JP2004500354A

JP2004500354A - Vaccine for prevention and treatment of Alzheimer's disease and amyloid-related diseases, comprising a whole D-peptide

Info

Publication number: JP2004500354A
Application number: JP2001541528A
Authority: JP
Inventors: シャリフール，　ロベール; エベール，　リズ; コン，　シエンチ; ゲルベ，　フランシーヌ
Original assignee: ニューロケム　インコーポレーティッド
Priority date: 1999-11-29
Filing date: 2000-11-29
Publication date: 2004-01-08
Also published as: NZ540564A; IL149924A0; WO2001039796A3; CN1433321A; HK1049279A1; KR20080059676A; NO20022531D0; NO20022531L; CA2388559A1; WO2001039796A2; MXPA02005576A; AU1847301A; KR20020073341A; BR0016022A; AU784312B2; EP1235587A2

Abstract

本発明は、アルツハイマー病および他のアミロイド関連疾患の予防および／または処置のための立体化学に基づく「非自己」抗原ワクチンに関する。本発明は、アルツハイマー病および他のアミロイド関連疾患の予防および処置のためのワクチンを提供し、これは、天然に存在するペプチド、タンパク質または抗原を用いることに関連する不利益を克服する。具体的には、本発明は、被験体においてアミロイド関連疾患を予防および／または処置するための方法を提供し、この方法は、抗原性量の全Ｄ体ペプチドを被験体に投与する工程を包含する。The present invention relates to a stereochemistry-based "non-self" antigen vaccine for the prevention and / or treatment of Alzheimer's disease and other amyloid-related diseases. The present invention provides vaccines for the prevention and treatment of Alzheimer's disease and other amyloid-related diseases, which overcome the disadvantages associated with using naturally occurring peptides, proteins or antigens. Specifically, the present invention provides a method for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject, the method comprising administering to the subject an antigenic amount of a whole D-peptide. I do.

Description

【０００１】
（関連出願）
本出願は、３５米国特許法１１９（ｅ）の下、同時係属中の米国仮出願番号６０／１６８，５９４（１９９９年１１月２９日に出願）に対して、および３５米国特許法１２０の下、同時係属中の米国出願番号　　　　　（２０００年１１月２８日に出願）の優先権の利益を主張し、両方の出願の全体の内容は、本明細書中で参考として援用される。
【０００２】
（発明の背景）
本発明は、アルツハイマー病および他のアミロイド関連疾患の予防および／または処置のための立体化学に基づく新たな「非自己」抗原ワクチンに関する。
【０００３】
アミロイドーシスとは、アミロイド線維の存在によって特徴付けられる病理学的な状態をいう。アミロイドは、多種多様なしかし特異的なタンパク質沈着物（細胞内および／または細胞外）の１群をいう包括的な用語であり、これらは、多くの異なる疾患において観察される。全てのアミロイド沈着物は、それらの発生において様々であるが、共通の形態的特性を有し、特定の染料（例えば、コンゴ−レッド）で染色され、そして染色後、偏光において特徴的な赤緑の複屈折の外観を有する。これらはまた、共通の超微細構造特性ならびに共通のＸ線回折および赤外線スペクトルを共有する。
【０００４】
アミロイド関連疾患は、１つの器官に制限されるか、またはいくつかの器官に広がるかのいずれかであり得る。第１の例は、「限局性アミロイドーシス」といわれ、一方、第２の例は、「全身性アミロイドーシス」といわれる。
【０００５】
いくつかのアミロイド性疾患は、特発性であり得るが、これらの疾患のほとんどは、以前から存在する障害の合併症として現れる。例えば、原発性アミロイドーシスは、何の他の病状もなしに出現し得るか、あるいは形質細胞異形成または多発性骨髄腫の後に起き得る。続発性アミロイドーシスは、通常、慢性的な感染（例えば、結核症）または慢性的な炎症（例えば、慢性関節リウマチ）に関連して観察される。家族性の型の続発性アミロイドーシスのはまた、家族性地中海熱（ＦＭＦ）において観察される。この家族性の型のアミロイドーシスは、他の型の家族性アミロイドーシスの１つとして、遺伝的に受け継がれ、そして特定の集団群において見出される。これらの２つの型のアミロイドーシスにおいて、沈着物は、いくつかの器官で見出され、従って、全身性アミロイド疾患と考えられる。別の型の全身性アミロイドーシスは、長期の血液透析患者において見出される。これらの場合の各々において、異なるアミロイド形成性タンパク質がアミロイド沈着物に含まれる。
【０００６】
「限局性アミロイドーシス」は、１つの器官系に関係する傾向があるアミロイドーシスである。異なるアミロイドはまた、沈着物に存在するタンパク質の型によって特徴付けられる。例えば、神経変性疾患（例えば、スクラピー、ウシの海綿状脳炎、クロイツフェルト−ヤーコプ病など）は、中枢神経系におけるプロテアーゼ抵抗性形態のプリオンタンパク質（ＡＳｃｒまたはＰｒＰ−２７という）の出現および蓄積によって特徴付けられる。同様に、アルツハイマー病（別の神経変性障害）は、軸索斑および神経原線維変化によって特徴付けられる。この場合、この斑および血管アミロイドが、原線維のＡβアミロイドタンパク質の沈着によって形成される。成人発症糖尿病（ＩＩ型糖尿病）のような他の疾患は、膵臓におけるアミロイドの限局性蓄積によって特徴付けられる。
【０００７】
一旦、これらのアミロイドが形成されると、インサイチュでこの沈着物をはっきりと溶解する、既知の広く受け入れられた治療も処置もない。
【０００８】
各アミロイド形成性タンパク質は、βシートへと組織化され、そして細胞外または細胞内に沈着する不溶性の原線維を形成する能力を有する。核アミロイド形成性タンパク質は、アミノ酸配列において異なるが、原線維を形成し、そして他のエレメント（例えば、プロテオグリカン、アミロイドＰおよび補体成分）に結合するという同じ特性を有する。さらに、各アミロイド形成性タンパク質は、異なるとはいえ、類似点（例えば、プロテオグリカンのグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）部分に結合する能力を有する領域（ＧＡＧ結合部位という）、ならびにβシート形成を促進するほかの領域）を示すアミノ酸配列を有する。
【０００９】
特定の場合、アミロイド性原線維は、一旦沈着すると、周りの細胞にとって有毒となり得る。例により、老人性斑として組織化されたＡβ原線維は、アルツハイマー病を有する患者における死んだニューロン細胞および小神経膠細胞症に関連することが示された。インビトロで試験する場合、Ａβペプチドは、小神経膠細胞（脳のマクロファージ）の活性化プロセスを誘発し得ることが示され、これは、アルツハイマー病を有する患者の脳において見い出され小神経膠細胞症および脳炎症の存在を説明する。
【００１０】
ＩＩ型糖尿病を有する患者において観察される別の型のアミロイドーシスであるアミロイド形成性タンパク質ＩＡＰＰは、インビトロでβ島細胞毒性を誘発することが示された。従って、ＩＩ型糖尿病患者の膵臓におけるＩＡＰＰ原線維の出現は、β島細胞（ランゲルハンス）の喪失および器官の機能不全に寄与し得る。
【００１１】
アルツハイマー病を患う人々は、成人期において進行性の痴呆を発症し、脳において３つの主要な構造的変化（脳の複数部分におけるニューロンのびまん性消失；神経原線維変化と名付けられた細胞内タンパク質沈着物の蓄積；および奇形の神経末端によって囲まれた、アミロイドまたは老人性斑（ジストロフィー軸索）と名付けられた細胞外タンパク質沈着物の蓄積）を伴う。これらのアミロイド斑の主要な成分は、アミロイドβペプチド（Ａβ）である４０〜４２アミノ酸タンパク質であり、これは、βアミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）の切断によって産生される。アルツハイマー病のための対症療法は、存在するが、この疾患は、現時点で、予防も治療もできない。
【００１２】
アルツハイマー病を処置するためのワクチンの使用は、原則的には可能である（Ｓｃｈｅｎｋ、Ｄ．ら、（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ４００、１７３−１７７）。Ｓｃｈｅｎｋらは、（アルツハイマー病で観察されるような）脳アミロイドーシスのトランスジェニックマウスモデルにおいて、Ａβペプチドでの免疫化は、アミロイド斑および関連するジストロフィー軸索の形成を阻害することを示している。この研究において、ヒトの凝集した全Ｌ体（ａｌｌ−Ｌ）ペプチドを免疫原として使用するワクチンは、ワクチン接種したトランスジェニックマウスにおいてβアミロイド斑、アストログリオーシス（ａｓｔｒｏｌｉｏｓｉｓ）および軸索ジストロフィーの形成を妨げた。
【００１３】
しかし、内因性タンパク質（またはワクチン接種される動物に生来存在するタンパク質）をワクチンとして使用することには、多くの不利益があることが明らかである。これらの不利益のいくつかとしては、以下が挙げられる：
・「自己」タンパク質に対する抗体の生成に起因する自己免疫疾患の発生の可能性。
・「自己」抗原を認識する宿主免疫系の不全に起因する免疫応答を惹起する際の困難性。
・急性の炎症応答の発生の可能性。
【００１４】
（発明の要旨）
本発明は、アルツハイマー病および他のアミロイド関連疾患の予防および／または処置のための立体化学に基づく「非自己」抗原ワクチンに関する。本発明の１つの目的は、アルツハイマー病および他のアミロイド関連疾患を予防および処置するためのワクチンを提供することであり、このワクチンは、天然に存在するペプチド、タンパク質または免疫原を用いることに付随する不利益を克服する。
【００１５】
１つの実施形態において、天然にないＤ配置のアミノ酸から合成された「非自己」ペプチドまたはタンパク質を用いて産生されるワクチンが提供されて、「自己」タンパク質を使用するという不利益を避ける。本発明に従って、ペプチドは、先行技術のワクチンとは対照的に、作動可能または免疫原性であるために、凝集させる必要がない。
【００１６】
別の実施形態において、被験体において、アミロイド関連疾患を予防および／または処置するための方法が提供され、この方法は、全Ｄ体（ａｌｌ−Ｄ）ペプチドに対する抗体の産生を惹起する全Ｄ体ペプチドの抗原量を、この被験体に投与し、この被験体による免疫応答を惹起し、それによって、原線維発生および関連した細胞毒性を予防する工程を特色とし、ここで、この抗体は、アミロイドタンパク質の少なくとも１つの領域（例えば、βシート領域およびＧＡＧ結合部位領域、その免疫原性フラグメント、そのタンパク質結合体、その免疫原性誘導体ペプチド、その免疫原性ペプチドおよびその免疫原性ペプチド模倣物）と相互作用する。これらのワクチンは、アミロイド関連疾患の予防および／または処置において、ならびにアミロイド関連疾患の予防および／または処置のための医薬の製造において、使用され得る。
【００１７】
本発明のさらなる実施形態において、被験体においてアミロイド関連疾患を予防および／または処置するためのワクチンは、アミロイドタンパク質と相互作用して原線維発生を防げる抗体を含み、ここで、この抗体は、アミロイドタンパク質の少なくとも１つの領域（例えば、βシート領域およびＧＡＧ結合部位領域、Ａβ（１−４２，全Ｄ体）、その免疫原性フラグメント、そのタンパク質結合体、その免疫原性誘導体、その免疫原性ペプチドおよびその免疫原性ペプチド模倣物）と相互作用する全Ｄ体ペプチドの抗原量に対して惹起される。これらのワクチンは、アミロイド関連疾患の予防および／または処置において、ならびにアミロイド関連疾患の予防および／または処置のための医薬の製造においてに使用され得る。
【００１８】
さらに、本発明のさらなる実施形態において、被験体においてアミロイド関連疾患の予防および／または処置するための方法が提供され、この方法は、アミロイドタンパク質の少なくとも１つの領域（例えば、βシート領域およびＧＡＧ結合部位領域、Ａβ（１−４２）、その免疫原性フラグメント、そのタンパク質結合体、その免疫原性誘導体、その免疫原性ペプチドおよびその免疫原性ペプチド模倣物）と相互作用する全Ｄ体ペプチドの抗原量をこの被験体に投与する工程を包含し、ここで、化合物は、この被験体による免疫応答を惹起し、それによって、原線維発生を妨げる。
【００１９】
本発明の好ましい実施形態において、化合物は、式（Ｉ）の化合物：
Ｒ’−（Ｐ）−Ｒ” （Ｉ）
であり、
ここで、
Ｐは、アミロイドタンパク質の少なくとも１つの領域（例えば、βシート領域およびＧＡＧ結合部位領域、Ａβ（１−４２，全Ｄ体）、その免疫原性フラグメント、その免疫原性誘導体、そのタンパク質結合体、その免疫原性ペプチドおよびその免疫原性ペプチド模倣物）と相互作用する全Ｄ体ペプチドであり、
Ｒ’は、Ｎ末端置換基、例えば、以下：
・水素；
・官能基（例えば、カルボキシレート、スルホネートおよびホスホネート）を有しても有さなくともよい、低級アルキル基（例えば、１〜８個の炭素原子を有する非環式または環式）；
・芳香族基；
・複素環式基；および
・アシル基（例えば、アルキルカルボニル基、アリールカルボニル基、スルホニル基およびホスホニル基）、
であり、かつ
Ｒ”は、Ｃ末端置換基（例えば、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、非置換アミノ基または置換アミノ基）である。
【００２０】
１つの実施形態において、Ｒ’およびＲ”は同一または異なり、ここで、このＲ’およびＲ”のアルキル基またはアリール基は、ハライド（例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ）、ヒドロキシル基、アルコキシル基、アリールオキシル基、ヒドロキシカルボニル基、アルコキシルカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、カルバミル基、非置換アミノ基または置換アミノ基、スルホ基またはアルキルオキシスルホニル基、ホスホノ基またはアルコキシホスホニル基のような官能基でさらに置換されている。
【００２１】
化合物が酸官能基を有する場合、それは、薬学的に受容可能な塩またはエステルの形態であり得る。化合物が、塩基性官能基を有する場合、それは、薬学的に受容可能な塩の形態であり得る。
【００２２】
本発明の好ましい実施形態において、被験体はヒトである。
【００２３】
本発明のなお別の実施形態において、アミロイド関連疾患は、アルツハイマー病であり得る。
【００２４】
本発明の別の実施形態において、被験体においてアミロイド関連疾患を予防および／または処置するための方法が提供され、この方法は、式（Ｉ）の化合物：
Ｒ’−（Ｐ）−Ｒ” （Ｉ）
の抗原量を被験体に投与する工程を包含し、
ここで、
Ｐは、アミロイドタンパク質の少なくとも１つの領域（例えば、βシート領域およびＧＡＧ結合部位領域、Ａβ（１−４２，全Ｄ体）、その免疫原性フラグメント、その免疫原性誘導体、そのタンパク質結合体、その免疫原性ペプチドおよびその免疫原性ペプチド模倣物）と相互作用する全Ｄ体ペプチドであり、
Ｒ’は、以下：
・水素；
・官能基（例えば、カルボキシレート、スルホネートおよびホスホネート）を有しても有さなくともよい、低級アルキル基（例えば、１〜８個の炭素原子を有する非環式または環式）；
・芳香族基；
・複素環式基；および
・アシル基（例えば、アルキルカルボニル基、アリールカルボニル基、スルホニル基およびホスホニル基）、
からなる群から選択されるＮ末端置換基であり、かつ
Ｒ”は、Ｃ末端置換基（例えば、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、非置換アミノ基または置換アミノ基）である。
【００２５】
この方法に従うと、化合物は、被験体による免疫応答を惹起して、原線維発生を妨げる。
【００２６】
本発明の好ましい実施形態に従うと、被験体においてアミロイド関連疾患を予防および／または処置するためのワクチンが提供され、このワクチンは、アミロイドタンパク質の少なくとも１つの領域（例えば、βシート領域およびＧＡＧ結合部位領域、その免疫原性フラグメント、そのタンパク質結合体、その免疫原性誘導体ペプチド、Ａβ（１−４２、全Ｄ体）ペプチド、その免疫原性ペプチドおよびその免疫原性ペプチド模倣物）と相互作用する全Ｄ体ペプチドの抗原量を含み、ここで、化合物は、被験体による免疫応答を惹起し、そして原線維発生を妨げる。
【００２７】
（発明の詳細な説明）
本開示の目的のために、以下の用語を以下に定義する。
【００２８】
用語「ペプチド模倣物」は、ペプチドの構造特性または機能特性を模倣する、非ペプチド性化合物を包含する。
【００２９】
用語「その抗原性フラグメント」は、被験体において免疫応答を惹起し得る、ペプチドのフラグメントを包含する。
【００３０】
用語「アミロイド関連疾患」は、１つの器官に制限された「限局性アミロイドーシス」またはいくつかの器官に広がった「全身性アミロイドーシス」のいずれかであり得る、アミロイドの蓄積に関連する疾患を包含する。続発性アミロイドーシス（家族性地中海熱（ＦＭＦ）においても見られる家族性形態の続発性アミロイドーシスおよび長期血液透析患者において見出される別の型の全身性アミロイドーシスを含む）は、慢性の感染（例えば、結核）または慢性の炎症（例えば、慢性関節リウマチ）に関連し得る。限局形態のアミロイドーシスとしては、ＩＩ型糖尿病およびその任意の関連障害、神経変性疾患（例えば、スクラピー、ウシの海綿状脳炎、クロイツフェルト−ヤーコプ病、アルツハイマー病、脳のアミロイドアンギオパチーおよびプリオンタンパク質関連障害）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３１】
本明細書中で他に明白に定義される場合を除いて、アミノ酸および保護基を示すために本明細書中で用いられる略号は、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢＣｏｍｍｉｓｓｉｏｎｏｎＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＮｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ（Ｂｉｏｃｈｅｎｍｉｓｔｒｙ，１９７２，１１：１７２６−１７３２）の勧告に基づく
Ａβ（１６−２１）部位は、Ａβペプチドアミロイド形成（ａｍｙｌｏｉｄｏｇｅｎｅｓｉｓ）という有害なプロセスを開始する際に重要な役割を果たすことが公知である。これらのペプチドがＤ体アミノ酸から構成される場合、これらは、天然の全てのＬ体の相同配列と相互作用するこれらの能力を保持し、それによってアミロイド形成を防げることもまた公知である。
【００３２】
本発明において用いられ得る他のアミロイドタンパク質としては、ＩＡＰＰ、β２−ミクログロブリン（β２−ｍｉｃｒｏｇｌｕｂｅｌｉｎｅ）、アミロイドＡタンパク質およびプリオン関連タンパク質が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３３】
全Ｄ体Ａβ（１６−２１）、全Ｄ体Ａβ（１０−１６）、全Ｄ体Ａβ（１−４０）、全Ｄ体Ａβ（１−４２）から、または全Ｄ体Ａβ（１−４２）のＣ末端領域から調製される、本発明のワクチンは、宿主において、または天然に存在する標的を認識する抗体を産生する際に、免疫応答を惹起すると考えられる。本明細書中で使用される場合、「全Ｄ体」は、≧７５％、≧８０％、≧８５％、≧９０％、≧９５％および１００％のＤ配置のアミノ酸を有するペプチドを包含する。また、本発明のワクチンは、「自己」タンパク質を使用するという欠点を提示せず、免疫応答を誘導するために凝集させることを必要としない。例えば、全Ｄ体Ａβ（１６−２１）ペプチドに対して惹起させた抗体は、全Ｌ−Ａβ（１６−２１）ペプチド配列を認識すると予想され得る。
【００３４】
本発明のワクチンが与えられた宿主中に存在する惹起された抗体は、Ａβ（１６−２１）部位または他の部位（例えば、ＡβのＣ末端領域）に結合し、そしてこの短いペプチド自体が有するのと同じかまたはさらにより大きいアミロイド形成を防げる能力を有する。本発明のワクチンは、ワクチン接種された宿主において、有効な抗アミロイド形成性（ａｎｔｉａｍｙｌｏｉｄｏｇｅｎｉｃ）抗体の生成を引き起こす。
【００３５】
示唆される免疫手順は以下の通りである：
ａ）天然に存在するβアミロイドペプチド（すなわち、Ａβ（全Ｌ体））の配列と実質的に同じ配列を有する全Ｄ体ペプチドからワクチンを調製する。この全Ｄ体ペプチドは、全長Ａβ（１−４２，全Ｄ体）、Ａβ（１−４２，全Ｄ体）の免疫原性フラグメントから誘導されたペプチドおよび関連のペプチド模倣物を含む。
【００３６】
ｂ）宿主をこのワクチンで免疫して、原線維発生を妨げ得る結合部位を有する抗体を宿主中で作製する。
【００３７】
適切な薬学的に受容可能なキャリアとしては、経口投与経路、非経口投与経路、血管内（ＩＶ）投与経路、動脈内（ｉｎｔｒａａｒｔｅｒｉａｌ）（ＩＡ）投与経路、筋肉内（ＩＭ）投与経路、および皮下（ＳＣ）投与経路に適切な任意の非免疫原性薬学的アジュバント（例えば、リン酸緩衝生理食塩水（ｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒｓａｌｉｎｅ（ＰＢＳ））が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
薬学的キャリアは、ビヒクルを含み得、これは、抗原を抗原提示細胞へと運ぶ。ビヒクルの例は、リポソーム、免疫刺激複合体、水中微小化スクアレンエマルジョン（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｄｓｑｕａｌｅｎｅ−ｉｎ−ｗａｔｅｒｅｍｕｌｓｉｏｎ）、ポリ（乳酸／グリコール酸）（ＰＬＧＡ）から構成され得るミクロスフェアである。規定の寸法（＜５ミクロン）の微粒子としては、水中油型ミクロエマルジョン（ＭＦ５９）およびポリマー性微粒子が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３９】
本発明のキャリアはまた、免疫応答を増強するための、または抗原性免疫原の抗原性を増大させるための、化学的アジュバントおよび遺伝的アジュバントを含み得る。これらのアジュバントは、いくつかの機構（例えば、リンパ系細胞の補充、サイトカイン誘導および細胞内へのＤＮＡ侵入の促進）を通してそれらの免疫調節特性を発揮する。サイトカインアジュバントとしては、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子、インターロイキン−１２、ＧＭ−ＣＳＦ、合成ムラミルジペプチドアナログまたはモノホスホリルリピドＡが挙げられるが、これらに限定されない。他の化学的アジュバントとしては、乳酸細菌、Ａｌ（ＯＨ）_３、ムラミルジペプチドおよびサポニンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４０】
このペプチドは、循環しているペプチドの半減期を調節するキャリアに対してカップリングされ得る。これは、防御期間の制御を可能にする。ペプチド−キャリアはまた、アジュバント中に乳化され得、そして通常の免疫経路によって投与され得る。
【００４１】
本発明のワクチンは、たいていは、非経口的に（例えば、血管内に（ＩＶ）、動脈内（ＩＡ）、筋肉内（ＩＭ）、皮下（ＳＣ）などに）投与される。いくつかの場合、投与は、経口、鼻腔内、直腸、経皮またはエアゾールであり得、ここで、ワクチンの性質は、血管系への移動を可能にする。通常、１回の注射が用いられるが、所望の場合、１より多くの注射が用いられ得る。ワクチンは、任意の便利な手段（注射器、トロカール、カテーテルなどを含む）によって投与され得る。好ましくは、投与は血管内であり、ここで、導入部位は、本発明にとって重要ではなく、好ましくは、迅速な血流が存在する部位（例えば、静脈内に、末梢静脈または中心静脈）である。他の経路は、投与が徐放技術または保護マトリックスと結びついている用途を見出し得る。
【００４２】
アルツハイマー病および他のアミロイド関連疾患を予防および／または処置する際の本発明のワクチンの使用は、対応する全Ｄ体ペプチドに対する抗体を惹起し、そしてこれらを試験してこれらが天然のアミロイドペプチド（全Ｌ体）の原線維発生を有効に阻害または防げ得るか否かを見ることによって確認され得る。
【００４３】
本発明に従ってワクチンを調製するために用いられる化合物は、以下の式Ｉの共通構造：
Ｒ’−（Ｐ）−Ｒ” （Ｉ）
を有し、ここで、
Ｐは、アミロイドタンパク質の少なくとも１つの領域（例えば、βシート領域およびＧＡＧ結合部位領域、Ａβ（１−４２，全Ｄ体）、その免疫原性フラグメント、その免疫原性誘導体、そのタンパク質結合体、その免疫原性ペプチドならびにその免疫原性ペプチド模倣物）と相互作用する全Ｄ体ペプチドであり；
Ｒ’は、以下：
・水素；
・官能基（例えば、カルボキシレート、スルホネートおよびホスホネート）があってもなくてもよい、低級アルキル基（例えば、１〜８個の炭素原子を有する非環式または環式）；
・芳香族基；
・複素環式基；および
・アシル基（例えば、アルキルカルボニル基、アリールカルボニル基、スルホニル基およびホスホニル基）、
からなる群から選択されるＮ末端置換基であり；そして
Ｒ”は、Ｃ末端置換基（例えば、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、非置換アミノ基または置換アミノ基）である、
Ｒ’およびＲ”は、同一であっても異なっていてもよい；Ｒ’およびＲ”のアルキル基またはアリール基は、ハライド（Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩ）、ヒドロキシル、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシカルボニル、アルコキシルカルボニル、アリールオキシカルボニル、カルバミル、非置換アミノまたは置換アミノ、スルホまたはアルキルオキシスルホニル、ホスホノまたはアルコキシホスホニルなどの群より選択される有機官能基によってさらに置換され得る。
【００４４】
官能基が酸である場合、その薬学的に受容可能な塩またはエステルは、本発明の範囲内にある。官能基が塩基である場合、その薬学的に受容可能な塩は、本発明の範囲内にある。
【００４５】
１つの実施形態では、好ましい化合物は、全長ペプチド、Ａβ（１−４２，全Ｄ体）、ならびにＡβ（１−４０，全Ｄ体）、Ａβ（１−３５，全Ｄ体）およびＡβ（１−２８，全Ｄ体）からなるそのより小さいホモログから選択される。
【００４６】
別の実施形態では、好ましい化合物は、短いペプチド（例えば、Ａβ（１−７，全Ｄ体）、Ａβ（１０−１６，全Ｄ体）、Ａβ（１６−２１，全Ｄ体）、Ａβ（３６−４２，全Ｄ体））の群から選択される。このペプチドは、いずれかの末端または両方の末端から１以上の残基を除去することによってさらに短縮化され得る。
【００４７】
好ましい化合物はまた、天然に存在する配列における１以上の残基の置換によって上記のペプチドから誘導される全Ｄ体ペプチドであり得る。別の実施形態では、好ましい化合物は、上記のペプチドのペプチド模倣物である。
【００４８】
さらなる実施形態では、好ましい化合物は、その化合物の生体分布、免疫原性特性および半減期を調節するキャリアとカップリングされ得る。
【００４９】
以下は、アルツハイマー病および他のアミロイド関連疾患を予防または処置するワクチンを調製するための代表的な化合物である：
【００５０】
【表１】

上記に列挙した化合物は、１以上のアミノ酸残基を除去もしくは挿入することによって、または１以上のアミノ酸残基を他のアミノ酸もしくは非アミノ酸フラグメントで置換することによって、改変され得る。
【００５１】
以下は、１または２のアミノ酸残基を他のアミノ酸で置換することによって、化合物１８（全Ｄ体ＫＬＶＦＦＡ−ＮＨ_２）から誘導された代表的な化合物である。
【００５２】
【表２】

上記の化合物について、用語Ｔｈｉ、ＣｈａおよびＰｇｌｙは、それぞれ、チエニルアラニン、シクロヘキシルアラニンおよびフェニルグリシンを意味することが意図される。
【００５３】
ウサギを、全Ｄ体ＫＬＶＦＦＡまたは全Ｌ体ＫＬＶＦＦＡで免疫した。得られた抗体力価の結果を図７に示す。図７において見られるように、本発明のワクチンは、抗体の産生を引き起こす。
【００５４】
本発明は、本発明のワクチン（例えば、ワクチンアプローチを用いたアミロイド治療）を用いて引き起こされた種々の型の免疫応答を包含する。
【００５５】
本発明に従って、用いられる免疫の型に従って、優先的ＴＨ−２応答またはＴＨ−１応答を引き起こすワクチンもまた提供される。ＴＨ−２応答を誘導することによって、抗炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−１０およびＴＧＦ−β）の産生ならびにＩｇＧ　１抗体クラスおよびＩｇＧ　２ｂ抗体クラスの産生に好都合である。このような型の応答が好ましい。なぜなら、ＡＤ患者の脳における主な炎症応答が回避されるからである。一方、好ましいＴＨ−１応答を伴うと、炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦおよびＩＦＮγ）の産生を伴った炎症誘発（ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ）応答に好都合である。この型の応答は、マクロファージ集団の活性化を誘発する可能性がより高い。次いで、これらのマクロファージは、補体活性化プロセスを介して、ならびに抗体媒介プロセスを介して、任意の粒状沈着物（例えば、斑）を貪食する。このアプローチは、既に組織化された老人斑を一掃し、そして新たな線維沈着物の形成を防止するために有益である。
【００５６】
両方のアプローチ（すなわち、ＴＨ−１およびＴＨ−２）が有益である。用いられる抗原は、細胞接着を担う領域（すなわち、領域１０−１６）、ＧＡＧ結合部位を担う領域（すなわち、１３−１６）、βシートを担う領域１６−２１または４０−４２についての領域を含むペプチドであり得る。これらのペプチドは、用いられるアジュバントの型に依存して、またはワクチンの投与経路に依存して、優先的なＴＨ−１応答またはＴＨ−２応答のいずれかが得られるように提示され得る。例えば、鼻腔内投与を介した粘膜免疫が可能である。なぜなら、このような投与経路は、ＴＨ−２応答に有利であることが公知であるからである。
【００５７】
本発明は、以下の実施例を言及することによって、より容易に理解される。以下の実施例は、本発明の範囲を限定するためではなく、本発明を例示するために提示される。
【００５８】
（実施例Ｉ）
原線維形成性（ｆｉｂｒｉｌｌｏｇｅｎｉｃ　）タンパク質から誘導された全Ｄ体ペプチドワクチンの有効性を試験するためのインビトロ確認手順を、ウサギまたはマウスにおいて行って、抗体がＡβ１６−２１（全Ｄ体）に対して惹起され得ることが実証された（図７を参照のこと）。産生された抗体を試験して、これらが天然のＡβ（１−４０，全Ｌ体）の原線維発生をインビトロで有効に妨げることが実証された。原線維発生についての標準アッセイ（例えば、チオフラビンＴ、円偏光二色性および溶解度に基づくアッセイ）を用いて、活性を評価した。
【００５９】
このアプローチをまた用いて、抗原線維形成性ワクチンを調製するために全Ｄ体ペプチドの形態で用いた場合にＡβペプチドのどの領域が最も有効であるかを確立し得る。これが行われ得る１つの方法は、以下の通りである：
ａ）ウサギまたはマウスを、Ａβ（１−４２）配列から作製された重複する一連の全Ｄ体ペプチド（例えば、Ａβ（１−６）、Ａβ（２−８）、Ａβ（４−１０）など）で免疫する。
【００６０】
ｂ）抗血清を、免疫したウサギまたはマウスから調製する。
【００６１】
ｃ）これらの抗血清を試験して、Ａβ配列のどの部分が、上記の原線維発生についての標準的なアッセイにおいて原線維発生を最も有効に防げる抗血清を産生するかを見る。
【００６２】
（実施例ＩＩ）
（Ｄ体およびＬ体のＡβ（１６−２１）ペプチドワクチンに対する抗体の、原線維発生に対する効果）
Ｄ体およびＬ体のＡβ（１６−２１）ペプチドに対して惹起された抗体の抗原線維形成性活性を試験するための確認手順を行った。
【００６３】
ウサギを、Ｄ体またはＬ体のＡβ（１６−２１）ペプチドで免疫した。惹起された抗体を、ＴｈＴアッセイによって、および電子顕微鏡検査（ＥＭ）によってそれらの抗原線維形成性活性について試験した。
【００６４】
Ｄ体およびＬ体のＫＬＶＦＦＡに対して惹起された抗体は、Ｔｈｉｏｆｌａｖｉｎ　チオフラビンＴアッセイ（ＴｈＴ）（図２および図３）およびＥＭ（図４Ａ〜４Ｃ）のいずれかによって見られるように、原線維発生プロセスをブロックし得た。このＴｈＴアッセイでは、原線維形成を、経時的な蛍光の増大によってモニタリングする。図において見られるように、これらの抗体は、原線維発生を阻害するという条件では、これらの抗体が蛍光におけるこのような増大を阻害し得た。
【００６５】
これらの図（図２〜４）において見られ得るように、Ｄ体のペプチドに対して惹起された抗体は、抗Ｌ体抗体よりも良好な抗原線維形成性活性を有する。
【００６６】
これらの結果はまた、ＥＭ（図４Ａ〜４Ｃ）によっても確認された。ここでは、抗Ｄ体ＫＬＶＦＦＡペプチドおよび抗Ｌ体ＫＬＶＦＦＡペプチドの両方が、コントロールと比較した場合に原線維形成をブロックした（図４Ａ）。さらに、再度、抗Ｄペプチドは、抗Ｌ体ペプチド（図４Ｃ）よりも大きな抗原線維形成性活性（図４Ｂ）を有する。これは、蛍光の減少が、抗Ｌ体ペプチド抗体についてよりも抗Ｄ体ペプチドについて大きかったＴｈＴアッセイに追随する。
【００６７】
（実施例ＩＩＩ）
（抗体結合アッセイ）
脳の切片を、ＫＬＶＦＦＡペプチド（Ｄ体およびＬ体）に対して惹起した抗体を用いて染色した。図５Ａ〜図５Ｄおよび図６Ａ〜図６Ｄに見られるように、これらの抗体は、凝集した（ＴｈｉｏＳ陽性）ＡＤに結合できなかった。抗体は細胞の表面でＡβを認識するが斑に結合できないことが、斑（ＴｈｉｏＳ）および抗ペプチドの両方について染色された両方のセットの図から見られ得る。これらの結果は、抗ＫＬＶＦＦＡペプチド抗体は、非線維性ＡＤを認識するが、凝集したＡＤに結合しないことを示す。このアッセイにおいて、抗Ｄ体ペプチド抗体と抗Ｌ体抗体との間に相違は存在しない。
【００６８】
これらの結果は、抗体が、非凝集形態のみを認識し、そして原線維発生をブロックすることを明確に証明する。このような活性を有することによって、本発明のワクチンは、１）Ａβがそれ自体組織化されて原線維になることを妨げる、および２）不溶性形態に対するこのような抗体結合によって誘発される炎症応答を妨げる。なぜなら、この抗体は、凝集したＡβには結合できないからである。
【００６９】
本発明をその特定の実施形態に関連して記載してきたが、さらなる改変がされ得ること、および本出願が、本発明の原理に一般に従う、本発明の任意のバリエーション、使用または適合物を包含すること、そして、本発明が属する当該分野において公知かまたは慣習的な実施内になるような、そして本明細書中上記の、および添付の特許請求の範囲の範囲内に従う、必須の特徴に適用され得る、本開示からのこのような逸脱物を含むことが意図されることが理解される。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、抗原性フラグメントついて標的とされる部位を示す。
【図２】
図２は、Ｄ体およびＬ体のＡβ（１６−２１）に対して惹起された１ｍｇ／ｍｌの抗体の原線維発生に対する効果を示す。
【図３】
図３は、Ｄ体およびＬ体のＡβ（１６−２１）に対して惹起された０．５ｍｇ／ｍｌの抗体の原線維発生に対する効果を示す。
【図４】
図４Ａ〜４Ｃは、コントロール（図４Ａ）に関してとともに、抗Ｄ体ＫＬＶＦＦＡペプチド抗体（図４Ｂ）および抗Ｌ体ＫＬＶＦＦＡペプチド抗体（図４Ｃ）の原線維発生に対する効果を示す電子顕微鏡写真を示す。
【図５】
図５Ａ〜５Ｄは、脳梁膨大後方（ｒｅｔｒｏｓｐｌｅｎｉａｌ）皮質（図５Ａ）および頭頂部皮質（図５Ｃ）の脳切片における凝集したＡβペプチドについての抗Ｄ体ＫＬＶＦＦＡの免疫組織化学、ならびに脳梁膨大後方皮質（図５Ｂ）および頭頂部皮質（図５Ｄ）の同じ脳切片における凝集したＡβペプチドについての抗Ｄ体ＫＬＶＦＦＡの組織化学（チオフラビンＳアッセイ）を示す。
【図６】
図６Ａ〜６Ｄは、頭頂部皮質（図６Ａ）および嗅内皮質（図６Ｃ）の脳切片における凝集したＡβペプチドについての抗Ｌ体ＫＬＶＦＦＡ抗体の免疫組織化学、ならびに頭頂部皮質（図６Ｂ）および嗅内皮質（図６Ｄ）の同じ脳切片における凝集したＡβペプチドについての抗Ｌ体ＫＬＶＦＦＡ抗体の組織化学（チオフラビンＳアッセイ）を示す。
【図７】
図７は、ＫＬＨに結合体化した全Ｌ体および全Ｄ体ＫＬＶＦＦＡに対するウサギの応答を示す。[0001]
(Related application)
This application is related to 35 US Patent 119 (e), co-pending US Provisional Application No. 60 / 168,594 (filed November 29, 1999), and 35 US Patent 120 , Co-pending U.S. application number　　　　　(Filed November 28, 2000), the entire contents of both applications being incorporated herein by reference.
[0002]
(Background of the Invention)
The present invention relates to a new “non-self” antigen vaccine based on stereochemistry for the prevention and / or treatment of Alzheimer's disease and other amyloid-related diseases.
[0003]
Amyloidosis refers to a pathological condition characterized by the presence of amyloid fibrils. Amyloid is a generic term that refers to a group of diverse but specific protein deposits (intracellular and / or extracellular), which are observed in many different diseases. All amyloid deposits vary in their development, but have common morphological properties, are stained with specific dyes (eg Congo-Red), and, after staining, characteristic red-green in polarization. Has a birefringent appearance. They also share common ultrastructural properties and common X-ray diffraction and infrared spectra.
[0004]
Amyloid-related diseases can either be restricted to one organ or spread to several organs. The first example is referred to as "localized amyloidosis", while the second example is referred to as "systemic amyloidosis".
[0005]
Some amyloid diseases may be idiopathic, but most of these diseases manifest as complications of pre-existing disorders. For example, primary amyloidosis may appear without any other medical conditions, or may occur after plasma cell dysplasia or multiple myeloma. Secondary amyloidosis is usually observed in association with chronic infection (eg, tuberculosis) or chronic inflammation (eg, rheumatoid arthritis). A familial form of secondary amyloidosis is also observed in familial Mediterranean fever (FMF). This familial type of amyloidosis is inherited as one of the other types of familial amyloidosis and is found in certain population groups. In these two types of amyloidosis, deposits are found in several organs and are therefore considered to be systemic amyloid diseases. Another type of systemic amyloidosis is found in long-term hemodialysis patients. In each of these cases, different amyloidogenic proteins are included in the amyloid deposit.
[0006]
"Localized amyloidosis" is amyloidosis that tends to involve one organ system. Different amyloids are also characterized by the type of protein present in the deposit. For example, neurodegenerative diseases (eg, scrapie, bovine spongiform encephalitis, Creutzfeldt-Jakob disease, etc.) are characterized by the appearance and accumulation of a protease-resistant form of the prion protein (referred to as AScr or PrP-27) in the central nervous system. Attached. Similarly, Alzheimer's disease (another neurodegenerative disorder) is characterized by axonal plaques and neurofibrillary tangles. In this case, the plaques and vascular amyloid are formed by the deposition of fibrillary Aβ amyloid protein. Other diseases, such as adult-onset diabetes (type II diabetes), are characterized by localized accumulation of amyloid in the pancreas.
[0007]
Once these amyloids are formed, there is no known widely accepted therapy or treatment that clearly dissolves this deposit in situ.
[0008]
Each amyloidogenic protein has the ability to organize into β-sheets and form insoluble fibrils that deposit extracellularly or intracellularly. Nuclear amyloidogenic proteins differ in amino acid sequence, but have the same property of forming fibrils and binding to other elements (eg, proteoglycans, amyloid P and complement components). In addition, each amyloidogenic protein, although different, has similarities (eg, regions capable of binding to the glycosaminoglycan (GAG) portion of proteoglycans (referred to as GAG binding sites), as well as promoting β-sheet formation. Other regions).
[0009]
In certain cases, amyloid fibrils, once deposited, can be toxic to surrounding cells. Examples have shown that Aβ fibrils organized as senile plaques are associated with dead neuronal cells and microgliosis in patients with Alzheimer's disease. When tested in vitro, it has been shown that Aβ peptides can trigger the process of activating microglia (macrophages of the brain), which is found in the brains of patients with Alzheimer's disease and has microgliosis And explain the presence of brain inflammation.
[0010]
Another type of amyloidosis observed in patients with type II diabetes, the amyloidogenic protein IAPP, has been shown to induce β-islet cytotoxicity in vitro. Thus, the appearance of IAPP fibrils in the pancreas of type II diabetics can contribute to the loss of beta islet cells (Langerhans) and organ dysfunction.
[0011]
People with Alzheimer's disease develop progressive dementia in adulthood and have three major structural changes in the brain (a diffuse loss of neurons in multiple parts of the brain; an intracellular protein termed neurofibrillary tangles). Accumulation of deposits; and accumulation of extracellular protein deposits termed amyloid or senile plaques (dystrophic axons), surrounded by malformed nerve endings. The major component of these amyloid plaques is a 40-42 amino acid protein that is amyloid β peptide (Aβ), which is produced by cleavage of β amyloid precursor protein (APP). Although symptomatic treatments exist for Alzheimer's disease, this disease cannot be prevented or treated at this time.
[0012]
The use of vaccines for treating Alzheimer's disease is in principle possible (Schenk, D. et al. (1999) Nature 400, 173-177). Schenk et al. Show that in a transgenic mouse model of brain amyloidosis (as observed in Alzheimer's disease), immunization with Aβ peptide inhibits the formation of amyloid plaques and associated dystrophic axons. In this study, a vaccine using human aggregated all-L (all-L) peptide as an immunogen prevented the formation of β-amyloid plaques, astrogliosis and axonal dystrophy in vaccinated transgenic mice. Was.
[0013]
However, the use of endogenous proteins (or proteins naturally present in the animal to be vaccinated) as vaccines clearly shows many disadvantages. Some of these disadvantages include:
The potential for the development of an autoimmune disease due to the production of antibodies against the "self" protein.
-Difficulties in eliciting an immune response due to failure of the host immune system to recognize "self" antigens.
The possibility of the development of an acute inflammatory response;
[0014]
(Summary of the Invention)
The present invention relates to a stereochemistry-based "non-self" antigen vaccine for the prevention and / or treatment of Alzheimer's disease and other amyloid-related diseases. One object of the present invention is to provide a vaccine for preventing and treating Alzheimer's disease and other amyloid-related diseases, which vaccine involves the use of naturally occurring peptides, proteins or immunogens. Overcome disadvantages.
[0015]
In one embodiment, a vaccine is provided that is produced using "non-self" peptides or proteins synthesized from non-naturally occurring D-configuration amino acids, avoiding the disadvantage of using "self" proteins. In accordance with the present invention, the peptides do not need to be aggregated in order to be operable or immunogenic, in contrast to prior art vaccines.
[0016]
In another embodiment, provided is a method for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject, the method comprising eliciting production of an antibody against an all-D peptide (all-D). Administering an antigenic amount of the peptide to the subject and eliciting an immune response by the subject, thereby preventing fibril development and associated cytotoxicity, wherein the antibody comprises amyloid At least one region of the protein (eg, a β-sheet region and a GAG binding site region, an immunogenic fragment thereof, a protein conjugate thereof, an immunogenic derivative peptide thereof, an immunogenic peptide and an immunogenic peptide mimetic thereof) Interacts with. These vaccines can be used in the prevention and / or treatment of amyloid-related diseases and in the manufacture of a medicament for the prevention and / or treatment of amyloid-related diseases.
[0017]
In a further embodiment of the present invention, a vaccine for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject comprises an antibody that interacts with amyloid protein to prevent fibril development, wherein the antibody comprises amyloid. At least one region of the protein (eg, β-sheet region and GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), its immunogenic fragments, its protein conjugates, its immunogenic derivatives, its immunogenicity Peptide and its immunogenic peptidomimetic)). These vaccines can be used in the prevention and / or treatment of amyloid-related diseases and in the manufacture of a medicament for the prevention and / or treatment of amyloid-related diseases.
[0018]
Further, in a further embodiment of the present invention, there is provided a method for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject, the method comprising at least one region of an amyloid protein (eg, a β-sheet region and a GAG binding Site region, Aβ (1-42), its immunogenic fragments, its protein conjugates, its immunogenic derivatives, its immunogenic peptides and its immunogenic peptidomimetics). Administering an amount of antigen to the subject, wherein the compound elicits an immune response by the subject, thereby preventing fibril development.
[0019]
In a preferred embodiment of the invention, the compound is a compound of formula (I):
R '-(P) -R "(I)
And
here,
P is at least one region of the amyloid protein (eg, β-sheet region and GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), an immunogenic fragment thereof, an immunogenic derivative thereof, a protein conjugate thereof, An immunogenic peptide and its immunogenic peptidomimetic).
R 'is an N-terminal substituent, for example:
·hydrogen;
Lower alkyl groups (eg acyclic or cyclic having 1 to 8 carbon atoms), with or without functional groups (eg carboxylate, sulfonate and phosphonate);
.Aromatic groups;
A heterocyclic group; and
An acyl group (for example, an alkylcarbonyl group, an arylcarbonyl group, a sulfonyl group and a phosphonyl group),
And
R ″ is a C-terminal substituent (eg, hydroxy, alkoxy, aryloxy, unsubstituted amino group or substituted amino group).
[0020]
In one embodiment, R ′ and R ″ are the same or different, wherein the alkyl or aryl group of R ′ and R ″ is a halide (eg, F, Cl, Br and I), a hydroxyl group, an alkoxyl Group, aryloxyl, hydroxycarbonyl, alkoxylcarbonyl, aryloxycarbonyl, carbamyl, unsubstituted amino or substituted amino, sulfo or alkyloxysulfonyl, phosphono or alkoxyphosphonyl Further substituted with a group.
[0021]
If the compound has an acid function, it may be in the form of a pharmaceutically acceptable salt or ester. If the compound has a basic functional group, it may be in the form of a pharmaceutically acceptable salt.
[0022]
In a preferred embodiment of the invention, the subject is a human.
[0023]
In yet another embodiment of the present invention, the amyloid-related disease can be Alzheimer's disease.
[0024]
In another embodiment of the present invention, there is provided a method for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject, comprising a compound of formula (I):
R '-(P) -R "(I)
Administering the amount of antigen to the subject,
here,
P is at least one region of the amyloid protein (eg, β-sheet region and GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), an immunogenic fragment thereof, an immunogenic derivative thereof, a protein conjugate thereof, An immunogenic peptide and its immunogenic peptidomimetic).
R 'is:
·hydrogen;
Lower alkyl groups (eg acyclic or cyclic having 1 to 8 carbon atoms), with or without functional groups (eg carboxylate, sulfonate and phosphonate);
.Aromatic groups;
A heterocyclic group; and
An acyl group (for example, an alkylcarbonyl group, an arylcarbonyl group, a sulfonyl group and a phosphonyl group),
An N-terminal substituent selected from the group consisting of
R ″ is a C-terminal substituent (eg, hydroxy, alkoxy, aryloxy, unsubstituted amino group or substituted amino group).
[0025]
According to this method, the compound elicits an immune response by the subject and prevents fibril development.
[0026]
According to a preferred embodiment of the present invention, there is provided a vaccine for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject, the vaccine comprising at least one region of the amyloid protein (eg, a β-sheet region and a GAG binding site). Interacts with the region, its immunogenic fragments, its protein conjugates, its immunogenic derivative peptides, Aβ (1-42, all D-form) peptides, its immunogenic peptides and its immunogenic peptidomimetics) Includes antigenic amounts of all D-body peptides, where the compound elicits an immune response by the subject and prevents fibril development.
[0027]
(Detailed description of the invention)
For the purposes of this disclosure, the following terms are defined below.
[0028]
The term “peptidomimetic” includes non-peptidic compounds that mimic the structural or functional properties of a peptide.
[0029]
The term “antigenic fragment thereof” encompasses fragments of a peptide that can elicit an immune response in a subject.
[0030]
The term "amyloid-related disease" encompasses diseases associated with amyloid accumulation that can be either "localized amyloidosis" restricted to one organ or "systemic amyloidosis" spread to several organs. . Secondary amyloidosis (including the familial form of secondary amyloidosis also found in familial Mediterranean fever (FMF) and another type of systemic amyloidosis found in long-term hemodialysis patients) is a chronic infection (eg, tuberculosis) Or it may be associated with chronic inflammation (eg, rheumatoid arthritis). Localized forms of amyloidosis include type II diabetes and any related disorders thereof, neurodegenerative diseases such as scrapie, bovine spongiform encephalitis, Creutzfeldt-Jakob disease, Alzheimer's disease, brain amyloid angiopathy and prion protein related disorders ), But is not limited thereto.
[0031]
Abbreviations used herein to indicate amino acids and protecting groups, unless explicitly defined otherwise herein, are based on the IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature (Biochemistry, 1972, 11: 1726). -1732)
The Aβ (16-21) site is known to play an important role in initiating the deleterious process of Aβ peptide amyloidogenesis. It is also known that when these peptides are composed of D-form amino acids, they retain their ability to interact with all naturally occurring homologous L-form sequences, thereby preventing amyloid formation.
[0032]
Other amyloid proteins that can be used in the present invention include, but are not limited to, IAPP, β2-microglobulin, amyloid A protein, and prion-related proteins.
[0033]
From all D-form Aβ (16-21), all D-form Aβ (10-16), all D-form Aβ (1-40), all D-form Aβ (1-42), or from all D-form Aβ (1-42) The vaccines of the invention, prepared from the C-terminal region of), are believed to elicit an immune response in the host or in producing antibodies that recognize a naturally occurring target. As used herein, “all D-forms” include peptides having ≧ 75%, ≧ 80%, ≧ 85%, ≧ 90%, ≧ 95% and 100% D-configuration amino acids. . Also, the vaccines of the present invention do not present the disadvantages of using "self" proteins and do not require aggregation to induce an immune response. For example, antibodies raised against the entire D-form Aβ (16-21) peptide would be expected to recognize the entire L-Aβ (16-21) peptide sequence.
[0034]
The elicited antibody present in the host to which the vaccine of the present invention has been applied binds to the Aβ (16-21) site or other site (eg, the C-terminal region of Aβ) and the short peptide itself has Has the same or even greater ability to prevent amyloid formation. The vaccines of the present invention cause the production of effective anti-amyloidogenic antibodies in the vaccinated host.
[0035]
Suggested immunization procedures are as follows:
a) A vaccine is prepared from all D-form peptides having substantially the same sequence as the naturally occurring β-amyloid peptide (ie, Aβ (all L-form)). The all-D peptide includes full-length Aβ (1-42, all-D), peptides derived from immunogenic fragments of Aβ (1-42, all-D) and related peptidomimetics.
[0036]
b) Immunize the host with this vaccine to produce antibodies in the host that have binding sites that can prevent fibril development.
[0037]
Suitable pharmaceutically acceptable carriers include oral, parenteral, intravascular (IV), intraarterial (IA), intramuscular (IM), and subcutaneous routes of administration. (SC) Any non-immunogenic pharmaceutical adjuvant suitable for the route of administration, such as, but not limited to, phosphate buffer saline (PBS).
[0038]
Pharmaceutical carriers can include vehicles, which carry the antigen to antigen presenting cells. Examples of vehicles are liposomes, immunostimulatory complexes, microfluidized squalene-in-water emulsions, microspheres that can be composed of poly (lactic / glycolic acid) (PLGA). Microparticles of defined dimensions (<5 microns) include, but are not limited to, oil-in-water microemulsions (MF59) and polymeric microparticles.
[0039]
The carriers of the present invention may also include chemical and genetic adjuvants to enhance the immune response or to increase the antigenicity of the antigenic immunogen. These adjuvants exert their immunomodulatory properties through several mechanisms, such as recruiting lymphoid cells, inducing cytokines and facilitating DNA entry into cells. Cytokine adjuvants include, but are not limited to, granulocyte-macrophage colony stimulating factor, interleukin-12, GM-CSF, synthetic muramyl dipeptide analog or monophosphoryl lipid A. Other chemical adjuvants include lactic acid bacteria, Al (OH)₃, Muramyl dipeptide and saponin, but are not limited thereto.
[0040]
The peptide can be coupled to a carrier that modulates the half-life of the circulating peptide. This allows for control of the defense period. The peptide-carrier can also be emulsified in an adjuvant and administered by the usual immunization routes.
[0041]
The vaccines of the present invention are often administered parenterally (eg, intravascularly (IV), intraarterially (IA), intramuscularly (IM), subcutaneously (SC), etc.). In some cases, administration can be oral, intranasal, rectal, transdermal, or aerosol, where the nature of the vaccine allows for transfer to the vasculature. Usually, one injection is used, but if desired, more than one injection may be used. The vaccine can be administered by any convenient means, including syringes, trocars, catheters, and the like. Preferably, administration is intravascular, wherein the site of introduction is not critical to the invention, and is preferably a site where rapid blood flow is present (eg, intravenous, peripheral or central vein). . Other routes may find use where the administration is associated with a sustained release technique or protective matrix.
[0042]
The use of the vaccines of the present invention in preventing and / or treating Alzheimer's disease and other amyloid-related diseases elicits antibodies against the corresponding whole D-body peptides and tests them to make sure they are the native amyloid peptide ( It can be confirmed by seeing whether it can effectively inhibit or prevent fibrillogenesis of (all L isomers).
[0043]
The compounds used to prepare vaccines according to the invention have the following common structure of formula I:
R '-(P) -R "(I)
Where
P is at least one region of the amyloid protein (eg, β-sheet region and GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), an immunogenic fragment thereof, an immunogenic derivative thereof, a protein conjugate thereof, All D-peptides that interact with the immunogenic peptide as well as the immunogenic peptidomimetic);
R 'is:
·hydrogen;
Lower alkyl groups (e.g. acyclic or cyclic having 1 to 8 carbon atoms), with or without functional groups (e.g. carboxylate, sulfonate and phosphonate);
.Aromatic groups;
A heterocyclic group; and
An acyl group (for example, an alkylcarbonyl group, an arylcarbonyl group, a sulfonyl group and a phosphonyl group),
An N-terminal substituent selected from the group consisting of:
R ″ is a C-terminal substituent (eg, hydroxy, alkoxy, aryloxy, unsubstituted amino group or substituted amino group),
R ′ and R ″ can be the same or different; the alkyl or aryl group of R ′ and R ″ can be a halide (F, Cl, Br and I), hydroxyl, alkoxyl, aryloxyl, hydroxy It can be further substituted by an organic functional group selected from the group such as carbonyl, alkoxylcarbonyl, aryloxycarbonyl, carbamyl, unsubstituted amino or substituted amino, sulfo or alkyloxysulfonyl, phosphono or alkoxyphosphonyl.
[0044]
Where the functional group is an acid, its pharmaceutically acceptable salts or esters are within the scope of the invention. When the functional group is a base, its pharmaceutically acceptable salts are within the scope of the invention.
[0045]
In one embodiment, preferred compounds are full-length peptides, Aβ (1-42, all-D), and Aβ (1-40, all-D), Aβ (1-35, all-D) and Aβ (1 -28, all D-forms).
[0046]
In another embodiment, preferred compounds are short peptides (eg, Aβ (1-7, all D-form), Aβ (10-16, all D-form), Aβ (16-21, all D-form), Aβ ( 36-42, all D-forms)). The peptide can be further shortened by removing one or more residues from either or both termini.
[0047]
Preferred compounds may also be all-D peptides derived from the above peptides by substitution of one or more residues in the naturally occurring sequence. In another embodiment, preferred compounds are peptidomimetics of the above peptides.
[0048]
In further embodiments, preferred compounds may be coupled with carriers that modulate the biodistribution, immunogenic properties and half-life of the compound.
[0049]
The following are representative compounds for preparing a vaccine to prevent or treat Alzheimer's disease and other amyloid-related diseases:
[0050]
[Table 1]

The compounds listed above can be modified by removing or inserting one or more amino acid residues, or by replacing one or more amino acid residues with other amino acids or non-amino acid fragments.
[0051]
The following replaces compound 18 (all D-form KLVFFA-NH) by substituting one or two amino acid residues with another amino acid.₂).
[0052]
[Table 2]

For the above compounds, the terms Thi, Cha and Pgly are intended to mean thienylalanine, cyclohexylalanine and phenylglycine, respectively.
[0053]
Rabbits were immunized with all-D KLVFFA or all-L KLVFFA. The results of the obtained antibody titers are shown in FIG. As seen in FIG. 7, the vaccine of the present invention causes the production of antibodies.
[0054]
The invention encompasses various types of immune responses elicited using the vaccines of the invention (eg, amyloid therapy using a vaccine approach).
[0055]
According to the present invention there is also provided a vaccine which elicits a preferential TH-2 or TH-1 response, depending on the type of immunity used. Inducing a TH-2 response favors the production of anti-inflammatory cytokines (eg, IL-4, IL-10 and TGF-β) and the production of the IgGＩ1 and IgG 2b antibody classes. This type of response is preferred. The primary inflammatory response in the brain of AD patients is avoided. On the other hand, a favorable TH-1 response favors a pro-inflammation response with production of inflammatory cytokines (eg, IL-1, IL-6, TNF and IFNγ). This type of response is more likely to trigger activation of the macrophage population. These macrophages then phagocytose any particulate deposits (eg, plaques) through the complement activation process as well as through an antibody-mediated process. This approach is beneficial for clearing already organized senile plaques and preventing the formation of new fibrous deposits.
[0056]
Both approaches (ie, TH-1 and TH-2) are beneficial. The antigens used include regions responsible for cell adhesion (ie, regions 10-16), regions responsible for GAG binding sites (ie, 13-16), and regions for β-sheet bearing regions 16-21 or 40-42. It can be a peptide. These peptides can be presented such that a preferential TH-1 or TH-2 response is obtained, depending on the type of adjuvant used or depending on the route of administration of the vaccine. For example, mucosal immunization via intranasal administration is possible. This is because such routes of administration are known to favor the TH-2 response.
[0057]
The invention will be more readily understood by reference to the following examples. The following examples are offered to illustrate the invention, but not to limit the scope of the invention.
[0058]
(Example I)
An in vitro confirmation procedure to test the efficacy of a whole D-peptide peptide vaccine derived from the fibrillogenic protein was performed in rabbits or mice and the antibody was raised against Aβ16-21 (all D-body). It was demonstrated that it could be triggered (see FIG. 7). Testing of the produced antibodies demonstrated that they effectively prevented the fibrillogenesis of native Aβ (1-40, all-L) in vitro. Activity was assessed using standard assays for fibril development (eg, assays based on Thioflavin T, circular dichroism and solubility).
[0059]
This approach can also be used to establish which regions of the Aβ peptide are most effective when used in the form of a pan-D peptide to prepare antigen fibrogenic vaccines. One way this can be done is as follows:
a) Rabbits or mice were ligated to a series of overlapping all-D peptides generated from the Aβ (1-42) sequence (eg, Aβ (1-6), Aβ (2-8), Aβ (4-10), etc. ) To immunize.
[0060]
b) Antiserum is prepared from immunized rabbits or mice.
[0061]
c) Test these antisera to see which portions of the Aβ sequence produce the antiserum that most effectively prevents fibril development in the standard assay for fibril development described above.
[0062]
(Example II)
(Effects of Antibodies to D- and L-Form Aβ (16-21) Peptide Vaccines on Fibril Development)
A confirmation procedure was performed to test the antigen fibrogenic activity of antibodies raised against D- and L-form Aβ (16-21) peptides.
[0063]
Rabbits were immunized with the D or L form of Aβ (16-21) peptide. The raised antibodies were tested for their antigen fibrogenic activity by ThT assay and by electron microscopy (EM).
[0064]
Antibodies raised against the D- and L-forms of KLVFFA were compared to fibril development as seen by either the Thioflavinｌａthioflavin T assay (ThT) (FIGS. 2 and 3) and EM (FIGS. 4A-4C). Could block the process. In this ThT assay, fibril formation is monitored by increasing fluorescence over time. As can be seen in the figure, these antibodies could inhibit such an increase in fluorescence, provided that they inhibited fibril development.
[0065]
As can be seen in these figures (FIGS. 2-4), antibodies raised against the D-form peptide have better antigen fibrogenic activity than the anti-L form antibody.
[0066]
These results were also confirmed by EM (FIGS. 4A-4C). Here, both the anti-D-KLVFFA peptide and the anti-L-KLVFFA peptide blocked fibril formation when compared to controls (FIG. 4A). Furthermore, again, the anti-D peptide has a greater antigen fibrogenic activity (FIG. 4B) than the anti-L-peptide (FIG. 4C). This follows a ThT assay where the decrease in fluorescence was greater for the anti-D peptide than for the anti-L peptide antibody.
[0067]
(Example III)
(Antibody binding assay)
Brain sections were stained with antibodies raised against the KLVFFA peptide (D and L forms). As seen in FIGS. 5A-5D and FIGS. 6A-6D, these antibodies failed to bind to aggregated (ThioS-positive) AD. The fact that the antibody recognizes Aβ on the surface of cells but cannot bind to plaques can be seen from the figures of both sets stained for both plaque (ThioS) and anti-peptide. These results indicate that the anti-KLVFFA peptide antibody recognizes non-fibrous AD but does not bind to aggregated AD. In this assay, there is no difference between the anti-D-body peptide antibody and the anti-L-body antibody.
[0068]
These results clearly demonstrate that the antibody recognizes only the non-aggregated form and blocks fibril development. By having such activity, the vaccines of the present invention are able to 1) prevent Aβ from organizing itself into fibrils, and 2) inflammatory responses triggered by such antibody binding to insoluble forms Hinder. This is because this antibody cannot bind to aggregated Aβ.
[0069]
Although the invention has been described with reference to specific embodiments thereof, further modifications may be made and the application encompasses any variation, use, or adaptation of the invention, which generally follows the principles of the invention. And applying to essential features as would be within the known or customary practice in the art to which this invention pertains and within the scope of the claims herein before and in the appended claims. It is understood that such deviations from the present disclosure are intended to be included.
[Brief description of the drawings]
FIG.
FIG. 1 shows the sites targeted for antigenic fragments.
FIG. 2
FIG. 2 shows the effect of 1 mg / ml antibody raised against D-form and L-form Aβ (16-21) on fibril development.
FIG. 3
FIG. 3 shows the effect of 0.5 mg / ml antibody raised against D-form and L-form Aβ (16-21) on fibril development.
FIG. 4
FIGS. 4A to 4C show electron micrographs showing the effects of anti-D-KLVFFA peptide antibody (FIG. 4B) and anti-L-KLVFFA peptide antibody (FIG. 4C) on fibril development, together with the control (FIG. 4A).
FIG. 5
FIGS. 5A-5D show the immunohistochemistry of anti-D KLVFFA for aggregated Aβ peptide in brain sections of the retrosplenial cortex (FIG. 5A) and the parietal cortex (FIG. 5C), and the posterior callosal hypertrophy. FIG. 9 shows the histochemistry (thioflavin S assay) of anti-D-KLVFFA for aggregated Aβ peptide in the same brain section of cortex (FIG. 5B) and parietal cortex (FIG. 5D).
FIG. 6
6A-6D show immunohistochemistry of anti-L KLVFFA antibody for aggregated Aβ peptide in brain sections of parietal cortex (FIG. 6A) and entorhinal cortex (FIG. 6C), and parietal cortex (FIG. 6B) and FIG. 7 shows the histochemistry (thioflavin S assay) of anti-L-KLVFFA antibody for aggregated Aβ peptide in the same brain section of the entorhinal cortex (FIG. 6D).
FIG. 7
FIG. 7 shows the response of rabbits to all L and all D KLVFFA conjugated to KLH.

Claims

A method for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject, comprising administering to the subject an antigenic amount of an all-D-peptide, wherein the all-D-peptide comprises: Elicits the production of antibodies against the all-D peptide and elicits an immune response by the subject, thereby preventing fibril development and associated cytotoxicity, wherein the antibodies and / or immune cells are treated with β-sheets. Region and a GAG binding site region, an immunogenic fragment thereof, a protein conjugate thereof, an immunogenic derivative peptide thereof, an immunogenic peptide thereof, and at least one of an amyloid protein selected from the group consisting of an immunogenic peptide mimetic thereof. To interact with one area.

2. The method of claim 1, wherein the compound is a compound of Formula I:
R '-(P) -R "(I)
And
here,
P is the β sheet region and GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), its immunogenic fragments, its immunogenic derivatives, its protein conjugates, its immunogenic peptides and its immunogenicity An all-D peptide that interacts with at least one region of an amyloid protein selected from the group consisting of peptidomimetics;
R 'is:
hydrogen;
A lower alkyl group selected from the group consisting of acyclic and cyclic having 1 to 8 carbon atoms;
Aromatic group;
A heterocyclic group; and an acyl group,
And R "is a C-terminal substituent selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, unsubstituted amino or substituted amino.
Method.

The method according to claim 2, wherein the alkyl or aryl group of R 'and R "is a halide; a hydroxyl group, an alkoxyl group, an aryloxyl group, a hydroxycarbonyl group, an alkoxylcarbonyl group, an aryloxy group. A method further substituted with a carbonyl group, carbamyl group, unsubstituted amino group or substituted amino group, sulfo group or alkyloxysulfonyl group, phosphono group or alkoxyphosphonyl group.

3. The method of claim 2, wherein the compound further comprises an acid function, a pharmaceutically acceptable salt or ester form thereof; or a base function or a pharmaceutically acceptable salt form thereof.

3. The method of claim 2, wherein said compound is selected from the group consisting of compounds 1-48.

6. The method of claim 5, wherein the compound is modified by removing or inserting one or more amino acid residues or by replacing one or more amino acid residues with other amino acids or non-amino acid fragments. .

7. The method of claim 6, wherein said compound is selected from the group consisting of compounds 49-63.

2. The method of claim 1, wherein said subject is a human.

2. The method according to claim 1, wherein the disease is Alzheimer's disease.

A vaccine for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject, comprising a β-sheet region and a GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), an immunogenic fragment thereof, and a protein conjugate thereof. An antigenic amount of a total D-body peptide that interacts with at least one region of an amyloid protein selected from the group consisting of: an immunogenic derivative peptide thereof, an immunogenic peptide thereof and an immunogenic peptide mimetic thereof. Vaccines, wherein the antibodies interact with amyloid protein and thus prevent fibril development.

The vaccine according to claim 10, wherein the compound is a compound of formula (I):
R '-(P) -R "(I)
And
here,
P is the β sheet region and GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), its immunogenic fragments, its immunogenic derivatives, its protein conjugates, its immunogenic peptides and its immunogenicity An all-D peptide that interacts with at least one region of an amyloid protein selected from the group consisting of peptidomimetics;
R 'is:
hydrogen;
A lower alkyl group selected from the group consisting of acyclic and cyclic having 1 to 8 carbon atoms;
Aromatic group;
A heterocyclic group; and an acyl group,
And R ″ is a C-terminal substituent selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, unsubstituted amino or substituted amino;
vaccine.

11. The vaccine according to claim 10, wherein the alkyl or aryl group of R 'and R "is a halide; a hydroxyl group, an alkoxyl group, an aryloxyl group, a hydroxycarbonyl group, an alkoxylcarbonyl group, an aryloxy group. A vaccine further substituted with a carbonyl group, carbamyl group, unsubstituted amino group or substituted amino group, sulfo group or alkyloxysulfonyl group, phosphono group or alkoxyphosphonyl group.

12. The vaccine of claim 11, wherein the compound further comprises an acid function, a pharmaceutically acceptable salt or ester form thereof; or a base function or a pharmaceutically acceptable salt form thereof.

The vaccine of claim 10, wherein said compound is selected from the group consisting of compounds 1-48.

12. The vaccine of claim 11, wherein the compound is modified by removing or inserting one or more amino acid residues or by replacing one or more amino acid residues with other amino acids or non-amino acid fragments. .

16. The vaccine of claim 15, wherein said compound is selected from the group consisting of compounds 49-63.

11. The vaccine according to claim 10, wherein said subject is a human.

The vaccine according to claim 10, wherein the disease is Alzheimer's disease.

Use of a vaccine according to claim 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 or 18 for preventing and / or treating amyloid-related diseases.

Use of the vaccine according to claim 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 or 18 for the manufacture of a medicament for preventing and / or treating an amyloid-related disease.

A method for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject, comprising a β-sheet region and a GAG binding site region, an immunogenic fragment thereof, a protein conjugate thereof, an immunogenic derivative peptide thereof, an immunogen thereof Administering to the subject an antigenic amount of a total D-form peptide that interacts with at least one region of an amyloid protein selected from the group consisting of a non-human peptide and an immunogenic peptidomimetic thereof. Wherein the compound elicits an immune response by the subject and thus prevents fibril development.

22. The method according to claim 21, wherein the compound is a compound of formula (I):
R '-(P) -R "(I)
And
here,
P is the β sheet region and GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), its immunogenic fragments, its immunogenic derivatives, its protein conjugates, its immunogenic peptides and its immunogenicity An all-D peptide that interacts with at least one region of an amyloid protein selected from the group consisting of peptidomimetics;
R 'is:
hydrogen;
A lower alkyl group selected from the group consisting of acyclic and cyclic having 1 to 8 carbon atoms;
Aromatic group;
A heterocyclic group; and an acyl group,
And R ″ is a C-terminal substituent selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, unsubstituted amino or substituted amino;
Method.

23. The method according to claim 22, wherein the alkyl or aryl group of R 'and R "is a halide; a hydroxyl group, an alkoxyl group, an aryloxyl group, a hydroxycarbonyl group, an alkoxylcarbonyl group, an aryloxy group. A method further substituted with a carbonyl group, carbamyl group, unsubstituted amino group or substituted amino group, sulfo group or alkyloxysulfonyl group, phosphono group or alkoxyphosphonyl group.

23. The method of claim 22, wherein the compound further comprises an acid function, a pharmaceutically acceptable salt or ester form thereof; or a base function or a pharmaceutically acceptable salt form thereof.

23. The method of claim 22, wherein said compound is selected from the group consisting of compounds 1-48.

26. The method of claim 25, wherein the compound is modified by removing or inserting one or more amino acid residues or by replacing one or more amino acid residues with other amino acids or non-amino acid fragments. .

27. The method of claim 26, wherein said compound is selected from the group consisting of compounds 49-63.

22. The method of claim 21, wherein said subject is a human.

22. The method according to claim 21, wherein the disease is Alzheimer's disease.

A method for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject, comprising a compound of formula I:
R '-(P) -R "(I)
Administering to the subject an antigenic amount of
here,
P is the β sheet region and GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), its immunogenic fragments, its immunogenic derivatives, its protein conjugates, its immunogenic peptides and its immunogenicity An all-D peptide that interacts with at least one region of an amyloid protein selected from the group consisting of peptidomimetics;
R 'is:
hydrogen;
A lower alkyl group selected from the group consisting of acyclic and cyclic having 1 to 8 carbon atoms;
Aromatic group;
A heterocyclic group; and an acyl group,
And R ″ is a C-terminal substituent selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, unsubstituted amino or substituted amino;
Method.

31. The method of claim 30, wherein said compound elicits an immune response by said subject and thus prevents fibril development.

The alkyl group or the aryl group represented by R ′ and R ″ is a halide; a hydroxyl group, an alkoxyl group, an aryloxyl group, a hydroxycarbonyl group, an alkoxylcarbonyl group, an aryloxycarbonyl group, a carbamyl group, an unsubstituted amino group or a substituted amino group; 31. The method of claim 30, further substituted with a sulfo group or an alkyloxysulfonyl group, a phosphono group or an alkoxyphosphonyl group.

33. The method of claim 32, wherein said compound has an acid function, a pharmaceutically acceptable salt or ester form thereof; or a base function or a pharmaceutically acceptable salt form thereof.

31. The method of claim 30, wherein said compound is selected from the group consisting of compounds 1-48.

35. The method of claim 34, wherein the compound is modified by removing or inserting one or more amino acid residues or by replacing one or more amino acid residues with other amino acids or non-amino acid fragments. .

36. The method of claim 35, wherein said compound is selected from the group consisting of compounds 49-63.

31. The method of claim 30, wherein said subject is a human.

31. The method of claim 30, wherein said disease is Alzheimer's disease.

A vaccine for preventing and / or treating an amyloid-related disease in a subject, comprising a β-sheet region and a GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), an immunogenic fragment thereof, and a protein conjugate thereof. An immunogenic derivative peptide, an immunogenic peptide, and an antigenic amount of a total D-body peptide that interacts with at least one region of an amyloid protein selected from the group consisting of the immunogenic peptide mimetic. A vaccine wherein the compound elicits an immune response by the subject and thus prevents fibril development.

40. The vaccine of claim 39, wherein the compound is of the formula (I):
R '-(P) -R "(I)
And
here,
P is the β sheet region and GAG binding site region, Aβ (1-42, all D-form), its immunogenic fragments, its immunogenic derivatives, its protein conjugates, its immunogenic peptides and its immunogenicity An all-D peptide that interacts with at least one region of an amyloid protein selected from the group consisting of peptidomimetics;
R 'is:
hydrogen;
A lower alkyl group selected from the group consisting of acyclic and cyclic having 1 to 8 carbon atoms;
Aromatic group;
A heterocyclic group; and an acyl group,
And R ″ is a C-terminal substituent selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, unsubstituted amino or substituted amino;
vaccine.

41. The vaccine of claim 40, wherein the alkyl or aryl group of R 'and R "is a halide; a hydroxyl group, an alkoxyl group, an aryloxyl group, a hydroxycarbonyl group, an alkoxylcarbonyl group, an aryloxy group. A vaccine further substituted with a carbonyl group, carbamyl group, unsubstituted amino group or substituted amino group, sulfo group or alkyloxysulfonyl group, phosphono group or alkoxyphosphonyl group.

42. The compound has an acid function, a pharmaceutically acceptable salt or ester form thereof; or the compound has a base function or a pharmaceutically acceptable salt form thereof. The vaccine according to claim 1.

40. The vaccine of claim 39, wherein said compound is selected from the group consisting of compounds 1-48.

41. The vaccine of claim 40, wherein the compound is modified by removing or inserting one or more amino acid residues, or by replacing one or more amino acid residues with other amino acids or non-amino acid fragments. .

45. The vaccine of claim 44, wherein said compound is selected from the group consisting of compounds 49-63.

40. The vaccine of claim 39, wherein said subject is a human.

40. The vaccine of claim 39, wherein said disease is Alzheimer's disease.

50. Use of a vaccine according to claim 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46 or 47 for preventing and / or treating amyloid-related diseases.

Use of the vaccine according to claim 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46 or 47 for the manufacture of a medicament for preventing and / or treating an amyloid-related disease.