JP2001518511A

JP2001518511A - 造骨細胞特異的分裂促進因子及び該化合物を含む薬剤

Info

Publication number: JP2001518511A
Application number: JP2000514652A
Authority: JP
Inventors: エスヴァイン，アンゲリカ; クリング，ローター
Original assignee: ロシュダイアグノスティックスゲーエムベーハー
Priority date: 1997-10-02
Filing date: 1998-09-30
Publication date: 2001-10-16
Also published as: KR20010030822A; ATE232103T1; TR200000875T2; AU1148399A; ES2191350T3; DE69811253T2; WO1999017781A1; CA2304821C; JP2004217667A; EP1019062B1; AU738479B2; CN1271289A; BR9813020A; DE69811253D1; DK1019062T3; ZA988952B; CN1191070C; KR100392207B1; EP1019062A1; US6197759B1

Abstract

(57)【要約】本発明は、式１（式中、Ｒ¹は６〜２４個の炭素原子を有する、アルキル、アルケニル又はアルキニル、ｎは０〜１２、Ｘは酸素又はＮＨである）の化合物、及び、生理学的に安全な、塩、エステル、光学活性形態、ラセマートと生体内で代謝され一般式（Ｉ）の化合物を生じることができるそれらの誘導体、その製造方法、並びに骨代謝障害の処置のための該化合物を含む薬剤を指向する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、式１

【０００２】

【化４】

【０００３】の造骨細胞特異的分裂促進化合物、その調製方法及び該化合物を含む薬剤に関す
る。

【０００４】健常個体において、骨内の生成作用及び分解作用は、事実上平衡状態にある、
すなわち、造骨細胞と破骨細胞の活性は平衡状態に保れている。しかし、若しこ
の平衡状態が、破骨細胞で選択的に乱される場合、及び／又は造骨細胞の損失に
よって乱される場合には、骨質量の減少及び骨の構造と機能に負の変化をもたら
すであろう。

【０００５】今に至るまで、エストロゲン、カルシトニン及びビスホスホナートのような骨
吸収阻害剤が、骨代謝障害の処置に主として用いられている。しかし、これらの
物質の使用は制限されるうえ、すべての場合で所望の効果を示すわけではない。
したがって骨形成への刺激効果を有する化合物、及びすでに減少した骨質量の増
加に寄与する化合物が、骨代謝障害の処置において特に重要である。骨粗鬆症治
療のための骨同化作用を有する物質が、欧州特許出願ＥＰ−Ａ−６２５，５２２
及びＥＰ−Ａ−５２４，０２３に記載されている。

【０００６】リゾホスファチジル酸（ＬＰＡ）は、種々の組織及び細胞型で細胞内脂質メッ
センジャーとしての役割を果たすことが知られている（J. Biol. Chem. 270(22,
12949-52, 1995; Curr. Opin. Cell. Biol. 7(2), 203-10, 1995）。

【０００７】本発明のリゾホスファチジル酸誘導体が骨形成の刺激効果を有し、したがって
骨代謝障害の全般的処置に適していることが、驚いたことに今見出された。特に
、それらは骨形成が障害を受けた場合に、極めて満足のいくように用いることが
できる、すなわち、それらは骨粗鬆症、例えば、骨形成不全症のような骨格系の
骨減少症の処置、同じく骨再生と骨誘導の局所的な促進のため、例えば、整形外
科適応症と歯科矯正適応症で、骨折治療で、骨接合、偽関節及び結合を生じる骨
移植片のために特に適している。

【０００８】更に、それらの骨代謝への作用によって、活性物質としての本発明のリゾホス
ファチジル酸誘導体を含む薬剤は、リウマチ、関節炎、変形性関節症及び変性関
節症の、局所及び全身処置の主成分の構成要素となる。

【０００９】本発明は、一般式（Ｉ）

【００１０】

【化５】

【００１１】（式中、Ｒ¹は、６〜２４個の炭素原子を有する、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり、ｎは、０〜１２であり、Ｘは、酸素又はＮＨである）の化合物であるが、化合物、すなわち、（（全）cis−５，８，１１，１４）−エイコサテトラエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル、cis−９，cis−１２
−オクタデカジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル、
（（全）cis−９，１２，１５）−オクタデカトリエン酸２−ヒドロキシ−３− ホスホノオキシプロピルエステル又はcis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ −３−ホスホノオキシプロピルエステルを除き、ただし、Ｘが酸素を表す場合に
は、−（ＣＨ₂)_n−ＣＨ₃基のｎは、７、９、１１、１３又は１５の数を表さない
化合物、並びに生理学的に許容し得る、塩、エステル、光学活性形態、ラセマー
ト及び生体内（in vivo）で代謝され一般式（Ｉ）の化合物をもたらすことができるそれらの誘導体，また薬剤製造における該化合物の使用を指向する。

【００１２】Ｘが酸素であり、かつｎが１３の−（ＣＨ₂)_n−ＣＨ₃である上記化合物の合成
方法は、周知である（例えば、Chem. Ber. 71, 1075 (1938), Hoppe-Seyler's Z
. Phisiol. Chem. 347, 94-101 (1966)）。Ｘが酸素であり、かつｎが１５の− （ＣＨ₂)_n−ＣＨ₃である該化合物の合成方法は、周知である（例えば、Chem. Ph
ys. Lipids 1, 317 (1966/67)）。Ｘが酸素であり、かつｎが７の−（ＣＨ₂)_n−
ＣＨ₃である該化合物の合成方法は、周知である（例えば、Chem. Phys. Lipids
18, 316 (1977)）。

【００１３】化合物（（全）cis−５，８，１１，１４）−エイコサテトラエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル、cis−９，cis−１２−オクタデ
カジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル及び（（全）
cis−９，１２，１５）−オクタデカトリエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステルが、単離したラット大腸の収縮に対する効果を有するこ
とが記載されている（J. Pharm. Pharmacol. 43, 774-78 (1991)）。Ｘが酸素で
あり、かつｎが９、１１、１３、１５の−（ＣＨ₂)_n−ＣＨ₃である化合物、同じ
くcis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル、cis−９，cis−１２−オクタデカジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノ
オキシプロピルエステル及び（（全）cis−９，１２，１５）−オクタデカトリエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステルも、血圧への効果
が記載されている（Arzneim. Forsch. 35, 587-92 (1985)）。

【００１４】各アルキルは、直鎖又は分岐のＣ₆−Ｃ₁₈アルキル基、例えば、ヘキシル、イソヘキシル、２，２−ジメチルヘキシル、５−メチルヘキシル、ヘプチル、イソ
ヘプチル、６−メチルヘプチル、オクチル、イソオクチル、ノニル、イソノニル
、デシル、イソデシル、ウンデシル、イソウンデシル、ドデシル、イソドデシル
、トリデシル、イソトリデシル、テトラデシル、イソテトラデシル、ペンタデシ
ル、イソペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、イソヘプタデシル又はオ
クタデシル、特にヘプチル、デシル及びドデシルを示すと理解される。

【００１５】各アルケニルは、６〜２０個の炭素原子及び１個以上の不飽和を有する、場合
により置換された残基、例えば、Δ¹−ヘキセニル、Δ¹−オクテニル、Δ⁹−ノネニル、Δ¹−デセニル、Δ¹⁰−デセニル、Δ^1,4−デカジエニル、Δ^1,4,7−デカトリエニル、Δ^1,4,7,10−ヘキサデカテトラエニル、Δ¹−ドデセニル、Δ⁵−
ドデセニル、Δ^1,4−ウンデカンジエニル、Δ¹⁴−テトラデセニル、特にΔ¹−デ
セニル、Δ^1,4−デカジエニル、Δ^1,4,7−デカトリエニルである（ここで、２重
結合はcis又はtransであることができ、また複数の不飽和を有する化合物ではあ
らゆる組み合わせが可能である）を示す。

【００１６】各アルキニルは、６〜２０個の炭素原子及び１個以上の不飽和を有する、場合
により置換された残基、例えば、Δ¹−デシニル、Δ¹−ノニニル、Δ^1,3−テトラデカジイニル、Δ^1,3−ヘキサデカジイニル、Δ^1,3−オクタデカジイニル、特
にΔ¹−デシニルを示す。

【００１７】ＸがＮＨを示す化合物が、特に好ましい。

【００１８】式１の化合物の生理学的に使用し得る塩の例は、生理学的に許容し得る鉱酸の
塩、例えば、塩酸、硫酸、亜硫酸若しくはリン酸の塩、又は有機酸の塩、例えば
、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、クエ
ン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、コハク酸若しくはサリチル酸の塩である
。遊離のカルボキシル基を有する一般式１の化合物は、生理学的に許容し得る塩
基で塩を形成することもできる。これらの塩の例は、アルカリ金属塩、アルカリ
土類金属塩、アンモニウム塩及びアルキルアンモニウム塩、例えば、ナトリウム
塩、カリウム塩、カルシウム塩又はテトラメチルアンモニウム塩である。

【００１９】一般式（Ｉ）の化合物は、少なくとも１個の不斉炭素原子を含む、そしてそれ
ゆえ、本願は、一般式（Ｉ）の光学活性化合物も指向する。

【００２０】Ｘが酸素である一般式（Ｉ）の化合物の純粋なエナンチオマーは、購入するか
、又は、例えば、光学活性な酸を用いる塩形成による伝統的なラセマート分割に
よる方法のような周知の方法によって調製することができる、光学活性なアルコ
ールを用いることによって得る。

【００２１】ＸがＮＨである一般式（Ｉ）の化合物の純粋なエナンチオマーは、購入するか
、又は、例えば、光学活性な酸を用いる塩形成による伝統的なラセマート分割に
よる方法若しくは光学活性なアミノ酸の還元による方法のような周知の方法によ
って調製することができる、光学活性なアミノアルコールを用いることによって
得る。

【００２２】Ｘが酸素である一般式（Ｉ）の化合物を、一般式（II）

【００２３】

【化６】

【００２４】（式中、Ｒ₂は、ヒドロキシル基に常用する保護基を示す）の化合物から保護基Ｒ₂を除去することによる、それ自体が既知の方法にしたがって調製する。

【００２５】一般式（II）の化合物は、好ましくは一般式（III）

【００２６】

【化７】

【００２７】（式中、Ｒ₃及びＲ₄は、ヒドロキシル基に常用する保護基を示し、１，２−ジオールのた
めの保護基、例えば、環状アセタール及び環状ケタールが好ましい）のアルコールと、一般式（IV）

【００２８】

【化８】

【００２９】（式中、Ｒ¹及びｎは上記と同義であり、及びＹはヒドロキシ又は活性化基であることができ、またＹがヒドロキシを表す場合にはカルボキシル基の活性化をカルボジイ
ミド法によって達成でき、またＹが活性化基を表す場合には、混合無水物、特に
炭酸低級アルキルエステル、例えば、エチル若しくはイソブチルエステル又は活
性エステル、特にｐ−ニトロフェニル、２，４，５−トリクロロフェニル、Ｎ−
ヒドロキシスクシンイミド若しくは１−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステル
がこの目的のために可能である）のカルボン酸誘導体を反応させることによって、一般式（Ｖ）

【００３０】

【化９】

【００３１】の化合物を得る。

【００３２】一般式（III）の化合物は、好ましくは、グリセロールへ保護基を導入することによるそれ自体が既知の方法によって調製するか、又は購入することができる
。

【００３３】一般式（IV）の化合物は、一般式（VI）

【００３４】

【化１０】

【００３５】（式中、Ｒ¹及びｎは、上記と同義である）の化合物から出発する周知の方法にしたがって調製する。

【００３６】一般式（VI）の化合物は、周知の鎖伸長又はカルボン酸合成方法にしたがって
、調製するか又は購入することができる。

【００３７】保護基Ｒ₃及びＲ₄を除去することによって、一般式（Ｖ）の化合物を、化合物
（VII）

【００３８】

【化１１】

【００３９】に変換する。

【００４０】一般式（VII）の化合物では、一般的なヒドロキシル保護基であるＲ₂及びＲ₆ を導入することによって、好ましくは、第１のヒドロキシル官能基にトリチル基
（Ｒ₆）、及び第２のヒドロキシル基にベンゾアート保護基又はシリル保護基、例えば、tert−ブチルジフェニルシリル（Ｒ₂）を導入することによって、オルトゴナル（orthogonal）形態で、２個のヒドロキシル基を保護し、一般式（VIII
）

【００４１】

【化１２】

【００４２】の化合物を得る。

【００４３】まず、一般式（VIII）の化合物をそれ自体が既知の方法によって選択的に脱保
護し、次いでオキシ塩化リンと反応させることによって一般式（II）の化合物に
変換する。

【００４４】ＸがＮＨである一般式（Ｉ）の化合物を、一般式（IX）

【００４５】

【化１３】

【００４６】（式中、Ｒ₂は、ヒドロキシル基に常用する保護基を示す）の化合物から保護基Ｒ₂を除去することによるそれ自体が既知の方法によって調製する。

【００４７】一般式（IX）の化合物は、好ましくは一般式（Ｘ）

【００４８】

【化１４】

【００４９】（式中、Ｒ₇及びＲ₈は、独立して水素又はヒドロキシル基に常用する保護基を示すことが
でき、１，２−ジオールの保護基、例えば、環状アセタール及び環状ケタールが
好ましい）のアミンを、一般式（IV）

【００５０】

【化１５】

【００５１】（式中、Ｒ¹、ｎ及びＹは上記と同義である）のカルボン酸誘導体と反応させることによって、一般式（XI）

【００５２】

【化１６】

【００５３】の化合物を得る、それ自体が既知の方法によって調製する。

【００５４】Ｒ₇及びＲ₈が水素を示す場合には、一般式（VII）の化合物のさらなる反応でＸが酸素である化合物を用いることによって、一般式（XI）の化合物を上記方法
と同様に得る。

【００５５】Ｒ₇及びＲ₈がオルトゴナル保護基ではない場合には、保護基を常法にしたがっ
て最初に除去し、後続の手順はＲ₇及びＲ₈が水素の場合と同様である。

【００５６】もしＲ₇及びＲ₈がオルトゴナル保護基であれば、第１のヒドロキシル基を選択
的に脱保護し、それからオキシ塩化リンと反応させ、Ｒ₂がＲ₇である一般式（IX
）の化合物を得る。

【００５７】一般式（Ｉ）の化合物の調製においてオキシ塩化リンを用いる代わりに、一般
式（XII）

【００５８】

【化１７】

【００５９】（式中、一般的な保護基、特に、メチル、エチル又はアリルを、Ｒ₉及びＲ₁₀に用いる）の一般式の適切に保護されたクロロフォスファートを、一般式（XIII）

【００６０】

【化１８】

【００６１】（式中、Ｒ₂は、ヒドロキシル保護基、好ましくは、ベンゾアート保護基又はシリル保護基を示す）の化合物と反応させることができる。一般式（XII）の化合物は、商業的に入手するか、又は文献（Houben-Weyl）で周知の方法にしたがって調製することができる。

【００６２】一般式（Ｉ）の化合物は、周知の方法にしたがって保護基Ｒ₉及びＲ₁₀を除去することによって得る。

【００６３】原則として、保護基すなわちＲ₂，Ｒ₃，Ｒ₄，Ｒ₅，Ｒ₆，Ｒ₇，Ｒ₈，Ｒ₉及びＲ ₁₀ のようなヒドロキシル基に適切な、あらゆるそれらの周知の保護基は、Th. Gr
eene, P. Wuts, “Protective Groups in Organic Synthesis”, 2nd Edn., 199
1, J. Wiley & Sons に記載されているように実行できる。導入及び除去は、そこに記載されている常法にしたがって実施する。

【００６４】式（Ｉ）の化合物は、すべての一般的かつ無毒な薬学的に許容し得る、担体、
補助剤及び添加剤中で、経口、経腸、非経口、局所、経鼻、経肺又は経直腸経路
によって、液体若しくは固体形態、又はエーロゾルとして投与することができる
。式（Ｉ）の化合物を、骨上／骨内で局所的に、場合により外科手術でも適用で
きる。用語“非経口の”は、皮下、静脈内及び筋肉内への、供給又は注入を含む
。経口投与形態は、例えば、錠剤、カプセル、被覆錠剤、シロップ、液体、サス
ペンション、エマルション、エリキシル等であることができ、これらは、以下の
、例えば、香味剤、甘味剤、着色剤及び防腐剤の群の添加剤の１種以上を含むこ
とができる。経口投与形態は、錠剤、カプセル、被覆錠剤等を製造するのに適し
た無毒の薬学的に許容し得る担体、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、
ラクトース、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウム、スターチ、マニトール、
メチルセルロース、タルク、高度に分散したケイ酸、高分子量脂肪酸（例えば、
ステアリン酸）、ピーナッツ油、オリーブ油、パラフィン、Miglyol、ゼラチン、寒天、ステアリン酸マグネシウム、蜜蝋、セチルアルコール、レクチン、グリ
セロール、動物性脂肪と植物性脂肪、固体高分子量ポリマー（例えば、ポリエチ
レングリコール）と一緒に活性成分を含む。胃において所望しない副作用を予防
するためか、又は消化管における遅延吸収の結果として延長された活性をもたら
すために、錠剤、カプセル、被覆錠剤等に、適切な被覆、例えば、モノステアリ
ン酸グリセリン又はジステアリン酸グリセリンを備えることができる。滅菌注射
用水性又は油性の、溶液又はサスペンションを、好ましくは、一般的添加剤、例
えば、安定剤及び溶解剤を含む注射媒体として用いる。該添加物は、例えば、水
、等張生理食塩液溶液、１，３−ブタンジオール、脂肪酸（例えば、オレイン酸
）モノ及びジグリセリド、又はMiglyolであることができる。直腸投与には、あらゆる適切な非刺激性添加剤を用いることができる、これらは常温では固体であ
り、また直腸温では液体である、例えば、ココアバター及びポリエチレングリコ
ールである。エーロゾル投与には、薬学的に一般的な担体を用いる。外用には、
薬学的に一般的な添加剤と共にクリーム、チンキ、ゲル、溶液又はサスペンショ
ン等を用いる。

【００６５】用量は種々の要因、例えば、適用形態、種、年齢、及び／又は個体の状態によ
って決められる。毎日又は間隔を置いて投与すべき用量は、およそ１〜１０００
mg／人、好ましくは、約１０〜２５０mg／人であり、また一回、又は数回に渡り
分散して摂取させることができる。

【００６６】式（Ｉ）の化合物を、骨上／骨内で局所的に、場合により外科手術で適用でき
る。骨上／骨内への、場合により外科手術での、直接的な適用は、局所的にか又
は担体に結合させた、注入又は注射によって、溶液中か又はサスペンション中の
いずれかで、好都合に実施できる。例えば、式（Ｉ）の担体結合化合物を、ゲル
、ペースト、固体又は移植片への被覆として適用できる。

【００６７】担体として、生物適合性、及び好ましくは生物分解性材料を用いる。好ましく
は、材料それ自身が、損傷回復又は骨形成を付加的に誘導するものである。

【００６８】局所的な適用のためには、式（Ｉ）の化合物をポリマーゲル又はフィルムに包
埋し、これらの固定化によって、骨の処置すべき領域にこれらの調製品を直接的
に適用することが好ましい。これらのポリマーベースゲル又はフィルムは、例え
ば、グリセロール、メチルセルロース、ヒアルロン酸、ポリエチレンオキサイド
及び／又はポリオキサマーからなる。コラーゲン、ゼラチン及びアルギニンもま
た適切であり、これは、例えば、ＷＯ９３／０００５０及びＷＯ９３／２０８５
９に記載されている。他のポリマーは、ポリ乳酸（ＰＬＡ）及び乳酸とグリコー
ル酸の共重合体（ＰＬＰＧ）（Hollinger et al., J. Biomed. Mater. Res. 17,
71-82 (1983)）、また“脱塩骨マトリックス”（ＤＢＭ）骨誘導体（Guterman
et al., Kollagen Rel. Res. 8, 419-4319 (1988)）である。例えば、ＴＧＦβ 吸収のため用いるようなポリマーもまた適切であり、これはＥＰ−Ａ０，６１６
，８１４及びＥＰ−Ａ０，５６７，３９１、同じくＷＯ９１／１８５５８によれ
ば合成骨マトリックスが記載されている。

【００６９】骨代用品又は他の治療的に活性な物質を移植するときに常用する材料も、式（
Ｉ）の化合物の担体として適切である。上記担体も、例えば、硫酸カルシウム、
リン酸３カルシウム、ヒドロキシアパタイトとその生分解性誘導体及びポリ無水
物に基づく。これらの生分解性担体とは別に、生物分解性ではないが生物適合性
である担体もまた適切である。例えば、これらの担体は、焼結ハイドロキシアパ
タイト、バイオガラス、アルミナート又は他のセラミック材料（例えば、カルシ
ウムアルミネートリン酸塩）である。これらの材料は、好ましくは、該生物分解
性材料、例えば、特に、ポリ乳酸、ヒドロキシアパタイト、コラーゲン又はリン
酸３カルシウムと組み合わせて用いる。他の非分解性ポリマーは、例えば、米国
特許４，１６４，５６０に記載されている。

【００７０】特に好ましいのは、活性部位で式（Ｉ）の化合物を持続的に放出する担体の使
用である。この目的に特に適したものは、例えば、Innovative Research of Ame
rica, Toledo, Ohio, USAの“徐放ペレット（slow release pellets）”である。特に好ましいのは、一日当たり１〜１０mg/kgの日用量で、数日間、好ましくは、１００日まで式（Ｉ）の化合物を放出するペレットの使用である。

【００７１】用量は種々の要因、例えば、適用形態、種、年齢、及び／又は個体の状態によ
って決めることができる。毎日投与すべき活性物質の用量は、０．０１〜約１０
０mg/kg体重、好ましくは０．１〜１０mg/kg体重であり、一回に又は数回に分散
して適用できる。

【００７２】実施例に記載した化合物及び請求項に記載した置換基の意味すること全てを組
み合わせることによって得られる化合物以外に、下記のリゾホスファチジル酸誘
導体、同じくそれらのナトリウム及びカリウム塩が本発明の趣旨に好ましい：

【００７３】好ましい化合物（ＰＣ）：（１）オクタン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（２）７−メチルオクタン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエス
テル（３）７，７−ジメチルオクタン酸２−ヒトロキシ−３−ホスホノオキシプロピ
ルエステル（４）ノナン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（５）４−メチルノナン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステ
ル（６）８−メチルノナン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステ
ル（７）ウンデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（８）１０−メチルウンデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピル
エステル（９）１１−メチルウンデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピル
エステル（１０）トリデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（１１）１２−メチルトリデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピ
ルエステル（１２）１３−メチルテトラデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルエステル（１３）ペンタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（１４）１４−メチルペンタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルエステル（１５）１５−メチルヘキサデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルエステル（１６）ヘプタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（１７）１６−メチルヘプタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルエステル（１８）１７−メチルオクタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルエステル（１９）ノナデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（２０）１８−メチルノナデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピ
ルエステル（２１）エイコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（２２）１９−メチルエイコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピ
ルエステル（２３）１９−メチルエイコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ−プロ
ピルエステル（２４）ヘンエイコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステ
ル（２５）ドコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（２６）トリコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（２７）テトラコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（２８）ヘプタコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（２９）オクタコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（３０）トリアコンタン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（３１）６−ヘプテン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル
（３２）trans−９−ヘキサデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（３３）（（全）cis−１１，１４，１７）−エイコサトリエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（３４）cis−１０−ヘプタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（３５）cis−１０−ノナデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（３６）cis−３，cis−６−ノナジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ
プロピルエステル（３７）cis−１０−ペンタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（３８）cis−１２−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（３９）cis−１３−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（４０）cis−７−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（４１）cis−８−エイコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（４２）trans−９−テトラデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（４３）trans−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（４４）（（全）trans−９，１１，１３，１５）−オクタデカテトラエン酸２ −ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（４５）（（全）cis−９，１１，１３，１５）−オクタデカテトラエン酸２− ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（４６）cis−１１−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（４７）（（全）cis−１３，１６，１９）−ドコサトリエン酸２−ヒドロキシ −３−ホスホノオキシプロピルエステル（４８）（（全）cis−１３，１６，１９）−ドコサトリエン酸２−ヒドロキシ −３−ホスホノオキシプロピルエステル（４９）（（全）cis−８，１１，１４）−エイコサトリエン酸２−ヒドロキシ −３−ホスホノオキシプロピルエステル（５０）trans−１１−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（５１）trans−１３−ドコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（５２）trans−９，trans−１２−オクタデカジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホ
スホノオキシプロピルエステル（５３）cis−９−テトラデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（５４）cis−９−ヘキサデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（５５）１０−ウンデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエス
テル（５６）cis−１１、cis−１４−エイコサジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホ
ノオキシプロピルエステル（５７）cis−１１−エイコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（５８）cis−１５−テトラコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（５９）１１−ドデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステ
ル（６０）９−デセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（６１）１６−ヘプタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエ
ステル（６２）（（全）cis−１１，１４，１７）−エイコサトリエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（６３）cis−１３−エイコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（６４）（（全）cis−７，１０，１３，１６）ドコサテトラエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル（６５）２２−トリコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエス
テル（６６）９−テトラデシン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエス
テル（６７）１３−エイコシン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエス
テル（６８）１０，１２−ノナコサジイン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプ
ロピルエステル（６９）１０，１２−オクタデカジイン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ
プロピルエステル（７０）９−オクタデシン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエス
テル（７１）１０−ウンデシン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエス
テル（７２）１０，１２−トリコサジイン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプ
ロピルエステル（７３）１０，１２−ペンタコサジイン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ
プロピルエステル（７４）１０，１２−ヘプタコサジイン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ
プロピルエステル（７５）オクタン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（７６）７−メチルオクタン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルア
ミド（７７）７，７−ジメチルオクタン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルアミド（７８）ノナン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（７９）４−メチルノナン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミ
ド（８０）８−メチルノナン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミ
ド（８１）デカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（８２）ウンデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（８３）１０−メチルウンデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピ
ルアミド（８４）ドデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（８５）１１−メチルドデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピル
アミド（８６）トリデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（８７）１２−メチルトリデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピ
ルアミド（８８）テトラデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（８９）１３−メチルテトラデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルアミド（９０）ペンタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（９１）１４−メチルペンタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルアミド（９２）ヘキサデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（９３）１５−メチルヘキサデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルアミド（９４）ヘプタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（９５）１６−メチルヘプタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルアミド（９６）オクタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（９７）１７−メチルオクタデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルアミド（９８）ノナデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（９９）１８−メチルノナデカン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピ
ルアミド（１００）エイコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１０１）１９−メチルエイコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルアミド（１０２）１９−メチルエイコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロ
ピルアミド（１０３）ヘンエイコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミ
ド（１０４）ドコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１０５）トリコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１０６）テトラコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド
（１０７）ヘプタコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド
（１０８）オクタコサン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド
（１０９）トリアコタン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド
（１１０）６−ヘプテン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド
（１１１）trans−９−ヘキサデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１１２）（（全）cis−１１，１４，１７）−エイコサトリエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１１３）（（全）cis−５，８，１１，１４）−エイコサテトラエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１１４）cis−１０−ヘプタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１１５）cis−１０−ノナデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１１６）cis−３，cis−６ノナジエン２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプ
ロピルアミド（１１７）cis−１０−ペンタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１１８）cis−１２−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１１９）cis−１３−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１２０）cis−７−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１２１）cis−８−エイコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１２２）trans−９−テトラデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１２３）cis−９，cis−１２オクタデカジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホ
ノオキシプロピルアミド（１２４）trans−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１２５）cis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１２６）（（全）trans−９，１１，１３，１５）−オクタデカテトラエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１２７）（（全）cis−９，１１，１３，１５）オクタデカテトラエン酸２− ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１２８）cis−１１−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１２９）（（全）cis−１３，１６，１９）−ドコサトリエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１３０）（（全）cis−１３，１６，１９）−ドコサトリエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１３１）（（全）cis−９，１２，１５）−オクタデカトリエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１３２）（（全）cis−８，１１，１４）−エイコサトリエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１３３）trans−１１−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１３４）trans−１３−ドコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１３５）trans−９，trans−１２−オクタデカジエン酸２−ヒドロキシ−３−
ホスホノオキシプロピルアミド（１３６）cis−９−テトラデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１３７）cis−９−ヘキサデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１３８）１０−ウンデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルア
ミド（１３９）cis−１１，cis−１４−エイコサジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホス
ホノオキシプロピルアミド（１４０）cis−１１−エイコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１４１）cis−１５−テトラコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１４２）１１−ドデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミ
ド（１４３）９−デセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１４４）１６−ヘプタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピル
アミド（１４５）（（全）cis−１１，１４，１７）−エイコサトリエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１４６）cis−１３−エイコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１４７）cis−１３，cis−１３−ドコサジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホ
ノオキシプロピルアミド（１４８）（（全）cis−７，１０，１３，１６）−ドコサテトラエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１４９）２２−トリコセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルア
ミド（１５０）９−テトラデシン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルア
ミド（１５１）１３−エイコシン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルア
ミド（１５２）１０，１２−ノナコサジイン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ
プロピルアミド（１５３）１０，１２−オクタデカジイン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキ
シプロピルアミド（１５４）９−オクタデシン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルア
ミド（１５５）１０−ウンデシン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルア
ミド（１５６）１０，１２−トリコサジイン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシ
プロピルアミド（１５７）１０，１２−ペンタコサジイン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキ
シプロピルアミド（１５８）１０，１２−ヘプタコサジイン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキ
シプロピルアミド

【００７４】本発明に記載の化合物の合成に用いることができるいくつかの変法を以下の実
施例に示す、ただし、実施例は本発明の主題を制限するものとして解釈すべきで
ない。化合物の構造を¹Ｈ、³¹Ｐ及び場合により¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトロスコピーを用いて確定した。物質の純度を、Ｃ，Ｈ，Ｎ，Ｐ分析及び薄層クロマトグラ
フィーを用いて測定した。

【００７５】

【実施例】

実施例１ cis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル cis−９−オクタデセン酸２，３−Ｏ−イソプロピリデンプロピルエステル（１）ピリジン１００ml中の２，２−ジメチル−４−ヒドロキシメチルジオキソラン
１５．４ｇ（１１６mmol）の溶液に、室温で８５％塩化オレイン酸４１．２ｇ（
１１６mmol）を滴下して加えた。室温で１２時間後、ピリジンを除去し、残査に
トルエン２×５０mlを加え、蒸発によって濃縮した。残査をジエチルエーテル２
００mlに溶かし、１N ＨＣｌ５０ml及び飽和ＮａＣｌ溶液５０mlで２度抽出し
た。エーテル層をＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮した。残査をヘプタン／エチルアセタート（９：１）を用いるシリカゲルフラッシュカラムで精製し
た。収率：２６．３ｇ（６１％）。

【００７６】 cis−９−オクタデセン酸２，３−ジヒドロキシプロピルエステル（２）上記（１）２４ｇ（６０．５mmol）をＴＨＦ／水（６：１）の混合物中に溶か
し、そして０℃まで冷却した。次に、トリフルオロ酢酸（２４ml）を滴下して加
え、そして混合物を０℃で更に３時間攪拌し、室温まで暖めた。１２時間後、０
℃まで冷却し、そして濃縮アンモニアで中和した。合わせた有機層をＭｇＳＯ₄ で乾燥し、ろ過し、そして乾燥した。残査をヘプタン／エチルアセタート（１：
１）を用いるシリカゲルカラムで精製した。収率：無色油状物について６８％。

【００７７】 cis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−トリフェニルメトキシプロピルエステル（３）ジクロロメタン／ピリジン（１：１）８０ml中の上記（２）の溶液を塩化トリ
フェニルメチル（２７mmol）に滴下して加え、室温で４８時間攪拌した。溶媒を
除去し、残査にトルエン５０mlを２回加え、そして濃縮した。残査を水１００ml
で希釈し、ジクロロメタン５０mlで３回抽出した。合わせた有機層を、冷却５％
ＨＣｌ５０ml、次いで飽和ＮａＣｌ５０ml溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮した。残査をヘプタン／エチルアセタート（５：１）を
用いるシリカゲル上のクロマトグラフィーによって精製した。収率：無色油状物
について８８％。

【００７８】 cis−９−オクタデセン酸２−tert−ブチルジフェニルシリルオキシ−３−トリフェニルメトキシプロピルエステル（４）ＤＭＦ３０ml中の上記（３）（５mmol）の溶液に０℃でイミダゾール（２０mm
ol）を加えた。次いで、この混合物にtert−ブチルジフェニルシリルクロリドを
滴下して加えた。混合物を室温までゆっくりと暖めた。室温で６時間後、これを
氷水に注ぎ、次いでエチルアセタートで抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣ
ｌ溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮した。残査をイソヘキサン／エチルアセタート（９：１）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーに
よって精製した。収率：無色油状物について９５％。

【００７９】 cis−９−オクタデセン酸２tert−ブチルジフェニルシリルオキシ−３−ヒドロキシプロピルエステル（５）ジクロロメタン５０ml中の上記（４）（４．６５mmol）の溶液中に、トリフル
オロ酢酸４mlを、室温でゆっくりと滴下した。３時間後、これを水及び飽和炭酸
水素ナトリウム溶液で洗浄した。合わせた有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮した。残査をイソヘキサン／エチルアセタート（７：１）を用いた
フラッシュクロマトグラフィーによりシリカゲル上で精製した。収率：無色油状
物について５４％。

【００８０】 cis−９−オクタデセン酸２−tert−ブチルジフェニルシリルオキシ−３−ホスホノプロピルエステル（６）テトラヒドロフラン５ml中のオキシ塩化リン（３mmol）の溶液を窒素下０℃ま
で冷却し、そして上記（５）の溶液（２．７５mmol）及びテトラヒドロフラン１
５ml中のピリジン（９．３mmol）を滴下して加えた。混合物を０℃で３０分間攪
拌した。次いで、水３mlを加え、室温で２０時間攪拌した。これを続いて１N ＨＣｌの滴下により酸性にし、エチルアセタート２５mlで３回抽出した。合わせ
た有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮した。残査をエチルアセタート、それからメタノールを用いたクロマトグラフィーによってシリカゲル上で
精製した。収率：無色油状物について７１％。

【００８１】 cis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル上記（６）（１mmol）をジクロロメタン１０mlに溶かし、１％メタノール（me
thanolic）ＮａＯＨ溶液２５mlを加えた。これを室温で２０時間後に濃縮し、そ
して残査を１N ＨＣｌで酸性にした。混合物をエチルアセタートで抽出した。合
わせた有機層をＨ₂Ｏ２０mlで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮
した。残査をメタノールで処理した。収率：無色結晶について７８％。

【００８２】実施例２ cis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド cis−９−オクタデセン酸スクシンイミド（８）ＴＨＦに溶かしたジシクロヘキシルカルボジイミド（２４．１ｇ、１１７mmol
）をＴＨＦ１５０ml中のオレイン酸（３０ｇ、１０６．２mmol）溶液に０℃で加
えた。２０分後、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（１３．５ｇ、１１７mmol）を
混合物に加えた。混合物をゆっくりと室温まで暖めた。室温で１８時間後、０℃
まで冷却し、沈殿を吸引ろ過した。ろ液を濃縮し、そしてエチルアセタート／ヘ
プタン（１：３）を用いるシリカゲルカラムで精製した。収率：無色蝋状物質に
ついて８３％。

【００８３】 cis−９−オクタデセン酸２，３−ジヒドロキシプロピルアミド（９）Ｈ₂Ｏ中の１−アミノ−２，３−プロパンジオール（４．４ｇ、４８．２mmol ）５０mlをアセトニトリル中のcis−９−オクタデセン酸スクシンイミド（１８．３ｇ、４８．２mmol）溶液５０mlに加えた。室温で１２時間攪拌後、アセトニ
トリルを留去し、そして、残査をエチルアセタートで抽出した。合わせた有機層
を飽和ＮａＣｌ溶液で抽出した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮した。残査をイソヘキサンから結晶化した。収率：無色粉末について８７％
。

【００８４】 cis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−トリフェニルメトキシプロピルアミド（１０）ジクロロメタン／ピリジン（１：１）８０ml中の上記（９）の溶液（２８mmol
）にトリフェニルメチルクロリド（３６mmol）を滴下して加え、室温で４８時間
攪拌した。溶媒を除去し、残査にトルエン５０mlを２回加え、濃縮した。残査を
Ｈ₂Ｏ１００mlで希釈し、ジクロロメタン５０mlで３回抽出した。合わせた有機層を、冷却５％ＨＣｌ５０ml、次いで飽和ＮａＣｌ溶液５０mlで洗浄し、Ｍｇ
ＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮した。残査をヘプタン／エチルアセタート（２：１）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。収率：無色油状
物について８１％。

【００８５】 cis−９−オクタデセン酸２−ベンゾイルオキシ−３−トリフェニルメトキシプロピルアミド（１１）ジクロロメタン／ピリジン（１：１）８０ml中の上記（１０）の溶液（２７．
３mmol）に塩化ベンゾイル（３０mmol）を０℃で滴下して加えた。室温までゆっ
くりと暖め、室温で更に４時間攪拌し続けた。次に混合物を濃縮し、トルエン５
０mlを２回加え、次いで濃縮した。残査にＨ₂Ｏ１００mlを加え、ジクロロメタン１００mlで３回抽出した。合わせた有機層を、冷却の５％ＨＣｌ５０ml、次
いで飽和ＮａＣｌ溶液５０mlで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮した。残査をヘプタン／エチルアセタート（３：１）を用いたシリカゲルクロ
マトグラフィーで精製した。収率：無色油状物について８７％。

【００８６】 cis−９−オクタデセン酸２−ベンゾイルオキシ−３−ホスホノオキシプロピル −アミド（１２）ＴＨＦ１０ml（２２mmol）中のオキシ塩化リン溶液（７．１mmol）をテトラヒ
ドロフラン３０ml中の上記（１１）の溶液に窒素下で、滴下により加えた。混合
物を０℃で３０分間攪拌した。次に、水５mlを加え、そして室温で２０時間攪拌
した。混合物に１N ＨＣｌを滴下して加え酸性にし、そしてエチルアセタート５
０mlで３回抽出した；合わせた有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮した。残査を最初にエチルアセタート次いでメタノールを用いたシリカゲルク
ロマトグラフィーに付した。収率：無色油状物について５４％。

【００８７】 cis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルアミド（１３）上記（１２）（１．７６mmol）をジクロロメタン２０mlに溶かし、そして１％
メタノールＮａＯＨ溶液５０mlを加えた。室温で２０時間後、これを濃縮し、そ
して残査を１N ＨＣｌで酸性にした。混合物をエチルアセタート抽出した。合わ
せた有機層をＨ₂Ｏ５０mlで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、そして濃縮し
た。残査をメタノールで処理した。収率：無色結晶について８２％。

【００８８】実施例３式（Ｉ）の化合物を、ＤＮＡ合成試験法を用いる胎児ラット頭頂骨からの造骨
細胞の初代培養で試験した。この実験は、Pfeilschifter et al., Endocrinolog
y 126, 703 (1990)にしたがって実施した。

【００８９】試験明細：ＢｒｄＵ法増殖の代用パラメーターとしてのＤＮＡ合成能力を、Boehringer Mannheim, M
annheim, Germany製の細胞増殖ＥＬＩＳＡ、ＢｒｄＵ（比色分析）を用いて測定
した。

【００９０】胎児ラット頭頂骨からコラゲナーゼを用いる順次消化により、初代造骨細胞を
回収し、こうして５個の細胞フラクションを得た。細胞フラクション３〜５のプ
ールを生体外（in vitro）で培養した。細胞を相対湿度９５％、ＣＯ₂含量５％、及び温度３７℃で培養した。試験物質を１、２又は３回目の細胞継代の培養で
試験した。

【００９１】試験では、試験物質適用の少なくとも９６時間前までに平底マイクロウェルプ
レート（ＭＷＰ）に７×１０³細胞（培養液１００μl中）／ウェルの密度で、細
胞を播種した。このために、５％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）及びペニシリン（１０
０Ｕ／ml）／ストレプトマイシン（０．１mg/ml）を加えたMEM Dulbecco（グルコース４．５ｇ/ｌ添加、ＮａＨＣＯ₃３．７ｇ添加、グルタミン無し）を、培養
液として用いた。

【００９２】培養細胞に試験物質を添加する直前に、培養液を、ＦＣＳの代わりにウシ血清
アルブミン（ＢＳＡ）１mg/mlを含む培地１００μlと交換した。ＢＳＡ含有培養
液に試験物質を所望の濃度で加えた。０．１〜０．２ng/mlの濃度のＴＧＦβ₁（
形質転換成長因子β₁）を陽性対照として含んだ。各（陽性）対照及び試験物質濃度それぞれについて３回の測定を実施した。

【００９３】試験物質を含む培養細胞を２４時間に渡ってインキュベートし、最後の３時間
は、ＢｒｄＵプローブ（１００μM ５−ブロモ−２′−デオキシウリジン溶液１０μlの添加）を加えてインキュベートした。

【００９４】培養期間の終わりに、細胞叢をFixDenat（登録商標）溶液２００μlを用いて室温で３０分間固定し、同時にＤＮＡを変成させた。続いて、固定した細胞叢を
抗−ＢｒｄＵ−ＰＯＤ溶液１００μlで覆い、室温で９０分間インキュベートした。ＰＢＳ溶液２００μlで３回洗浄後、ＭＷＰウェルに基質溶液１００μl（Ｔ
ＭＢ＝テトラメチルベンジジン）を加え、室温で５分間インキュベートした。

【００９５】光学密度をSLT Company製のATTC 340 MTP Readerを用いて測定した（ここで測
定ビーム波長は３７０nm、参照ビーム波長は４９２ｎｍであった）。原データの
記録及び処理は、SLT Company製のソフトウェア“easyWINbasic”を用いて実施した。

【００９６】ＢＳＡ含有培養液のみを与えた細胞培養を評価の対照（１００％）として用い
た。

【００９７】

【表１】

【００９８】式（Ｉ）の化合物を、Ｂａｌｂ／ｃマウスを用いる生体内（in viro）試験モデルでの骨形成刺激作用についても試験した。実験は、Mackie and Trechsel：形質転換増殖因子βによる生体内（in vivo）骨形成の刺激作用：インドメタシンによる、繊維性骨の再構築及び阻害の欠如、Bone 11, 295-300, 1990にしたが
って実施した。

【００９９】

【表２】

【０１００】

【表３】

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１２年４月３日（２０００．４．３）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

【化１】（式中、Ｒ¹は、６〜２４個の炭素原子を有する、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり、ｎは、０〜１２であり、Ｘは、酸素又はＮＨである）のリゾホスファチジル酸誘導体,並びに生理学的に許容し得る、塩、エステル、光学活性形態、ラセマート及び生体内（in vivo）で代謝され、一般式（Ｉ）の化合物をもたらすことができるそれらの誘導体の使
用。

【化２】（式中、Ｒ¹は、６〜２４個の炭素原子を有する、アルケニル又はアルキニルであり、ｎは、０〜１２であり、Ｘは、酸素又はＮＨである）の化合物であるが、化合物、すなわち、（（全）cis−５，８，１１，１４）−エイコサテトラエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル、cis−９，cis−１２
−オクタデカジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル、
（（全）cis−９，１２，１５）−オクタデカトリエン酸２−ヒドロキシ−３− ホスホノオキシプロピルエステル、cis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ− ３−ホスホノオキシプロピルエステル又はエルカ酸２−ヒドロキシ−３−ホスホ
ノオキシプロピルエステルを除く化合物、並びに生理学的に許容し得る、塩、エ
ステル、光学活性形態、ラセマート、及び生体内（in vivo）で代謝され、一般式（Ｉ）の化合物をもたらすことができるそれらの誘導体。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷＦターム(参考） 4C086 AA01 DA34 MA01 MA04 NA14 ZA96 4H050 AA03 AB84

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】骨代謝障害の処置のための薬剤製造における、一般式（Ｉ）【化１】（式中、Ｒ¹は、６〜２４個の炭素原子を有する、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり、ｎは、０〜１２であり、Ｘは、酸素又はＮＨである）のリゾホスファチジル酸誘導体、並びに生理学的に
許容し得る、塩、エステル、光学活性形態、ラセマート及び生体内で代謝され、
一般式（Ｉ）の化合物をもたらすことができるそれらの誘導体の使用。
【請求項２】式（Ｉ）【化２】（式中、Ｒ¹は、６〜２４個の炭素原子を有する、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり、ｎは、０〜１２であり、Ｘは、酸素又はＮＨである）の化合物であるが、化合物、すなわち、（（全）cis−５，８，１１，１４）−エイコサテトラエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル、cis−９，cis−１２
−オクタデカジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル、
（（全）cis−９，１２，１５）−オクタデカトリエン酸２−ヒドロキシ−３− ホスホノオキシプロピルエステル又はcis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ −３−ホスホノオキシプロピルエステルを除き、ただし、Ｘが酸素を表す場合に
は、−（ＣＨ₂)_n−ＣＨ₃基のｎは、７、９、１１、１３又は１５の数を表さない
化合物、並びに生理学的に許容し得る、塩、エステル、光学活性形態、ラセマー
ト、及び生体内で代謝され、一般式（Ｉ）の化合物をもたらすことができるそれ
らの誘導体。
【請求項３】一般的な、担体及び補助剤に加えて請求項２記載の式（Ｉ）
の化合物の少なくとも１種を含む薬剤。
【請求項４】骨代謝障害の処置のための薬剤製造における、請求項２記載
の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項５】式（Ｉ）【化３】（式中、Ｒ¹は、６〜２４個の炭素原子を有する、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり、ｎは、０〜１２であり、Ｘは、酸素又はＮＨである）の化合物であるが、化合物、すなわち、（（全）cis−５，８，１１，１４）−エイコサテトラエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル、cis−９，cis−１２
−オクタデカジエン酸２−ヒドロキシ−３−ホスホノオキシプロピルエステル、
（（全）cis−９，１２，１５）−オクタデカトリエン酸２−ヒドロキシ−３− ホスホノオキシプロピルエステル又はcis−９−オクタデセン酸２−ヒドロキシ −３−ホスホノオキシプロピルエステルを除き、ただし、Ｘが酸素を表す場合に
は、−（ＣＨ₂)_n−ＣＨ₃基のｎは、９、１１、１３又は１５の数を表さない化合
物の少なくとも１種、並びに生理学的に許容し得る、塩、エステル、光学活性形
態、ラセマート、及び生体内で代謝され、一般式（Ｉ）の化合物をもたらすこと
ができるそれらの誘導体を含む薬剤。
【請求項６】骨代謝障害の処置のための薬剤製造における、請求項３記載
の式（Ｉ）の化合物の使用。