ：分
ＭｇＳＯ_４：硫酸マグネシウム
ＰＳ−ＤＩＰＥＡ：ポリマーに担持されたジイソプロピルエチルアミン
ＲＴ：保持時間
ＴＢＴＵ：Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート
ＳＣＸカートリッジはイオン交換ＳＰＥカラムであって、その固定相はポリマー性ベンゼンスルホン酸である。これらを使用して、アミンを単離する。

ＳＣＸ２カートリッジはイオン交換ＳＰＥカラムであって、その固定相はポリマー性プロピルスルホン酸である。これらを使用して、アミンを単離する。

有機溶液は硫酸マグネシウムまたは硫酸ナトリウム上のいずれかで乾燥した。

ＬＣＭＳは、Ｓｕｐｅｌｃｏｓｉｌ ＬＣＡＢＺ＋ＰＬＵＳカラム（３．３ｃｍ×４．６ｍｍＩＤ）上で、水中の０．１％ギ酸および０．０１Ｍ酢酸アンモニウム（溶媒Ａ）とアセトニトリル中の０．０５％ギ酸５％水（溶媒Ｂ）で溶出させ、以下の溶出勾配を使用して、実施した：０．０〜７ｍｉｎ ０％Ｂ、０．７〜４．２ｍｉｎ １００％Ｂ、４．２〜５．３ｍｉｎ ０％Ｂ、５．３〜５．５ｍｉｎ ０％Ｂ、流速３ｍｌｍｉｎ^−１。Ｆｉｓｏｎｓ ＶＧ Ｐｌａｔｆｏｒｍスペクトルメーター上で、エレクトロスプレー陽性および陰性モード（ＥＳ＋ｖｅおよびＥＳ−ｖｅ）を使用して、マススペクトルを記録した。

Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ ＩＩはＡｒｇｏｎａｕｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｌｔｄから入手可能な自動マルチユーザーフラッシュクロマトグラフィーシステムであって、使い捨ての順相ＳＰＥカートリッジ（２ｇ〜１００ｇ）を利用する。これは勾配利用方法を実施することができるように、４成分溶媒オンライン混合系を具備している。多機能オープンアクセスソフトウェアを使用して、サンプルを待ち行列化した。これによって溶媒、流速、勾配プロファイルおよび採取条件が管理される。このシステムはＫｎａｕｅｒ可変波長ＵＶ−検出器および２つのＧｉｌｓｏｎ ＦＣ２０４画分採取器を具備していて、自動ピークカット、採取およびトラッキングが可能になっている。

延長ポンプヘッドを持つＷａｔｅｒｓ６００ポンプ、Ｗａｔｅｒｓ２７００自動サンプル投入器、Ｗａｔｅｒｓ９９６ダイオードアレイおよびＧｉｌｓｏｎ２０２画分採取器を備えたＷａｔｅｒｓ ＦｌａｃｔｉｏｎＬｙｎｘシステムで、１０ｃｍ×２．５４ｃｍ ｉｄ ＡＢＺ＋カラム上で、ＭＤＡＰ（分取ＨＰＬＣによる化合物精製の自動化システム）ＨＰＬＣを実施した。水中０．１％ギ酸（溶媒Ａ）およびアセトニトリル中０．１％ギ酸（溶媒Ｂ）、流速２０ｍｌｍｉｎ^−１、室温で１５分間、適切な溶出勾配を使用して溶出させ、２００〜３２０ｎｍで検出した。ＺＭＤ質量分析器で、エレクトロスプレー陽性および陰性モード、オールタネートスキャンを使用して、マススペクトルを記録した。使用したソフトウェアはＯｐｅｎＬｙｎｘによるＭａｓｓＬｙｎｘ ３．５およびＦｌａｃｔｉｏｎＬｙｎｘオプションである。

ＡＣＤ／Ｎａｍｅ ＰＲＯ６．０２化合物命名ソフトウェア（Advanced Chemistry Developments Inc.; Toronto, Ontario, M5H2L3, Canada）を使用して、化合物を命名した。

中間体１
Ｎ^２−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ^１−｛４−［（フェニルメチル）オキシ］フェニル｝グリシンアミド

４−［（フェニルメチル）オキシ］アニリン塩酸塩（例えばＦｉｓｈｅｒより入手可能）（１０ｇ）を無水テトラヒドロフラン（１００ｍｌ）中で撹拌し、氷／水浴中で約５℃まで冷却した。炭酸カリウム（１６．１５ｇ）の水（６０ｍｌ）溶液を上記混合物に添加し、その後塩化クロロアセチル（４．２２ｍｌ）を３０分かけて滴下した。混合物を室温まで昇温させ、有機相を分離した。有機相を氷／水浴中で約５℃まで冷却し、２−アミノエタノール（９ｇ）を添加した。混合物を室温まで昇温させ、６０℃で２時間加熱し、室温で一晩放置し、６０℃でさらに２時間加熱した。反応混合物を酢酸エチルおよび水間に分配した。有機相を分離し、水、ブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濃縮した。残渣をクロロホルムから再結晶させて、表記化合物（８．１ｇ）を生成させた。LCMS RT = 2.17 min, ES+ve m/z 301(M+H)⁺。

中間体２
１，１−ジメチルエチル（２−ヒドロキシエチル）［２−オキソ−２−（｛４−［（フェニルメチル）オキシ］フェニル｝アミノ）エチル］カルバメート

ＤＣＭ（２００ｍｌ）中のＮ^２−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ^１−｛４−［（フェニルメチル）オキシ］フェニル｝グリシンアミド（中間体１）（８．１ｇ）の溶液に、二炭酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（例えばＦｉｓｈｅｒより入手可能）（１４．５ｇ）および４−ジメチルアミノピリジン（例えばＡｌｄｒｉｃｈより入手可能）（１５０ｍｇ）を添加した。混合物を３０分撹拌し、水性飽和重炭酸ナトリウム（１５０ｍｌ）を添加した。有機相を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）して蒸発させた。残渣をメタノール（１５０ｍｌ）に溶解させ、炭酸カリウム（１４．５ｇ）を添加した。混合物を蒸気浴上で１５分加熱し、室温まで冷却させて、１８時間静置した。反応混合物を蒸発させ、ＤＣＭおよび水間に分配した。有機相を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、蒸発させた。残渣をフラッシュシリカに事前に吸着させ、フラッシュクロマトグラフィー（１００ｇシリカカートリッジ；０％〜１００％ＥｔＯＡｃ〜シクロヘキサン勾配、３０分）で精製して、表記化合物（５．０ｇ）を生成させた。LCMS RT = 3.2 min, ES+ve m/z 401(M+H)⁺。

中間体３
１，１−ジメチルエチル３−オキソ−４−｛４−［（フェニルメチル）オキシ］フェニル｝−１−ピペラジンカルボキシレート

無水ＤＣＭ（５０ｍｌ）およびトリエチルアミン（２０ｍｌ）中の１，１−ジメチルエチル（２−ヒドロキシエチル）［２−オキソ−２−（｛４−［（フェニルメチル）オキシ］フェニル｝アミノ）エチル］カルバメート（中間体２）（４．９９ｇ）の溶液に窒素下で、塩化メタンスルホニル（２．５ｍｌ）を添加した。混合物を３０分撹拌し、その後ＤＣＭおよび水性飽和重炭酸ナトリウム間に分配した。有機層を分離し、真空濃縮した。残渣を無水ＤＭＦ（２０ｍｌ）に溶解させ、水素化ナトリウム（６０％油分散物、０．６ｇ）を添加した。混合物を２．５時間撹拌し、水性飽和重炭酸ナトリウムで反応を停止させ、ＥｔＯＡｃ×３で抽出した。有機相をまとめて、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１００ｇシリカカートリッジ；０％〜１００％ＥｔＯＡｃ〜シクロヘキサン勾配、４０分）で精製し、表記化合物（４．１ｇ）を生成させた。LCMS RT = 3.2 min, ES+ve m/z 383(M+H)⁺。

中間体４
１，１−ジメチルエチル４−（４−ヒドロキシフェニル）−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート

エタノール（２５ｍｌ）およびＥｔＯＡｃ（２５ｍｌ）中の１，１−ジメチルエチル３−オキソ−４−｛４−［（フェニルメチル）オキシ］フェニル｝−１−ピペラジンカルボキシレート（中間体３）（３．１ｇ）の溶液を炭素上の１０％パラジウム（１ｇ）で２時間、水素化した。セライトでのろ過によって、触媒を除去し、エタノールで洗浄した。まとめたろ液および洗浄液を濃縮して、表記化合物（１．９２ｇ）を生成させた。LCMS RT = 2.5 min, ES+ve m/z 293(M+H)⁺。

中間体５
１，１−ジメチルエチル４−｛４−［（３−クロロプロピル）オキシ］フェニル｝−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート

２−ブタノン（２００ｍｌ）中の１，１−ジメチルエチル４−（４−ヒドロキシフェニル）−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート（中間体４）（５．０ｇ）の溶液に炭酸カリウム（４．７ｇ）を、その後１−ブロモ−３−クロロプロパン（４．０ｇ）を添加した。混合物を窒素下で還流しながら週末中（約７２時間）加熱し、室温まで冷却し、水（２００ｍｌ）を添加した。有機相を分離し、水性層をＤＣＭで２回抽出した。有機相をまとめ、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１００ｇシリカカートリッジ；０％〜１００％ＥｔＯＡｃ〜シクロヘキサン勾配、６０分）で精製して、表記化合物および１，１−ジメチルエチル４−｛４−［（３−ブロモプロピル）オキシ］フェニル｝−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート（６．２ｇ；９：１）の混合物を生成させた。LCMS RT = 3.2 min, ES+ve m/z 369/371(3:1)(M+H)⁺（塩化物）およびRT = 3.26 min, ES+ve m/z 413/415(1:1)(M+H)⁺（臭化物）。

中間体６
１，１−ジメチルエチル４−［４−（｛３−［（２Ｒ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート

１，１−ジメチルエチル４−｛４−［（３−クロロプロピル）オキシ］フェニル｝−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレートおよび１，１−ジメチルエチル４−｛４−［（３−ブロモプロピル）オキシ］フェニル｝−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート（中間体５）の混合物（９：１；２．５８ｇ）を２−ブタノン（５０ｍｌ）に溶解させた。炭酸カリウム（２．９ｇ）、ヨウ化カリウム（２．３２ｇ）および（２Ｒ）−２−メチルピロリジン塩酸（これは例えば米国特許出願公開第２００４／０１７１８４５号明細書に記載されたようにして、製造することができる）（１．０ｇ）を添加した。混合物を窒素下で還流しながら週末中（約７２時間）加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、ＤＣＭおよび水間に分配した。有機相を乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー［１００ｇシリカカートリッジ；０％〜３０％のメタノール中１％トリエチルアミン〜ＤＣＭ勾配、６０分］で精製して、表記化合物（１．８７ｇ）を生成させた。LCMS RT = 2.2 min, ES+ve m/z 418(M+H)⁺。

中間体７
１−［４−（｛３−［（２Ｒ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−２−ピペラジノン

ＤＣＭ（１０ｍｌ）中の１，１−ジメチルエチル４−［４−（｛３−［（２Ｒ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート（中間体６）（１．８７ｇ）に、ＤＣＭ（６ｍｌ）中のトリフルオロ酢酸（４ｍｌ）の溶液を添加した。混合物を窒素下で２時間撹拌した。トリフルオロ酢酸（４ｍｌ）を添加し、混合物をさらに１８時間撹拌した。混合物を蒸発させ、残渣をメタノールに溶解させた。溶液をＳＣＸ−２カートリッジ（７０ｇ）に添加した。カートリッジをメタノールで洗浄し、生成物をメタノール中１０％０．８８０アンモニアで溶出させた。適切なアンモニア画分を１つに合わせて、濃縮し、表記化合物（１．３９ｇ）を生成させた。LCMS RT = 0.35 min, ES+ve m/z 318(M+H)⁺。

中間体８
１，１−ジメチルエチル４−（４−｛［３−（２−メチル−１−ピロリジニル）プロピル］オキシ｝フェニル）−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート

１，１−ジメチルエチル４−｛４−［（３−クロロプロピル）オキシ］フェニル｝−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート（中間体５）（１．３ｇ）の溶液を２−ブタノン（５０ｍｌ）に溶解させた。炭酸カリウム（０．９６ｇ）、ヨウ化カリウム（１．１６ｇ）および２−メチルピロリジン（例えばＦｉｓｈｅｒから入手可能）（１．５ｇ）を添加した。混合物を８０℃で２４時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（×２）および水間に分配した。有機相をまとめて濃縮した。残渣をＦｌａｓｈｍａｓｔｅｒ ＩＩ［１００ｇシリカカートリッジ；０％〜１５％（メタノール中１０％０．８８０アンモニア）〜ＤＣＭ勾配、３０分］で精製した。適切な画分をまとめて、濃縮し、表記化合物（０．８５ｇ）を生成させた。LCMS RT = 2.28 min, ES+ve m/z 418(M+H)⁺。

中間体９
１−（４−｛［３−（２−メチル−１−ピロリジニル）プロピル］オキシ｝フェニル）−２−ピペラジノン

１，１−ジメチルエチル４−［４−（｛３−［（２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート（中間体８）（０．８５ｇ）をＤＣＭ（１０ｍｌ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸−ＤＣＭ混合物（１０ｍｌ、２：５）を添加した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した。溶媒を真空除去した。残渣をメタノールに溶解させ、溶液をＳＣＸ−２カートリッジ（７０ｇ）に添加した。カートリッジをメタノールで洗浄し、生成物をメタノール中１０％０．８８０アンモニアで溶出させた。適切なアンモニア画分を１つにして、濃縮し、表記化合物（６４５ｍｇ）を生成させた。LCMS RT = 0.36 min, ES+ve m/z 318(M+H)⁺。

中間体１０
１，１−ジメチルエチル４−［４−（｛３−［（２Ｓ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート

１，１−ジメチルエチル４−｛４−［（３−クロロプロピル）オキシ］フェニル｝−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート（中間体５）（１．３ｇ）の溶液を２−ブタノン（５０ｍｌ）に溶解させた。炭酸カリウム（０．９６ｇ）、ヨウ化カリウム（１．１６ｇ）および（２Ｓ）−２−メチルピロリジン塩酸（これは例えば米国特許出願公開第２００４／０１７１８４５号明細書に記載された方法によって作製することができる）（０．２ｇ）を添加した。混合物を８０℃で一晩（約１８時間）加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、ＤＣＭおよび水間に分配した。有機相を乾燥し、濃縮した。残渣を最初にＦｌａｓｈｍａｓｔｅｒ ＩＩクロマトグラフィー［７０ｇシリカカートリッジ；０％〜３０％（メタノール中１％トリエチルアミン）−ＤＣＭ勾配、４０分］で精製した。適切なアンモニア画分をまとめて、濃縮した。残渣をＭｅＯＨ中に取り、２０ｇ ＳＣＸ−２イオン交換カートリッジに添加し、メタノール中１０％０．８８０アンモニア溶液で溶出させて、表記化合物（０．４１８ｇ）を生成させた。LCMS RT = 2.2 min, ES+ve m/z 418(M+H)⁺。

中間体１１
１−［４−（｛３−［（２Ｓ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−２−ピペラジノン

１，１−ジメチルエチル４−［４−（｛３−［（２Ｓ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−３−オキソ−１−ピペラジンカルボキシレート（中間体１０）（０．４１８ｇ）をＤＣＭ（１０ｍｌ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（２ｍｌ）を添加した。反応混合物を室温で２〜３時間撹拌した。溶媒を真空除去して、表記化合物（０．３２ｇ）を残留させた。LCMS RT = 0.37 min, ES+ve m/z 318(M+H)⁺。

実施例１
４−［（２，４−ジフルオロフェニル）カルボニル］−１−［４−（｛３−［（２Ｒ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−２−ピペラジノン、ギ酸塩

無水ＤＭＦ（１ｍｌ）およびトリエチルアミン（０．２１ｍｌ）中の１−［４−（｛３−［（２Ｒ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−２−ピペラジノン（中間体７）（１５９ｍｇ）の溶液を、無水ＤＭＦ（２ｍｌ）中の２，４−ジフルオロ安息香酸（７９ｍｇ）およびＴＢＴＵ（０．２１ｇ）の混合物に添加した。溶液を室温で１８時間撹拌し、その後メタノールで希釈した。この溶液をＳＣＸ−２カートリッジ（２０ｇ）に添加した。カートリッジをメタノールで洗浄し、生成物をメタノール中の１０％０．８８０アンモニアで溶出させた。適切なアンモニア画分をまとめて濃縮した。残渣を自動調製用質量目的ＨＰＬＣによって精製して、表記化合物（１９７ｍｇ）を生成させた。LCMS RT = 2.14 min, ES+ve m/z 458(M+H)⁺。¹H NMRδ(CD₃OD) 8.53(1H, s), 7.56(1H, m), 7.25(2H, m), 7.13(2H, m), 6.99(2H, m), 4.48(55% 2H, s), 4.18 - 4.07 [(45% 2H) + 4H +(55% 1H), t + m)], 3.85 - 2.95(7H + 45% 1H, m), 2.30 - 2.10(3H, m), 2.08 - 1.98(2H, m), 1.75 - 1.62(1H, m), 1.38(3H, d)。

実施例２
４−［（２，４−ジフルオロフェニル）カルボニル］−１−［４−（｛３−［２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−２−ピペラジノン、ギ酸塩

中間体９および２，４−ジフルオロ安息香酸を使用し、実施例１に記載したものと類似の方法で化合物を調製して、表記化合物を生成させた。LCMS RT = 2.03 min, ES+ve m/z 458(M+H)⁺。

実施例３
４−［（２，４−ジフルオロフェニル）カルボニル］−１−［４−（｛３−［（２Ｓ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−２−ピペラジノン、ギ酸塩

中間体１１および２，４−ジフルオロ安息香酸を使用し、実施例１に記載したものと類似の方法で化合物を調製して、表記化合物を生成させた。LCMS RT = 2.14 min, ES+ve m/z 458(M+H)⁺。

生物学的データ

本発明の化合物を、以下のまたは同様のアッセイによって、ｉｎ ｖｉｔｒｏ生物学的活性について試験することができる。

Ｈ１受容体細胞系の作製およびＦＬＩＰＲアッセイプロトコル

１．ヒスタミンＨ１細胞系の作製
文献［Biochem. Biophys. Res. Commun., 201(2): 894, (1994)］に記載されている既知の操作法を使用して、ヒトＨ１受容体をクローン化した。文献［Br. J. Pharmacol., 117(6): 1071, (1996)］に記載されている既知の操作法を使用して、ヒトＨ１受容体を安定して発現するチャイニーズハムスター卵巣細胞を作製した。

ヒスタミンＨ１機能性アンタゴニストアッセイ
非コーティング黒色壁面透明底３８４ウェル組織培養プレートに、１０％透析済みウシ胎仔血清（Ｇｉｂｃｏ／Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ｃａｔ．ｎｏ．１２４８０−０２１）および２ｍＭ Ｌ−グルタミン（Ｇｉｂｃｏ／Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ｃａｔ．ｎｏ．２５０３０−０２４）を補充したアルファ最少必須培地（Ｇｉｂｃｏ／Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ｃａｔ．ｎｏ．２２５６１−０２１）中で、ヒスタミンＨ１細胞系を播種し、５％ＣＯ_２、３７℃で一晩維持した。

各ウェルから過剰の培地を除去して、１０μｌを残した。各ウェルに、ローディングダイ（Ｔｙｒｏｄｅｓバッファー＋プロベネシド（１４５ｍＭ ＮａＣｌ、２．５ｍＭ ＫＣｌ、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ、１．２ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１．５ｍＭ ＣａＣｌ_２、２．５ｍＭプロベネシド、ＮａＯＨ １．０ＭでｐＨを７．４０に調整）で希釈した２５０μＭ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｂｌａｃｋ、２μＭ Ｆｌｕｏ−４）３０μｌを添加し、プレートを５％ＣＯ_２、３７℃で６０分、インキュベートした。

各ウェルに、Ｔｙｒｏｄｅｓバッファー＋プロベネシドで必要な濃度に希釈した試験化合物１０μｌ（または対照としてＴｙｒｏｄｅｓバッファー＋プロベネシド１０μｌ）を添加し、プレートを３７℃、５％ＣＯ_２で３０分、インキュベートした。次に、ヒスタミンの最終アッセイ濃度がＥＣ_８０の結果になる濃度でのヒスタミン１０μｌの添加の前および後に、プレートをＦＬＩＰＲ（商標）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、ＵＫ）に入れて、Ｓｕｌｌｉｖａｎら（In: Lambert DG (ed.), Calcium Signaling Protocols, New Jersey: Humana Press, 1999, pp. 125-136）が記載している手法で、細胞蛍光（λ_ｅｘ＝４８８ｎｍ、λ_ＥＭ＝５４０ｎｍ）をモニターした。

機能性アンタゴニスト作用は、ＦＬＩＰＲ（商標）システム（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）によって測定される、ヒスタミンの抑制が誘発する蛍光の増加によって指示される。濃度効果曲線によって、標準薬理学的数学的分析を使用して、機能的親和性を判定する。

２．Ｈ３受容体細胞系の作製、膜調製および機能的ＧＴＰγＳアッセイプロトコル

ヒスタミンＨ３細胞系の作製
ヒスタミンＨ３のｃＤＮＡを、これを保持するベクターであるｐＣＤＮＡ３．１ ＴＯＰＯ（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）から、酵素ＢａｍＨ１およびＮｏｔ−１によるプラスミドＤＮＡの制限消化で単離し、同一の酵素で消化した誘導性発現ベクターｐＧｅｎｅ（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）に連結した。ＧｅｎｅＳｗｉｔｃｈ（商標）システム（インデューサー不在ではトランスジーン発現のスイッチが切られ、インデューサーの存在中ではスイッチが入るシステム）を、米国特許第５，３６４，７９１号明細書、米国特許第５，８７４，５３４号明細書および米国特許第５，９３５，９３４号明細書に記載されたようにして、実施した。連結されたＤＮＡをコンピテントＤＨ５αＥ．ｃｏｌｉ宿主細菌細胞中に形質転換し、Ｚｅｏｃｉｎ（商標）（ｐＧｅｎｅおよびｐＳｗｉｔｃｈ上に存在するｓｈ ｂｌｅ遺伝子を発現する細胞の選択を可能にする抗生物質の１つ）を含有するＬｕｒｉａ Ｂｒｏｔｈ（ＬＢ）アガー上に５０μｇｍｌ^−１でプレーティングした。再連結されたプラスミドを含有するコロニーを制限解析によって同定した。ＤＮＡ調製キット（Ｑｉａｇｅｎ Ｍｉｄｉ−Ｐｒｅｐ）を製造元の指針（Ｑｉａｇｅｎ）にしたがって使用し、ｐＧｅｎｅＨ３プラスミドを含有する宿主細菌の培養物２５０ｍｌから、哺乳動物細胞へのトランスフェクション用のＤＮＡを調製して、単離した。

ｐＳｗｉｔｃｈ調節プラスミド（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）であらかじめトランスフェクトしたＣＨＯ Ｋ１細胞を、使用の２４時間前に、１０％ｖ／ｖ透析済みウシ胎仔血清、Ｌ−グルタミン、およびヒグロマイシン（１００μｇｍｌ^−１）を補充したＨａｍｓ Ｆ１２（ＧＩＢＣＯＢＲＬ、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）培地を含有する、完全培地（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｍｅｄｉｕｍ）にＴ７５フラスコ当たり２×１０^６細胞で播種した。Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ｐｌｕｓを製造元の指針（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）にしたがって使用して、プラスミドＤＮＡを細胞中にトランスフェクトした。トランスフェクションの４８時間後、５００μｇｍｌ^−１Ｚｅｏｃｉｎ（商標）を補充した完全培地に、細胞を入れた。

選択の１０−１４日後、１０ｎＭ Ｍｉｆｅｐｒｉｓｔｏｎｅ（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）を培養培地に添加して、受容体の発現を誘導した。誘導の１８時間後、エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ；１：５０００；ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、細胞をフラスコから取り出した後、リン酸塩緩衝化生理食塩水ｐＨ７．４で数回洗浄し、フェノールレッドを含まず、Ｅａｒｌｅｓ塩および３％Ｆｏｅｔａｌ Ｃｌｏｎｅ ｌｌ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充した最少必須培地（Ｍｉｎｉｍｕｍ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｍｅｄｉｕｍ）（ＭＥＭ）を含有する選別用培地（Ｓｏｒｔｉｎｇ Ｍｅｄｉｕｍ）に懸濁させた。約１×１０^７細胞について、ヒスタミンＨ３受容体のＮ末端ドメインに対して誘発させたウサギポリクローナル抗体、４ａで染色し、氷上で６０分インキュベートし、その後選別用培地で２回洗浄することによって、受容体発現を試験した。受容体と結合した抗体を、Ａｌｅｘａ４８８蛍光マーカー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）とコンジュゲートさせたヤギ抗ウサギ抗体と細胞を氷上で６０分インキュベートすることによって、検出した。さらに２回の選別用培地での洗浄後、細胞を５０μｍ Ｆｉｌｃｏｎ（商標）（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）でろ過し、その後Ａｕｔｏｍａｔｉｃ Ｃｅｌｌ Ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ Ｕｎｉｔと組み合わせたＦＡＣＳ Ｖａｎｔａｇｅ ＳＥ Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒで分析した。対照細胞は同様の手法で処理した非誘導細胞とした。陽性染色された細胞を単細胞として、５００μｇｍｌ^−１Ｚｅｏｃｉｎ（商標）を含有する完全培地（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｍｅｄｉｕｍ）を含む９６−ウェルプレートに取り分け、増殖させた後、抗体およびリガンド結合研究によって、受容体発現について再分析した。１クローン、３Ｈ３を膜調製用に選択した。

培養細胞からの膜の調製
本プロトコルの全ステップを４℃および事前冷却した試薬によって実施する。細胞ペレットを、１０容量のホモジナイズ用バッファー（５０ｍＭ Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、１ｍＭエチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）、ＫＯＨでｐＨ７．４に調整、１０^−６Ｍロイペプチン（アセチル−ロイシル−ロイシル−アルギナル；Ｓｉｇｍａ Ｌ２８８４）、２５μｇｍｌ^−１バシトラシン（Ｓｉｇｍａ Ｂ０１２５）、１ｍＭフェニルメチルスルホニルフルオライド（ＰＭＳＦ）および２×１０^−６ＭペプスタインＡ（Ｓｉｇｍａ）を補充）に懸濁させる。次に細胞を１リッターガラスＷａｒｉｎｇブレンダーで２×１５秒間、ホモジナイズし、その後５００ｇで２０分、遠心分離する。次に上清を４８，０００ｇで３０分、遠心分離する。ペレットを５秒間ボルテックスすることによって、ホモジナイズ用バッファー（４×当初細胞ペレットの体積）に再懸濁させ、その後Ｄｏｕｎｃｅホモジナイザー（１０〜１５回）でホモジナイズする。調製のこの時点で、ポリプロピレンチューブに分注して、−８０℃で保存する。

ヒスタミンＨ３機能性アンタゴニストアッセイ
硬質白色３８４ウェルプレート内のアッセイする各化合物に、以下を添加する：
（ａ）ＤＭＳＯ中に必要な濃度に希釈した試験化合物０．５μｌ（または対照としてＤＭＳＯ ０．５μｌ）；
（ｂ）以下によって調製した、ビーズ／膜／ＧＤＰ混合物３０μｌ：Ｗｈｅａｔ Ｇｅｒｍ Ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ Ｐｏｌｙｓｔｙｒｅｎｅ ＬｅａｄＳｅｅｋｅｒ（登録商標）（ＷＧＡ ＰＳ ＬＳ）シンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）ビーズと膜（上記の方法論によって調製）を混合し、アッセイバッファー（２０ｍＭ Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）＋１００ｍＭ ＮａＣｌ＋１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２、ｐＨ７．４ ＮａＯＨ）で希釈して、１ウェルについてタンパク質５μｇおよびビーズ０．２５ｍｇを含有し、最終体積が３０μｌとなるようにする。これを回転機上、室温で６０分インキュベートし、プレートへの添加の直前に、１０μＭの最終濃度のグアノシン５’二リン酸（ＧＤＰ）（Ｓｉｇｍａ；アッセイバッファーで希釈）を添加する；
（ｃ）０．３８ｎＭ［^３５Ｓ］−ＧＴＰγＳ（Ａｍｅｒｓｈａｍ；放射性濃度＝３７ＭＢｑｍｌ^−１；比活性＝１１６０Ｃｉｍｍｏｌ^−１）１５μｌ、ヒスタミン（ヒスタミンの最終アッセイ濃度がＥＣ_８０となる濃度）。

２〜６時間後、プレートを１５００ｒｐｍで５分遠心分離し、１プレートについて５分、６１３／５５フィルターを使用して、Ｖｉｅｗｌｕｘカウンターで計数する。４パラメーターのロジスティック式を使用してデータを分析する。使用する基底活性は最小値、すなわちヒスタミンをウェルに添加しないものである。

本発明の化合物のバイオアベイラビリティおよびＣＮＳ侵入については、以下の、または同様のアッセイによってアッセイすることができる。

１．ＣＮＳ侵入方法
雄ＣＤ Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、化合物を１ｍｇｋｇ^−１の名目用量レベルで静脈投与した。化合物を５％ＤＭＳＯ／４５％ＰＥＧ２００／５０％水で製剤化した。投与の５分後、イソフルランでの致死麻酔下で血液サンプルを採取し、脳侵入の評価のために、脳も取り出した。血液サンプルはヘパリン化チューブに直接採取した。血液サンプルはタンパク質沈殿を使用して分析用に調製し、脳サンプルは、ホモジナイズによる脳からの薬物の抽出およびその後のタンパク質沈殿を使用して調製した。化合物特異的質量遷移を使用する定量ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析によって、血液および脳抽出物中の母薬物の濃度を測定した。

２．ラット薬物動態学的方法
雄ＣＤ Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、化合物をそれぞれ１ｍｇｋｇ^−１および３ｍｇｋｇ^−１の予定の用量レベルで単回静脈または経口投与した。化合物を５％ＤＭＳＯ／４５％ＰＥＧ２００／５０％水で製剤化した。投与の０．０８３、０．２５、０．５、１、２、４、および７時間後、連続的または最終の血液サンプルを採取することによって、静脈プロファイルを取得した。経口プロファイルは、投与の０．２５、０．５、１、２、４、７および１２時間後、連続的または最終の血液サンプルを採取することによって、取得した。血液サンプルはヘパリン化チューブに直接採取した。タンパク質沈殿を使用して血液サンプルを調製し、化合物特異的質量遷移を使用する定量ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析に供した。薬物濃度−時間プロファイルを作製し、非コンパートメントＰＫ解析を使用して、半減期、クリアランス、分布量および経口バイオアベイラビリティの評価を作製した。

３．イヌ薬物動態学的方法
雄Ｂｅａｇｌｅイヌに、化合物をそれぞれ１ｍｇｋｇ^−１および２ｍｇｋｇ^−１の名目用量レベルで単回静脈または経口投与した。両方の投与実践について同一のイヌを使用するクロスオーバーデザインにしたがって、研究を実施し、投与実践は１週間間隔とした。化合物を５％ＤＭＳＯ／４５％ＰＥＧ２００／５０％水で製剤化した。投与の０．０８３、０．２５、０．５、０．７５、１、２、４、６および１２時間後、連続的に血液サンプルを採取することによって、静脈プロファイルを取得した。経口プロファイルは、投与の０．２５、０．５、０．７５、１、２、４、６、１２および２４時間後、連続的に血液サンプルを採取することによって、取得した。血液サンプルはヘパリン化チューブに直接採取した。タンパク質沈殿を使用して血液サンプルを調製し、化合物特異的質量遷移を使用する定量ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析に供した。薬物濃度−時間プロファイルを作製し、非コンパートメントＰＫ解析を使用して、半減期、クリアランス、分布量および経口バイオアベイラビリティの評価を作製した。

結果
上記のアッセイまたは同様のアッセイ中、式（Ｉ）の化合物は、平均ｐＫｉ（ｐＫｂ）がＨ３では約８．５を超え、またＨ１では約５．７未満であった。

その上、Ｅ１の化合物は、経口バイオアベイラビリティがラットで約４８％Ｆおよびイヌで約１００％Ｆであり、ＣＮＳ侵入が約５７．５ｎｇ／ｇであった。

本明細書に引用した参考文献、特許および特許出願を含む、すべての文書は、その全体を本明細書中に組み込まれるものとみなされる。

Claims (14)

1. 式（Ｉ）の化合物またはその塩。
   

   
2. 塩が薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の化合物。
3. ４−［（２，４−ジフルオロフェニル）カルボニル］−１−［４−（｛３−［（２Ｒ）−２−メチル−１−ピロリジニル］プロピル｝オキシ）フェニル］−２−ピペラジノン、またはその塩。
4. 以下を含む、式（Ｉ）の化合物またはその塩の調製方法：
   （ａ）式（ＩＩ）の化合物またはその塩と、２，４−ジフルオロ安息香酸とを反応させる工程；
   

   

   （ｂ）ラセミ体からＲおよびＳ異性体をそれぞれ単離する工程；または
   （ｃ）式（Ｉ）の化合物の塩を調製する工程。
5. 治療に使用するための、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
6. 炎症性および／またはアレルギー性障害の治療に使用するための、請求項５に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
7. 鼻炎、特にアレルギー性鼻炎の治療に使用するための、請求項５に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。
8. 請求項１〜３のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容されるその塩を、場合により１種以上の薬学的に許容される担体および／または賦形剤とともに含む、組成物。
9. Ｈ１受容体アンタゴニストをさらに含む、請求項８に記載の組成物。
10. 請求項１〜３のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容されるその塩とＨ１受容体アンタゴニストとを含む、組み合わせ。
11. 炎症性および／またはアレルギー性障害の治療または予防のための医薬の製造における、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容されるその塩の使用。
12. 障害がアレルギー性鼻炎である、請求項１１に記載の使用。
13. 炎症性および／またはアレルギー性障害の治療または予防のための方法であって、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物または薬学的に許容されるその塩の有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む、前記方法。
14. 障害がアレルギー性鼻炎である、請求項１３に記載の方法。