JP2008088065A

JP2008088065A - Fatty acid ester compound having diethylenetriaminepentaacetic acid structure as metal chelate moiety

Info

Publication number: JP2008088065A
Application number: JP2006267250A
Authority: JP
Inventors: Hiroshi Kori; 弘郡; 和信 ▲高▼橋; Kazunobu Takahashi; Kazuhiro Aikawa; 和広相川; Junji Nishigaki; 純爾西垣
Original assignee: Fujifilm Corp
Current assignee: Fujifilm Corp
Priority date: 2006-09-29
Filing date: 2006-09-29
Publication date: 2008-04-17

Abstract

【課題】溶解性等に優れ、病巣選択的なリポソーム造影剤に適した化合物の提供。
【解決手段】下記の一般式（Ｉ）：

［式中、Ｒは炭素数８〜３０個のアルキル基又はアルケニル基を示し；Ｌは２価の連結基を表し；Ｃｈは下記の一般式（II）もしくは(III): を表す］で表される化合物、該化合物を有するキレート化合物、又はこれらいずれかの塩。該化合物等を含むリポソームを含む造影剤を用いたMRI造影又はシンチグラフィー造影により血管の病巣を選択的に造影できる。

【選択図】なしDisclosed is a compound suitable for a lesion-selective liposome contrast agent having excellent solubility and the like.
The following general formula (I):

[Wherein R represents an alkyl group or alkenyl group having 8 to 30 carbon atoms; L represents a divalent linking group; Ch represents the following general formula (II) or (III):] Compound, a chelate compound having the compound, or a salt of any of these. A lesion of a blood vessel can be selectively imaged by MRI contrast or scintigraphy contrast using a contrast medium including a liposome containing the compound.

[Selection figure] None

Description

本発明は、ジエチレントリアミン五酢酸（DTPA）構造を金属キレート部位として有する脂肪酸エステル化合物又はその塩に関する。本発明はさらに該化合物、該化合物を含むキレート化合物、又はそれらいずれかの塩を膜構成成分として含むリポソーム及び該リポソームを含む造影剤に関する。 The present invention relates to a fatty acid ester compound having a diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA) structure as a metal chelate moiety or a salt thereof. The present invention further relates to a liposome containing the compound, a chelate compound containing the compound, or any salt thereof as a membrane component, and a contrast agent containing the liposome.

非侵襲的な動脈硬化の診断法としては、主にＸ線血管造影法が挙げられる。しかし、この方法は、水溶性のヨード造影剤で血液の流れを造影する方法であるため、病変組織と正常組織との区別がつけにくい。そのため、狭窄が５０％以上進んだ病巣しか検出することができず、虚血性疾患の発作が発症する前に病巣を検出することが困難である。 As a non-invasive diagnosis method for arteriosclerosis, there is mainly an X-ray angiography. However, since this method is a method of imaging a blood flow with a water-soluble iodine contrast medium, it is difficult to distinguish between a diseased tissue and a normal tissue. Therefore, only lesions with stenosis of 50% or more can be detected, and it is difficult to detect lesions before the onset of an ischemic disease.

上記以外の診断法として、近年、動脈硬化巣プラーク中に多く動態分布される造影剤を用いて核磁気共鳴トモグラフィー（MRI）により疾患を検出する方法が報告されている。しかし、該造影剤として報告されている化合物はいずれも診断法に用いることには問題がある。例えば、ヘマトポルフィリン誘導体（特許文献１参照）は皮膚への沈着・着色の欠点が指摘されており、また、脂質に富んだプラークに集積するとの報告があるパーフルオロ側鎖を有するガドリニウム錯体（非特許文献１参照）は、脂肪肝・腎臓上皮・筋組織の腱などの、生体における脂質豊富な組織、器官への集積が危惧されている。 As a diagnostic method other than the above, in recent years, a method for detecting a disease by nuclear magnetic resonance tomography (MRI) using a contrast agent that is dynamically distributed in atherosclerotic plaque has been reported. However, any of the compounds reported as the contrast agent has a problem when used in diagnostic methods. For example, a hematoporphyrin derivative (see Patent Document 1) has been pointed out to have defects in deposition and coloring on the skin, and a gadolinium complex having a perfluoro side chain that has been reported to accumulate in lipid rich plaques (non- Patent Document 1) is concerned about accumulation in lipid-rich tissues and organs such as fatty liver, kidney epithelium, and muscle tissue tendons.

化合物の観点からは、ホスファチジルエタノールアミン（PE）とジエチレントリアミン五酢酸（DTPA）をアミド結合した化合物が知られており（例えば、非特許文献２）、このような化合物のガドリニウム錯体のリポソームに関する報告（非特許文献３）もある。しかし、この錯体は難溶解性であるためリポソーム化の際の操作性が悪く、生体内での蓄積性や毒性における懸念もある。
米国特許第4577636号明細書サーキュレーション（Circulation）, 109, 2890 (2004) ポリメリックマテリアルズサイエンスアンドエンジニアリング（Polymeric Materials Science and Engineering）, 89, 148 (2003) インオーガニカキミカアクタ（Inorganica Chimica Acta）, 331, 151 (2002) From the viewpoint of the compound, a compound in which phosphatidylethanolamine (PE) and diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA) are amide-linked is known (for example, Non-Patent Document 2), and a report on a gadolinium complex liposome of such a compound ( Non-patent document 3) is also available. However, since this complex is poorly soluble, the operability during the formation of liposomes is poor, and there are also concerns about accumulation in vivo and toxicity.
US Patent No. 4577636 Circulation, 109, 2890 (2004) Polymeric Materials Science and Engineering, 89, 148 (2003) Inorganica Chimica Acta, 331, 151 (2002)

本発明の課題は、病巣選択的な造影のためのリポソーム造影剤に適した化合物であって、特に溶解性及びリポソーム膜構成成分との相溶性に優れた化合物を提供することである。また、本発明の課題は、該化合物を含むＭＲＩ造影剤及びシンチグラフィー造影剤などの造影剤を提供することである。 An object of the present invention is to provide a compound suitable for a liposome contrast agent for lesion-selective imaging, and particularly excellent in solubility and compatibility with liposome membrane components. Another object of the present invention is to provide a contrast agent such as an MRI contrast agent and a scintigraphic contrast agent containing the compound.

本発明者等は上記の課題を解決すべく研究を行った結果、ジエチレントリアミン五酢酸（DTPA）構造を金属キレート部位として有する脂肪酸エステル化合物が溶解性に富み、また、造影剤としてのリポソームの構成成分として優れた性質を有していることを見出した。本発明は上記の知見を基にして完成されたものである。 As a result of studies conducted by the present inventors to solve the above-mentioned problems, fatty acid ester compounds having a diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA) structure as a metal chelate moiety are highly soluble, and components of liposomes as contrast agents It has been found that it has excellent properties. The present invention has been completed based on the above findings.

すなわち、本発明は、下記一般式（Ｉ）：

［式中、Ｒは炭素数８〜３０個のアルキル基又は炭素数８〜３０個のアルケニル基を示し；Ｌは２価の連結基を表し（ただし、Ｌは炭素原子、酸素原子、窒素原子、硫黄原子及び水素原子からなる群から選択される原子により構成され、かつＬを構成する炭素原子、酸素原子、窒素原子及び硫黄原子の総原子数は１〜３０個であり、このうち酸素原子の数は０〜１５個であり、窒素原子の数は０〜６個であり、かつ硫黄原子の数は０〜３個である）；Ｃｈは下記の一般式（II）又は(III)を示す］で表される化合物又はその塩を提供するものである。

That is, the present invention provides the following general formula (I):

[Wherein, R represents an alkyl group having 8 to 30 carbon atoms or an alkenyl group having 8 to 30 carbon atoms; L represents a divalent linking group (where L represents a carbon atom, an oxygen atom, a nitrogen atom) The total number of carbon atoms, oxygen atoms, nitrogen atoms, and sulfur atoms that are composed of atoms selected from the group consisting of sulfur atoms and hydrogen atoms and that constitute L is 1 to 30, of which oxygen atoms Is 0-15, the number of nitrogen atoms is 0-6, and the number of sulfur atoms is 0-3; Ch represents the following general formula (II) or (III): Or a salt thereof.

本発明の好ましい態様によれば、Lが主鎖中に−X¹−CO−又は−CO−X¹−：[X¹は−O−又は−NZ¹−を示し；Z¹は水素原子又は炭素数１〜３個のアルキル基を示す]で示される部分構造を少なくとも１つ以上有する連結基である上記の化合物又はその塩；Lが−W¹−X²−CO−W²−又は−W¹−CO−X²−W²−[W¹は単結合、又は炭素数１〜５個のアルキレン基又は炭素数１〜５個のアルケニレン基を示し；X²は−O−又は−NZ²−を示し（Z²は水素原子又は炭素数１〜３個のアルキル基を示す）；W²は炭素数１〜２０個のアルキレン基又は炭素数１〜２０個のアルケニレン基を示す] で表される連結基である上記の化合物又はその塩；Lが主鎖中に、−(OCH₂CH₂)_n−、−(CH₂CH₂O)_n−、−(OCH₂CH₂CH₂)_m−、又は−(CH₂CH₂CH₂O)_m−（ｎは1〜7の整数を示し；mは１〜5の整数を示す）のいずれか１つの構造で示される部分構造を有する連結基である上記の化合物又はその塩；Lが、−W³−X³−CO−W⁴−又は−W³−CO−X³−W⁵−[W³は単結合、又は炭素数１〜５個のアルキレン基又は炭素数１〜５個のアルケニレン基を示し；X³は−O−又は−NZ³−を示し；Z³は水素原子又は炭素数１〜３個のアルキル基を示し；W⁴は−(OCH₂CH₂)_nOCH₂−、−CH₂−(OCH₂CH₂)_nOCH₂−、−(OCH₂CH₂CH₂)_m OCH₂CH₂−、−CH₂−(OCH₂CH₂CH₂)_m OCH₂CH₂−、又は−CH₂CH₂−(OCH₂CH₂CH₂)_m OCH₂CH₂−（ｎは1〜7の整数を表し；mは1〜5の整数を表す）のいずれか１つの構造を示し；W⁵は−(CH₂)₂−(OCH₂CH₂)_nOCH₂−又は−(CH₂)₃−(OCH₂CH₂CH₂)_m OCH₂CH₂−（ｎは1〜7の整数を示し；mは1〜5の整数を示す）の構造を示す] で表される連結基である上記の化合物又はその塩が提供される。 According to a preferred embodiment of the present invention, L represents —X ¹ —CO— or —CO—X ¹ — in the main chain: [X ¹ represents —O— or —NZ ¹ —; Z ¹ represents a hydrogen atom or The above compound or a salt thereof, which is a linking group having at least one partial structure represented by C 1-3 alkyl group]; and L is —W ¹ —X ² —CO—W ² — or — W ¹ —CO—X ² —W ² — [W ¹ represents a single bond, an alkylene group having 1 to 5 carbon atoms, or an alkenylene group having 1 to 5 carbon atoms; X ² represents —O— or —NZ. ^2- (Z ² represents a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms); W ² represents an alkylene group having 1 to 20 carbon atoms or an alkenylene group having 1 to 20 carbon atoms.] The above-mentioned compound or a salt thereof which is a linking group represented by: L is in the main chain,-(OCH ₂ CH ₂ ) _n -,-(CH ₂ CH ₂ O) _n -,-(OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m −, or — (CH ₂ CH ₂ CH ₂ O) _m — (n represents an integer of 1 to 7) M represents an integer of 1 to 5), or a salt thereof, which is a linking group having a partial structure represented by any one of the structures: L is —W ³ —X ³ —CO—W ⁴ - or ^{^{^{-W 3 -CO-X 3 -W 5}}} - [W 3 represents a single bond, or an alkylene group or a number 1-5 alkenylene group having a carbon number 1 to 5 carbons; X ³ is -O- Or —NZ ³ —; Z ³ represents a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms; W ⁴ represents — (OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH ₂ —, —CH ₂ — (OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH ₂ -,-(OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH _2- , --CH _2- (OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH _2- , or --CH ₂ CH _2- (OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH ₂ — (wherein n represents an integer of 1 to 7; m represents an integer of 1 to 5); W ⁵ represents — (CH ₂ ) _2- (OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH _2- or-(CH ₂ ) _3- (OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH _2- (n represents an integer of 1 to 7; m represents 1 to 5 Show the integer) A linking group represented aforementioned compound or a salt thereof is provided.

本発明のさらに好ましい態様によれば、上記いずれかの化合物及び金属イオンから成るキレート化合物又はその塩；金属イオンが原子番号21-29、31、32、37-39、42-44、49及び、57-83に選択される元素の金属イオンである該キレート化合物又はその塩；金属イオンが原子番号21-29、42、44及び、57-71から選択される常磁性元素の金属イオンである該キレート化合物又はその塩が提供される。 According to a further preferred embodiment of the present invention, a chelate compound comprising one of the above compounds and a metal ion or a salt thereof; the metal ion has an atomic number of 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49, and The chelate compound which is a metal ion of an element selected from 57-83 or a salt thereof; the metal ion is a metal ion of a paramagnetic element selected from atomic numbers 21-29, 42, 44 and 57-71 Chelate compounds or salts thereof are provided.

別の観点からは、本発明により、上記の化合物又はその塩を膜構成成分として含むリポソームが提供され、その好ましい態様によれば、ホスファチジルコリン及びホスファチジルセリンを膜構成成分として含む上記リポソームが提供される。
また、本発明により、上記のリポソームを含む造影剤が提供される。この発明の好ましい態様によれば、血管疾患の造影に用いる上記造影剤；泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋細胞の造影に用いる上記造影剤；マクロファージが局在化する組織又は疾患部位の造影に用いる上記の造影剤；マクロファージが局在化する組織が肝臓、脾臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、及び腎臓上皮からなる群から選ばれる上記の造影剤；マクロファージが局在化する疾患部位が腫瘍、炎症部位、及び感染部位からなる群から選ばれる上記の造影剤が提供される。その好ましい態様によれば、MRI造影剤またはシンチグラフィー造影剤である上記いずれかの造影剤が提供される。 From another aspect, the present invention provides a liposome containing the above-mentioned compound or a salt thereof as a membrane constituent, and according to a preferred embodiment thereof, the above-mentioned liposome containing phosphatidylcholine and phosphatidylserine as membrane constituents is provided. .
In addition, according to the present invention, a contrast agent containing the above-described liposome is provided. According to a preferred aspect of the present invention, the contrast agent used for imaging of vascular disease; the contrast agent used for imaging of vascular smooth muscle cells abnormally proliferated under the influence of foamed macrophages; a tissue or a disease site where macrophages are localized The above contrast agent used for contrast imaging; the above contrast agent selected from the group consisting of liver, spleen, alveoli, lymph nodes, lymphatic vessels, and kidney epithelium; There is provided the above-mentioned contrast agent in which the disease site is selected from the group consisting of a tumor, an inflammation site, and an infection site. According to a preferred embodiment thereof, any one of the above contrast agents that is an MRI contrast agent or a scintigraphic contrast agent is provided.

さらに、上記造影剤の製造のための上記の化合物、キレート化合物又はそれらいずれかの塩の使用；造影法であって、上記の化合物、キレート化合物又はそれらいずれかの塩を膜構成成分として含むリポソームを、ヒトを含む哺乳類動物に投与した後にMRI造影/シンチグラフィー造影する工程を含む方法；血管疾患の病巣の造影方法であって、上記の化合物、キレート化合物又はそれらいずれかの塩を膜構成成分として含むリポソームを、ヒトを含む哺乳類動物に投与した後に造影する工程を含む方法が本発明により提供される。 Furthermore, use of the above-mentioned compound, chelate compound or any salt thereof for the production of the above-mentioned contrast agent; a contrast method, comprising the above-mentioned compound, chelate compound or any salt thereof as a membrane constituent A method comprising MRI imaging / scintigraphy imaging after administration to a mammal including human; imaging method for lesion of vascular disease, wherein the compound, chelate compound or any one of salts thereof is a membrane constituent According to the present invention, there is provided a method comprising the step of imaging a liposome containing as a liposome after administration to a mammal including human.

本発明の化合物、キレート化合物及びこれらいずれかの塩は、造影剤のためのリポソームの構成脂質として、その溶解性等において、優れた性質を有しており、この化合物を含むリポソームを用いてMRI造影やシンチグラフィー造影等の造影をすることにより血管の病巣を選択的に造影できる。 The compound of the present invention, the chelate compound, and any one of these salts have excellent properties, such as solubility, as a constituent lipid of a liposome for a contrast agent, and MRI using a liposome containing this compound By contrast imaging or scintigraphy imaging, a blood vessel lesion can be selectively imaged.

Ｒで表される炭素数８〜３０個のアルキル基又は炭素数８〜３０個のアルケニル基は、直鎖状、分岐鎖状、環状、又はそれらの組み合わせのいずれであってもよいが、直鎖状、又は分岐鎖状が好ましい。またＲを構成する炭素原子の数は8〜24個が好ましく、12〜20個が最も好ましい。
なお、本明細書において「〜」を用いて表される数値範囲は、「〜」の前後に記載される数値を下限値及び上限値として含む範囲を意味する。 The alkyl group having 8 to 30 carbon atoms or the alkenyl group having 8 to 30 carbon atoms represented by R may be linear, branched, cyclic, or a combination thereof. A chain or branched chain is preferred. The number of carbon atoms constituting R is preferably 8-24, and most preferably 12-20.
In the present specification, a numerical range represented by using “to” means a range including numerical values described before and after “to” as a lower limit value and an upper limit value.

Ｒがアルケニル基を表す場合、その二重結合はＥ又はＺ配置のいずれであってもよく、また、二重結合が複数ある場合はＥ及びＺ配置の混合物であってもよい。ビシナル2置換の場合はＺ体が好ましく、3置換又は4置換の場合はＥ体がより好ましいが、これに限定されることはない。二重結合の位置、及び個数は特に規定されないが、二重結合の数は8個以下であることが好ましく、4個以下であることがより好ましい。 When R represents an alkenyl group, the double bond may be either E or Z configuration, and when there are a plurality of double bonds, it may be a mixture of E and Z configurations. In the case of vicinal disubstitution, the Z form is preferred, and in the case of trisubstitution or tetrasubstitution, the E form is more preferred, but is not limited thereto. The position and number of double bonds are not particularly limited, but the number of double bonds is preferably 8 or less, and more preferably 4 or less.

Ｌは２価の連結基を表し（ただし、Ｌは炭素原子、酸素原子、窒素原子、硫黄原子及び水素原子からなる群から選択される原子により構成され、Ｌを構成する炭素原子、酸素原子、窒素原子及び硫黄原子の総原子数は１〜３０個であり、このうち酸素原子の数は０〜１５個であり、窒素原子の数は０〜６個であり、硫黄原子の数は０〜３個である）、飽和の基であっても、不飽和結合を含む基であってもよい。Ｌが不飽和結合を含む連結基である場合、その種類、位置、個数は特に規定されない。Ｌが炭素原子のほかに、酸素原子、窒素原子又は硫黄原子を含む場合、該連結基中に、シアノ、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、アルコキシ、アシルオキシ、カルバモイルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アミノ、アシルアミノ、アミノカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアミノ、スルファモイルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、メルカプト、アルキルチオ、スルファモイル、スルホ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アシル、アルコキシカルボニル、カルバモイル、アゾ、イミドなどの部分構造を形成していてもよいが、例示した部分構造に限定されることはない。またＬが、炭素原子、酸素原子、窒素原子及び水素原子から構成される２価の連結基である場合がより好ましい。Ｌが炭素原子のほかに、酸素原子、又は窒素原子を含む場合、該連結基中に、シアノ、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、アルコキシ、アシルオキシ、カルバモイルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アミノ、アシルアミノ、アミノカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアミノ、アシル、アルコキシカルボニル、カルバモイル、アゾ、イミドなどの部分構造を形成していてもよいが、例示した部分構造に限定されることはない。 L represents a divalent linking group (wherein L is composed of an atom selected from the group consisting of a carbon atom, an oxygen atom, a nitrogen atom, a sulfur atom, and a hydrogen atom, and a carbon atom, an oxygen atom, The total number of nitrogen atoms and sulfur atoms is 1-30, among which the number of oxygen atoms is 0-15, the number of nitrogen atoms is 0-6, and the number of sulfur atoms is 0-0. 3), a saturated group or a group containing an unsaturated bond may be used. When L is a linking group containing an unsaturated bond, its type, position and number are not particularly defined. When L contains an oxygen atom, a nitrogen atom or a sulfur atom in addition to a carbon atom, in the linking group, cyano, hydroxyl, nitro, carboxyl, alkoxy, acyloxy, carbamoyloxy, alkoxycarbonyloxy, amino, acylamino, amino Even if it forms a partial structure such as carbonylamino, alkoxycarbonylamino, sulfamoylamino, alkylsulfonylamino, mercapto, alkylthio, sulfamoyl, sulfo, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, acyl, alkoxycarbonyl, carbamoyl, azo, imide Although it is good, it is not limited to the illustrated partial structure. More preferably, L is a divalent linking group composed of a carbon atom, an oxygen atom, a nitrogen atom and a hydrogen atom. When L contains an oxygen atom or a nitrogen atom in addition to a carbon atom, in the linking group, cyano, hydroxyl, nitro, carboxyl, alkoxy, acyloxy, carbamoyloxy, alkoxycarbonyloxy, amino, acylamino, aminocarbonylamino , Alkoxycarbonylamino, acyl, alkoxycarbonyl, carbamoyl, azo, imide and the like may be formed, but is not limited to the exemplified partial structures.

Ｌで表される2価の連結基において、その主鎖の原子数は1〜25個の範囲であることが好ましい。ただしＬの「主鎖」とは一般式（Ｉ）におけるＣｈ−で表される基と−ＣＯ-Ｏ-Ｒで表される基との間を最小個数で結ぶ原子群を意味する。Ｌの主鎖の原子数は5〜23個がより好ましく、7〜18個が最も好ましい。Ｌの主鎖が不飽和結合を含む場合、その種類、位置、個数は特に限定されない。主鎖は炭素原子のほかに、酸素原子、窒素原子又は硫黄原子を含むことが好ましい。この場合、該連結基中に形成される部分構造として、エーテル、チオエーテル、カルボニル、エステル、アミド、ジスルフィド、アミノ、イミドなどが挙げられるが、例示した部分構造に限定されることはない。より好ましくは主鎖が炭素原子のほかに、酸素原子、又は窒素原子を含む場合である。この場合、該連結基中に形成される部分構造としてエーテル、エステル、アミノ、又はアミドなどが挙げられるが、これらに限定されることはない。 In the divalent linking group represented by L, the number of atoms in the main chain is preferably in the range of 1 to 25. However, the “main chain” of L means an atomic group connecting the group represented by Ch— and the group represented by —CO—O—R in the general formula (I) with a minimum number. The number of atoms in the main chain of L is more preferably 5-23, and most preferably 7-18. When the main chain of L contains an unsaturated bond, the type, position, and number are not particularly limited. The main chain preferably contains an oxygen atom, a nitrogen atom or a sulfur atom in addition to the carbon atom. In this case, examples of the partial structure formed in the linking group include ether, thioether, carbonyl, ester, amide, disulfide, amino, and imide, but are not limited to the exemplified partial structure. More preferably, the main chain contains an oxygen atom or a nitrogen atom in addition to the carbon atom. In this case, examples of the partial structure formed in the linking group include, but are not limited to, ether, ester, amino, or amide.

Ｌで表される２価の連結基において、Ｌを構成する原子は上述の主鎖への置換基として含まれていてもよい。該置換基の個数、置換位置は特に限定されず、２個以上の置換基が存在する場合には、それらは同一であっても異なっていてもよい。ただし、置換基を有する部分構造を含めたＬを構成する炭素原子、酸素原子、窒素原子、及び硫黄原子の総数は30個を超えないものとする。置換基の例としては、ヘテロ環基、シアノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、カルボキシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、ヘテロ環オキシ基、アシルオキシ基、カルバモイルオキシ基、アルコキシカルボニルオキシ基、アリールオキシカルボニルオキシ基、アミノ基（アニリノ基を含む）、アシルアミノ基、アミノカルボニルアミノ基、アルコキシカルボニルアミノ基、アリールオキシカルボニルアミノ基、スルファモイルアミノ基、アルキル及びアリールスルホニルアミノ基、メルカプト基、アルキルチオ基、アリールチオ基、ヘテロ環チオ基、スルファモイル基、スルホ基、アルキル及びアリールスルフィニル基、アルキル及びアリールスルホニル基、アシル基、アリールオキシカルボニル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、アリール及びヘテロ環アゾ基、イミド基が挙げられるが、これらに限定されることはない。また、置換基は、炭素原子、酸素原子、窒素原子及び水素原子から選択される原子で構成されていることが好ましい。この場合、該置換基の例としては、ヘテロ環基、シアノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、カルボキシル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、ヘテロ環オキシ基、アシルオキシ基、カルバモイルオキシ基、アルコキシカルボニルオキシ基、アリールオキシカルボニルオキシ基、アミノ基（アニリノ基を含む）、アシルアミノ基、アミノカルボニルアミノ基、アルコキシカルボニルアミノ基、アリールオキシカルボニルアミノ基、アシル基、アリールオキシカルボニル基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、アリール及びヘテロ環アゾ基、イミド基が挙げられるが、これらに限定されることはない。 In the divalent linking group represented by L, the atoms constituting L may be contained as a substituent for the main chain. The number of substituents and the substitution position are not particularly limited, and when two or more substituents are present, they may be the same or different. However, the total number of carbon atoms, oxygen atoms, nitrogen atoms and sulfur atoms constituting L including the partial structure having a substituent shall not exceed 30. Examples of substituents include heterocyclic group, cyano group, hydroxyl group, nitro group, carboxyl group, alkoxy group, aryloxy group, heterocyclic oxy group, acyloxy group, carbamoyloxy group, alkoxycarbonyloxy group, aryloxycarbonyl Oxy group, amino group (including anilino group), acylamino group, aminocarbonylamino group, alkoxycarbonylamino group, aryloxycarbonylamino group, sulfamoylamino group, alkyl and arylsulfonylamino group, mercapto group, alkylthio group, Arylthio group, heterocyclic thio group, sulfamoyl group, sulfo group, alkyl and arylsulfinyl group, alkyl and arylsulfonyl group, acyl group, aryloxycarbonyl group, alkoxycarbonyl group, carbamo Group, a heterocyclic azo group, although the imide group include, but is not limited thereto. Moreover, it is preferable that the substituent is comprised by the atom selected from a carbon atom, an oxygen atom, a nitrogen atom, and a hydrogen atom. In this case, examples of the substituent include a heterocyclic group, a cyano group, a hydroxyl group, a nitro group, a carboxyl group, an alkoxy group, an aryloxy group, a heterocyclic oxy group, an acyloxy group, a carbamoyloxy group, and an alkoxycarbonyloxy group. , Aryloxycarbonyloxy group, amino group (including anilino group), acylamino group, aminocarbonylamino group, alkoxycarbonylamino group, aryloxycarbonylamino group, acyl group, aryloxycarbonyl group, alkoxycarbonyl group, carbamoyl group, An aryl and a heterocyclic azo group and an imide group are mentioned, However, It is not limited to these.

Ｌで表される２価の連結基としてより好ましくは、Ｌが、主鎖中に、−X¹−CO−又は−CO−X¹−で表される部分構造を少なくとも１個以上有する場合が挙げられる。Ｌの主鎖における上記部分構造の数は特に限定されないが、通常は5個以下であり、好ましくは3個以下であり、最も好ましくは1個である。X¹は−O−又は−NZ¹−を表し、Z¹は水素原子又は１〜３個の炭素原子からなる低級アルキル基を表すが、X¹が−O−、−NH−、又は-N（CH₃）-を表す場合がより好ましい。ただし、Ｌの部分構造の表記として、例えば−X¹−CO−と表した場合、Ch−はX¹の左側、-CO-O-RはCOの右側に、それぞれ直接、又は任意の2価の連結基を介して結合しているものとする。 More preferably, as the divalent linking group represented by L, L may have at least one partial structure represented by —X ¹ —CO— or —CO—X ¹ — in the main chain. Can be mentioned. The number of the partial structures in the main chain of L is not particularly limited, but is usually 5 or less, preferably 3 or less, and most preferably 1. X ¹ represents —O— or —NZ ¹ —, Z ¹ represents a hydrogen atom or a lower alkyl group consisting of 1 to 3 carbon atoms, and X ¹ represents —O—, —NH—, or —N. The case of representing (CH ₃ ) — is more preferable. However, when the partial structure of L is expressed as, for example, -X ¹ -CO-, Ch- is on the left side of X ¹ and -CO-OR is on the right side of CO, either directly or in any divalent linkage. Assume that they are bonded via a group.

また、Ｌが−W¹−X²−CO−W²−又は−W¹−CO−X²−W²−によって表される連結基であることがより好ましい。ここでW¹は単結合、又は炭素数１〜５個のアルキレン基又は炭素数１〜５個のアルケニレン基を表すが、炭素数1〜3個のアルキレン基又は炭素数1〜3個のアルケニレン基を表すことがより好ましい。またW¹は飽和の基であっても、不飽和結合を含む基であってもよい。W¹が不飽和結合を含む基である場合、その種類、位置、個数は特に規定されない。またW¹は直鎖状、分岐鎖状、環状、又はそれらの組み合わせのいずれであってもよいが、直鎖状、又は分岐鎖状が好ましく、直鎖状であることがより好ましい。またW¹は置換基を有していてもよい。X²は−O−又は−NZ²−を表し、Z²は水素原子又は炭素数１〜３個のアルキル基を表すが、X²が−O−、−NH−、又は-N（CH₃）-を表す場合がより好ましい。また、W²は炭素数１〜２０個のアルキレン基又は炭素数１〜２０個のアルケニレン基を表すが、炭素原子の数は1〜15個がより好ましく、1〜10個が最も好ましい。またW²は飽和の基であっても、不飽和結合を含む基であってもよい。W²が不飽和結合を含む基である場合、その種類、位置、個数は特に規定されない。またW²は直鎖状、分岐鎖状、環状、又はそれらの組み合わせのいずれであってもよいが、直鎖状、又は分岐鎖状が好ましく、直鎖状であることがより好ましい。またW²は置換基を有していてもよい。 Further, L is ^{^{^{-W 1 -X 2 -CO-W 2}}} - is more preferably a linking group represented by - or ^{^{^{-W 1 -CO-X 2 -W 2}}} . Here, W ¹ represents a single bond, an alkylene group having 1 to 5 carbon atoms, or an alkenylene group having 1 to 5 carbon atoms, and an alkylene group having 1 to 3 carbon atoms or an alkenylene having 1 to 3 carbon atoms. More preferably it represents a group. W ¹ may be a saturated group or a group containing an unsaturated bond. When W ¹ is a group containing an unsaturated bond, its type, position and number are not particularly defined. W ¹ may be linear, branched, cyclic, or a combination thereof, but is preferably linear or branched, and more preferably linear. W ¹ may have a substituent. X ² represents —O— or —NZ ² —, Z ² represents a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms, and X ² represents —O—, —NH—, or —N (CH ₃ )-Is more preferable. W ² represents an alkylene group having 1 to 20 carbon atoms or an alkenylene group having 1 to 20 carbon atoms, and the number of carbon atoms is more preferably 1 to 15, and most preferably 1 to 10. W ² may be a saturated group or a group containing an unsaturated bond. When W ² is a group containing an unsaturated bond, its type, position and number are not particularly defined. W ² may be linear, branched, cyclic, or a combination thereof, but is preferably linear or branched, and more preferably linear. W ² may have a substituent.

別の観点からは、Ｌは主鎖中に−(OCH₂CH₂)_n−、−(CH₂CH₂O)_n−、−(OCH₂CH₂CH₂)_m−、又は−(CH₂CH₂CH₂O)_m−のいずれか１つで表される部分構造を有することが好ましく、−(OCH₂CH₂)_n−、又は−(CH₂CH₂O)_n−で表される部分構造を有することがより好ましい。またＬが主鎖中に−(OCH₂CH₂)_n−、又は−(OCH₂CH₂CH₂)_m−で表される部分構造を有する場合、該部分構造は-CO-O-Rと−(OCH₂CH₂)_nOCH₂-CO-O-R、又は−(OCH₂CH₂CH₂)_m OCH₂CH₂-CO-O-Rの構造で連結していることが好ましい。nは1〜7の整数を表すが、好ましくは2〜5、より好ましくは3〜5の整数を表す。mは１〜5の整数を表すが、好ましくは2〜5、より好ましくは2〜4の整数を表す。ただし、−(OCH₂CH₂)_n−又は−(OCH₂CH₂CH₂)_m−がCh−と直接結合することはい。 From another viewpoint, L represents — (OCH ₂ CH ₂ ) _n —, — (CH ₂ CH ₂ O) _n —, — (OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m —, or — (CH ₂ ) in the main chain. It is preferable to have a partial structure represented by any one of CH ₂ CH ₂ O) _m —, represented by — (OCH ₂ CH ₂ ) _n —, or — (CH ₂ CH ₂ O) _n —. It is more preferable to have a partial structure. When L has a partial structure represented by-(OCH ₂ CH ₂ ) _n- or-(OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _{m-in the} main chain, the partial structure is represented by -CO-OR and-( OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH ₂ —CO—OR or — (OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH ₂ —CO—OR is preferably linked. n represents an integer of 1 to 7, preferably 2 to 5, more preferably an integer of 3 to 5. m represents an integer of 1 to 5, preferably 2 to 5, more preferably an integer of 2 to 4. _{_{However, - (OCH 2 CH 2)}} n - or _{_{_{- (OCH 2 CH 2 CH 2}}} ) m - is not able to bind directly to Ch -.

さらに、Ｌは−W³−X³−CO−W⁴−又は−W³−CO−X³−W⁵−によって表される連結基であることが好ましい。ここでW³は単結合、又は炭素数１〜５個のアルキレン基又はアルケニレン基を表すが、炭素数１〜３個のアルキレン基又はアルケニレン基を表す場合がより好ましい。またW³は飽和の基であっても、不飽和結合を含む基であってもよい。W³が不飽和結合を含む基である場合、その種類、位置、個数は特に規定されない。またW³は直鎖状、分岐鎖状、環状、又はそれらの組み合わせのいずれであってもよいが、直鎖状、又は分岐鎖状が好ましく、直鎖状であることがより好ましい。またW³は置換基を有していてもよい。X³は−O−又は−NZ³−を表し、Z³は水素原子又は１〜３個の炭素原子からなる低級アルキル基を表すが、X³が−O−、−NH−、又は-N（CH₃）-を表すことがより好ましい。またW⁴は−(OCH₂CH₂)_n OCH₂−、−CH₂(OCH₂CH₂)_nOCH₂−、−(OCH₂CH₂CH₂)_m OCH₂CH₂−、−CH₂(OCH₂CH₂CH₂)_m OCH₂CH₂−、又は−(CH₂)₂(OCH₂CH₂CH₂)_m OCH₂CH₂−を表すが、−(OCH₂CH₂)_n OCH₂−、又は−CH₂(OCH₂CH₂)_nOCH₂−を表すことがより好ましい。W⁵は−(CH₂)₂(OCH₂CH₂) OCH_2n−又は−(CH₂)₃(OCH₂CH₂CH₂)_m OCH₂CH₂−を表すが、−(CH₂)₂(OCH₂CH₂)_nOCH₂−であることがより好ましい。またnは1〜7の整数を表すが、好ましくは2〜5、より好ましくは3〜5の整数を表す。mは１〜5の整数を表すが、好ましくは2〜5、より好ましくは2〜4の整数を表す。W⁴及びW⁵は置換基を有していてもよい。 Further, L is ^{^{^{-W 3 -X 3 -CO-W 4}}} - is preferably a linking group represented by - or ^{^{^{-W 3 -CO-X 3 -W 5}}} . Here, W ³ represents a single bond, or an alkylene group or alkenylene group having 1 to 5 carbon atoms, and more preferably represents an alkylene group or alkenylene group having 1 to 3 carbon atoms. W ³ may be a saturated group or a group containing an unsaturated bond. When W ³ is a group containing an unsaturated bond, its type, position and number are not particularly defined. W ³ may be linear, branched, cyclic, or a combination thereof, but is preferably linear or branched, and more preferably linear. W ³ may have a substituent. X ³ represents —O— or —NZ ³ —, Z ³ represents a hydrogen atom or a lower alkyl group consisting of 1 to 3 carbon atoms, and X ³ represents —O—, —NH—, or —N. More preferably, (CH ₃ ) — is represented. W ⁴ is-(OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH _2- , --CH ₂ (OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH ₂ -,-(OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH _2- , --CH ₂ ( OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH _2- or-(CH ₂ ) ₂ (OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH _2- represents-(OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH _2- Or —CH ₂ (OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH ₂ — is more preferable. W ⁵ represents-(CH ₂ ) ₂ (OCH ₂ CH ₂ ) OCH _2n- or-(CH ₂ ) ₃ (OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH _2-, but-(CH ₂ ) ₂ ( OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH ₂ — is more preferable. N represents an integer of 1 to 7, preferably 2 to 5, more preferably an integer of 3 to 5. m represents an integer of 1 to 5, preferably 2 to 5, more preferably an integer of 2 to 4. W ⁴ and W ⁵ may have a substituent.

以下に本発明の化合物の好ましい例を示すが、本発明の化合物はこれらの例に限定されることはない。

Although the preferable example of the compound of this invention is shown below, the compound of this invention is not limited to these examples.

以下に、本発明の化合物の一般的な合成法について説明するが、本発明の化合物の合成法はこれらに限定されるものではない。本発明の化合物の部分構造である長鎖アルコールは、通常市販されているものを使用してもよく、あるいは用途に応じて適宜合成してもよい。 Hereinafter, a general method for synthesizing the compound of the present invention will be described, but the method for synthesizing the compound of the present invention is not limited thereto. As the long-chain alcohol which is a partial structure of the compound of the present invention, a commercially available one may be used, or it may be appropriately synthesized according to the use.

上記の長鎖アルコールは、適宜必要な連結基を結合した後に、金属配位能を有するポリアミン誘導体と連結することで本発明の化合物が合成できる。この際、必要な場合には保護基を用いることもできるが、この場合の保護基とは、例えば、T. W. Green & P. G. M. Wuts著、Protecting groups in organic synthesis（John Wiley & sonc, inc.）に記載のものを適宜選択して用いることができる。ポリアミン誘導体との連結方法は、例えば、Bioconjugate Chem., 10, 137 (1999)や Tetrahedron Lett., 37, 4685 (1996) 、J. Chem. Soc., Perkin Trans 2, 348 (2002) 、又は J. Heterocycl. Chem., 37, 387 (2000) に記載の手法に準じて合成することができる。しかし、これらの方法は一例であり、これに限定されるものではない。 The above-mentioned long-chain alcohol can be synthesized with the compound of the present invention by appropriately connecting a necessary linking group and then linking with a polyamine derivative having metal coordination ability. In this case, if necessary, a protecting group can be used. In this case, the protecting group is described in, for example, Protecting groups in organic synthesis (John Wiley & sonc, inc.) By TW Green & PGM Wuts. Can be appropriately selected and used. For example, Bioconjugate Chem., 10, 137 (1999), Tetrahedron Lett., 37, 4685 (1996), J. Chem. Soc., Perkin Trans 2, 348 (2002), or J Heterocycl. Chem., 37, 387 (2000). However, these methods are examples, and the present invention is not limited to these.

本発明のキレート化合物は上述の化合物及び金属イオンからなるキレート化合物である。金属イオンとしては、特に限定されないが、MRI、X線、超音波コントラスト、シンチグラフィーなどの造影、放射線治療の目的に適切な金属イオンとして、常磁性金属、重金属、放射性金属同位体の放射性金属の金属イオンを用いることが好ましい。より具体的には、原子番号21-29、31、32、37-39、42-44、49、及び57-83から選択される元素の金属イオンが好ましい。MRI造影剤として本発明のキレート化合物を使用する場合に適切な金属イオンとしては、原子番号21-29、42、44、及び57-71から選択される元素の金属イオンが挙げられる。正のMRI剤の調製に用いるためにより好ましい金属は、原子番号24（Cr）、25（Mn）、26（Fe）、63（Eu）、64（Gd）、66（Dy）、67（Ho）であり、原子番号25（Mn）、26（Fe）、64（Gd）がより好ましく、特にMn(II)、Fe(III)、Gd(III)が好ましい。負のMRI剤の調製に用いるためにより好ましい金属は、原子番号62（Sm）、65（Tb）、66（Dy）である。 The chelate compound of the present invention is a chelate compound comprising the above-mentioned compound and a metal ion. The metal ion is not particularly limited, but as a metal ion suitable for the purpose of imaging and radiotherapy such as MRI, X-ray, ultrasonic contrast, scintigraphy, paramagnetic metal, heavy metal, radioactive metal isotope It is preferable to use metal ions. More specifically, a metal ion of an element selected from atomic numbers 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49, and 57-83 is preferable. Suitable metal ions when using the chelate compound of the present invention as an MRI contrast agent include metal ions of elements selected from atomic numbers 21-29, 42, 44, and 57-71. More preferred metals for use in preparing positive MRI agents are atomic numbers 24 (Cr), 25 (Mn), 26 (Fe), 63 (Eu), 64 (Gd), 66 (Dy), 67 (Ho) Atomic numbers 25 (Mn), 26 (Fe), and 64 (Gd) are more preferable, and Mn (II), Fe (III), and Gd (III) are particularly preferable. More preferred metals for use in preparing the negative MRI agent are atomic numbers 62 (Sm), 65 (Tb), 66 (Dy).

本発明の化合物又はキレート化号物は１以上の不斉中心を有する場合があるが、この場合、不斉中心に基づく光学活性体又はジアステレオ異性体などの立体異性体が存在する。純粋な形態の任意の立体異性体、任意の立体異性体の混合物、又はラセミ体などは、いずれも本発明の範囲に包含される。また、本発明の化合物はオレフィン性の二重結合を１個又は２個以上有する場合があるが、その配置はＥ又はＺのいずれであってもよく、両者の混合物として存在していてもよい。本発明の化合物は互変異性体として存在する場合もあるが、任意の互変異性体、又はそれらの混合物は本発明の範囲に包含される。さらに、本発明の化合物は塩を形成する場合があり、遊離形態の化合物又は塩の形態の化合物が水和物又は溶媒和物を形成する場合もあるが、このような場合も本発明の範囲に包含される。塩の種類は特に限定されず、酸付加塩又は塩基付加塩のいずれであってもよい。 The compound or chelate compound of the present invention may have one or more asymmetric centers. In this case, stereoisomers such as optically active substances or diastereoisomers based on the asymmetric centers exist. Any stereoisomers in pure form, mixtures of any stereoisomers, racemates, and the like are all encompassed within the scope of the present invention. In addition, the compound of the present invention may have one or more olefinic double bonds, but the arrangement may be either E or Z, and may exist as a mixture of both. . The compounds of the invention may exist as tautomers, but any tautomer, or mixture thereof, is included within the scope of the invention. Furthermore, the compound of the present invention may form a salt, and the free form compound or the salt form compound may form a hydrate or a solvate. Is included. The kind of salt is not particularly limited, and may be either an acid addition salt or a base addition salt.

本発明の化合物又はその塩はリポソームの膜構成成分として用いることができる。本発明の化合物又はその塩を用いてリポソームを調製する場合、本発明の化合物又はその塩の使用量は、膜構成成分の全質量に対して１０から９０質量％程度、好ましくは１０から８０質量％、さらに好ましくは２０から８０質量％である。本発明の化合物は膜構成成分として１種類を用いてもよいが、２種類以上を組み合わせて用いてもよい。
リポソームの他の膜構成成分としては、リポソームの製造に通常用いられている脂質化合物をいずれも用いてもよい。例えば、Biochim. Biophys. Acta 150(4), 44 (1982)、Adv. In Lipid. Res. 16(1), 1 (1978)、RESEARCH IN LIPOSOMES (P. Machy, L. Leserman著、John Libbey EUROTEXT社)、「リポソーム」（野島、砂本、井上編、南江堂）等に記載されている。脂質化合物としてはリン脂質が好ましく、特に好ましいのはホスファチジルコリン（PC）類である。ホスファチジルコリン類の好ましい例としては、eggPC（卵由来のPC）、ジミリストイルPC（DMPC）、ジパルミトイルPC（DPPC）、ジステアロイルPC（DSPC）、ジオレイルPC（DOPC）等があげられるが、これらに限定されるものではない。 The compound of the present invention or a salt thereof can be used as a membrane constituent of a liposome. When a liposome is prepared using the compound of the present invention or a salt thereof, the amount of the compound of the present invention or the salt thereof used is about 10 to 90% by mass, preferably 10 to 80% by mass with respect to the total mass of the membrane constituent components. %, More preferably 20 to 80% by weight. Although the compound of this invention may use 1 type as a film | membrane structural component, you may use it in combination of 2 or more types.
As other membrane constituent components of the liposome, any lipid compound usually used in the production of liposomes may be used. For example, Biochim. Biophys. Acta 150 (4), 44 (1982), Adv. In Lipid. Res. 16 (1), 1 (1978), RESEARCH IN LIPOSOMES (P. Machy, L. Leserman, John Libbey EUROTEXT Co., Ltd.), “Liposome” (Nojima, Sunamoto, Inoue Hen, Nankodo) and the like. As the lipid compound, phospholipid is preferable, and phosphatidylcholine (PC) is particularly preferable. Preferred examples of phosphatidylcholines include eggPC (egg-derived PC), dimyristoyl PC (DMPC), dipalmitoyl PC (DPPC), distearoyl PC (DSPC), dioleyl PC (DOPC) and the like. It is not limited.

リポソームの膜構成成分として好ましい例としては、ホスファチジルコリンとホスファチジルセリン（PS）との組み合わせを挙げることができる。ホスファチジルセリンとしては、ホスファチジルコリンの好ましい例として挙げたリン脂質と同様の脂質部位を有する化合物が挙げられる。ホスファチジルコリンとホスファチジルセリンとを組み合わせて用いる場合、PCとPSの好ましい使用モル比はPC：PS＝９０：１０から１０：９０の間であり、さらに好ましくは、３０：７０から７０：３０の間である。
本発明のリポソームとして好ましい別の例としては、膜構成成分として、ホスファチジルコリンとホスファチジルセリンとを含み、さらにリン酸ジアルキルエステルを含むリポソームが挙げられる。リン酸ジアルキルエステルのジアルキルエステルを構成する２個のアルキル基は同一であることが好ましく、それぞれのアルキル基の炭素数は６以上であることが好ましく、１０以上がより好ましく、１２以上がさらに好ましい。好ましいリン酸ジアルキルエステルの例としては、ジラウリルフォスフェート、ジミリスチルフォスフェート、ジセチルフォスフェート等が挙げられるが、これらに限定されることはない。この態様において、ホスファチジルコリン及びホスファチジルセリンの合計質量に対するリン酸ジアルキルエステルの好ましい使用量は１から５０質量％までであり、好ましくは１から３０質量％であり、さらに好ましくは１から２０質量％である。 Preferable examples of the membrane component of the liposome include a combination of phosphatidylcholine and phosphatidylserine (PS). Examples of phosphatidylserine include compounds having the same lipid moiety as the phospholipids listed as preferred examples of phosphatidylcholine. When phosphatidylcholine and phosphatidylserine are used in combination, the preferred use molar ratio of PC to PS is between PC: PS = 90: 10 to 10:90, more preferably between 30:70 to 70:30. is there.
Another preferable example of the liposome of the present invention includes a liposome containing phosphatidylcholine and phosphatidylserine as membrane constituents, and further containing a dialkyl phosphate. The two alkyl groups constituting the dialkyl ester of the phosphoric acid dialkyl ester are preferably the same, and each alkyl group preferably has 6 or more carbon atoms, more preferably 10 or more, and even more preferably 12 or more. . Examples of preferred dialkyl phosphates include, but are not limited to, dilauryl phosphate, dimyristyl phosphate, dicetyl phosphate, and the like. In this embodiment, the preferred amount of dialkyl phosphate used relative to the total weight of phosphatidylcholine and phosphatidylserine is 1 to 50% by weight, preferably 1 to 30% by weight, more preferably 1 to 20% by weight. .

ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、リン酸ジアルキルエステ及び本発明の化合物を膜構成成分として含むリポソームにおいて、上記成分の好ましい質量比はPC：PS：リン酸ジアルキルエステル：本発明の化合物が５〜４０質量％：５〜４０質量％：１〜１０質量％：１５〜８０質量％の間で選択することができる。
本発明のリポソームの構成成分は上記４者に限定されず、他の成分を加えることができる。その例としては、コレステロール、コレステロールエステル、スフィンゴエミリン、FEBS Lett. 223, 42 (1987); Proc. Natl. Acad. Sci., USA 85, 6949 (1988)等に記載のモノシアルガングリオキシドGM1誘導体、Chem. Lett. 2145 (1989); Biochim. Biophys. Acta 1148, 77 (1992)等に記載のグルクロン酸誘導体、Biochim. Biophys. Acta 1029, 91 (1990); FEBS Lett. 268, 235 (1990)等に記載のポリエチレングリコール誘導体が挙げられるが、これに限られるものではない。 In the liposome containing phosphatidylcholine, phosphatidylserine, dialkyl ester phosphate and the compound of the present invention as membrane components, the preferred mass ratio of the above components is PC: PS: dialkyl phosphate ester: 5-40% by mass of the compound of the present invention: It can be selected between 5-40% by weight: 1-10% by weight: 15-80% by weight.
The constituent components of the liposome of the present invention are not limited to the above four, and other components can be added. Examples thereof include cholesterol, cholesterol ester, sphingoemilin, FEBS Lett. 223, 42 (1987); Proc. Natl. Acad. Sci., USA 85, 6949 (1988) and the like, Chem. Lett. 2145 (1989); Biochim. Biophys. Acta 1148, 77 (1992) and other glucuronic acid derivatives, Biochim. Biophys. Acta 1029, 91 (1990); FEBS Lett. 268, 235 (1990), etc. However, the present invention is not limited to this.

本発明のリポソームは、当業者が利用可能ないかなる方法で製造してもよい。製造法の例としては、先に挙げたリポソームの総説成書類の他、Ann. Rev. Biophys. Bioeng. 9, 467 (1980)、"Liposomes" (M. J. Ostro編、MARCELL DEKKER、INC.)等に記載されている。具体例としては、超音波処理法、エタノール注入法、フレンチプレス法、エーテル注入法、コール酸法、カルシウム融合法、凍結融解法、逆相蒸発法等が挙げられるが、これらに限られるものではない。本発明のリポソームのサイズは、上記の方法で作成できるサイズのいずれであってもよいが、通常は平均が400 nm以下であり、200 nm以下が好ましい。リポソームの構造は特に限定されず、ユニラメラ又はマルチラメラなどのいずれの形態でもよい。また、リポソームの内部に適宜の薬物や他の造影剤の１種又は２種以上を配合することも可能である。 The liposome of the present invention may be produced by any method available to those skilled in the art. Examples of production methods include the above-listed liposome review documents, Ann. Rev. Biophys. Bioeng. 9, 467 (1980), "Liposomes" (MJ Ostro, MARCELL DEKKER, INC.), Etc. Are listed. Specific examples include sonication, ethanol injection, French press method, ether injection method, cholic acid method, calcium fusion method, freeze-thaw method, reverse phase evaporation method, etc. Absent. The size of the liposome of the present invention may be any of the sizes that can be produced by the above method, but the average is usually 400 nm or less, and preferably 200 nm or less. The structure of the liposome is not particularly limited, and may be any form such as unilamellar or multilamellar. Moreover, it is also possible to mix | blend the 1 type (s) or 2 or more types of a suitable drug and another contrast agent in the inside of a liposome.

本発明のリポソームを造影剤として用いる場合には、好ましくは非経口的に投与することができ、より好ましくは静脈内投与することができる。例えば、注射剤や点滴剤などの形態の製剤を凍結乾燥形態の粉末状組成物として提供し、用事に水又は他の適当な媒体（例えば生理食塩水、ブドウ等輸液、緩衝液など）に溶解ないし再懸濁して用いることができる。本発明のリポソームを造影剤として用いる場合、投与量はリポソーム中の化合物含有量が従来の造影剤の化合物含有量と同程度になるように適宜決定することが可能である。 When the liposome of the present invention is used as a contrast agent, it can be preferably administered parenterally, more preferably intravenously administered. For example, a preparation in the form of an injection or infusion is provided as a powdered composition in a lyophilized form, and is dissolved in water or other appropriate medium (for example, physiological saline, infusion of grapes, buffer, etc.) Or it can be resuspended. When the liposome of the present invention is used as a contrast agent, the dose can be appropriately determined so that the compound content in the liposome is comparable to the compound content of a conventional contrast agent.

いかなる特定の理論に拘泥するわけではないが、動脈硬化、若しくはPTCA（経皮的冠動脈形成術）後の再狭窄等の血管疾患においては、血管の中膜を形成する血管平滑筋細胞が異常増殖を起こすと同時に内膜に遊走し、血流路を狭くすることが知られている。正常の血管平滑筋細胞が異常増殖を始めるトリガーはまだ完全に明らかにされていないが、マクロファージの内膜への遊走と泡沫化が重要な要因であることが知られており、その後に血管平滑筋細胞がフェノタイプ変換（収縮型から合成型）をおこすことが報告されている。 Without being bound to any particular theory, in vascular diseases such as arteriosclerosis or restenosis after PTCA (percutaneous coronary angioplasty), vascular smooth muscle cells that form the media of the blood vessels grow abnormally At the same time, it is known to migrate to the intima and narrow the blood flow path. Although the triggers for normal vascular smooth muscle cells to begin to grow abnormally have not yet been fully clarified, macrophage migration and foaming are known to be important factors, followed by vascular smoothness. It has been reported that myocytes undergo phenotype conversion (from contraction to synthesis).

本発明のリポソームを用いると、泡沫化マクロファージの影響で異常増殖した血管平滑筋に対して規定の造影剤となる化合物を選択的に取り込ませることができる。その結果、病巣と非疾患部位とをコントラストをつけて造影することが可能である。従って、本発明の造影剤は、特に血管疾患の造影に好適に使用でき、例えば、動脈硬化巣やPTCA後の再狭窄等の造影を行うことができる。 When the liposome of the present invention is used, a compound that serves as a defined contrast agent can be selectively taken into vascular smooth muscles that have abnormally grown under the influence of foamed macrophages. As a result, it is possible to contrast the lesion and the non-disease site with contrast. Therefore, the contrast agent of the present invention can be suitably used particularly for imaging of vascular diseases. For example, imaging of arteriosclerotic lesions and restenosis after PTCA can be performed.

また、例えば J. Biol. Chem., 265, 5226 (1990)に記載されているように、リン脂質よりなるリポソーム、特にPCとPSから形成されるリポソームが、スカベンジャーレセプターを介してマクロファージに集積しやすいことが知られている。従って本発明のリポソームを使用することにより、本発明の化合物をマクロファージが局在化している組織又は疾患部位に集積させることができる。本発明のリポソームを用いると、公知技術であるサスペンジョン又はオイルエマルジョンを用いる場合に比べて、より多くの規定の化合物をマクロファージに集積させることが可能である。 Further, as described in, for example, J. Biol. Chem., 265, 5226 (1990), liposomes composed of phospholipids, particularly liposomes formed from PC and PS, accumulate in macrophages via scavenger receptors. It is known to be easy. Therefore, by using the liposome of the present invention, the compound of the present invention can be accumulated in a tissue or a disease site where macrophages are localized. When the liposome of the present invention is used, more defined compounds can be accumulated in macrophages than when a suspension or oil emulsion, which is a known technique, is used.

マクロファージの局在化が認められ、本発明のリポソームで好適に造影可能な組織としては、例えば、血管、肝臓、肺胞、リンパ節、リンパ管、腎臓上皮を挙げることができる。また、ある種の疾患においては、疾患部位にはマクロファージが集積していることが知られている。こうした疾患としては、腫瘍、動脈硬化、炎症、感染等を挙げることができる。従って、本発明のリポソームを用いることにより、これらの疾患部位を特定することができる。特に、アテローム性動脈硬化病変の初期過程において、スカベンジャーレセプターを介して変性LDLを大量に取り込んだ泡沫化マクロファージが集積していることが知られており〔Am. J. Pathol., 103, 181(1981)、Annu. Rev. Biochem., 52, 223(1983)〕、このマクロファージに本発明のリポソームを集積化させてMRI造影をすることにより、他の手段では困難な動脈硬化初期病変の位置を特定することが可能である。 Examples of tissues in which macrophage localization is recognized and can be suitably imaged with the liposome of the present invention include blood vessels, liver, alveoli, lymph nodes, lymphatic vessels, and kidney epithelium. Further, in certain diseases, it is known that macrophages are accumulated at the disease site. Examples of such diseases include tumors, arteriosclerosis, inflammation, infection and the like. Therefore, these disease sites can be identified by using the liposome of the present invention. In particular, it is known that foamed macrophages that have incorporated a large amount of denatured LDL via a scavenger receptor accumulate in the early stage of atherosclerotic lesions [Am. J. Pathol., 103, 181 ( 1981), Annu. Rev. Biochem., 52, 223 (1983)], and by integrating the liposomes of the present invention in these macrophages and performing MRI imaging, the position of the early stage of arteriosclerosis difficult by other means can be determined. It is possible to specify.

本発明のリポソームを用いた造影方法は特に限定されない。例えば、通常のMRI造影剤を用いた造影方法と同様にして水のT1/T2緩和時間の変化を測定することにより造影を行うことができる。また、適宜、適切な金属イオン同等物を用いることで、シンチグラフィー造影剤、Ｘ線造影剤、光像形成剤、超音波コントラスト剤としても使用することも可能である。 The imaging method using the liposome of the present invention is not particularly limited. For example, the contrast can be performed by measuring the change in the T1 / T2 relaxation time of water in the same manner as a conventional contrast method using an MRI contrast agent. Moreover, it can also be used as a scintigraphic contrast agent, an X-ray contrast agent, a photoimage forming agent, and an ultrasonic contrast agent by appropriately using an appropriate metal ion equivalent.

以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されることはない。なお、下記の実施例中の化合物番号は上記に示した化合物例の番号に対応している。また、実施例中の化合物の構造はNMRスペクトル、及びマススペクトルにより確認した。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention further more concretely, the scope of the present invention is not limited to the following Example. In addition, the compound number in the following Example respond | corresponds to the number of the compound example shown above. Moreover, the structure of the compound in an Example was confirmed by the NMR spectrum and the mass spectrum.

製造例１：化合物1−5の調製
（１）１−テトラデカノール４．２９ｇ、ピメリン酸１６．０ｇを濃硫酸０．１ｍＬ存在下、トルエン５０ｍＬに溶解した。６時間還流した後、溶液を飽和炭酸ナトリウム水溶液に加え、100ｍＬの酢酸エチルで３度抽出した後、有機層を水と食塩水で洗浄した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥後、除媒、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、エステル化合物を４．６１ｇ (65%)得た。
¹H-NMR (300MHz, CDCl₃) δ: 4.05 (2H, t), 2.2-2.5 (4H, ｍ), 1.5-1.8 (6H, m), 1.1-1.5(26H, m), 0.9 (3H, t). Production Example 1: Preparation of Compound 1-5 (1) 4.29 g of 1-tetradecanol and 16.0 g of pimelic acid were dissolved in 50 mL of toluene in the presence of 0.1 mL of concentrated sulfuric acid. After refluxing for 6 hours, the solution was added to a saturated aqueous sodium carbonate solution and extracted three times with 100 mL of ethyl acetate, and then the organic layer was washed with water and brine. The obtained organic layer was dried over sodium sulfate, and then purified by silica removal and silica gel column chromatography to obtain 4.61 g (65%) of an ester compound.
¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ: 4.05 (2H, t), 2.2-2.5 (4H, m), 1.5-1.8 (6H, m), 1.1-1.5 (26H, m), 0.9 (3H, t).

（２）上記エステル534mgを、非特許文献5（シンセティックコミュニケーションズ (SYNTHETIC COMMUNICATIONS), 26(13),2511 (1996)）に記載の方法で合成した1-(R)-ヒドロキシメチル−ＤＴＰＡペンタ−ｔ−ブチルエステル528 mgと、ＥＤＣ（１−エチルー３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩）288 mg、ジメチルアミノピリジン18 mg存在下、ジクロロメタン2.5ｍＬ中、室温で5時間攪拌した。反応終了後、除媒することで得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、化合物1−5のtert-ブチルエステル体を597 mg (76%)得た。
Mass(MALDI-TOFF) : m/z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 1042.9 (M+H) (2) 1- (R) -hydroxymethyl-DTPA penta-t synthesized by the method described in Non-Patent Document 5 (SYNTHETIC COMMUNICATIONS, 26 (13), 2511 (1996)) -528 mg of butyl ester, 288 mg of EDC (1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride) and 18 mg of dimethylaminopyridine were stirred in 2.5 mL of dichloromethane at room temperature for 5 hours. After completion of the reaction, the residue obtained by removing the solvent was purified by silica gel column chromatography to obtain 597 mg (76%) of a tert-butyl ester of compound 1-5.
Mass (MALDI-TOFF): m / z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 1042.9 (M + H)

（３）上記化合物1−5のtert-ブチルエステル体597mgを４規定の塩酸ジオキサン溶液3.0ｍＬ中、室温で12時間半攪拌した。除媒することで化合物1−5を410 mg (94%)得た。
Mass(MALDI-TOFF) : m/z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 762 (M-H) (3) 597 mg of the tert-butyl ester of the above compound 1-5 was stirred in 3.0 mL of 4N dioxane hydrochloride at room temperature for 12 and a half hours. Removal of the solvent yielded 410 mg (94%) of compound 1-5.
Mass (MALDI-TOFF): m / z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 762 (MH)

（４）メタノール３ｍＬに465 mgの化合物1−5を溶解した後に、塩化ガドリニウム218 mgを加え、室温にて5時間半攪拌した。溶液を１規定水酸化ナトリウム水溶液でpH６に調整した。生じた結晶を濾別し、水、メタノールで洗浄後、乾燥させることで化合物1−5のガドリニウム錯体360 mg (61%)を得た。 (4) After dissolving 465 mg of compound 1-5 in 3 mL of methanol, 218 mg of gadolinium chloride was added and stirred at room temperature for 5 and a half hours. The solution was adjusted to pH 6 with 1N aqueous sodium hydroxide solution. The resulting crystals were separated by filtration, washed with water and methanol, and dried to obtain 360 mg (61%) of a gadolinium complex of Compound 1-5.

製造例２：化合物7−3の調製
（１）３，７，１１，１５−テトラメチルヘキサデカノール3.0 ｇ、グルタル酸6.6ｇを濃硫酸0.1 mL存在下、トルエン20ｍＬに溶解した。６時間還流した後、溶液を飽和炭酸ナトリウム水溶液に加え、100ｍＬの酢酸エチルで３度抽出した後、有機層を水と食塩水で洗浄した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥後、除媒、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、エステル化合物を3.4ｇ (81%)得た。
¹H-NMR (300MHz, CDCl₃) δ: 4.0-4.2 (2H, m), 2.3-2.5 (4H, ｍ), 1.9-2.1 (2H, m), 0.8-1.8 (39H, m). Production Example 2: Preparation of Compound 7-3 (1) 3.0 g of 3,7,11,15-tetramethylhexadecanol and 6.6 g of glutaric acid were dissolved in 20 mL of toluene in the presence of 0.1 mL of concentrated sulfuric acid. After refluxing for 6 hours, the solution was added to a saturated aqueous sodium carbonate solution and extracted three times with 100 mL of ethyl acetate, and then the organic layer was washed with water and brine. The obtained organic layer was dried over sodium sulfate, and then purified by silica removal and silica gel column chromatography to obtain 3.4 g (81%) of an ester compound.
¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ: 4.0-4.2 (2H, m), 2.3-2.5 (4H, m), 1.9-2.1 (2H, m), 0.8-1.8 (39H, m).

（２）上記エステル211 mgを、非特許文献5（シンセティックコミュニケーションズ (SYNTHETIC COMMUNICATIONS), 26(13),2511 (1996)）に記載の方法で合成した1-(R)-ヒドロキシメチル−ＤＴＰＡペンタ−ｔ−ブチルエステル300 mgと、ＥＤＣ98 mg、ジメチルアミノピリジン6.1 mg存在下、ジクロロメタン2.0 ｍＬ中、室温で攪拌した。反応終了後、除媒することで得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、化合物7−3のtert-ブチルエステル体を450 mg (80%)得た。
Mass(MALDI-TOFF) : m/z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 1099.2 (M+H) (2) 1- (R) -hydroxymethyl-DTPA penta- synthesized from 211 mg of the above ester by the method described in Non-Patent Document 5 (SYNTHETIC COMMUNICATIONS, 26 (13), 2511 (1996)) The mixture was stirred at room temperature in 2.0 mL of dichloromethane in the presence of 300 mg of t-butyl ester, 98 mg of EDC and 6.1 mg of dimethylaminopyridine. After completion of the reaction, the residue obtained by removing the solvent was purified by silica gel column chromatography to obtain 450 mg (80%) of a tert-butyl ester compound 7-3.
Mass (MALDI-TOFF): m / z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 1099.2 (M + H)

（３）上記化合物7-3のtert-ブチルエステル体450 mgを４規定の塩酸ジオキサン溶液3.0ｍＬ中、室温で12時間半攪拌した。除媒することで化合物7-3を315 mg (94%)得た。
Mass(MALDI-TOFF) : m/z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 816.5 (M-2H) (3) 450 mg of the tert-butyl ester of Compound 7-3 was stirred in 3.0 mL of 4N dioxane hydrochloride at room temperature for 12 and a half hours. Removal of the solvent yielded 315 mg (94%) of compound 7-3.
Mass (MALDI-TOFF): m / z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 816.5 (M-2H)

（４）メタノール３ｍＬに240 mgの化合物7-3を溶解した後に、塩化ガドリニウム104 mgを加え、室温にて2時間攪拌した。溶液を１規定水酸化ナトリウム水溶液でpH６に調整した。生じた結晶を濾別し、水、メタノールで洗浄後、乾燥させることで化合物7-3のガドリニウム錯体199 mg (68%)を得た。 (4) After 240 mg of compound 7-3 was dissolved in 3 mL of methanol, 104 mg of gadolinium chloride was added and stirred at room temperature for 2 hours. The solution was adjusted to pH 6 with 1N aqueous sodium hydroxide solution. The resulting crystals were separated by filtration, washed with water and methanol, and dried to obtain 199 mg (68%) of a gadolinium complex of Compound 7-3.

製造例３：化合物7−5の調製
（１）３，７，１１，１５−テトラメチルヘキサデカノール3.0 ｇ、ピメリン酸8.0ｇを濃硫酸0.1 mL存在下、トルエン20ｍＬに溶解した。６時間還流した後、溶液を飽和炭酸ナトリウム水溶液に加え、100ｍＬの酢酸エチルで３度抽出した後、有機層を水と食塩水で洗浄した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥後、除媒、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、エステル化合物を2.9ｇ (66%)得た。
¹H-NMR (300MHz, CDCl₃) δ: 4.0-4.2 (2H, m), 3.6-3.8 (2H, m), 2.3-2.4 (4H, ｍ), 1.9-2.1 (2H, m), 0.8-1.8 (44H, m). Production Example 3: Preparation of Compound 7-5 (1) 3.0 g of 3,7,11,15-tetramethylhexadecanol and 8.0 g of pimelic acid were dissolved in 20 mL of toluene in the presence of 0.1 mL of concentrated sulfuric acid. After refluxing for 6 hours, the solution was added to a saturated aqueous sodium carbonate solution and extracted three times with 100 mL of ethyl acetate, and then the organic layer was washed with water and brine. The obtained organic layer was dried over sodium sulfate, and then purified with silica removal and silica gel column chromatography to obtain 2.9 g (66%) of an ester compound.
¹ H-NMR (300MHz, CDCl ₃ ) δ: 4.0-4.2 (2H, m), 3.6-3.8 (2H, m), 2.3-2.4 (4H, m), 1.9-2.1 (2H, m), 0.8- 1.8 (44H, m).

（２）上記エステル225 mgを、非特許文献5（シンセティックコミュニケーションズ (SYNTHETIC COMMUNICATIONS), 26(13),2511 (1996)）に記載の方法で合成した1-(R)-ヒドロキシメチル−ＤＴＰＡペンタ−ｔ−ブチルエステル300 mgと、ＥＤＣ98 mg、ジメチルアミノピリジン6.1 mg存在下、ジクロロメタン2.0 ｍＬ中、室温で攪拌した。反応終了後、除媒することで得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、化合物7−5のtert-ブチルエステル体を175 mg (36%)得た。
Mass(MALDI-TOFF) : m/z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 1127.3 (M+H) (2) 1- (R) -hydroxymethyl-DTPA penta- synthesized by the method described in Non-Patent Document 5 (SYNTHETIC COMMUNICATIONS, 26 (13), 2511 (1996)) The mixture was stirred at room temperature in 2.0 mL of dichloromethane in the presence of 300 mg of t-butyl ester, 98 mg of EDC and 6.1 mg of dimethylaminopyridine. After completion of the reaction, the residue obtained by removing the solvent was purified by silica gel column chromatography to obtain 175 mg (36%) of a tert-butyl ester of compound 7-5.
Mass (MALDI-TOFF): m / z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 1127.3 (M + H)

（３）上記化合物7-5のtert-ブチルエステル体175 mgを４規定の塩酸ジオキサン溶液3.0ｍＬ中、室温で4時間半攪拌した。除媒することで化合物7-5を130 mg (99%)得た。
Mass(MALDI-TOFF) : m/z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 844.6(M-2H) (3) 175 mg of the tert-butyl ester of the above compound 7-5 was stirred in 4 mL of 4N dioxane hydrochloride solution at room temperature for 4 and a half hours. Removal of the solvent yielded 130 mg (99%) of compound 7-5.
Mass (MALDI-TOFF): m / z (α-cyano-4-hydroxycinnamic acid) 844.6 (M-2H)

（４）メタノール1.5ｍＬに125mgの化合物7-5を溶解した後に、塩化ガドリニウム52 mgを加え、室温にて5時間攪拌した。溶液を１規定水酸化ナトリウム水溶液でpH６に調整した。生じた結晶を濾別し、水、メタノールで洗浄後、乾燥させることで化合物7-5のガドリニウム錯体106 mg (69%)を得た。 (4) After dissolving 125 mg of compound 7-5 in 1.5 mL of methanol, 52 mg of gadolinium chloride was added and stirred at room temperature for 5 hours. The solution was adjusted to pH 6 with 1N aqueous sodium hydroxide solution. The resulting crystals were separated by filtration, washed with water and methanol, and dried to obtain 106 mg (69%) of a gadolinium complex of Compound 7-5.

製造例４：化合物5−2の調製
化合物５−２は下記の方法で得ることができる。
テトラエチレングリコールの片方の水酸基をベンジル基で保護した後に、Jones試薬による酸化を行い、カルボン酸を得る。該カルボン酸を１−テトラデカノールと濃硫酸の存在下、トルエン中で還流することによりエステル体を得る。該エステル体の水酸基を保護しているベンジル基を水酸化パラジウム存在下、シクロヘキセンと加熱して脱保護する。得られたアルコールをJones試薬による酸化によりカルボン酸へと転換する。該カルボン酸を非特許文献5（シンセティックコミュニケーションズ (SYNTHETIC COMMUNICATIONS), 26(13),2511 (1996)）に記載の方法で合成した1-(R)-ヒドロキシメチル−ＤＴＰＡペンタ−ｔ−ブチルエステルと共にＥＤＣ及びジメチルアミノピリジンの存在下、ジクロロメタン中で攪拌して化合物5−2のtert-ブチルエステル体を得る。得られたtert-ブチルエステル体を塩酸ジオキサン中で攪拌してtert-ブチル基を脱保護し、化合物5−2を得る。得られた5−2を塩化ガドリニウム存在下、メタノール中で攪拌し、水酸化ナトリウム水溶液によって中性化して、化合物5−2のガドリニウム錯体を得る。 Production Example 4: Preparation of Compound 5-2 Compound 5-2 can be obtained by the following method.
After protecting one hydroxyl group of tetraethylene glycol with a benzyl group, oxidation with Jones reagent is performed to obtain a carboxylic acid. The ester is obtained by refluxing the carboxylic acid in toluene in the presence of 1-tetradecanol and concentrated sulfuric acid. The benzyl group protecting the hydroxyl group of the ester is deprotected by heating with cyclohexene in the presence of palladium hydroxide. The resulting alcohol is converted to a carboxylic acid by oxidation with Jones reagent. Together with 1- (R) -hydroxymethyl-DTPA penta-t-butyl ester synthesized by the method described in Non-Patent Document 5 (SYNTHETIC COMMUNICATIONS, 26 (13), 2511 (1996)) Stir in dichloromethane in the presence of EDC and dimethylaminopyridine to obtain the tert-butyl ester of compound 5-2. The resulting tert-butyl ester is stirred in dioxane hydrochloride to deprotect the tert-butyl group to give compound 5-2. The obtained 5-2 is stirred in methanol in the presence of gadolinium chloride and neutralized with an aqueous sodium hydroxide solution to obtain a gadolinium complex of compound 5-2.

試験例１：リポソームの作成方法
J. Med. Chem., 25(12), 1500 (1982) に記載の方法に従い、下記に示した割合のジ・パルミトイルＰＣ（フナコシ社製、No.1201-41-0225）、ジ・パルミトイルＰＳ（フナコシ社製、No.1201-42-0237）を、本発明の化合物とともにナス型フラスコ内でクロロホルムに溶解して均一溶液とした後、溶媒を減圧で留去してフラスコ底面に薄膜を形成した。この薄膜を真空で乾燥後、0.9%生理食塩水（光製薬社製、No512）を適当量加え、超音波照射（Branson社製、No.3542プローブ型発振器、0.1mW）を氷冷下５分実施した後に、リポソーム調製器（セントラル科学社製）を用いて粒子径85から120 nmのリポソーム分散液を調製した。 Test Example 1: Method for preparing liposome
According to the method described in J. Med. Chem., 25 (12), 1500 (1982), the following proportions of di-palmitoyl PC (Funakoshi, No. 1201-41-0225), di-palmitoyl PS (Funakoshi, No.1201-42-0237) was dissolved in chloroform together with the compound of the present invention in chloroform in an eggplant type flask to form a homogeneous solution, and then the solvent was distilled off under reduced pressure to form a thin film on the bottom of the flask did. This thin film is dried in vacuum, 0.9% physiological saline (manufactured by Hikari Pharmaceutical Co., Ltd., No512) is added in an appropriate amount, and ultrasonic irradiation (Branson Co., No.3542 probe type oscillator, 0.1 mW) is applied for 5 minutes under ice cooling. After the implementation, a liposome dispersion with a particle size of 85 to 120 nm was prepared using a liposome preparation device (manufactured by Central Science Co., Ltd.).

試験例２：リポソーム形成試験
上記方法に従い、ジ・パルミトイルＰＣ、ジ・パルミトイルＰＳ、及び化合物1-5のGd錯体、7-3のGd錯体、7-5のGd錯体、既知の比較化合物１の混合比率を変えて、それぞれリポソーム形成を行った結果、化合物1-5のGd錯体、7-3のGd錯体、7-5のGd錯体はジ・パルミトイルＰＳの含量が高い時でも安定してリポソームの形成が確認され、比較化合物１に比べてリポソーム製剤化するための優れた特性を有していることが明らかになった。
ジ・パルミトイルＰＣジ・パルミトイルＰＳ化合物1-5のGd錯体
５０：５０：５
ジ・パルミトイルＰＣジ・パルミトイルＰＳ化合物7-3のGd錯体
５０：５０：１
ジ・パルミトイルＰＣジ・パルミトイルＰＳ化合物7-5のGd錯体
５０：５０：１
ジ・パルミトイルＰＣジ・パルミトイルＰＳ比較化合物
５０：５０：０

Test Example 2: Liposome Formation Test According to the above method, di-palmitoyl PC, di-palmitoyl PS, Gd complex of compound 1-5, Gd complex of 7-3, Gd complex of 7-5, known comparative compound 1 As a result of the formation of liposomes with different mixing ratios, the compound 1-5 Gd complex, 7-3 Gd complex, and 7-5 Gd complex are stable liposomes even when the content of di-palmitoyl PS is high. As a result, it was clarified that it has superior properties for preparing a liposome preparation as compared with Comparative Compound 1.
Di-palmitoyl PC Di-palmitoyl PS Gd complex of compound 1-5
50: 50: 5
Di-palmitoyl PC Di-palmitoyl PS Gd complex of compound 7-3
50: 50: 1
Di-palmitoyl PC Di-palmitoyl PS Gd complex of compound 7-5
50: 50: 1
Di-palmitoyl PC Di-palmitoyl PS Comparative compound
50: 50: 0

試験例４：マウス３日間連続投与毒性試験
化合物1-5のGd錯体、化合物7-3のGd錯体、及び化合物7-5のGd錯体につきそれぞれ下記の手順で毒性試験を行った。
ＩＣＲマウス雄６週齢（日本チャールスリバー）を購入し、１週間の検疫期間の後、クリーン動物舎内（空調：へパフィルタークラス1000、室温：２０℃〜２４℃ 湿度：３５％〜６０％）で１週間馴化した。その後、ＭＴＤ（最大耐用量）値を求めるため、尾静脈より被験化合物のマウス血清懸濁液を投与した。被験化合物のマウス血清懸濁液は、生理食塩水（光製薬社製）又はグルコース溶液（大塚製薬社製）のいずれかを溶媒として投与した。次に求められたＭＴＤ値をもとに、その1/2量の各錯体を３日間、尾静脈より３日間連続で投与した（ｎ＝３匹とする）。症状観察は各投与後６時間までとし、神経毒性を観察後、剖検を行ない、主要臓器について所見を取った。結果を下記に示す。本発明の化合物は低毒性で、神経毒性も示さないことが明らかであり、MRI造影剤のためのリポソームの構成脂質として優れた性質を有することが明らかである。
化合物：MTD(mg/kg)；神経毒性（「−」は神経毒性陰性、「＋」は神経毒性陽性を示す）
化合物1-5のGd錯体（100mg/kg）：−
化合物7-3のGd錯体（100mg/kg）：−
化合物7-5のGd錯体（100mg/kg）：− Test Example 4: Mouse 3 day continuous administration toxicity test Compound 1-5 Gd complex, compound 7-3 Gd complex and compound 7-5 Gd complex were each subjected to toxicity test according to the following procedure.
ICR mouse male 6-week-old (Charles River Japan) was purchased, and after a quarantine period of 1 week, in a clean animal house (air conditioning: Hepafilter class 1000, room temperature: 20 ° C to 24 ° C, humidity: 35% to 60% ) For one week. Thereafter, a mouse serum suspension of the test compound was administered from the tail vein in order to determine the MTD (maximum tolerated dose) value. The mouse serum suspension of the test compound was administered using either physiological saline (manufactured by Hikari Pharmaceutical Co., Ltd.) or glucose solution (manufactured by Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.) as a solvent. Next, based on the obtained MTD value, each half amount of each complex was administered for 3 days from the tail vein for 3 consecutive days (n = 3 mice). Symptoms were observed up to 6 hours after each administration. After observing neurotoxicity, autopsy was performed and findings were taken on major organs. The results are shown below. It is clear that the compound of the present invention has low toxicity and does not show neurotoxicity, and has excellent properties as a constituent lipid of liposomes for MRI contrast agents.
Compound: MTD (mg / kg); neurotoxicity (“-” indicates negative neurotoxicity, “+” indicates positive neurotoxicity)
Gd complex of compound 1-5 (100mg / kg):-
Gd complex of compound 7-3 (100 mg / kg): −
Gd complex of compound 7-5 (100 mg / kg):-

試験例５：定法に従い、PC（ジパルミトイルフォスファチジルコリンフナコシ社製No,850355C）、PS（ジパルミトイルフォスファチジルセリンフナコシ社製No,840037C）、ガドリニウム錯体のクロロホルム溶液より、PC／PS／Gd錯体からなるサイズ：85〜120nmのリポソーム製剤が作成できる。尚、製剤には注射用水（大塚製薬社製）を使用する。
大動脈弓部に病巣が形成されている12ヵ月齢のWHHLウサギ（北山ラベス社製）を入手し、１週間馴化飼育する。該WHHLウサギの耳下静脈より上記リポソーム製剤をGd錯体換算でウサギの体重１ｋｇあたり80mg投与し、１５分後、弓部の病巣にターゲットを絞りガドリニウムMRIの造影を行うことで病巣のみを選択的に造影できる。 Test Example 5: According to a conventional method, from a chloroform solution of PC (Dipalmitoylphosphatidylcholine Funakoshi No.850355C), PS (Dipalmitoylphosphatidylserine Funakoshi No.840037C), a gadolinium complex in a PC / PS / A liposome preparation having a size of 85 to 120 nm comprising a Gd complex can be prepared. In addition, water for injection (Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.) is used for the preparation.
A 12-month-old WHHL rabbit (Kitayama Labes Co., Ltd.) with a lesion formed in the aortic arch is obtained and acclimated for one week. The above liposome preparation is administered from the WHHL rabbit's parotid vein in an amount of 80 mg / kg of rabbit body weight in terms of Gd complex, and 15 minutes later, the focus is focused on the focus of the arch and gadolinium MRI is performed to select only the focus. Can be contrasted.

Claims

The following general formula (I):

[Wherein, R represents an alkyl group having 8 to 30 carbon atoms or an alkenyl group having 8 to 30 carbon atoms; L represents a divalent linking group (where L represents a carbon atom, an oxygen atom, a nitrogen atom) The total number of carbon atoms, oxygen atoms, nitrogen atoms, and sulfur atoms that are composed of atoms selected from the group consisting of sulfur atoms and hydrogen atoms and that constitute L is 1 to 30, of which oxygen atoms Is 0-15, the number of nitrogen atoms is 0-6, and the number of sulfur atoms is 0-3; Ch is the following general formula (II)
Or a compound represented by (III)] or a salt thereof.

The compound or a salt thereof according to claim 1, wherein R is a linear or branched alkyl group, or a linear or branched alkenyl group.

L represents —X ¹ —CO— or —CO—X ¹ — in the main chain: [X ¹ represents —O— or —NZ ¹ —; Z ¹ represents a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms. The compound or a salt thereof according to any one of claims 1 and 2, which is a linking group having at least one partial structure represented by

L is —W ¹ —X ² —CO—W ² — or —W ¹ —CO—X ² —W ² — [W ¹ is a single bond, an alkylene group having 1 to 5 carbon atoms, or 1 to 5 carbon atoms. X ² represents —O— or —NZ ² — (Z ² represents a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms); W ² has 1 to 20 carbon atoms The compound or salt thereof according to any one of claims 1 to 3, which is a linking group represented by an alkylene group or an alkenylene group having 1 to 20 carbon atoms.

L is-(OCH ₂ CH ₂ ) _n -,-(CH ₂ CH ₂ O) _n -,-(OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m- , or-(CH ₂ CH ₂ CH ₂ O ) _m - (n represents an integer of 1 to 7; m is any of claims 1 to 4 is a linking group having a partial structure represented by any one of structures of an integer of 1 to 5) 1 Or a salt thereof.

L is —W ³ —X ³ —CO—W ⁴ — or —W ³ —CO—X ³ —W ⁵ — [W ³ is a single bond, an alkylene group having 1 to 5 carbon atoms or 1 to 1 carbon atoms. 5 represents an alkenylene group; X ³ represents —O— or —NZ ³ —; Z ³ represents a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms; W ⁴ represents — (OCH ₂ CH ₂ ). _n OCH _2- , --CH _2- (OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH ₂ -,-(OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH _2- , --CH _2- (OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH ₂ — or —CH ₂ CH ₂ — (OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH ₂ — (n represents an integer of 1 to 7; m represents an integer of 1 to 5) Shows one structure; W ⁵ is — (CH ₂ ) ₂ — (OCH ₂ CH ₂ ) _n OCH ₂ — or — (CH ₂ ) ₃ — (OCH ₂ CH ₂ CH ₂ ) _m OCH ₂ CH ₂ — (n Represents an integer of 1 to 7; m represents a structure of 1 to 5).] The compound according to any one of claims 1 to 3, or a salt thereof.

The chelate compound which consists of the compound of any one of Claims 1-6, and a metal ion, or its salt.

The chelate compound or a salt thereof according to claim 7, wherein the metal ion is a metal ion of an element selected from atomic numbers 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49, 57-83.

The chelate compound or a salt thereof according to claim 7, wherein the metal ion is a metal ion of an element selected from paramagnetic elements corresponding to atomic numbers 21-29, 42, 44, 57-71.

A liposome comprising the compound according to any one of claims 1 to 9 or a salt thereof as a membrane component.

The liposome according to claim 10, comprising phosphatidylcholine and phosphatidylserine as membrane components.

The contrast agent containing the liposome of Claim 10 or 11.

The contrast agent according to claim 12 for use in imaging of vascular diseases.

The contrast agent according to claim 12, which is used for imaging of vascular smooth muscle cells abnormally proliferated under the influence of foamed macrophages.

The contrast agent according to claim 12, for imaging a tissue or a diseased site where macrophages are localized.

The contrast agent according to claim 15, wherein the tissue in which macrophages are localized is selected from the group consisting of liver, spleen, alveoli, lymph nodes, lymphatic vessels, and kidney epithelium.

The contrast agent according to claim 15, wherein the disease site where the macrophages are localized is selected from the group consisting of a tumor, an inflammation site, and an infection site.

The contrast agent according to any one of claims 12 to 17, which is an MRI contrast agent.

The contrast agent according to any one of claims 12 to 17, which is a scintigraphic contrast agent.