JP2001194369A - 中枢神経系作用薬のスクリーニング方法及びストレス状態の評価方法 - Google Patents
中枢神経系作用薬のスクリーニング方法及びストレス状態の評価方法Info
- Publication number
- JP2001194369A JP2001194369A JP2000325071A JP2000325071A JP2001194369A JP 2001194369 A JP2001194369 A JP 2001194369A JP 2000325071 A JP2000325071 A JP 2000325071A JP 2000325071 A JP2000325071 A JP 2000325071A JP 2001194369 A JP2001194369 A JP 2001194369A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- central nervous
- nervous system
- blood
- mammal
- concentration
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【解決手段】 免疫系に異常のある哺乳動物に対して被
験化合物を投与し、該動物の血中インターロイキン６濃
度を測定することを特徴とする中枢神経系作用薬のスク
リーニング方法及びストレス状態の評価方法。 【効果】 中枢神経系に作用する薬物を広く且つ簡易に
スクリーニングすることができ、新規な中枢神経作用薬
の開発及び副作用として中枢作用を有する薬物のスクリ
ーニング並びに免疫系に異常のある哺乳動物のストレス
状態の評価が可能になった。
験化合物を投与し、該動物の血中インターロイキン６濃
度を測定することを特徴とする中枢神経系作用薬のスク
リーニング方法及びストレス状態の評価方法。 【効果】 中枢神経系に作用する薬物を広く且つ簡易に
スクリーニングすることができ、新規な中枢神経作用薬
の開発及び副作用として中枢作用を有する薬物のスクリ
ーニング並びに免疫系に異常のある哺乳動物のストレス
状態の評価が可能になった。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、中枢神経系作用薬
をスクリーニングするための方法及び免疫系に異常のあ
る哺乳動物のストレス状態を評価する方法に関する。
をスクリーニングするための方法及び免疫系に異常のあ
る哺乳動物のストレス状態を評価する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、動物を用いて中枢神経系に作用す
る化合物をスクリーニングとする方法としては、例え
ば、抗てんかん薬評価のための最大電撃けいれん（ＭＥ
Ｓ）法及びしきい値法（ＰＴＺ法）、抗うつ薬評価のた
めの強制水泳試験、抗不安薬評価のための抗コンフリト
試験、脳機能改善薬評価のための抗ハイポキシア試験、
抗痴呆薬評価のための電気痙攣ショック誘発健忘モデル
及びシクロヘキシミド誘発健忘モデルを用いる方法が挙
げられ、正常動物又は病態モデル動物に薬物を投与する
ことにより各種の中枢神経薬がスクリーニングされてい
る。
る化合物をスクリーニングとする方法としては、例え
ば、抗てんかん薬評価のための最大電撃けいれん（ＭＥ
Ｓ）法及びしきい値法（ＰＴＺ法）、抗うつ薬評価のた
めの強制水泳試験、抗不安薬評価のための抗コンフリト
試験、脳機能改善薬評価のための抗ハイポキシア試験、
抗痴呆薬評価のための電気痙攣ショック誘発健忘モデル
及びシクロヘキシミド誘発健忘モデルを用いる方法が挙
げられ、正常動物又は病態モデル動物に薬物を投与する
ことにより各種の中枢神経薬がスクリーニングされてい
る。
【０００３】斯かる中枢神経系作用薬をスクリーニング
するための評価系は、殆どが行動観察によるものであ
り、ダブルブラインドを組み合わせて評価しなければな
らないことが多く、また、いずれも客観的に薬物を評価
できるものではなかった。また、上記のように薬理作用
に応じた中枢神経系作用薬のスクリーニング方法は多数
存在するものの、薬理作用に関係なく中枢神経系作用薬
を広くスクリーニングする方法についてはこれまでに知
られていない。一方、ストレス関連生体内物質として、
カテコールアミン類およびそれらの代謝物、ステロイド
ホルモン類等が知られており、これらの濃度を測定し、
ストレス状態の指標とすることができる。しかし、それ
らは共存する測定妨害物質の影響を受けやすいため、必
ずしも満足できるものではない。
するための評価系は、殆どが行動観察によるものであ
り、ダブルブラインドを組み合わせて評価しなければな
らないことが多く、また、いずれも客観的に薬物を評価
できるものではなかった。また、上記のように薬理作用
に応じた中枢神経系作用薬のスクリーニング方法は多数
存在するものの、薬理作用に関係なく中枢神経系作用薬
を広くスクリーニングする方法についてはこれまでに知
られていない。一方、ストレス関連生体内物質として、
カテコールアミン類およびそれらの代謝物、ステロイド
ホルモン類等が知られており、これらの濃度を測定し、
ストレス状態の指標とすることができる。しかし、それ
らは共存する測定妨害物質の影響を受けやすいため、必
ずしも満足できるものではない。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、中枢神経に
作用する薬物を広く且つ簡易にスクリーニングするため
の方法及び免疫系に異常のある哺乳動物のストレス状態
を評価する新たな指標を提供することを目的とする。
作用する薬物を広く且つ簡易にスクリーニングするため
の方法及び免疫系に異常のある哺乳動物のストレス状態
を評価する新たな指標を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者は，斯かる状況
の下、血中インターロイキン−６（以下、「ＩＬ−６」
という）の濃度と中枢神経作用の相関関係について鋭意
検討した結果、免疫系に異常のあるモデル動物におい
て、ある薬物投与後短時間の間に炎症等の免疫異常に基
づく症状変化とは無関係に血中ＩＬ−６濃度が変化し、
これを指標とすることにより、中枢神経系作用薬を簡易
にスクリーニングできること及び血中ＩＬ−６濃度の変
化がストレス状態の指標となることを見出し、本発明を
完成するに至った。
の下、血中インターロイキン−６（以下、「ＩＬ−６」
という）の濃度と中枢神経作用の相関関係について鋭意
検討した結果、免疫系に異常のあるモデル動物におい
て、ある薬物投与後短時間の間に炎症等の免疫異常に基
づく症状変化とは無関係に血中ＩＬ−６濃度が変化し、
これを指標とすることにより、中枢神経系作用薬を簡易
にスクリーニングできること及び血中ＩＬ−６濃度の変
化がストレス状態の指標となることを見出し、本発明を
完成するに至った。
【０００６】即ち、本発明は、免疫系に異常のある哺乳
動物に対して被験化合物を投与し、該動物の血中ＩＬ−
６濃度を測定することを特徴とする中枢神経系作用薬の
スクリーニング方法及び免疫系に異常のある哺乳動物の
血中ＩＬ−６濃度を測定することにより免疫系に異常の
ある哺乳動物のストレス状態を評価する方法を提供する
ものである。
動物に対して被験化合物を投与し、該動物の血中ＩＬ−
６濃度を測定することを特徴とする中枢神経系作用薬の
スクリーニング方法及び免疫系に異常のある哺乳動物の
血中ＩＬ−６濃度を測定することにより免疫系に異常の
ある哺乳動物のストレス状態を評価する方法を提供する
ものである。
【０００７】
【発明の実施の形態】本発明のスクリーニング方法及び
ストレス状態の評価方法は、免疫系に異常のあるモデル
動物を用いて、血中ＩＬ−６濃度を測定することを特徴
とするものである。
ストレス状態の評価方法は、免疫系に異常のあるモデル
動物を用いて、血中ＩＬ−６濃度を測定することを特徴
とするものである。
【０００８】ＩＬ−６は、単球、Ｔ細胞、Ｂ細胞、血管
内皮細胞、線維芽細胞、骨芽細胞等種々の細胞から産生
され、Ｂ細胞の抗体産生細胞への分化誘導、肝細胞から
の急性期蛋白質合成誘導、脳神経系細胞の分化誘導、造
血系細胞の増殖分化誘導、破骨細胞の分化誘導等の多様
な生理活性作用を有するサイトカインであるが（実験医
学、７巻、１号、１９８９年）、近年、ＩＬ−６が急性
相蛋白を誘導することが報告され炎症マーカーとして有
用であることが示唆され、更に開心術症例における検討
から、炎症の初期に血中ＩＬ−６が上昇し、ＩＬ−６を
炎症マ−カ−とすることにより初期の炎症を感度よく把
握できる可能性が示唆されている（臨床病理、４２巻、
１１号、１１５１−１１５７頁、１９９４年）。また、
最近では慢性関節リウマチ患者において、笑うことによ
り、血中ＩＬ−６濃度が低下することが報告されている
（ジャ−ナル・オブ・リウマトロジ−（Journal of Rhe
umatology）、２３巻、４号、793−794頁、1996年）。
内皮細胞、線維芽細胞、骨芽細胞等種々の細胞から産生
され、Ｂ細胞の抗体産生細胞への分化誘導、肝細胞から
の急性期蛋白質合成誘導、脳神経系細胞の分化誘導、造
血系細胞の増殖分化誘導、破骨細胞の分化誘導等の多様
な生理活性作用を有するサイトカインであるが（実験医
学、７巻、１号、１９８９年）、近年、ＩＬ−６が急性
相蛋白を誘導することが報告され炎症マーカーとして有
用であることが示唆され、更に開心術症例における検討
から、炎症の初期に血中ＩＬ−６が上昇し、ＩＬ−６を
炎症マ−カ−とすることにより初期の炎症を感度よく把
握できる可能性が示唆されている（臨床病理、４２巻、
１１号、１１５１−１１５７頁、１９９４年）。また、
最近では慢性関節リウマチ患者において、笑うことによ
り、血中ＩＬ−６濃度が低下することが報告されている
（ジャ−ナル・オブ・リウマトロジ−（Journal of Rhe
umatology）、２３巻、４号、793−794頁、1996年）。
【０００９】しかし、免疫系に異常のある哺乳動物にお
いて、ＩＬ−６と中枢作用全般について詳細に検討され
た報告はこれまでになく、該哺乳動物の血中ＩＬ−６濃
度が、催眠作用、解熱作用、鎮痛作用、脳機能改善作用
等の作用を有する中枢神経系作用薬によって著しく減少
することは全く予期することができなかった事実であ
る。
いて、ＩＬ−６と中枢作用全般について詳細に検討され
た報告はこれまでになく、該哺乳動物の血中ＩＬ−６濃
度が、催眠作用、解熱作用、鎮痛作用、脳機能改善作用
等の作用を有する中枢神経系作用薬によって著しく減少
することは全く予期することができなかった事実であ
る。
【００１０】本スクリーニング方法においては、免疫系
に異常のある哺乳動物が使用される。ここで、「免疫系
に異常のある」とは、炎症等によって免疫系が亢進した
状態をいい、自己免疫疾患を発症した状態が挙げられ
る。自己免疫疾患としては、慢性関節リウマチ等の慢性
炎症疾患が挙げられ、本スクリーニング方法においては
特に関節炎が好ましい。また、当該自己免疫疾患は、特
定の手段により誘発させたものでも、自然発症型の自己
免疫疾患であってもよい。
に異常のある哺乳動物が使用される。ここで、「免疫系
に異常のある」とは、炎症等によって免疫系が亢進した
状態をいい、自己免疫疾患を発症した状態が挙げられ
る。自己免疫疾患としては、慢性関節リウマチ等の慢性
炎症疾患が挙げられ、本スクリーニング方法においては
特に関節炎が好ましい。また、当該自己免疫疾患は、特
定の手段により誘発させたものでも、自然発症型の自己
免疫疾患であってもよい。
【００１１】自己免疫疾患の誘導手段としては、アジュ
バントあるいは化学物質を接種する方法、トランスジェ
ニック動物の使用、移植及び遺伝子ノックアウト等が挙
げられる。アジュバントを接種して免疫異常を誘発し、
関節炎を発症させる方法としては、例えば、結核死菌を
流動パラフィンに懸濁し、ラットの尾根部皮内に接種す
る方法（アルツナイミッテル−フォ−シュング／ドラッ
グリサ−チ（Arzneim.-Forsch./Drug Res.）、42巻、2
号、935-944頁、1992年）等が挙げられる。また、自然
発症型の免疫異常を有する動物としては、例えば、MRL
／lprマウス等が挙げられる。
バントあるいは化学物質を接種する方法、トランスジェ
ニック動物の使用、移植及び遺伝子ノックアウト等が挙
げられる。アジュバントを接種して免疫異常を誘発し、
関節炎を発症させる方法としては、例えば、結核死菌を
流動パラフィンに懸濁し、ラットの尾根部皮内に接種す
る方法（アルツナイミッテル−フォ−シュング／ドラッ
グリサ−チ（Arzneim.-Forsch./Drug Res.）、42巻、2
号、935-944頁、1992年）等が挙げられる。また、自然
発症型の免疫異常を有する動物としては、例えば、MRL
／lprマウス等が挙げられる。
【００１２】免疫系に異常のある哺乳動物に更にストレ
ス負荷を与えることにより、血中ＩＬ−６濃度を有効に
上げることができる。斯かるストレス負荷としては、心
理的ストレス及び／または物理的ストレス等の如何なる
方法を用いてもよいが、例えば、強制水泳、強い光や音
の照射、拘束、水浸拘束、過密飼育、電気ショック、低
温及び／または高温等が挙げられる。
ス負荷を与えることにより、血中ＩＬ−６濃度を有効に
上げることができる。斯かるストレス負荷としては、心
理的ストレス及び／または物理的ストレス等の如何なる
方法を用いてもよいが、例えば、強制水泳、強い光や音
の照射、拘束、水浸拘束、過密飼育、電気ショック、低
温及び／または高温等が挙げられる。
【００１３】上記哺乳動物としては、ヒト以外の哺乳動
物が挙げられ、好ましくは、マウス及びラット等のげっ
歯類が挙げられる。本発明スクリーニング方法において
用いられる好ましいモデル動物としては、関節炎を発症
したヒト以外の哺乳動物、特にマウス及びラット等のげ
っ歯類が挙げられ、更にそれらがストレス負荷された状
態である場合が好ましい。
物が挙げられ、好ましくは、マウス及びラット等のげっ
歯類が挙げられる。本発明スクリーニング方法において
用いられる好ましいモデル動物としては、関節炎を発症
したヒト以外の哺乳動物、特にマウス及びラット等のげ
っ歯類が挙げられ、更にそれらがストレス負荷された状
態である場合が好ましい。
【００１４】本発明スクリーニング方法で評価される中
枢系作用薬としては、例えば、麻酔作用、催眠作用、鎮
静作用、解熱作用、鎮痛作用、抗抑欝作用、脳機能改善
作用又は抗（向）精神神経作用等を有する化合物のスク
リーニングに適している。
枢系作用薬としては、例えば、麻酔作用、催眠作用、鎮
静作用、解熱作用、鎮痛作用、抗抑欝作用、脳機能改善
作用又は抗（向）精神神経作用等を有する化合物のスク
リーニングに適している。
【００１５】また、血中のＩＬ−６濃度を測定するに
は、例えば、採取した血液あるいは血液から分離した血
漿又は血清を使用し、全血中、血漿中又は血清中のＩＬ
−６濃度をＲＩＡ法、ＥＩＡ法、ＥＬＩＳＡ法、バイオ
アッセイ法等通常用いられる方法により測定すればよ
い。
は、例えば、採取した血液あるいは血液から分離した血
漿又は血清を使用し、全血中、血漿中又は血清中のＩＬ
−６濃度をＲＩＡ法、ＥＩＡ法、ＥＬＩＳＡ法、バイオ
アッセイ法等通常用いられる方法により測定すればよ
い。
【００１６】本発明スクリーニング方法は、具体的に
は、（１）免疫系に異常のある哺乳動物に無毒性量の化
合物を経口又は非経口に投与し、（２）ストレスが負荷
されない又は負荷された一定時間後の血液を採取し、
（３）血液中のＩＬ−６濃度を測定することにより実施
できる。特に、炎症を惹起された哺乳動物に被験化合物
を投与し、ストレス負荷により血中ＩＬ−６の誘導が見
られるストレス負荷の至適時間後に血液を採取し、血中
ＩＬ−６濃度を測定することが好ましい。尚、血中のＩ
Ｌ−６濃度の比較は、同一群を用いてもよいし、化合物
投与群及び非投与群で比較してもよい。この様に測定さ
れた血中ＩＬ−６の濃度を被験化合物の投与前後で比較
し、その濃度が低下した場合に、被験化合物が中枢神経
系作用薬であると判断することができる。
は、（１）免疫系に異常のある哺乳動物に無毒性量の化
合物を経口又は非経口に投与し、（２）ストレスが負荷
されない又は負荷された一定時間後の血液を採取し、
（３）血液中のＩＬ−６濃度を測定することにより実施
できる。特に、炎症を惹起された哺乳動物に被験化合物
を投与し、ストレス負荷により血中ＩＬ−６の誘導が見
られるストレス負荷の至適時間後に血液を採取し、血中
ＩＬ−６濃度を測定することが好ましい。尚、血中のＩ
Ｌ−６濃度の比較は、同一群を用いてもよいし、化合物
投与群及び非投与群で比較してもよい。この様に測定さ
れた血中ＩＬ−６の濃度を被験化合物の投与前後で比較
し、その濃度が低下した場合に、被験化合物が中枢神経
系作用薬であると判断することができる。
【００１７】一方、免疫系に異常のある哺乳動物にスト
レス負荷を与えることにより、血中ＩＬ−６濃度が上昇
することから、免疫系に異常のある哺乳動物の血中ＩＬ
−６濃度を測定することにより、免疫系に異常のある哺
乳動物のストレス状態を測定することができる。
レス負荷を与えることにより、血中ＩＬ−６濃度が上昇
することから、免疫系に異常のある哺乳動物の血中ＩＬ
−６濃度を測定することにより、免疫系に異常のある哺
乳動物のストレス状態を測定することができる。
【００１８】免疫系に異常のある哺乳動物のストレス状
態を評価するための血中ＩＬ−６濃度の測定法は、上記
した本発明のスクリーニング方法と同様の方法を使用す
ればよい。すなわち、採取した血液あるいは血液から分
離した血漿又は血清を使用し、全血中、血漿中又は血清
中のＩＬ−６濃度をＲＩＡ法、ＥＩＡ法、ＥＬＩＳＡ
法、バイオアッセイ法等通常用いられる方法により測定
すればよい。
態を評価するための血中ＩＬ−６濃度の測定法は、上記
した本発明のスクリーニング方法と同様の方法を使用す
ればよい。すなわち、採取した血液あるいは血液から分
離した血漿又は血清を使用し、全血中、血漿中又は血清
中のＩＬ−６濃度をＲＩＡ法、ＥＩＡ法、ＥＬＩＳＡ
法、バイオアッセイ法等通常用いられる方法により測定
すればよい。
【００１９】ストレス状態の評価は、具体的には、
（１）免疫系に異常のある哺乳動物に無毒性量の中枢神
経系作用薬を経口又は非経口に投与し、（２）一定時間
後の血液を採取し、（３）血液中のＩＬ−６濃度を測定
する、（４）測定されたＩＬ−６の濃度を化合物の投与
前後で比較することにより実施できる。特に、炎症を惹
起された哺乳動物に催眠作用、解熱作用、鎮痛作用又は
脳機能改善作用を有する化合物、とりわけ、催眠作用又
は脳機能改善作用を有する化合物を投与し、至適時間後
に血液を採取し、血中ＩＬ−６濃度を測定し、比較する
ことが好ましい。
（１）免疫系に異常のある哺乳動物に無毒性量の中枢神
経系作用薬を経口又は非経口に投与し、（２）一定時間
後の血液を採取し、（３）血液中のＩＬ−６濃度を測定
する、（４）測定されたＩＬ−６の濃度を化合物の投与
前後で比較することにより実施できる。特に、炎症を惹
起された哺乳動物に催眠作用、解熱作用、鎮痛作用又は
脳機能改善作用を有する化合物、とりわけ、催眠作用又
は脳機能改善作用を有する化合物を投与し、至適時間後
に血液を採取し、血中ＩＬ−６濃度を測定し、比較する
ことが好ましい。
【００２０】
【実施例】以下、実施例により本発明を具体的に説明す
る。
る。
【００２１】実施例１ 結核死菌（M.tuberculosis H37Ra、ディフコ社製）を流
動パラフィン（メルク社製）に懸濁し(6 mg/mL）、ラッ
ト(ルイス系、6-7週齢、雄)の尾根部皮内に0.1mL接種し
た［アルツナイミッテル−フォーシュング／ドラッグリ
サーチ（Arzneim.-Forsch./Drug Res.,）42巻、2号、93
5-944頁、1992年］。18日後に、プレチスモメーター ウ
ゴ・バシル7150（PLETHYSMO METER Ugo Basile 7150）
で測定した足蹠容積が均等になるように一群5又は6匹に
群分けした。ストレス負荷群は、東大薬作型ストレスケ
ージに入れ、23℃の水槽内に胸部まで浸して、ストレス
負荷した［薬物活性の前臨床的評価法、96-97頁、藤村・
福田編、薬事日報社］。30分後、エーテル麻酔下、採血
し、血清分離剤入スピッツ（セパクリーン、栄研器材）
により血清を分離した。各血清中のＩＬ−６濃度をMH60
・BSF2細胞［ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・イムノ
ロジー (Eur. J. Immuol.）、18巻、951-956頁、1988
年]による増殖活性により測定し、既知量のＩＬ−６の
増殖活性をもとに血清中のＩＬ−６量を算出した。尚、
血清中ＩＬ−６は、ストレスを負荷した関節炎ラットの
ＩＬ−６濃度（units/ml）を100％として相対的（T/C：
％）に示した。また、ELISAキットを用いて、血清中の
コルチゾール濃度を測定した。結果を表１に示す。
動パラフィン（メルク社製）に懸濁し(6 mg/mL）、ラッ
ト(ルイス系、6-7週齢、雄)の尾根部皮内に0.1mL接種し
た［アルツナイミッテル−フォーシュング／ドラッグリ
サーチ（Arzneim.-Forsch./Drug Res.,）42巻、2号、93
5-944頁、1992年］。18日後に、プレチスモメーター ウ
ゴ・バシル7150（PLETHYSMO METER Ugo Basile 7150）
で測定した足蹠容積が均等になるように一群5又は6匹に
群分けした。ストレス負荷群は、東大薬作型ストレスケ
ージに入れ、23℃の水槽内に胸部まで浸して、ストレス
負荷した［薬物活性の前臨床的評価法、96-97頁、藤村・
福田編、薬事日報社］。30分後、エーテル麻酔下、採血
し、血清分離剤入スピッツ（セパクリーン、栄研器材）
により血清を分離した。各血清中のＩＬ−６濃度をMH60
・BSF2細胞［ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・イムノ
ロジー (Eur. J. Immuol.）、18巻、951-956頁、1988
年]による増殖活性により測定し、既知量のＩＬ−６の
増殖活性をもとに血清中のＩＬ−６量を算出した。尚、
血清中ＩＬ−６は、ストレスを負荷した関節炎ラットの
ＩＬ−６濃度（units/ml）を100％として相対的（T/C：
％）に示した。また、ELISAキットを用いて、血清中の
コルチゾール濃度を測定した。結果を表１に示す。
【００２２】
【表１】
【００２３】上記の結果は、免疫異常状態を起こしたア
ジュバント関節炎ラットに水浸拘束ストレスを負荷する
ことにより血清中ＩＬ−６の上昇と同時にストレスマー
カーとして知られている血清中コルチゾールが上昇して
いることを示している。すなわち、この結果は、免疫系
に異常のある哺乳動物において、血中ＩＬ−６濃度は、
ストレス状態の指標となりうることを示している。
ジュバント関節炎ラットに水浸拘束ストレスを負荷する
ことにより血清中ＩＬ−６の上昇と同時にストレスマー
カーとして知られている血清中コルチゾールが上昇して
いることを示している。すなわち、この結果は、免疫系
に異常のある哺乳動物において、血中ＩＬ−６濃度は、
ストレス状態の指標となりうることを示している。
【００２４】実施例２ 結核死菌（M.tuberculosis H37Ra、ディフコ社製）を流
動パラフィン（メルク社製）に懸濁し(6mg/mL）、ラッ
ト(ルイス系、6−7週齢、雄)の尾根部皮内に0.1mL接種
した［アルツナイミッテル−フォーシュング／ドラッグ
リサーチ（Arzneim.-Forsch./Drug Res.,）42巻、2号、
935-944頁、1992年］。18日後に、プレチスモメータ
ー、ウゴ・バシル7150（PLETHYSMO METER、Ugo Basile
7150）で測定した足蹠容積が均等になるように一群6又
は7匹に群分けした。各被験化合物を投与し、60分後に
東大薬作型ストレスケージに入れ、23℃の水槽内に胸部
まで浸して、ストレス負荷した［薬物活性の前臨床的評
価法、96-97頁、藤村・福田編、薬事日報社］。30分
後、エーテル麻酔下、採血し、血清分離剤入スピッツ
（セパクリーン、栄研器材）により血清を分離した。各
血清中のＩＬ−６濃度をMH60・BSF2細胞[ヨーロピアン
・ジャーナル・オブ・イムノロジー(Eur. J. Immuo
l.）、18巻、951-956頁、1988年］による増殖活性によ
り測定し、既知量のＩＬ−６の増殖活性をもとに血清中
のＩＬ−６量を算出した。尚、血清中ＩＬ−６は、スト
レスを負荷した関節炎ラットのＩＬ−６濃度（units/m
l）を100％として相対的（T/C：％）に示した。被験化
合物としては、催眠作用を有するペントバルビタールナ
トリウム（PE）、シナプス伝達効率改善作用、脳内アセ
チルコリン系神経調節作用及び脳エネルギ−代謝改善作
用を有するアニラセタム（AN）を用い、ペントバルビタ
ールナトリウムは、ストレス負荷直前に投与した。結果
を表２に示す。
動パラフィン（メルク社製）に懸濁し(6mg/mL）、ラッ
ト(ルイス系、6−7週齢、雄)の尾根部皮内に0.1mL接種
した［アルツナイミッテル−フォーシュング／ドラッグ
リサーチ（Arzneim.-Forsch./Drug Res.,）42巻、2号、
935-944頁、1992年］。18日後に、プレチスモメータ
ー、ウゴ・バシル7150（PLETHYSMO METER、Ugo Basile
7150）で測定した足蹠容積が均等になるように一群6又
は7匹に群分けした。各被験化合物を投与し、60分後に
東大薬作型ストレスケージに入れ、23℃の水槽内に胸部
まで浸して、ストレス負荷した［薬物活性の前臨床的評
価法、96-97頁、藤村・福田編、薬事日報社］。30分
後、エーテル麻酔下、採血し、血清分離剤入スピッツ
（セパクリーン、栄研器材）により血清を分離した。各
血清中のＩＬ−６濃度をMH60・BSF2細胞[ヨーロピアン
・ジャーナル・オブ・イムノロジー(Eur. J. Immuo
l.）、18巻、951-956頁、1988年］による増殖活性によ
り測定し、既知量のＩＬ−６の増殖活性をもとに血清中
のＩＬ−６量を算出した。尚、血清中ＩＬ−６は、スト
レスを負荷した関節炎ラットのＩＬ−６濃度（units/m
l）を100％として相対的（T/C：％）に示した。被験化
合物としては、催眠作用を有するペントバルビタールナ
トリウム（PE）、シナプス伝達効率改善作用、脳内アセ
チルコリン系神経調節作用及び脳エネルギ−代謝改善作
用を有するアニラセタム（AN）を用い、ペントバルビタ
ールナトリウムは、ストレス負荷直前に投与した。結果
を表２に示す。
【００２５】
【表２】
【００２６】免疫異常状態を起こしたアジュバント関節
炎ラットでは、ストレス無負荷の群でも血清中ＩＬ−６
は検出されたが、ストレス負荷ににより血清中ＩＬ−６
濃度は更に上昇した。これに対し、ペントバルビタール
ナトリウム及びアニラセタムを投与した群では、血清中
ＩＬ−６の低下が見られた。
炎ラットでは、ストレス無負荷の群でも血清中ＩＬ−６
は検出されたが、ストレス負荷ににより血清中ＩＬ−６
濃度は更に上昇した。これに対し、ペントバルビタール
ナトリウム及びアニラセタムを投与した群では、血清中
ＩＬ−６の低下が見られた。
【００２７】
【発明の効果】本発明のスクリーニング方法を用いれ
ば、中枢神経系に作用する薬物を広く且つ簡易にスクリ
ーニングすることができ、新規な中枢神経系作用薬の開
発及び副作用として中枢作用を有する薬物のスクリーニ
ングが可能となる。また、本発明の評価方法は、免疫系
に異常のある哺乳動物のストレス状態を見るための有用
な手段の一つとなる。
ば、中枢神経系に作用する薬物を広く且つ簡易にスクリ
ーニングすることができ、新規な中枢神経系作用薬の開
発及び副作用として中枢作用を有する薬物のスクリーニ
ングが可能となる。また、本発明の評価方法は、免疫系
に異常のある哺乳動物のストレス状態を見るための有用
な手段の一つとなる。
フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 25/04 Ａ６１Ｐ 25/04 25/20 25/20 25/28 25/28
Claims (5)
- 【請求項１】 免疫系に異常のある哺乳動物に対して被
験化合物を投与し、該動物の血中インターロイキン−６
濃度を測定することを特徴とする中枢神経系作用薬のス
クリーニング方法。 - 【請求項２】 中枢神経系作用薬が、催眠作用、解熱作
用、鎮痛作用又は脳機能改善作用を有するものである請
求項１記載のスクリーニング方法。 - 【請求項３】 哺乳動物が、更にストレス負荷されたも
のである請求項１または２記載のスクリーニング方法。 - 【請求項４】 哺乳動物が、げっ歯類である請求項1〜
３のいずれか１項記載のスクリーニング方法。 - 【請求項５】 血中インターロイキン−６濃度を測定す
ることを特徴とする免疫系に異常のある哺乳動物のスト
レス状態の評価方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000325071A JP4490576B2 (ja) | 1999-10-26 | 2000-10-25 | 中枢神経系作用薬のスクリーニング方法及びストレス状態の評価方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11-303345 | 1999-10-26 | ||
| JP30334599 | 1999-10-26 | ||
| JP2000325071A JP4490576B2 (ja) | 1999-10-26 | 2000-10-25 | 中枢神経系作用薬のスクリーニング方法及びストレス状態の評価方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001194369A true JP2001194369A (ja) | 2001-07-19 |
| JP4490576B2 JP4490576B2 (ja) | 2010-06-30 |
Family
ID=26563491
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000325071A Expired - Lifetime JP4490576B2 (ja) | 1999-10-26 | 2000-10-25 | 中枢神経系作用薬のスクリーニング方法及びストレス状態の評価方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4490576B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007094472A1 (ja) * | 2006-02-17 | 2007-08-23 | Atsuo Sekiyama | 生体負荷の指標剤および生体負荷の測定方法 |
| JP2015517813A (ja) * | 2012-05-28 | 2015-06-25 | ザ・ロイヤル・インスティテューション・フォア・ザ・アドバンスメント・オブ・ラーニング／マクギル・ユニヴァーシティ | 炎症を可能にするポリペプチドおよびその使用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0665068A (ja) * | 1992-08-11 | 1994-03-08 | Suntory Ltd | 抗ストレス組成物 |
| JPH07287008A (ja) * | 1994-04-18 | 1995-10-31 | Taisho Pharmaceut Co Ltd | 炎症性疾患治療薬の簡易試験法 |
| JPH08245414A (ja) * | 1995-01-27 | 1996-09-24 | Private Biolog Corp | Ｉｌ−６関連疾患の治療用組成物および方法 |
| JPH1081629A (ja) * | 1997-07-18 | 1998-03-31 | Nippon Zoki Pharmaceut Co Ltd | 抗炎症剤 |
| JPH10218770A (ja) * | 1997-02-03 | 1998-08-18 | Shinichi Yoshino | 免疫改善剤 |
-
2000
- 2000-10-25 JP JP2000325071A patent/JP4490576B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0665068A (ja) * | 1992-08-11 | 1994-03-08 | Suntory Ltd | 抗ストレス組成物 |
| JPH07287008A (ja) * | 1994-04-18 | 1995-10-31 | Taisho Pharmaceut Co Ltd | 炎症性疾患治療薬の簡易試験法 |
| JPH08245414A (ja) * | 1995-01-27 | 1996-09-24 | Private Biolog Corp | Ｉｌ−６関連疾患の治療用組成物および方法 |
| JPH10218770A (ja) * | 1997-02-03 | 1998-08-18 | Shinichi Yoshino | 免疫改善剤 |
| JPH1081629A (ja) * | 1997-07-18 | 1998-03-31 | Nippon Zoki Pharmaceut Co Ltd | 抗炎症剤 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| JPN6009045676, ＭＡＥＳ，Ｍ． ｅｔ ａｌ．, "Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｒｅｓｓ ｏｎ ｈｕｍａｎｓ： ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎ", Ｃｙｔｏｋｉｎｅ, 1998, Ｖｏｌ．１０， Ｎｏ．４, ｐ．３１３−８ * |
| JPN6009045680, ＴＨＥＩＳＥＮ−ＰＯＰＰ，Ｐ． ｅｔ ａｌ．, "Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−６ （ＩＬ−６） ｉｎ ａｄｊｕｖａｎｔ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｏｆ ｒａｔｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ", Ｉｎｔ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．, 1992, Ｖｏｌ．１４， Ｎｏ．４, ｐ．５６５−７１ * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007094472A1 (ja) * | 2006-02-17 | 2007-08-23 | Atsuo Sekiyama | 生体負荷の指標剤および生体負荷の測定方法 |
| JP5069213B2 (ja) * | 2006-02-17 | 2012-11-07 | 敦生 関山 | 生体負荷の指標剤および生体負荷の測定方法 |
| RU2519324C2 (ru) * | 2006-02-17 | 2014-06-10 | Ацуо СЕКИЯМА | Индикатор биологической нагрузки и способ измерения биологической нагрузки |
| JP2015517813A (ja) * | 2012-05-28 | 2015-06-25 | ザ・ロイヤル・インスティテューション・フォア・ザ・アドバンスメント・オブ・ラーニング／マクギル・ユニヴァーシティ | 炎症を可能にするポリペプチドおよびその使用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4490576B2 (ja) | 2010-06-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Winkler et al. | The interleukin‐1 receptor–associated kinase 4 inhibitor PF‐06650833 blocks inflammation in preclinical models of rheumatic disease and in humans enrolled in a randomized clinical trial | |
| Matsushita et al. | Elevated serum BAFF levels in patients with systemic sclerosis: enhanced BAFF signaling in systemic sclerosis B lymphocytes | |
| An et al. | Taste and smell GPCRs in the lung: evidence for a previously unrecognized widespread chemosensory system | |
| Nakanishi et al. | NLRP3 mutation and cochlear autoinflammation cause syndromic and nonsyndromic hearing loss DFNA34 responsive to anakinra therapy | |
| Bas et al. | CD14 is an acute-phase protein | |
| Meduri et al. | Systemic inflammation‐associated glucocorticoid resistance and outcome of ARDS | |
| Guo et al. | PR-957 mediates neuroprotection by inhibiting Th17 differentiation and modulating cytokine production in a mouse model of ischaemic stroke | |
| Nadeem et al. | Systemic inflammation in asocial BTBR T+ tf/J mice predisposes them to increased psoriatic inflammation | |
| Barthelmes et al. | Induction of experimental autoimmune encephalomyelitis in mice and evaluation of the disease-dependent distribution of immune cells in various tissues | |
| Yeung et al. | The role of interleukin‐1β in the immune response to contact allergens | |
| Straub et al. | Neuronally released sympathetic neurotransmitters stimulate splenic interferon‐γ secretion from T cells in early type II collagen–induced arthritis | |
| Shrestha et al. | Lesional and nonlesional skin from patients with untreated juvenile dermatomyositis displays increased numbers of mast cells and mature plasmacytoid dendritic cells | |
| Odobasic et al. | Formyl peptide receptor activation inhibits the expansion of effector T cells and synovial fibroblasts and attenuates joint injury in models of rheumatoid arthritis | |
| Dohn et al. | The gain-of-function integrin β3 Pro33 variant alters the serotonin system in the mouse brain | |
| Szabo et al. | Therapeutic advances in alcohol-associated hepatitis | |
| Li et al. | Systematic analysis of critical genes and pathways identified a signature of neuropathic pain after spinal cord injury | |
| Nguyen et al. | Parenchymal and inflammatory cell responses to single and repeated ozone exposure in healthy and surfactant protein-C mutant lung | |
| Albekairi et al. | CXCR2 antagonist SB332235 mitigates deficits in social behavior and dysregulation of Th1/Th22 and T regulatory cell-related transcription factor signaling in male BTBR T+ Itpr3tf/J mouse model of autism | |
| Gilio et al. | Interleukin-10 contrasts inflammatory synaptopathy and central neurodegenerative damage in multiple sclerosis | |
| JP4490576B2 (ja) | 中枢神経系作用薬のスクリーニング方法及びストレス状態の評価方法 | |
| Dreher et al. | Role of the anaphylatoxin receptor C5aR2 in angiotensin II-induced hypertension and hypertensive end-organ damage | |
| Eftekhari et al. | Blockade of proteinase-activated receptor 2 (PAR2) attenuates neuroinflammation in experimental autoimmune encephalomyelitis | |
| US20220409585A1 (en) | Treatment of autoinflammatory disorders | |
| Shim et al. | Protection against Nippostrongylus brasiliensis infection in mice is independent of GM‐CSF | |
| Chen et al. | Pinaverium bromide attenuates lipopolysaccharide-induced excessive systemic inflammation via inhibiting neutrophil priming |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070710 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20090824 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090908 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20091109 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100316 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100402 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130409 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4490576 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130409 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140409 Year of fee payment: 4 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |