JP2003240765A - 液体クロマトグラフの制御装置、液体クロマトグラフィの実行方法及び液体クロマトグラフの制御プログラム - Google Patents
液体クロマトグラフの制御装置、液体クロマトグラフィの実行方法及び液体クロマトグラフの制御プログラムInfo
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- G—PHYSICS
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 煩雑な作業を行うことなく適切な移動度Ｒf0
となる溶離液条件でクロマトグラフィを実行することを
可能とする。 【解決手段】 液体クロマトグラフの制御装置１は、薄
層クロマトグラフィの分離において複数の成分を特定混
合比で含む溶離液４を用いて分離を行ったときの試料３
の移動度Ｒfの実測値を特定混合比に関連づけて記憶す
るための実測値記憶部２５ａと、溶離液１０における各
成分の混合比の変化に対する試料３の移動度Ｒfの変化
率を記憶するための移動度変化率記憶部２５ｂと、実測
値記憶部２５ａに記憶された特定混合比に対する移動度
Ｒfの実測値と、移動度変化率記憶部２５ｂに記憶され
た移動度Ｒfの変化率とに基づいて、特定移動度Ｒf0が
得られる溶離液１０の混合比を求めるための混合比演算
部２２ａと、混合比演算部２２ａでの演算結果に基づい
て、試料３の移動度Ｒfが特定移動度Ｒf0となるように
カラム１８に送液される溶離液４の混合比を制御する制
御信号を出力するための混合比制御部２２ｂとを備えて
いる。
となる溶離液条件でクロマトグラフィを実行することを
可能とする。 【解決手段】 液体クロマトグラフの制御装置１は、薄
層クロマトグラフィの分離において複数の成分を特定混
合比で含む溶離液４を用いて分離を行ったときの試料３
の移動度Ｒfの実測値を特定混合比に関連づけて記憶す
るための実測値記憶部２５ａと、溶離液１０における各
成分の混合比の変化に対する試料３の移動度Ｒfの変化
率を記憶するための移動度変化率記憶部２５ｂと、実測
値記憶部２５ａに記憶された特定混合比に対する移動度
Ｒfの実測値と、移動度変化率記憶部２５ｂに記憶され
た移動度Ｒfの変化率とに基づいて、特定移動度Ｒf0が
得られる溶離液１０の混合比を求めるための混合比演算
部２２ａと、混合比演算部２２ａでの演算結果に基づい
て、試料３の移動度Ｒfが特定移動度Ｒf0となるように
カラム１８に送液される溶離液４の混合比を制御する制
御信号を出力するための混合比制御部２２ｂとを備えて
いる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、移動相として液体
溶媒（溶離液）を用いる液体クロマトグラフィに関し、
より詳細には、液体クロマトグラフィを行う際の条件検
討に関する。
溶媒（溶離液）を用いる液体クロマトグラフィに関し、
より詳細には、液体クロマトグラフィを行う際の条件検
討に関する。
【０００２】
【従来の技術】液体クロマトグラフィにおいては、カラ
ム内に充填された固定相内に、複数の溶媒が混合された
溶離液である移動相に溶解された試料が通過される。こ
のとき、カラム内に導入された試料内の各成分は固定相
との相互作用や移動相との親和性等により、それぞれカ
ラムを通過する時間が異なるため、カラムから排出され
る時点では各成分が分離される。固定相との相互作用が
強い、又は移動相との親和性の弱い物質がカラム中に長
く留まり、カラムから遅く排出されることとなる。
ム内に充填された固定相内に、複数の溶媒が混合された
溶離液である移動相に溶解された試料が通過される。こ
のとき、カラム内に導入された試料内の各成分は固定相
との相互作用や移動相との親和性等により、それぞれカ
ラムを通過する時間が異なるため、カラムから排出され
る時点では各成分が分離される。固定相との相互作用が
強い、又は移動相との親和性の弱い物質がカラム中に長
く留まり、カラムから遅く排出されることとなる。
【０００３】上記示した液体クロマトグラフィと同じ原
理により行われる薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）があ
る。薄層クロマトグラフィでは、薄層とされたカラム内
の固定相に用いられる物質に試料が１滴垂らされ、この
薄層が移動層となる溶離液中に浸漬される。そして、毛
管現象により溶離液が薄層に吸い上げられると共に試料
が吸い上げられる作用により、試料の溶離液に対する移
動度Ｒfを求めることができる。このようにして任意の
溶媒比の溶離液で行われるＴＬＣにて求められる移動度
Ｒfが、液体クロマトグラフィの分離度Ｒsに相関性があ
ることが知られている。
理により行われる薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）があ
る。薄層クロマトグラフィでは、薄層とされたカラム内
の固定相に用いられる物質に試料が１滴垂らされ、この
薄層が移動層となる溶離液中に浸漬される。そして、毛
管現象により溶離液が薄層に吸い上げられると共に試料
が吸い上げられる作用により、試料の溶離液に対する移
動度Ｒfを求めることができる。このようにして任意の
溶媒比の溶離液で行われるＴＬＣにて求められる移動度
Ｒfが、液体クロマトグラフィの分離度Ｒsに相関性があ
ることが知られている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記の
移動度Ｒfと分離度Ｒsとの相関性の具体的指標は明らか
にされておらず、ＴＬＣにおける結果を液体クロマトグ
ラフィに利用することは行われていない。そのため、現
状では、液体クロマトグラフィにおいて分離度Ｒ sを設
定するために、まず、ある値の移動度Ｒfにて液体クロ
マトグラフィを行い、その結果に基づき、溶離液に含ま
れる極性分子溶媒と非極性分子溶媒との割合を変更する
等行って、分離度Ｒsを探し設定することが行われてい
る。例えば、設定した移動度よりも高い移動度となれ
ば、溶離液における極性分子の割合を減少させて、再び
液体クロマトグラフィを行う必要がある。そのため、移
動度の値が設定されるまで液体クロマトグラフィを繰り
返し行う必要があり、作業が煩雑で時間がかかり、溶離
液が多量に必要とされるという問題がある。
移動度Ｒfと分離度Ｒsとの相関性の具体的指標は明らか
にされておらず、ＴＬＣにおける結果を液体クロマトグ
ラフィに利用することは行われていない。そのため、現
状では、液体クロマトグラフィにおいて分離度Ｒ sを設
定するために、まず、ある値の移動度Ｒfにて液体クロ
マトグラフィを行い、その結果に基づき、溶離液に含ま
れる極性分子溶媒と非極性分子溶媒との割合を変更する
等行って、分離度Ｒsを探し設定することが行われてい
る。例えば、設定した移動度よりも高い移動度となれ
ば、溶離液における極性分子の割合を減少させて、再び
液体クロマトグラフィを行う必要がある。そのため、移
動度の値が設定されるまで液体クロマトグラフィを繰り
返し行う必要があり、作業が煩雑で時間がかかり、溶離
液が多量に必要とされるという問題がある。
【０００５】本発明は上記問題に鑑みなされたものであ
り、煩雑な作業を行うことなく適切な移動度Ｒfとなる
溶離液条件でクロマトグラフィを実行することができる
液体クロマトグラフィの制御装置、液体クロマトグラフ
ィの実行方法及び液体クロマトグラフィの制御プログラ
ムを提供することを目的とする。
り、煩雑な作業を行うことなく適切な移動度Ｒfとなる
溶離液条件でクロマトグラフィを実行することができる
液体クロマトグラフィの制御装置、液体クロマトグラフ
ィの実行方法及び液体クロマトグラフィの制御プログラ
ムを提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記問題を
解決すべく鋭意研究を重ねた結果、溶離液の各成分の混
合比と試料の移動度Ｒfとの関係が比例関係であるこ
と、そして、溶離液の各成分の混合比に対する試料の移
動度Ｒfの変化率は、試料の種類が変わっても同じであ
るという知見を得た。
解決すべく鋭意研究を重ねた結果、溶離液の各成分の混
合比と試料の移動度Ｒfとの関係が比例関係であるこ
と、そして、溶離液の各成分の混合比に対する試料の移
動度Ｒfの変化率は、試料の種類が変わっても同じであ
るという知見を得た。
【０００７】本発明はこの知見に基づいてなされたもの
であって、請求項１に記載の液体クロマトグラフィの制
御装置は、薄層クロマトグラフの分離において複数の成
分を特定混合比で含む溶離液を用いて分離を行ったとき
の試料の移動度Ｒfの実測値を前記特定混合比に関連づ
けて記憶するための実測値記憶手段と、前記溶離液にお
ける各成分の混合比の変化に対する試料の移動度Ｒfの
変化率を記憶するための移動度変化率記憶手段と、前記
実測値記憶手段に記憶された前記特定混合比に対する移
動度Ｒfの実測値と、前記移動度変化率記憶手段に記憶
された移動度Ｒfの変化率とに基づいて、特定移動度Ｒ
f0が得られる前記溶離液の混合比を求めるための混合比
演算手段と、前記混合比演算手段での演算結果に基づい
て、試料の移動度Ｒfが前記特定移動度Ｒf0となるよう
にカラムに送液される前記溶離液の混合比を制御する制
御信号を出力するための混合比制御手段とを備えている
ことを特徴としている。
であって、請求項１に記載の液体クロマトグラフィの制
御装置は、薄層クロマトグラフの分離において複数の成
分を特定混合比で含む溶離液を用いて分離を行ったとき
の試料の移動度Ｒfの実測値を前記特定混合比に関連づ
けて記憶するための実測値記憶手段と、前記溶離液にお
ける各成分の混合比の変化に対する試料の移動度Ｒfの
変化率を記憶するための移動度変化率記憶手段と、前記
実測値記憶手段に記憶された前記特定混合比に対する移
動度Ｒfの実測値と、前記移動度変化率記憶手段に記憶
された移動度Ｒfの変化率とに基づいて、特定移動度Ｒ
f0が得られる前記溶離液の混合比を求めるための混合比
演算手段と、前記混合比演算手段での演算結果に基づい
て、試料の移動度Ｒfが前記特定移動度Ｒf0となるよう
にカラムに送液される前記溶離液の混合比を制御する制
御信号を出力するための混合比制御手段とを備えている
ことを特徴としている。
【０００８】請求項３に記載の液体クロマトグラフィの
実行方法は、複数の成分を特定混合比で含む溶離液を用
いたときの試料の移動度Ｒfの実測値をＴＬＣを行って
求める第１の工程と、前記第１の工程で求められた移動
度Ｒfの実測値及びこの実測値が求められた前記溶離液
の前記特定混合比に基づいて、前記溶離液における各成
分の混合比の変化に対する試料の移動度Ｒfの変化率を
利用することにより、特定移動度Ｒf0が得られる前記溶
離液の混合比を求める第２の工程と、前記第２の工程で
求められた前記特定移動度Ｒf0が得られる混合比を有す
る前記溶離液をカラムに送液する第３の工程とを備えて
いることを特徴としている。
実行方法は、複数の成分を特定混合比で含む溶離液を用
いたときの試料の移動度Ｒfの実測値をＴＬＣを行って
求める第１の工程と、前記第１の工程で求められた移動
度Ｒfの実測値及びこの実測値が求められた前記溶離液
の前記特定混合比に基づいて、前記溶離液における各成
分の混合比の変化に対する試料の移動度Ｒfの変化率を
利用することにより、特定移動度Ｒf0が得られる前記溶
離液の混合比を求める第２の工程と、前記第２の工程で
求められた前記特定移動度Ｒf0が得られる混合比を有す
る前記溶離液をカラムに送液する第３の工程とを備えて
いることを特徴としている。
【０００９】上記の構成によると、任意の特定混合比に
おける試料の移動度Ｒfを薄層クロマトグラフィで求め
ておけば、所望の特定移動度Ｒf0での溶離液の混合比を
知ることができる。そのため、煩雑な作業を行うことな
く適切な移動度Ｒf0となる溶離液条件でクロマトグラフ
ィを実行することができる。
おける試料の移動度Ｒfを薄層クロマトグラフィで求め
ておけば、所望の特定移動度Ｒf0での溶離液の混合比を
知ることができる。そのため、煩雑な作業を行うことな
く適切な移動度Ｒf0となる溶離液条件でクロマトグラフ
ィを実行することができる。
【００１０】請求項２に記載の液体クロマトグラフの制
御装置は、前記移動度変化率記憶手段が、含有成分の組
合せの異なる別種類の溶離液ごとに、各成分の混合比の
変化に対する試料の移動度Ｒfの変化率を記憶すること
が可能であることを特徴としている。
御装置は、前記移動度変化率記憶手段が、含有成分の組
合せの異なる別種類の溶離液ごとに、各成分の混合比の
変化に対する試料の移動度Ｒfの変化率を記憶すること
が可能であることを特徴としている。
【００１１】上記の構成によれば、液体クロマトグラフ
の制御装置を、含有成分の組合せの異なる多様な種類の
溶離液に対して使用することができる。
の制御装置を、含有成分の組合せの異なる多様な種類の
溶離液に対して使用することができる。
【００１２】また、請求項４に記載の液体クロマトグラ
フの制御プログラムは、コンピュータを請求項１のよう
な液体クロマトグラフの制御装置として機能させること
が可能なプログラムであり、請求項１と同様の作用効果
を奏する。なお、請求項４に記載されているプログラム
は、ＣＤ−ＲＯＭ、ＦＤ、ＭＯなどのリムーバブル型記
録媒体やハードディスクなどの固定型記録媒体に記録し
て配布可能である他、有線又は無線の電気通信手段によ
ってインターネットなどの通信ネットワークを介して配
布可能である。
フの制御プログラムは、コンピュータを請求項１のよう
な液体クロマトグラフの制御装置として機能させること
が可能なプログラムであり、請求項１と同様の作用効果
を奏する。なお、請求項４に記載されているプログラム
は、ＣＤ−ＲＯＭ、ＦＤ、ＭＯなどのリムーバブル型記
録媒体やハードディスクなどの固定型記録媒体に記録し
て配布可能である他、有線又は無線の電気通信手段によ
ってインターネットなどの通信ネットワークを介して配
布可能である。
【００１３】
【発明の実施の形態】本発明の好適な実施の形態を、図
１〜図７に基づいて以下に説明する。
１〜図７に基づいて以下に説明する。
【００１４】図１において、薄層クロマトグラフィ（Ｔ
ＬＣ）に用いられるＴＬＣ装置１を示す。ＴＬＣ装置１
は、試料３が表面に１滴垂らされたシリカゲル薄層板２
と、容器５に貯留された溶離液４とを備えている。尚、
試料３、シリカゲル薄層板２を形成するシリカゲル、及
び溶離液４は、後述する液体クロマトグラフィに用いら
れるのと同等のものである。
ＬＣ）に用いられるＴＬＣ装置１を示す。ＴＬＣ装置１
は、試料３が表面に１滴垂らされたシリカゲル薄層板２
と、容器５に貯留された溶離液４とを備えている。尚、
試料３、シリカゲル薄層板２を形成するシリカゲル、及
び溶離液４は、後述する液体クロマトグラフィに用いら
れるのと同等のものである。
【００１５】図３において、液体クロマトグラフ装置１
１を示す。液体クロマトグラフ装置１１は、溶媒Ａが貯
留された容器１２と、溶媒Ｂが貯留された容器１３と、
溶媒Ａと溶媒Ｂとが連結された位置に設けられた電磁弁
１４と、溶離液４が貯留される混合器１５と、ポンプ１
６と、インジェクター１７と、カラム１８と、検出器１
９と、フラクションコレクター２０とが、この順に配置
され経路が形成されている。そして、電磁弁１４に液体
クロマトグラフ制御装置２１が接続されている。
１を示す。液体クロマトグラフ装置１１は、溶媒Ａが貯
留された容器１２と、溶媒Ｂが貯留された容器１３と、
溶媒Ａと溶媒Ｂとが連結された位置に設けられた電磁弁
１４と、溶離液４が貯留される混合器１５と、ポンプ１
６と、インジェクター１７と、カラム１８と、検出器１
９と、フラクションコレクター２０とが、この順に配置
され経路が形成されている。そして、電磁弁１４に液体
クロマトグラフ制御装置２１が接続されている。
【００１６】容器１２には溶媒Ａが、容器１３には溶媒
Ｂが貯留されている。尚、用いられる溶媒は２種類に限
定されず、使用状態・目的に応じて数を増やしてもよ
い。一般に、溶媒Ａ・溶媒Ｂには、非極性分子と極性分
子との組合せで用いられる。
Ｂが貯留されている。尚、用いられる溶媒は２種類に限
定されず、使用状態・目的に応じて数を増やしてもよ
い。一般に、溶媒Ａ・溶媒Ｂには、非極性分子と極性分
子との組合せで用いられる。
【００１７】ポンプ１６は、液体クロマトグラフ装置１
１の回路において、容器１５・電磁弁１４を介して溶媒
Ａ・溶媒Ｂを汲み上げる。電磁弁１４は、液体クロマト
グラフ制御装置２１からの制御信号により、汲み上げら
れる溶媒を溶媒Ａ又は溶媒Ｂから選択する。電磁弁１４
での各溶媒の選択時間に応じて混合器１５内での溶媒
Ａ、Ｂの混合比が決定される。混合器１５は、汲み上げ
られた溶媒Ａ及び溶媒Ｂが一旦貯留され、溶離液１０と
される。この溶離液１０は、後述するように、算出され
た混合比を有するものである。
１の回路において、容器１５・電磁弁１４を介して溶媒
Ａ・溶媒Ｂを汲み上げる。電磁弁１４は、液体クロマト
グラフ制御装置２１からの制御信号により、汲み上げら
れる溶媒を溶媒Ａ又は溶媒Ｂから選択する。電磁弁１４
での各溶媒の選択時間に応じて混合器１５内での溶媒
Ａ、Ｂの混合比が決定される。混合器１５は、汲み上げ
られた溶媒Ａ及び溶媒Ｂが一旦貯留され、溶離液１０と
される。この溶離液１０は、後述するように、算出され
た混合比を有するものである。
【００１８】インジェクター１７は、試料３を有してお
り、溶離液１０が通過することで試料３が送出されるよ
うになっている。この試料３は、図１における試料３と
同じものである。尚、インジェクター１７は１本に限定
されず、選択的に経路を選ぶことができる並設された複
数のインジェクターとし、複数の試料について連続的に
作業を行うことも可能である。
り、溶離液１０が通過することで試料３が送出されるよ
うになっている。この試料３は、図１における試料３と
同じものである。尚、インジェクター１７は１本に限定
されず、選択的に経路を選ぶことができる並設された複
数のインジェクターとし、複数の試料について連続的に
作業を行うことも可能である。
【００１９】カラム１８には固定相が充填されており、
混合溶媒１０が通過することで液体クロマトグラフが行
われる。この固定相としては、図１におけるシリカゲル
薄層板２を形成するシリカゲルが用いられている。尚、
カラムは１本に限定されず、選択的に経路を選ぶことが
できる並設された複数のカラムとし、複数種類の液体ク
ロマトグラフィを行うことも可能である。
混合溶媒１０が通過することで液体クロマトグラフが行
われる。この固定相としては、図１におけるシリカゲル
薄層板２を形成するシリカゲルが用いられている。尚、
カラムは１本に限定されず、選択的に経路を選ぶことが
できる並設された複数のカラムとし、複数種類の液体ク
ロマトグラフィを行うことも可能である。
【００２０】検知器１９は、カラム１８にて行われる液
体クロマトグラフの結果の検出を行う。そして、フラク
ションコレクター２０は、複数の試験管を有しており、
検知器１９の分析結果により、試料３に含まれる成分毎
に各試験管に分取されるようになっている。
体クロマトグラフの結果の検出を行う。そして、フラク
ションコレクター２０は、複数の試験管を有しており、
検知器１９の分析結果により、試料３に含まれる成分毎
に各試験管に分取されるようになっている。
【００２１】また、液体クロマトグラフ制御装置２１
は、例えば汎用のパーソナルコンピュータなどの情報処
理装置によって構成されており、図４に示すように、混
合比演算部２２ａ及び混合比制御部２２ｂを有するＣＰ
Ｕ２２と、実測値記憶部２５ａ及び移動度変化率記憶部
２５ｂを有するメモリ２５と、ハードディスク２６と、
入出力部２８とを備えている。入出力部２８には、例え
ばキーボードやマウスなどから構成された入力部２９
と、液体クロマトグラフィの実行過程における様々な情
報をオペレータに知らせるためのディスプレイ３０と、
ＣＰＵの混合比制御部２２ｂからの指示に基づいて電磁
弁１４の開閉信号を送出する電磁弁操作部３１とが接続
されている。
は、例えば汎用のパーソナルコンピュータなどの情報処
理装置によって構成されており、図４に示すように、混
合比演算部２２ａ及び混合比制御部２２ｂを有するＣＰ
Ｕ２２と、実測値記憶部２５ａ及び移動度変化率記憶部
２５ｂを有するメモリ２５と、ハードディスク２６と、
入出力部２８とを備えている。入出力部２８には、例え
ばキーボードやマウスなどから構成された入力部２９
と、液体クロマトグラフィの実行過程における様々な情
報をオペレータに知らせるためのディスプレイ３０と、
ＣＰＵの混合比制御部２２ｂからの指示に基づいて電磁
弁１４の開閉信号を送出する電磁弁操作部３１とが接続
されている。
【００２２】ハードディスク２６には、一実施の形態に
よる液体クロマトグラフの制御プログラムを含む各種の
ソフトウェアが記憶されている。そして、これらのハー
ドウェア及びソフトウェアが組み合わされることによっ
て、上述の各部２２ａ、２２ｂ、２５ａ、２５ｂが構築
されている。なお、このプログラムは、ＣＤ−ＲＯＭ、
ＦＤ、ＭＯなどのリムーバブル型記録媒体に記録してお
くことにより、任意のコンピュータにインストールする
ことが可能である。
よる液体クロマトグラフの制御プログラムを含む各種の
ソフトウェアが記憶されている。そして、これらのハー
ドウェア及びソフトウェアが組み合わされることによっ
て、上述の各部２２ａ、２２ｂ、２５ａ、２５ｂが構築
されている。なお、このプログラムは、ＣＤ−ＲＯＭ、
ＦＤ、ＭＯなどのリムーバブル型記録媒体に記録してお
くことにより、任意のコンピュータにインストールする
ことが可能である。
【００２３】実測値記憶部２５ａは、薄層クロマトグラ
フィの分離において複数の成分を特定混合比で含む溶離
液を用いて分離を行ったときの試料の移動度Ｒfの実測
値を当該特定混合比に関連づけて記憶する。実測値記憶
部２５ａに記憶すべきデータは、液体クロマトグラフ装
置１１を用いて液体クロマトグラフィを行う前に予め薄
層クロマトグラフィを行って得られたものであって、オ
ペレータによって入力部２９から入力されてよい。
フィの分離において複数の成分を特定混合比で含む溶離
液を用いて分離を行ったときの試料の移動度Ｒfの実測
値を当該特定混合比に関連づけて記憶する。実測値記憶
部２５ａに記憶すべきデータは、液体クロマトグラフ装
置１１を用いて液体クロマトグラフィを行う前に予め薄
層クロマトグラフィを行って得られたものであって、オ
ペレータによって入力部２９から入力されてよい。
【００２４】移動度変化率記憶部２５ｂは、溶離液にお
ける各成分の混合比の変化に対する試料の移動度Ｒfの
変化率を記憶している。移動度変化率記憶部２５ｂに記
憶されたデータは、含有成分の組合せの異なる別種類の
溶離液ごとに予め薄層クロマトグラフィを行って得られ
たものである。ハードディスク２６には、含有成分の組
合せの異なる別種類の溶離液について、それぞれ移動度
Ｒfの変化率が格納されている。そして、本実施の形態
による制御プログラムが実行されるときに、実測値記憶
部２５ａに記憶された特定混合比にかかる種類の溶離液
に対する移動度Ｒfの変化率だけがメモリ２５にロード
される。
ける各成分の混合比の変化に対する試料の移動度Ｒfの
変化率を記憶している。移動度変化率記憶部２５ｂに記
憶されたデータは、含有成分の組合せの異なる別種類の
溶離液ごとに予め薄層クロマトグラフィを行って得られ
たものである。ハードディスク２６には、含有成分の組
合せの異なる別種類の溶離液について、それぞれ移動度
Ｒfの変化率が格納されている。そして、本実施の形態
による制御プログラムが実行されるときに、実測値記憶
部２５ａに記憶された特定混合比にかかる種類の溶離液
に対する移動度Ｒfの変化率だけがメモリ２５にロード
される。
【００２５】混合比演算部２２ａは、実測値記憶部２５
ａに記憶された特定混合比に対する移動度Ｒfの実測値
と、移動度変化率記憶部２５ｂに記憶された移動度Ｒf
の変化率とに基づいて、特定移動度Ｒf0が得られる溶離
液の混合比を求める。混合比演算部２２ａでの詳細な動
作については後述する。
ａに記憶された特定混合比に対する移動度Ｒfの実測値
と、移動度変化率記憶部２５ｂに記憶された移動度Ｒf
の変化率とに基づいて、特定移動度Ｒf0が得られる溶離
液の混合比を求める。混合比演算部２２ａでの詳細な動
作については後述する。
【００２６】混合比制御部２２ｂは、混合比演算部２２
ａでの演算結果に基づいて、試料の移動度Ｒfが特定移
動度Ｒf0となるようにカラムに送液される溶離液の混合
比を制御する制御信号を出力する。この制御信号は入出
力部２８から電磁弁操作部３１に供給される。
ａでの演算結果に基づいて、試料の移動度Ｒfが特定移
動度Ｒf0となるようにカラムに送液される溶離液の混合
比を制御する制御信号を出力する。この制御信号は入出
力部２８から電磁弁操作部３１に供給される。
【００２７】ディスプレイ３０には、図５に示すよう
に、グラフ５１と、グラフ５２と、グラジエント条件表
５３とが表示される。
に、グラフ５１と、グラフ５２と、グラジエント条件表
５３とが表示される。
【００２８】グラフ５１は、混合器１５からカラム１８
に供給される溶離液１０の混合比（Ｂ／Ａ＋Ｂ）の時間
変化を表したものであり、横軸が経過時間、縦軸が溶離
液に含まれる溶媒Ｂの割合である。横軸には、時間巾５
４がＷ（ｗａｉｔ）、Ｇ（ｇｒａｄｉｅｎｔ）、Ｔ（ｔ
ｏｐ）、ＦＷ（ｆｏｒｗａｒｄ ｗａｓｈ）、ＥＱ（ｅ
ｑｕｉｌｉｂｒａｔｉｏｎ）の順に設定されている。グ
ラフ５２は、横軸が経過時間、縦軸が吸光度である。グ
ラフ５２は試料３の流出曲線であり、試料３に含まれる
成分がカラム１８から排出されたときに突出した値を示
す。グラジエント条件表５３は、時間巾毎の、溶離液１
０に含まれる溶媒Ａと溶媒Ｂとの混合比が表示されてい
る。尚、時間巾Ｇにおいては、Ｗでの混合比を徐々にＴ
での混合比にまで直線的に増加させる。
に供給される溶離液１０の混合比（Ｂ／Ａ＋Ｂ）の時間
変化を表したものであり、横軸が経過時間、縦軸が溶離
液に含まれる溶媒Ｂの割合である。横軸には、時間巾５
４がＷ（ｗａｉｔ）、Ｇ（ｇｒａｄｉｅｎｔ）、Ｔ（ｔ
ｏｐ）、ＦＷ（ｆｏｒｗａｒｄ ｗａｓｈ）、ＥＱ（ｅ
ｑｕｉｌｉｂｒａｔｉｏｎ）の順に設定されている。グ
ラフ５２は、横軸が経過時間、縦軸が吸光度である。グ
ラフ５２は試料３の流出曲線であり、試料３に含まれる
成分がカラム１８から排出されたときに突出した値を示
す。グラジエント条件表５３は、時間巾毎の、溶離液１
０に含まれる溶媒Ａと溶媒Ｂとの混合比が表示されてい
る。尚、時間巾Ｇにおいては、Ｗでの混合比を徐々にＴ
での混合比にまで直線的に増加させる。
【００２９】次に、本発明の液体クロマトグラフの実行
方法の一実施の形態について説明する。
方法の一実施の形態について説明する。
【００３０】（第１の工程）まず、溶媒Ａ・溶媒Ｂを特
定混合比で含む溶離液４を用いたときの、試料３の移動
度Ｒfの実測値を、オペレータが薄層クロマトグラフィ
（ＴＬＣ）を行って求める。
定混合比で含む溶離液４を用いたときの、試料３の移動
度Ｒfの実測値を、オペレータが薄層クロマトグラフィ
（ＴＬＣ）を行って求める。
【００３１】ＴＬＣでは、まず、図２（ａ）に示すよう
に、試料３が１滴垂らされた状態のシリカゲル薄層２
が、図１に示すように溶離液４中に浸漬される。する
と、毛管現象により混合溶液４がシリカゲル薄層２に吸
い上げられてゆく。これに伴い、試料３も上方に移動す
る。溶離液４及び試料３の移動が終了すると、図２
（ｂ）に示すように、試料３は試料３´の位置に移動す
る。このとき、試料３の混合溶液４中に浸漬される前の
位置から、溶離液４の上端までの距離を１．０として、
その１．０に対する試料３´までの距離が移動度Ｒfと
して求められる。
に、試料３が１滴垂らされた状態のシリカゲル薄層２
が、図１に示すように溶離液４中に浸漬される。する
と、毛管現象により混合溶液４がシリカゲル薄層２に吸
い上げられてゆく。これに伴い、試料３も上方に移動す
る。溶離液４及び試料３の移動が終了すると、図２
（ｂ）に示すように、試料３は試料３´の位置に移動す
る。このとき、試料３の混合溶液４中に浸漬される前の
位置から、溶離液４の上端までの距離を１．０として、
その１．０に対する試料３´までの距離が移動度Ｒfと
して求められる。
【００３２】（第２の工程）以下の工程は液体クロマト
グラフ制御装置２１において行われる。液体クロマトグ
ラフ制御装置２１のＣＰＵ２２は、図６のステップＳ１
において、第１の工程のＴＬＣで得られた移動度Ｒfの
実測値が入力部２９から入力されたかどうかを繰り返し
て判断する。そして、移動度Ｒfの実測値が入力された
場合には（Ｓ１：ＹＥＳ）、ステップＳ２において、移
動度Ｒfの実測値と共に、これが求められたときにおけ
る混合溶液４の溶媒Ａと溶媒Ｂとの混合比（特定混合
比）をメモリ２５の実測値記憶部２５ａに記憶する。
グラフ制御装置２１において行われる。液体クロマトグ
ラフ制御装置２１のＣＰＵ２２は、図６のステップＳ１
において、第１の工程のＴＬＣで得られた移動度Ｒfの
実測値が入力部２９から入力されたかどうかを繰り返し
て判断する。そして、移動度Ｒfの実測値が入力された
場合には（Ｓ１：ＹＥＳ）、ステップＳ２において、移
動度Ｒfの実測値と共に、これが求められたときにおけ
る混合溶液４の溶媒Ａと溶媒Ｂとの混合比（特定混合
比）をメモリ２５の実測値記憶部２５ａに記憶する。
【００３３】次に、ステップＳ３において、実測値記憶
部２５ａに記憶された特定混合比にかかる種類の溶離液
について、各成分の混合比の変化に対する試料の移動度
Ｒfの変化率のデータがハードディスク２６から読み出
されて移動度変化率記憶部２５ｂにロードされる。
部２５ａに記憶された特定混合比にかかる種類の溶離液
について、各成分の混合比の変化に対する試料の移動度
Ｒfの変化率のデータがハードディスク２６から読み出
されて移動度変化率記憶部２５ｂにロードされる。
【００３４】そして、ステップＳ４において、混合比演
算部２２ａは、実測値記憶部２５ａに記憶された特定混
合比に対する移動度Ｒfの実測値と、移動度変化率記憶
部２５ｂに記憶された移動度Ｒfの変化率とに基づい
て、溶離液の混合比と移動度Ｒfとの関係を一対一に定
める。つまり、移動度変化率記憶部２５ｂに記憶されて
いるのは移動度Ｒfの変化率に過ぎないので、混合比を
横軸に移動度Ｒfを縦軸にとったグラフである図７に示
すように、移動度変化率記憶部２５ｂの記憶内容から
は、溶離液の混合比と移動度Ｒfとの関係を一対一に定
めることはできず、両者の関係を表す直線が直線６１、
６２、６３、６４（これらはすべて移動度変化率記憶部
２５ｂに記憶された移動度Ｒfの変化率に従った傾きを
有している）などの無数の直線のいずれかであるという
ことしか分からない。そのため、実測値記憶部２５ａに
記憶された特定混合比Ｘ0に対する移動度Ｒfの実測値Ｒ
f1を用いて、これら無数の直線の中から座標（Ｘ0，Ｒ
f1）を通過するものを、実際に移動度Ｒfと混合比との
関係を表すものとして選択する。例えば、図７に示す例
では、混合比演算部２２ａは、両者の関係を表すものと
して直線６３を選択する。
算部２２ａは、実測値記憶部２５ａに記憶された特定混
合比に対する移動度Ｒfの実測値と、移動度変化率記憶
部２５ｂに記憶された移動度Ｒfの変化率とに基づい
て、溶離液の混合比と移動度Ｒfとの関係を一対一に定
める。つまり、移動度変化率記憶部２５ｂに記憶されて
いるのは移動度Ｒfの変化率に過ぎないので、混合比を
横軸に移動度Ｒfを縦軸にとったグラフである図７に示
すように、移動度変化率記憶部２５ｂの記憶内容から
は、溶離液の混合比と移動度Ｒfとの関係を一対一に定
めることはできず、両者の関係を表す直線が直線６１、
６２、６３、６４（これらはすべて移動度変化率記憶部
２５ｂに記憶された移動度Ｒfの変化率に従った傾きを
有している）などの無数の直線のいずれかであるという
ことしか分からない。そのため、実測値記憶部２５ａに
記憶された特定混合比Ｘ0に対する移動度Ｒfの実測値Ｒ
f1を用いて、これら無数の直線の中から座標（Ｘ0，Ｒ
f1）を通過するものを、実際に移動度Ｒfと混合比との
関係を表すものとして選択する。例えば、図７に示す例
では、混合比演算部２２ａは、両者の関係を表すものと
して直線６３を選択する。
【００３５】さらに、ステップＳ５では、混合比演算部
２２ａが、液体クロマトグラフ装置１１で試料の分取を
行う際に必要とされる特定移動度Ｒf0に対する混合比
を、ステップＳ４で定められた一対一の関係に基づいて
算出する。例えば、図５のグラフ５１に示すようなグラ
ジエント処理を行う場合、混合比演算部２２ａは、図７
に示すように、時間巾「Ｗ」及び「Ｔ」のときの各特定
移動度Ｒf0w、Ｒf0tに対する混合比Ｘw、Ｘtを直線６３
に基づいて求める。このようにして求められた混合比
は、メモリ２５内の所定領域に書き込まれ、図５のグラ
ジエント条件表５３に示すようにディスプレイ３０に表
示される。
２２ａが、液体クロマトグラフ装置１１で試料の分取を
行う際に必要とされる特定移動度Ｒf0に対する混合比
を、ステップＳ４で定められた一対一の関係に基づいて
算出する。例えば、図５のグラフ５１に示すようなグラ
ジエント処理を行う場合、混合比演算部２２ａは、図７
に示すように、時間巾「Ｗ」及び「Ｔ」のときの各特定
移動度Ｒf0w、Ｒf0tに対する混合比Ｘw、Ｘtを直線６３
に基づいて求める。このようにして求められた混合比
は、メモリ２５内の所定領域に書き込まれ、図５のグラ
ジエント条件表５３に示すようにディスプレイ３０に表
示される。
【００３６】なお、ステップＳ５において、グラフ５１
に示す溶離液１０の混合比の時間変化や、グラフ５２に
示す試料３の流出曲線がさらに算出されてもよい。
に示す溶離液１０の混合比の時間変化や、グラフ５２に
示す試料３の流出曲線がさらに算出されてもよい。
【００３７】（第３の工程）ステップＳ６において、混
合比制御部２２ｂは、ステップＳ５で求められた混合比
を有する溶離液１０が所定時間だけカラム１８に送液さ
れるような制御信号を電磁弁操作部３１に順次出力す
る。電磁弁操作部３１はこの制御信号に基づいて電磁弁
１４を開閉させる信号を電磁弁１４に供給する。これに
より、カラム１８内での試料の移動度Ｒfを、確実に特
定移動度Ｒf0又はその近傍とすることができるので、良
好な試料の分離を行わせることができる。
合比制御部２２ｂは、ステップＳ５で求められた混合比
を有する溶離液１０が所定時間だけカラム１８に送液さ
れるような制御信号を電磁弁操作部３１に順次出力す
る。電磁弁操作部３１はこの制御信号に基づいて電磁弁
１４を開閉させる信号を電磁弁１４に供給する。これに
より、カラム１８内での試料の移動度Ｒfを、確実に特
定移動度Ｒf0又はその近傍とすることができるので、良
好な試料の分離を行わせることができる。
【００３８】また、本実施の形態では、含有成分の組合
せの異なる別種類の溶離液ごとに、各成分の混合比の変
化に対する試料の移動度Ｒfの変化率がハードディスク
２６に記憶されており、必要な変化率だけを移動度変化
率記憶部２５ｂに記憶させることができる。そのため、
液体クロマトグラフ制御装置２１を、含有成分の組合せ
の異なる多様な種類の溶離液に対して使用することがで
きる。
せの異なる別種類の溶離液ごとに、各成分の混合比の変
化に対する試料の移動度Ｒfの変化率がハードディスク
２６に記憶されており、必要な変化率だけを移動度変化
率記憶部２５ｂに記憶させることができる。そのため、
液体クロマトグラフ制御装置２１を、含有成分の組合せ
の異なる多様な種類の溶離液に対して使用することがで
きる。
【００３９】以上、本発明の好適な実施の形態について
説明したが、本発明は上述の実施の形態に限られるもの
ではなく、特許請求の範囲に記載した限りにおいて様々
な設計変更が可能なものである。例えば、液体クロマト
グラフ装置１１の具体的な構成は様々な形態に変更する
ことができる。また、移動度変化率記憶部２５ｂは、各
成分の混合比の変化に対する試料の移動度Ｒfの変化率
を１種類の溶離液だけについて記憶可能であってもよ
い。また、液体クロマトグラフ制御装置２１のハードウ
ェア構成は任意に変更可能である。
説明したが、本発明は上述の実施の形態に限られるもの
ではなく、特許請求の範囲に記載した限りにおいて様々
な設計変更が可能なものである。例えば、液体クロマト
グラフ装置１１の具体的な構成は様々な形態に変更する
ことができる。また、移動度変化率記憶部２５ｂは、各
成分の混合比の変化に対する試料の移動度Ｒfの変化率
を１種類の溶離液だけについて記憶可能であってもよ
い。また、液体クロマトグラフ制御装置２１のハードウ
ェア構成は任意に変更可能である。
【００４０】
【発明の効果】請求項１、３、４の発明によると、任意
の特定混合比における試料の移動度Ｒ fを薄層クロマト
グラフィで求めておけば、所望の特定移動度Ｒf0での溶
離液の混合比を知ることができる。そのため、煩雑な作
業を行うことなく適切な移動度Ｒf0となる溶離液条件で
クロマトグラフィを実行することができる。
の特定混合比における試料の移動度Ｒ fを薄層クロマト
グラフィで求めておけば、所望の特定移動度Ｒf0での溶
離液の混合比を知ることができる。そのため、煩雑な作
業を行うことなく適切な移動度Ｒf0となる溶離液条件で
クロマトグラフィを実行することができる。
【００４１】また、請求項２の発明によると、液体クロ
マトグラフの制御装置を、含有成分の組合せの異なる多
様な種類の溶離液に対して使用することができる。
マトグラフの制御装置を、含有成分の組合せの異なる多
様な種類の溶離液に対して使用することができる。
【図１】ＴＬＣを行う装置を示す斜視図である。
【図２】ＴＬＣを行う際のシリカゲル薄層板の模式図で
あり、（ａ）はＴＬＣ前、（ｂ）はＴＬＣ後をそれぞれ
示している。
あり、（ａ）はＴＬＣ前、（ｂ）はＴＬＣ後をそれぞれ
示している。
【図３】本発明が適用される液体クロマトグラフ装置を
示す模式図である。
示す模式図である。
【図４】本発明の一実施の形態による液体クロマトグラ
フ制御装置のブロック図である。
フ制御装置のブロック図である。
【図５】図４に示す液体クロマトグラフ制御装置のディ
スプレイへの表示例を描いた図面である。
スプレイへの表示例を描いた図面である。
【図６】本発明の一実施の形態による液体クロマトグラ
フの実行方法のフローチャートである。
フの実行方法のフローチャートである。
【図７】混合比を横軸に、移動度Ｒfを縦軸にとったグ
ラフである。
ラフである。
１ ＴＬＣ装置
２ シリカゲル薄層板
３ 試料
４ 溶離液
５ 容器
６ 検出器
１１ 液体クロマトグラフ装置
１２、１３ 容器
１４ 電磁弁
１５ 混合器
１６ ポンプ
１７ インジェクター
１８ カラム
２０ フラクションコレクター
２１ 液体クロマトグラフ制御装置
２２ ＣＰＵ
２２ａ 混合比演算部（混合比演算手段）
２２ｂ 混合比制御部（混合比制御手段）
２５ メモリ
２５ａ 実測値記憶部（実測値記憶手段）
２５ｂ 移動度変化率記憶部（移動度変化率記憶手段）
２６ ハードディスク
２８ 入出力部
２９ 入力部
３０ ディスプレイ
３１ 電磁弁操作部
Claims (4)
- 【請求項１】 薄層クロマトグラフィの分離において複
数の成分を特定混合比で含む溶離液を用いて分離を行っ
たときの試料の移動度Ｒfの実測値を前記特定混合比に
関連づけて記憶するための実測値記憶手段と、前記溶離
液における各成分の混合比の変化に対する試料の移動度
Ｒfの変化率を記憶するための移動度変化率記憶手段
と、前記実測値記憶手段に記憶された前記特定混合比に
対する移動度Ｒfの実測値と、前記移動度変化率記憶手
段に記憶された移動度Ｒfの変化率とに基づいて、特定
移動度Ｒf0が得られる前記溶離液の混合比を求めるため
の混合比演算手段と、前記混合比演算手段での演算結果
に基づいて、試料の移動度Ｒfが前記特定移動度Ｒf0と
なるようにカラムに送液される前記溶離液の混合比を制
御する制御信号を出力するための混合比制御手段とを備
えていることを特徴とする液体クロマトグラフの制御装
置。 - 【請求項２】 前記移動度変化率記憶手段が、含有成分
の組合せの異なる別種類の溶離液ごとに、各成分の混合
比の変化に対する試料の移動度Ｒfの変化率を記憶する
ことが可能であることを特徴とする請求項１に記載の液
体クロマトグラフの制御装置。 - 【請求項３】 複数の成分を特定混合比で含む溶離液を
用いたときの試料の移動度Ｒfの実測値を薄層クロマト
グラフを行って求める第１の工程と、前記第１の工程で
求められた移動度Ｒfの実測値及びこの実測値が求めら
れた前記溶離液の前記特定混合比に基づいて、前記溶離
液における各成分の混合比の変化に対する試料の移動度
Ｒfの変化率を利用することにより、特定移動度Ｒf0が
得られる前記溶離液の混合比を求める第２の工程と、前
記第２の工程で求められた前記特定移動度Ｒf0が得られ
る混合比を有する前記溶離液をカラムに送液する第３の
工程とを備えていることを特徴とする液体クロマトグラ
フィの実行方法。 - 【請求項４】 薄層クロマトグラフィの分離において複
数の成分を特定混合比で含む溶離液を用いて分離を行っ
たときの試料の移動度Ｒfの実測値を前記特定混合比に
関連づけて記憶するための実測値記憶手段、 前記溶離液における各成分の混合比の変化に対する試料
の移動度Ｒfの変化率を記憶するための移動度変化率記
憶手段、 前記実測値記憶手段に記憶された前記特定混合比に対す
る移動度Ｒfの実測値と、前記移動度変化率記憶手段に
記憶された移動度Ｒfの変化率とに基づいて、特定移動
度Ｒf0が得られる前記溶離液の混合比を求めるための混
合比演算手段、及び、 前記混合比演算手段での演算結果に基づいて、試料の移
動度Ｒfが前記特定移動度Ｒf0となるようにカラムに送
液される前記溶離液の混合比を制御する制御信号を出力
するための混合比制御手段としてコンピュータを機能さ
せるための液体クロマトグラフの制御プログラム。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002037722A JP3423707B1 (ja) | 2002-02-15 | 2002-02-15 | 液体クロマトグラフの制御装置、液体クロマトグラフィの実行方法及び液体クロマトグラフの制御プログラム |
| PCT/JP2003/001522 WO2008062495A1 (fr) | 2002-02-15 | 2003-02-14 | Dispositif de commande de chromatographie en phase liquide, procédé d'exécution de chromatographie en phase liquide et programme de commande de chromatographie en phase liquide |
| AU2003304726A AU2003304726A1 (en) | 2002-02-15 | 2003-02-14 | Liquid chromatograph control device, liquid chromatography performing method and liquid chromatograph control program |
| US10/504,637 US7169308B2 (en) | 2002-02-15 | 2003-02-14 | Liquid chromatograph control apparatus, method for performing liquid chromatography and computer program for controlling a liquid chromatograph |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002037722A JP3423707B1 (ja) | 2002-02-15 | 2002-02-15 | 液体クロマトグラフの制御装置、液体クロマトグラフィの実行方法及び液体クロマトグラフの制御プログラム |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP3423707B1 JP3423707B1 (ja) | 2003-07-07 |
| JP2003240765A true JP2003240765A (ja) | 2003-08-27 |
Family
ID=27606575
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2002037722A Expired - Lifetime JP3423707B1 (ja) | 2002-02-15 | 2002-02-15 | 液体クロマトグラフの制御装置、液体クロマトグラフィの実行方法及び液体クロマトグラフの制御プログラム |
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| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7169308B2 (ja) |
| JP (1) | JP3423707B1 (ja) |
| AU (1) | AU2003304726A1 (ja) |
| WO (1) | WO2008062495A1 (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7169308B2 (en) | 2002-02-15 | 2007-01-30 | Yamazen Corporation | Liquid chromatograph control apparatus, method for performing liquid chromatography and computer program for controlling a liquid chromatograph |
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