【発明の詳細な説明】
ＣＤ８＋細胞の個数を減少させるイプリフラボンの使用
本発明は、活性成分として７−イソプロポキシイソフラボン（イプリフラボン
）を含有する、ＣＤ８＋細胞の個数を減少させるのに適する医薬組成物に関する
ものである。
イプリフラボンは公知の骨粗髭症予防剤である。その製造はハンガリー特許公
報第１６２３７７号および第１９６９８１号に記載されている。生物は２種の基
本的保護機能、すなわち体液および細胞−媒介の免疫反応を有することが知られ
ている。いわゆる細胞媒介の免疫反応は主として、ウィルスまたは細胞内寄生体
、腫瘍細胞、化学改変細胞および外来組織で感染された細胞におけるエンドゲン
抗原に向けられる。
細胞媒介の免疫反応は、いわゆる胸腺依存性（胸腺にて成熟する細胞）リンパ
球（Ｔリンパ球）に関連する。熟成過程が終了すると、２種類のＴリンパ球（そ
の表面マーカーに基づき、明かに区別しうるサブ群）が末梢まで放出される。Ｃ
Ｄ４＋細胞（いわゆるヘルパー細胞）はオキソゲン抗原の提示に際し活性化され
て、そのサイトキン産生を増大させることにより免疫反応を助ける。ＣＤ８＋細
胞（いわゆる細胞毒性細胞）はエン
ドゲン抗原の認識に際し活性化されて、細胞分解により異物と認識される細胞を
破壊する。
末梢リンパ球の約２／３はＣＤ４＋であり、１／３はＣＤ８＋である。これに
対応し、正常のＣＤ４＋／ＣＤ８＋の比は２：１である［アンドラス・ファルス
：イミュノロジー、第１１１〜１３８頁、テンプスＩＴＣ Ｂｐ．／１９９３］
。
細胞毒性の免疫反応は、感染細胞の破壊により病原性作用物質が再生する可能
性を排除するので、細胞内感染の場合に基本的保護メカニズムとなる。同様に、
これは腫瘍細胞の破壊にも重要な役割を有する。これらの場合、細胞毒性の免疫
反応は生物の一体性を保護するよう作用する。
生物に関し細胞毒性の免疫反応が望ましくない或いは有害でさえある場合も知
られている。或る種の自己免疫病の場合、細胞毒性反応は生物の自己細胞に指向
し、その結果として重大な機能障害を生ぜしめる。Ｔ細胞媒介の免疫病の特徴な
例はリューマチ様関節炎である。
病原性の細胞毒性反応は、或る種の形成不全貧血症および慢性活性肝炎の場合
に見ることができる。組織移植もしくは器官移植の後の拒絶反応も細胞毒性免疫
反応に基づいている。特殊
な器官移植（骨髄）の場合、いわゆる「移植体と宿主との関係」も細胞毒性反応
に基づいている。これらの場合、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋の比が減少し、或る種の場
合は主としてＣＤ８＋細胞の増加の結果および少ない割合だがＣＤ４＋細胞の減
少の結果として逆転する。自己免疫病および組織／器官移植の後の拒絶反応の場
合は免疫反応を和らげ、或る種の場合は急激にこれを減少させる（免疫抑制処置
）ことさえ通常の処理法である。免疫抑制処置はＴリンパ球の個数の減少をもた
らすだけでなく、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋細胞比の正常化に対する作用をも有する。
ＣＤ８＋細胞を含有しないアロゲン骨髄移植体の場合、「移植体と宿主との関係」
反応が顕著に低い回数でしか観察しえない。したがって上記病気の場合、ＣＤ８
＋細胞の個数を特異的に減少させる療法が有利であろう。
上記の理論的考察および実際の経験に基づき本発明者等は、細胞媒介免疫反応
の原因となるＴリンパ球およびＣＤ４＋ヘルパ細胞とＣＤ８＋細胞毒性細胞との
個数に対しイプリフラボン処置が有する作用につき検査した。或る種類のリンパ
球およびサブ群を分離するためフロー・サイトメトリーを用いた。臨床試験にお
いて、リンパ球の絶対カウント数および或る種のリン
パ球サブ集団における変化を、毎日４００ｍｇのイプリフラボンの投与量を摂取
した６０名の患者にて試験した。５１名の患者にてリンパ球の絶対カウント数の
緩和または緩徐な減少が観察された。患者の平均リンパ球の絶対カウント数は処
置後に０．８５×１０9／Ｌ（範囲０．２５〜０．８９）であった（正常範囲：
０．９〜３．２２×１０9／Ｌ）。９名の患者にて、リンパ球の平均絶対カウン
ト数は１．８４×１０9／Ｌの正常範囲内であると判明した。リンパ球減少症を
有する５１名の患者において減少はいわゆるＴリンパ球についてのみ特徴的であ
り、これらのうち主としてＣＤ８＋サブ集団につき顕著であった。平均ＣＤ８＋
カウント数は０．０８×109／Ｌ（範囲０．０２〜０．２３）であり、これは０
．３〜１．４４×１０9／Ｌの正常範囲を考慮すれば、かなり顕著な細胞カウン
ト数の減少を示す。正常なリンパ球カウント数を示す９名の患者にて、平均ＣＤ
８＋カウント数は１０．４３×１０9／Ｌ（範囲０．２８〜０．６４）であった
。この数値は正常範囲内であるが、低い方の部分に入り、効果の選択的性質を支
持することが判る。
本発明者等は、イプリフラボン処置の下でＴリンパ球の個数
が平均して６６．６％だけ減少したことを突き止めた。ＣＤ４＋ヘルパーおよび
ＣＤ８＋細胞毒性の各サブ群を考慮すると、平均的減少は顕著に異なった。５０
％のＣＤ４＋ヘルパ細胞の減少に続き、ＣＤ８＋細胞毒性細胞の減少は７７％で
あった。ＣＤ４＋／ＣＤ８＋の比はＣＤ４＋細胞およびＣＤ８＋細胞の異なる個
数を特性化し、これらの比はイプリフラボン処置に際し５：１まで変化した。Ｔ
リンパ球、ＣＤ４＋ヘルパー細胞およびＣＤ８＋細胞毒性細胞の個数の減少、並
びにその比における基本的変化が２つの面で考えられる。慣用の免疫抑制処置の
過程で、細胞個数にて観察された減少はイプリフラボンの場合に経験されるより
も概して少なかった。他の顕著な相違点は、ＣＤ４＋ヘルパー細胞の個数におけ
るよりもＣＤ８＋細胞毒性細胞の個数における一層顕著な減少である。これらの
結果に基づき、イプリフラボンは細胞毒性反応を減少させ或いは特異的に抑制し
うると推定することができる。
本発明の主題はＣＤ８＋細胞の個数を減少させるのに適する医薬組成物であり
、これは活性成分として７−イソプロポキシイソフラボンを適する不活性の固体
もしくは液体キャリヤおよび必要に応じ通常の治療添加剤および助剤と混合して
含むこと
を特徴とする。上記組成物は、ＣＤ８＋リンパ球の選択的抑制が所望される症状
にあるヒトもしくは動物患者の処置につき使用することができる。
本発明による組成物は注射、輸液、カプセル、錠剤、溶液、シロップ、経皮製
剤などの形態で、それ自体公知の方法により作成することができる。
細胞毒性反応の抑制が治療効果を有する病気または症状において、治療価値は
病気の性質、外観および経過にてかなり相違する。したがって、投与量は診断、
リンパ球の初期個数およびＣＤ４＋／ＣＤ８＋細胞の比を知った上で決定せねば
ならない。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION CD8 + USE OF ipriflavone reducing the number of cells contain as active ingredient 7-isopropoxycarbonyl isoflavones (ipriflavone), pharmaceutical compositions suitable to decrease the number of CD8 + cells for Things. Ipriflavone is a known osteoporosis preventive agent. Its manufacture is described in Hungarian Patent Publication Nos. 162377 and 199681. Organisms are known to have two basic protective functions, fluid and cell-mediated immune responses. The so-called cell-mediated immune response is mainly directed at endogen antigens on viruses or intracellular parasites, tumor cells, chemically modified cells and cells infected with foreign tissues. Cell-mediated immune responses involve so-called thymus-dependent (cells that mature in the thymus) lymphocytes (T lymphocytes). At the end of the maturation process, two types of T lymphocytes (subgroups that can be clearly distinguished based on their surface markers) are released to the periphery. CD4 + cells (so-called helper cells) are activated upon presentation of oxogen antigens and assist in the immune response by increasing their cytokin production. CD8 + cells (so-called cytotoxic cells) are activated upon recognition of an endogen antigen, and destroy cells recognized as foreign substances by cytolysis. About 2/3 of peripheral lymphocytes are CD4 + and 1/3 are CD8 +. Correspondingly, the ratio of normal CD4 + / CD8 + is 2: 1 [Andrus Farus: Immunology, pp. 111-138, Tempus ITC Bp. / 1993]. A cytotoxic immune response is a fundamental protective mechanism in the case of intracellular infection, as it eliminates the possibility of regenerating pathogenic agents by destroying infected cells. Similarly, it has an important role in destruction of tumor cells. In these cases, the cytotoxic immune response acts to protect the integrity of the organism. It is also known that cytotoxic immune responses are undesirable or even detrimental to organisms. In some autoimmune diseases, the cytotoxic response is directed at the autologous cells of the organism, resulting in severe dysfunction. A characteristic example of a T cell-mediated immune disease is rheumatoid arthritis. Pathogenic cytotoxic reactions can be seen in the case of certain dysplastic anemias and chronic active hepatitis. Rejection after tissue or organ transplantation is also based on a cytotoxic immune response. In the case of special organ transplants (bone marrow), the so-called "transplant-host relationship" is also based on cytotoxic reactions. In these cases, the ratio of CD4 + / CD8 + is reduced and in some cases reversed mainly as a result of an increase in CD8 + cells and, to a lesser extent, a decrease in CD4 + cells. In the case of autoimmune disease and rejection following tissue / organ transplantation, it is a common treatment to even moderate the immune response and in some cases even to abruptly reduce it (immunosuppressive treatment). Immunosuppressive treatment not only results in a decrease in the number of T lymphocytes, but also has an effect on the normalization of the CD4 + / CD8 + cell ratio. In the case of allogeneic bone marrow transplants that do not contain CD8 + cells, the “relationship between transplant and host” reaction can only be observed at significantly lower times. Therefore, in the case of the above diseases, a therapy that specifically reduces the number of CD8 + cells would be advantageous. Based on the above theoretical considerations and practical experience, we examined the effects of ipriflavone treatment on the number of T lymphocytes and CD4 + helper cells and CD8 + cytotoxic cells responsible for cell-mediated immune responses. . Flow cytometry was used to separate certain types of lymphocytes and subgroups. In clinical trials, changes in absolute lymphocyte counts and certain lymphocyte subpopulations were tested in 60 patients who received a daily dose of 400 mg ipriflavone. In 51 patients, a modest or slow decrease in absolute lymphocyte counts was observed. The absolute lymphocyte count in the patient's mean lymphocytes after treatment was 0.85 × 10 9 / L (range 0.25-0.89) (normal range: 0.9-3.22 × 10 9 / L). . In nine patients, the mean absolute lymphocyte count was found to be within the normal range of 1.84 × 10 9 / L. In 51 patients with lymphopenia, the reduction was characteristic only for so-called T lymphocytes, of which predominantly for the CD8 + subpopulation. The average CD8 + count is 0.08 × 10 9 / L (range 0.02-0.23), which is Considering the normal range of 3 to 1.44 × 10 9 / L, it shows a rather significant reduction in cell counts. In 9 patients with normal lymphocyte counts, the average CD8 + count was 10.43 × 10 9 / L (range 0.28 to 0.64). This figure is within the normal range, but falls in the lower part and is found to support the selective nature of the effect. The inventors have determined that the number of T lymphocytes decreased by an average of 66.6% under ipriflavone treatment. Considering each subgroup of CD4 + helper and CD8 + cytotoxicity, the average reduction was significantly different. Following a 50% reduction in CD4 + helper cells, a reduction in CD8 + cytotoxic cells was 77%. The CD4 + / CD8 + ratio characterizes the different numbers of CD4 + and CD8 + cells, and these ratios varied up to 5: 1 upon ipriflavone treatment. A fundamental change in the number of T lymphocytes, CD4 + helper cells and CD8 + cytotoxic cells, as well as fundamental changes in their ratios, is considered in two ways. During the course of conventional immunosuppressive treatment, the observed decrease in cell number was generally less than that experienced with ipriflavone. Another notable difference is a more pronounced decrease in the number of CD8 + cytotoxic cells than in the number of CD4 + helper cells. Based on these results, it can be assumed that ipriflavone can reduce or specifically suppress the cytotoxic response. The subject of the present invention is a pharmaceutical composition suitable for reducing the number of CD8 + cells, which comprises as an active ingredient 7-isopropoxyisoflavone an inert solid or liquid carrier and, if necessary, conventional therapeutic additives and It is characterized by being mixed with an auxiliary agent. The composition can be used for treating a human or animal patient with a condition in which selective suppression of CD8 + lymphocytes is desired. The compositions according to the invention can be prepared in the form of injections, infusions, capsules, tablets, solutions, syrups, transdermal preparations and the like by methods known per se. In diseases or conditions in which suppression of the cytotoxic response has a therapeutic effect, the therapeutic value varies considerably in the nature, appearance and course of the disease. Therefore, the dosage must be determined with knowledge of the diagnosis, the initial number of lymphocytes and the ratio of CD4 + / CD8 + cells.
【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項
【提出日】平成９年９月１６日（１９９７．９．１６）
【補正内容】
請求の範囲
１．活性成分として治療上活性量の７−イソプロポキシイソフラボンを適する不
活性の固体もしくは液体キャリヤおよび必要に応じ通常の治療添加剤および助剤
と混合して含むことを特徴とするＣＤ８＋細胞の個数を減少させるのに適する医
薬組成物。
２．注射、輸液、カプセル、錠剤、溶液、シロップもしくは経皮製剤として製造
された請求の範囲第１項に記載の組成物。
３．ＣＤ８＋リンパ球の選択的抑制が所望される臨床症状を処置するための薬剤
を製造する際の７−イソプロポキシイソフラボンの使用。
４．ＣＤ８＋リンパ球の選択的抑制が所望される症状にあるヒトもしくは動物患
者を処置するに際し、有効量の７−イソプロポキシイソフラボンを適する不活性
の固体もしくは液体キャリヤおよび必要に応じ通常の治療添加剤および助剤と混
合して投与することを特徴とする処置方法。[Procedure for Amendment] Article 184-8, Paragraph 1 of the Patent Act [Date of Submission] September 16, 1997 (September 16, 1997) [Details of Amendment] Claims 1. Reducing the number of CD8 + cells, characterized in that they contain a therapeutically active amount of 7-isopropoxy isoflavone as active ingredient, mixed with a suitable inert solid or liquid carrier and, if necessary, usual therapeutic additives and auxiliaries. A pharmaceutical composition suitable for 2. The composition according to claim 1, which is manufactured as an injection, infusion, capsule, tablet, solution, syrup or transdermal preparation. 3. Use of 7-isopropoxy isoflavone in the manufacture of a medicament for treating a clinical condition in which selective suppression of CD8 + lymphocytes is desired. 4. In treating a human or animal patient with a condition in which the selective suppression of CD8 + lymphocytes is desired, an effective amount of 7-isopropoxy isoflavone is provided by a suitable inert solid or liquid carrier and, if necessary, conventional therapeutic additives and A method of treatment characterized by administering a mixture with an auxiliary agent.
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(81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，
ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ
Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ
，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，
ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ
Ｚ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ
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ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，Ｈ
Ｕ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ
，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，
ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，Ｒ
Ｏ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ
，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ
(72)発明者 ケレペシ，テレージア
ハンガリー国、ハー−1151・ブダペシユ
ト、タルパイ・テール・12
(72)発明者 バーライ，ジユルジイ
ハンガリー国、ハー−1124・ブダペシユ
ト、タマーシ・アー・ウツツア・42
(72)発明者 タル，アツテイラ
ハンガリー国、ハー−1118・ブダペシユ
ト、ケレンヘジイ・ウツツア・47／ベー────────────────────────────────────────────────── ───
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(81) Designated countries EP (AT, BE, CH, DE,
DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, L
U, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF)
, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE,
SN, TD, TG), AP (KE, LS, MW, SD, S
Z, UG), EA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD
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CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GE, H
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MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, R
O, RU, SD, SE, SG, SI, SK, TJ, TM
, TR, TT, UA, UG, US, UZ, VN
(72) Inventor Kerepesi, Theresia
Hungary, Her-1151 Budapest
G, Talpai Tail 12
(72) Inventors Balalay, Jyurgyi
Hungary, Her-1124 Budapest
G, Tamashia Utsua 42
(72) Inventor Tal, Atsuteira
Hungary, Her-1118 Budapest
G, Kerenhejii Utsua 47 / B