【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、かぶれの発生、増悪化の原因である細菌類及び酵素類の増殖抑制、乃至は機能阻害に対して有効な植物抽出物由来の組成物に関する。また本発明は、該組成物を含有する事を特徴とする繊維製品またはフィルム製品、及びこれらを用いた吸収性物品またはワイパーに関する。更に本発明は、該組成物を配合した皮膚外用剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、使い捨て紙おむつや生理用ナプキンなど人体に直接接触する吸収性物品において、かぶれの発生が問題視されている。一般にかぶれの発生には、皮膚と吸収性物品との摩擦による切れやこすれ以外に、人体に由来する様々な生物学的要因が関与すると考えられている。例えば、おむつかぶれが発生する過程に於いては、先ずおむつの内部で尿や便が混在する状況が発生し、この環境が便や皮膚に常在する細菌類や、プロテアーゼ、リパーゼ等の消化管酵素を活性化する。これら生物学的因子は活性化すると刺激物となって皮膚を直接刺激し、最終的にかぶれを引き起こす。また一部の細菌類が産生するウレアーゼは、かぶれの増悪化因子であるアンモニアの発生に関与する。更に、かぶれの発生した皮膚表面はカンジタ菌や糸状菌等の真菌類が増殖するのに適しており、これらが増殖するとかぶれの症状はより悪化する。以上の如く、かぶれは様々な因子（刺激物）が複合的に絡んで発生するものである。
【０００３】
過去より、細菌類の増殖抑制の観点からおむつかぶれを防止しようとする試みがなされている。例えば、特開昭６１−２８０７８号公報には、クマザサとハトムギとその他の植物エキス油を布地や紙製品に塗布したものが提案されている。また、特公昭６３−５４０１３号公報、特開昭６３−１７５１１７号公報、特開平１−２５０４１３号公報には、ゼオライトに担持させた抗菌性金属のイオン解離により抗菌性を付与した繊維、並びに繊維製品が提案されている。更に、その他にもビグアナイト誘導体、有機シリコン系第４級アンモニウム塩を用いて抗菌性を付与したものもある。特開平５−５２７４号公報にはキチンの脱アセチル化物を、特開平９−１０８２６１号公報にはグリチルリチンやフィトンチッドをシクロデキストリンに包接化したものを、また特開２０００−１１００６７号公報にはトコフェノールを、それぞれ付与した繊維製品がかぶれ抑制用の基材として提案されている。しかしながら、先に述べたとおり、おむつかぶれが微生物の増殖のみならず酵素類の作用を含めた複合的な刺激の産物である事を考えれば、抗菌作用のみではかぶれ抑制に対する機能は不十分である。
【０００４】
【特許文献１】特開昭６１−２８０７８号公報
【特許文献２】特公昭６３−５４０１３号公報
【特許文献３】特開昭６３−１７５１１７号公報
【特許文献４】特開平１−２５０４１３号公報
【特許文献５】特開平５−５２７４号公報
【特許文献６】特開平９−１０８２６１号公報
【特許文献７】特開２０００−１１００６７号公報
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、より効果的なかぶれ防止を実現すべく、抗菌作用のみならず、かぶれの発生、増悪化に関わる酵素類に対する阻害作用を併せ持つ植物抽出物由来のかぶれ防止組成物、及び該かぶれ防止組成物を利用した各種製品を提供する事を目的とする。
【０００６】
【課題を解決する為の手段】
本研究者らは、鋭意研究の結果、各種植物の抽出物の内、ニンジン（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ Ｌ． ｖａｒ． ｓａｔｉｖａ ＤＣ）、ハラン（Ａｓｐｉｄｉｓｔｒａ ｅｌａｔｉｏｒ Ｂｌ．）、ムクロジ（Ｓａｐｉｎｄｕｓ ｍｕｋｕｒｏｓｓｉ Ｇａｅｒｔｎ．）、セロリ（Ａｐｉｕｍ ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ Ｌ． ｖａｒ． ｄｕｌｃｅ ＤＣ）、ナンキョウソウ（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ （Ｌ．） Ｓｗａｒｔｓ）、ムラサキ（Ｌｉｔｈｏｓｐｅｒｍｕｍ ｅｒｙｔｈｒｏｈｉｚｏｎ Ｓｉｅｂ． ｅｔ Ｚｕｃｃ．）等の植物の抽出物中に、かぶれの発生、増悪化の因子である細菌類及び酵素類に対する抗菌作用及び酵素阻害作用を見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
即ち、本発明は、ニンジン（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ Ｌ． ｖａｒ． ｓａｔｉｖａ ＤＣ）、ハラン（Ａｓｐｉｄｉｓｔｒａ ｅｌａｔｉｏｒ Ｂｌ．）、ムクロジ（Ｓａｐｉｎｄｕｓ ｍｕｋｕｒｏｓｓｉ Ｇａｅｒｔｎ．）、セロリ（Ａｐｉｕｍ ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ Ｌ． ｖａｒ． ｄｕｌｃｅ ＤＣ）、ナンキョウソウ（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ （Ｌ．） Ｓｗａｒｔｓ）、ムラサキ（Ｌｉｔｈｏｓｐｅｒｍｕｍ ｅｒｙｔｈｒｏｈｉｚｏｎ Ｓｉｅｂ． ｅｔ Ｚｕｃｃ．）からなる群の中から選ばれる１種以上の植物の抽出物を有効成分とするかぶれ防止機能を有する組成物であって、その機能として、皮膚又は便常在の細菌類に対する抗菌作用と、酵素類に対する阻害作用を併せ持つ事を特徴とするかぶれ防止組成物に関するものである。
また本発明は、上記のかぶれ防止組成物を含有する事を特徴とする繊維製品またはフィルム製品であって、且つ該繊維製品またはフィルム製品を用いた吸収性物品又はワイパーに関するものである。
更に本発明は、上記のかぶれ防止組成物を配合する事を特徴とする皮膚外用剤に関するものである。
【０００８】
【発明の実施の形態】
以下に本発明を詳細に説明する。本発明に於いて使用される植物としては、ニンジン（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ Ｌ． ｖａｒ． ｓａｔｉｖａ ＤＣ）、ハラン（Ａｓｐｉｄｉｓｔｒａ ｅｌａｔｉｏｒ Ｂｌ．）、ムクロジ（Ｓａｐｉｎｄｕｓ ｍｕｋｕｒｏｓｓｉ Ｇａｅｒｔｎ．）、セロリ（Ａｐｉｕｍ ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ Ｌ． ｖａｒ． ｄｕｌｃｅ ＤＣ）、ナンキョウソウ（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ （Ｌ．） Ｓｗａｒｔｓ）、ムラサキ（Ｌｉｔｈｏｓｐｅｒｍｕｍ ｅｒｙｔｈｒｏｈｉｚｏｎ Ｓｉｅｂ． ｅｔ Ｚｕｃｃ．）が挙げられる。
【０００９】
本発明に於けるニンジン（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ Ｌ． ｖａｒ． ｓａｔｉｖａ ＤＣ）とは、セリ科の一年生または二年生草本で、薬効として解痙作用が知られている。本発明で使用するニンジン抽出物とは、当該植物の葉、根、茎、花、種子等の植物体の一部又は全部から抽出されるものであるが、中でも種子からの抽出物が特に好ましい。
【００１０】
本発明に於けるハラン（Ａｓｐｉｄｉｓｔｒａ ｅｌａｔｉｏｒ Ｂｌ．）とは、ユリ科の多年生草本で、薬効として鎮痛、止血作用等が知られている。本発明で使用するハラン抽出物とは、当該植物の葉、根、茎、花、種子等の植物体の一部又は全部から抽出されるものであり、抽出材料に特に限定はない。
【００１１】
本発明に於けるムクロジ（Ｓａｐｉｎｄｕｓ ｍｕｋｕｒｏｓｓｉ Ｇａｅｒｔｎ．）とは、ムクロジ科の落葉或いは常緑の高木で、鎮痛、消炎、解毒等の薬効が知られている。また特開平２−１６０７９８号公報には、当該植物抽出物の糸状菌に対する抗菌作用が開示されている。本発明で使用するムクロジ抽出物とは、当該植物の葉、根、茎、花及び果実等の植物体の一部又は全部から抽出されるものであるが、中でも果皮からの抽出物が特に好ましい。
【００１２】
本発明に於けるセロリ（Ａｐｉｕｍ ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ Ｌ． ｖａｒ． ｄｕｌｃｅ ＤＣ）とは、セリ科の一年生又は二年生草本で、血圧降下作用、抗痙攣作用、抗菌作用等の薬効が知られている。本発明で使用するセロリ抽出物とは、当該植物の葉、根、茎、花、種子等の植物体の一部又は全部から抽出されるものであるが、中でも種子からの抽出物が特に好ましい。
【００１３】
本発明に於けるナンキョウソウ（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ （Ｌ．） Ｓｗａｒｔｓ）とは、ショウガ科の多年生草本で、去痰、殺虫、抗菌作用等の薬効が知られている。本発明で利用するナンキョウソウ抽出物とは、当該植物の葉、根、茎、花、種子等の植物体の一部又は全部から抽出されるものであるが、中でも根からの抽出物が特に好ましい。
【００１４】
本発明に於けるムラサキ（Ｌｉｔｈｏｓｐｅｒｍｕｍ ｅｒｙｔｈｒｏｈｉｚｏｎ Ｓｉｅｂ． ｅｔ Ｚｕｃｃ．）は、ムラサキ科の多年生草本で、抗炎症、抗浮腫、抗腫瘍、抗菌作用等の薬効が知られている。本発明で利用するムラサキ抽出物とは、当該植物の葉、根、茎等その組織の一部を取り、これを常法により培養した後得られる培養細胞、乃至は培養終了後に回収する培養液から抽出されるものである。
【００１５】
本発明において「培養細胞」とは、前記植物の組織片を、植物組織培養培地上で一定期間培養した後に誘導される直径が数μｍ〜数ｍｍの細胞塊の集合体であり、細胞塊の一部がシュートや根に分化せずに未分化の状態を保持する性質を持ち、細胞の生育速度が均質であるものをいう。この培養細胞は、固体培地又は液体培地で培養可能であるが、液体培地で培養した細胞を使用する事が特に好ましい。
【００１６】
ムラサキから組織を取り、これを培養する方法は特に限定されないが、好ましい方法としては、例えば以下の方法が挙げられる。即ち、先ず、ムラサキの組織の一部、例えば子葉から無菌的にカルスを取得し、この中から、シコニン含有量が高く維持された株、又はｐ−Ｏ−β−Ｄ−グルコシル安息香酸（ＰＨＢＯＧ）含有量が高く維持された株を選抜する。次いで、これらの株を１４日毎に継代培養して細胞を増殖させた後、例えばＭ−９培地の様な生産誘導培地で培養する事により、シコニン含有量の高い細胞株、乃至はコーヒー酸誘導体含有量の高い細胞株を得ることが出来る。
【００１７】
本発明に於ける植物から抽出物を得る為には、当該植物乾燥物または生植物の乾物換算当たりに対して２〜２０倍の抽出溶媒が用いられる。
抽出に使用する溶媒としては、一般には水、低級１価アルコール（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール等）、低級アルキルエステル（酢酸エチル等）、炭化水素（ベンゼン、ヘキサン、ペンタン、トルエン）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）エーテル類（ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジプロピルエーテル、アセトニトリル等）が挙げられる。これらの溶媒は、単独で用いても２種以上を混合して用いても良い。
各植物からの抽出方法は特に限定されないが、常温又は加温下で行う事が好ましい。その方法としては浸漬抽出、超音波破砕抽出、ソックスレイ抽出等がある。抽出時間に特に限定はないが、一般的に３０分間から２週間が好ましい。
【００１８】
本発明に関わる抽出物は通常液体の抽出液として得られる。当該抽出液はそのまま使用しても良いが、各種処理を施して得られる処理物を使用する事も可能であり、このような処理物も本発明に関わる抽出物の中に含まれる。その例としては、例えば抽出液を常圧あるいは減圧下で濃縮した抽出液、該濃縮液中の溶媒を蒸発乾固させた固形物、濃縮液から有効成分を晶析後濾別乾燥した固形物等を挙げる事ができる。
【００１９】
本発明によって得られる抽出物は、かぶれを防止する機能を有する。ここで言うかぶれ防止機能とは、かぶれの発生或いは増悪化に関与する各種生物学的因子の作用を抑制する機能であり、具体的には、皮膚、便中に常在する細菌類に対する抗菌作用、及び酵素類に対する阻害作用を示すものを指す。本発明に於いて、抗菌の対象となる皮膚、便中に常在する細菌類としては、既に存在が確認されている細菌類であれば特に限定はないが、例えばＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ属、 Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ属等のバクテリア類やＣａｎｄｉｄａ属、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ属、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ属等の真菌類を挙げることが出来る。中でもバクテリア類としてはＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、 Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓが、また真菌類としてはＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ ｃａｎｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍが抗菌対象として好ましい。更に、阻害の対象となる酵素類としては、その機能がかぶれの発生、悪化に関わるものであれば特に限定はないが、中でもプロテアーゼ、リパーゼ、ウレアーゼが阻害対象として好ましい。本発明によって得られる抽出物は、かぶれ防止機能として、上記細菌類の内の少なくとも４種以上に対する抗菌作用と、プロテアーゼ、リパーゼ、ウレアーゼの中から選ばれる少なくとも２種以上の酵素に対する阻害作用を発現し得るものである。
【００２０】
上記の植物から得られる抽出物をかぶれ防止組成物として使用する場合、該抽出物をそれぞれ単独に用いても良いし、該抽出物の群から選ばれる少なくとも２種以上を混合して用いても良い。また、かぶれ防止組成物として用いる場合の剤型に特に制限はなく、液状、ゲル状、粉末等の形態で使用することができ、更に該抽出物を、ローション、スプレー剤、ムース剤等に配合する事もできる。液状、ゲル状の製品とする場合は抽出物を０．００００１〜１０重量％含有させる事が好ましい。
【００２１】
本発明のかぶれ防止組成物は、使い捨て紙おむつや生理用ナプキン等の吸収性物品に含有させたり、ウェットティッシュ、おしり拭き等のワイパーの薬剤として使用することが出来る。
【００２２】
上記かぶれ防止組成物を吸収性物品に含有させる場合、例えば吸収性物品用の基材に液状のかぶれ防止組成物を含浸するか、またはスプレー法、グラビア印刷法等により該基材表面に塗布する方法により行う事が出来る。中でもグラビア印刷法によって表面塗布する方法が好ましい。
【００２３】
上記かぶれ防止組成物を含有する吸収物品用の基材としては、合成繊維、天然繊維の繊維製品（織布、不織布等）、フィルム製品等、いかなる素材いかなる形状でもよく、吸収性物品の用途に応じて適宜選択可能である。また、対象となる基材は、疎水性、親水性を問わず使用可能である。例えば、疎水性の繊維製品又はフィルム製品にかぶれ防止組成物を含有させる場合、かぶれ防止組成物の処理に先立って、市販の親水化剤を製品表面に塗布するか、或いは物理的手法により製品表面を親水化する事により、効果的にかぶれ防止組成物を含有させる事ができる。この場合、物理的に親水化する方法が特に好ましく、その具体的な方法としては、プラズマ処理法を挙げる事が出来る。更に、上記かぶれ防止組成物を当該基材に含有させる場合、該かぶれ防止組成物は基材の重量の０．０００１〜１０重量％の範囲である事が好ましく、特に０．００１〜１重量％の範囲である事が好ましい。
【００２４】
前記かぶれ防止組成物をウェットティッシュ、おしり拭き等の衛生用ワイパーの薬剤として使用する場合、該かぶれ防止剤は基材の重量の０．００１〜１０重量％の範囲である事が好ましく、特に０．０１〜１重量％の範囲である事が好ましい。
【００２５】
本発明のかぶれ防止組成物は、化粧料や医薬品等の皮膚外用剤として使用することが出来る。この場合、該かぶれ防止組成物の効果を損なわない範囲で、抗炎症剤、保湿剤、栄養補給剤からなる群から選ばれる薬効成分の１種または２種以上を配合する事により、更に効果を高めることが可能である。具体的な薬効剤としては以下のものが例示できる。
【００２６】
（抗炎症剤）
抗炎症剤としては、グリチルリチン酸及びその誘導体、グリチルレチン酸及びその誘導体、チアミン塩酸塩、リボフラビン、酢酸リボフラビン、塩酸ピリドキシン、フラビンアデニンジヌクレオチド、ニコチン酸アミド、塩化コリン、アロエ抽出物、アルニカ抽出物、アシタバ抽出物、ウコン抽出物、キハダ抽出物、オトギリソウ抽出物、カミツレ抽出物、コンフリー抽出物、スイカズラ抽出物、セージ抽出物、ワレモコウ抽出物、シソ抽出物、シラカバ抽出物、ユーカリ抽出物、ヨモギ抽出物、レンゲソウ抽出物、コンドロイチン硫酸及びその誘導体が挙げられる。
【００２７】
（保湿剤）
保湿剤としては、グリセリン、アロエ抽出液、冬虫夏草抽出液、プラセンタ抽出液、ホホバ抽出液、ローヤルゼリー、加水分解コラーゲン、加水分解ケラチン、トレハロース、セラミド、尿素等が挙げられる。
【００２８】
（栄養補給剤）
栄養補給剤としては、グリシン、アラニン、アルギニン、セリン、グルタミン酸、プロリン、スレオニン、リジン等のアミノ酸及びその誘導体、ビタミンＣ及びその誘導体、パントテン酸カルシウム、ニコチン酸アミド、チアミン塩酸塩、リボフラビン、塩酸ピリドキシン、ビオチン等のビタミン類が挙げられる。
【００２９】
また、本発明のかぶれ防止剤には、上記の抗炎症剤、保湿剤、栄養補給剤に加えて、必要に応じて通常の皮膚外用剤に用いられる添加物、例えば水性成分、油性成分、粉末成分、アルコール類、エステル類、界面活性剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、増粘剤、色剤、香料、ｐＨ調整剤、キレート剤等の成分を配合する事が出来る。
【００３０】
【実施例】
以下、実施例および比較例により本発明を更に具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００３１】
（実施例１）ニンジン（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ Ｌ． ｖａｒ． ｓａｔｉｖａ ＤＣ）の種子５０ｇをヘキサン（１．５Ｌ）で３日間、室温で浸漬抽出した。吸引濾過により抽出液と残渣を濾別した後、得られた抽出液を濃縮し、ニンジン抽出物４．８ｇを得た。
【００３２】
（実施例２）ハラン（Ａｓｐｉｄｉｓｔｒａ ｅｌａｔｉｏｒ Ｂｌ．）の乾燥植物体５０ｇをメタノール（１．５Ｌ）で３日間、室温で浸漬抽出した。吸引濾過により抽出液と残渣を濾別した後、得られた抽出液を濃縮し、ハラン抽出物４．３ｇを得た。
【００３３】
（実施例３）ムクロジ（Ｓａｐｉｎｄｕｓ ｍｕｋｕｒｏｓｓｉ Ｇａｅｒｔｎ．）の果皮５０ｇをメタノール（１．５Ｌ）で３日間、室温で浸漬抽出した。吸引濾過により抽出液と残渣を濾別した後、得られた抽出液を濃縮し、ムクロジ抽出物３１．３ｇを得た。
【００３４】
（実施例４）ムクロジの果皮５０ｇを７０％エタノール（１．５Ｌ）で３日間、室温で浸漬抽出した。吸引濾過により抽出液と残渣を濾別した後、得られた抽出液を濃縮し、ムクロジ抽出物２３．１ｇを得た。
【００３５】
（実施例５）セロリ（Ａｐｉｕｍ ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ Ｌ． ｖａｒ． ｄｕｌｃｅ ＤＣ）の種子５０ｇをヘキサン（１．５Ｌ）で３日間、室温で浸漬抽出した。吸引濾過により抽出液と残渣を濾別した後、得られた抽出液を濃縮し、セロリ抽出物５．１ｇを得た。
【００３６】
（実施例６）ナンキョウソウ（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ （Ｌ．） Ｓｗａｒｔｓ）の乾燥根茎５０ｇをメタノール（１．５Ｌ）で３日間、室温で浸漬抽出した。吸引濾過により抽出液と残渣を濾別した後、得られた抽出液を濃縮し、ナンキョウソウ抽出物７．３ｇを得た。
【００３７】
（実施例７）ナンキョウソウの乾燥根茎５０ｇを７０％エタノール（１．５Ｌ）で３日間、室温で浸漬抽出した。吸引濾過により抽出液と残渣を濾別した後、得られた抽出液を濃縮し、ナンキョウソウ抽出物６．６ｇを得た。
【００３８】
（実施例８）シコニン含有量の高いムラサキ（Ｌｉｔｈｏｓｐｅｒｍｕｍ ｅｒｙｔｈｒｏｈｉｚｏｎ Ｓｉｅｂ． ｅｔ Ｚｕｃｃ．）培養細胞の乾燥体５０ｇをトルエン（１．５Ｌ）で３日間、室温で浸漬抽出した。吸引濾過により抽出液と残渣を濾別した後、得られた抽出液を濃縮し、シコニン含有ムラサキ抽出物９．１ｇを得た。
【００３９】
（実施例９）コーヒー酸誘導体含有量の高いムラサキ培養細胞の乾燥体５０ｇを５０％エタノール（１．５Ｌ）で３日間、室温で浸漬抽出した。吸引濾過により抽出液と残渣を濾別した後、得られた抽出液を濃縮し、コーヒー酸誘導体含有ムラサキ抽出物２．６ｇを得た。
【００４０】
（試験例１）実施例１〜９で得られた抽出物について、各菌株に対する最小生育阻止濃度（ＭＩＣ）を調べた。以下にその具体的方法を記す。
［試験菌株］
【００４１】
［増殖用培地］
【００４２】
［感受性試験用培地］
【００４３】
［感受性測定用平板培地の作成］
実施例１〜９で得られた抽出物を、１０重量％になるようジメチルスルホキシド（以下ＤＭＳＯ）に溶解し溶解原液を作成した後、各溶解原液をＤＭＳＯで順次２倍希釈し、２倍系列希釈液を調製した。次に滅菌、溶解後５０〜６０℃に保った各感受性測定用培地に、各溶解原液及び各２倍系列希釈液を１／９９量添加し、十分に混和後、シャーレに分注、固化させて感受性測定用平板培地を作成した。
【００４４】
［摂取用菌液の調製］
上記の増殖用培地に各菌株を摂取し、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ及びＭｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓは３０℃で１８〜２０時間、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓは２５℃で２日間、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ ｃａｎｉｓとＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍは２５℃で１４日間、夫々増殖培養を行った。培養終了後、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓ及びＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓの３菌株は、夫々の増殖用培地で菌数が１０６／ｍＬとなるように希釈し、摂取用菌液とした。Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ ｃａｎｉｓ及びＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍの２菌株は、増殖培養終了後、形成された胞子（分生子）をポリソルベート８０を０．０５％添加した滅菌生理食塩水に浮遊させ、胞子数が約１０６／ｍＬとなるよう調製し、摂取用菌液とした。
【００４５】
［感受性測定試験］
上記感受性測定平板培地に摂取用菌液を樹脂製ループ（内径約１ｍｍ）を用いて１〜２ｃｍ程度線画塗沫し、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉは３０℃で１８〜２０時間、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓは３０℃で２日間、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓは２５℃で２日間、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ ｃａｎｉｓ及びＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍは２５℃で１４日間、夫々培養した。培養終了後、発育の有無を肉眼で観察し、発育が阻止された最小濃度をもって各菌株に対する最小発育阻止濃度とした。その結果を表１に示す。
【００４６】
【表１】
【００４７】
実施例１〜９で得られた抽出物を、１０００、１００、１０、１μｇ／ｍＬの濃度になるようＤＭＳＯに溶解しサンプル溶液を作成した後、これらサンプル溶液を用いてプロテアーゼ（トリプシン及びＶ８プロテアーゼ）、リパーゼ及びウレアーゼに対する阻害活性を測定した。以下にその具体的方法を記す。
【００４８】
（試験例２）プロテアーゼ阻害試験：
［トリプシン阻害活性測定法］
測定にはＥｎＣｈｅｃｋＴＭ Ｐｒｏｔｅａｓｅ Ａｓｓａｙ ｋｉｔｓ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ、カタログ番号Ｅ−６６３９）を用いた。９６穴のブラックプレートに、各サンプル溶液を２０μＬ、付属のＤｉｇｅｓｔｉｏｎバッファーを７０μＬ、１５μｇ／ｍＬトリプシン（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｔ７１６８）を１０μＬ加え総容量を１００μＬにした後、１０μｇ／ｍＬの付属の基質（ＢＯＤＩＰＹ ＴＲ−Ｘ ｃａｓｅｉｎ）を１００μＬ加え、遮光下で３７℃で１時間反応した。反応終了後、各反応液中の蛍光強度を、励起波長５８４ｎｍ、蛍光波長６１２ｎｍにて測定した。
各サンプル溶液のトリプシン阻害活性は、反応終了後の酵素残存率（％）により評価した。すなわち、サンプル溶液の代わりにＤＭＳＯを加えた反応系に於いて、酵素を０〜２０μｇ／ｍＬ加えた時の夫々の蛍光強度を求めた後、各酵素量に対する蛍光強度をプロットし検量線を作成した。酵素残存率はこの検量線を基に、以下の計算式により式により算出した。
酵素残存率（％）＝［（Ｓ０／ａ）／（Ｓ１／ａ）］ｘ１００
Ｓ０：サンプル溶液が入った反応系の蛍光強度、Ｓ１：サンプル溶液の代わりにＤＭＳＯを入れた反応系の蛍光強度、ａ：検量線の傾き。
各サンプル溶液を添加した時に、酵素残存率が５０％以下になる濃度を表２に示す。
【００４９】
［Ｖ８プロテアーゼ阻害活性測定法］
上記のトリプシン阻害活性測定法に於いて、トリプシンの代わりに５００Ｕ／ｍＬのＶ８プロテアーゼ（ＩＣＮ、カタログ番号１５１９７２、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ由来）を１０μＬ加えた事、及び検量線の作成に於いて、酵素を０〜７５０Ｕ／ｍＬ加えた以外は、該試験法と同様に操作した。その結果を表２に示す。
【００５０】
（試験例３）リパーゼ阻害試験：
９６穴のブラックプレートに、各サンプル溶液を２０μＬ、０．１Ｍクエン酸リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を７０μＬ、８００Ｕ／ｍリパーゼ（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｌ０３８２、Ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｎｃｒｅａｓ由来）を１０μＬ加え総容量を１００μＬにした後、１００μＭ４−メチルウンベリフェリルオレエート（ＮＢＳｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ、カタログ番号１６３８５−Ｂ）を１００μＬ加え、遮光下で３７℃で１時間反応した。反応終了後、各反応液中の蛍光強度を、励起波長３５５ｎｍ、蛍光波長４６０ｎｍにて測定した。
各サンプル溶液のリパーゼ阻害活性は、反応終了後の酵素残存率（％）により評価した。すなわち、サンプル溶液の代わりにＤＭＳＯを加えた反応系に於いて、酵素を０〜１０μｇ／ｍＬ加えた時の夫々の蛍光強度を求めた後、各酵素量に対する蛍光強度をプロットし検量線を作成した。酵素残存率はこの検量線を基に、以下の計算式により式により算出した。
酵素残存率（％）＝［（Ｓ０／ａ）／（Ｓ１／ａ）］×１００
Ｓ０：サンプル溶液が入った反応系の蛍光強度、Ｓ１：サンプル溶液の代わりにＤＭＳＯを入れた反応系の蛍光強度、ａ：検量線の傾き。
各サンプル溶液を添加した時に、酵素残存率が５０％以下になる濃度を表２に示す。
【００５１】
（試験例４）ウレアーゼ阻害試験：
９６穴プレートに、各サンプル溶液を１０μＬ、１Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）を１０μＬ、滅菌蒸留水を２０μＬ、０．２５Ｍ尿素水溶液を１０μＬ、４Ｕ／ｍＬウレアーゼ（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｕ７１７２、Ｂｃｉｌｌｕｓ ｐａｓｔｅｕｒｉ由来）を５０μＬ夫々加え総容量を１００μＬにした後、シーリングフィルムで密封し３７℃で２時間インキュベートした。反応終了後、０．００２％フェノールレッド水溶液が１００μＬ入った別の９６穴プレートに、先程密封に使用したシーリングフィルムを張替えた後、フェノールレッドの５４０ｎｍに於ける吸光度を継時的に測定し、吸光度が一定になった時の値を各反応液の測定値とした。
各サンプル溶液のウレアーゼ阻害活性は、反応終了後の酵素残存率（％）により評価した。すなわち、サンプル溶液の代わりにＤＭＳＯを加えた反応系に於いて、酵素を０〜６μｇ／ｍＬ加えた時の夫々の測定値を求めた後、各酵素量に対する測定値をプロットし検量線を作成した。酵素残存率はこの検量線を基に、以下の計算式により式により算出した。
酵素残存率（％）＝［（Ｓ０／ａ）／（Ｓ１／ａ）］ｘ１００
Ｓ０：サンプル溶液が入った反応系の測定値、Ｓ１：サンプル溶液の代わりにＤＭＳＯを入れた反応系の測定値、ａ：検量線の傾き。
各サンプル溶液を添加した時に、酵素残存率が５０％以下になる濃度を表２に示す。
【００５２】
【表２】
【００５３】
以上、試験例１〜４の結果から、実施例１〜９で得られる植物抽出物が、本発明で定義するところのかぶれ防止機能を有する事を確認した。
【００５４】
（試験例５）実施例４のムクロジ抽出物及び実施例７のナンキョウソウ抽出物を夫々含浸させた不織布について、ハローテストによる抗菌試験を行った。以下にその具体的な方法を記す。
【００５５】
［抗菌試験用不織布の作成］
（実施例１０）ポリプロピレンを原料とする繊維径２．１デニールの連続長繊維からなる目付量が１５ｇ〜２５／ｍ２のスパンボンド不織布を作成した後、この不織布に市販の親水化剤（商品名：シラストールＰＨＰ２６、Ｓｃｈｉｌｌ＆Ｓｅｉｌａｃｈｅｒ社製）を、０．１〜１塗布量％の範囲になるよう塗布し、親水化剤処理不織布を作成した。次に、ムクロジ抽出物を該親水化剤処理不職布に対して０．１重量％含有するよう含浸させ、試験用不織布を作成した。
【００５６】
（実施例１１）実施例１０に於いて、ムクロジ抽出物の代わりに、ナンキョウソウの抽出物を親水化剤塗布不職布に対して０．１重量％含有するよう含浸させた以外は、該実施例と同様に操作し、試験用不織布を作成した。
【００５７】
（比較例１）実施例１０に於いて、ムクロジエキスを含浸させない以外は、該実施例と同様に操作し、試験用不織布を作成した。
【００５８】
（実施例１２）ポリプロピレンを原料とする繊維径２．１デニールの連続長繊維からなる目付量が１５〜２５ｇ／ｍ２のスパンボンド不織布を作成した後、真空プラズマ処理を行なった。処理に用いた装置は、ロールツーロール型の真空プラズマ処理装置であり、幅２０ｃｍの不織布を最大１００ｍ／ｍｉｎ．の速度でプラズマ処理することができる。プラズマ処理に用いた条件は、酸素ガス流量１００ｓｃｃｍ、処理時圧力２０Ｐａ、電力密度 １．６Ｗ／ｃｍ２（平行平板型電極）である。送り速度５０ｍ／ｍｉｎ．にてプラズマ処理を実施することにより、親水化不織布を得た。次いで，ムクロジ抽出物を該プラズマ処理不職布に対して０．１重量％含有するよう含浸させ、試験用不織布を作成した。
【００５９】
（実施例１３）実施例１２に於いて、ムクロジ抽出物の代わりに、ナンキョウソウの抽出物をプラズマ処理不職布に対して０．１重量％含有するよう含浸させた以外は、該実施例と同様に操作し、試験用不織布を作成した。
【００６０】
（比較例２）実施例１２に於いて、ムクロジエキスを含浸させない以外は、該実施例と同様に操作し、試験用不織布を作成した。
【００６１】
［ハローテスト用平板培地の作成］
試験例１に記載の方法に従い各摂取用菌液を調整した後、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ及びＭｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓはＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ ＩＩ ａｇａｒ培地に、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ ｃａｎｉｓ及びＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍはサブロー寒天培地に、夫々各摂取用菌液を１／１０量添加し、十分に混和後、シャーレに分注、固化させてハローテスト用平板培地を作成した。
【００６２】
［ハローテスト］
実施例１０〜１３及び比較例１、２で得られた試験用不織布を夫々３ｃｍ四方の正方形に裁断し、上記のハローテスト用平板培地上に載せた後、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉは３０℃で１８〜２０時間、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓは３０℃で２日間、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓは２５℃で２日間、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ ｃａｎｉｓ及びＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍは２５℃で１４日間、培養した。培養終了後、試験用不織布周囲のハローの有無を肉眼で観察し、抗菌活性を判定した。その結果を表３に示す。
【００６３】
【表３】
【００６４】
以上の結果から、ムクロジ抽出物及びナンキョウソウ抽出物を含有した不織布に於いても、抗菌作用を発現し得る事を確認した。
【００６５】
（試験例６）実施例１０〜１３及び比較例１、２で得られた不織布を用いて使い捨て紙おむつを作成すると共に、これを用いてモニター試験を実施した。以下にその具体的な方法を記す。
【００６６】
［モニター試験用紙おむつの作成］
（実施例１４）市販の乳幼児用使い捨て紙おむつ（商品名：メリーズ、花王株式会社製、Ｌサイズ）のトップシートを剥がした後、実施例１０で記載の方法に従い作成したムクロジ抽出物含有不織布を張り替え、モニター試験用紙おむつを作成した。
【００６７】
（実施例１５）実施例１４に於いて、ムクロジ抽出物含有不織布の代わりに、実施例１１記載のナンキョウソウ抽出物含有不織布を使用した以外は、該実施例と同様に操作し、モニター試験用紙おむつを作成した。
【００６８】
（比較例３）実施例１４に於いて、ムクロジ抽出物含有不織布の代わりに、比較例１記載の植物抽出物未処理不織布を使用した以外は、該実施例と同様に操作し、モニター試験用紙おむつを作成した。
【００６９】
（実施例１６）上記の市販の乳幼児用使い捨て紙おむつのトップシートを剥がした後、実施例１２で記載の方法に従い作成したムクロジ抽出物含有不織布を張り替え、モニター試験用紙おむつを作成した。
【００７０】
（実施例１７）実施例１６に於いて、ムクロジ抽出物含有不織布の代わりに、実施例１３記載のナンキョウソウ抽出物含有不織布を使用した以外は、該実施例と同様に操作し、モニター試験用紙おむつを作成した。
【００７１】
（比較例４）実施例１６に於いて、ムクロジ抽出物含有不織布の代わりに、比較例２記載の植物抽出物未処理不織布を使用した以外は、該実施例と同様に操作し、モニター試験用紙おむつを作成した。
【００７２】
［モニター試験］
乳幼児用紙おむつ使用中の赤ちゃん４８名（平均月齢１８ヶ月）を無作為に８名ずつ６つのグループに分けた後、夫々に実施例１４〜１７及び比較例３、４で作成したモニター試験用紙おむつを配布した。試験結果は、配布した紙おむつを１０日間ずつ使用してもらった後に、母親からの回答により得た。その結果を表４に示す。
【００７３】
【表４】
【００７４】
モニター試験の結果、ムクロジ抽出物を含有する紙おむつ（実施例１４、１６）、ナンキョウソウ抽出物を含有する紙おむつ（実施例１５、１７）共に、上記の抽出物を含有しない紙おむつ（比較例３、４）に比べかぶれにくいとと答えた人が増えた事から、上記抽出物はかぶれ防止に効果があると判断した。また、上記抽出物の処理に先立って行った不織布の親水化方法に関しては、親水化剤を使用した試験区（実施例１４、１５）に比べ、プラズマ処理した試験区（実施例１６、１７）に於いて、かぶれにくいと回答した人の数が増加する傾向が認められた。この事から、ポリプロピレンを原料とする不織布に上記植物抽出物を含有させるに当っては、物理的に親水化する方法、即ちプラズマ処理により親水化する方法がより好適であることを確認した。
【００７５】
（実施例１８、１９）
実施例４のムクロジ抽出物、及び実施例７のナンキョウソウ抽出物を配合した皮膚外用剤として、液体石鹸の配合例を実施例１８、１９として以下に示す。各種配合成分、及び配合割合を表５に示す。なお、配合割合は重量％である。
【００７６】
【表５】
【００７７】
【発明の効果】
本発明によって得られるニンジン、ハラン、ムクロジ、セロリ、ナンキョウソウ、ムラサキの抽出物は、かぶれ発生、増悪化の原因である細菌類及び酵素類の増殖抑制乃至は阻害機能を有しており、おむつかぶれの防止に有効である事が明らかになった。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a composition derived from a plant extract that is effective for suppressing the growth of bacteria and enzymes that are the cause of rashes and deterioration, or for inhibiting the function. The present invention also relates to a fiber product or a film product containing the composition, and an absorbent article or wiper using the same. Furthermore, this invention relates to the skin external preparation which mix | blended this composition.
[0002]
[Prior art]
Conventionally, the occurrence of rash has been regarded as a problem in absorbent articles such as disposable paper diapers and sanitary napkins that are in direct contact with the human body. In general, it is considered that the occurrence of rash involves various biological factors derived from the human body in addition to cutting and rubbing due to friction between the skin and the absorbent article. For example, in the process of diaper rash, urine and feces are first mixed inside the diaper, and this environment is the gastrointestinal tract of bacteria, proteases, lipases, etc. Activate the enzyme. When activated, these biological factors directly irritate the skin and ultimately cause irritation. In addition, urease produced by some bacteria is involved in the generation of ammonia, a factor that exacerbates rash. Furthermore, the skin surface where rash has occurred is suitable for the growth of fungi such as Candida and filamentous fungi, and the symptom of rash becomes worse as these grow. As described above, rashes are caused by various factors (stimulants) involved in a complex manner.
[0003]
In the past, attempts have been made to prevent diaper rash from the viewpoint of inhibiting bacterial growth. For example, Japanese Patent Application Laid-Open No. 61-28078 proposes a cloth or paper product coated with Kumazasa, pearl barley and other plant extract oils. JP-B 63-54013, JP-A 63-175117, and JP-A 1-250413 disclose fibers imparted with antibacterial properties by ion dissociation of an antibacterial metal supported on zeolite, and fibers. A product has been proposed. In addition, there are also those provided with antibacterial properties using biguanite derivatives and organic silicon quaternary ammonium salts. JP-A-5-5274 discloses a deacetylated product of chitin, JP-A-9-108261 discloses inclusion of glycyrrhizin or phytoncide in cyclodextrin, and JP-A 2000-110067 discloses a tocoprotein. Textile products to which phenol is added have been proposed as base materials for suppressing rash. However, as mentioned above, considering that diaper rash is a product of multiple stimuli including the action of enzymes as well as the growth of microorganisms, antibacterial action alone has insufficient functions for rash suppression. .
[0004]
[Patent Document 1] Japanese Patent Laid-Open No. 61-28078
[Patent Document 2] Japanese Patent Publication No. 63-54013
[Patent Document 3] Japanese Patent Laid-Open No. 63-175117
[Patent Document 4] JP-A-1-250413
[Patent Document 5] JP-A-5-5274
[Patent Document 6] JP-A-9-108261
[Patent Document 7] Japanese Patent Application Laid-Open No. 2000-110067
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
The present invention provides a rash prevention composition derived from a plant extract which has not only an antibacterial action but also an inhibitory action against enzymes related to the occurrence and deterioration of rash, and the rash prevention, in order to realize more effective rash prevention. The purpose is to provide various products using the composition.
[0006]
[Means for solving the problems]
As a result of diligent research, the present investigators have found that carrots (Daucus carota L. var. Sativa DC), Haran (Aspidistra elatior Bl.), Mukuroji (Sapindus mukurossi Gaertn. Gravelolens L. var. DUDC (DC), Antarctic galanga (L.) Swarts, Murasaki (Lithosperum erythrohizon Sieb. et Zucc.) The inventors have found antibacterial action and enzyme inhibitory action against sucrose and enzymes, and have completed the present invention.
[0007]
That is, the present invention includes carrots (Daucus carota L. var. Sativa DC), Haran (Aspidistra elicitor Bl.), Mugwort (Sapindus mukurossi Gaertn.), Celery (Apium gravol. (L.) Swarts), Murasaki (Lithosperum erythrohizon Sieb. Et Zucc.), A composition having an anti-rash function comprising an extract of one or more plants selected from the group consisting of: It relates to a rash prevention composition characterized by having both an antibacterial action against bacteria resident on the skin or feces and an inhibitory action against enzymes. That.
The present invention also relates to a fiber product or film product containing the above-mentioned anti-rash composition, and to an absorbent article or wiper using the fiber product or film product.
Furthermore, this invention relates to the skin external preparation characterized by mix | blending said rash prevention composition.
[0008]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The present invention is described in detail below. Plants used in the present invention include carrots (Daucus carota L. var. Sativa DC), halans (Aspidistra elatior Bl.), Mugwort (Sapindus mukurssi Gaertn.), Celery (Apig. ), Alpinia galanga (L.) Swarts, and Murasaki (Lithosperum erythrohizon Sieb. Et Zucc.).
[0009]
The carrot (Daucus carota L. var. Sativa DC) in the present invention is an annual or biennial herb of the ciraceae, and its anticonvulsant action is known as a medicinal effect. The carrot extract used in the present invention is extracted from part or all of the plant body such as leaves, roots, stems, flowers, seeds, etc., among which the extract from seeds is particularly preferable. .
[0010]
In the present invention, Haran (Aspidistra elatior Bl.) Is a perennial herb belonging to the family Liliaceae, and is known to have analgesia, hemostasis and the like as its medicinal effects. The halan extract used in the present invention is extracted from a part or all of a plant body such as leaves, roots, stems, flowers and seeds of the plant, and the extraction material is not particularly limited.
[0011]
In the present invention, sacrodus (Sapindus mukurossi Gaertn.) Is a deciduous or evergreen tree in the family Mukurodidae, and is known for its medicinal effects such as analgesia, anti-inflammatory and detoxification. JP-A-2-160798 discloses the antibacterial action of the plant extract against filamentous fungi. The extract of mugwort used in the present invention is extracted from a part or all of a plant body such as leaves, roots, stems, flowers and fruits of the plant, among which an extract from the skin is particularly preferable. .
[0012]
Celery in the present invention (Apium graveolens L. var. Duul DC) is an annual or biennial herb of the celery family and is known to have medicinal effects such as blood pressure lowering action, anticonvulsant action, antibacterial action and the like. The celery extract used in the present invention is extracted from part or all of the plant body such as leaves, roots, stems, flowers, seeds, etc., among which the extract from seeds is particularly preferable. .
[0013]
In the present invention, “Alpinia galanga (L.) Swarts” is a perennial herb of Ginger family, and its medicinal effects such as expectorant, insecticidal, antibacterial action and the like are known. The extract of nanpasou used in the present invention is extracted from a part or all of a plant body such as leaves, roots, stems, flowers, seeds, etc., among which extracts from roots are particularly preferable. .
[0014]
Murasaki (Lithospermum erythrohizon Sieb. Et Zucc.) In the present invention is a perennial herb belonging to the family Murasaki, and is known to have medicinal effects such as anti-inflammatory, anti-edema, anti-tumor and antibacterial action. The Murasaki extract used in the present invention is a cultured cell obtained after taking a part of the tissue such as leaves, roots and stems of the plant and culturing it by a conventional method, or a culture solution collected after the end of the culture. Is extracted from
[0015]
In the present invention, the “cultured cell” is an aggregate of cell clusters having a diameter of several μm to several mm that are induced after culturing the plant tissue pieces on a plant tissue culture medium for a certain period of time. Some have the property of maintaining an undifferentiated state without differentiation into shoots and roots, and the cell growth rate is homogeneous. The cultured cells can be cultured in a solid medium or a liquid medium, but it is particularly preferable to use cells cultured in a liquid medium.
[0016]
A method for taking a tissue from Murasaki and culturing the tissue is not particularly limited, but preferred methods include, for example, the following methods. That is, first, callus is aseptically obtained from a part of Murasaki's tissue, for example, cotyledons, and from this, a strain in which the shikonin content is maintained high, or p-O-β-D-glucosylbenzoic acid (PHBOG). ) Select strains with high content. Subsequently, these strains are subcultured every 14 days to proliferate the cells, and then cultured in a production induction medium such as M-9 medium, so that a cell line having a high shikonin content or caffeic acid is obtained. A cell line with a high derivative content can be obtained.
[0017]
In order to obtain an extract from a plant in the present invention, 2 to 20 times the extraction solvent is used per dry matter of the plant dry matter or raw plant.
Solvents used for extraction are generally water, lower monohydric alcohols (methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, etc.), liquid polyhydric alcohols (1,3-butylene glycol) , Propylene glycol, etc.), lower alkyl esters (ethyl acetate, etc.), hydrocarbons (benzene, hexane, pentane, toluene), ketones (acetone, methyl ethyl ketone, etc.) ethers (diethyl ether, tetrahydrofuran, dipropyl ether, acetonitrile, etc.) Is mentioned. These solvents may be used alone or in combination of two or more.
The extraction method from each plant is not particularly limited, but it is preferably performed at room temperature or under heating. Examples of the method include immersion extraction, ultrasonic crushing extraction, and soxhlet extraction. The extraction time is not particularly limited, but generally 30 minutes to 2 weeks is preferable.
[0018]
The extract according to the present invention is usually obtained as a liquid extract. Although the said extract may be used as it is, it is also possible to use the processed material obtained by performing various processes, and such a processed material is also contained in the extract concerning this invention. Examples thereof include, for example, an extract obtained by concentrating the extract under normal pressure or reduced pressure, a solid obtained by evaporating the solvent in the concentrate to dryness, a solid obtained by crystallization of an active ingredient from the concentrate, and then filtered and dried. Etc.
[0019]
The extract obtained by the present invention has a function of preventing rash. The rash prevention function mentioned here is a function that suppresses the action of various biological factors involved in the occurrence or aggravation of rash, and specifically, an antibacterial action against bacteria resident in the skin and stool. And those showing an inhibitory action on enzymes. In the present invention, there are no particular limitations on the bacteria that are permanently present in the skin and stool, which are subject to antibacterial activity, as long as they are already confirmed to exist, such as Escherichia, Micrococcus, etc. Examples include bacteria, fungi such as Candida genus, Microsporum genus, and Trichophyton genus. Among them, Escherichia coli and Micrococcus luteus are preferable as bacteria, and Candida albicans, Microsporium canis and Trichophyton rubrum are preferable as antibacterials. Furthermore, the enzymes to be inhibited are not particularly limited as long as their functions are related to the occurrence or deterioration of rash, but among them, protease, lipase, and urease are preferable as the inhibition target. The extract obtained by the present invention exhibits antibacterial activity against at least 4 or more of the above bacteria and an inhibitory activity against at least 2 or more enzymes selected from protease, lipase, and urease as a rash prevention function. It is possible.
[0020]
When the extract obtained from the above plant is used as a rash prevention composition, each of the extracts may be used alone, or at least two kinds selected from the group of the extracts may be mixed and used. good. In addition, there is no particular limitation on the dosage form when used as a rash prevention composition, it can be used in the form of liquid, gel, powder, etc., and the extract is further blended with lotion, spray, mousse, etc. You can also do it. When a liquid or gel product is used, the extract is preferably contained in an amount of 0.00001 to 10% by weight.
[0021]
The anti-rash composition of the present invention can be contained in absorbent articles such as disposable paper diapers and sanitary napkins, and can be used as a wiper medicine such as wet tissues and wipes.
[0022]
When the above-mentioned anti-rash composition is contained in an absorbent article, for example, the base material for the absorbent article is impregnated with a liquid anti-rash composition, or is applied to the surface of the base material by a spray method, a gravure printing method, or the like. It can be done by the method. Among these, a method of applying a surface by a gravure printing method is preferable.
[0023]
As a base material for an absorbent article containing the above-mentioned anti-rash composition, any material such as synthetic fiber, natural fiber fiber product (woven fabric, non-woven fabric, etc.), film product, etc. may be used. It can be appropriately selected depending on the situation. Moreover, the target base material can be used regardless of hydrophobicity or hydrophilicity. For example, when an anti-rash composition is contained in a hydrophobic fiber product or film product, a commercially available hydrophilizing agent is applied to the product surface prior to the treatment of the anti-rash composition, or the product surface is obtained by a physical technique. By making the surface hydrophilic, it is possible to effectively contain an anti-rash composition. In this case, a method of physically hydrophilizing is particularly preferable, and a specific example of the method is a plasma treatment method. Further, when the above-mentioned anti-rash composition is contained in the base material, the anti-rash composition is preferably in the range of 0.0001 to 10% by weight, particularly 0.001 to 1% by weight of the base material. It is preferable that it is the range.
[0024]
When the anti-rash composition is used as a chemical for sanitary wipes such as wet tissues and wipes, the anti-rash agent is preferably in the range of 0.001 to 10% by weight of the weight of the substrate, particularly 0. It is preferably in the range of 0.01 to 1% by weight.
[0025]
The anti-rash composition of the present invention can be used as an external preparation for skin such as cosmetics and pharmaceuticals. In this case, by adding one or more medicinal components selected from the group consisting of an anti-inflammatory agent, a moisturizer, and a nutritional supplement within a range that does not impair the effect of the rash prevention composition, the effect can be further improved. It is possible to increase. The following can be illustrated as a specific medicinal agent.
[0026]
(Anti-inflammatory agent)
Anti-inflammatory agents include glycyrrhizic acid and its derivatives, glycyrrhetinic acid and its derivatives, thiamine hydrochloride, riboflavin, riboflavin acetate, pyridoxine hydrochloride, flavin adenine dinucleotide, nicotinamide, choline chloride, aloe extract, arnica extract, Ashitaba extract, Turmeric extract, Yellowfin extract, Hypericum extract, Chamomile extract, Comfrey extract, Honeysuckle extract, Sage extract, Walnut extract, Perilla extract, Birch extract, Eucalyptus extract, Artemisia extract An extract, an Astragalus extract, chondroitin sulfate and its derivative are mentioned.
[0027]
(Humectant)
Examples of the humectant include glycerin, aloe extract, cordyceps extract, placenta extract, jojoba extract, royal jelly, hydrolyzed collagen, hydrolyzed keratin, trehalose, ceramide, urea and the like.
[0028]
(Nutrition supplement)
Nutritional supplements include amino acids such as glycine, alanine, arginine, serine, glutamic acid, proline, threonine, lysine and derivatives thereof, vitamin C and derivatives thereof, calcium pantothenate, nicotinamide, thiamine hydrochloride, riboflavin, pyridoxine hydrochloride And vitamins such as biotin.
[0029]
In addition to the anti-inflammatory agent, moisturizer, and nutritional supplement described above, the anti-rash agent of the present invention includes additives that are used in normal skin external preparations as necessary, for example, aqueous components, oily components, and powders. Components such as components, alcohols, esters, surfactants, antioxidants, ultraviolet absorbers, thickeners, colorants, fragrances, pH adjusters, chelating agents and the like can be blended.
[0030]
【Example】
EXAMPLES Hereinafter, although an Example and a comparative example demonstrate this invention further more concretely, the scope of the present invention is not limited to these Examples.
[0031]
Example 1 50 g of carrot (Daucus carota L. var. Sativa DC) seeds were soaked and extracted with hexane (1.5 L) at room temperature for 3 days. After the extract and the residue were separated by suction filtration, the obtained extract was concentrated to obtain 4.8 g of a carrot extract.
[0032]
(Example 2) 50 g of a dried plant body of Haran (Aspidistra elatior Bl.) Was extracted by immersion in methanol (1.5 L) at room temperature for 3 days. After the extract and the residue were separated by suction filtration, the resulting extract was concentrated to obtain 4.3 g of a halan extract.
[0033]
(Example 3) 50 g of the peel of Sapindus mukurossi Gaertn. Was immersed and extracted with methanol (1.5 L) at room temperature for 3 days. After the extract and the residue were separated by suction filtration, the obtained extract was concentrated to obtain 31.3 g of Mukuroji extract.
[0034]
(Example 4) 50 g of peel of mukuroji was extracted by immersion in 70% ethanol (1.5 L) for 3 days at room temperature. After the extract and the residue were separated by suction filtration, the obtained extract was concentrated to obtain 23.1 g of Mukuroji extract.
[0035]
(Example 5) 50 g of seeds of celery (Apium graveolens L. var. Duul DC) were subjected to immersion extraction with hexane (1.5 L) for 3 days at room temperature. After the extract and the residue were separated by suction filtration, the obtained extract was concentrated to obtain 5.1 g of celery extract.
[0036]
(Example 6) 50 g of dried rhizomes of Alpinia galanga (L. Swarts) were immersed and extracted with methanol (1.5 L) at room temperature for 3 days. The extract and the residue were separated by suction filtration, and then the obtained extract was concentrated to obtain 7.3 g of an extract of Nansou.
[0037]
(Example 7) 50 g of dried dried rhizomes were immersed in 70% ethanol (1.5 L) for 3 days at room temperature. The extract and the residue were separated by suction filtration, and then the obtained extract was concentrated to obtain 6.6 g of a salamander extract.
[0038]
(Example 8) 50 g of dried dried cultured cells (Lithospermum erythrohizon Sieb. Et Zucc.) Cultured cells were extracted by immersion in toluene (1.5 L) at room temperature for 3 days. After the extract and the residue were separated by suction filtration, the obtained extract was concentrated to obtain 9.1 g of Shikonin-containing Murasaki extract.
[0039]
(Example 9) 50 g of dried dried cells of Murasaki cultured cells having a high content of caffeic acid derivative were immersed and extracted with 50% ethanol (1.5 L) for 3 days at room temperature. After the extract and the residue were separated by suction filtration, the obtained extract was concentrated to obtain 2.6 g of a caffeic acid derivative-containing Murasaki extract.
[0040]
(Test Example 1) The minimum growth inhibitory concentration (MIC) for each strain was examined for the extracts obtained in Examples 1-9. The specific method is described below.
[Test strain]
[Growth medium]
[Sensitivity test medium]
[Preparation of plate medium for sensitivity measurement]
The extract obtained in Examples 1 to 9 was dissolved in dimethyl sulfoxide (hereinafter DMSO) so as to be 10% by weight to prepare a dissolution stock solution. Then, each dissolution stock solution was sequentially diluted 2 times with DMSO, and 2 times series. A dilution was prepared. Next, add 1/99 volume of each dissolution stock solution and each 2-fold serial dilution to each sensitivity measurement medium maintained at 50-60 ° C. after sterilization and dissolution, mix thoroughly, and dispense and solidify in a petri dish. A plate medium for sensitivity measurement was prepared.
[0044]
[Preparation of inoculum]
Each strain is ingested into the above growth medium, Escherichia coli and Micrococcus luteus are grown at 30 ° C. for 18 to 20 hours, Candida albicans is grown at 25 ° C. for 2 days, Microsporum canis and Trichophyton rubrum are grown at 25 ° C. for 14 days, respectively. Went. After completion of the culture, three strains of Escherichia coli, Micrococcus luteus and Candida albicans have a cell count of 10 in their respective growth media. 6 / ML was diluted to give a bacterial solution for ingestion. Two strains of Microsporum canis and Trichophyton rubrum were prepared by suspending the formed spores (conidia) in sterile physiological saline to which 0.05% of polysorbate 80 was added, and the number of spores was about 10 6 / ML to prepare a bacterial solution for ingestion.
[0045]
[Sensitivity test]
The inoculated bacterial solution is smeared on the susceptibility measurement flat plate using a resin loop (inner diameter of about 1 mm) for about 1 to 2 cm, Escherichia coli for 18 to 20 hours at 30 ° C, and Micrococcus luteus for 2 days at 30 ° C. Candida albicans was cultured at 25 ° C. for 2 days, and Microsporum canis and Trichophyton rubrum were cultured at 25 ° C. for 14 days. After completion of the culture, the presence or absence of growth was observed with the naked eye, and the minimum concentration at which growth was inhibited was defined as the minimum growth inhibition concentration for each strain. The results are shown in Table 1.
[0046]
[Table 1]
[0047]
The extracts obtained in Examples 1 to 9 were dissolved in DMSO to a concentration of 1000, 100, 10, 1 μg / mL to prepare sample solutions, and then proteases (trypsin and V8 protease were used using these sample solutions. ), Inhibitory activity against lipase and urease. The specific method is described below.
[0048]
(Test Example 2) Protease inhibition test:
[Measurement method of trypsin inhibitory activity]
EnCheck for measurement TM Protease Assay kits (Molecular Probes, catalog number E-6639) were used. In a 96-well black plate, 20 μL of each sample solution, 70 μL of attached Digestion buffer, 10 μL of 15 μg / mL trypsin (Sigma, catalog number T7168) were added to make a total volume of 100 μL, and then 10 μg / mL of attached substrate ( 100 μL of BODIPY TR-X casein) was added, and the mixture was reacted at 37 ° C. for 1 hour in the dark. After completion of the reaction, the fluorescence intensity in each reaction solution was measured at an excitation wavelength of 584 nm and a fluorescence wavelength of 612 nm.
The trypsin inhibitory activity of each sample solution was evaluated by the enzyme residual rate (%) after the reaction was completed. That is, in the reaction system in which DMSO was added instead of the sample solution, after obtaining the fluorescence intensity when 0 to 20 μg / mL of enzyme was added, the fluorescence intensity against each enzyme amount was plotted to create a calibration curve did. The residual enzyme rate was calculated from the following calculation formula based on this calibration curve.
Enzyme residual rate (%) = [(S 0 / A) / (S 1 / A)] x100
S 0 : Fluorescence intensity of reaction system containing sample solution, S 1 : Fluorescence intensity of reaction system containing DMSO instead of sample solution, a: slope of calibration curve.
Table 2 shows the concentration at which the enzyme residual ratio becomes 50% or less when each sample solution is added.
[0049]
[V8 protease inhibitory activity assay]
In the above method for measuring trypsin inhibitory activity, 10 μL of 500 U / mL V8 protease (ICN, catalog number 151972, derived from Staphylococcus aureus) was added instead of trypsin, and the calibration curve was prepared by adding 0 enzyme. The procedure was the same as in the above test except that ~ 750 U / mL was added. The results are shown in Table 2.
[0050]
(Test Example 3) Lipase inhibition test:
Add 20 μL of each sample solution, 70 μL of 0.1 M citrate phosphate buffer (pH 7.4), 10 μL of 800 U / m lipase (Sigma, catalog number L0382, Porcine pancreas) to a 96-well black plate Was added to 100 μL, 100 μL of 100 μM 4-methylumbelliferyl oleate (NBSbiologicals, catalog number 16385-B) was added, and the mixture was reacted at 37 ° C. for 1 hour in the dark. After completion of the reaction, the fluorescence intensity in each reaction solution was measured at an excitation wavelength of 355 nm and a fluorescence wavelength of 460 nm.
The lipase inhibitory activity of each sample solution was evaluated by the enzyme residual rate (%) after the reaction was completed. In other words, in the reaction system in which DMSO was added instead of the sample solution, the respective fluorescence intensities when 0 to 10 μg / mL of the enzyme was added were obtained, and then the calibration intensity was plotted by plotting the fluorescence intensity with respect to each enzyme amount. did. The residual enzyme rate was calculated from the following calculation formula based on this calibration curve.
Enzyme residual rate (%) = [(S 0 / A) / (S 1 / A)] × 100
S 0 : Fluorescence intensity of reaction system containing sample solution, S 1 : Fluorescence intensity of reaction system containing DMSO instead of sample solution, a: slope of calibration curve.
Table 2 shows the concentration at which the enzyme residual ratio becomes 50% or less when each sample solution is added.
[0051]
(Test Example 4) Urease inhibition test:
In a 96-well plate, 10 μL of each sample solution, 10 μL of 1 M Tris-HCl buffer (pH 8.0), 20 μL of sterilized distilled water, 10 μL of 0.25 M urea aqueous solution, 4 U / mL urease (Sigma, Catalog No. U7172, Bcillus) After adding 50 μL of each of them to a total volume of 100 μL, the cells were sealed with a sealing film and incubated at 37 ° C. for 2 hours. After completion of the reaction, the sealing film used for sealing was replaced in another 96-well plate containing 100 μL of 0.002% phenol red aqueous solution, and the absorbance at 540 nm of phenol red was measured continuously. The value when the absorbance became constant was taken as the measured value of each reaction solution.
The urease inhibitory activity of each sample solution was evaluated by the enzyme residual rate (%) after the reaction was completed. In other words, in the reaction system in which DMSO was added instead of the sample solution, the respective measured values when 0 to 6 μg / mL of enzyme was added were obtained, and then the measured values for each enzyme amount were plotted to create a calibration curve did. The residual enzyme rate was calculated from the following calculation formula based on this calibration curve.
Enzyme residual rate (%) = [(S 0 / A) / (S 1 / A)] x100
S 0 : Measured value of reaction system containing sample solution, S 1 : Measured value of reaction system containing DMSO instead of sample solution, a: slope of calibration curve.
Table 2 shows the concentration at which the enzyme residual ratio becomes 50% or less when each sample solution is added.
[0052]
[Table 2]
[0053]
As described above, from the results of Test Examples 1 to 4, it was confirmed that the plant extracts obtained in Examples 1 to 9 have a rash prevention function as defined in the present invention.
[0054]
(Test Example 5) An antibacterial test by a halo test was conducted on the nonwoven fabric impregnated with the extract of Mukuroji of Example 4 and the extract of Nanso of Example 7. The specific method is described below.
[0055]
[Preparation of antibacterial nonwoven fabric]
(Example 10) The basis weight of a continuous long fiber having a fiber diameter of 2.1 denier made of polypropylene is 15 g to 25 / m. 2 After preparing a spunbonded nonwoven fabric, a commercially available hydrophilizing agent (trade name: Silastol PHP26, manufactured by Schill & Seillacher) was applied to the nonwoven fabric so as to be in a range of 0.1 to 1% by application amount. A treated nonwoven fabric was created. Next, a non-woven fabric for testing was prepared by impregnating the mugwort extract so as to contain 0.1% by weight with respect to the nonwoven fabric treated with the hydrophilizing agent.
[0056]
(Example 11) In Example 10, in place of Mukuroji extract, the same procedure was carried out except that the extract of licorice was impregnated so as to contain 0.1% by weight with respect to the non-working cloth coated with a hydrophilizing agent. By operating in the same manner as in the examples, a test nonwoven fabric was prepared.
[0057]
Comparative Example 1 A non-woven fabric for testing was prepared in the same manner as in Example 10 except that it was not impregnated with Mukuroji extract.
[0058]
(Example 12) The basis weight of a continuous long fiber having a fiber diameter of 2.1 denier made from polypropylene is 15 to 25 g / m. 2 After producing the spunbond nonwoven fabric, vacuum plasma treatment was performed. The apparatus used for the treatment is a roll-to-roll type vacuum plasma treatment apparatus, and a nonwoven fabric having a width of 20 cm is a maximum of 100 m / min. Plasma treatment can be performed at a speed of The conditions used for the plasma treatment were an oxygen gas flow rate of 100 sccm, a treatment pressure of 20 Pa, and a power density of 1.6 W / cm. 2 (Parallel plate type electrode). Feed rate 50 m / min. A hydrophilized non-woven fabric was obtained by carrying out plasma treatment at. Subsequently, the non-woven fabric for a test was produced by impregnating the plasma extract untreated cloth with 0.1% by weight of Mukuroji extract.
[0059]
(Example 13) In Example 12, instead of Mukuroji extract, except that impregnation extract was added so as to contain 0.1% by weight with respect to the plasma-treated untreated cloth, The same operation was performed to prepare a test nonwoven fabric.
[0060]
(Comparative Example 2) A non-woven fabric for testing was prepared in the same manner as in Example 12 except that it was not impregnated with Mukuroji extract.
[0061]
[Preparation of plate medium for halo test]
After preparing each ingestion bacterial solution according to the method described in Test Example 1, Escherichia coli and Micrococcus luteus were added to Mueller Hinton II agar medium, Candida albicans, Microsporum canis and Trichophyton rubrum were added to each subculture medium. 1/10 amount of the solution was added and mixed well, then dispensed into a petri dish and solidified to prepare a plate medium for halo test.
[0062]
[Hello Test]
Each of the test nonwoven fabrics obtained in Examples 10 to 13 and Comparative Examples 1 and 2 was cut into 3 cm squares and placed on the above plate for halo test, then Escherichia coli was 18 to 20 at 30 ° C. Micrococcus luteus was cultured at 30 ° C. for 2 days, Candida albicans was cultured at 25 ° C. for 2 days, and Microsporum canis and Trichophyton rubrum were cultured at 25 ° C. for 14 days. After completion of the culture, the presence or absence of halo around the test nonwoven was observed with the naked eye to determine antibacterial activity. The results are shown in Table 3.
[0063]
[Table 3]
[0064]
From the above results, it was confirmed that the antibacterial action can be expressed even in the nonwoven fabric containing the extract of mukuroji and the extract of Nanso.
[0065]
(Test Example 6) A disposable paper diaper was prepared using the nonwoven fabric obtained in Examples 10 to 13 and Comparative Examples 1 and 2, and a monitor test was performed using this disposable paper diaper. The specific method is described below.
[0066]
[Create monitor test paper diapers]
(Example 14) After removing the top sheet of a commercially available disposable disposable diaper for infants (trade name: Merry's, manufactured by Kao Corporation, L size), the non-woven fabric containing the extract of Mucurozi prepared according to the method described in Example 10 was replaced. A monitor test paper diaper was created.
[0067]
(Example 15) A monitor test paper diaper was operated in the same manner as in Example 14 except that the nonwoven fabric containing the extract of Nansam of Example 11 was used instead of the nonwoven fabric containing the extract of Mukuroji. It was created.
[0068]
(Comparative Example 3) In Example 14, instead of the Mukuroji extract-containing non-woven fabric, the non-woven plant extract-treated non-woven fabric described in Comparative Example 1 was used. A paper diaper was created.
[0069]
(Example 16) After the top sheet of the above-mentioned commercially available disposable disposable diaper for infants was peeled off, the non-woven cloth containing the extract of mkuroji prepared according to the method described in Example 12 was replaced to prepare a monitor test paper diaper.
[0070]
(Example 17) A monitor test paper diaper was prepared in the same manner as in Example 16 except that the non-woven fabric containing the extract of extract of Example 13 was used instead of the nonwoven fabric containing the extract of Mukuroji. It was created.
[0071]
(Comparative Example 4) In Example 16, instead of the Mukuroji extract-containing non-woven fabric, the non-woven plant extract-treated non-woven fabric described in Comparative Example 2 was used. A paper diaper was created.
[0072]
[Monitor test]
48 baby babies (average age of 18 months) who are using baby paper diapers were randomly divided into 6 groups of 8 each, and then the monitor test paper diapers prepared in Examples 14-17 and Comparative Examples 3 and 4 respectively. Distributed. The test results were obtained from responses from mothers after having used the disposable diapers for 10 days. The results are shown in Table 4.
[0073]
[Table 4]
[0074]
As a result of the monitoring test, both the paper diapers containing the extract of the black mushroom (Examples 14 and 16) and the paper diapers containing the extract of Nanso (Examples 15 and 17) were both used (Comparative Examples 3 and 4). ), The number of people who answered that it was less susceptible to rashes, the above extract was judged to be effective in preventing rashes. Moreover, regarding the hydrophilization method of the nonwoven fabric performed prior to the treatment of the extract, the plasma-treated test section (Examples 16 and 17) compared to the test section using the hydrophilizing agent (Examples 14 and 15). There was a tendency to increase the number of people who answered that they were less likely to get rash. From this, it was confirmed that the method of physically hydrophilizing, that is, the method of hydrophilizing by plasma treatment, is more suitable for incorporating the plant extract into a nonwoven fabric made of polypropylene.
[0075]
(Examples 18 and 19)
Formulation examples of liquid soap as Examples 18 and 19 are shown below as a skin external preparation containing the extract of Mukuroji of Example 4 and the extract of Nanso of Example 7. Table 5 shows various blending components and blending ratios. In addition, a mixture ratio is weight%.
[0076]
[Table 5]
[0077]
【The invention's effect】
The extracts of carrots, halans, mukuroji, celery, salamanders, murasaki obtained by the present invention have the function of inhibiting or inhibiting the growth of bacteria and enzymes that cause rashes and exacerbations. It became clear that it was effective for prevention.