JP2002238995A - Separable medical materials - Google Patents
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 ヒアルロン酸溶液とヒアルロン酸ゲルを同一
容器内に別々のｐＨで保存することで、従来の均一に混
合した場合より、ゲルをより安定な条件で保存すること
ができ、長期安定性に優れたヒアルロン酸とヒアルロン
酸ゲルからなる医療材料を提供すること。
【解決手段】（Ａ）ヒアルロン酸溶液と、（Ｂ）実質的
に化学的架橋剤又は化学的修飾剤等によって改質されて
いないヒアルロン酸単独で形成されたゲルを、各々異な
るｐＨ条件下にて同一容器内に分離された状態で充填さ
れていることを特徴とする医療材料を構成とする。
(57) [Problem] To store a hyaluronic acid solution and a hyaluronic acid gel in the same container at different pHs, and to store the gel under more stable conditions than in the conventional case of uniformly mixing. To provide a medical material comprising hyaluronic acid and a hyaluronic acid gel that can be produced and has excellent long-term stability. A gel formed of (A) a hyaluronic acid solution and (B) a hyaluronic acid alone substantially not modified by a chemical cross-linking agent or a chemical modifying agent, etc., under different pH conditions. The medical material is characterized by being packed separately in the same container.
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、新規なヒアルロン
酸溶液とヒアルロン酸ゲルを構成成分とする医療材料に
関する。The present invention relates to a novel hyaluronic acid solution and a medical material comprising a hyaluronic acid gel as a constituent.
【０００２】[0002]
【従来の技術】ヒアルロン酸は、β−Ｄ−Ｎ−アセチル
グルコサミンとβ−Ｄ−グルクロン酸が交互に結合した
直鎖状の高分子多糖である。ヒアルロン酸は哺乳動物の
結合組織に分布するほか、ニワトリのとさか、連鎖球菌
の夾膜などにも存在が知られている。ニワトリのとさ
か、臍帯等が抽出材料として用いられているほか、連鎖
球菌の培養物からも精製物が調製されている。天然産の
ヒアルロン酸は、分子量について多分散性であるが、種
及び臓器特異性をもたず、生体に移植または注入した場
合であっても優れた生体適合性を示すことが知られてい
る。2. Description of the Related Art Hyaluronic acid is a linear polysaccharide in which β-DN-acetylglucosamine and β-D-glucuronic acid are alternately bonded. Hyaluronic acid is known to be distributed in connective tissues of mammals and also in chicken crusts and capsular streptococci. In addition to using chicken crest, umbilical cord and the like as an extraction material, purified products have also been prepared from streptococcal cultures. Naturally occurring hyaluronic acid is polydisperse in molecular weight, but has no species or organ specificity and is known to exhibit excellent biocompatibility even when implanted or injected into living organisms .
【０００３】本発明者らは、ヒアルロン酸の水溶液を酸
性に調整し、該水溶液を凍結し、次いで解凍することを
少なくとも１回行うことによって、ヒアルロン酸ゲルが
得られ、こうして得られたヒアルロン酸ゲルの水中での
溶解速度が極めて遅いことを見出した（特開平１０−１
１７５６４号）。また、凍結を行わずとも５％以上の濃
度になるようにヒアルロン酸と酸性溶液を混合・該共存
状態を保持することで同様のヒアルロン酸ゲルが製造で
きることも見い出した（特開平１０−２１９４６３
号）。さらに、このゲルを用いて関節注入剤、癒着防止
材をはじめとする各種の医用材料を提供している（特開
平１０−３１８９６９号）。これまでに、アルツ（生化
学工業社）をはじめ、Ｈｙａｌｇａｎ（Ｆｉｄｉａ社）
や、Ｓｙｎｖｉｓｃ（Ｂｉｏｍａｔｒｉｘ社）などのヒ
アルロン酸を材料とした関節注入材がいくつか開発され
ている。Ｓｙｎｖｉｓｃはヒアルロン酸溶液とヒアルロ
ン酸ゲルを均一に混合した関節製剤である。The present inventors have adjusted the aqueous solution of hyaluronic acid to acidic, frozen and then thawed the aqueous solution at least once to obtain a hyaluronic acid gel, and thus obtained hyaluronic acid gel. The dissolution rate of the gel in water was found to be extremely slow (Japanese Patent Laid-Open No. 10-1).
No. 17564). It has also been found that a similar hyaluronic acid gel can be produced by mixing hyaluronic acid and an acidic solution so as to have a concentration of 5% or more and maintaining the coexistence state without freezing (Japanese Patent Laid-Open No. 10-219463).
issue). Further, various medical materials such as a joint injection agent and an adhesion preventing material are provided using this gel (Japanese Patent Application Laid-Open No. Hei 10-318969). Up to now, Alz (Seikagaku Corporation) and Hyalgan (Fidia)
And several joint injection materials using hyaluronic acid, such as Synvisc (Biomatrix). Synvisc is a joint preparation in which a hyaluronic acid solution and a hyaluronic acid gel are uniformly mixed.
【０００４】[0004]
【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、これま
でに上記凍結法や、酸溶液とヒアルロン酸を混合するこ
とでヒアルロン酸単独のゲルを発明しているが、ヒアル
ロン酸ゲルの性質を鋭意検討する過程で該ヒアルロン酸
ゲルが中性領域では十分な安定性を持たないことを見い
だした。生体に投与するような医療材料は、生理的条件
である中性領域になるように製剤化されるが、このよう
な条件で医療材料としてヒアルロン酸ゲルを適応した場
合には、流通過程等での長期保存に耐えられない可能性
が考えられた。そこで、特にこのようなヒアルロン酸ゲ
ルと、ヒアルロン酸溶液の両成分から成る医療材料の製
剤化に当たり、ヒアルロン酸ゲルが中性ｐＨ領域で不安
定となるといった問題を解決するために、該ゲルを安定
に提供する方法を鋭意検討してきた。その結果、該ヒア
ルロン酸ゲルが弱酸性領域条件下で安定性が高まること
を見いだした。そして、ヒアルロン酸ゲルとヒアルロン
酸溶液を成分とする医療材料を提供する場合に、ヒアル
ロン酸溶液とヒアルロン酸ゲルを異なったｐＨ条件にな
るように、同一容器内で分離された状態で充填してお
き、治療時に混合もしくは個別に注入でき、最終的には
生理的な中性ｐＨ条件で投与できるような製剤を考案
し、本発明を完成するに至った。The present inventors have invented a gel of hyaluronic acid alone by the above-mentioned freezing method or mixing an acid solution and hyaluronic acid. In the course of diligent investigation, it was found that the hyaluronic acid gel did not have sufficient stability in the neutral region. Medical materials to be administered to a living body are formulated so as to be in a neutral region, which is a physiological condition.However, when a hyaluronic acid gel is applied as a medical material under such conditions, a distribution process or the like is required. May not be able to withstand long-term storage. Therefore, in order to solve the problem that the hyaluronic acid gel becomes unstable in a neutral pH range, particularly in the preparation of a medical material comprising such a hyaluronic acid gel and a hyaluronic acid solution, the gel is used. We have been eagerly examining a method of providing a stable supply. As a result, it has been found that the hyaluronic acid gel has increased stability under the condition of a weakly acidic region. Then, when providing a medical material comprising a hyaluronic acid gel and a hyaluronic acid solution as components, the hyaluronic acid solution and the hyaluronic acid gel are filled in a separated state in the same container so as to have different pH conditions. The present invention was completed by devising a preparation which can be mixed or individually injected at the time of treatment and finally administered under physiological neutral pH conditions.
【０００５】[0005]
【課題を解決するための手段】即ち、本発明は、（１）
（Ａ）ヒアルロン酸溶液と、（Ｂ）実質的に化学的架橋
剤又は化学的修飾剤等によって改質されていないヒアル
ロン酸単独で形成されたゲルを、各々異なるｐＨ条件下
にて同一容器内に分離された状態で充填されていること
を特徴とする医療材料、（２）（Ｂ）実質的に化学的架
橋剤又は化学的修飾剤等によって改質されていないヒア
ルロン酸単独で形成されたゲルが、ヒアルロン酸の酸性
溶液を凍結・解凍して得られたものであることを特徴と
する（１）記載の医療材料、（３）（Ｂ）実質的に化学
的架橋剤又は化学的修飾剤等によって改質されていない
ヒアルロン酸単独で形成されたゲルが、ヒアルロン酸濃
度を５質量％以上になるように酸溶液と混和し、該共存
状態を保持して得られたものであることを特徴とする
（１）記載の医療材料、（４）（Ａ）ヒアルロン酸溶液
のｐＨが、ｐＨ６．５〜７．５であり、（Ｂ）実質的に
化学的架橋剤又は化学的修飾剤等によって改質されてい
ないヒアルロン酸単独で形成されたゲルの懸濁液のｐＨ
が、ｐＨ４．０〜６．０であることを特徴とする（２）
又は（３）記載の医療材料、（５）医療材料として提供
される形態が、シリンジに充填された関節注入型医療材
料、癒着防止用医療材料、又は創傷被覆型医療材料から
なる群より選択した１種であることを特徴とする（４）
記載の医療材料である。That is, the present invention provides (1)
A gel formed of (A) a hyaluronic acid solution and (B) a hyaluronic acid alone substantially not modified with a chemical cross-linking agent or a chemical modifying agent, etc., in the same container under different pH conditions. (2) (B) formed of hyaluronic acid alone which has not been substantially modified by a chemical crosslinking agent or a chemical modifier, etc. The medical material according to (1), wherein the gel is obtained by freezing and thawing an acidic solution of hyaluronic acid, (3) (B) a substantially chemical cross-linking agent or chemical modification. A gel formed of hyaluronic acid alone not modified with an agent or the like must be obtained by mixing with an acid solution so that the hyaluronic acid concentration becomes 5% by mass or more and maintaining the coexistence state. (1) The medical material according to (1), (4) (A) the pH of the hyaluronic acid solution is pH 6.5 to 7.5, and (B) hyaluronic acid alone which has not been substantially modified by a chemical crosslinking agent or a chemical modifier, etc. PH of the formed gel suspension
Has a pH of 4.0 to 6.0 (2)
Or, the medical material according to (3), (5) the form provided as the medical material is selected from the group consisting of a joint-filled medical material, an anti-adhesion medical material, and a wound-coated medical material filled in a syringe. Characterized by one kind (4)
A medical material as described.
【０００６】[0006]
【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。
本発明に用いられるヒアルロン酸は、動物組織から抽出
したものでも、また発酵法で製造したものでもその起源
を問うことなく使用できる。発酵法で使用する菌株は自
然界から分離されるストレプトコッカス属等のヒアルロ
ン酸生産能を有する微生物、又は特開昭６３−１２３３
９２号公報に記載したストレプトコッカス・エクイＦＭ
−１００（微工研菌寄第９０２７号)、特開平２−２３
４６８９号公報に記載したストレプトコッカス・エクイ
ＦＭ−３００（微工研菌寄第２３１９号)のような高収
率で安定にヒアルロン酸を生産する変異株が望ましい。
上記の変異株を用いて培養、精製されたものが用いられ
る。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION Hereinafter, the present invention will be described in detail.
The hyaluronic acid used in the present invention can be used regardless of its origin, whether it is extracted from animal tissues or produced by a fermentation method. The strain used in the fermentation method is a microorganism capable of producing hyaluronic acid, such as Streptococcus sp. Isolated from nature, or JP-A-63-1233.
No. 92, Streptococcus equi FM
-100 (Microbial Laboratories No. 9027), JP-A-2-23
A mutant strain that stably produces hyaluronic acid at a high yield, such as Streptococcus equi equi-FM-300 (No. 2319, manufactured by BKK) described in JP-A-4689 is desirable.
Those cultured and purified using the above mutant strains are used.
【０００７】本発明に用いられるヒアルロン酸の分子量
は、約１×１０5〜約１×１０7ダルトンの範囲内のもの
が好ましい。また、上記範囲内の分子量をもつものであ
れば、より高分子量のものから加水分解処理等をして得
た低分子量のものでも同様に好ましく使用できる。尚、
本発明でいうヒアルロン酸は、そのアルカリ金属塩、例
えば、ナトリウム、カリウム、リチウムの塩をも包含す
る概念で使用される。The molecular weight of the hyaluronic acid used in the present invention is preferably in the range of about 1 × 10 5 to about 1 × 10 7 daltons. In addition, as long as it has a molecular weight within the above range, a low molecular weight compound obtained by subjecting a higher molecular weight compound to a hydrolysis treatment or the like can also be preferably used. still,
The hyaluronic acid referred to in the present invention is used in a concept including its alkali metal salts, for example, sodium, potassium and lithium salts.
【０００８】ゲルとは、新版高分子辞典（朝倉書店 昭
和６３年）によれば、「あらゆる溶媒に不溶の三次元網
目構造をもつ高分子及びその膨潤体」と定義されてい
る。理化学辞典（岩波書店 第４版 昭和６２年）によ
れば、「ゾル（コロイド溶液）がジェリー状に固化した
もの」と定義されている。本発明でいうヒアルロン酸ゲ
ルとは、中性水溶液に難溶性であることを特徴とし、こ
のヒアルロン酸ゲルを中性水溶液中に投入した場合、ゲ
ル化していないヒアルロン酸と比較して有意に難溶性を
示す物質を指す。難溶性は、中性の２５℃の水溶液中で
のゲルの形態の保持とゲルの溶解率で規定する。ここ
で、中性水溶液とは、ｐＨ７に調整された緩衝能を有す
る生理的食塩水である。本発明でいうヒアルロン酸ゲル
は、アルカリ性水溶液中、例えばｐＨ１１のアルカリ性
緩衝水溶液中に投入すると速やかに溶解する特徴も有す
る。The gel is defined as "a polymer having a three-dimensional network structure which is insoluble in any solvent and a swollen body thereof" according to a new edition of Polymer Dictionary (Asakura Shoten, 1988). According to the Dictionary of Physical and Chemical Sciences (Iwanami Shoten, 4th Edition, 1987), it is defined as "sol (colloidal solution) solidified in a jelly-like form". The hyaluronic acid gel referred to in the present invention is characterized in that it is hardly soluble in a neutral aqueous solution, and when this hyaluronic acid gel is put into a neutral aqueous solution, it is significantly harder than non-gelled hyaluronic acid. Refers to a substance that exhibits solubility. Poor solubility is defined by the retention of the gel form in a neutral 25 ° C. aqueous solution and the gel dissolution rate. Here, the neutral aqueous solution is a physiological saline having a buffer capacity adjusted to pH7. The hyaluronic acid gel referred to in the present invention also has a characteristic that when it is put into an alkaline aqueous solution, for example, an alkaline buffered aqueous solution having a pH of 11, it rapidly dissolves.
【０００９】本発明でいうヒアルロン酸単独で形成され
たゲルとは、ヒアルロン酸以外に化学的架橋剤や化学的
修飾剤等は使用しないこと、また、カチオン性の高分子
と複合体化しないことでゲルを形成させることであり、
自己架橋したゲルを意味するものである。The gel formed of hyaluronic acid alone as used in the present invention means that no chemical crosslinking agent or chemical modifier other than hyaluronic acid is used and that the gel is not complexed with a cationic polymer. To form a gel with
It means a self-crosslinked gel.
【００１０】本発明でいうヒアルロン酸ゲルとは、三次
元網目構造をもつ高分子及びその膨潤体である。三次元
網目構造はヒアルロン酸の架橋構造によって形成されて
いる。The hyaluronic acid gel referred to in the present invention is a polymer having a three-dimensional network structure and a swollen body thereof. The three-dimensional network structure is formed by a cross-linked structure of hyaluronic acid.
【００１１】凍結・解凍法によるヒアルロン酸ゲルの製
造について述べる。ヒアルロン酸の水溶液のｐＨを調整
するために使用する酸は、ｐＨ３．５以下に調整できる
酸であれば、いずれの酸も使用することができる。酸の
使用量を低減するために、好ましくは強酸、例えば、塩
酸、硝酸、硫酸等を使用することが望ましい。The production of a hyaluronic acid gel by the freeze / thaw method will be described. As the acid used for adjusting the pH of the aqueous solution of hyaluronic acid, any acid can be used as long as it can adjust the pH to 3.5 or less. In order to reduce the amount of acid used, it is desirable to use a strong acid, for example, hydrochloric acid, nitric acid, sulfuric acid and the like.
【００１２】ヒアルロン酸の水溶液のｐＨは、ヒアルロ
ン酸のカルボキシル基が充分な割合でプロトン化するｐ
Ｈに調整する。調整されるヒアルロン酸ｐＨはヒアルロ
ン酸塩の対イオンの種類、ＨＡの分子量、水溶液濃度、
凍結及び解凍の条件、並びに生成するゲルの強さ等の諸
特性により適宜決められるが、本発明では、ｐＨ３．５
以下、好ましくはｐＨ２．５以下に調整することであ
る。[0012] The pH of the aqueous solution of hyaluronic acid is such that the carboxyl groups of hyaluronic acid are protonated at a sufficient rate.
Adjust to H. The pH of the adjusted hyaluronic acid depends on the type of the counter ion of the hyaluronate, the molecular weight of the HA, the concentration of the aqueous solution,
It is appropriately determined according to the conditions of freezing and thawing, and various properties such as the strength of the generated gel. In the present invention, the pH is 3.5.
Hereafter, preferably, the pH is adjusted to 2.5 or less.
【００１３】凍結、解凍はヒアルロン酸の調整された酸
性水溶液を、任意の容器に入れた後、所定の温度で凍結
させ、凍結が終わった後、所定の温度で解凍させる操作
を少なくとも１回行う。凍結、解凍の温度と時間は、容
器の大きさ、水溶液量、ヒアルロン酸の分子量、水溶液
濃度、水溶液のｐＨ、含有金属塩の濃度、種類等の諸特
性により凍結、解凍する温度と時間の範囲内で適宜決め
られる。一般には、氷点以下の凍結温度、氷点以上の解
凍温度が好ましい。凍結、解凍時間を短く出来ることか
ら、更に好ましくは−５℃以下の凍結温度、５℃以上の
解凍温度が選ばれる。また、時間は、その温度で凍結、
解凍が終了する時間以上であれば特に制限されない。For freezing and thawing, an operation of placing an acidic aqueous solution of hyaluronic acid in an arbitrary container, freezing it at a predetermined temperature, and thawing at a predetermined temperature after freezing is performed at least once. . The temperature and time for freezing and thawing depend on the size of the container, the amount of aqueous solution, the molecular weight of hyaluronic acid, the concentration of the aqueous solution, the pH of the aqueous solution, the concentration of the metal salt, the type and other characteristics of the freezing and thawing. It is determined appropriately within. Generally, a freezing temperature below the freezing point and a thawing temperature above the freezing point are preferred. More preferably, a freezing temperature of −5 ° C. or less and a thawing temperature of 5 ° C. or more are selected because the freezing and thawing times can be shortened. Also, time is frozen at that temperature,
There is no particular limitation as long as the time is equal to or longer than the time when thawing is completed.
【００１４】ヒアルロン酸の調整された酸性水溶液を凍
結し、次いで解凍する操作の繰り返し回数は、使用する
ヒアルロン酸の分子量、水溶液濃度、水溶液のｐＨ、含
有金属塩の濃度・種類、凍結及び解凍の温度と時間、並
びに生成するゲルの強さ等の諸特性により適宜決められ
る。通常は１回以上繰り返すことが好ましい。また、凍
結、解凍の操作を繰り返すごとに、その凍結、解凍の温
度及び時間を変えても構わない。The number of repetitions of the operation of freezing and then thawing the adjusted acidic aqueous solution of hyaluronic acid depends on the molecular weight of the hyaluronic acid used, the concentration of the aqueous solution, the pH of the aqueous solution, the concentration and type of the metal salt contained, the freezing and thawing. The temperature and time are appropriately determined according to various properties such as the strength of the gel to be formed. Normally, it is preferable to repeat it one or more times. Further, each time the operation of freezing and thawing is repeated, the temperature and time of freezing and thawing may be changed.
【００１５】ヒアルロン酸の調整された酸性溶液の凍結
解凍により得られたヒアルロン酸ゲルは、ヒアルロン酸
の酸加水分解を避けるために、酸性に調整するために用
いた酸等の成分を除く必要がある。酸や無機塩等の成分
を除くためには、通常は水性溶媒による洗浄か透析をす
る。用いる水性溶媒としてはヒアルロン酸ゲルの機能を
損なわないものであれば特に制限はないが、例えば、
水、生理食塩水、リン酸緩衝液等が用いられる。好まし
くは、生理食塩水、リン酸緩衝液等が用いられる。In order to avoid acid hydrolysis of hyaluronic acid, it is necessary to remove components such as acids used for adjusting the acidity of the hyaluronic acid gel obtained by freezing and thawing the adjusted acidic solution of hyaluronic acid. is there. To remove components such as acids and inorganic salts, washing with an aqueous solvent or dialysis is usually performed. The aqueous solvent used is not particularly limited as long as it does not impair the function of the hyaluronic acid gel.
Water, physiological saline, phosphate buffer and the like are used. Preferably, physiological saline, phosphate buffer and the like are used.
【００１６】また、洗浄・透析方法は、特に制限はない
が、透析法を用いるのが好ましい。透析法としては透析
膜、限外ろ過膜による方法等が好適に用いられる。これ
らの条件は、液量、回数を含めて、除きたい成分を目標
の濃度以下にできる条件であればよい。透析されたゲル
は目的に応じてｐＨ調整され使用される。The washing / dialysis method is not particularly limited, but it is preferable to use the dialysis method. As the dialysis method, a method using a dialysis membrane, an ultrafiltration membrane or the like is suitably used. These conditions may be any conditions as long as the components to be removed, including the liquid amount and the number of times, can be reduced to the target concentration or less. The dialyzed gel is used after adjusting the pH according to the purpose.
【００１７】次に、酸混合法によるヒアルロン酸ゲルの
製造について述べる。酸混合法によるヒアルロン酸ゲル
は、ヒアルロン酸と、ヒアルロン酸濃度５質量％以上に
する水、及びヒアルロン酸のカルボキシル基と等モル以
上の酸成分とを共存させ、該共存状態を凍結させないで
保持することにより得られる。Next, production of a hyaluronic acid gel by an acid mixing method will be described. The hyaluronic acid gel prepared by the acid mixing method contains hyaluronic acid, water having a hyaluronic acid concentration of 5% by mass or more, and an acid component having an equimolar amount or more with the carboxyl group of the hyaluronic acid, and keeping the coexistence state without freezing. It is obtained by doing.
【００１８】酸性に調製するための用いる酸成分の量
は、ヒアルロン酸塩の対イオンの種類、ヒアルロン酸の
分子量、ヒアルロン酸濃度、並びに生成するゲルの強さ
等の諸特性により適宜決められるが、一般にはヒアルロ
ン酸のカルボキシル基と等モル以上の酸成分の量が好ま
しい。The amount of the acid component used for preparing the acid is determined appropriately depending on various characteristics such as the kind of the counter ion of the hyaluronic acid salt, the molecular weight of the hyaluronic acid, the hyaluronic acid concentration, and the strength of the gel to be formed. Generally, the amount of the acid component is preferably equimolar or more than the carboxyl group of hyaluronic acid.
【００１９】酸成分は、ヒアルロン酸より強い酸であれ
ば、いずれの酸も使用することができる。酸の使用量を
低減するために、好ましくは強酸、例えば、塩酸、硝
酸、硫酸等を使用することが好ましい。As the acid component, any acid can be used as long as it is stronger than hyaluronic acid. In order to reduce the amount of acid used, it is preferable to use a strong acid, for example, hydrochloric acid, nitric acid, sulfuric acid and the like.
【００２０】尚、ヒアルロン酸濃度５質量％以下では、
たとえヒアルロン酸のカルボキシ基が充分な割合でプロ
トン化されるように調製されてもヒアルロン酸ゲルは得
られない。ヒアルロン酸と、ヒアルロン酸濃度５質量％
以上にする水、及びヒアルロン酸のカルボキシル基と等
モル以上の酸成分とを共存させた後に、ゲル化を進行さ
せるためにその状態を保つ（保持する）ことが必要であ
る。また、この保持は、静置して一定時間経過させるこ
とでもかまわない。When the concentration of hyaluronic acid is 5% by mass or less,
Even if the carboxy group of hyaluronic acid is prepared so as to be protonated at a sufficient ratio, a hyaluronic acid gel cannot be obtained. Hyaluronic acid and hyaluronic acid concentration 5% by mass
After coexistence of water and the carboxyl group of hyaluronic acid and an acid component of equimolar or more, it is necessary to maintain (hold) the state in order to promote gelation. In addition, this holding may be performed by leaving the apparatus to stand still for a certain period of time.
【００２１】さらに、この保持する温度や時間は、ヒア
ルロン酸塩の対イオンの種類、ヒアルロン酸の分子量、
ヒアルロン酸濃度、並びに生成するゲルの強さ等の諸特
性により適宜決められるが温度については、水分が凍結
せずに、そして、ヒアルロン酸の酸による分解を抑える
ために、−１０℃以上３０℃以下で行うことが好まし
い。Further, the temperature and time to be maintained depend on the type of the counter ion of the hyaluronate, the molecular weight of the hyaluronic acid,
Hyaluronic acid concentration and various properties such as the strength of the gel to be formed are appropriately determined, but the temperature is not lower than −10 ° C. and not lower than 30 ° C. in order to prevent moisture from freezing and to suppress decomposition of hyaluronic acid by acid. It is preferable to perform the following.
【００２２】次に実際の保存形態について述べる。ヒア
ルロン酸溶液とヒアルロン酸ゲルを分離して保存する実
際の形態において、ゲルは微破砕後に特定の溶液に分散
させた懸濁液として容器に充填される。ヒアルロン酸溶
液の保存ｐＨは、ヒアルロン酸の主鎖の安定性から中性
付近が好ましく、ｐＨ６．５〜７．５の範囲が好まし
い。また、ヒアルロン酸ゲル懸濁液のｐＨは、ヒアルロ
ン酸ゲル安定性からｐＨ５前後が好ましく、ｐＨ４．０
〜６．０のが好ましい。また、容器内のヒアルロン酸溶
液とヒアルロン酸ゲルの濃度や容積比については、特に
規定するものではないが、濃度については全体としての
ヒアルロン酸濃度が０．１％〜３．０％になるのが好ま
しい。また、実際に医薬品・医療材料として製品を提供
する場合には、液を分離できるシリンジを用いる。一般
的には、二液分離型のプレフィルシリンジなどが目的に
合致しており、このような保存容器によってヒアルロン
酸溶液とヒアルロン酸ゲル懸濁液を別々に封入するのが
好ましい。ここで、通液用のシリンジの突起部分の位
置、ゴム栓位置などは、ヒアルロン酸溶液とヒアルロン
酸ゲル懸濁液の封入量や容積比に応じて最適の位置に調
整されるもである。Next, the actual storage mode will be described. In the actual mode of storing a hyaluronic acid solution and a hyaluronic acid gel separately, the gel is filled into a container as a suspension dispersed in a specific solution after fine crushing. The storage pH of the hyaluronic acid solution is preferably around neutral from the stability of the main chain of hyaluronic acid, and is preferably in the range of pH 6.5 to 7.5. Further, the pH of the hyaluronic acid gel suspension is preferably around pH 5 from the viewpoint of the stability of the hyaluronic acid gel, and the pH is 4.0.
~ 6.0 is preferred. The concentration and volume ratio of the hyaluronic acid solution and the hyaluronic acid gel in the container are not particularly specified, but the concentration is such that the hyaluronic acid concentration as a whole is 0.1% to 3.0%. Is preferred. When a product is actually provided as a drug or medical material, a syringe capable of separating a liquid is used. Generally, a two-liquid separation type prefilled syringe is suitable for the purpose, and it is preferable to separately enclose the hyaluronic acid solution and the hyaluronic acid gel suspension in such a storage container. Here, the position of the protrusion of the syringe for liquid passage, the position of the rubber stopper, and the like are adjusted to optimal positions according to the enclosing amount and the volume ratio of the hyaluronic acid solution and the hyaluronic acid gel suspension.
【００２３】本発明の医療材料として提供される形態
は、シリンジに充填された関節注入型医療材料、癒着防
止用医療材料、又は創傷被覆型医療材料等が挙げられ
る。Examples of the form provided as the medical material of the present invention include a joint-filled medical material, a medical material for preventing adhesion, and a wound-coated medical material filled in a syringe.
【００２４】[0024]
【実施例】以下、本発明を実施例によりさらに詳しく説
明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものでは
ない。 実施例１ 凍結・解凍法によるヒアルロン酸ゲルの製造例 ヒアルロン酸ナトリウム（電気化学工業製：分子量２×
１０6ダルトン）を蒸留水に溶解し、１質量％のヒアル
ロン酸の水溶液を調製した。この水溶液のｐＨを、１ｍ
ｏｌ／ｌ塩酸（和光純薬）でｐＨ１．５に調整する。ヒ
アルロン酸の酸性水溶液１５ｍｌを３０ｍｌのガラスビ
ンに入れ、−２０℃に設定した冷凍庫に入れた。そして
６５時間放置した後、２５℃で解凍した。その結果、ス
ポンジ状のヒアルロン酸ゲルが得られた。これを、１０
０ｍｍｏｌ／ｌのリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）に何度か
浸漬させ、ゲルを完全に中和する。次に得られたスポン
ジ状のヒアルロン酸ゲルをミキサーにより破砕し、ゲル
破砕懸濁液を得た。これを、３，０００ｒｐｍ、５分の
条件で遠心分離し、ゲル分を分離して、これに新しい緩
衝液を加える操作を５回以上繰り返し、ゲル溶媒を５ｍ
ｍｏｌ／ｌリン酸緩衝生理食塩水に置換した。以上の方
法により、酸性凍結・解凍法で製造されたヒアルロン酸
ゲル懸濁液が得られた。EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples, but the present invention is not limited to these Examples. Example 1 Production Example of Hyaluronic Acid Gel by Freezing / Thawing Method Sodium hyaluronate (manufactured by Denki Kagaku Kogyo: molecular weight 2 ×)
(10 6 daltons) was dissolved in distilled water to prepare a 1% by mass aqueous solution of hyaluronic acid. The pH of this aqueous solution is 1 m
The pH is adjusted to 1.5 with ol / l hydrochloric acid (Wako Pure Chemical). 15 ml of an acidic aqueous solution of hyaluronic acid was placed in a 30-ml glass bottle and placed in a freezer set at -20 ° C. After being left for 65 hours, it was thawed at 25 ° C. As a result, a sponge-like hyaluronic acid gel was obtained. This is 10
The gel is completely neutralized by immersion several times in 0 mmol / l phosphate buffer (pH 6.8). Next, the obtained sponge-shaped hyaluronic acid gel was crushed with a mixer to obtain a crushed gel suspension. This was centrifuged at 3,000 rpm for 5 minutes to separate the gel component, and the operation of adding a new buffer was repeated 5 times or more.
It was replaced with mol / l phosphate buffered saline. By the above method, a hyaluronic acid gel suspension produced by the acidic freezing / thawing method was obtained.
【００２５】酸混合法によるヒアルロン酸ゲルの製造例 ヒアルロン酸ナトリウム（電気化学工業製、分子量２×
１０6ダルトン）の粉末を５ｇ量り取り、これに氷冷し
ておいた１５ｍｌの１Ｎ硝酸（和光純薬）を添加した。
両者をビーカー内で十分に混合した後、ビニール袋に入
れた状態で４℃の冷蔵庫に入れ、６５時間放置した。そ
の結果、スポンジ状のヒアルロン酸ゲルが得られた。こ
れを、１００ｍｍｏｌ／ｌのリン酸緩衝液（ｐＨ６．
８）に何度か浸漬させ、ゲルを完全に中和した。次に得
られたスポンジ状のヒアルロン酸ゲルをミキサーにより
破砕し、ゲル破砕懸濁液を得た。これを、３，０００ｒ
ｐｍ、５分の条件で遠心分離し、ゲル分を分離して、こ
れに新しい緩衝液を加える操作を５回以上繰り返し、ゲ
ル溶媒を５ｍｍｏｌ／ｌリン酸緩衝生理食塩水に置換し
た。以上の方法により、酸混合法で製造されたヒアルロ
ン酸ゲル懸濁液が得らた。Production Example of Hyaluronic Acid Gel by Acid Mixing Method Sodium hyaluronate (manufactured by Denki Kagaku Kogyo, molecular weight 2 ×
10 powder 5g weighed 6 Daltons) was added 1N nitric acid 15ml which had been ice-cooled (Wako Pure Chemical) thereto.
After sufficiently mixing the two in a beaker, the mixture was placed in a refrigerator at 4 ° C. in a plastic bag and left for 65 hours. As a result, a sponge-like hyaluronic acid gel was obtained. This was added to a 100 mmol / l phosphate buffer solution (pH 6.
8) several times to completely neutralize the gel. Next, the obtained sponge-shaped hyaluronic acid gel was crushed with a mixer to obtain a crushed gel suspension. This is 3,000r
The procedure of centrifugation at pm for 5 minutes, separation of the gel component, and addition of a new buffer thereto was repeated 5 times or more, and the gel solvent was replaced with 5 mmol / l phosphate buffered saline. By the above method, a hyaluronic acid gel suspension produced by the acid mixing method was obtained.
【００２６】以上の方法で製造したヒアルロン酸ゲルの
ｐＨ安定性は以下の加速試験で評価した。評価には、ｐ
Ｈ４、ｐＨ５、ｐＨ６、ｐＨ７のリン酸緩衝生理食塩水
に懸濁された１％のヒアルロン酸濃度になるように調節
したゲル懸濁液を用いた。ゲル懸濁液１０ｍｌを１５ｍ
ｌのプラスチックチューブに入れ、これを６０℃の温浴
上で放置し、２時間おきにサンプリングを行った。サン
プリングした液は、まず１２，０００ｒｐｍ、５分の遠
心でゲル分を除き、その後０．２２μのフィルターでろ
過して完全にゲルを除去した。これについてＧＰＣ分析
と比色分析を行い、ヒアルロン酸濃度を求めた。この上
清中のヒアルロン酸濃度は、ゲルが溶解した濃度である
ために、初期濃度との比から残存するゲルの割合と溶解
したゲルの割合が求められる（両者の和は１００％に相
当する）。以上の方法により、各サンプリング時間にお
ける残存するゲルの割合を調べた。結果を表１に示す。The pH stability of the hyaluronic acid gel produced by the above method was evaluated by the following accelerated test. For evaluation, p
A gel suspension adjusted to a concentration of 1% hyaluronic acid suspended in phosphate buffered saline at H4, pH5, pH6 and pH7 was used. 15 ml of gel suspension 10 ml
The sample was placed in a 1 l plastic tube, left in a hot bath at 60 ° C, and sampled every two hours. The sampled liquid was first subjected to centrifugation at 12,000 rpm for 5 minutes to remove the gel content, and then filtered through a 0.22 μ filter to completely remove the gel. GPC analysis and colorimetric analysis were performed on this, and the concentration of hyaluronic acid was determined. Since the concentration of hyaluronic acid in the supernatant is the concentration at which the gel is dissolved, the ratio of the remaining gel and the ratio of the dissolved gel are determined from the ratio with the initial concentration (the sum of both is equivalent to 100%). ). By the above method, the ratio of the remaining gel at each sampling time was examined. Table 1 shows the results.
【００２７】[0027]
【表１】 [Table 1]
【００２８】表１に示すように、溶解後２５時間ではｐ
Ｈ７に調整したゲル懸濁液のゲル残存率が７５％である
のに対して、ｐＨ６に調整したゲル懸濁液では８４％
が、そしてｐＨ４に調整したゲル懸濁液では８８％が残
存していた。更に、ｐＨ５では９５％ものゲルが残存し
ており、有意にｐＨ５付近の低ｐＨ側でのゲルの保存安
定性があることがわかった。As shown in Table 1, 25 hours after dissolution, p
The gel suspension adjusted to H7 has a gel residual ratio of 75%, whereas the gel suspension adjusted to pH 6 has 84%.
However, 88% of the gel suspension adjusted to pH 4 remained. Furthermore, at pH 5, as much as 95% of the gel remained, indicating that the gel had a significant storage stability on the low pH side near pH 5.
【００２９】実施例２ 凍結・解凍法によるヒアルロン酸ゲルを含む分離型医療
材料の製造例 ヒアルロン酸ナトリウム（電気化学工業製、分子量２×
１０6ダルトン）を蒸留水に溶解し、１質量％のヒアル
ロン酸の水溶液を調製した。この水溶液のｐＨを、１ｍ
ｏｌ／ｌ塩酸（和光純薬）でｐＨ１．５に調整した。ヒ
アルロン酸の酸性水溶液１５ｍｌを３０ｍｌのガラスビ
ンに入れ、−２０℃に設定した冷凍庫に入れた。そして
６５時間放置した後、２５℃で解凍し、スポンジ状のヒ
アルロン酸ゲルが得られた。これを、１００ｍｍｏｌ／
ｌのリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）に何度か浸漬させ、ゲ
ルを完全に中和した。次に、得られたスポンジ状のヒア
ルロン酸ゲルをカップミキサー（１２，０００ｒｐｍ、
２分）により破砕し、ゲル破砕懸濁液を得た。これを、
３，０００ｒｐｍ、５分の条件で遠心分離し、ゲル分を
分離した。そして、これに新しい緩衝液を加える操作を
５回以上繰り返し、ゲル溶媒をｐＨ５の５ｍｍｏｌ／ｌ
リン酸緩衝生理食塩水に置換した。 （Ａ）１％濃度になるようにリン酸緩衝生理食塩水（ｐ
Ｈ６．８）に溶解したヒアルロン酸（電気化学工業製）
溶液と、（Ｂ）１％濃度になるようにリン酸緩衝生理食
塩水に懸濁したヒアルロン酸ゲル懸濁液（ｐＨ５．０）
を（Ａ）：（Ｂ）＝９：１になるようにトップ社のプレ
フィルシリンジ（Ｇタイプ）に別々に充填した。すなわ
ち、図１に示すように（Ｂ）のヒアルロン酸ゲル懸濁液
を注射口側のコンパートメントに０．３ｍｌ充填し、
（Ａ）のヒアルロン酸溶液をプランジャー側に２．７ｍ
ｌ充填した。Example 2 Production Example of Separable Medical Material Containing Hyaluronic Acid Gel by Freezing / Thawing Method Sodium hyaluronate (manufactured by Denki Kagaku Kogyo, molecular weight 2 ×)
(10 6 daltons) was dissolved in distilled water to prepare a 1% by mass aqueous solution of hyaluronic acid. The pH of this aqueous solution is 1 m
The pH was adjusted to 1.5 with ol / l hydrochloric acid (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). 15 ml of an acidic aqueous solution of hyaluronic acid was placed in a 30-ml glass bottle and placed in a freezer set at -20 ° C. After standing for 65 hours, the mixture was thawed at 25 ° C. to obtain a sponge-like hyaluronic acid gel. This is 100 mmol /
The gel was completely neutralized by immersion several times in 1 l of phosphate buffer (pH 6.8). Next, the obtained sponge-like hyaluronic acid gel was mixed with a cup mixer (12,000 rpm,
2 minutes) to obtain a gel-crushed suspension. this,
Centrifugation was performed at 3,000 rpm for 5 minutes to separate a gel component. Then, the operation of adding a new buffer to the mixture was repeated 5 times or more, and the gel solvent was changed to pH 5 of 5 mmol / l.
Replaced with phosphate buffered saline. (A) Phosphate buffered saline (p
H6.8) dissolved in hyaluronic acid (manufactured by Denki Kagaku Kogyo)
Solution and (B) Hyaluronic acid gel suspension (pH 5.0) suspended in phosphate buffered saline to a concentration of 1%
Was separately filled in a prefilled syringe (G type) of Top Co., Ltd. so that (A) :( B) = 9: 1. That is, as shown in FIG. 1, 0.3 ml of the hyaluronic acid gel suspension of (B) was filled in the compartment on the injection port side,
2.7 m of the hyaluronic acid solution of (A) on the plunger side
l.
【００３０】実施例３ 酸混合法によるヒアルロン酸ゲルを含む分離型医療材料
の製造例 ヒアルロン酸ナトリウム（電気化学工業製、分子量２×
１０6ダルトン）の粉末を５ｇ量り取り、これに氷冷し
ておいた１５ｍｌの１ｍｏｌ／ｌ硝酸（和光純薬）を添
加した。両者をビーカー内で十分に混合した後、ビニー
ル袋に入れた状態で４℃の冷蔵庫に入れ、６５時間放置
した。その結果、スポンジ状のヒアルロン酸ゲルが得ら
れた。これを、１００ｍｍｏｌ／ｌのリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ６．８）に何度か浸漬させ、ゲルを完全に中和した。
次に、得られたスポンジ状のヒアルロン酸ゲルをカップ
ミキサー（１２，０００ｒｐｍ、２分）により破砕し、
ゲル破砕懸濁液を得た。これを、３，０００ｒｐｍ、５
分の条件で遠心分離し、ゲル分を分離した。そして、こ
れに新しい緩衝液を加える操作を５回以上繰り返し、ゲ
ル溶媒をｐＨ５の５ｍｍｏｌ／ｌリン酸緩衝生理食塩水
に置換した。 （Ａ）１％濃度になるようにリン酸緩衝生理食塩水（ｐ
Ｈ６．８）に溶解したヒアルロン酸（電気化学工業製）
溶液と、（Ｂ）１％濃度になるようにリン酸緩衝生理食
塩水に懸濁したヒアルロン酸ゲル懸濁液（ｐＨ５．０）
を（Ａ）：（Ｂ）＝９：１になるようにトップ社のプレ
フィルシリンジ（Ｇタイプ）に別々に充填した。すなわ
ち、図１のように（Ｂ）のヒアルロン酸ゲル懸濁液を注
射口側のコンパートメントに０．３ｍｌ充填し、（Ａ）
のヒアルロン酸溶液をプランジャー側に２．７ｍｌ充填
した。Example 3 Production Example of Separable Medical Material Containing Hyaluronic Acid Gel by Acid Mixing Method Sodium hyaluronate (manufactured by Denki Kagaku Kogyo, molecular weight 2 ×)
5 g of 10 6 daltons) powder was weighed, and 15 ml of 1 mol / l nitric acid (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) cooled with ice was added thereto. After sufficiently mixing the two in a beaker, the mixture was placed in a refrigerator at 4 ° C. in a plastic bag and left for 65 hours. As a result, a sponge-like hyaluronic acid gel was obtained. This was added to a 100 mmol / l phosphate buffer (p
H6.8) several times to completely neutralize the gel.
Next, the obtained sponge-like hyaluronic acid gel was crushed by a cup mixer (12,000 rpm, 2 minutes),
A gel disruption suspension was obtained. This is 3,000 rpm, 5
The mixture was centrifuged under the conditions of minutes and the gel fraction was separated. Then, the operation of adding a new buffer to the mixture was repeated 5 times or more, and the gel solvent was replaced with 5 mmol / l phosphate buffered saline at pH 5. (A) Phosphate buffered saline (p
H6.8) dissolved in hyaluronic acid (manufactured by Denki Kagaku Kogyo)
Solution and (B) Hyaluronic acid gel suspension (pH 5.0) suspended in phosphate buffered saline to a concentration of 1%
Was separately filled in a prefilled syringe (G type) of Top Co., Ltd. so that (A) :( B) = 9: 1. That is, as shown in FIG. 1, 0.3 ml of the hyaluronic acid gel suspension of (B) was filled in the compartment on the injection port side, and (A)
2.7 ml of the hyaluronic acid solution was charged into the plunger side.
【００３１】比較例１ 非分離型のヒアルロン酸とヒアルロン酸ゲルの混合医療
材料の調製 （Ａ）１％濃度になるようにリン酸緩衝生理食塩水（ｐ
Ｈ６．８）に溶解したヒアルロン酸（電気化学工業製）
溶液と、（Ｂ）１％濃度になるようにリン酸緩衝生理食
塩水に懸濁した実施例１の方法で製造したヒアルロン酸
ゲル懸濁液（ｐＨ５．０）を（Ａ）溶液：（Ｂ）ゲル懸
濁液＝９：１になるように混合後にテルモ社のシリンジ
（ＳＳ−０２Ｓ２１３８）に注入した。Comparative Example 1 Preparation of Mixed Medical Material of Non-Separable Hyaluronic Acid and Hyaluronic Acid Gel (A) Phosphate-buffered saline (p
H6.8) dissolved in hyaluronic acid (manufactured by Denki Kagaku Kogyo)
A solution (B) and a hyaluronic acid gel suspension (pH 5.0) produced by the method of Example 1 suspended in phosphate buffered saline so as to have a concentration of 1% were added to the solution (A): ) After mixing so that the gel suspension was 9: 1, the mixture was injected into a syringe (SS-02S2138) manufactured by Terumo Corporation.
【００３２】実施例４ ヒアルロン酸製剤中のヒアルロン酸ゲル安定性 実施例２と比較例１で調製した複数のシリンジを６０℃
の恒温槽に保存した。これを各時間で取り出し、サンプ
リングを行った。サンプリングした液は、まず１２，０
００ｒｐｍ、５分の遠心でゲル分を除き、その後０．２
２μフィルターでろ過して完全にゲルを除去した。これ
についてＧＰＣ分析と比色分析を行い、ヒアルロン酸濃
度を求めた。この上清中のヒアルロン酸濃度は、ゲルが
溶解した濃度分だけ増加しているために、初期濃度との
比から残存するゲルの割合と溶解したゲルの割合が求め
られる（両者の和は１００％に相当する）。以上の方法
により、各サンプリング時間における残存するゲルの割
合を調べた。結果を表２に示す。Example 4 Hyaluronic Acid Gel Stability in Hyaluronic Acid Formulation A plurality of syringes prepared in Example 2 and Comparative Example 1 were subjected to 60 ° C.
Was stored in a thermostat. This was taken out at each time and sampled. First, the sampled liquid is 12,0
The gel was removed by centrifugation at 00 rpm for 5 minutes.
The gel was completely removed by filtration through a 2μ filter. GPC analysis and colorimetric analysis were performed on this, and the concentration of hyaluronic acid was determined. Since the concentration of hyaluronic acid in this supernatant has increased by the concentration at which the gel was dissolved, the ratio of the remaining gel and the ratio of the dissolved gel are determined from the ratio to the initial concentration (the sum of both is 100 %). By the above method, the ratio of the remaining gel at each sampling time was examined. Table 2 shows the results.
【００３３】[0033]
【表２】 [Table 2]
【００３４】表２に示すとおり、６０℃に保存した時間
が２５時間後では、均一に混合された比較例１では、ゲ
ルが開始時の６４％しか残存していなかったのに対し
て、実施例１の分離させた状態でのゲル残存率は開始時
の９４％と有意に高かった。これより、分離して保存す
ることでゲルの安定性を高めることわかった。As shown in Table 2, after 25 hours of storage at 60 ° C., in Comparative Example 1 in which the mixture was uniformly mixed, only 64% of the gel remained at the start, whereas The gel retention in the separated state of Example 1 was significantly higher at 94% at the start. From this, it was found that the stability of the gel was increased by separating and storing.
【００３５】実施例５ ヒアルロン酸製剤の生体内での貯留性 膝関節製剤としての有効性を評価するために、実施例２
で作成したヒアルロン酸ゲルとヒアルロン酸溶液の分離
型医療材料のウサギ膝関節内貯留性試験を行った。試験
は次の手順で行った。３ヶ月齢のウサギ（Ｋｂｓ：ＮＺ
Ｗ雄）の左膝に０．２５ｍｌのヒアルロン酸ゲルとヒア
ルロン酸溶液の混合液（ヒアルロン酸ゲル懸濁液：ヒア
ルロン酸溶液＝１：９）を投与した。投与１日及び３日
後に、動物をペントバルビタールナトリウムの耳介静脈
内投与による麻酔後、放血致死させた。その後投与した
方の脚を切断し膝関節を背面より切開して、腔内を生理
食塩水で洗いだし、膝関節腔内貯留液を回収した。ま
た、投与しない方の脚についても同様の回収を行った。
得られた関節腔内貯留液はｐＨをアルカリ側に調整して
残存するヒアルロン酸ゲルを完全に分解させた後、ＧＰ
Ｃ分析により全ヒアルロン酸量を定量した。そして、投
与を行っていない方の膝から回収した貯留液のヒアルロ
ン酸量でバックグラウンド補正をして、投与後１日およ
び３日後のヒアルロン酸の回収率を得た。その結果、投
与してから１日経過後のヒアルロン酸の回収率は、７５
％であり、投与してから３日経過後のヒアルロン酸の回
収率は、３５％であった。従って、投与してから１日経
過後と３日経過後で、それぞれ関節腔に投与したヒアル
ロン酸が残存していることがわかり、関節製剤としての
有用性が示された。Example 5 In vivo Retention of Hyaluronic Acid Preparation In order to evaluate the efficacy as a knee joint preparation, Example 2 was used.
A storage test of the separated medical material of the hyaluronic acid gel and the hyaluronic acid solution prepared in the above was performed in a rabbit knee joint. The test was performed according to the following procedure. 3 month old rabbit (Kbs: NZ
W male) was administered 0.25 ml of a mixture of a hyaluronic acid gel and a hyaluronic acid solution (hyaluronic acid gel suspension: hyaluronic acid solution = 1: 9) to the left knee. One day and three days after administration, the animals were sacrificed by exsanguination after anesthesia by intravenous administration of sodium pentobarbital. Thereafter, the leg to which the drug was administered was cut, the knee joint was incised from the back, the cavity was washed with physiological saline, and the pooled fluid in the knee joint cavity was collected. In addition, the same recovery was performed on the leg that was not administered.
After adjusting the pH to an alkaline side to completely decompose the remaining hyaluronic acid gel, GP
The total amount of hyaluronic acid was determined by C analysis. The background was corrected for the amount of hyaluronic acid in the pool collected from the knee to which no administration was performed, and the recovery rates of hyaluronic acid 1 day and 3 days after administration were obtained. As a result, the recovery of hyaluronic acid one day after administration was 75%.
%, And the recovery of hyaluronic acid 3 days after the administration was 35%. Therefore, it was found that the administered hyaluronic acid remained in the joint cavity 1 day and 3 days after the administration, respectively, indicating its usefulness as a joint preparation.
【００３６】[0036]
【発明の効果】以上、本発明によれば、ヒアルロン酸溶
液とヒアルロン酸ゲルを同一容器内に別々のｐＨで保存
することで、均一に充填した場合よりも保存安定性に優
れた状態とすることができる。そして、従来の均一に混
合した場合より、ゲルをより安定な条件で保存すること
ができ、長期安定性に優れたヒアルロン酸とヒアルロン
酸ゲルからなる医療材料を提供することができる。As described above, according to the present invention, the hyaluronic acid solution and the hyaluronic acid gel are stored at different pHs in the same container, so that the storage stability is superior to that of the case where they are uniformly filled. be able to. Then, the gel can be stored under more stable conditions than in the case of conventional uniform mixing, and a medical material comprising hyaluronic acid and a hyaluronic acid gel having excellent long-term stability can be provided.
【図１】 本発明の医療材料の一実施例の態様であるプ
レフィルシリンジに充填されたサンプルの概略図であ
る。FIG. 1 is a schematic view of a sample filled in a prefilled syringe which is an embodiment of the medical material of the present invention.
１ 先端部密封用部品 ２ ラバーストッパー ３ シリンダー ４ プランジャー・ロッド （Ａ） ゲル懸濁液 （Ｂ） ヒアルロン酸溶液 1 Tip sealing parts 2 Rubber stopper 3 Cylinder 4 Plunger rod (A) Gel suspension (B) Hyaluronic acid solution
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 17/02 Ａ６１Ｐ 19/02 19/02 19/04 19/04 Ａ６１Ｌ 15/04 Ｆターム(参考） 4C076 AA09 BB21 BB31 BB32 CC50 EE37P FF35 FF63 4C081 AA12 AB05 AB11 BC02 CD081 DA12 4C086 AA01 EA25 MA02 MA28 NA10 ZA89 ZA96 ZC80 ──────────────────────────────────────────────────の Continued on the front page (51) Int.Cl. 7 Identification symbol FI Theme coat ゛ (Reference) A61P 17/02 A61P 19/02 19/02 19/04 19/04 A61L 15/04 F-term (Reference) 4C076 AA09 BB21 BB31 BB32 CC50 EE37P FF35 FF63 4C081 AA12 AB05 AB11 BC02 CD081 DA12 4C086 AA01 EA25 MA02 MA28 NA10 ZA89 ZA96 ZC80
Claims (5)
的に化学的架橋剤又は化学的修飾剤等によって改質され
ていないヒアルロン酸単独で形成されたゲルを、各々異
なるｐＨ条件下にて同一容器内に分離された状態で充填
されていることを特徴とする医療材料。1. A gel formed of (A) a hyaluronic acid solution and (B) a gel formed of hyaluronic acid alone which has not been substantially modified by a chemical crosslinking agent or a chemical modifier, etc., under different pH conditions. A medical material characterized by being filled in the same container in a separated state.
修飾剤等によって改質されていないヒアルロン酸単独で
形成されたゲルが、ヒアルロン酸の酸性溶液を凍結・解
凍して得られたものであることを特徴とする請求項１記
載の医療材料。(B) A gel formed of hyaluronic acid alone which is not substantially modified by a chemical crosslinking agent or a chemical modifier is obtained by freezing and thawing an acidic solution of hyaluronic acid. The medical material according to claim 1, wherein the medical material is a medical material.
修飾剤等によって改質されていないヒアルロン酸単独で
形成されたゲルが、ヒアルロン酸濃度を５質量％以上に
なるように酸溶液と混合し、該共存状態を保持して得ら
れたものであることを特徴とする請求項１記載の医療材
料。(B) a gel formed of hyaluronic acid alone, which has not been substantially modified by a chemical crosslinking agent or a chemical modifier, has an hyaluronic acid concentration of 5% by mass or more. The medical material according to claim 1, wherein the medical material is obtained by mixing with a solution and maintaining the coexistence state.
６．５〜７．５であり、（Ｂ）実質的に化学的架橋剤又
は化学的修飾剤等によって改質されていないヒアルロン
酸単独で形成されたゲルの懸濁液のｐＨが、ｐＨ４．０
〜６．０であることを特徴とする請求項２又は３記載の
医療材料。4. The method according to claim 1, wherein (A) the pH of the hyaluronic acid solution is pH
6.5 to 7.5, and (B) the pH of the suspension of the gel formed of hyaluronic acid alone which has not been substantially modified by a chemical cross-linking agent or a chemical modifying agent, and the like. 0
The medical material according to claim 2 or 3, wherein
ンジに充填された関節注入型医療材料、癒着防止用医療
材料、又は創傷被覆型医療材料からなる群より選択した
１種であることを特徴とする請求項４記載の医療材料。5. The form provided as a medical material is one selected from the group consisting of a joint-filled medical material, a medical material for preventing adhesion, and a wound-coated medical material filled in a syringe. The medical material according to claim 4, wherein
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001039726A JP2002238995A (en) | 2001-02-16 | 2001-02-16 | Separable medical materials |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001039726A JP2002238995A (en) | 2001-02-16 | 2001-02-16 | Separable medical materials |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002238995A true JP2002238995A (en) | 2002-08-27 |
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ID=18902448
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| JP2001039726A Pending JP2002238995A (en) | 2001-02-16 | 2001-02-16 | Separable medical materials |
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| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2002238995A (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004093887A1 (en) * | 2003-03-28 | 2004-11-04 | Kimberly-Clark Worldwide Inc. | Compositions comprising hyaluronic acid for the prevention of urogenital infections |
-
2001
- 2001-02-16 JP JP2001039726A patent/JP2002238995A/en active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004093887A1 (en) * | 2003-03-28 | 2004-11-04 | Kimberly-Clark Worldwide Inc. | Compositions comprising hyaluronic acid for the prevention of urogenital infections |
| US7238677B2 (en) | 2003-03-28 | 2007-07-03 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Prevention of urogenital infections |
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