JP2002223770A - 宿主およびカダベリンの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 より経済的にカダベリンを生産する。 【解決手段】 本発明の課題は、微生物にリジン脱炭酸
酵素遺伝子および／またはリジン・カダベリンアンチポ
ーター遺伝子を組み込み、高発現させ、リジン脱炭酸酵
素および／またはリジン・カダベリンアンチポーター酵
素活性を増強した微生物に、カダベリンを高濃度蓄積さ
せることによって解決される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、カダベリンの製造
法に関するものである。カダベリンは医薬中間体などの
合成原料や高分子原材料として期待され、需要が高まり
つつある。

【０００２】

【従来の技術】従来、リジンを微量のテトラリン過酸化
物を含むシクロヘキサノール中で煮沸することによりカ
ダベリンが得られることが知られている（須山正,金尾
清造;アミノ酸の脱炭酸（第４報）薬学雑誌,vol.85(6),
P.531-533(1965)）。しかしながら大量のエネルギーお
よび有機溶媒が必要であるうえに、生成効率が非常に低
い（36%）。また、カダベリンは生体内に普遍的に存在
する生体アミンであり、その生合成系が解明されつつあ
る（Celia white tabor and Herbert tabor;Microbiolo
gical Reviews,vol.49,P.81-99(1985)）。植物に微生物
由来のリジン脱炭酸酵素をコードする遺伝子を導入する
と、カダベリンの蓄積量が増加することが知られている
（Lothar F.Fecker,Christiane Rugenhagen and Jochen
Berlin;Plant Molecular Biology,vol.23,P.11-21(199
3)）。また、大腸菌由来の至適pHの異なるリジン脱炭酸
酵素遺伝子が知られている（Shi-yuanmeng and George
N. Bennett;Journal of Bacteriology,vol.174,P.2659-
2669(1992)）（Yoshimi kikuchi,Hiroyuki kojima,Taka
shi tanaka,Yumiko,takatsuka and Yoshiyuki kamio;Jo
urnal of Bacteriology,vol.179,P.4486-4492(199
7)）。さらに、リジンを高効率で発酵法により生産でき
ることが知られている（Schilling BM, Pfefferle W,Ba
chmann B, Leuchtenberger W and Deckwer W;Biotechno
l Bioeng,vol64,P.599-606(1999)）。しかしながら、カ
ダベリンの製造について実際的な製造技術は確立されて
おらず、効率よく、より温和な条件下でカダベリンを製
造する方法の開発が望まれている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、微生
物によるカダベリンの高効率かつ高収率で、エネルギー
消費が少なく、有機溶媒を必要としないカダベリンの工
業的製造方法を提供することである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】上記問題点を解決するた
めに、本発明者らは更に生産性の高いカダベリンの製造
方法について鋭意研究を行った結果、微生物に微生物由
来のリジン脱炭酸酵素遺伝子およびリジン・カダベリン
アンチポーター遺伝子を組み込み、培養することによ
り、培養液中のカダベリンの蓄積濃度、生成収率が著し
く向上することを見出し、本発明に到達した。すなわ
ち、本発明はリジン脱炭酸酵素およびリジン・カダベリ
ンアンチポーターの高発現能を持った微生物を培養し
て、培養液中にカダベリンを蓄積せしめ、前記培養液よ
りカダベリンを回収することを特徴とするカダベリンの
製造方法である。

【０００５】すなわち本発明は、「宿主のリジン脱炭酸
酵素および／またはリジン・カダベリンアンチポーター
の酵素活性を増強した宿主。」および「前期の宿主を培
養することを特徴とするカダベリンの製造方法。」に関
する。

【０００６】

【発明の実施の形態】本発明の好ましい態様では、リジ
ン脱炭酸酵素および／またはリジン・カダベリンアンチ
ポーターの細胞内での活性を増強した宿主を使用する。
宿主細胞内でのリジン脱炭酸酵素および／またはリジン
・カダベリンアンチポーターの細胞内での活性を増強す
る方法に制限はない。具体的には、例えば、リジン脱炭
酸酵素および／またはリジン・カダベリンアンチポータ
ーの酵素量を増加させる方法、もしくは酵素の構造遺伝
子自体に変異を導入して、酵素そのものの比活性を上昇
させることなどが挙げられる。

【０００７】細胞内の酵素量を増加させる手段として
は、遺伝子の転写調節領域の改良、遺伝子のコピー数の
増加、蛋白への翻訳の効率化などが挙げられる。

【０００８】転写調節領域の改良とは、遺伝子の転写量
を増加させる改変を加えることをいう。例えば、プロモ
ーターに変異を導入することによってプロモーター強化
を行い、下流にある遺伝子の転写量を増加させることが
できる。プロモーターに変異を導入する以外にも、宿主
内で強力に発現するプロモーターを導入しても良い。例
えば大腸菌においては、lac、tac、trpなどのプロモー
ターが挙げられる。また、エンハンサーを新たに導入す
ることによって遺伝子の転写量を増加させることができ
る。染色体DNAのプロモーター等の遺伝子導入について
は、例えば特開平1-215280号公報に記載されている。

【０００９】遺伝子のコピー数の上昇は、具体的には、
遺伝子を多コピー型のベクターに接続して組換えDNAを
作製し、該組換えDNAを宿主細胞に保持させることによ
り達成することができる。ここでベクターとは、プラス
ミドやファージ等広く用いられているものを含むが、こ
れら以外にも、トランソポゾン（Berg, D. E. and Ber
g. C. M., Bio/Technol., vol.1, P.417(1983)）やMuフ
ァージ（特開平2-109985号公報）も含む。遺伝子を相同
組換え用プラスミド等を用いた方法で染色体に組み込ん
でコピー数を上昇させることも可能である。

【００１０】蛋白の翻訳効率を上昇させる方法として
は、例えば原核生物においてはSD配列（Shine, J. and
Dalgarno, L., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 71, 1342
-1346(1974)）、真核生物では Kozak のコンセンサス配
列（Kozak, M., Nuc. Acids Res., Vol.15，p.8125-814
8(1987)）を導入、改変することや、使用コドンの最適
化（特開昭59-125895）などが挙げられる。

【００１１】リジン脱炭酸酵素および／またはリジン・
カダベリンアンチポーターの細胞内での比活性を上昇さ
せる手段としては、酵素の構造遺伝子自体に変異を導入
して、より比活性の上昇した酵素を選択する方法が挙げ
られる。

【００１２】遺伝子に変異を生じさせるには、部位特異
的変異法（Kramer,W. and frita,H.J., Methods in Enz
ymology,vol.154,P.350(1987)）リコンビナントPCR法
（PCRTechnology,Stockton Press(1989）、特定の部分
のDNAを化学合成する方法、または当該遺伝子をヒドロ
キシアミン処理する方法や当該遺伝子を保有する菌株を
紫外線照射処理、もしくはニトロソグアニジンや亜硝酸
などの化学薬剤で処理する方法がある。

【００１３】宿主が、リジンモノオキシゲナーゼ、リジ
ンオキシダーゼおよびリジンムターゼなどのカダベリン
以外へのリジン代謝系を持つ場合、カダベリンを選択的
に産生させるために、リジンモノオキシゲナーゼ遺伝
子、リジンオキシダーゼ遺伝子およびリジンムターゼ遺
伝子などを破壊してもよい。

【００１４】リジン脱炭酸酵素遺伝子およびリジン・カ
ダベリンアンチポーター遺伝子の取得方法としては特に
制限はなく、PCR法、ゲノムライブラリーやcDNAライブ
ラリーからのスクリーニング法などが用いられる。本発
明において、これらの遺伝子は、遺伝的多形性などによ
る変異型も含む。なお、遺伝的多形性とは、遺伝子上の
自然突然変異により遺伝子の塩基配列が一部変化してい
るものをいう。

【００１５】取得した遺伝子は適当な発現ベクターに組
み込み、宿主内に導入する。

【００１６】用いられる発現ベクターのタイプについて
は宿主細胞中で安定に維持されるものであれば特に制限
はない。例えば大腸菌においては大腸菌内において複製
可能なpBR322、pUC19などをベクターとして用いること
が可能である。

【００１７】作製される発現ベクターについては、特に
制限はない。宿主内で複製可能な１種類の発現ベクター
に、１種類のリジン脱炭酸酵素遺伝子を組み込み発現さ
せても良い。また、１種類の発現ベクターに、２種類以
上のリジン脱炭酸酵素遺伝子を組み込み、同一のプロモ
ーターまたは異なるプロモーターの制御下に発現させて
も良い。さらに、異なる複製起点を持ち異なるプロモー
ターを有する発現ベクターを２種類以上を使用し、それ
ぞれに異なるリジン脱炭酸酵素遺伝子を組み込み異なる
プロモーターの制御下で、それぞれを発現させても良
い。

【００１８】２種類以上リジン脱炭酸酵素遺伝子を組み
込む際、それぞれの酵素の至適pHの異なるリジン脱炭酸
酵素遺伝子を組み込むことが好ましい。

【００１９】更に好ましくは、これらリジン脱炭酸酵素
発現ベクターと同一の発現ベクターにリジン・カダベリ
ンアンチポーターを組み込み同一のプロモーターの制御
下に発現させても良い。また、これらリジン脱炭酸酵素
発現ベクターと異なる複製起点を持ち異なるプロモータ
ーを有する発現ベクターにリジン・カダベリンアンチポ
ーター遺伝子を組み込み、異なるプロモーターの制御下
でリジン脱炭酸酵素およびリジン・カダベリンアンチポ
ーターをそれぞれ発現させても良い。

【００２０】導入方法としては特に制限はないが、例え
ば細菌の場合は、塩化カルシウム法、エレクトロポレー
ション法などが用いられる。

【００２１】本発明に使用する宿主は、特に制限はな
い。微生物、動物、植物または昆虫などが好ましく使用
できる。例えば動物を用いる場合、マウス、ラットやそ
れらの培養細胞などが用いられる。植物を用いる場合、
例えばシロイヌナズナ、タバコやそれらの培養細胞が用
いられる。また、昆虫を用いる場合、例えばカイコやそ
の培養細胞などが用いられる。

【００２２】宿主は微生物であることがより好ましい。
微生物としては例えば、大腸菌、枯草菌、リジン高生産
菌などが用いられる。リジン高生産菌として、ブレビバ
クテリウム・ディバリカツム（Brevibacterium divaric
atum）、コリネバクテリウム・エスピー（Corynebacter
ium sp）、ミクロコッカス・グルタミカス（Micrococcu
s glutamicus）が好ましく使用できる。

【００２３】また、宿主に、薬剤に対する耐性、栄養要
求性などの性質があってもよい。

【００２４】宿主に組み込むべきリジン脱炭酸酵素をコ
ードする遺伝子およびリジン・カダベリンアンチポータ
ーをコードする遺伝子は、宿主によって発現され、リジ
ン脱炭酸酵素およびリジン・カダベリンアンチポーター
としての活性が保持されるならば特に制限はなく、微生
物、動物、植物または昆虫由来のもが使用できるが、微
生物由来のリジン脱炭酸酵素をコードする遺伝子および
リジン・カダベリンアンチポーターをコードする遺伝子
が好ましい。

【００２５】微生物のリジン脱炭酸酵素をコードする遺
伝子としては、細菌由来のものが好ましく、大腸菌、バ
シラス・ハロドゥランス（Bacillus halodurans）、バ
シラス・サブチリス（Bacillus subtilis）、セレノモ
ナス・ルミナンチウム（Selenomonas ruminantium）、
ビブリオ・コレラ（Vibrio cholerae）、ビブリオ・パ
ラヘモリティカス（Vibrio parahaemolyticus）、スト
レプトマイセス・コエリカーラ（Streptomyces coelico
lor）、ストレプトマイセス・ピロサス（Streptomyces
pilosus）、エイケネラ・コロデンス（Eikenella corro
dens）、イユバクテリウム・アシダミノフィルム（Euba
cterium acidaminophilum）、サルモネラ・ティフィム
リウム（Salmonella typhimurium）、ハフニア・アルベ
イ(Hafniaalvei)、ナイセリア・メニンギチデス（Neiss
eria meningitidis）、テルモプラズマ・アシドフィル
ム（Thermoplasma acidophilum）、ピロコッカス・アビ
シ（Pyrococcus abyssi）またはコリネバクテリウム・
グルタミカス（Corynebacterium glutamicum）などの由
来の遺伝子が知られており、これらが好ましく用いられ
る。さらに好ましくは大腸菌由来の遺伝子（cadA、ld
c）が用いられる。

【００２６】リジン・カダベリンアンチポーターをコー
ドする遺伝子としては、大腸菌、テルモプラズマ・アシ
ドフィルム（Thermoplasma acidophilum）、ビブリオ・
コレラ（Vibrio cholerae）などの遺伝子が知られてお
り、これらが好ましく用いられる。さらに好ましくは大
腸菌由来の遺伝子（cadB）が用いられる。

【００２７】本発明における培養方法について説明す
る。培地は炭素源、窒素源、無機イオンおよび必要に応
じてその他の有機微量成分を含有する通常の培地が使用
可能でであり、カダベリンが産生される限り特に制限は
ない。

【００２８】炭素源としてはグルコース、フラクトー
ス、糖蜜などの糖類、フマール酸、クエン酸、コハク酸
などの有機酸、メタノール、エタノール、グリセロール
などのアルコール類などを１〜１５％、窒素源として酢
酸アンモニウムなどの有機アンモニウム塩、硫酸アンモ
ニウム、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、硝酸
アンモニウムなどの無機アンモニウム塩、アンモニアガ
ス、アンモニア水、尿素などを０．１％〜４．０％、有
機微量成分としてはピリドキサルリン酸やビオチンなど
の被要求性物質が０．００００００１％〜０．１％、そ
れぞれ適当量含有する培地が用いられる。

【００２９】これらの他にリン酸カルシウム、硫酸マグ
ネシウム、塩化カルシウム、塩化ナトリウム、硫酸亜
鉛、硫酸銅、硫酸第１鉄などが微量物質として必要に応
じて添加される。さらにチアミン、ナイアシンなどの要
求ビタミン、又はこれらを含有する酵母エキス、コーン
スティープリカー、その他天然物を適当量含有した培地
を用いることもできる。

【００３０】培養は通常、好気的条件下で行うが、カダ
ベリンの生成に応じて嫌気的条件下で行うことが可能で
ある。培養中はカダベリンの生成蓄積に応じて、培地の
ｐＨ上昇が起こるので、塩酸、硫酸などの酸でｐＨ４〜
ｐＨ８に調節することが有効である。好ましくは消泡剤
なども添加し、培養条件の安定化を図る。培養温度は１
５℃〜４５℃、好ましくは２０℃〜３７℃が用いられ
る。

【００３１】これらの条件の下に４〜１２０時間振とう
または撹拌培養することで好ましい結果が得られる。

【００３２】培養液中に生成したカダベリンは、そのま
ま単離精製することなく利用することもできるし、菌体
を遠心分離などで除去した後、常法により単離精製し利
用することもできる。

【００３３】

【実施例】以下、実施例により本発明を具体的に説明す
る。 （実施例１） リジン脱炭酸酵素遺伝子およびリジン・カダベリンアン
チポーター遺伝子のクローニングおよび同一プロモータ
ー制御下発現ベクターの作製 宿主細胞の生産するリジンからカダベリンを産生させる
ために、リジン脱炭酸酵素遺伝子およびリジン・カダベ
リンアンチポーター遺伝子のクローニングを行った。

【００３４】データベース(GenBank)に登録されている
リジン脱炭酸酵素遺伝子（cadA）およびリジン・カダベ
リンアンチポーター遺伝子（cadB）（Accession No.M76
411）の塩基配列を元に、PCRプライマーを設計した。そ
の塩基配列を配列表１、配列表２に示した。PCR用プラ
イマーの末端にはHindIII切断部位とXbaI切断部位がそ
れぞれ付加されている。

【００３５】これらのプライマーを用い、大腸菌K12株
（ATCC10798）のゲノムDNAを鋳型としてPCRを行い、3,6
22塩基対の増幅断片を得た。この増幅断片をHindIIIお
よびXbaIにより切断後、pUC19（宝酒造社製）のHindIII
／XbaI切断部位に導入し、リジン脱炭酸酵素発現ベクタ
ーpCAD1を作製した（図）。pCAD1においてクローン化
したcadAおよびcadBは、pUC19が持つlacプロモーターの
制御下に発現される。 （実施例２） 宿主への発現ベクターの導入 実施例１で作製した発現ベクターpCAD1を大腸菌JM109株
に導入した。導入後、組換え大腸菌の選択は抗生物質で
あるアンピシリン耐性を指標に行い、形質転換体を得
た。この形質転換株を大腸菌CAD1株と命名した。 （実施例３） 形質転換株によるカダベリンの発現 親株である大腸菌JM109株およびこの形質転換株の培養
は以下のように行った。JM109株、およびこのCAD1株を
培養した。すなわち、これらの菌株を各々ＬＢ培地５ｍ
ｌに１白金耳植菌し、３０℃で２４時間振とうして前培
養した。

【００３６】次に、ＬＢ培地４５ｍｌを５０ｍｌの三角
フラスコに入れ、予め１１５℃、１０分間蒸気滅菌し
た。この培地に前培養した上記菌株を植え継ぎ、４時間
後に1mM IPTG(isopropyl-1-thio-β-D-galactoside)を
添加し、５０時間培養した。

【００３７】培養終了後、菌体を除去した培養上清中の
カダベリン濃度を（Phan,A.P.H.,T.T.Ngo and H.M.Lenh
off;Anal.Biochem.,vol120,P.193-197(1982））に記載
の方法に従って測定した。その結果を以下に示した。

【００３８】 コントロールである大腸菌JM109株に比較して組換え株
である大腸菌CAD1株ではカダベリンの蓄積量増加が見ら
れた。

【００３９】

【発明の効果】本発明によれば、発酵法によりカダベリ
ンを培養液中に生産すると、既存の方法に比較してより
経済的なカダベリンの生産が可能となる。

【００４０】

【配列表】 SEQUENCE LISTING <110> TORAY <120> The method to produce Cadaverine <130> 51E15810 <160> 2 <210> 1 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> PCR primer to obtain cad operon from Escherichia coli <400> cttcccttgttctagataattattttttgctttct <210> 2 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> PCR primer to obtain cad operon from Escherichia coli <400> gacccggactcaagcttcaaaaatgaaattaggag

【図面の簡単な説明】

【図１】 リジン脱炭酸酵素およびリジン・カダベリン
アンチポーター発現ベクターpCAD1のフィジカルマップ
を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｐ 13/02 Ｃ１２Ｒ 1:07） //(Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ 1:125） Ｃ１２Ｒ 1:01） 1:15） (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ 1:19） Ｃ１２Ｒ 1:07） 1:36） (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ 1:465） Ｃ１２Ｒ 1:125） 1:63） (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ 1:42） Ｃ１２Ｒ 1:15） (Ｃ１２Ｎ 1/21 (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ Ｃ１２Ｒ 1:13） Ｃ１２Ｒ 1:19） (Ｃ１２Ｎ 1/21 (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ Ｃ１２Ｒ 1:15） Ｃ１２Ｒ 1:36） (Ｃ１２Ｎ 1/21 (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ Ｃ１２Ｒ 1:19） Ｃ１２Ｒ 1:465） (Ｃ１２Ｎ 1/21 (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ Ｃ１２Ｒ 1:28） Ｃ１２Ｒ 1:63） (Ｃ１２Ｐ 13/02 (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ Ｃ１２Ｒ 1:13） Ｃ１２Ｒ 1:42） (Ｃ１２Ｐ 13/02 (Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｒ 1:15） Ｃ１２Ｒ 1:13） (Ｃ１２Ｐ 13/02 (Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｒ 1:19） Ｃ１２Ｒ 1:15） (Ｃ１２Ｐ 13/02 (Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｒ 1:28） Ｃ１２Ｒ 1:19） Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ (Ｃ１２Ｎ 1/21 5/00 Ａ Ｃ１２Ｒ 1:28） Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 13/02 1:07） Ｃ１２Ｒ 1:13） 1:125） (Ｃ１２Ｐ 13/02 1:15） Ｃ１２Ｒ 1:15） 1:19） (Ｃ１２Ｐ 13/02 1:36） Ｃ１２Ｒ 1:19） 1:465） (Ｃ１２Ｐ 13/02 1:63） Ｃ１２Ｒ 1:28） 1:42） Ｆターム(参考） 4B024 AA01 BA08 CA04 DA01 DA02 DA05 DA11 EA04 GA11 HA01 4B064 AE02 CA02 CA05 CA10 CA11 CA19 CC24 DA01 4B065 AA01X AA01Y AA15Y AA19Y AA22X AA24X AA24Y AA26X AA26Y AA34X AA46Y AA50Y AA55Y AA57X AA87X AB01 BA02 CA16 CA44

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 宿主のリジン脱炭酸酵素および／または
   リジン・カダベリンアンチポーターの酵素活性を増強し
   た宿主。
2. 【請求項２】 宿主にリジン脱炭酸酵素および／または
   リジン・カダベリンアンチポーターをコードする遺伝子
   を組み込んでなる請求項１記載の宿主。
3. 【請求項３】 リジン脱炭酸酵素をコードする遺伝子
   が、１または２種類以上であるところの請求項２記載の
   宿主。
4. 【請求項４】 リジン脱炭酸酵素をコードする遺伝子を
   ２種類以上組み込む際、それぞれの酵素の至適pHが異な
   るリジン脱炭酸酵素をコードする遺伝子を組み込むこと
   を特徴とする請求項３記載の宿主。
5. 【請求項５】 リジン脱炭酸酵素をコードする遺伝子
   が、微生物、動物、植物または昆虫のいずれか由来であ
   るところの請求項２〜４のいずれかに記載の宿主。
6. 【請求項６】 リジン脱炭酸酵素をコードする遺伝子
   が、細菌由来であるところの請求項５に記載の宿主。
7. 【請求項７】 リジン脱炭酸酵素をコードする遺伝子
   が、バシラス・ハロドゥランス（Bacillus haloduran
   s）、バシラス・サブチリス（Bacillus subtilis）、エ
   シェリシア・コリ(Escherichia coli)、セレノモナス・
   ルミナンチウム（Selenomonas ruminantium）、ビブリ
   オ・コレラ（Vibrio cholerae）、ビブリオ・パラヘモ
   リティカス（Vibrio parahaemolyticus）、ストレプト
   マイセス・コエリカーラ（Streptomyces coelicolo
   r）、ストレプトマイセス・ピロサス（Streptomyces pi
   losus）、エイケネラ・コロデンス（Eikenella corrode
   ns）、イユバクテリウム・アシダミノフィルム（Eubact
   erium acidaminophilum）、サルモネラ・ティフィムリ
   ウム（Salmonella typhimurium）、ハフニア・アルベイ
   (Hafnia alvei)、ナイセリア・メニンギチデス（Neisse
   ria meningitidis）、テルモプラズマ・アシドフィルム
   （Thermoplasma acidophilum）、ピロコッカス・アビシ
   （Pyrococcus abyssi）またはコリネバクテリウム・グ
   ルタミカス（Corynebacterium glutamicum）のいずれか
   由来であるところの請求項６に記載の宿主。
8. 【請求項８】 リジン・カダベリンアンチポーターをコ
   ードする遺伝子が、微生物、動物、植物または昆虫のい
   ずれか由来であるところの請求項２に記載の宿主。
9. 【請求項９】 リジン・カダベリンアンチポーターをコ
   ードする遺伝子が、テルモプラズマ・アシドフィルム
   （Thermoplasma acidophilum）、ビブリオ・コレラ（Vi
   brio cholerae）またはエシェリシア・コリ(Escherichi
   a coli)のいずれか由来であるところの請求項８に記載
   の宿主。
10. 【請求項１０】 宿主が、微生物、動物、植物または昆
    虫のいずれかであるところの請求項１〜９のいずれかに
    記載の宿主。
11. 【請求項１１】 宿主が、ブレビバクテリウム・ディバ
    リカツム（Brevibacterium divaricatum）、コリネバク
    テリウム・エスピー（Corynebacterium sp）、ミクロコ
    ッカス・グルタミカス（Micrococcus glutamicus）また
    はエシェリシア・コリ(Escherichia coli)のいずれかで
    あるところの請求項１０に記載の宿主。
12. 【請求項１２】２種類以上のリジン脱炭酸酵素遺伝子を
    同一のプロモーターの制御下に発現させることを特徴と
    する請求項１０または１１に記載の宿主。
13. 【請求項１３】２種類以上のリジン脱炭酸酵素遺伝子を
    異なるプロモーターの制御下に発現させることを特徴と
    する請求項１０または１１に記載の宿主。
14. 【請求項１４】リジン脱炭酸酵素遺伝子及びリジン・カ
    ダベリンアンチポーター遺伝子を同一のプロモーターの
    制御下に発現させることを特徴とする請求項１０〜１２
    のいずれかに記載の宿主。
15. 【請求項１５】リジン脱炭酸酵素遺伝子及びリジン・カ
    ダベリンアンチポーター遺伝子を異なるプロモーターの
    制御下に発現させることを特徴とする請求項１０、１１
    または１３のいずれかに記載の宿主。
16. 【請求項１６】 請求項１〜１５のいずれかに記載の宿
    主を培養することを特徴とするカダベリンの製造方法。