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JP2006111565A - Glutathione S transferase activity inducer - Google Patents

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JP2006111565A
JP2006111565A JP2004300048A JP2004300048A JP2006111565A JP 2006111565 A JP2006111565 A JP 2006111565A JP 2004300048 A JP2004300048 A JP 2004300048A JP 2004300048 A JP2004300048 A JP 2004300048A JP 2006111565 A JP2006111565 A JP 2006111565A
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JP
Japan
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mint
glutathione
lavender
rosemary
transferase activity
Prior art date
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Pending
Application number
JP2004300048A
Other languages
Japanese (ja)
Inventor
Satoshi Mochizuki
聡 望月
Nobuhisa Yamamoto
展久 山本
Wataru Takano
済 高野
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FIND NEWS KK
Oita University
Oita Prefectural Government
Original Assignee
FIND NEWS KK
Oita University
Oita Prefectural Government
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Publication date
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Abstract

【課題】植物あるいはその抽出物を有効成分とするグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤を提供する。
【解決手段】シソ科植物及びフトモモ科ユーカリ属植物から選択される1種あるいは2種以上の植物あるいはその抽出物を有効成分とするグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤とする。
【選択図】 なし
A glutathione S transferase activity inducer comprising a plant or an extract thereof as an active ingredient is provided.
A glutathione S transferase activity inducer comprising one or more plants selected from Lamiaceae plants and Euphorbiaceae plants or extracts thereof as active ingredients.
[Selection figure] None

Description

本発明は、植物あるいはその抽出物を有効成分とするグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤に関し、特に、ハーブの抽出物を有効成分とするグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤に関する。   The present invention relates to a glutathione S transferase activity inducer containing a plant or an extract thereof as an active ingredient, and particularly to a glutathione S transferase activity inducer containing an herbal extract as an active ingredient.

近年、薬物や食品添加物など多様な化合物が環境中に増加し蓄積し、ヒトを始めとする哺乳動物はこれらに曝されるようになってきている。これらの化合物が生体異物として認識されると、主として肝臓にて代謝されるとされている。肝臓、胃、腸、肺などの各種器官で行われる解毒代謝は、第一相と第二相とがあり、第一相は、モノオキシゲナーゼまたはチトクロームP450と呼ばれる一群の酵素によって触媒される水酸化反応を主体として生体異物の水溶性を高め、第二相は、第一相の代謝物やその他の生体異物をグルクロン酸、硫酸、酢酸、グルタチオン等と抱合するかあるいはメチル化して高い水溶性を持った代謝産物へと変換して体外への排出を容易化する。   In recent years, various compounds such as drugs and food additives have increased and accumulated in the environment, and mammals including humans have been exposed to these. When these compounds are recognized as xenobiotics, they are mainly metabolized in the liver. The detoxification metabolism carried out in various organs such as the liver, stomach, intestine and lung has a first phase and a second phase, and the first phase is hydroxylation catalyzed by a group of enzymes called monooxygenase or cytochrome P450. The second phase improves the water solubility of the xenobiotic mainly by the reaction, and the second phase has high water solubility by conjugating or methylating metabolites of the first phase and other xenobiotics with glucuronic acid, sulfuric acid, acetic acid, glutathione, etc. Easily excretion outside the body by converting it into a metabolite.

ここに、第二相解毒代謝系における酵素としては、還元型グルタチオンと多様な潜在毒性を持った親電子性生体異物との抱合反応を触媒するグルタチオンSトランスフェラーゼが知られている。グルタチオンSトランスフェラーゼは、例えば、ベンツピレンやアフラトキシンB1などが第一相解毒代謝によって代謝されて発ガン性を発現するに至った代謝物を無毒化することがわかっている。したがって、グルタチオンSトランスフェラーゼは生体異物からの重要な防御機構ひいては発ガンに対する防御機構を担っているといえ、生体内においてグルタチオンSトランスフェラーゼを増量しあるいはその活性を増強することにより、生体防御機能が向上され生体異物によるDNA損傷等も効果的に回避されることが期待される。   Here, as an enzyme in the second-phase detoxification metabolic system, glutathione S-transferase that catalyzes a conjugation reaction between reduced glutathione and electrophilic xenobiotics having various potential toxicities is known. Glutathione S transferase is known to detoxify metabolites in which, for example, benzpyrene, aflatoxin B1, and the like are metabolized by first-phase detoxification metabolism to develop carcinogenicity. Therefore, it can be said that glutathione S transferase has an important defense mechanism against xenobiotics and thus a defense mechanism against carcinogenesis. By increasing the amount of glutathione S transferase or enhancing its activity in vivo, the biological defense function is improved. It is expected that DNA damage caused by xenobiotics can be effectively avoided.

グルタチオンSトランスフェラーゼを誘導する物質としては、イソチオシアネート類が知られている(非特許文献1,2)。イソチオシアネート類は、アブラナ科植物に含まれることが知られているが、その他の植物への分布は探索されてはいない。
ニュートリション アンド キャンサー(Nutr Cancer)(米国),2002, 44, 1, p.52-59 Proc. Natl. Acad. Sci.(米国), 1997, 94, p.10367-10372)
Isothiocyanates are known as substances that induce glutathione S transferase (Non-patent Documents 1 and 2). Isothiocyanates are known to be contained in cruciferous plants, but their distribution to other plants has not been explored.
Nutrition and Cancer (USA), 2002, 44, 1, p.52-59 Proc. Natl. Acad. Sci. (USA), 1997, 94, p.10367-10372)

そこで、本発明は、植物あるいはその抽出物を有効成分とするグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤を提供することを目的とする。また、本発明は、アブラナ科植物以外の植物あるいはその抽出物由来のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤を含有する食品組成物及び医薬組成物を提供することを他の一つの目的とする。   Then, an object of this invention is to provide the glutathione S transferase activity inducer which uses a plant or its extract as an active ingredient. Another object of the present invention is to provide a food composition and a pharmaceutical composition containing a glutathione S transferase activity inducer derived from plants other than cruciferous plants or extracts thereof.

本発明者らは、ハーブ類に着目し、広い範囲にわたってハーブ類のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導作用についてスクリーニングしたところ、シソ科のハーブ及びフトモモ科ユーカリ属ハーブに高いグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導作用を見出し、本発明を完成した。すなわち、本発明によれば以下の手段が提供される。   The present inventors focused on herbs and screened the glutathione S transferase activity-inducing action of herbs over a wide range. As a result, they found a high glutathione S-transferase activity-inducing action in Labiatae herbs and Myrtaceae eucalyptus herbs. The present invention has been completed. That is, according to the present invention, the following means are provided.

本発明の一つの形態によれば、シソ科植物及びフトモモ科ユーカリ属植物から選択される1種あるいは2種以上の植物あるいはその抽出物を有効成分とする、グルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤が提供される。この活性誘導剤においては、前記シソ科植物はローズマリードリーミィブルー(Rosemary Dreamy blue)、ローズマリーウッド(Rosemary Wood)、ローズマリートスカナブルー(Rosemary Tuscanablue)、イエローフラワーラベンダー(Yellow Flower Lavender)、ヒッドコートラベンダー(Hidcote Lavender)、フレンチストエカスラベンダー(French Stoechas Lavender)、スパイクラベンダー(Spike Lavender)、イングリッシュラベンダー(English Lavender)、アップルミント(Apple Mint)、ウォーターミント(Water Mint)、オーデコロンミント(Eau de cologne Mint)、オレンジミント(Orange Mint)、クールミント(Cool Mint)、スペアミント(Spear Mint)、パイナップルミント(Pineapple Mint)、ブッシュミント(Bush Mint)、ペパーミント(Pepper Mint)、スウィートマジョラム(Sweet Marjoram)、パイナップルセージ(Pineapple Sage)、チェリーセージ(Cherry Sage)、クラリーセージ(Clary Sage)、オレガノ(Oregano)、レモンバジル(Lemon Basil)及びベルガモット(Bergamot)から選択されることが好ましい態様である。   According to one aspect of the present invention, there is provided a glutathione S transferase activity inducer comprising, as an active ingredient, one or more kinds of plants selected from Lamiaceae plants and Euphorbiaceae plants or extracts thereof. The In this activity inducer, the Lamiaceae plants are Rosemary Dreamy blue, Rosemary Wood, Rosemary Tuscanablue, Yellow Flower Lavender, Hidden Coat vendor (Hidcote Lavender), French Stoechas Lavender, Spike Lavender, English Lavender, Apple Mint, Water Mint, Eau de cologne Mint, Orange Mint, Cool Mint, Spear Mint, Pineapple Mint, Bush Mint, Pepper Mint, Sweet Marjoram, pie Ppuruseji (Pineapple Sage), cherry sage (Cherry Sage), clary sage (Clary Sage), oregano (Oregano), it is a preferred embodiment that is selected from lemon basil (Lemon Basil) and bergamot (Bergamot).

また、この活性誘導剤においては、前記シソ科植物は、ローズマリードリーミィブルー(Rosemary Dreamy blue)、ローズマリーウッド(Rosemary Wood)、ローズマリートスカナブルー(Rosemary Tuscanablue)、イエローフラワーラベンダー(Yellow Flower Lavender)、フレンチストエカスラベンダー(French Stoechas Lavender)、ヒッドコートラベンダー(Hidcote Lavender)、イングリッシュラベンダー(English Lavender)、ウォーターミント(Water Mint)、オーデコロンミント(Eau de cologne Mint)、クールミント(Cool Mint)、ペパーミント(Pepper Mint)、スウィートマジョラム(Sweet Marjoram)、パイナップルセージ(Pineapple Sage)及びチェリーセージ(Cherry Sage)から選択されることがより好ましい。さらに、前記シソ科植物は、ローズマリードリーミィブルー(Rosemary Dreamy blue)、ローズマリーウッド(Rosemary Wood)、ローズマリートスカナブルー(Rosemary Tuscanablue)及びスウィートマジョラム(Sweet Marjoram)から選択されることがさらに好ましい。   In this activity inducer, the Lamiaceae plants are Rosemary Dreamy blue, Rosemary Wood, Rosemary Tuscanablue, Yellow Flower Lavender. , French Stoechas Lavender, Hidcote Lavender, English Lavender, Water Mint, Eau de cologne Mint, Cool Mint, Peppermint More preferably, it is selected from (Pepper Mint), Sweet Marjoram, Pineapple Sage and Cherry Sage. Further, the Labiatae plant is more preferably selected from Rosemary Dreamy blue, Rosemary Wood, Rosemary Tuscanablue, and Sweet Marjoram.

また、前記フトモモ科ユーカリ属植物は、アップルユーカリ(Apple Eucalyptus)及びレモンユーカリ(Lemon Eucalyptus)から選択されることが好ましい態様である。   In a preferred embodiment, the Eucalyptus eucalyptus plant is selected from Apple Eucalyptus and Lemon Eucalyptus.

また、これらのいずれかに記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤においては、前記抽出物は、低級アルコール抽出物であることが好ましい態様であり、さらに、エタノール抽出物であることが好ましい態様である。また、前記抽出物は、熱水、水、あるいは水・有機溶媒混液抽出物であることも好ましい態様である。さらに、前記植物として、収穫後乾燥前の植物を用いることが好ましい態様である。   Moreover, in the glutathione S transferase activity inducer described in any of these, the extract is preferably a lower alcohol extract, and more preferably an ethanol extract. Moreover, it is also a preferable aspect that the extract is hot water, water, or a water / organic solvent mixed liquid extract. Furthermore, it is a preferable aspect to use a plant after harvest and before drying as the plant.

本発明の他の一つの形態によれば、食品組成物であって、上記いずれかのグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤を含有する、食品組成物が提供される。また、本発明のさらに他の一つの形態によれば、上記いずれかのグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤を有効量含有する、グルタチオンSトランスフェラーゼ活性が有効な疾患の治療用あるいは予防用の医薬組成物も提供される。この医薬組成物は、抗がん剤であることが好ましい態様である。   According to another aspect of the present invention, there is provided a food composition comprising any one of the above glutathione S transferase activity inducers. According to still another aspect of the present invention, there is provided a pharmaceutical composition for treating or preventing a disease having an effective glutathione S transferase activity, comprising an effective amount of any one of the above glutathione S transferase activity inducers. Provided. The pharmaceutical composition is preferably an anticancer agent.

本発明のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤(以下、単にGST活性誘導剤という。)は、シソ科植物及びフトモモ科ユーカリ属植物から選択される1種あるいは2種以上の植物あるいはその抽出物を有効成分とすることを特徴としている。なお、本発明において、GST活性誘導剤とは、GSTを誘導するかあるいはその活性を増強する有効成分を含有するものとする。   The glutathione S transferase activity inducer of the present invention (hereinafter simply referred to as GST activity inducer) is an active ingredient comprising one or more plants selected from Lamiaceae and Euphoridae plants or extracts thereof. It is characterized by that. In the present invention, the GST activity inducer includes an active ingredient that induces GST or enhances its activity.

本発明のGST活性誘導剤は、上記特定の植物の抽出物から選択される有効成分を含有している。これらの特定の植物にグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導作用(以下、単にGST活性誘導作用という。)があることあるいは優れたGST活性誘導作用があるという報告はこれまでになされていない。本発明のGST活性誘導剤は、食用材料ともなるこれらの特定の植物の抽出物を有効成分とするため、持続的かつ予防的な食事からの摂取あるいは薬剤としての投与に適したGST活性誘導剤が提供されることになる。   The GST activity inducer of the present invention contains an active ingredient selected from the extract of the specific plant. There has been no report that these specific plants have a glutathione S transferase activity-inducing action (hereinafter simply referred to as GST activity-inducing action) or an excellent GST activity-inducing action. Since the GST activity inducer of the present invention contains an extract of these specific plants, which also serve as an edible material, as an active ingredient, the GST activity inducer suitable for continuous and preventive intake from a meal or administration as a drug Will be provided.

以下、本発明の一形態であるGST活性誘導剤について説明するとともに、該GST活性誘導剤を含有する組成物ならびにその用途について説明する。   Hereinafter, a GST activity inducer which is one embodiment of the present invention will be described, and a composition containing the GST activity inducer and its use will be described.

(植物)
本GST活性誘導剤に用いられる植物(ハーブ)は、シソ科植物及びフトモモ科ユーカリ属から選択される。これらの植物は、それぞれ単独で用いることもできるし、2種以上を組み合わせて用いてもよい。
(plant)
The plant (herb) used in the present GST activity inducer is selected from the family Lamiaceae and Euphoridae. These plants can be used alone or in combination of two or more.

(シソ科植物)
(シソ科メボウキ属:バジル類)
バジル類としては、スウィートバジル(学名Ocimum basilicum)、ダークオパールバジル(学名Ocimum basilicum ‘Dark Opal’)、レタスバジル(学名Ocimum basilicum ‘Crispum’)、シナモンバジル(学名Ocimum basilicum ‘Cinnamon’)、リコリスバジル(学名Ocimum basilicum ‘Licorice’)、パープルラッセルバジル(学名Ocimum basilicum ‘Purple Ruffles’)、ブッシュバジル(学名Ocimum basilicum ‘Minimum’)、レモンバジル(学名Ocimum basilicum ‘Lemon’)が挙げられる、これらのバジルはいずれもGST活性誘導作用を備えているが、レモンバジルは、これらのバジルの中でも良好なGST活性誘導作用を有している。
(Lamiaceae)
(Lamiaceae: Basil)
Basil species include sweet basil (scientific name: Ocimum basilicum), dark opal basil (scientific name: Ocimum basilicum 'Dark Opal'), lettuce basil (scientific name: Ocimum basilicum 'Crispum'), cinnamon basil (scientific name: Ocimum basilicum 'Cinnamon') (Scientific name Ocimum basilicum 'Licorice'), Purple Russell Basil (scientific name Ocimum basilicum 'Purple Ruffles'), Bush Basil (scientific name Ocimum basilicum 'Minimum'), Lemon Basil (scientific name Ocimum basilicum 'Lemon'), these basil Have a GST activity-inducing action, but lemon basil has a good GST activity-inducing action among these basil.

(シソ科ラバンジュラ属:ラベンダー類)
ラベンダー類としては、イエローフラワーラベンダー(学名Lavandula angustifolia ‘Yellow Flower’)、サマーラベンダー(学名Lavandula angustifolia ‘Summer’)、ヒッドコートラベンダー(学名Lavandula angustifolia ‘Hidcote’)、フレンチラベンダー(学名Lavandula stoechas f.leucantha)、フレンチストエカスラベンダー(学名Lavandula stoechas)、スパイクラベンダー(学名Lavandula latifolia)、イングリッシュラベンダー(学名Lavandula angustifolia)が挙げられる。これらのラベンダーはいずれもGST活性誘導作用を備えている、なかでも、イエローフラワーラベンダー、ヒッドコートラベンダー、フレンチストエカスラベンダー、スパイクラベンダー、イングリッシュラベンダーが良好なGST活性誘導作用を備えており、イエローフラワーラベンダー、ヒッドコートラベンダー、フレンチストエカスラベンダー、イングリッシュラベンダーがより高いGST活性誘導作用を備えている。
(Lamiaceae Lavandula: Lavender)
Lavenders include yellow flower lavender (scientific name Lavandula angustifolia 'Yellow Flower'), summer lavender (scientific name Lavandula angustifolia 'Summer'), hid coat lavender (scientific name Lavandula angustifolia 'Hidcote'), French lavender (scientific name Lavandula stoechas f. leucantha), Frenchst Ecus lavender (scientific name Lavandula stoechas), spike lavender (scientific name Lavandula latifolia), English lavender (scientific name Lavandula angustifolia). All of these lavenders have GST activity-inducing action. Among them, yellow flower lavender, hid coat lavender, Frenchstoke lavender, spike lavender, and English lavender have good GST activity-inducing action. Lavender, Hidcoat Lavender, Frenchst Ecus Lavender, and English Lavender have a higher GST activity-inducing action.

(シソ科ハッカ属:ミント類)
ミント類としては、アップルミント(学名Mentha suaveolens)、オーデコロンミント(学名Mentha × piperita ‘Citrata’)、ウォーターミント(学名Mentha aquatica)、オレンジミント(学名Mentha × piperita var citorata ‘Orange’)、クールミント(学名Mentha arvensis var agrestis)、スペアミント(学名Menta spicata)、パイナップルミント(学名Mentha suaveolens ‘Variegata’)、ブッシュミント(学名Hyptis mutabilis)、ペパーミント(学名Mentha × piperita)が挙げられる。これらの各種ミントは、いずれも良好なGST活性誘導作用を備えているが、なかでも、ウォーターミント、オーデコロンミント、クールミント、ペパーミントは、より高いGST活性誘導作用を備えている。
(Lamiaceae genus: mint)
Mints include apple mint (scientific name Mentha suaveolens), eau de cologne mint (scientific name Mentha × piperita 'Citrata'), water mint (scientific name Mentha aquatica), orange mint (scientific name Mentha × piperita var citorata 'Orange'), cool mint ( Scientific name Mentha arvensis var agrestis), Spearmint (scientific name Menta spicata), Pineapple mint (scientific name Mentha suaveolens 'Variegata'), Bush mint (scientific name Hyptis mutabilis), Peppermint (scientific name Mentha × piperita). Each of these various mint has a good GST activity-inducing action, and among them, water mint, eau de cologne mint, cool mint, and peppermint have a higher GST activity-inducing action.

(シソ科マンネンロウ属:ローズマリー類)
ローズマリー類としては、セーラムローズマリー、パープルローズマリー、ホワイトローズマリー、マリンブルーローズマリー、ローズマリードリーミィブルー(学名Rosmarinus officinalis ‘Dreamyblue’)、ローズマリートスカナブルー(学名Rosmarinus officinalis ‘Tuscan Blue’)、ローズマリーウッド(学名Rosmarinus officinalis ‘Wood’)が挙げられる。これらの各種ローズマリーは、いずれも良好なGST活性誘導作用を備えているが、なかでも、ローズマリードリーミィブルー、ローズマリートスカナブルー、ローズマリーウッドはいずれも優れたGST活性誘導作用を備えている。
(Lamiaceae genus: Rosemary)
As rosemary, Salem rosemary, purple rosemary, white rosemary, marine blue rosemary, rose marie dreamy blue (scientific name Rosmarinus officinalis 'Dreamyblue'), rose marito scanna blue (scientific name Rosmarinus officinalis 'Tuscan Blue'), Rosemary Wood (scientific name Rosmarinus officinalis 'Wood'). Each of these various rosemary has a good GST activity-inducing action, but among them, rosemary creamy blue, rosemary scanna blue, and rosemary wood all have an excellent GST activity-inducing action. .

(その他のシソ科植物)
その他のシソ科植物としては、パイナップルセージ(学名Salvia elegans ‘Scarlet Pineapple’)、チェリーセージ(学名Salvia greggii)、アメジストセージ(学名Salvia leucantha)、クラリーセージ(学名Salvia sclarea)などのサルビア属、レモンタイム(学名Thymus × citriodorus)などのイブキジャコウソウ属、レモンバーム(学名Melissa officinalis)などのセイヨウヤマハッカ属、スウィートマジョラム(学名Origanum majorana)、オレガノ(学名Origanum vulgare)などのハナハッカ属、ラムズイヤー(学名Stachys byzantina)などのイズゴマ属、ベルガモット(学名Monarda didyma)などのヤグルマハッカ属、ヒソップ(学名Hyssopus officinalis)などのヤナギハッカ属に属する植物が挙げられる。これらはいずれもGST活性誘導作用を有しているが、なかでも、スウィートマジョラム、オレガノ、パイナップルセージ、チェリーセージ、クラリーセージ、ベルガモット、ヒソップが良好なGST活性誘導作用を有し、さらに、スウィートマジョラム、パイナップルセージ、チェリーセージがより高いGST活性誘導作用を有し、スウィートマジョラムがさらに優れたGST活性誘導作用を有している。
(Other Lamiaceae plants)
Other Labiatae plants include pineapple sage (scientific name Salvia elegans 'Scarlet Pineapple'), cherry sage (scientific name Salvia greggii), amethyst sage (scientific name Salvia leucantha), clary sage (scientific name Salvia sclarea), salvia genus, lemon thyme ( Iris genus, such as Thymus × citriodorus), Acer genus such as Lemon balm (Melissa officinalis), Sweet marjoram (Origanum majorana), Oanano (scientific name Origanum vulgare), Hanaka genus, Ramsyear (Stachys bytina) Examples include plants belonging to the genus Izugoma, genus cornflower such as Bergamot (scientific name: Monarda didyma), and the genus Genus genus such as hyssop (scientific name: Hyssopus officinalis). These all have GST activity-inducing action, among which sweet marjoram, oregano, pineapple sage, cherry sage, clary sage, bergamot and hyssop have good GST activity-inducing action, and in addition, sweet marjoram, Pineapple sage and cherry sage have a higher GST activity-inducing action, and sweet marjoram has a more excellent GST activity-inducing action.

(フトモモ科ユーカリ属:ユーカリ)
ユーカリとしては、ラディアタユーカリ、ロブラスユーカリ、ブルーマリーユーカリ、アップルユーカリ(学名Eucalyptus cinerea)及びレモンユーカリ(学名Eucalyptus citriodora)が挙げられるが、いずれも高いGST活性誘導作用を有している。なかでも、アップルユーカリおよびレモンユーカリが優れたGST活性誘導作用を有している。
(Pinaceae Eucalyptus: Eucalyptus)
Examples of eucalyptus include Radiata eucalyptus, Robus eucalyptus, bluemary eucalyptus, apple eucalyptus (scientific name Eucalyptus cinerea) and lemon eucalyptus (scientific name Eucalyptus citriodora), all of which have a high GST activity-inducing action. Among them, apple eucalyptus and lemon eucalyptus have an excellent GST activity inducing action.

(その他の植物)
なお、シソ科植物及びフトモモ科植物以外においては、セリ科のフェンネル(学名Foeniculum vulgare var.dulce)及びチャービル(学名Anthriscus cerefolium)、キク科のステビア(学名Stevia rebaudiana)、チコリ(学名Cichorium intybus)及びローマンカモミール(学名Chamaemelum nobile)、ノウゼンハレン科のナスタティウム(学名Tropaeolum majus cv.)、アオイ科のブラックマロー、ユリ科のチャイブ(学名Allium schoenoprasum)、タデ科のルバーブ(学名Rheum rhabarbarum)、ナデシコ科のコモンソープウァート(学名Saponaria officinalis)、フクロソウ科のローズゼラニウム(学名Pelargonium graveolens)、バラ科のワイルドストロベリー(学名Fragaria vesca)及びサラダバーネット(学名Sanguisorba minor)、クマシズラ科のレモンバーベナ(学名Lippia citriodora)、イネ科のレモングラス(学名Cymbopogon citratus)等が良好なGST活性誘導作用を有している。これらの他の植物から選択される1種あるいは2種以上の植物は、シソ科植物及びフトモモ科ユーカリ属植物と組み合わせて用いることができる他、当該他の植物から選択される1種あるいは2種以上を組み合わせてGST活性誘導剤として用いることも可能である。
(Other plants)
In addition, other than Lamiaceae and Myrtaceae plants, fennel (scientific name Foeniculum vulgare var.dulce) and chervil (scientific name Anthriscus cerefolium), stevia (scientific name Stevia rebaudiana), chicory (scientific name Cicholium intybus) and Roman chamomile (scientific name Chamaemelum nobile), Nosenthalenaceae Nastatium (scientific name Tropaeolum majus cv.), Aoi family black mallow, Lily family chives (scientific name Allium schoenoprasum), Tadeceae rhubarb (scientific name Rheum rhabarbarum), Nadesiko family Soapate (scientific name Saponaria officinalis), rose geranium (scientific name Pelargonium graveolens), rose family wild strawberry (scientific name Fragaria vesca) and salad burnet (scientific name Sanguisorba minor), lemon squirrel lemon verbena (scientific name Lippia citriodora), Gramineae Lemongrass ( Name Cymbopogon citratus), etc. has a good GST activity inducing action. One or two or more kinds of plants selected from these other plants can be used in combination with Lamiaceae and Euphoridae plants, or one or two kinds selected from the other plants. A combination of the above can also be used as a GST activity inducer.

本発明のGST活性誘導剤の有効成分は、これら特定の植物あるいはその抽出物である。したがって、本発明のGST活性誘導剤の一形態は、有効成分として、これらの植物の全体あるいはその一部である果実、種子、種皮、花、茎、葉、根および/または根茎をそのまま、あるいはこれらを粉砕、乾燥等の処理を施した処理物を含有することができる。なお、植物においては、通常、葉を用いることが好ましい。さらに、本GST活性誘導剤の有効成分は、こうした植物の全体、その一部あるいは処理物を原料とする植物の抽出物あるいは該抽出物から得られる画分とすることもできる。   The active ingredient of the GST activity inducer of the present invention is these specific plants or extracts thereof. Therefore, in one form of the GST activity inducer of the present invention, as an active ingredient, fruits, seeds, seed coats, flowers, stems, leaves, roots and / or rhizomes, which are all or a part of these plants, are used as they are, or The processed material which gave the process of pulverizing, drying, etc. can be contained. In plants, it is usually preferable to use leaves. Further, the active ingredient of the present GST activity inducer can be the whole plant, a part thereof, or a plant extract using a processed product as a raw material or a fraction obtained from the extract.

原料としての植物は、収穫後乾燥前の植物(フレッシュハーブ)のほか乾燥植物(乾燥ハーブ)も用いることができるが、フレッシュハーブを用いることが好ましい。なお、本明細書において、収穫後乾燥前の植物(フレッシュハーブ)とは、通常の方法によって収穫後14日間経過する前のものであって特に乾燥を施していないものを意味し、収穫後14日間経過前に凍結後,期間を問わずに解凍したものも含めるものとする。より好ましくは、収穫後72時間経過前のものである。なお、ここで、「乾燥」とは、天日乾燥や装置による乾燥など、いわゆる保存あるいは貯蔵状態以外の状態で積極的に水分を除去する操作を意味している。   As a plant as a raw material, a dried plant (dried herb) can be used in addition to a plant after harvesting and before drying (fresh herb), but fresh herb is preferably used. In the present specification, the plant after harvesting and before drying (fresh herb) means a plant that has not been dried for 14 days after harvesting by a normal method and has not been dried. It also includes those that have been thawed at any time after freezing before the passage of the day. More preferably, it is before 72 hours have passed since harvesting. Here, “drying” means an operation of actively removing moisture in a state other than the so-called storage or storage state, such as sun drying or drying with an apparatus.

植物からの有効成分の抽出は、例えば、植物を細断したうえ抽出溶媒と混合攪拌したり、抽出溶媒とともに粉砕あるいは摩砕したりすることができる。フレッシュハーブを用いる場合、これを細断した上、直ちにあるいは速やかに適当な抽出溶媒と混合攪拌しさらに粉砕あるいは摩砕して抽出する。抽出溶媒は、特に限定されず、水、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、n−ブチルアルコール、tert−ブチルアルコール、アミルアルコールの1価の低級アルコール類、1,3−ブチレングリコール、プロピレングリコールなどの多価アルコール、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類、酢酸メチル、酢酸エチルなどの低級アルキルエステル類、ヘキサン、クロロホルム、ジクロロメタンなどの溶媒を用いることができる。これらの溶媒は、1種あるいは2種以上を組み合わせて使用することができる。好ましい有機溶媒としては、低級アルコール類であり、なかでもエタノールが挙げられる。また、抽出溶媒としては、水、熱水あるいは上記有機溶媒と水との混液を好ましく用いることができ、水、熱水をより好ましく用いることができる。なお、抽出原料に対する抽出溶媒の比率は特に限定しないで適宜決定することができる。   Extraction of the active ingredient from the plant can be performed, for example, by chopping the plant and mixing and stirring with the extraction solvent, or by crushing or grinding with the extraction solvent. When a fresh herb is used, it is shredded, and immediately or immediately mixed with an appropriate extraction solvent and then stirred and further ground or ground for extraction. The extraction solvent is not particularly limited, and many solvents such as water, methanol, ethanol, isopropyl alcohol, n-butyl alcohol, tert-butyl alcohol, monovalent lower alcohols of amyl alcohol, 1,3-butylene glycol, propylene glycol and the like. Solvents such as monohydric alcohols, ketones such as acetone and methyl ethyl ketone, lower alkyl esters such as methyl acetate and ethyl acetate, hexane, chloroform and dichloromethane can be used. These solvents can be used alone or in combination of two or more. Preferred organic solvents are lower alcohols, especially ethanol. As the extraction solvent, water, hot water or a mixture of the above organic solvent and water can be preferably used, and water and hot water can be more preferably used. In addition, the ratio of the extraction solvent with respect to an extraction raw material can be suitably determined without limitation.

抽出方法は特に限定されず、これらの植物の原料を抽出溶媒に浸漬し、あるいは必要に応じこれを室温、加温下あるいは冷却下で抽出し、ろ過等して固形分を除去することにより抽出液を得ることができる。なお、加温あるいは冷却下での抽出は、抽出溶媒が液体状態を維持できる範囲で行うことができるが、必要に応じて還流装置などを用いて行うこともできる。こうして得られた抽出液をそのまま用いることもできるが、必要により濃縮あるいは乾固することもできる。さらに必要に応じてカラムなどを用いた通常の精製手段を用いて精製することもできる。   The extraction method is not particularly limited, and these plant materials are immersed in an extraction solvent, or extracted as necessary by extraction at room temperature, under heating or cooling, and by filtering to remove the solid content. A liquid can be obtained. The extraction under heating or cooling can be performed as long as the extraction solvent can maintain a liquid state, but can also be performed using a reflux device or the like as necessary. The extract thus obtained can be used as it is, but can be concentrated or dried as necessary. Furthermore, it can also refine | purify using the normal refinement | purification means using a column etc. as needed.

こうして得られた抽出物は、溶液、ペースト、粉末等の各種形態を有するが、いずれの形態であってもGST活性誘導作用を有することができる。GST活性は、本GST活性誘導剤に曝して培養した細胞抽出液上清を試料液として、例えば、1−クロロ−2,4−ジニトロベンゼン(CDNB)などの化合物と還元型グルタチオンとを基質とする酵素反応を用いて測定することができる。   The extract thus obtained has various forms such as a solution, a paste, and a powder, and any form can have a GST activity inducing action. The GST activity is obtained by using, for example, a compound such as 1-chloro-2,4-dinitrobenzene (CDNB) and reduced glutathione as a substrate, using a cell extract supernatant cultured by exposure to the present GST activity inducer as a sample solution. It can be measured using an enzymatic reaction.

本発明のGST活性誘導剤は、GST活性が関連し、グルタチオンSトランスフェラーゼ活性が有効であるとされるヒトあるいは非ヒト動物の疾患に対する予防目的あるいは症状の改善目的で投与あるいは摂取される形態の用途に好ましく用いられる。特に、本GST活性誘導剤は、食品因子由来であるため、持続的に投与あるいは摂取される形態の用途に好ましく用いられる。また、ひいてはヒトあるいは非ヒト動物の健康維持目的あるいは健康改善目的において持続的に摂取される用途に好ましく用いられる。   The GST activity-inducing agent of the present invention is used in a form that is administered or ingested for the purpose of preventing or ameliorating symptoms of diseases of humans or non-human animals that are associated with GST activity and that are effective for glutathione S-transferase activity. Is preferably used. In particular, since the present GST activity inducer is derived from food factors, it is preferably used for applications that are continuously administered or ingested. In addition, it is preferably used for applications that are ingested continuously for the purpose of maintaining or improving the health of humans or non-human animals.

したがって、本GST活性誘導剤は、研究用途のほか、医薬品、医薬部外品、食品、飲料、栄養補助食品(サプリメント)、食品添加物、飼料および動物用医薬品あるいはこれらの原材料として有用である。   Therefore, the present GST activity inducer is useful not only for research purposes but also as pharmaceuticals, quasi drugs, foods, beverages, dietary supplements (supplements), food additives, feeds and veterinary drugs, or raw materials thereof.

(組成物)
本GST活性誘導剤を含有する組成物は、用途に応じた各種の形態を備えることができる。
(医薬組成物)
本GST活性誘導剤によれば、医薬組成物が提供される。本GST活性誘導剤を含有する医薬組成物によれば、GST活性が有効であるとされる、ヒトあるいは非ヒトの疾患の治療薬ないし予防薬が提供される。GST活性誘導作用を有するイソチオシアネート類が抗ガン作用を有することから、本GST活性誘導剤を含有する医薬組成物は、抗ガン剤、ガン予防剤として使用できる。
(Composition)
The composition containing the present GST activity inducer can have various forms depending on the application.
(Pharmaceutical composition)
According to the present GST activity inducer, a pharmaceutical composition is provided. According to the pharmaceutical composition containing the present GST activity inducer, a therapeutic or prophylactic agent for human or non-human diseases, for which GST activity is effective, is provided. Since isothiocyanates having a GST activity-inducing action have an anti-cancer action, the pharmaceutical composition containing the GST activity-inducing agent can be used as an anti-cancer agent or a cancer preventive agent.

本医薬組成物は、本GST活性誘導剤と許容される公知の医薬用担体とを組み合わせて製剤化することにより得ることができる。製剤化は、本GST活性誘導剤を薬学的に許容できる液状又は固体状の担体と配合し、所望により溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を加えて、錠剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤等の固形剤、懸濁剤、乳剤、注射剤等の液剤とすることにより達成される。また、使用時において適当な添加によって液状となし得る用時溶解性の固形品とすることもできるし、外用剤とすることもできる。   This pharmaceutical composition can be obtained by combining the present GST activity inducer and an acceptable known pharmaceutical carrier in combination. For formulation, the GST activity inducer is blended with a pharmaceutically acceptable liquid or solid carrier, and if necessary, a solvent, a dispersant, an emulsifier, a buffer, a stabilizer, an excipient, a binder, a disintegrant, It is achieved by adding a lubricant or the like to form a liquid agent such as a solid agent such as a tablet, granule, powder, powder or capsule, a suspension, an emulsion or an injection. Moreover, it can also be set as the use-soluble solid product which can be made into a liquid state by an appropriate addition at the time of use, and can also be used as an external preparation.

医薬用担体は、本医薬組成物の投与形態及び剤型に応じて選択することができる。経口剤の場合は、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩等が利用される。また経口剤の調製に当っては、更に結合剤、崩壊剤、界面活性剤、潤沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料等を配合することもできる。一方、非経口剤の場合は、常法に従い、本GST活性誘導剤を希釈剤としての注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロコシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等に溶解ないし懸濁させ、必要に応じ、殺菌剤、安定剤、等張化剤、無痛化剤等を加えることにより調製することができる。あるいは、用時においてこれらの希釈剤によって溶解可能な用時溶解の注射剤等の非経口剤として提供することもできる。   The pharmaceutical carrier can be selected according to the administration form and dosage form of the pharmaceutical composition. In the case of an oral preparation, for example, starch, lactose, sucrose, mannitol, carboxymethylcellulose, corn starch, inorganic salt, etc. are used. In preparation of the oral preparation, a binder, a disintegrant, a surfactant, a lubricant, a fluidity promoter, a corrigent, a colorant, a fragrance and the like can be further added. On the other hand, in the case of parenteral agents, according to conventional methods, distilled water for injection, physiological saline, aqueous glucose solution, vegetable oil for injection, sesame oil, peanut oil, soybean oil, corn oil, It can be prepared by dissolving or suspending in propylene glycol, polyethylene glycol or the like, and adding a bactericidal agent, stabilizer, tonicity agent, soothing agent, etc. as necessary. Alternatively, it can also be provided as a parenteral preparation such as an injection dissolved at the time of use that can be dissolved by these diluents at the time of use.

本発明の医薬組成物はその剤型に応じて、内用、外用、注射、点滴、注入、吸引等の適切な投与形態で投与される。注射剤は、例えば静脈内、筋肉内、皮下、皮内等に投与し得、外用剤には座剤等も包含される。また、例えば、直接、皮下の疾患あるいは変性部位に塗布、散布、注入等により供給することにより本組成物を投与することができる。   The pharmaceutical composition of the present invention is administered in an appropriate dosage form such as internal use, external use, injection, drip, infusion, aspiration, etc., depending on the dosage form. Injections can be administered, for example, intravenously, intramuscularly, subcutaneously, intradermally, and external preparations include suppositories. In addition, for example, the composition can be administered by being directly applied to a subcutaneous disease or degeneration site by application, spraying, injection or the like.

本医薬組成物を治療目的あるいは予防目的で投与する場合の投与量は、その製剤形態、投与方法、使用目的及びこれに適用される患者の年齢、体重、症状によって適宜設定され、一定ではないが一般には製剤中に含有される本発明で使用されるGST活性誘導剤の量(抽出物の乾燥固形分)として、成人1日当り好ましくは0.01〜400mg/kg体重であり、より好ましくは0.2〜200mg/kg体重である。抽出物乾燥固形分量の約10倍量が乾燥植物重量であり、同約100倍量が乾燥前植物重量に相当する。なお、投与量は、使用するGST活性誘導剤の種類のほか種々の条件によって変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは範囲を超えて必要な場合もある。   The dosage when the pharmaceutical composition is administered for therapeutic or prophylactic purposes is appropriately set according to the formulation form, administration method, purpose of use and age, weight, and symptoms of the patient applied thereto, and is not constant. In general, the amount of GST activity inducer used in the present invention contained in the preparation (dry solid content of the extract) is preferably 0.01 to 400 mg / kg body weight per day for an adult, more preferably 0 .2 to 200 mg / kg body weight. About 10 times the dry solid content of the extract is the dry plant weight, and about 100 times the amount corresponds to the plant weight before drying. In addition, since the dosage varies depending on various conditions in addition to the type of GST activity inducer to be used, an amount smaller than the above dosage may be sufficient or may exceed the range.

なお、これらの本医薬組成物の形態は、外用剤、飲料形態の経口剤等を含む医薬部外品の各種形態に適用される。   In addition, the form of these present pharmaceutical compositions is applied to various forms of quasi-drugs including external preparations, oral preparations for beverages, and the like.

(食品組成物)
本GST活性誘導剤は、食用あるいは栄養補給用として摂取させるための食品組成物とすることができる。本食品組成物によれば、容易に持続的に本GST活性誘導剤を摂取することができるため、がんなどGST活性が関連する各種疾患の患者に対して、抗がん等該疾患の進行の抑制、症状の改善、QOLの向上に有効である。また、健常者に対しては、がん予防などこれらGST活性関連疾患の予防、健康維持あるいは改善に有効である。
(Food composition)
This GST activity inducer can be used as a food composition for ingestion for food or nutrition. According to the present food composition, since the present GST activity inducer can be easily and continuously ingested, the progression of the disease such as anti-cancer to patients with various diseases associated with GST activity such as cancer. It is effective for suppression of symptoms, improvement of symptoms, and improvement of QOL. In addition, it is effective for healthy persons to prevent, maintain or improve health of these GST activity-related diseases such as cancer prevention.

本食品組成物は、各種形態を採ることができる。すなわち、従来公知の各種食品(加工食品を含む)、飲料、調味料等の形態あるいはその原材料の形態を採ることができる他、散剤、粒剤、錠剤、カプセル剤、エキス剤、液剤(飲料を含む)など主として経口栄養剤であるサプリメント形態あるいはその原材料、チューブ等を介して胃や腸、血管に供給する経管栄養剤形態あるいはその原材料を採ることができる。   The food composition can take various forms. That is, it can take the form of various known foods (including processed foods), beverages, seasonings, etc., or the form of its raw materials, as well as powders, granules, tablets, capsules, extracts, liquids (for beverages) Supplemental forms that are mainly oral nutrients or their raw materials, tube feeding nutritional forms that are supplied to the stomach, intestines, and blood vessels via tubes or the like, or their raw materials.

本食品組成物における本GST活性誘導剤の含有量(抽出物の乾燥固形分)は特に限定されないが、好ましくは0.000001重量%以上、より好ましくは0.00001〜100重量%とすることができる。また、本食品組成物は、好ましくは、それらに含有される有効成分が、例えば成人1日当たり好ましくは0.0001〜100mg/kg体重、より好ましくは0.001〜10mg/kg体重となるように摂取されうる。なお、摂取量は、使用するGST活性誘導剤の種類のほか種々の条件によって変動するので、上記摂取量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは上記範囲を超えて必要な場合もある。   The content of the GST activity inducer in the food composition (dry solid content of the extract) is not particularly limited, but is preferably 0.000001% by weight or more, more preferably 0.00001-100% by weight. it can. In addition, the present food composition is preferably such that the active ingredient contained therein is preferably 0.0001 to 100 mg / kg body weight, more preferably 0.001 to 10 mg / kg body weight per day for an adult. Can be ingested. In addition, since the amount of intake varies depending on various conditions in addition to the type of GST activity inducer to be used, an amount smaller than the above amount may be sufficient or may be necessary beyond the above range.

(治療方法又は予防方法等)
以上説明した本GST活性誘導剤、本医薬組成物、本食品組成物の使用形態に基づけば、本発明の別の形態として、本GST活性誘導剤、本医薬組成物および本食品組成物のいずれかを、ヒトに投与あるいは摂取させる本GST活性誘導剤の供給工程を有する、ガンあるいは前ガン状態を予防あるいは治療する方法が提供される。
(Treatment method or prevention method, etc.)
Based on the use form of the GST activity inducer, the pharmaceutical composition, and the food composition described above, as another form of the present invention, any of the GST activity inducer, the pharmaceutical composition, and the food composition There is provided a method for preventing or treating cancer or a precancerous condition, which comprises the step of supplying the present GST activity inducer to be administered or ingested to humans.

以下、実施例を挙げて、本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。   EXAMPLES Hereinafter, although an Example is given and this invention is demonstrated further more concretely, this invention is not limited to these Examples at all.

図1及び図2に示す74種類のフレッシュハーブ(収穫後24時間内に抽出操作を開始した。)について、特に記載のない場合はそれぞれ葉部を、カッコ書きで記載ある場合にはその特定部位を5g秤量し、エタノール20mlとともにホモジナイザーで十分に攪拌し磨砕し、ろ過した後、残渣をエタノールで洗浄し、ろ液と洗液とをあわせて50mlとした。このエタノール抽出液(フレッシュハーブ100mg/ml)を用いてGST活性誘導作用について試験した。   For 74 types of fresh herbs shown in FIGS. 1 and 2 (extraction operation started within 24 hours after harvesting), unless otherwise specified, leaves are indicated, and specific parts are indicated in parentheses. 5g was weighed and thoroughly stirred with a homogenizer with 20 ml of ethanol and ground and filtered. The residue was washed with ethanol, and the filtrate and the washing solution were combined to make 50 ml. This ethanol extract (fresh herb 100 mg / ml) was used to test GST activity inducing activity.

GST活性誘導作用の測定には、ウイスター系ラット正常肝由来培養細胞RL34を用いた。測定にあたって使用するRL34細胞は以下のようにして調製した。凍結保存されたRL34細胞を37℃に温めた上、予め37℃としておいた5%FBS(ウシ胎児血清、CCT、三光純薬株式会社製)−DMEM培地(ダルベッコ変法イーグル培地「ニッスイ」2、日水製薬株式会社製)20mlの入ったチューブに入れて凍結した細胞を融解し、1200rpm(25℃)で5分間遠心分離し、上清を吸引し新しいDMEM培地に懸濁した後、その5mlをシャーレに播種して95%COインキュベーター内で培養した。3日毎に培地交換を行い、コンフルエント状態毎(約7日間毎)に継代を行い、測定用のRL34細胞とした。なお、5%FBS−DMEM培地としては、DMEM粉末4.75gを秤量し、450mlの超純水(ミリポア社製フィルターで調製した超純水である。以下、同じ。)に溶かした後121℃で15分間オートクレーブした。クリーンベンチ内で100×PS(ペニシリンGカリウム100万単位、硫酸ストレプトマイシン1gを超純水100mlに溶解後滅菌したもの)5ml、200mM l−グルタミン10ml及び10%NaHCOを培地の色が朱色になるまで約5mlを加えた。このDMEM培地にFBS25mlを加えたものを用いた。 For the measurement of the GST activity inducing action, Wistar rat normal liver-derived cultured cells RL34 were used. RL34 cells used for the measurement were prepared as follows. 5% FBS (fetal bovine serum, CCT, manufactured by Sanko Junyaku Co., Ltd.)-DMEM medium (Dulbecco's modified Eagle's medium "Nissui") 2 in which cryopreserved RL34 cells were warmed to 37 ° C and pre-set to 37 ° C (Manufactured by Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) The frozen cells were thawed in a tube containing 20 ml, centrifuged at 1200 rpm (25 ° C.) for 5 minutes, and the supernatant was aspirated and suspended in a new DMEM medium. 5 ml was seeded on a petri dish and cultured in a 95% CO 2 incubator. The medium was changed every 3 days, and subculture was performed for each confluent state (about every 7 days) to obtain RL34 cells for measurement. As a 5% FBS-DMEM medium, 4.75 g of DMEM powder was weighed and dissolved in 450 ml of ultrapure water (ultrapure water prepared with a filter manufactured by Millipore. The same applies hereinafter) and then 121 ° C. And autoclaved for 15 minutes. In a clean bench, 100 × PS (1 million units of penicillin G potassium, 1 g of streptomycin sulfate dissolved in 100 ml of ultrapure water and sterilized) 5 ml, 200 mM l-glutamine 10 ml and 10% NaHCO 3 becomes vermilion. About 5 ml was added. What added 25 ml of FBS to this DMEM culture medium was used.

GST活性誘導作用の測定に用いた試薬は以下の通りであった。
(1)0.8%ジギトニン(2mMEDTA含む、和光純薬工業製、特級)ただし、NaOHでpH7.8に調整したもの
(2)第一基質溶液
10mMグルタチオン:0.2Mリン酸カリウム緩衝液(pH6.5):超純水混液(1:5:2)を用時調製した。
(3)第二基質溶液
10mMCDNB/40%エタノール
1−クロロ−2,4−ジニトロベンゼン(CDNB)(シグマ製)をエタノールに完全に溶解した後、水を添加して調製した。
(4)0.2Mリン酸カリウム緩衝液(pH6.5)
KHPO9.5gを超純水350mlに溶解させたものと、KHPO5.2gを超純水350mlに溶解させたものをpHメーターでpH6.5に調整しながら混合した。
(5)10mMGSH(グルタチオン)(還元型)、和光純薬工業製、特級
(6)1×PBS
The reagents used for the measurement of the GST activity inducing action were as follows.
(1) 0.8% digitonin (containing 2 mM EDTA, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, special grade), but adjusted to pH 7.8 with NaOH (2) First substrate solution 10 mM glutathione: 0.2 M potassium phosphate buffer ( pH 6.5): Ultrapure water mixture (1: 5: 2) was prepared at the time of use.
(3) Second substrate solution 10 mM CDNB / 40% ethanol 1-Chloro-2,4-dinitrobenzene (CDNB) (manufactured by Sigma) was completely dissolved in ethanol and then added with water.
(4) 0.2M potassium phosphate buffer (pH 6.5)
A solution in which 9.5 g of KH 2 PO 4 was dissolved in 350 ml of ultrapure water and a solution in which 5.2 g of K 2 HPO 4 was dissolved in 350 ml of ultrapure water were mixed while adjusting to pH 6.5 with a pH meter.
(5) 10 mM GSH (glutathione) (reduced), manufactured by Wako Pure Chemical Industries, special grade (6) 1 × PBS

GST活性誘導作用の測定方法は以下のように行った。6wellプレートに0.5×10cells/wellとなるようにRL34細胞を播種し、3日目に培地を交換した。培養4日目に培地交換(1ml/well)を行い、74種のハーブのエタノール抽出液を1.0μl/ml及び2.5μl/mlとなるように投与した。なお、同濃度になるようにエタノールを投与したものをコントロールとした。なお、本測定方法におけるエタノール投与量の範囲においてエタノールは細胞のGST活性に影響を及ぼさず、細胞毒性も示さないことが確認されている。 The GST activity inducing action was measured as follows. RL34 cells were seeded on a 6- well plate at 0.5 × 10 6 cells / well, and the medium was changed on the third day. On the 4th day of the culture, the medium was changed (1 ml / well), and 74 kinds of herbal ethanol extracts were administered at 1.0 μl / ml and 2.5 μl / ml. In addition, what administered ethanol so that it might become the same density | concentration was made into control. It has been confirmed that ethanol does not affect the GST activity of cells and does not show cytotoxicity in the range of ethanol dosage in this measurement method.

投与後24時間経過後に培養細胞を1mlのPBSで2回洗浄し、PBSを除去した後、0.8%ジギトニン(Digitonin)200μlをシャーレに加えて、37℃で10分間インキュベートし、細胞を可溶化した。セルスクレーパー(商標、岩城硝子製)を用いて細胞を回収し、4℃、5000rpm、5分間冷却遠心し、上清を試料液とした。試料液を1.5ml容マイクロチューブに入れ、使用時まで−20℃で保存した。小試験管に第一基質溶液0.8mlと希釈した試料液0.1mlを入れ、第二基質溶液0.1mlを加え、ただちに分光光度計にて340nmの吸光度を測定し、その後20秒毎に3分間340nmの吸光度を測定した。なお、反応は約25℃(室温)にて行った。酵素活性(Units/mgタンパク質)は、GSH−CDNB抱合体の340nmにおけるモル吸光係数9600(M−1cm−1)を用い、次式により求めた。ただし、OD340nmは3分後のOD340nmから0分のOD340nmを差し引いたものとした。また、試料液(抽出液)のタンパク質濃度は、BCA Protein Assay Reagent Kit(Pierce製)を用いて測定した。
GST活性(Units/mgタンパク質)=
(OD340/3×10×試料液の希釈倍率)(9600×10−3×1)/試料液のタンパク質濃度(mg/ml)
After 24 hours from the administration, the cultured cells were washed twice with 1 ml of PBS, and after removing PBS, 200 μl of 0.8% Digitonin was added to the petri dish and incubated at 37 ° C. for 10 minutes to allow the cells. Solubilized. Cells were collected using a cell scraper (trademark, manufactured by Iwaki Glass Co., Ltd.), cooled and centrifuged at 4 ° C. and 5000 rpm for 5 minutes, and the supernatant was used as a sample solution. The sample solution was placed in a 1.5 ml microtube and stored at −20 ° C. until use. Put 0.8 ml of the first substrate solution and 0.1 ml of the diluted sample solution in a small test tube, add 0.1 ml of the second substrate solution, immediately measure the absorbance at 340 nm with a spectrophotometer, and then every 20 seconds. Absorbance at 340 nm was measured for 3 minutes. The reaction was performed at about 25 ° C. (room temperature). The enzyme activity (Units / mg protein) was determined by the following formula using a molar extinction coefficient of 9600 (M −1 cm −1 ) at 340 nm of the GSH-CDNB conjugate. However, OD340nm was obtained by subtracting OD340nm of 0 minutes from OD340nm after 3 minutes. The protein concentration of the sample solution (extract) was measured using BCA Protein Assay Reagent Kit (Pierce).
GST activity (Units / mg protein) =
(OD340 / 3 × 10 × dilution ratio of sample solution) (9600 × 10 −3 × 1) / protein concentration of sample solution (mg / ml)

酵素活性は、最終的に、各種のハーブのエタノール抽出液の供給量に対応した溶媒(エタノール)を投与したコントロールにおいて測定された酵素活性に対する比率(%)で示した。なお、各ハーブのGST活性誘導作用は2回繰り返し試験を行った結果である。これらの結果を図1及び図2に示す。   The enzyme activity was finally expressed as a ratio (%) to the enzyme activity measured in a control administered with a solvent (ethanol) corresponding to the supply amount of ethanol extracts of various herbs. In addition, the GST activity inducing action of each herb is the result of repeating the test twice. These results are shown in FIGS.

図1及び図2に示すように、ハーブ類のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導作用は、シソ科植物について1.0μl/mlあるいは2.5μl/mlのいずれかの濃度でGST活性誘導を示した。具体的には、平均してラベンダー類(イエローフラワーラベンダー、サマーラベンダー、ヒッドコートラベンダー、フレンチラベンダー、フレンチストエカスラベンダー、スパイクラベンダー、イングリッシュラベンダー)、ミント類(アップルミント、オーデコロンミント、ウォーターミント、オレンジミント、クールミント、スペアミント、パイナップルミント、ペパーミント)、ローズマリー類(ローズマリードリーミィブルー、ローズマリートスカナブルー、ローズマリーウッド)、セージ類(パイナップルセージ、チェリーセージ、アメジストセージ、クラリーセージ)及びスウィートマジョラムが高いGST活性誘導作用を示した。なお、ミント類では、1.0μl/mlの低濃度域においてより高いGST活性誘導作用を示す傾向があった。その他、ベルガモット、バジル類(スウィートバジル、ダークオパールバジル、レタスバジル、シナモンバジル、リコリスバジル、パープルラッセルバジル、ブッシュバジル、レモンバジル)、レモンタイム、レモンバーム、オレガノ、ラムズイヤーについても、GST活性誘導作用を示していた。   As shown in FIGS. 1 and 2, the activity of inducing glutathione S transferase activity by herbs showed GST activity induction at a concentration of 1.0 μl / ml or 2.5 μl / ml for Lamiaceae plants. Specifically, on average, lavenders (yellow flower lavender, summer lavender, hid coat lavender, French lavender, Frenchst Ecus lavender, spike lavender, English lavender), mint (apple mint, cologne mint, water mint, orange) Mint, Cool Mint, Spearmint, Pineapple Mint, Peppermint), Rosemary (Rose Marie Dreamy Blue, Rose Marito Scana Blue, Rosemary Wood), Sage (Pineapple Sage, Cherry Sage, Amethyst Sage, Clary Sage) and Sweet Marjoram It showed a high GST activity inducing action. Mints tended to show a higher GST activity-inducing action in a low concentration range of 1.0 μl / ml. In addition, bergamot, basil (sweet basil, dark opal basil, lettuce basil, cinnamon basil, licorice basil, purple russell basil, bush basil, lemon basil), lemon thyme, lemon balm, oregano, and rams ear also induce GST activity Was showing.

また、これらのなかでも、イエローフラワーラベンダー、ヒッドコートラベンダー、フレンチストエカスラベンダー、イングリッシュラベンダー、ウォーターミント、オーデコロンミント、クールミント、ペパーミント、ブッシュミント、ローズマリードリーミィブルー、ローズマリートスカナブルー、ローズマリーウッド、スウィートマジョラム、パイナップルセージ、チェリーセージが対エタノールで約140%以上のGST活性誘導作用を示しており、さらに、ローズマリードリーミィブルー、ローズマリートスカナブルー、ローズマリーウッド、スウィートマジョラムが同約150%以上のGST活性誘導作用を有し、ローズマリードリーミィブルー、ローズマリートスカナブルー、ローズマリーウッドが同約160%以上のGST活性誘導作用を示した。以上のことから、シソ科植物はGST活性誘導作用を有するとともに、ラベンダー類、ミント類、ローズマリー類について高いGST活性誘導作用を有し、なかでも、ローズマリードリーミィブルー、ローズマリートスカナブルー、ローズマリーウッドなどのローズマリー類、スイートマジョラムについて特に高いGST活性誘導作用を有していることがわかった。なお、対エタノール150%のGST活性誘導作用は、t−ブチルヒドロキノン、ベンジルイソチオシアネート10μMの投与量レベルのGST活性誘導作用と同等であることがわかっている。   Among these, yellow flower lavender, hid coat lavender, Frenchst Ekas lavender, English lavender, water mint, eau de cologne mint, cool mint, peppermint, bush mint, rose marie dreamy blue, rose marito scanna blue, rosemary wood , Sweet marjoram, pineapple sage, cherry sage show GST activity induction action of about 140% or more with ethanol, and rose maridy dreamy blue, rose marito sana blue, rosemary wood, sweet marjoram are about 150% of the same. GST activity-inducing action as described above, rose maridy dreamy blue, rose marito scanna blue and rosemary wood are about 160% or more of GST It showed a sex-inducing effect. From the above, Lamiaceae plants have GST activity-inducing action, and also have high GST activity-inducing action for lavenders, mint, and rosemary, and among them, rose marie dreamy blue, rose marito scanna blue, rose It was found that rosemary such as Marywood and sweet marjoram have particularly high GST activity-inducing action. It has been found that the GST activity inducing action of ethanol 150% is equivalent to the GST activity inducing action of t-butylhydroquinone and benzylisothiocyanate at a dose level of 10 μM.

また、シソ科植物以外では、アップルユーカリ、レモンユーカリ、レモングラス、レモンバーベナ、フェンネル、ワイルドストロベリー、スウィートハーブメキシカン、ステビア、ナスタティウム、チャイブ、チコリ、ローマンカモミール、ルバーブ、コモンソープウァート、サラダバーネット、コモンコンフリー、チャービル、ローズゼラニウム、ブラックマローについてもGST活性誘導作用が認められ、なかでも、アップルユーカリ及びレモンユーカリについて約140%のGST活性誘導作用が認められた。したがって、シソ科植物以外のハーブ類、特にフトモモ科ユーカリ属に有効なGST活性誘導作用のあることがわかった。   Other than Lamiaceae, Apple Eucalyptus, Lemon Eucalyptus, Lemongrass, Lemon Verbena, Fennel, Wild Strawberry, Sweet Herb Mexican, Stevia, Nastatum, Chives, Chicory, Roman Chamomile, Rhubarb, Common Soap Wart, Salad Barnet, Common comfrey, chervil, rose geranium, and black mallow also showed GST activity inducing action, and apple eucalyptus and lemon eucalyptus showed about 140% GST activity inducing action. Therefore, it was found that there is an effective GST activity-inducing action for herbs other than Lamiaceae plants, particularly Euphoridae.

実施例1に用いたハーブとそのGST活性誘導作用(対エタノール比率(%))を示す表。The table | surface which shows the herb used for Example 1, and its GST activity induction effect (ratio with respect to ethanol (%)). 実施例1に用いたハーブとそのGST活性誘導作用(対エタノール比率(%))を示す表。The table | surface which shows the herb used for Example 1, and its GST activity induction effect (ratio with respect to ethanol (%)).

Claims (12)

シソ科植物及びフトモモ科ユーカリ属植物から選択される1種あるいは2種以上の植物あるいはその抽出物を有効成分とする、グルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤。   A glutathione S transferase activity inducer comprising, as an active ingredient, one or more plants selected from Lamiaceae plants and Myrtaceae Eucalyptus plants, or extracts thereof. 前記シソ科植物は、ローズマリードリーミィブルー(Rosemary Dreamy blue)、ローズマリーウッド(Rosemary Wood)、ローズマリートスカナブルー(Rosemary Tuscanablue)、イエローフラワーラベンダー(Yellow Flower Lavender)、ヒッドコートラベンダー(Hidcote Lavender)、フレンチストエカスラベンダー(French Stoechas Lavender)、スパイクラベンダー(Spike Lavender)、イングリッシュラベンダー(English Lavender)、アップルミント(Apple Mint)、ウォーターミント(Water Mint)、オーデコロンミント(Eau de cologne Mint)、オレンジミント(Orange Mint)、クールミント(Cool Mint)、スペアミント(Spear Mint)、パイナップルミント(Pineapple Mint)、ブッシュミント(Bush Mint)、ペパーミント(Pepper Mint)、スウィートマジョラム(Sweet Marjoram)、パイナップルセージ(Pineapple Sage)、チェリーセージ(Cherry Sage)、クラリーセージ(Clary Sage)、オレガノ(Oregano)、レモンバジル(Lemon Basil)及びベルガモット(Bergamot)から選択される、請求項1に記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤。   The Lamiaceae plants are Rosemary Dreamy blue, Rosemary Wood, Rosemary Tuscanablue, Yellow Flower Lavender, Hidcote Lavender , French Stoechas Lavender, Spike Lavender, English Lavender, Apple Mint, Water Mint, Eau de cologne Mint, Orange Mint ( Orange Mint, Cool Mint, Spear Mint, Pineapple Mint, Bush Mint, Pepper Mint, Sweet Marjoram, Pineapple Sag The glutathione S transferase activity inducer according to claim 1, selected from e), cherry sage, clary sage, oregano, lemon basil and bergamot. 前記シソ科植物は、ローズマリードリーミィブルー(Rosemary Dreamy blue)、ローズマリーウッド(Rosemary Wood)、ローズマリートスカナブルー(Rosemary Tuscanablue)、イエローフラワーラベンダー(Yellow Flower Lavender)、ヒッドコートラベンダー(Hidcote Lavender)、フレンチストエカスラベンダー(French Stoechas Lavender)、イングリッシュラベンダー(English Lavender)、ウォーターミント(Water Mint)、クールミント(Cool Mint)、オーデコロンミント(Eau de cologne Mint)、ペパーミント(Pepper Mint)、スウィートマジョラム(Sweet Marjoram)パイナップルセージ(Pineapple Sage)及びチェリーセージ(Cherry Sage)から選択される、請求項2に記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤。   The Lamiaceae plants are Rosemary Dreamy blue, Rosemary Wood, Rosemary Tuscanablue, Yellow Flower Lavender, Hidcote Lavender , French Stoechas Lavender, English Lavender, Water Mint, Cool Mint, Eau de cologne Mint, Pepper Mint, Sweet Marjoram (Sweet) The glutathione S transferase activity inducer according to claim 2, selected from Marjoram, Pineapple Sage and Cherry Sage. 前記シソ科植物は、ローズマリードリーミィブルー(Rosemary Dreamy blue)、ローズマリーウッド(Rosemary Wood)、ローズマリートスカナブルー(Rosemary Tuscanablue)及びスウィートマジョラム(Sweet Marjoram)から選択される、請求項3に記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤。   4. The Lamiaceae plant is selected from Rosemary Dreamy blue, Rosemary Wood, Rosemary Tuscanablue and Sweet Marjoram. Glutathione S transferase activity inducer. 前記フトモモ科ユーカリ属植物は、アップルユーカリ(Apple Eucalyptus)及びレモンユーカリ(Lemon Eucalyptus)から選択される、請求項1に記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤。   The glutathione S transferase activity inducer according to claim 1, wherein the Eucalyptus eucalyptus plant is selected from Apple Eucalyptus and Lemon Eucalyptus. 前記抽出物は、低級アルコール抽出物である、請求項1〜5のいずれかに記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤。   The glutathione S transferase activity inducer according to any one of claims 1 to 5, wherein the extract is a lower alcohol extract. 前記抽出物は、エタノール抽出物である、請求項6に記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤。   The glutathione S transferase activity inducer according to claim 6, wherein the extract is an ethanol extract. 前記抽出物は、熱水、水、あるいは水・有機溶媒混液抽出物である、請求項1〜5のいずれかに記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤。   The glutathione S transferase activity inducer according to any one of claims 1 to 5, wherein the extract is hot water, water, or a water / organic solvent mixed liquid extract. 前記植物として、収穫後乾燥前の植物を用いる、請求項1〜8のいずれかに記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤。   The glutathione S transferase activity inducer according to any one of claims 1 to 8, wherein a plant after harvest and before drying is used as the plant. 請求項1〜9のいずれかに記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤を含有する、食品組成物。   A food composition comprising the glutathione S transferase activity inducer according to any one of claims 1 to 9. 請求項1〜9のいずれかに記載のグルタチオンSトランスフェラーゼ活性誘導剤を有効量含有する、グルタチオンSトランスフェラーゼ誘導作用が有効な疾患の治療用あるいは予防用の医薬組成物。   A pharmaceutical composition for treating or preventing a disease having an effective glutathione S-transferase-inducing action, comprising an effective amount of the glutathione S-transferase activity-inducing agent according to any one of claims 1 to 9. 抗がん剤である、請求項11に記載の医薬組成物。   The pharmaceutical composition according to claim 11, which is an anticancer agent.
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