JP2001231541A - Fungus culture media laminate and sheet media - Google Patents
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Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】従来の多孔質マトリックス層を使用しているシ
ート状培地には、真菌用に応用しようとするとき、菌の
生育を観察しにくかったり、生育を確認できるまでに時
間のかかる欠点があった。
【解決手段】多孔質マトリックス層と１〜５層の水溶性
高分子化合物層とを含み、多孔質マトリックス層から最
も離れた側の水溶性高分子化合物層に接して台紙が積層
されていてもよい積層物であって、該水溶性高分子化合
物層にエステラーゼの発色基質および栄養成分が含まれ
ることを特徴とする真菌用培地積層物、およびこの培地
積層物を粘着シートと透明フィルムで挟み密閉可能な構
造を有する真菌用シート状培地。(57) [Problem] To provide a sheet-like medium using a conventional porous matrix layer, when trying to apply it to fungi, it is difficult to observe the growth of the fungus or to confirm the growth. There was a time-consuming disadvantage. The method includes a porous matrix layer and 1 to 5 water-soluble polymer compound layers, and a backing sheet is laminated in contact with the water-soluble polymer compound layer farthest from the porous matrix layer. A good laminate, wherein the water-soluble polymer compound layer contains a chromogenic substrate and a nutrient component of an esterase, and a fungal culture laminate, and the culture laminate is sandwiched between an adhesive sheet and a transparent film and sealed. A sheet-shaped medium for fungi having a possible structure.
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は微生物を培養するた
めの培地に関する。さらに詳しくは食品や環境中の真菌
汚染を判断するための培地に関する。The present invention relates to a medium for culturing microorganisms. More particularly, the present invention relates to a medium for determining fungal contamination in foods and the environment.
【０００２】[0002]
【従来技術】従来の真菌検査方法は次に示すように実施
される。即ち、まず粉末寒天培地を溶解して滅菌した後
ペトリ皿に分注し、冷却固化して表面を乾燥しておく。
食品の懸濁液などの検査試料一定量をあらかじめ作って
おいた寒天培地に塗布し、２５℃で７日目まで培養し
て、生じた微生物のコロニー数を計数する。また、環境
真菌検査は通常、検査対象の一定面積を綿棒またはガー
ゼでふき取り、この綿棒またはガーゼを滅菌水で洗い、
綿棒に付着した菌体を滅菌水に懸濁させる。この懸濁液
をあらかじめ作製しておいた寒天培地に塗布して培養し
た後、生じたコロニーを計数する。このように従来の真
菌検査方法は、前もって培地を調整しておかねばなら
ず、また試料液を培地へ塗布する必要があるなど、非常
に手間と時間がかかる方法である。真菌検査をより簡
便、迅速に行うためには、このような手間と時間のかか
る培地の調製や試料液を塗布する作業が省けることが好
ましい。また、通常、多量のプラスチック製ペトリ皿を
使用するため、培養後多量のプラスチック廃棄物が発生
する。2. Description of the Related Art A conventional fungus inspection method is carried out as follows. That is, a powder agar medium is first dissolved and sterilized, then dispensed into a Petri dish, cooled and solidified, and the surface is dried.
A fixed amount of a test sample such as a food suspension is applied to a previously prepared agar medium, cultured at 25 ° C. until day 7, and the number of colonies of the resulting microorganism is counted. In addition, an environmental fungal test is usually performed by wiping a predetermined area of the test object with a cotton swab or gauze, washing the cotton swab or gauze with sterile water,
The cells attached to the swab are suspended in sterile water. This suspension is applied to an agar medium prepared in advance and cultured, and the resulting colonies are counted. As described above, the conventional fungal inspection method is a very time-consuming and time-consuming method, for example, the medium must be adjusted in advance, and a sample solution must be applied to the medium. In order to perform the fungal test more simply and promptly, it is preferable to omit such labor and time-consuming work of preparing the medium and applying the sample solution. Further, since a large amount of plastic petri dishes are usually used, a large amount of plastic waste is generated after culturing.
【０００３】一方、培地調製の手間を省いた、真菌用の
簡易培地が生産・市販されている。簡易培地を便宜的に
分類すればスタンプタイプ（特開平４−１１７２９
９）、フィルタータイプ、フィルムタイプ（特公平２−
４９７０５、特開平３−１５３７９）等に分けられる。
スタンプタイプはプラスチック容器に寒天培地を盛り上
げた状態で分注した培地で、寒天培地面を直接検査対象
に接触させて検査するものである。この培地は簡便に環
境の微生物汚染を検査するためには使いやすいものであ
るが、培地面積が小さいため定量性に乏しい。また、曲
面や凹凸がある対象の検査に用いることは難しく、通常
の食品検査や環境検査には利用できない欠点もある。ま
たプラスチック容器を使用しているために培養後、多量
のプラスチック廃棄物がでることは従来法と同様であ
る。フィルタータイプは液体試料の検査には適している
が固体を含む試料の検査は難しい。フィルムタイプは食
品の検査には定量性もあり、使いやすいが環境などの検
査をするときにはスタンプタイプのように検査対象に直
接接触して検査することは難しく、かび類では培養によ
り生じた胞子が飛散する危険性がある。[0003] On the other hand, a simple medium for fungi which does not require the preparation of a medium is produced and marketed. If the simple culture medium is classified for convenience, a stamp type (JP-A-4-11729)
9), filter type, film type
49705, JP-A-3-15379) and the like.
The stamp type is a culture medium dispensed in a state in which the agar medium is raised in a plastic container, and the agar medium surface is directly brought into contact with a test object for inspection. This medium is easy to use for easily examining environmental microbial contamination, but is poor in quantitativeness due to the small area of the medium. Moreover, it is difficult to use it for inspection of an object having a curved surface or unevenness, and there is a disadvantage that it cannot be used for ordinary food inspection or environmental inspection. In addition, since a plastic container is used, a large amount of plastic waste is produced after culturing as in the conventional method. The filter type is suitable for testing liquid samples, but difficult to test samples containing solids. The film type has a quantitative property for food inspection, and it is easy to use, but it is difficult to directly contact the inspection target like the stamp type when inspecting the environment, such as the stamp type. There is a risk of splashing.
【０００４】本発明者等は、省スペースで、通常の食品
に加えてふき取りなど様々な用途に使え、廃棄も容易で
定量性のある微生物培養器および微生物培地として、多
孔質マトリックスと水溶性高分子化合物を用いる、シー
ト状もしくはフィルム状の培地をＷＯ９７／２４４３２
において提案した。この培地は次のように機能するもの
である。即ち、試料液を多孔質マトリックス層に添加す
ると、試料液は一旦多孔質マトリックス層に保持され
る。試料液は多孔質マトリックス層中を拡散して広がる
ので試料液を塗布する必要はない。多孔質マトリックス
層に保持された水により多孔質マトリックス層に接した
高分子化合物層が溶解し、高分子化合物層から栄養成分
が溶けだし、微生物の生育分裂が開始される。試料液中
に存在する微生物は、添加直後は多孔質マトリックス層
全体に広がり分布するが、高分子化合物層が徐々に溶解
し高粘度溶液を形成するために高分子化合物層内部まで
には入らず、高分子化合物層が徐々に溶解し多孔質マト
リックス層と一体化する過程で、多孔質マトリックス層
の表面まで押し上げられ、多孔質マトリックス層の表面
にコロニーが形成される。The present inventors have proposed a microbial incubator and a microbial medium that are space-saving and can be used for various purposes such as wiping in addition to ordinary foods, and are easy to dispose of. WO97 / 24432 using a sheet or film medium using a molecular compound
In the proposed. This medium functions as follows. That is, when the sample liquid is added to the porous matrix layer, the sample liquid is once held in the porous matrix layer. Since the sample liquid diffuses and spreads in the porous matrix layer, there is no need to apply the sample liquid. The high molecular compound layer in contact with the porous matrix layer is dissolved by the water retained in the porous matrix layer, the nutrients are dissolved from the high molecular compound layer, and the growth and division of microorganisms are started. Microorganisms present in the sample solution spread and distribute throughout the porous matrix layer immediately after addition, but do not enter the polymer compound layer because the polymer compound layer gradually dissolves to form a high-viscosity solution. During the process in which the polymer compound layer is gradually dissolved and integrated with the porous matrix layer, the polymer compound layer is pushed up to the surface of the porous matrix layer, and colonies are formed on the surface of the porous matrix layer.
【０００５】[0005]
【発明が解決しようとする課題】本発明者等がＷＯ９７
／２４４３２において提案した多孔質マトリックス層と
水溶性高分子化合物層を含むシートまたはフィルム状の
培地は、省スペースで、通常の食品検査に加え、ふき取
りによる環境検査など様々な用途に使え、塗布の手間も
省ける便利な培地であるが、真菌用に応用しようとする
とき、多孔質マトリックス層を使用しているために、酵
母類では有色酵母以外は生育を観察しにくいし、かび類
は培地積層物を粘着シートに接着し、透明フィルムを被
せたとき色素生産が遅れ、生育を確認できるまでに時間
のかかる欠点があった。DISCLOSURE OF THE INVENTION The present inventors disclose WO97
The medium in the form of a sheet or film containing a porous matrix layer and a water-soluble polymer compound layer proposed in / 24432 is space-saving and can be used for various purposes such as environmental inspection by wiping in addition to ordinary food inspection. Although it is a convenient medium that can save labor, it is difficult to observe the growth of yeasts other than colored yeasts because of the use of a porous matrix layer when trying to apply it for fungi, and molds are used for layering the culture medium. When a product is adhered to a pressure-sensitive adhesive sheet and covered with a transparent film, the production of pigment is delayed, and it takes a long time before the growth can be confirmed.
【０００６】[0006]
【課題を解決するための手段】上記の問題点を解決する
ため種々研究した結果、真菌の生育を確認するために真
菌類が普遍的に有しているエステラーゼの発色基質を加
えるとよいことが分かった。これによって、酵母は着色
コロニーを形成し確認が容易となるし、かび類はコロニ
ー周囲が着色し早期に生育が確認できる。本発明の真菌
用シート状培地は、水または栄養成分を含んだ水を加え
ることによって真菌類の生育しうる培地となるものであ
る。As a result of various studies to solve the above-mentioned problems, it has been found that it is advisable to add a chromogenic substrate of esterase, which is commonly possessed by fungi, in order to confirm the growth of fungi. Do you get it. As a result, the yeast forms a colored colony to facilitate confirmation, and the molds can be colored around the colony and the growth can be confirmed at an early stage. The sheet-shaped medium for fungi of the present invention is a medium in which fungi can grow by adding water or water containing nutrients.
【０００７】即ち、本発明は下記のような構成を有す
る。 （１）多孔質マトリックス層と１〜５層の水溶性高分子
化合物層とを含み、多孔質マトリックス層から最も離れ
た側の水溶性高分子化合物層に接して台紙を含んでもよ
い積層物であって、該水溶性高分子化合物層にエステラ
ーゼの発色基質および栄養成分が含まれることを特徴と
する真菌用培地積層物。That is, the present invention has the following configuration. (1) A laminate that includes a porous matrix layer and 1 to 5 water-soluble polymer compound layers, and may include a mount in contact with the water-soluble polymer compound layer farthest from the porous matrix layer. A laminate for a fungus culture, wherein the water-soluble polymer compound layer contains a chromogenic substrate for esterase and a nutrient component.
【０００８】（２）多孔質マトリックス層に接する水溶
性高分子化合物層にエステラーゼの発色基質が含まれる
ことを特徴とする、前記（１）項に記載の真菌用培地積
層物。(2) The fungal culture medium laminate according to the above (1), wherein the water-soluble polymer compound layer in contact with the porous matrix layer contains a chromogenic substrate for esterase.
【０００９】（３）水溶性高分子化合物層が少なくとも
２層であり、多孔質マトリックス層に接する水溶性高分
子化合物層が、目付２〜２０ｇ／ｍ2の水溶性高分子化
合物を含有していることを特徴とする、前記（１）また
は（２）項に記載の真菌用培地積層物。(3) At least two water-soluble polymer compound layers, and the water-soluble polymer compound layer in contact with the porous matrix layer contains a water-soluble polymer compound having a basis weight of 2 to 20 g / m 2. The fungal medium laminate according to the above (1) or (2), wherein
【００１０】（４）水溶性高分子化合物層が少なくとも
３層であり、多孔質マトリックス層から最も離れた側の
水溶性高分子化合物層が水溶性高分子化合物のみからな
る層であることを特徴とする、前記（１）〜（３）のい
ずれか１項に記載の真菌用培地積層物。(4) There are at least three water-soluble polymer compound layers, and the water-soluble polymer compound layer farthest from the porous matrix layer is a layer composed of only the water-soluble polymer compound. The fungal culture medium laminate according to any one of the above (1) to (3).
【００１１】（５）水溶性高分子化合物層に含まれる水
溶性高分子化合物が、鹸化度７５〜９５％、分子量２５
０００〜２５００００のポリビニルアルコールであるこ
とを特徴とする、前記（１）〜（４）のいずれか１項に
記載の真菌用培地積層物。(5) The water-soluble polymer compound contained in the water-soluble polymer compound layer has a saponification degree of 75 to 95% and a molecular weight of 25.
The fungal medium laminate according to any one of the above (1) to (4), which is 2,000 to 250,000 polyvinyl alcohol.
【００１２】（６）多孔質マトリックスとして目付４０
〜１００ｇ／ｍ2、通気度７０〜２４０Ｌ／（ｍ2・ｓｅ
ｃ）のナイロンメルトブロー不織布を用いることを特徴
とする、前記（１）〜（５）のいずれか１項に記載の真
菌用培地積層物。(6) A basis weight of 40 as a porous matrix
-100 g / m 2 , air permeability 70-240 L / (m 2 · se
The fungal culture medium laminate according to any one of (1) to (5), wherein the nylon meltblown nonwoven fabric of c) is used.
【００１３】（７）エステラーゼの発色基質が３−オキ
シインドール、Ｎ−メチル−３−オキシインドール、ベ
ンゼン環に置換基を有する３−オキシインドールまたは
Ｎ−メチル−３−オキシインドールの酢酸もしくは酪酸
エステルであることを特徴とする、前記（１）〜（６）
のいずれか１項に記載の真菌用培地積層物。(7) The esterase chromogenic substrate is 3-oxindole, N-methyl-3-oxindole, 3-oxindole having a substituent on the benzene ring, or acetic acid or butyrate of N-methyl-3-oxindole. (1) to (6),
The fungal culture medium laminate according to any one of the above items.
【００１４】（８）多孔質マトリックス層が水溶性物質
を保持していることを特徴とする、前記（１）〜（７）
のいずれか１項に記載の真菌用培地積層物。(8) The above (1) to (7), wherein the porous matrix layer holds a water-soluble substance.
The fungal culture medium laminate according to any one of the above items.
【００１５】（９）多孔質マトリックス層が保持してい
る水溶性物質の量が０．１〜３ｇ／ｍ 2であることを特
徴とする、前記（８）項に記載の真菌用培地積層物。(9) The porous matrix layer holds
0.1 to 3 g / m of water-soluble substance TwoSpecially
The fungal culture medium laminate according to the above (8), which is a feature.
【００１６】（１０）水溶性物質がペプトン、ポテトエ
キス、麦芽エキス、グルコースまたはこれらの２種以上
の混合物であることを特徴とする、前記（８）または
（９）項に記載の真菌用培地積層物。(10) The fungal medium according to the above (8) or (9), wherein the water-soluble substance is peptone, potato extract, malt extract, glucose or a mixture of two or more thereof. Laminate.
【００１７】（１１）前記（１）〜（１０）のいずれか
１項に記載の培地積層物が、該培地積層物より大きな粘
着シートの中心部に多孔質マトリックス層が上になるよ
うに接着され、その上に該培地積層物より大きな透明フ
ィルムが多孔質マトリックス層に接しかつ該培地積層物
と中心部を合わせるように被せられ、この透明フィルム
の該培地積層物からはみ出している部分が、粘着シート
の該培地積層物によって覆われていない部分と接着され
ていることを特徴とする真菌用シート状培地。(11) The culture medium laminate according to any one of the above (1) to (10) is adhered so that a porous matrix layer is placed on the center of an adhesive sheet larger than the culture medium laminate. A transparent film larger than the culture medium laminate is placed thereon so as to be in contact with the porous matrix layer and align the center with the culture medium laminate, and the portion of the transparent film that protrudes from the culture medium laminate is A sheet-shaped culture medium for fungi, which is adhered to a part of the adhesive sheet that is not covered by the culture medium laminate.
【００１８】（１２）粘着シートがアクリル系粘着剤ま
たはゴム系粘着剤を塗布した、ポリエステルフィルム、
白色ポリエステルフィルム、ポリオレフィン系合成紙ま
たはポリオレフィンラミネート紙であり、透明フィルム
がポリオレフィンフィルムまたは剥離処理ポリオレフィ
ンフィルムであることを特徴とする、前記（１１）項に
記載の真菌用シート状培地。(12) a polyester film, wherein the pressure-sensitive adhesive sheet is coated with an acrylic pressure-sensitive adhesive or a rubber-based pressure-sensitive adhesive;
The sheet-shaped medium for fungi according to the above (11), which is a white polyester film, a polyolefin-based synthetic paper or a polyolefin-laminated paper, and wherein the transparent film is a polyolefin film or a release-treated polyolefin film.
【００１９】（１３）粘着シートの厚さが０．０７〜
０．５ｍｍであり、透明フィルムの厚さが２０〜１００
μｍであることを特徴とする、前記（１１）または（１
２）項に記載の真菌用シート状培地。(13) The pressure-sensitive adhesive sheet has a thickness of 0.07 to 0.07
0.5 mm, and the thickness of the transparent film is 20 to 100
(11) or (1)
2) The fungal sheet medium according to the item 2).
【００２０】（１４）粘着シートと透明フィルムとの接
着部分の一部がこの粘着シートの粘着力より強い粘着力
で接着されていることを特徴とする、前記（１１）〜
（１３）のいずれか１項に記載の真菌用シート状培地。(14) The method according to (11) to (11), wherein a part of the adhesive portion between the adhesive sheet and the transparent film is adhered with an adhesive force stronger than the adhesive force of the adhesive sheet.
The sheet culture medium for fungi according to any one of (13).
【００２１】[0021]
【発明の実施の形態】本発明に使用される多孔質マトリ
ックス層を形成するための材料としては、ナイロン繊
維、ポリアクリロニトリル繊維、ポリビニルアルコール
（ＰＶＡ）繊維、エチレン酢酸ビニル共重合体繊維、ポ
リエステル繊維（親水化処理したポリエステル繊維がよ
り好ましい）、ポリオレフィン繊維（親水化処理したポ
リオレフィン繊維がより好ましい）、及びポリウレタン
繊維等の合成繊維、レーヨン繊維等の半合成繊維、羊毛
（獣毛）、絹、コットン繊維、セルロース繊維、及びパ
ルプ繊維等の天然繊維、ガラス繊維等の無機繊維等が例
示でき、これらの繊維を用いて作られた編織布及び不織
布等の布帛や、上記繊維の構成素材で作られた多孔質フ
ィルムやスポンジなどが使用でき、多孔質セラミックス
も使用できる。これらの中でも目付、通気度の調整が容
易な編織布、不織布等の布帛を用いることが好ましく、
不織布の中でも、さらに比較的容易に細繊維が得られる
メルトブロー製法で作製した不織布や、分割繊維から製
造した極細繊維不織布が特に好ましく用いられる。DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Materials for forming a porous matrix layer used in the present invention include nylon fibers, polyacrylonitrile fibers, polyvinyl alcohol (PVA) fibers, ethylene-vinyl acetate copolymer fibers, and polyester fibers. (Hydrophilized polyester fibers are more preferable), polyolefin fibers (hydrophilic polyolefin fibers are more preferable), synthetic fibers such as polyurethane fibers, semi-synthetic fibers such as rayon fibers, wool (animal hair), silk, Examples thereof include natural fibers such as cotton fibers, cellulose fibers, and pulp fibers, and inorganic fibers such as glass fibers.They include fabrics such as knitted and nonwoven fabrics made using these fibers, and fabrics made of the above fibers. For example, a porous film or sponge can be used, and porous ceramics can also be used. Among these, it is preferable to use a fabric such as a knitted fabric, a nonwoven fabric, or the like, in which the basis weight and air permeability are easily adjusted,
Among the non-woven fabrics, non-woven fabrics produced by a melt-blow manufacturing method, which can obtain fine fibers relatively easily, and ultra-fine fiber non-woven fabrics produced from split fibers are particularly preferably used.
【００２２】上記繊維のうち特に好ましいのは、ナイロ
ン繊維、コットン繊維、セルロース繊維、及びレーヨン
繊維であり、その中でも特にナイロン繊維が好ましく、
さらに細繊度の繊維径となるメルトブロー製法で作製し
た不織布が好ましい。そして、多孔質マトリックス層
は、目付４０〜１００ｇ／ｍ2、通気度７０〜２４０Ｌ
／（ｍ2・ｓｅｃ）であることが好ましい。Among the above fibers, particularly preferred are nylon fibers, cotton fibers, cellulose fibers and rayon fibers, of which nylon fibers are particularly preferred.
Further, a nonwoven fabric produced by a melt-blow manufacturing method having a fine fiber diameter is preferable. The porous matrix layer has a basis weight of 40 to 100 g / m 2 and an air permeability of 70 to 240 L.
/ (M 2 · sec).
【００２３】多孔質マトリックスは必ずしも親水性であ
る必要はないが、親水性の多孔質マトリックスまたは親
水化処理した多孔質マトリックスを用いれば吸水速度が
速くなり、作業の能率が上がる。親水性または親水化処
理した多孔質マトリックスであっても、水溶性物質を保
持させることにより添加した試料液及び微生物の分散性
を更に向上させることができる。多孔質マトリックスに
水溶性物質を保持させる方法としては、その表面に水溶
性物質を塗布して乾燥後または未乾燥のまま用いる方
法、多孔質マトリックスを水溶性物質を含む溶液に浸し
て水溶性物質を含浸させ乾燥後または未乾燥のまま用い
る方法、多孔質マトリックスを水溶性高分子化合物層に
貼り合わせてから乾燥後または未乾燥のままその表面に
水溶性物質を塗布する方法、多孔質マトリックスを水溶
性高分子化合物層に貼り合わせてから乾燥後、水溶性高
分子化合物を溶解しない溶媒による水溶性物質の溶液ま
たは懸濁液を用いて多孔質マトリックス層に水溶性物質
を含浸させ乾燥するなどの方法があり、これらの方法を
適当に組み合わせてもよい。The porous matrix is not necessarily required to be hydrophilic. However, if a hydrophilic porous matrix or a hydrophilized porous matrix is used, the water absorption rate is increased, and the work efficiency is increased. Even in the case of a porous matrix that has been subjected to a hydrophilic or hydrophilic treatment, dispersibility of the added sample liquid and microorganisms can be further improved by retaining a water-soluble substance. As a method of retaining the water-soluble substance in the porous matrix, a method of applying the water-soluble substance to the surface thereof and using it after drying or undried, or immersing the porous matrix in a solution containing the water-soluble substance, Impregnated and dried or undried, using a porous matrix bonded to the water-soluble polymer compound layer, and then drying or undried and applying a water-soluble substance to the surface of the porous matrix. After bonding to the water-soluble polymer compound layer and drying, the porous matrix layer is impregnated with the water-soluble material using a solution or suspension of a water-soluble material in a solvent that does not dissolve the water-soluble polymer compound, and dried. And these methods may be appropriately combined.
【００２４】多孔質マトリックスに保持させる水溶性物
質としては、微生物の生育を妨げないものならばどのよ
うなものでも用いることができるが、水溶性高分子化合
物層に添加する栄養成分、例えばペプトン、ポテトエキ
ス、麦芽エキス、グルコースまたはこれらの２種以上の
混合物が好ましく用いられる。なお、多孔質マトリック
スを水溶性高分子化合物層に貼り合わせてからその表面
に水溶性物質を塗布する場合には、上記水溶性物質を粉
末状で塗布しても良いが、溶液または懸濁液として用い
て塗布し乾燥する方が均一性が得られ好ましい。水溶性
物質を溶液または懸濁液として用いるときの溶媒は、水
溶性物質を溶解または部分溶解し、揮発または蒸発する
ものであればどのようなものでもよいが、水、エタノー
ル、メタノールまたはこれらの混合溶媒が好ましい。As the water-soluble substance retained in the porous matrix, any substance can be used as long as it does not hinder the growth of microorganisms. Nutrient components added to the water-soluble polymer compound layer, for example, peptone, Potato extract, malt extract, glucose or a mixture of two or more thereof is preferably used. When the water-soluble substance is applied to the surface after the porous matrix is attached to the water-soluble polymer compound layer, the water-soluble substance may be applied in a powder form, but may be applied as a solution or a suspension. It is more preferable to apply and dry by using the above as uniformity can be obtained. When the water-soluble substance is used as a solution or a suspension, any solvent may be used as long as it dissolves or partially dissolves the water-soluble substance, and volatilizes or evaporates. Mixed solvents are preferred.
【００２５】水溶性高分子化合物層を形成する水溶性高
分子化合物は、試料液を加えたとき溶解して１×１０-2
Ｐａ・ｓ以上の粘度を示し、微生物の生育を阻害しない
ものなら良い。たとえば、ポリビニルアルコール、セル
ロース誘導体、ポリアクリル酸誘導体、でんぷん誘導
体、蛋白質、蛋白質誘導体、多糖類などが使用できる。
ポリビニルアルコールがより好ましく、鹸化度７５〜９
５％、分子量２５０００〜２５００００のポリビニルア
ルコールが特に好ましい。The water-soluble polymer compound forming the water-soluble polymer compound layer dissolves when the sample solution is added, and becomes 1 × 10 -2.
Any material that exhibits a viscosity of Pa · s or more and does not inhibit the growth of microorganisms may be used. For example, polyvinyl alcohol, cellulose derivatives, polyacrylic acid derivatives, starch derivatives, proteins, protein derivatives, polysaccharides and the like can be used.
Polyvinyl alcohol is more preferred, and has a saponification degree of 75-9.
Particularly preferred is 5% polyvinyl alcohol having a molecular weight of 25,000 to 250,000.
【００２６】培地には微生物の生育を確認するために発
色または蛍光基質を加えておく必要がある。発色または
蛍光剤としては、真菌類が普遍的に有するエステラーゼ
やフォスファターゼの基質や、酸化還元により発色する
テトラゾリウム塩などが使えるが、多孔質マトリックス
層と水溶性高分子化合物層の積層物ではエステラーゼの
発色基質が適している。エステラーゼの基質であればど
のようなものでも使用できるが、蛍光基質は確認に蛍光
ランプを必要とし、易溶性の色素を生じる基質では生じ
た色素が拡散するので確認しにくい。エステラーゼの発
色基質のなかでは、３−オキシインドール、Ｎ−メチル
−３−オキシインドール、ベンゼン環に置換基を有する
３−オキシインドール、またはＮ−メチル−３−オキシ
インドールの酢酸もしくは酪酸エステルが好ましく、１
または２ハロゲン置換３オキシインドールの酢酸もしく
は酪酸エステルが特に好ましい。エステラーゼの発色基
質は食品中のエステラーゼによっても分解されるが、酪
酸エステルは酢酸エステルより食品中のエステラーゼに
よる分解を受け難い傾向にある。発色基質は多孔質マト
リックス層、水溶性高分子化合物層のどこに加えても良
いが、多孔質マトリックス層に接する水溶性高分子化合
物層に加えることが最も効果的である。発色基質を加え
ることにより、酵母類はコロニーおよびコロニー周辺が
着色し、観察しやすくなる。かび類では、色素または胞
子嚢が形成されるより前に、かび類が生育している周辺
部が着色し、かび類の存在をより早く確認できる。It is necessary to add a coloring or fluorescent substrate to the medium in order to confirm the growth of the microorganism. As a coloring or fluorescent agent, a substrate of esterase or phosphatase, which is commonly found in fungi, or a tetrazolium salt that develops color by redox, can be used.However, in a laminate of a porous matrix layer and a water-soluble polymer compound layer, esterase is used. Chromogenic substrates are suitable. Any esterase substrate can be used, but a fluorescent substrate requires a fluorescent lamp for confirmation, and a substrate that produces a readily soluble dye is difficult to confirm because the generated dye diffuses. Among the chromogenic substrates for esterases, 3-oxindole, N-methyl-3-oxindole, 3-oxindole having a substituent on the benzene ring, or acetic acid or butyrate of N-methyl-3-oxindole is preferable. , 1
Alternatively, acetic acid or butyric acid ester of 2-halogen-substituted 3-oxindole is particularly preferred. Esterase chromogenic substrates are also degraded by esterases in foods, butyrate esters tend to be less susceptible to degradation by esterases in foods than acetate esters. The coloring substrate may be added to any of the porous matrix layer and the water-soluble polymer compound layer, but is most effectively added to the water-soluble polymer compound layer in contact with the porous matrix layer. By adding a chromogenic substrate, the yeast is colored in the colony and around the colony, and is easily observed. In molds, before the pigment or sporangia is formed, the surrounding area where the molds grow is colored, and the presence of the molds can be confirmed more quickly.
【００２７】栄養成分は通常真菌用培地に使われている
ポテトエキス、麦芽エキス、酵母エキス、ペプトンまた
はこれらのうちの２種以上の混合物をグルコースと組み
合わせて使ってもよい。また、前述のように細菌の生育
を選択的に抑制するためにクロラムフェニコールなどの
細菌の生育阻害剤を同時に加えることが好ましい。栄養
成分および細菌生育阻害剤の濃度は、通常の真菌用寒天
培地と同程度から２倍程度の濃度の範囲となることが好
ましい。２倍濃度以上に加えてもかまわないが、２倍濃
度以上に加えたとしても加えた効果が現れない。As a nutrient component, potato extract, malt extract, yeast extract, peptone or a mixture of two or more of these, which are usually used in a fungal medium, may be used in combination with glucose. As described above, it is preferable to simultaneously add a bacterial growth inhibitor such as chloramphenicol in order to selectively inhibit the growth of bacteria. The concentrations of the nutrients and the bacterial growth inhibitor are preferably in the range of about the same to about twice that of a normal fungal agar medium. It may be added to a concentration of 2 times or more, but even if it is added to a concentration of 2 times or more, the added effect does not appear.
【００２８】本発明のシート状培地は、多孔質マトリッ
クス層と水溶性高分子化合物層とを含む培地積層物が、
該培地積層物より大きな粘着シートの中心部に多孔質マ
トリックス層が上になるように接着され、その上に該培
地積層物より大きな透明フィルムが多孔質マトリックス
層に接しかつ該培地積層物と中心部を合わせるように被
せられ、この透明フィルムの該培地積層物からはみ出し
ている部分が、粘着シートの該培地積層物によって覆わ
れていない部分と接着されている構造を有するものであ
る。なお、ここでいう中心部は厳密である必要はない
し、場合によっては目的に応じて意図的にずらすことも
あり得る。更に、シート状培地の少なくとも一部分にお
いて、透明フィルムが粘着シートの端からはみ出すよう
に構成することも、透明フィルムの開閉を容易にするた
めに有効である。The sheet-form medium of the present invention comprises a medium laminate comprising a porous matrix layer and a water-soluble polymer compound layer,
The porous matrix layer is adhered to the center of the adhesive sheet larger than the culture medium laminate so that the porous matrix layer is on the top, and a transparent film larger than the culture medium laminate is in contact with the porous matrix layer and is in contact with the culture medium laminate. The transparent film has a structure in which a portion of the transparent film protruding from the culture medium laminate is bonded to a part of the adhesive sheet not covered by the culture medium laminate. Note that the center here does not need to be exact, and may be intentionally shifted depending on the purpose in some cases. Further, it is also effective to make the transparent film protrude from the edge of the adhesive sheet in at least a part of the sheet-shaped medium, in order to facilitate opening and closing of the transparent film.
【００２９】そして、本発明に使用される粘着シートに
使用する粘着剤は微生物の生育を阻害しないものであれ
ばどのようなものでも良いが、作業性を考えると粘着シ
ートと透明フィルムが再接着される限りにおいては、粘
着力は弱いほど好ましい。ゴム系およびアクリル系粘着
剤が好ましく、再剥離タイプおよび微粘着タイプアクリ
ル系粘着剤が特に好ましい。粘着シートのシートもどの
ようなものでも良いが、透明フィルムを剥がしやすくす
るためにはある程度の腰が必要であり、曲面などをふき
取るためには柔軟であることが好ましい。ポリエステル
フィルム、白色ポリエステルフィルム、ポリオレフィン
系合成紙またはポリオレフィンラミネート紙であって、
厚さ０．０７〜０．５ｍｍのものであればこの条件を満
たしている。The pressure-sensitive adhesive used in the pressure-sensitive adhesive sheet used in the present invention may be any pressure-sensitive adhesive as long as it does not inhibit the growth of microorganisms. As far as possible, the weaker the adhesion, the better. Rubber-based and acrylic-based pressure-sensitive adhesives are preferable, and re-peelable and slightly-adhesive-type acrylic pressure-sensitive adhesives are particularly preferable. Any kind of pressure-sensitive adhesive sheet may be used, but a certain amount of stiffness is required to make it easy to peel off the transparent film, and it is preferable that the sheet be flexible to wipe a curved surface or the like. Polyester film, white polyester film, polyolefin synthetic paper or polyolefin laminated paper,
A thickness of 0.07 to 0.5 mm satisfies this condition.
【００３０】透明フィルムも生育を阻害せず、酸素透過
性を有するものであればどのようなものでも良いが、厚
みをもった培地積層物が粘着シートとの間にはいるた
め、柔軟性は必要である。ポリオレフィンフィルムが好
ましく、厚さ２０〜１００μｍのポリプロピレンフィル
ムが特に好ましい。剥がしやすくするために剥離剤処理
を施したものでも良い。The transparent film may be of any type as long as it does not inhibit the growth and has oxygen permeability. However, since the thick medium laminate is interposed between the adhesive sheet and the transparent film, the flexibility is low. is necessary. Polyolefin films are preferred, and polypropylene films having a thickness of 20 to 100 μm are particularly preferred. A material that has been subjected to a release agent treatment to make it easy to peel off may be used.
【００３１】透明フィルムを開けるとき、透明フィルム
は剥がれてもかまわないが、再接着するときには一部が
剥がれずに残っていることが好ましい。ただし、直接ス
タンプまたはふき取りを行うときは、透明フィルムが着
いているとじゃまとなることがあるので、完全に剥がせ
るようにしておく必要もある。粘着フィルムと透明シー
トの接着部分の一部においてその部分の粘着力を残りの
部分より強くすることで、透明フィルムを開けるとき粘
着力を強くした部分で止めることができ、透明フィルム
を外さないで作業ができる。また、粘着力を増しただけ
であるため、必要に応じて完全に剥がすこともできる。
粘着力を増した部分は再接着性はなくても良い。なお、
粘着力を強くした部分以外の少なくとも一部は、透明フ
ィルムが粘着シートより大きく外側にでていることが、
透明フィルムを開けやすく好ましい。When the transparent film is opened, the transparent film may be peeled off, but it is preferable that a part of the transparent film remains without peeling when re-adhering. However, when performing direct stamping or wiping, it may be an obstacle if the transparent film is attached, so it is necessary to be able to completely remove the stamp. By making the adhesive strength of the part of the adhesive part between the adhesive film and the transparent sheet stronger than the remaining part, when opening the transparent film, it can be stopped at the part where the adhesive strength is increased, without removing the transparent film Can work. Further, since the adhesive force is merely increased, it can be completely removed as necessary.
The part having increased adhesive strength may not have re-adhesiveness. In addition,
At least a part other than the part where the adhesive strength is strengthened, that the transparent film is larger than the adhesive sheet and comes out on the outside,
It is preferable because the transparent film can be easily opened.
【００３２】粘着力の強い部分を作る方法として、
（ａ）粘着シートと透明フィルムを粘着シートと透明フ
ィルム間より強い粘着力の別の粘着テープなどにより接
着する、（ｂ）粘着シートと透明フィルムの接着すべき
部分の一部を両面テープにより接着する、（ｃ）粘着シ
ートの一部に粘着力の異なる粘着剤を塗布する、（ｄ）
透明シートの一部に粘着シートと透明フィルム間より強
い粘着力粘着剤を塗布する、または（ｅ）粘着シートと
透明フィルムの接着すべき部分の一部に残りの部分より
強い粘着力の粘着剤を塗布するなどの方法がある。別の
粘着テープで接着するときには粘着シートと透明シート
の接着面をずらし、粘着シートの粘着剤塗布面と透明フ
ィルムの培地積層物に接していない面に、または粘着シ
ートの裏面と透明フィルムの培地積層物に接した面に別
の粘着テープを接着する。または、粘着シートと透明シ
ートをずらさずに別の粘着テープを折り曲げて、粘着シ
ートの裏面と透明フィルムの培地積層物に接していない
面に接着する方法がある。別の粘着テープを折り曲げ
て、粘着シートの裏面と透明フィルムの培地積層物に接
していない面に接着したときには、透明フィルムを開け
たとき、粘着シートの裏面と透明フィルムを接着したま
ま完全に開くことができ便利である。強い粘着力の部分
は残りの部分より粘着力が強ければよいが、粘着力は２
倍以上であることが好ましい。As a method of forming a portion having a strong adhesive force,
(A) The pressure-sensitive adhesive sheet and the transparent film are bonded with another pressure-sensitive adhesive tape having a higher adhesive strength than between the pressure-sensitive adhesive sheet and the transparent film. (B) A part of the portion to be bonded between the pressure-sensitive adhesive sheet and the transparent film is bonded with a double-sided tape. (C) applying an adhesive having a different adhesive strength to a part of the adhesive sheet, (d)
A part of the transparent sheet is coated with a pressure-sensitive adhesive having a stronger adhesive strength between the pressure-sensitive adhesive sheet and the transparent film, or (e) a part of the part of the pressure-sensitive adhesive sheet and the transparent film to be bonded is bonded with a higher pressure than the remaining part. Is applied. When bonding with another adhesive tape, shift the adhesive surface between the adhesive sheet and the transparent sheet, and place it on the adhesive-coated surface of the adhesive sheet and the surface of the transparent film that is not in contact with the laminate, or on the back surface of the adhesive sheet and the transparent film medium. Another adhesive tape is adhered to the surface in contact with the laminate. Alternatively, there is a method in which another pressure-sensitive adhesive tape is bent without shifting the pressure-sensitive adhesive sheet and the transparent sheet, and adhered to the back surface of the pressure-sensitive adhesive sheet and the surface of the transparent film that is not in contact with the culture medium laminate. When another adhesive tape is folded and adhered to the back side of the adhesive sheet and the side of the transparent film that is not in contact with the culture medium laminate, when the transparent film is opened, the back side of the adhesive sheet and the transparent film are completely opened with the adhesive attached Can be convenient. The part with strong adhesive strength should be stronger than the rest, but the adhesive strength is 2
It is preferably at least two times.
【００３３】本発明の真菌用シート状培地のうち、水溶
性高分子化合物層が１層であるものについて、その作製
方法の一例を以下に説明する。まず、ポリエステルフィ
ルムなどの台紙上に、グルコース、酵母エキス、ペプト
ン、麦芽エキス、ポテトエキスまたはこれらの２種以上
の混合物などの栄養成分およびエステラーゼの発色基質
を含む水溶性高分子化合物の水溶液を塗布し半乾燥状態
にする。この上に多孔質マトリックスを貼り合わせて乾
燥する。このとき、水溶性高分子化合物を乾燥後、水ま
たは水溶性物質を含む水で湿らせた多孔質マトリックス
を張り合わせて乾燥しても良いし、乾燥後の多孔質マト
リックス層表面に更に水溶性物質溶液を塗布して乾燥し
てもよい。台紙をはがし、もしくははがさずに適当な大
きさに切断して真菌用培地積層物とする。台紙を剥がさ
ないときは培地積層物の台紙側を、台紙を剥がしたとき
は培地積層物の水溶性高分子化合物層側を、切断した培
地積層物より大きな粘着シートに接着し、その上に透明
フィルムを被せ、培地積層物の周りの粘着シートのはみ
出し部分で接着する。このとき、またはこの後でもよい
が、透明フィルムと粘着シートの接着すべき部分の一部
をずらし、粘着シートと透明フィルム間の粘着力より強
い粘着力の粘着テープを、透明フィルムと粘着シートの
両方にかかるような状態で接着するか、透明フィルムと
粘着シートの接着すべき部分の一部を粘着シートと透明
フィルム間の粘着力より強い粘着力の両面テープで接着
するか、または透明フィルム、粘着シートもしくは両者
の接着すべき部分の一部に他の部分より強い接着力の粘
着剤を塗布して接着するなどの方法により、透明フィル
ムと粘着シートの接着部分の一部における粘着力を他の
部分における粘着力より強くする。そして最後に、エチ
レンオキサイドガス滅菌などの滅菌を施し、真菌用シー
ト状培地とする。An example of a method for preparing a sheet-form medium for fungi of the present invention having a single layer of a water-soluble polymer compound will be described below. First, an aqueous solution of a water-soluble polymer compound containing nutrients such as glucose, yeast extract, peptone, malt extract, potato extract or a mixture of two or more thereof and a chromogenic substrate for esterase is applied on a mount such as a polyester film. And make it semi-dry. A porous matrix is stuck thereon and dried. At this time, after the water-soluble polymer compound is dried, a porous matrix moistened with water or water containing a water-soluble substance may be laminated and dried, or the dried water-soluble substance may be further added to the surface of the dried porous matrix layer. The solution may be applied and dried. Peel the backing sheet or cut it into an appropriate size without peeling to obtain a fungus culture medium laminate. When the backing paper is not removed, the backing side of the culture medium laminate is adhered.When the backing paper is peeled off, the water-soluble polymer compound layer side of the culture laminate is adhered to an adhesive sheet larger than the cut culture paper laminate, and is transparent on it. Cover the film and adhere at the protruding part of the adhesive sheet around the culture medium laminate. At this time or after this, a part of the part to be bonded between the transparent film and the adhesive sheet is shifted, and an adhesive tape having an adhesive strength stronger than the adhesive strength between the adhesive sheet and the transparent film is applied to the transparent film and the adhesive sheet. Glue in such a state that both sides, or glue a part of the part to be glued between the transparent film and the adhesive sheet with a double-sided tape with an adhesive strength stronger than the adhesive strength between the adhesive sheet and the transparent film, or a transparent film, Apply adhesive to the adhesive sheet or a part of the part to be adhered to the transparent film and the adhesive sheet. To be stronger than the adhesive strength at the part. And finally, sterilization such as ethylene oxide gas sterilization is performed to obtain a sheet-shaped medium for fungi.
【００３４】次に、水溶性高分子化合物層が２層である
ものについて、その作製方法の一例を以下に説明する。
ポリエステルフィルムなどの台紙上に、前記栄養成分と
エステラーゼの発色基質の両方または片方を含む水溶性
高分子化合物の水溶液を塗布し乾燥して、最初の水溶性
高分子化合物層とする。次いで、この水溶性高分子化合
物層上に、前記栄養成分およびエステラーゼの発色基質
を含む水溶性高分子化合物の水溶液を塗布し、その上に
多孔質マトリックスを貼り合わせて乾燥する。このと
き、水溶性高分子化合物層を乾燥後、水または水溶性物
質を含む水で湿らせた多孔質マトリックスを張り合わせ
て乾燥しても良いし、乾燥後の多孔質マトリックス層表
面に更に水溶性物質溶液を塗布して乾燥してもよい。台
紙をはがし、もしくははがさずに適当な大きさに切断し
て真菌用培地積層物とし、前記の水溶性高分子化合物層
が１層の場合と同様にして、真菌用シート状培地を作製
する。Next, an example of a manufacturing method for a two-water-soluble polymer compound layer will be described below.
An aqueous solution of a water-soluble polymer compound containing both or one of the nutrient and the esterase coloring substrate is applied on a mount such as a polyester film and dried to form a first water-soluble polymer compound layer. Next, an aqueous solution of the water-soluble polymer compound containing the nutrient and the esterase coloring substrate is applied onto the water-soluble polymer compound layer, and a porous matrix is stuck thereon and dried. At this time, after drying the water-soluble polymer compound layer, a porous matrix moistened with water or water containing a water-soluble substance may be laminated and dried, or the water-soluble polymer layer may be further dried on the surface of the dried porous matrix layer. The substance solution may be applied and dried. Peel the backing sheet or cut it into an appropriate size without peeling it to obtain a fungal culture medium laminate, and prepare a fungal sheet culture medium in the same manner as in the case where the water-soluble polymer compound layer is a single layer. I do.
【００３５】水溶性高分子化合物層が３層であるもの
は、下記の例のように作製する。まず、ポリエステルフ
ィルムなどの台紙上に、水溶性高分子化合物の水溶液を
塗布し、乾燥して最初の水溶性高分子化合物層（Ｃ層）
を形成させる。このＣ層上に前記の栄養成分とエステラ
ーゼの発色基質の両方または片方を含む高分子化合物の
水溶液を塗布し乾燥して、２番目の水溶性高分子化合物
層（Ｂ層）を形成させる。更に、このＢ層上にエステラ
ーゼの発色基質、または前記の栄養成分とエステラーゼ
の発色基質の両方を含む水溶性高分子化合物の水溶液を
塗布してＡ層とし、その上に多孔質マトリックスを貼り
合わせて乾燥する。当然のことながらＡ層およびＢ層の
うちの少なくとも１層が栄養成分を含むようにする必要
がある。なおこのとき、最後の水溶性高分子化合物層を
乾燥後、水または水溶性物質を含む水で湿らせた多孔質
マトリックスを張り合わせて乾燥しても良いし、乾燥後
の多孔質マトリックス層表面に更に水溶性物質溶液を塗
布して乾燥してもよい。台紙をはがし、またははがさず
に適当な大きさに切断して真菌用培地積層物とし、前記
の水溶性高分子化合物層が１層の場合と同様にして、真
菌用シート状培地を作製する。A structure having three water-soluble polymer compound layers is prepared as follows. First, an aqueous solution of a water-soluble polymer compound is applied to a mount such as a polyester film and dried to form a first water-soluble polymer compound layer (C layer).
Is formed. An aqueous solution of a high molecular compound containing both or one of the nutrient component and the esterase coloring substrate is applied on the C layer and dried to form a second water-soluble high molecular compound layer (B layer). Further, an aqueous solution of an esterase coloring substrate or a water-soluble polymer compound containing both the nutrient component and the esterase coloring substrate is applied to the B layer to form an A layer, and a porous matrix is bonded thereon. And dry. Naturally, it is necessary that at least one of the layer A and the layer B contains a nutritional component. At this time, after drying the last water-soluble polymer compound layer, a porous matrix moistened with water or water containing a water-soluble substance may be laminated and dried, or the dried porous matrix layer surface may be dried. Further, a water-soluble substance solution may be applied and dried. Peel the backing sheet or cut it into an appropriate size without peeling it to obtain a fungal medium laminate, and prepare a fungal sheet medium in the same manner as in the case where the water-soluble polymer compound layer is a single layer. I do.
【００３６】なお、水溶性高分子化合物層が３層を越え
る場合については、上記の水溶性高分子化合物層が３層
の場合のＢ層に該当する部分を複数にする場合、Ｃ層に
該当する部分を複数にする場合、またはＢ層に該当する
部分とＣ層に該当する部分を共に複数にする場合がある
が、いずれにしても上記と同様にして作製することがで
きる。しかしながら、あまりに層の数を多くしても工程
の増加に伴うコスト高に見合う効果が得られないので、
水溶性高分子化合物層を５層を越えて重ね合わせてもあ
まり意味がない。なお、当然のことであるが、エステラ
ーゼの発色基質／栄養成分を含む水溶性高分子化合物層
は、多孔質マトリック層に接する層から始まる連続層と
することが好ましく、エステラーゼの発色基質／栄養成
分を含む２層の水溶性高分子化合物層の間に水溶性高分
子化合物のみからなる層を挟むような構成とすること
は、必要成分の有効利用が阻害されるので好ましくな
い。In the case where the number of the water-soluble polymer compound layers exceeds three, if the number of the portions corresponding to the layer B in the case where the number of the water-soluble polymer compound layers is three is plural, the portion corresponding to the layer C is considered. In some cases, a plurality of portions may be provided, or in both a portion corresponding to the layer B and a portion corresponding to the layer C, a plurality of portions may be provided. However, if the number of layers is too large, the effect corresponding to the cost increase due to the increase in the number of steps cannot be obtained.
It does not make much sense to superimpose more than five water-soluble polymer compound layers. Needless to say, it is preferable that the layer of the water-soluble polymer compound containing the chromogenic substrate / nutritional component of the esterase be a continuous layer starting from the layer in contact with the porous matrix layer. It is not preferable to sandwich a layer made of only a water-soluble polymer compound between two water-soluble polymer compound layers containing the compound, because the effective use of necessary components is hindered.
【００３７】水溶性高分子化合物層が２層以上のとき
は、多孔質マトリックス層に接する水溶性高分子化合物
層は、水溶性高分子化合物目付が２〜２０ｇ／ｍ2であ
ることが好ましい。２０ｇ／ｍ2を越えると試料液の吸
水・分散性、高分子化合物の溶解性などに好ましくない
影響が出てくるし、２ｇ／ｍ2未満では溶液濃度が低く
なるため層を形成させにくくなるし、また多孔質マトリ
ックスが接着されにくくなるという問題点が生じる。ま
た、水溶性高分子化合物層を形成させるに際しては、細
菌の生育を選択的に阻害する目的で、クロラムフェニコ
ールなどの細菌生育阻害剤を加えることが好ましい。When there are two or more water-soluble polymer compound layers, the water-soluble polymer compound layer in contact with the porous matrix layer preferably has a weight per unit area of 2 to 20 g / m 2 . If it exceeds 20 g / m 2 , the water absorption and dispersibility of the sample solution and the solubility of the polymer compound will be undesirably affected. If it is less than 2 g / m 2 , the solution concentration will be low, making it difficult to form a layer. In addition, there is a problem that the porous matrix is hardly adhered. When forming the water-soluble polymer compound layer, it is preferable to add a bacterial growth inhibitor such as chloramphenicol for the purpose of selectively inhibiting the growth of bacteria.
【００３８】なお、各水溶性高分子化合物層の層間、お
よび台紙として用いたフィルムを剥がさないときは水溶
性高分子化合物層とフィルムとの間は密着していること
が好ましく、水溶性高分子化合物層と多孔質マトリック
ス層は少なくとも一部は接着していることが好ましい。
また、接着された粘着シートと透明フィルムの端部には
隙間のないことが好ましい。従って、場合によっては培
地積層物を粘着シートに接着せず、袋に入れるなどして
培地としても良い。When the water-soluble polymer compound layer and the film used as the backing paper are not peeled off, it is preferable that the water-soluble polymer compound layer and the film are in close contact with each other. Preferably, the compound layer and the porous matrix layer are at least partially adhered.
In addition, it is preferable that there is no gap between the bonded adhesive sheet and the end of the transparent film. Therefore, in some cases, the culture medium may be placed in a bag instead of being adhered to the pressure-sensitive adhesive sheet to form a culture medium.
【００３９】本発明の真菌用シート状培地を使用するに
当たっては、以下のような方法が採用できる。食品など
に滅菌水を加えホモジナイズした懸濁液、または食品製
造環境などをガーゼまたは綿棒などで拭き取り滅菌水に
懸濁した懸濁液などを適宜希釈して試料液とする。真
菌用シート状培地の透明フィルムを粘着力を強くした部
分まで開け、前記の懸濁液または希釈液を培地積層物に
加え、透明フィルムを再び被せて、２５℃で培養するこ
とによって微生物を生育させる。真菌用シート状培地
の透明フィルムを粘着力を強くした部分まで開け、滅菌
水を培地積層物に加えておき、試料液をろ過したフィル
ターを培地積層物上に乗せ、再び透明フィルムを被せ
て、２５℃で培養することによって微生物を生育させ
る。真菌用シート状培地の透明フィルムを粘着力を強
くした部分まで開けるか、または完全に剥がし、滅菌水
を培地積層物に加えてそのまま放置し落下菌を捕集す
る。そのまままたは滅菌水を加えた後、再び透明フィル
ムを被せて、２５℃で培養することによって微生物を生
育させる。In using the fungal sheet medium of the present invention, the following method can be adopted. A suspension prepared by adding sterilized water to food or the like and homogenized, or a suspension prepared by wiping the food production environment or the like with a gauze or a cotton swab or the like is appropriately diluted to prepare a sample liquid. Open the transparent film of the sheet-form medium for fungi to the part where the adhesive strength is increased, add the above suspension or diluent to the medium stack, cover the transparent film again, and grow the microorganism by culturing at 25 ° C. Let it. Open the transparent film of the sheet-shaped medium for fungus to the part where the adhesive strength is increased, add sterile water to the medium laminate, put the filter that filtered the sample solution on the medium laminate, cover the transparent film again, The microorganism is grown by culturing at 25 ° C. The transparent film of the fungal sheet medium is opened or completely peeled off to the portion where the adhesive strength is increased, and sterilized water is added to the culture medium laminate and left as it is to collect falling bacteria. As it is or after adding sterile water, the microorganism is grown by covering the transparent film again and culturing at 25 ° C.
【００４０】真菌用シート状培地の透明フィルムを粘
着力を強くした部分まで開けるか、または完全に剥がし
て、滅菌水を培地積層物に加え、多孔質マトリックス側
を検査対象に直接スタンプし、または検査対象面を直接
ふき取り、そのまままたは滅菌水を加えた後、再び透明
フィルムを被せて、２５℃で培養することによって微生
物を生育させる。湿った面を検査するときには培地積
層物をあらかじめ湿らせる必要はなく、そのままふき取
るかスタンプし、そのまままたは滅菌水を加えた後、透
明フィルムを被せて、２５℃培養することによって微生
物を生育させる。The transparent film of the sheet-form medium for fungi is opened or completely peeled off to the portion where the adhesive strength is increased, sterilized water is added to the medium laminate, and the porous matrix side is directly stamped on the test object, or The surface to be inspected is directly wiped, and as it is or after adding sterilized water, a transparent film is put on again, and the microorganism is grown by culturing at 25 ° C. When examining the wet surface, it is not necessary to wet the medium laminate in advance, and the microorganism is grown by wiping or stamping the medium as it is or after adding sterile water, covering with a transparent film, and culturing at 25 ° C.
【００４１】このように本発明の真菌用シート状培地
は、通常の食品や環境の検査に加え、検査対象に直接接
触および検査対象面を直接ふき取って検査もできること
を特徴とする。直接接触または直接ふき取って検査する
ときは検査対象が曲面や多少の凹凸があるものでも検査
できる。粘着シートと透明フィルムを密着でき、また、
高粘度溶液によってかび類の胞子は接着しているため、
カバーを開いたとしてもかび類の胞子が飛散する危険性
はない。また、培地積層物を用いて同様な操作を行い、
袋に入れるなどして乾燥を防ぐ措置を施し培養しても良
い。このとき、使用する袋は酸素透過性の高い、ポリオ
レフィン袋が適している。As described above, the sheet medium for fungi of the present invention is characterized in that, in addition to ordinary food and environmental tests, it can also be tested by directly contacting the test object and directly wiping the surface of the test object. When performing inspection by direct contact or direct wiping, inspection can be performed even on an inspection object having a curved surface or some unevenness. Adhesive sheet and transparent film can be adhered,
Mold spores are adhered by the high viscosity solution,
There is no danger of mold spores flying even if the cover is opened. In addition, the same operation was performed using the medium laminate,
The cells may be placed in a bag or the like to prevent drying and then cultured. At this time, the bag to be used is preferably a polyolefin bag having high oxygen permeability.
【００４２】水溶性高分子化合物層を多層にするときは
すべての層にエステラーゼの発色基質や栄養成分を加え
てもよいが、例えば３層とする場合であれば、多孔質マ
トリックス層に接する側からＡ層、Ｂ層、Ｃ層としたと
き、Ｃ層は水溶性高分子化合物だけからなる層であるこ
とが好ましい。試料液を多孔質マトリックス層に添加す
ると、試料液は一旦多孔質マトリックス層に保持され
る。多孔質マトリックス層に保持された水により、まず
最初に多孔質マトリックス層に接したＡ層、続いてＢ
層、Ｃ層が溶解して、水溶性高分子化合物層から栄養成
分が溶けだし、微生物の生育分裂が開始される。試料液
中の微生物は、添加された後最上面の多孔質マトリック
ス層全体に広がり分布するが、水溶性高分子化合物層が
徐々に溶解し高粘度溶液を形成するために、水溶性高分
子化合物層内部までは入らない。そして、水溶性高分子
化合物層が徐々に溶解して多孔質マトリックス層と一体
化する過程で、微生物は多孔質マトリックス層の表面ま
で押し上げられ、多孔質マトリックス層の表面にコロニ
ーが形成され、微生物のエステラーゼにより発色基質が
分解されて着色する。コロニーが表面に形成されるた
め、多孔質マトリックスを用いているにもかかわらず微
生物の計数が不正確となることはないが、高粘度溶液で
あるために、栄養成分等の溶液内での拡散速度が遅いた
め、Ｃ層に加えた栄養成分等は微生物にほとんど利用さ
れない。栄養成分等をＡおよびＢ層だけに加えれば、栄
養成分等は多孔質マトリックスに近い部分、即ち、微生
物の近傍に存在するため、同量の栄養成分等が３層の水
溶性高分子化合物層全体に分布しているときに比べ、微
生物は栄養成分等を取り込みやすく、生育がはやくな
る。When the water-soluble polymer compound layer is formed into multiple layers, a coloring substrate or a nutrient component of esterase may be added to all the layers. For example, when three layers are used, the side in contact with the porous matrix layer may be added. When the layers A, B, and C are used, the layer C is preferably a layer composed of only a water-soluble polymer compound. When the sample liquid is added to the porous matrix layer, the sample liquid is once held in the porous matrix layer. Due to the water retained in the porous matrix layer, the A layer which first contacts the porous matrix layer, and then the B layer
The nutrients are dissolved from the water-soluble polymer compound layer, and the growth and division of microorganisms are started. Microorganisms in the sample solution are spread and distributed throughout the uppermost porous matrix layer after being added, but since the water-soluble polymer compound layer gradually dissolves to form a high-viscosity solution, the water-soluble polymer compound It does not enter inside the layer. Then, in the process of gradually dissolving the water-soluble polymer compound layer and integrating with the porous matrix layer, microorganisms are pushed up to the surface of the porous matrix layer, and colonies are formed on the surface of the porous matrix layer, The chromogenic substrate is decomposed and colored by the esterase. Although colonies are formed on the surface, the count of microorganisms does not become inaccurate despite the use of a porous matrix.However, because of the high viscosity solution, the diffusion of nutrients and other components in the solution is not possible. Since the speed is low, nutrients and the like added to the C layer are hardly used by microorganisms. If the nutrients are added only to the layers A and B, the nutrients are present in a portion close to the porous matrix, that is, in the vicinity of the microorganism, so that the same amount of the nutrients is contained in the three water-soluble polymer compound layers. Microorganisms tend to take in nutrient components and the like, and grow faster than when they are distributed throughout.
【００４３】Ａ層は、前述のように、試料液の吸水・分
散性、高分子化合物の溶解性などから、水溶性高分子化
合物の含有量を目付２０ｇ／ｍ2以下とすることが好ま
しいが、Ｂ、Ｃ層は作業性に問題が生じない範囲であれ
ばどのような比率であっても良い。しかしながら、前述
のように、水溶性高分子化合物は溶解して高粘度溶液と
なり微生物を多孔性マトリックス層表面に押し上げる役
目を担っているので、その供給源であるＣ層は、水溶性
高分子化合物の目付で割合を計算するとき、水溶性高分
子化合物層全体の２０％以上であることが好ましく、よ
り好ましくは４０％以上である。従って、粘度の高い溶
液を均一に塗布する際の作業性を考慮すれば、前記のＣ
層に該当する部分を複数にしなければならない場合もあ
り得る。この値の上限については、機能の点からは特に
制限はないが、必要以上の水溶性高分子化合物を用いる
ことに意味はないので、経済的観点および作業性を考慮
すると８０％を越えるようにすることには問題がある。
なお、水溶性高分子化合物だけの層を加えることは、高
分子化合物水溶液を加熱乾燥するとき、栄養成分等の熱
分解、熱変成を考慮する必要がなく、乾燥温度を上げる
ことができるので、作業の短時間化、効率化を図ること
ができるという利点もある。As described above, the content of the water-soluble polymer compound in the layer A is preferably 20 g / m 2 or less from the viewpoint of water absorption / dispersibility of the sample solution and solubility of the polymer compound. , B and C layers may have any ratio as long as there is no problem in workability. However, as described above, the water-soluble polymer compound dissolves into a high-viscosity solution and plays a role of pushing microorganisms to the surface of the porous matrix layer. When the ratio is calculated based on the basis weight, it is preferably 20% or more, more preferably 40% or more of the whole water-soluble polymer compound layer. Therefore, considering the workability in uniformly applying a high-viscosity solution, the above C
In some cases, it may be necessary to provide a plurality of portions corresponding to the layers. The upper limit of this value is not particularly limited from the point of function, but it does not make sense to use an excessive amount of a water-soluble polymer compound, so that it exceeds 80% in consideration of economic viewpoint and workability. There is a problem with doing so.
In addition, adding a layer of only a water-soluble polymer compound, when heating and drying the polymer compound aqueous solution, it is not necessary to consider thermal decomposition and thermal denaturation of nutrient components and the like, so that the drying temperature can be increased, There is also an advantage that work can be shortened and efficiency can be improved.
【００４４】[0044]
【実施例】次に実施例をあげて本発明を詳細に説明する
が、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。Next, the present invention will be described in detail with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.
【００４５】実施例１ 水０．３Ｌに鹸化度８９％、分子量８３０００のポリビ
ニルアルコール３５ｇを加え加熱溶解後、厚み２０μｍ
で０．５ｍ×１ｍのポリエステルフィルム上にすべて塗
布し、１２０℃で６分間乾燥した。得られた最初の水溶
性高分子化合物層の上に、前記のポリビニルアルコール
１５ｇ、酵母エキス１．２ｇ、グルコース４．５ｇ、お
よびクロラムフェニコール０．３７５ｇを水０．２５Ｌ
に溶解して得た溶液をすべて塗布し、１１０℃で７分間
乾燥して第２の水溶性高分子化合物層を形成させた。こ
の第２の層の上に、前記のポリビニルアルコール５ｇ、
酵母エキス０．４ｇ、グルコース１．５ｇ、クロラムフ
ェニコール０．１２５ｇおよび酢酸５−ブロモインドキ
シル０．０３ｇを水０．１Ｌに溶解して得た溶液をすべ
て塗布し、その上に目付６５ｇ／ｍ2、通気度１１０Ｌ
／（ｍ2・ｓｅｃ）のナイロンメルトブロー不織布を貼
り合わせて、１００℃で３０秒間乾燥した。ペプトン２
０ｇを水１Ｌに溶解し、６０メッシュ四角錐グラビアロ
ールを用いて不織布上に塗布し、１００℃で２０秒間乾
燥した。このようにして得られた積層物を直径５５ｍｍ
の円形に切断し、８０ｍｍ×９０ｍｍに切断した０．１
ｍｍ厚の白色ポリエステル粘着シート（リンテック
（株）製、アクリル系微粘着タイプの粘着剤が塗布され
た粘着シート）の中央部に接着した後、厚み６０μｍの
８０ｍｍ×９０ｍｍポリプロピレンフィルムを９０ｍｍ
方向が５ｍｍずれるように粘着シートに接着し、バック
シーリングテープ（（株）共和製、９ｍｍ巾）をずらし
た部分を覆うように接着して、エチレンオキサイドガス
滅菌を行い、真菌用シート状培地を作製した。Example 1 35 g of polyvinyl alcohol having a degree of saponification of 89% and a molecular weight of 83,000 was added to 0.3 L of water and dissolved by heating.
Was applied onto a 0.5 m × 1 m polyester film, and dried at 120 ° C. for 6 minutes. On the obtained first water-soluble polymer compound layer, 15 g of the polyvinyl alcohol, 1.2 g of yeast extract, 4.5 g of glucose, and 0.375 g of chloramphenicol were added to 0.25 L of water.
Was applied and dried at 110 ° C. for 7 minutes to form a second water-soluble polymer compound layer. On this second layer, 5 g of the polyvinyl alcohol,
A solution obtained by dissolving 0.4 g of yeast extract, 1.5 g of glucose, 0.125 g of chloramphenicol and 0.03 g of 5-bromoindoxyl acetate in 0.1 L of water was all applied, and a basis weight of 65 g was applied thereon. / M 2 , air permeability 110L
/ (M 2 · sec) nylon melt-blown non-woven fabric was laminated and dried at 100 ° C. for 30 seconds. Peptone 2
0 g was dissolved in 1 L of water, applied to a non-woven fabric using a 60 mesh square pyramid gravure roll, and dried at 100 ° C. for 20 seconds. The thus obtained laminate is 55 mm in diameter.
0.1 mm cut into a circle of 80 mm x 90 mm
After adhering to the center of a white polyester adhesive sheet having a thickness of mm (manufactured by Lintec Co., Ltd., an adhesive sheet coated with an acrylic fine adhesive type adhesive), an 80 mm × 90 mm polypropylene film having a thickness of 60 μm was subjected to 90 mm.
Adhesion is applied to the adhesive sheet so that the direction is shifted by 5 mm, and back sealing tape (manufactured by Kyowa Co., Ltd., 9 mm width) is adhered so as to cover the shifted part, and ethylene oxide gas sterilization is performed to prepare a sheet-shaped medium for fungi did.
【００４６】比較例１ 水０．３Ｌに鹸化度８９％、分子量８３０００のポリビ
ニルアルコール３５ｇを加え加熱溶解後、厚み２０μｍ
の０．５ｍ×１ｍポリエステルフィルム上にすべて塗布
し、１２０℃で６分間乾燥した。得られた最初の水溶性
高分子化合物層の上に、前記のポリビニルアルコール１
５ｇ、酵母エキス１．２ｇ、グルコース４．５ｇおよび
クロラムフェニコール０．３７５ｇを水０．２５Ｌに溶
解した溶液すべてを塗布し、１１０℃で７分間乾燥して
第２の水溶性高分子化合物層を形成させた。この第２の
層の上に、前記のポリビニルアルコール５ｇ、酵母エキ
ス０．４ｇ、グルコース１．５ｇおよびクロラムフェニ
コール０．１２５ｇを水０．１Ｌに溶解した溶液すべて
を塗布し、その上に目付６５ｇ／ｍ2、通気度１１０Ｌ
／（ｍ2・ｓｅｃ）のナイロンメルトブロー不織布を貼
り合わせ、１００℃で３０秒間乾燥した。次いで、ペプ
トン２０ｇを水１Ｌに溶解し、６０メッシュ四角錐グラ
ビアロールを用いてその溶液を不織布上に塗布し、１０
０℃で２０秒間乾燥した。得られた積層物を用い、実施
例１と同様にして真菌用シート状培地を作製した。Comparative Example 1 To 0.3 L of water was added 35 g of polyvinyl alcohol having a degree of saponification of 89% and a molecular weight of 83,000, and dissolved by heating.
Was applied onto a 0.5 m × 1 m polyester film of the above, and dried at 120 ° C. for 6 minutes. On the obtained first water-soluble polymer compound layer, the polyvinyl alcohol 1
5 g, 1.2 g of yeast extract, 4.5 g of glucose, and 0.375 g of chloramphenicol in 0.25 L of water were all applied, dried at 110 ° C. for 7 minutes, and dried to form a second water-soluble polymer compound. A layer was formed. On this second layer, a solution prepared by dissolving 5 g of the polyvinyl alcohol, 0.4 g of yeast extract, 1.5 g of glucose, and 0.125 g of chloramphenicol in 0.1 L of water was applied. Weight 65g / m 2 , air permeability 110L
/ (M 2 · sec) of a nylon melt-blown non-woven fabric, and dried at 100 ° C. for 30 seconds. Next, 20 g of peptone was dissolved in 1 L of water, and the solution was applied on a nonwoven fabric using a 60-mesh square pyramid gravure roll.
Dry at 0 ° C. for 20 seconds. Using the obtained laminate, a sheet-shaped culture medium for fungi was prepared in the same manner as in Example 1.
【００４７】実施例２ 食品および保冷倉庫から分離した酵母およびかび類の胞
子を滅菌水で数〜数１０ｃｆｕ／ｍＬとなるように希釈
して、実施例１および比較例１で作製した真菌用シート
状培地に１ｍＬずつ加え、２５℃で培養した。酵母は比
較例１の培地では赤色酵母以外は生育を確認できなかっ
たが、実施例１の培地では培養１〜２日後に暗青色のス
ポットとして生育が確認された。かび類は、比較例１の
培地では早い場合で３日後に、かび類が生産する色素で
着色したコロニーが観察される菌株もあったが、多くの
菌株では生育が確認できるまでに４日〜５日以上を要
し、色素が生産されず非常に観察しにくい菌株もあっ
た。実施例１の培地では多くの菌株は２日後には暗青色
のスポットが観察され、コロニーの発現が遅い菌株でも
３日後には暗青色のスポットが観察された。Example 2 A fungal sheet prepared in Example 1 and Comparative Example 1 was prepared by diluting yeast and mold spores separated from food and a cold storage warehouse with sterile water to a concentration of several to several tens cfu / mL. 1 mL was added to the solid medium, and the cells were cultured at 25 ° C. In the medium of Comparative Example 1, the growth of yeast except red yeast could not be confirmed, but in the medium of Example 1, growth was confirmed as a dark blue spot after 1 to 2 days of culture. In the case of the mold of Comparative Example 1, some strains showed colonies colored with the pigment produced by the mold as early as 3 days after the culture of Comparative Example 1, but in many strains the growth was confirmed from 4 days to 4 days. Some strains required more than 5 days and did not produce any pigment, making them very difficult to observe. In the medium of Example 1, dark blue spots were observed in many strains after 2 days, and dark blue spots were observed after 3 days in strains with slow colony expression.
【００４８】実施例３ カット野菜、総菜などの多くの食品各１０ｇを滅菌済袋
に入れ、１００ｍＬの滅菌水を加えてストマッカーでホ
モジナイズした試料と、多くの場所について約１００ｃ
ｍ2の範囲を滅菌水に浸した滅菌綿棒でふき取り１０ｍ
Ｌの滅菌水に懸濁した試料を作成した。これらの試料に
ついて滅菌水で１０倍希釈列を作製し、真菌用シート状
培地のポリプロピレンフィルムをバックシーリングテー
プを接着した部分まで開いて懸濁液または希釈した懸濁
液１ｍＬを加えた後、再度ポリプロピレンフィルムで被
せ、２５℃で２〜５日間培養した。同時に、あらかじめ
作製しておいたクロラムフェニコール添加ポテトデキス
トロース寒天培地に、上記の懸濁液または希釈した懸濁
液０．２ｍＬを加えコーンラージ棒で塗布して、２５℃
で２〜６日間培養して、生育菌数を測定比較した。その
結果を希釈前の試料についての菌数に換算して示したの
が図１〜４であるが、非常によい相関を示しており、真
菌汚染検査用の微生物培地として十分使用に耐えること
が分かった。Example 3 10 g of many foods such as cut vegetables and delicatessen foods were put in sterilized bags, 100 mL of sterilized water was added thereto, and the sample was homogenized with a stomacher.
10m wiped off with a sterile cotton swab soaked the range of m 2 in sterile water
A sample suspended in L sterile water was prepared. A 10-fold dilution series was prepared for these samples with sterile water, and the polypropylene film of the sheet medium for fungi was opened to the portion where the back sealing tape was adhered, and 1 mL of the suspension or diluted suspension was added. The cells were covered with a polypropylene film and cultured at 25 ° C for 2 to 5 days. At the same time, 0.2 mL of the above suspension or diluted suspension was added to a previously prepared chloramphenicol-added potato dextrose agar medium, and the mixture was applied with a corn large rod, and the temperature was 25 ° C.
And cultured for 2 to 6 days. Figs. 1 to 4 show the results in terms of the number of bacteria in the sample before dilution, which show a very good correlation, and can be sufficiently used as a microorganism medium for fungal contamination inspection. Do you get it.
【００４９】[0049]
【発明の効果】本発明の真菌用シート状培地を用いるこ
とにより、食品や環境の真菌汚染検査が簡便に行えるよ
うになった。通常の食品や環境検査に加え、曲面や多少
の凹凸のある面でも直接検査対象をスタンプまたはふき
取って検査することもできる。また、薄いため培養に場
所をとらず、廃棄物も通常の微生物検査に比べ大幅に減
少する。The use of the fungal sheet medium of the present invention makes it possible to easily perform a fungal contamination test on foods and the environment. In addition to ordinary food and environmental inspections, it is also possible to directly inspect or wipe off inspection targets on curved or slightly uneven surfaces. In addition, because it is thin, it does not take up much space for cultivation, and the amount of waste is greatly reduced as compared with ordinary microbial tests.
【図１】ポテトデキストロース寒天培地との比較（培養
２日）FIG. 1. Comparison with potato dextrose agar medium (2 days of culture)
【図２】ポテトデキストロース寒天培地との比較（培養
３日）FIG. 2 Comparison with potato dextrose agar medium (3 days of culture)
【図３】ポテトデキストロース寒天培地との比較（培養
４日）FIG. 3 Comparison with potato dextrose agar medium (4 days of culture)
【図４】ポテトデキストロース寒天培地との比較（培養
５日）FIG. 4 Comparison with potato dextrose agar medium (5 days of culture)
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き Ｆターム(参考） 4B029 AA07 AA08 BB06 CC02 CC09 FA01 FA11 GA08 GB09 4B063 QA01 QA18 QQ07 QQ16 QQ18 QR66 QR69 QR85 QS07 QS28 QX01 4B065 AA57X AC14 BB13 BC31 CA27 CA46 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page F term (reference) 4B029 AA07 AA08 BB06 CC02 CC09 FA01 FA11 GA08 GB09 4B063 QA01 QA18 QQ07 QQ16 QQ18 QR66 QR69 QR85 QS07 QS28 QX01 4B065 AA57X AC14 BB13 BC31 CA27 CA46
Claims (14)
高分子化合物層とを含み、多孔質マトリックス層から最
も離れた側の水溶性高分子化合物層に接して台紙を含ん
でもよい積層物であって、該水溶性高分子化合物層にエ
ステラーゼの発色基質および栄養成分が含まれることを
特徴とする真菌用培地積層物。1. A laminate comprising a porous matrix layer and 1 to 5 water-soluble polymer compound layers, and optionally including a mount in contact with the water-soluble polymer compound layer farthest from the porous matrix layer. A culture medium laminate for fungi, wherein the water-soluble polymer compound layer contains a chromogenic substrate for esterase and a nutrient component.
子化合物層にエステラーゼの発色基質が含まれることを
特徴とする、請求項１に記載の真菌用培地積層物。2. The fungal culture medium laminate according to claim 1, wherein the water-soluble polymer compound layer in contact with the porous matrix layer contains a chromogenic substrate for esterase.
あり、多孔質マトリックス層に接する水溶性高分子化合
物層が、目付２〜２０ｇ／ｍ2の水溶性高分子化合物を
含有していることを特徴とする、請求項１または２に記
載の真菌用培地積層物。3. The water-soluble polymer compound layer is at least two layers, and the water-soluble polymer compound layer in contact with the porous matrix layer contains a water-soluble polymer compound having a basis weight of 2 to 20 g / m 2 . The fungal culture medium laminate according to claim 1 or 2, characterized in that:
あり、多孔質マトリックス層から最も離れた側の水溶性
高分子化合物層が水溶性高分子化合物のみからなる層で
あることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に
記載の真菌用培地積層物。4. The method according to claim 1, wherein the water-soluble polymer compound layer is at least three layers, and the water-soluble polymer compound layer furthest away from the porous matrix layer is a layer composed of only the water-soluble polymer compound. The fungal culture medium laminate according to any one of claims 1 to 3.
分子化合物が、鹸化度７５〜９５％、分子量２５０００
〜２５００００のポリビニルアルコールであることを特
徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の真菌用
培地積層物。5. The water-soluble polymer compound contained in the water-soluble polymer compound layer has a saponification degree of 75 to 95% and a molecular weight of 25,000.
The culture medium laminate for fungi according to any one of claims 1 to 4, which is a polyvinyl alcohol of up to 250,000.
０ｇ／ｍ2、通気度７０〜２４０Ｌ／（ｍ2・ｓｅｃ）の
ナイロンメルトブロー不織布を用いることを特徴とす
る、請求項１〜５のいずれか１項に記載の真菌用培地積
層物。6. A porous matrix having a basis weight of 40 to 10
0 g / m 2, nylon melt is characterized by using a blow nonwoven fabric, fungal medium laminate according to any one of claims 1 to 5 air permeability 70~240L / (m 2 · sec) .
ドール、Ｎ−メチル−３−オキシインドール、ベンゼン
環に置換基を有する３−オキシインドールまたはＮ−メ
チル−３−オキシインドールの酢酸もしくは酪酸エステ
ルであることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１
項に記載の真菌用培地積層物。7. The chromogenic substrate of the esterase is 3-oxindole, N-methyl-3-oxindole, 3-oxindole having a substituent on the benzene ring or acetic acid or butyrate of N-methyl-3-oxindole. 7. The method according to claim 1, wherein
13. The fungal culture medium laminate according to item 8.
していることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１
項に記載の真菌用培地積層物。8. The method according to claim 1, wherein the porous matrix layer holds a water-soluble substance.
13. The fungal culture medium laminate according to item 8.
性物質の量が０．１〜３ｇ／ｍ2であることを特徴とす
る、請求項８に記載の真菌用培地積層物。9. The fungal culture medium laminate according to claim 8, wherein the amount of the water-soluble substance held by the porous matrix layer is 0.1 to 3 g / m 2 .
麦芽エキス、グルコースまたはこれらの２種以上の混合
物であることを特徴とする、請求項８または９に記載の
真菌用培地積層物。10. The water-soluble substance is peptone, potato extract,
The laminate for a fungal medium according to claim 8 or 9, which is malt extract, glucose or a mixture of two or more thereof.
培地積層物が、該培地積層物より大きな粘着シートの中
心部に多孔質マトリックス層が上になるように接着さ
れ、その上に該培地積層物より大きな透明フィルムが多
孔質マトリックス層に接しかつ該培地積層物と中心部を
合わせるように被せられ、この透明フィルムの該培地積
層物からはみ出している部分が、粘着シートの該培地積
層物によって覆われていない部分と接着されていること
を特徴とする真菌用シート状培地。11. The culture medium laminate according to any one of claims 1 to 10, wherein the culture medium laminate is adhered to a central portion of an adhesive sheet larger than the culture medium laminate so that a porous matrix layer faces upward. A transparent film larger than the culture medium laminate is covered so as to be in contact with the porous matrix layer and align the center with the culture medium laminate, and the portion of the transparent film protruding from the culture medium laminate is the adhesive film. A sheet-shaped culture medium for fungi, which is adhered to a part not covered by the culture medium laminate.
ム系粘着剤を塗布した、ポリエステルフィルム、白色ポ
リエステルフィルム、ポリオレフィン系合成紙またはポ
リオレフィンラミネート紙であり、透明フィルムがポリ
オレフィンフィルムまたは剥離処理ポリオレフィンフィ
ルムであることを特徴とする、請求項１１に記載の真菌
用シート状培地。12. The pressure-sensitive adhesive sheet is a polyester film, a white polyester film, a polyolefin-based synthetic paper or a polyolefin laminated paper coated with an acrylic pressure-sensitive adhesive or a rubber-based pressure-sensitive adhesive, and the transparent film is a polyolefin film or a release-treated polyolefin film. The sheet-shaped culture medium for fungi according to claim 11, which is characterized in that:
ｍであり、透明フィルムの厚さが２０〜１００μｍであ
ることを特徴とする、請求項１１または１２に記載の真
菌用シート状培地。13. The pressure-sensitive adhesive sheet has a thickness of 0.07 to 0.5 m.
m, and the thickness of the transparent film is from 20 to 100 μm.
の一部がこの粘着シートの粘着力より強い粘着力で接着
されていることを特徴とする、請求項１１〜１３のいず
れか１項に記載の真菌用シート状培地。14. The adhesive sheet according to claim 11, wherein a part of an adhesive portion between the adhesive sheet and the transparent film is adhered with an adhesive force stronger than the adhesive force of the adhesive sheet. The sheet-shaped medium for fungi according to the above.
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000193819A JP2001231541A (en) | 1999-12-17 | 2000-06-28 | Fungus culture media laminate and sheet media |
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| Country | Link |
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| JP (1) | JP2001231541A (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004070032A1 (en) * | 2003-02-07 | 2004-08-19 | National Institute Of Agrobiological Sciences | Method of preparing template dna to be used in polymerase chain reaction from microbial cells |
| JP2006025608A (en) * | 2004-07-12 | 2006-02-02 | Chisso Corp | Microbial culture medium |
-
2000
- 2000-06-28 JP JP2000193819A patent/JP2001231541A/en active Pending
Cited By (3)
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|---|---|---|---|---|
| WO2004070032A1 (en) * | 2003-02-07 | 2004-08-19 | National Institute Of Agrobiological Sciences | Method of preparing template dna to be used in polymerase chain reaction from microbial cells |
| JP2006025608A (en) * | 2004-07-12 | 2006-02-02 | Chisso Corp | Microbial culture medium |
| US7141387B2 (en) | 2004-07-12 | 2006-11-28 | Chisso Corporation | Microorganism culture medium |
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