JP2008208039A

JP2008208039A - クマリン誘導体及びその用途

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Publication number: JP2008208039A
Application number: JP2007043878A
Authority: JP
Inventors: Hiroyuki Kagechika; 弘之影近; Tomoya Hirano; 智也平野
Original assignee: Tokyo Medical and Dental University NUC
Current assignee: Tokyo Medical and Dental University NUC
Priority date: 2007-02-23
Filing date: 2007-02-23
Publication date: 2008-09-11

Abstract

【課題】機能性蛍光物質として、特定の分子種の検出や溶液の脂溶性の高さの検出等に好適に利用可能な、新規なクマリン誘導体を提供する。
【解決手段】下記一般式（１）で表される化合物。

〔式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５は水素又はＣＯＯＲ^６等、ＸはＮＲ^６Ｒ^７を示し、Ｒ^６、Ｒ^７は水素、アルキル基等を示す。〕
【選択図】なし

Description

本発明は、新規なクマリン誘導体及びその蛍光物質としての用途に関する。

特定の機能を持った蛍光物質は、多くの分野の科学研究において非常に有用である（非特許文献１〜２）。例えば、特定の分子種（イオン、小分子、酵素等）と結合又は反応することによってその蛍光特性（励起波長、蛍光波長、蛍光強度等）が変化する機能を持った蛍光分子は、その蛍光特性の変化から、分子種の濃度や活性を見積もることができる。
例えば、従来の蛍光物質として、カルシウムイオンと結合することによって蛍光強度が大きく変化するＦｌｕｏ−３（非特許文献３）や、一酸化窒素と反応することによって蛍光強度が増大するＤＡＦ−２（非特許文献４）が知られており（下記反応式参照）、このようなＦｌｕｏ−３やＤＡＦ−２は、それぞれカルシウム蛍光センサーや一酸化窒素蛍光センサーとして有用である。

また、このような蛍光物質は、例えば生命科学の研究では、測定対象の分子種の濃度や活性の時空間的な変化を、生きた生体、組織、細胞を用いて解析することができるため、生体内における分子種の機能を解析する為にも有用である。

このような有用性の高さから、現在も更に新たな機能性蛍光物質の開発が求められている。

Ｌａｃｋｏｗｉｔｚ，Ｊ．Ｒ．ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＳｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ，ＴｈｉｒｄＥｄｉｔｉｏｎ；ＳｐｒｉｎｇｌｅｒＳｃｉｅｎｃｅ：ＮｅｗＹｏｒｋ，２００６．ｄａＳｉｌｖａ，Ａ．Ｐ．；Ｇｕｎａｒａｔｎｅ，Ｈ．Ｑ．；Ｇｕｎｎｌａｕｇｓｓｏｎ，Ｔ．；Ｈｕｘｌｅｙ，Ａ．Ｊ．Ｍ．；ＭｃＣｏｙ，Ｃ．Ｐ．；Ｒａｄｅｍａｃｈｅｒ，Ｊ．Ｔ．；Ｒｉｃｅ，Ｔ．Ｅ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９７，９７，１５１５−１５６６．Ｍｉｎｔａ，Ａ．；Ｋａｏ，Ｊ．Ｐ．Ｙ．；Ｔｓｉｅｎ，Ｒ．Ｙ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９８９，２６４，８１７１−８１７８．Ｋｏｊｉｍａ，Ｈ．；Ｎａｋａｔｓｕｂｏ，Ｎ．；Ｋｉｋｕｃｈｉ，Ｋ．；Ｋａｗａｈａｒａ，Ｓ．；Ｋｉｒｉｎｏ，Ｙ．；Ｎａｇｏｓｈｉ，Ｈ．；Ｈｉｒａｔａ，Ｙ．；Ｎａｇａｎｏ，Ｔ．Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．１９９８，７０，２４４６−２４５３．

本発明は、前記諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、機能性蛍光物質として、特定の分子種の検出や溶液の脂溶性の高さの検出等に好適に利用可能な、新規なクマリン誘導体を提供することを目的とする。

本発明者らは、機能性蛍光物質を開発するための方法論として、多種類の候補蛍光物質からなるライブラリー構築が有用であると考えた。そこで本発明者らは、図１に示すように、単一の原料（蛍光団）から同様の反応条件にて多種類の化合物を効率よく得るというコンビナトリアル合成法を蛍光物質に適用し、クマリンを基本骨格とした蛍光物質ライブラリーの構築を行っている。

クマリンの構造、並びに置換位置は以下の通りである。クマリンに蛍光性を持たせるために、通常、７位には水酸基、アミノ基、アルコキシル基等の電子供与性基が導入される。

これまでに、クマリンの３位に様々な置換基を導入した蛍光物質ライブラリーが報告されていたが（Ｓｃｈｉｅｄｅｌ，Ｍ．−Ｓ．；Ｂｒｉｅｈｅｎ，Ｃ．Ａ．；Ｂａｕｅｒｌｅ，Ｐ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００１，４０，４６７７−４６８０．又はＳｉｌｖａｋｕｍａｒ，Ｋ．；Ｘｉｅ，Ｆ．；Ｃａｓｈ，Ｂ．Ｍ．；Ｌｏｎｇ，Ｓ．；Ｂａｒｎｈｉｌｌ，Ｈ．Ｎ．；Ｗａｎｇ，Ｑ．Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．２００４，６，４６０３−４６０６．参照）、これに対し、本発明者らは今回、クマリンの５，６，８位に着目し、芳香環、トリアゾール環を含む置換基を効率的に導入する合成法の開発を行った。
その結果、本発明者らは、特定の分子種を検出し得るプローブ（蛍光センサー分子）や、環境応答型蛍光分子等として好適に利用可能な新規クマリン誘導体を見出し、本発明の完成に至った。

本発明は、本発明者らの前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞下記一般式（１）で表されることを特徴とする化合物である。
〔一般式（１）中、Ｒ^１は水素又はＣＯＯＲ^６を示し；Ｒ^２は水素、ＣＨ_３、ＣＦ_３又はＣＨ_２ＣＯＯＲ^６を示し；ＸはＯＲ^６又はＮＲ^６Ｒ^７を示し；Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５はそれぞれ独立に水素、又は下記一般式（２）：
で表されるいずれかを示し；ＹはＲ^６、ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＮＯ_２、ＣＯＯＲ^６又はＣＮを示し、或いはＹはそれが結合するベンゼン環の隣接する２つの炭素と共に複素環を形成していてもよく；Ｒ^６は水素、置換基を有していてもよいＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５又はＣ（＝Ｏ）ＣＨ_３を示し；Ｒ^７は水素、置換基を有していてもよいＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５又はＣ（＝Ｏ）ＣＨ_３を示す。〕
＜２＞下記構造式（３ａ）〜（３ｏ）の少なくともいずれかで表される前記＜１＞に記載の化合物である。
〔構造式（３ａ）〜（３ｏ）中、Ａｒはそれぞれ下記の構造：
を示す。〕
＜３＞前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の化合物を１種以上含むことを特徴とする特定の分子種の検出剤である。
＜４＞前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の化合物を１種以上用いることを特徴とする特定の分子種の検出方法である。
＜５＞前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の化合物を１種以上含むことを特徴とする溶液の脂溶性の高さの検出剤である。
＜６＞前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の化合物を１種以上用いることを特徴とする溶液の脂溶性の高さの検出方法である。

本発明によれば、前記従来における諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、機能性蛍光物質として、特定の分子種の検出や溶液の脂溶性の高さの検出等に好適に利用可能な、新規なクマリン誘導体を提供することができる。

（化合物）
本発明の化合物は、下記一般式（１）で表されることを特徴とする新規クマリン誘導体である。

＜一般式（１）＞
前記一般式（１）中、Ｒ^１は水素又はＣＯＯＲ^６を示し；Ｒ^２は水素、ＣＨ_３、ＣＦ_３又はＣＨ_２ＣＯＯＲ^６を示し；ＸはＯＲ^６又はＮＲ^６Ｒ^７を示し；Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５はそれぞれ独立に水素、又は下記一般式（２）：

で表されるいずれかを示し；ＹはＲ^６、ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＮＯ_２、ＣＯＯＲ^６又はＣＮを示し、或いはＹはそれが結合するベンゼン環の隣接する２つの炭素と共に複素環を形成していてもよく；Ｒ^６は水素、置換基を有していてもよいＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５又はＣ（＝Ｏ）ＣＨ_３を示し；Ｒ^７は水素、置換基を有していてもよいＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５又はＣ（＝Ｏ）ＣＨ_３を示す。

前記Ｙが、それ（Ｙ）が結合するベンゼン環の隣接する２つの炭素と共に複素環を形成する場合の前記複素環としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ピロール環、イミダゾール環、ピラゾール環、トリアゾール環、チアゾール環、オキサゾール環、ピリジン環、ピリダジン環、ピリミジン環、ピラジン環などが挙げられる。
これらの中でも、前記複素環としてはトリアゾール環が好ましい。

前記Ｒ^６及び前記Ｒ^７において、前記ＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５又はＣ（＝Ｏ）ＣＨ_３が置換基を有する場合の前記置換基としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ハロゲン原子、フェニル基、イミダゾール環、ピリジン環等の複素環基などが挙げられる。前記置換基は、前記ＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５又はＣ（＝Ｏ）ＣＨ_３の１つ乃至複数の水素と置換される。複数の水素と置換される場合には、同一の置換基で置換してもよく、異なる置換基で置換してもよい。前記ハロゲン原子としては、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子などが挙げられる。
なお、前記Ｒ^６、前記Ｒ^７としては、メチル（ＣＨ_３）基、エチル（Ｃ_２Ｈ_５）基が好ましい。

＜具体例＞
前記一般式（１）で表される化合物の具体例としては、例えば下記構造式（３ａ）〜（３ｏ）の少なくともいずれかで表される化合物などが好適に挙げられる。

前記構造式（３ａ）〜（３ｏ）中、Ａｒはそれぞれ下記の構造を示す。

＜製造＞
前記化合物（３ａ）〜（３ｏ）の製造方法については、後述する実施例１に詳細かつ具体的に示した。実施例１に記載した方法によれば、一種類の原料化合物（化合物１：実施例１参照）から、同様の反応条件により、多種類の化合物（化合物３ａ〜３ｏ）を効率的に得ることができる。
当業者であれば、実施例１の具体的説明を参照しつつ、原料化合物、反応条件、試薬等を適宜選択し、必要に応じてこれらの方法に適宜の修飾乃至改変を加えることにより、前記一般式（１）に含まれる化合物をいずれも効率的に製造することができる。

＜用途＞
前記一般式（１）で表される化合物は、蛍光性を有する新規クマリン誘導体であり、その蛍光性を利用して種々の用途に好適に利用可能である。例えば、前記化合物は、後述するような本発明の特定の分子種の検出方法／検出剤や溶液の脂溶性の高さの検出方法／検出剤に好適に利用可能であり、また、これら以外にも様々な用途に好適に利用可能である。
また、例えば前記したような製造方法によれば、一種類の原料化合物から、同様の反応条件により、多種類の一般式（１）で表される化合物を効率的に得ることができる。得られた多種類の化合物は、それぞれが単独で有用であることは勿論であるが、更には得られた多種類の化合物群全体からなる蛍光物質ライブラリーとしても有用である。多種類の化合物を含む蛍光物質ライブラリーを構築しておくことにより、例えば、前記蛍光物質ライブラリーから、所望の機能性を有する蛍光物質（化合物）をより効率的に探索することが可能となる。

（特定の分子種の検出方法／特定の分子種の検出剤）
本発明の特定の分子種の検出方法は、前記した本発明の化合物の１種以上を用いることを特徴とする。以下、本発明の特定の分子種の検出方法の説明を通じ、本発明の特定の分子種の検出剤についても説明するものとする。

前記したように、本発明の化合物は蛍光性を有する化合物（本明細書中「蛍光物質」と称することがある）であるが、本発明者らは更に、前記化合物が、それらの構造の違いに応じてそれぞれ異なる蛍光特性を有していることを見出した（実施例２（１）参照）。したがって、これらの化合物によれば、前記化合物に結合又は反応することにより前記化合物の構造を変化させる特定の分子種の濃度や活性の強さを、前記化合物の蛍光特性の変化を指標として容易に検出することが可能となる。

＜特定の分子種＞
前記「特定の分子種」の種類としては、前記化合物に結合又は反応することにより、前記化合物の蛍光特性を変化させる性質を有する分子種であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、イオン（水素イオン、カルシウムイオンなど）、小分子（一酸化窒素、一重項酸素など）、酵素（ペプチダーゼ、脱アルキル化酵素など）等から適宜選択することができる。

＜検出＞
前記特定の分子種の検出方法の実施方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、検出対象の試料（例えば、前記特定の分子種を含む試料、前記特定の分子種を含むか否かを評価したい試料等）と、前記化合物とを接触させ、接触前後での前記化合物の蛍光特性の変化を、公知の蛍光測定装置等を用いて測定する方法などが挙げられる。
なお、前記蛍光特性の変化としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、蛍光強度の変化、蛍光波長の変化、励起波長の変化などが挙げられる。
接触前後での前記化合物の蛍光特性の変化の有無や、その変化の程度等から、前記試料中の特定の分子種の濃度や活性の強さ等を、適宜判断することができる（具体例としては、後述する実施例２（１）参照）。

なお、前記検出方法によれば、生きた生体、組織、細胞等を前記試料として用い、これらにおける特定の分子種の濃度や活性の時空間的な変化等を解析することもできる。したがって、前記検出方法は、例えば生命科学の分野において非常に好適である。

＜検出剤＞
前記特定の分子種の検出方法において、検出対象の試料と接触させる前記化合物としては、前記した本発明の化合物を１種以上含む検出剤（本発明の特定の分子種の検出剤）を使用することが好ましい。前記検出剤に含まれる前記化合物の種類は、検出したい前記分子種の種類に応じて適宜選択することができ、また、前記化合物は１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。
前記検出剤は、前記化合物そのものであってもよいし、或いは更に適宜その他の成分を含んでいてもよい。前記その他の成分の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記検出剤中の前記化合物と前記その他の成分との含有量比としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。

（溶液の脂溶性の高さの検出方法／溶液の脂溶性の高さの検出剤）
本発明の溶液の脂溶性の高さの検出方法は、前記した本発明の化合物の１種以上を用いることを特徴とする。以下、本発明の溶液の脂溶性の高さの検出方法の説明を通じ、本発明の溶液の脂溶性の高さの検出剤についても説明するものとする。

前記したように、本発明の化合物は蛍光性を有する化合物（蛍光物質）であるが、本発明者らは更に、前記化合物が、溶液の脂溶性の高さの違いに応じて蛍光特性が変化する性質を有していることを見出した（実施例２（２）参照）。したがって、これらの化合物によれば、溶液の脂溶性の高さを、前記化合物の蛍光特性の変化を指標として、容易に検出することが可能となる。

＜溶液＞
前記「溶液」の種類としては、特に制限はなく、脂溶性の高さを検出したい任意の溶液を、目的に応じて適宜選択することができる。なお、前記「脂溶性」とは、溶媒分子の分極状態を表す指標であり、分極が強い分子は「脂溶性が低い」、分極が弱い分子は「脂溶性が高い」と表される。

＜検出＞
前記溶液の脂溶性の高さの検出方法の実施方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、検出対象の溶液中での前記化合物の蛍光特性を、公知の蛍光測定装置等を用いて測定し、その蛍光特性を、同様に測定した対照溶液（既に脂溶性の高さがわかっている溶液）中での前記化合物の蛍光特性と比較する方法などが挙げられる。
なお、前記蛍光特性としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、蛍光強度、蛍光波長、励起波長などが挙げられる。
前記検出対象溶液中での蛍光特性と、前記対照溶液中での蛍光特性とを比較することにより、前記検出対象溶液の脂溶性の高さを、前記対照溶液の脂溶性の高さを基準として相対的に判断することができる。
より具体的には、例えば、前記検出対象溶液中での蛍光強度が、前記対照溶液中での蛍光強度よりも高かった場合に、前記検出対象溶液の脂溶性は、前記対照溶液よりも相対的に高いと判断することができ、逆に、前記検出対象溶液中での蛍光強度が、前記対照溶液中での蛍光強度よりも低かった場合に、前記検出対象溶液の脂溶性は、前記対照溶液よりも相対的に低いと判断することができる（実施例２（２）参照）。

＜検出剤＞
前記溶液の脂溶性の高さの検出に使用する前記化合物としては、前記した本発明の化合物を１種以上含む検出剤（本発明の溶液の脂溶性の高さの検出剤）を使用することが好ましい。前記検出剤に含まれる前記化合物の種類は、目的に応じて適宜選択することができ、また、前記化合物は１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。中でも、前記化合物としては、脂溶性の高さの違いによる蛍光強度の違いが大きく、検出がし易い点で、例えば化合物３ｆや化合物３ｈが好ましいと考えられる（実施例２（２）参照）。
前記検出剤は、前記化合物そのものであってもよいし、或いは更に適宜その他の成分を含んでいてもよい。前記その他の成分の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記検出剤中の前記化合物と前記その他の成分との含有量比としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。

以下に本発明の実施例について説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。

（実施例１：化合物３ａ〜３ｏの合成）
実施例１では、下記の合成スキームに従い、本発明の化合物３ａ〜３ｏの合成を行った。

以下、化合物３ａ〜３ｏの合成手順を詳細に説明する。
なお、上記合成スキームの化合物１は既報の文献（Ｃｏｒｒｉｅ，Ｊ．Ｅ．Ｔ．；Ｍｕｎａｓｉｎｇｈｅ，Ｖ．Ｒ．Ｎ．；Ｒｅｔｔｉｇ，Ｗ．Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ．Ｃｈｅｍ．２０００，３７，１４４７−１４５５．参照）に記された方法により合成した。化合物２ａ〜２ｌは市販品をそのまま用いた。前記市販品はそれぞれ、東京化成工業株式会社、Ａｌｄｒｉｃｈ社、和光純薬工業株式会社のいずれかから適宜入手した。化合物３ｋは化合物３ｍに、化合物３ｌは化合物３ｎに、化合物３ｎは化合物３ｏへと変換し、本発明の化合物１５種類（３ａ〜３ｏ）から成る蛍光物質ライブラリーを構築した。

＜化合物３ａの合成＞
化合物２ａ（３４．３ｍｇ，０．１６８ｍｍｏｌ）、フッ化セシウム（４３．５ｍｇ，０．２８６ｍｍｏｌ）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノフェロセン）ジクロロパラジウム（ＩＩ）・塩化メチレン錯体（ＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）・ＣＨ_２Ｃｌ_２，９．４ｍｇ，０．０１２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍｌ）に溶かした溶液に、化合物１（２０．３ｍｇ，０．０５５ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下、室温で加え、６０℃に加熱して２時間撹拌した。室温まで冷却した後、反応液を酢酸エチルで希釈し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水、飽和食塩水で洗浄した。減圧下で溶媒を留去し、カラムクロマトグラフィーで精製することによって、黄色固体の化合物３ａ（１４．５ｍｇ，７２％）を得た。
融点：１２３−１２４℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４４（ｓ，１Ｈ），７．４０（ｍ，４Ｈ），７．３１（ｍ，１Ｈ），７．２８（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），４．３７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．０３（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６３．８，１５７．６，１５６．４，１５５．２，１４８．８，１４０．５，１３２．７，１３１．６，１２８．７（２Ｃ），１２８．２（２Ｃ），１２７．３，１１２．８，１１１．１，１０５．７，６１．４，４５．８（２Ｃ），１４．３，１２．１（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２３ＮＯ_４Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）^＋３８８．１５２５．Ｆｏｕｎｄ３８８．１５０２；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２３ＮＯ_４：Ｃ，７２．３１；Ｈ，６．３４；Ｎ，３．８３．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，７２．３３；Ｈ，６．４５；Ｎ，３．５６．

＜化合物３ｂの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｂから、収率８５％で黄色粉状物の化合物３ｂを得た。
融点：１７０−１７１℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４２（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｓ，１Ｈ），７．２１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．８０（ｓ，１Ｈ），６．７３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），４．３６（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．７６（ｂｒｓ，２Ｈ），３．０５（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６３．８，１５７．８，１５６．１，１５５．４，１４８．９，１４５．２，１３２．３，１３１．７，１３０．８，１２９．１（２Ｃ），１１５．５（２Ｃ），１１２．４，１１１．１，１０５．６，６１．４，４５．５（２Ｃ），１４．３，１２．１（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２４Ｎ_２Ｏ_４Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）^＋４０３．１６３４．Ｆｏｕｎｄ４０３．１６０８；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２４Ｎ_２Ｏ_４・１／８Ｈ_２Ｏ：Ｃ，６９．０５；Ｈ，６．３９；Ｎ，７．３２．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６９．０５；Ｈ，６．３６；Ｎ，７．３４．

＜化合物３ｃの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｃから、収率６３％で黄色針状物の化合物３ｃを得た。
融点：１２５−１２６℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４３（ｓ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．２５（ｓ，１Ｈ），６．８２（ｓ，１Ｈ），４．３６（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．０３（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，４Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），１．３６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６８．４，１６３．７，１５７．７，１５６．３，１５５．３，１４８．８，１３７．３，１３６．１，１３２．６，１３１．１，１２８．７（２Ｃ），１２０．０（２Ｃ），１１２．８，１１１．２，１０５．９，６１．５，４５．７（２Ｃ），２４．６，１４．３，１２．１（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２４Ｈ_２６Ｎ_２Ｏ_５Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）^＋４４５．１７３９．Ｆｏｕｎｄ４４５．１７１３；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２４Ｈ_２６Ｎ_２Ｏ_５：Ｃ，６８．２３；Ｈ，６．２０；Ｎ，６．６３．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６８．０３；Ｈ，６．２３；Ｎ，６．５７．

＜化合物３ｄの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｄから、収率６６％で黄色固体の化合物３ｄを得た。
融点：１６６−１６８℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４２（ｓ，１Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．２４（ｓ，１Ｈ），６．８０（ｓ，１Ｈ），６．７３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），４．３６（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．０６（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），２．９７（ｓ，６Ｈ），１．３６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６３．９，１５７．８，１５５．９，１５５．５，１４９．６，１４８．９，１３２．２，１３１．９，１２８．７（２Ｃ），１２８．２，１１２．５（２Ｃ），１１２．３，１１１．１，１０５．６，６１．３，４５．５（２Ｃ），４０．４（２Ｃ），１４．３，１２．１（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２４Ｈ_２８Ｎ_２Ｏ_４Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）^＋４３１．１９４７．Ｆｏｕｎｄ４３１．１９３０；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２４Ｈ_２８Ｎ_２Ｏ_４：Ｃ，７０．５７；Ｈ，６．９１；Ｎ，６．８６．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，７０．４１；Ｈ，６．８６；Ｎ，６．８６．

＜化合物３ｅの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｅから、収率２８％で黄色粉状物の化合物３ｅを得た。
融点：１２３−１２４℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４５（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｓ，１Ｈ），６．９１（ｓ，１Ｈ），４．３８（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．０３（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３８（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），０．９８（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６３．５，１５７．１，１５６．９，１５４．９，１４８．４，１４７．１，１４７．０，１３２．６，１２９．４，１２９．０（２Ｃ），１２４．２（２Ｃ），１１４．０，１１１．６，１０６．７，６１．７，４６．１（２Ｃ），１４．３，１１．９（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２２Ｎ_２Ｏ_６Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）^＋４３３．１３７６．Ｆｏｕｎｄ４３３．１３８１；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２２Ｎ_２Ｏ_６・１／４Ｈ_２Ｏ：Ｃ，６３．６８；Ｈ，５．４７；Ｎ，６．７５．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６３．９０；Ｈ，５．４５；Ｎ，６．４９．

＜化合物３ｆの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｆから、収率７５％で黄色針状物の化合物３ｆを得た。
融点：１１２−１１３℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４４（ｓ，１Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．２５（ｓ，１Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），６．８４（ｓ，１Ｈ），５，１５（ｂｒｓ，１Ｈ），４．３７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．０４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６３．９，１５８．１，１５６．２，１５５．５，１５５．４，１４９．１，１３２．６，１３２．５，１３１．５，１２９．４（２Ｃ），１１５．８（２Ｃ），１１２．３，１１１．１，１０５．６，６１．５，４５．６（２Ｃ），１４．３，１２．１（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２２ＮＯ_５（Ｍ−Ｈ）⁻ ３８０．１４９８．Ｆｏｕｎｄ３８０．１４９１；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２３ＮＯ_５：Ｃ，６９．２８；Ｈ，６．０８；Ｎ，３．６７．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６９．０２；Ｈ，６．２０；Ｎ，３．６５．

＜化合物３ｇの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｇから、収率６３％で黄色針状物の化合物３ｇを得た。
融点：７０−７１℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４３（ｓ，１Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｓ，１Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．８５（ｓ，１Ｈ），４．３７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．０４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６３．８，１５９．０，１５７．６，１５６．２，１５５．１，１４８．８，１３２．７，１３２．５，１３１．４，１２９．３（２Ｃ），１１４．２（２Ｃ），１１２．９，１１１．３，１０６．０，６１．５，５５．３，４５．８（２Ｃ），１４．３，１２．１（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２３Ｈ_２５ＮＯ_５Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）^＋４１８．１６３０．Ｆｏｕｎｄ４１８．１６０８ｒｔ；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２３Ｈ_２５ＮＯ_５：Ｃ，６９．８６；Ｈ，６．３７；Ｎ，３．５４．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６９．６２；Ｈ，６．４０；Ｎ，３．５４．

＜化合物３ｈの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｈから、収率５８％で黄色固体の化合物３ｈを得た。
融点：７９−８０℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４４（ｓ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３０（ｓ，１Ｈ），６．８７（ｓ，１Ｈ），４．３７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．０２（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），２．６２（ｓ，３Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１９７．４，１６３．６，１５７．３，１５６．７，１５５．０，１４８．６，１４５．４，１３６．０，１３２．６，１３０．４，１２８．９（２Ｃ），１２８．４（２Ｃ），１１３．４，１１１．３，１０６．２，６１．６，４５．９（２Ｃ），２６．６，１４．３，１２．０（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２４Ｈ_２５ＮＯ_５Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）^＋４３０．１６３０．Ｆｏｕｎｄ４３０．１６０６；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２４Ｈ_２５ＮＯ_５：Ｃ，７０．７４；Ｈ，６．１８；Ｎ，３．４４．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，７０．５５；Ｈ，６．２９；Ｎ，３．４２．

＜化合物３ｉの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｉから、収率４５％で黄色針状物の化合物３ｉを得た。
融点：１７４−１７６℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４４（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．２９（ｓ，１Ｈ），６．８９（ｓ，１Ｈ），４．３７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６３．５，１５７．２，１５６．８，１５４．９，１４８．５，１４５．２，１３２．６（２Ｃ），１３２．６，１２９．７，１２８．９（２Ｃ），１１８．６，１１３．７，１１１．５，１１１．２，１０６．５，６１．６，４５．９（２Ｃ），１４．３，１１．９（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２３Ｈ_２２Ｎ_２Ｏ_４Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）^＋４１３．１４７７．Ｆｏｕｎｄ４１３．１４６２；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２３Ｈ_２２Ｎ_２Ｏ_４：Ｃ，７０．７５；Ｈ，５．６８；Ｎ，７．１７．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，７０．６１；Ｈ，５．７５；Ｎ，６．９９．

＜化合物３ｊの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｊから、収率４６％で黄色固体の化合物３ｊを得た。
融点：１１５−１１７℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４４（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．３１（ｓ，１Ｈ），６．８８（ｓ，１Ｈ），４．３７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．０２（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６６．７，１６３．６，１５７．３，１５６．６，１５５．０，１４８．６，１４５．２，１３２．６，１３０．４，１３０．１（２Ｃ），１２９．１，１２８．２（２Ｃ），１１３．２，１１１．２，１０６．０，６１．５，５２．１，４５．８（２Ｃ），１４．２，１２．０（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２４Ｈ_２５ＮＯ_６Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）^＋４４６．１５８０．Ｆｏｕｎｄ４４６．１５８３；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２４Ｈ_２５ＮＯ_６：Ｃ，６８．０７；Ｈ，５．９５；Ｎ，３．３１．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６７．７８；Ｈ，５．９４；Ｎ，３．３０．

＜化合物３ｋの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｋから、収率６３％で黄色固体の化合物３ｋを得た。
融点：１２１−１２３℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４４（ｓ，１Ｈ），８．１１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３９（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｍ，１Ｈ），７．３０（ｓ，１Ｈ），６．８６（ｓ，１Ｈ），５．３７（ｓ，２Ｈ），４．３７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６６．１，１６３．６，１５７．４，１５６．７，１５５．０，１４８．６，１４５．３，１３６．０，１３２．６，１３０．４，１３０．２（２Ｃ），１２９．１，１２８．６（２Ｃ），１２８．３３，１２８．２７（２Ｃ），１２８．２（２Ｃ），１１３．３，１１１．３，１０６．１，６６．８，６１．５，４５．９（２Ｃ），１４．３，１２．０（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_３０Ｈ_２９ＮＯ_６Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）^＋５２２．１８９３．Ｆｏｕｎｄ５２２．１８８８；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_３０Ｈ_２９ＮＯ_６・１／８Ｈ_２Ｏ：Ｃ，７１．８０；Ｈ，５．８８；Ｎ，２．７９．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，７１．７０；Ｈ，６．０１；Ｎ，２．８１．

＜化合物３ｌの合成＞
化合物３ａの合成と同様の方法で、化合物１と化合物２ｌから、収率６２％で黄色粉状物の化合物３ｌを得た。
融点：１８７−１８８℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４４（ｓ，１Ｈ），８．２３（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．６，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｓ，１Ｈ），６．８９（ｓ，１Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），６．２１（ｂｒｓ，２Ｈ），４．３７（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．０６（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６３．５，１５７．４，１５６．２，１５５．２，１４８．６，１４４．０，１３５．８，１３２．１，１３２．１，１２９．８，１２８．９，１２５．０，１１９．２，１１３．３，１１１．７，１０６．７，６１．５，４５．６（２Ｃ），１４．２，１１．９（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２２Ｎ_３Ｏ_６（Ｍ−Ｈ）⁻ ４２４．１５０９．Ｆｏｕｎｄ４２４．１５１３；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２３Ｎ_３Ｏ_６：Ｃ，６２．１１；Ｈ，５．４５；Ｎ，９．８８．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６２．０２；Ｈ，５．６５；Ｎ，９．７６．

＜化合物３ｍの合成＞
化合物３ｋ（１１０．４ｍｇ，０．２２１ｍｍｏｌ）をメタノール：テトラヒドロフラン（２：１）３ｍＬに溶かし、１０％Ｐｄ／Ｃ（パラジウム炭素、１７．０ｍｇ）を室温下で加え、水素雰囲気下で４０分間撹拌した。反応液をろ過後、カラムクロマトグラフィーにて精製し、黄色粉状物の化合物３ｍ（６６．０ｍｇ，７３％）を得た。
融点：２４９−２５０℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１１．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｓ，１Ｈ），６．８６（ｓ，１Ｈ），４．３６（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．０３（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１７０．９，１６３．６，１５７．４，１５６．７，１５４．９，１４８．６，１４６．１，１３２．７，１３０．８（２Ｃ），１３０．３，１２８．４（２Ｃ），１２８．１，１１３．４，１１１．４，１０６．２，６１．６，４６．０（２Ｃ），１４．３，１２．０（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２３Ｈ_２２ＮＯ_６（Ｍ−Ｈ）⁻ ４０８．１４４７．Ｆｏｕｎｄ４０８．１４５０；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２３Ｈ_２３ＮＯ_６・１／４Ｈ_２Ｏ：Ｃ，６６．７４；Ｈ，５．７２；Ｎ，３．３８．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６６．９８；Ｈ，５．７６；Ｎ，３．３５．

＜化合物３ｎの合成＞
化合物３ｌ（１２０．９ｍｇ，０．２８４ｍｍｏｌ）を２．５ｍＬのメタノールに溶かし、１０％Ｐｄ／Ｃ（パラジウム炭素、３９．１ｍｇ）を室温下で加え、水素雰囲気下で２時間撹拌した。反応液をろ過後、カラムクロマトグラフィーにて精製し、黄色粉状物の化合物３ｎ（７２．５ｍｇ，６５％）を得た。
融点：１８５−１８６℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．４１（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｓ，１Ｈ），６．８２−６．７５（ｍ，４Ｈ），４．３６（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．６８（ｂｒｓ，４Ｈ），３．０７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６３．９，１５７．９，１５６．１，１５５．３，１４９．０，１３４．７，１３４．０，１３２．５，１３２．４，１３１．５，１２０．０，１１６．９，１１６．４，１１２．０，１１０．８，１０５．２，６１．３，４５．５（２Ｃ），１４．２，１２．１（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２４Ｎ_３Ｏ_４（Ｍ−Ｈ）⁻ ３９４．１７６７．Ｆｏｕｎｄ３９４．１７６０；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２５Ｎ_３Ｏ_４・１／４Ｈ_２Ｏ：Ｃ，６６．０７；Ｈ，６．４３；Ｎ，１０．５１．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６６．０１；Ｈ，６．２７；Ｎ，１０．４４．

＜化合物３ｏの合成＞
化合物３ｎ（４７．８ｍｇ，０．１３１ｍｍｏｌ）をメタノール：水（１：４）２ｍＬに溶かし、酢酸（０．２ｍｌ）、亜硝酸ナトリウム（２１．４ｍｇ，０．３１０ｍｍｏｌ）を室温下で加えた。５分間撹拌後、反応液を酢酸エチルで希釈し、有機層を水、飽和食塩水で洗浄した。溶媒を留去後、カラムクロマトグラフィーにて精製し、黄色粉状物の化合物３ｏ（５０．２ｍｇ，９４％）を得た。
融点：２３２−２３３℃；^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・８．５１（ｓ，１Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５５（ｄｄ，Ｊ＝８．６，１．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４１（ｓ，１Ｈ），６．９１（ｓ，１Ｈ），４．３８（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．０５（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），１．３６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），０．９６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）・・・１６３．７，１５８．１，１５６．５，１５５．２，１４９．０，１３９．３，１３８．４，１３８．３，１３３．４，１３１．１，１２７．０，１１５．５，１１４．１，１１２．５，１１１．４，１０６．０，６１．７，５２．２，４６．０（２Ｃ），１４．３，１２．１（２Ｃ）；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２１Ｎ_４Ｏ_４（Ｍ−Ｈ）⁻ ４０５．１５６３．Ｆｏｕｎｄ４０５．１５６４；Ａｎａｌ．ＣａｌｃｄｆｏｒＣ_２２Ｈ_２２Ｎ_４Ｏ_４：Ｃ，６５．０１；Ｈ，５．４６；Ｎ，１３．７８．Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，６４．７２；Ｈ，５．６０；Ｎ，１３．６８．

（実施例２：各化合物の機能性確認）
実施例２では、前記実施例１で合成した本発明の化合物（化合物３ａ〜３ｏ）の蛍光特性を検討し、各化合物が種々の機能性を有した蛍光物質であることを確認した。

（１）蛍光センサー分子としての機能（特定の分子種を検出する機能）
水溶液（１ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ７．４））中での、各化合物３μＭの励起波長４２０ｎｍにおける蛍光スペクトルを、分光蛍光光度計（日本分光株式会社製、ＦＰ−６６００）を用いて測定した。

結果の一部を図２に示す。化合物３ａ〜３ｏは、それぞれの構造の違いに応じて蛍光特性が異なり、したがって、本発明の化合物は例えば以下のような用途に好適であることが示された。
化合物３ｃから３ｂへの変換は、アミド基からアミノ基への変換であり、変換により全く無蛍光の状態になる（図２（ｉ））。こうした反応は、例えば生体内に存在するペプチダーゼの検出に適用することができる。
化合物３ｎから３ｏへの変換は、ジアミノ基からトリアゾールへの変換であり、変換により全くの無蛍光の状態から、蛍光を持つようになる（図２（ｉｉ））。こうした反応は、例えば生体内において血管収縮などを担う生理活性物質である一酸化窒素の検出に適用することができる。
化合物３ｇから３ｆへの変換は、メトキシ基から水酸基への変換であり、変換により蛍光強度が約５分の１に減少する（図２（ｉｉｉ））。こうした反応は、例えば生体内の脱アルキル化酵素やグリコシダーゼの検出に適用できると考えられる。

（２）環境応答型蛍光分子としての機能（溶液の脂溶性の高さを検出する機能）
水溶液（１ｍＭリン酸バッファー、ｐＨ７．４）中、メタノール中、アセトニトリル中、又は塩化メチレン中での各化合物３ａ〜３ｏの蛍光強度（ＦＩ）は、個々の化合物が最も強い蛍光強度を持つ励起波長、蛍光波長における蛍光強度を、分光蛍光光度計（日本分光株式会社製、ＦＰ−６６００）を用いて測定した。（なお、用いた溶媒の脂溶性の高さは、「塩化メチレン」＞「アセトニトリル」＞「メタノール」＞「水溶液」の順である。）

結果を表１に示す。ほとんどの化合物が脂溶性の高い溶媒になるのに伴い蛍光強度が増大した。また、その変化量は個々の化合物で異なっていた。特に、化合物３ｆ及び化合物３ｈでは、水溶液中と塩化メチレン中で比較すると、２００倍以上の蛍光強度の増大が起こっていた。
これらの結果から、本発明の化合物が、溶液の脂溶性の高さを検出する用途に好適であることが示された。

本発明の化合物は蛍光性を有する新規クマリン誘導体であり、その蛍光性を利用して種々の用途に好適に利用可能である。例えば、前記化合物は、イオン、小分子、酵素等の特定の分子種の検出や、溶液の脂溶性の高さの検出等に好適に利用可能である。

図１は、本発明者らが実施した蛍光物質ライブラリーの構築方法を示す概念図である。図２は、水溶液（１ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ７．４）中での各化合物の蛍光スペクトルを示した図である。

Claims

下記一般式（１）で表されることを特徴とする化合物。
〔一般式（１）中、Ｒ^１は水素又はＣＯＯＲ^６を示し；Ｒ^２は水素、ＣＨ_３、ＣＦ_３又はＣＨ_２ＣＯＯＲ^６を示し；ＸはＯＲ^６又はＮＲ^６Ｒ^７を示し；Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^５はそれぞれ独立に水素、又は下記一般式（２）：
で表されるいずれかを示し；ＹはＲ^６、ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＮＯ_２、ＣＯＯＲ^６又はＣＮを示し、或いはＹはそれが結合するベンゼン環の隣接する２つの炭素と共に複素環を形成していてもよく；Ｒ^６は水素、置換基を有していてもよいＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５又はＣ（＝Ｏ）ＣＨ_３を示し；Ｒ^７は水素、置換基を有していてもよいＣＨ_３、Ｃ_２Ｈ_５又はＣ（＝Ｏ）ＣＨ_３を示す。〕
下記構造式（３ａ）〜（３ｏ）の少なくともいずれかで表される請求項１に記載の化合物。
〔構造式（３ａ）〜（３ｏ）中、Ａｒはそれぞれ下記の構造：
を示す。〕
請求項１から２のいずれかに記載の化合物を１種以上含むことを特徴とする特定の分子種の検出剤。
請求項１から２のいずれかに記載の化合物を１種以上用いることを特徴とする特定の分子種の検出方法。
請求項１から２のいずれかに記載の化合物を１種以上含むことを特徴とする溶液の脂溶性の高さの検出剤。
請求項１から２のいずれかに記載の化合物を１種以上用いることを特徴とする溶液の脂溶性の高さの検出方法。