JP2001072701A - タピオカ澱粉の製造方法及びアミノ酸の発酵生産方法 - Google Patents
タピオカ澱粉の製造方法及びアミノ酸の発酵生産方法Info
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
く分離取得する方法並びにタピオカ澱粉を出発原料とす
る工業的に有利なアミノ酸の発酵生産方法を提供する。 【解決手段】 キャッサバ芋に澱粉採取のための通常の
破砕処理を施して粒径1〜10mmに粉砕し、次いで機
械的磨砕を施して50メッシュパスとするか、または機
械的磨砕を施した後、セルラーゼによる酵素的処理を施
し、次いで澱粉懸濁液とカスを分離し、澱粉懸濁液より
澱粉を回収することを特徴とするタピオカ澱粉の製造方
法。このようにして回収したタピオカ澱粉に澱粉液化酵
素および糖化酵素を作用させて高濃度糖液とし、該糖液
を発酵原料に用いるアミノ酸の発酵生産方法。
Description
械的磨砕または酵素的処理を施してタピオカ澱粉を収率
よく分離取得する方法並びにこのようにして製造取得し
たタピオカ澱粉を酵素糖化して糖液となし、これを発酵
原料に用いるアミノ酸の発酵生産方法に関する。
る澱粉であり、酵素糖化によりグルコースに変換され、
L−グルタミン酸モノナトリウム塩、L−リジン等のア
ミノ酸発酵製品の主要原料として使われている。
芋の中に蓄えられた澱粉の微粒子を繊維質等のカスから
分離採取し、乾燥することによって製造されている。一
般的に、原料であるキャッサバ芋(生芋)に対し20〜
25%の収率でタピオカが得られており、これとほぼ同
量のカスが排出されているのが現状である。
よって行われているが、破砕された芋組織は澱粉粒子に
比較し数百〜数千倍も大きく澱粉粒子の分離には充分と
は言えず、澱粉の収率に顕著な向上が認められない。
状態を実験室で再現するために、図7に示すフローシー
トに従っておろし金でキャッサバ芋をすりおろし、澱粉
製造実験を行い、最終的に得られた澱粉、カスの各重量
を測定し、澱粉の収率(抽出率)を求めた。同一条件で
3回の実験を行った結果を表1に示す。
澱粉重量とカスの重量はほぼ同じであり、実際のタピオ
カ澱粉工場で製品であるタピオカとほぼ同量のカスが排
出されている状況とよく一致している。
したところ、生芋(水分約50%)の40〜45%が澱
粉であり、従って、相当量の澱粉が抽出されずに、排出
される繊維質等のカスの中に残留していることになる。
事実、前述の実験で得たカスを走査性電子顕微鏡(SE
M)で観察し、そのSEM写真を図5(400倍)、図
6(1000倍)に示したように、ほぼ均質で球状の澱粉
粒がびっしり存在し、多数の澱粉粒子が膜状のもので覆
われているのがわかる。このように、おろし金ですりお
ろした芋からのカスの中でも多くの澱粉粒子が残留し、
膜状のもので覆われているため、澱粉採取のための通常
の破砕処理においても同様、澱粉の得量に大きな制約を
受け、キャッサバ芋中の澱粉が充分に抽出できない。
在する澱粉粒子を覆う膜状のセルロースやヘミセルロー
スを破損、切断もしくは分解させれば、澱粉粒子が漏れ
出し、収率の向上につながり、ひいてはアミノ酸発酵工
業の大幅のコストダウンに寄与するものと考えられ、本
発明はかかる観点に着目してなされたもので、キャッサ
バ芋から澱粉を効率よく分離取得する方法並びにこのよ
うにして製造取得したタピオカ澱粉を酵素糖化して糖液
となし、これを発酵原料に用いるアミノ酸の発酵生産方
法を提供することを目的としている。
を達成するために鋭意検討した結果、澱粉採取のための
通常の破砕処理を施したキャッサバ芋にさらに機械的磨
砕を施し、または機械的磨砕を施した後にセルラーゼを
作用させることにより、澱粉粒子を覆う膜が破損、切断
もしくは分解され、その結果、澱粉が効率よく抽出し得
ること、そしてタピオカ澱粉の収率向上に伴ない、これ
を出発原料とする工業的に有利なアミノ酸発酵プロセス
の確立に成功し、本発明を完成するに至った。
ッサバ芋に澱粉採取のための通常の破砕処理を施して粒
径1〜10mmに粉砕し、次いで機械的磨砕を施して5
0メッシュパスとした後、澱粉懸濁液とカスを分離し、
澱粉懸濁液より澱粉を回収することを特徴とするタピオ
カ澱粉の製造方法であり、請求項2に係る発明は、キャ
ッサバ芋に澱粉採取のための通常の破砕処理を施して粒
径1〜10mmに粉砕し、次いで機械的磨砕を施した
後、セルラーゼによる酵素的処理を施し、次いで澱粉懸
濁液とカスを分離し、澱粉懸濁液より澱粉を回収するこ
とを特徴とするタピオカ澱粉の製造方法であり、請求項
3に係る発明は、請求項1または2記載の製造方法によ
って得られたタピオカ澱粉を水に懸濁してスラリーと
し、これに澱粉液化酵素および糖化酵素を作用させて製
造された糖液を発酵原料に用いるアミノ酸の発酵生産方
法である。
する。本発明において、原料として使用されるキャッサ
バ芋は、収穫した生芋の他に、皮を剥いだ芋でもよい。
また、乾燥した芋を用いてもよい。これらを常法に従っ
てラスパー等を用いて1〜10mmの粒子に粉砕する。
粉砕されたキャッサバ芋はさらに機械的磨砕を施すか、
または機械的磨砕を施した後にセルラーゼを作用させ
る。
て芋組織が200μm以下にまで細かくされた状態にす
る任意の方法が適用される。例えば、後記実施例によっ
て示された「おろし金ですりおろす」/「乳鉢にて磨砕
する」の組み合わせのように異なった二段の機械的磨砕
処理によって効果的に行うことができる。
砕を行う装置としては、ホモジナイザー、ボールミル等
が挙げられる。ジェットミル等の湿式微粉砕機も使用可
能である。
された芋粉を磨砕するが、磨砕の程度としては、50メ
ッシュパスが好ましく、100メッシュパスが特に好ま
しい。
用させる場合、「CELLULASE YC」(商品
名、キッコーマン社製)等の市販のセルラーゼが使用可
能であり、トリコデルマ属のカビの産出するセルラーゼ
が好適に使用される。使用量は濾紙崩壊活性で10以上
程度であればよい。反応は、40〜50℃の温度範囲で
pH5〜7で行われる。反応時間は通常1〜5時間でよ
い。
反応を行った後、澱粉懸濁液とカスと分離され、澱粉懸
濁液を例えば、濃縮、濾過あるいは、遠心分離等の固液
分離操作によって澱粉が原料生芋に基づいて35〜40
%の好収率で分離取得することができる。
カスと分別した澱粉懸濁液に直接澱粉液化酵素および糖
化酵素を作用させて澱粉を液化・糖化する。また、分離
取得した澱粉を用いる場合には、水を加えて澱粉懸濁液
を調製し、これに液化酵素および糖化酵素を作用させる
と、澱粉は液化・糖化してグルコースとなり可溶化す
る。
全量を一度に添加せずに少量ずつ分けて添加すると、4
5〜55g/dlの高濃度に懸濁できるので、40〜5
0%の高濃度糖化液を製造することができる。
和化成(株)製〕を粉末1g当たり20になるように添
加し、85〜95℃で1時間加熱攪拌する。放冷し、希
硫酸にてpHを4.2に調整したならば、引き続き、糖
化酵素、例えば「NC−4.2」〔商品名、天野製薬
(株)製〕を粉末1g当たり2〜5単位になるように添加
し、55〜65℃に加熱し、同温度に保ちながら40〜
48時間加熱攪拌して酵素反応を完結させる。
め液化酵素を20ユニット/粉末g添加しておいた方が
液化が早く進行する。40〜60℃で液化酵素含有液に
澱粉粉末を徐々に添加することにより液化・糖化効率が
あがり、高濃度(45〜55g/dl)の澱粉を糖化し
てグルコース濃度40〜55g/dlの糖液を製造する
ことができる。この方法により、澱粉の95%以上が糖
化可能である。
られた糖液をアミノ酸発酵原料に用いるところに特徴が
ある。
グルタミン酸、リジン、メチオニン、トリプトファン、
スレオニン、セリン、プロリン、アラニン、バリン、ロ
イシン、フェニルアラニン、ヒスチジン、アルギニン、
オルニチン、グルタミン、アスパラギン酸等のアミノ酸
の発酵を例に挙げることができる。
れの発酵に公知のものを用いることができる。例を挙げ
れば、次のとおりである。 L−グルタミン酸発酵:ブレビバクテリウム・ラクトフ
ェルメンタムATCC 13869 L−リジン発酵:ブレビバクテリウム・ラクトフェルメ
ンタムATCC 21800 L−トリプトファン発酵:エシェリヒア・コリAGX1
7(PGX44)[NRRL B−12263] L−フェニルアラニン発酵:ブレビバクテリウム・ラク
トフェルメンタムAJ 12637(FERM BP−4
160)フランス特許出願公開第2,686,898号参
照 L−チロシン発酵:ブレビバクテリウム・ラクトファー
メンタムAJ 12081(FERM P−7249)特
開昭60−70093号公報参照 L−スレオニン発酵:コリネバクテリウム・アセトアシ
ドフィラムAJ 12318(FERM BP−117
2)米国特許第5,188,945号参照 L−イソロイシン発酵:ブレビバクテリウム・フラバム
AJ 12149(FERM BP−759)米国特許第
4,656,135号参照
糖液を用いるほかは公知の培地と同様でよい。上記の糖
液は炭素源の全量に使用してもよく、その1部に使用し
てもよい。1部に使用する場合の残余の炭素源は従来用
いていたものと同様でよい。発酵方法も従来と同様でよ
い。
飼料である。そこで、リジン等を飼料に用いる場合には
発酵液をそのまま乾燥して飼料添加物とすることができ
る。
るが、本発明はこれに限定されるものではない。
mm程度の大きさにする。水30mlに懸濁し、これを
乳鉢を用いて磨砕を行った。処理時間は2分及び15分
とした。約40メッシュの金網で濾した。濾液に網上残
渣を水20mlで洗浄処理した処理水を合わせて300
0rpm、10minの条件で遠心分離し、得られた沈
殿(澱粉)を減圧下、60℃で24時間乾燥した。ま
た、網上残渣(カス)を同様な条件で乾燥した。
鉢による機械磨砕を加えないで行った結果(表1)と比
較し、澱粉の得量が上がり、カスの量が減少した。2分
の機械処理で10.4%の収率向上、15分の機械処理
で32.9%の収率向上となった。
のSEM写真は、図1(400倍)、図2(1000倍)
に示す。この場合においてもかなりの澱粉粒子が残って
いる状態が観察されるも、機械的磨砕を加えないで行っ
た結果(図5、図6)に比較して、所々澱粉粒子を覆う
膜状の物質が破れたり、ちぎれ去ったりしている様子が
窺える。
ッサバ芋の懸濁液に乳鉢を用いて2分間磨砕処理を施し
たものに、下記表3に示す条件で酵素処理を行い、その
後の澱粉とカスとの分離操作を実施例1と同様に行っ
た。得られた結果は表4に示す。
(商品名、キッコーマン社製)を用いた。 **:プルラナーゼは「DEXTROZYME plu
s L」(商品名、ノボ社製)を用いた。
加えることにより、実施例1と同様に澱粉の得量が上が
り、カスの量が減少し、収率が向上することが判明した
が、澱粉に作用するプルラナーゼ(澱粉枝きり酵素)処
理では、澱粉の得量や収率は機械的処理による向上以上
の有意な効果は認められなかった。
てのSEM写真は、図3(400倍)、図4(1000
倍)に示す。セルラーゼ処理により、機械的磨砕処理と
同様澱粉粒子を覆っている膜状物質は除去されており、
残った膜も非常に薄くなっている。このことから、セル
ラーゼにより、この膜状物質は溶かされたものと考えら
れる。
容が1Lになるように調整した。これを攪拌しつつ85
℃に加熱し、液化酵素「T−5」を1.5ml添加し、
1時間液化反応を行った。液化終了後、60℃まで冷や
した時点で希硫酸にてpHを4.5に調整し、糖化酵素
「NC−4.2」を0.5ml添加した。糖化反応は、
60℃で48時間振とう攪拌により行った。糖液中のグ
ルコース濃度は44.5g/dl(糖化率97%)であ
った。
1g/L、KH2PO41g/L、大豆蛋白酸加水分解物1
5ml/L、ビオチン300μg/Lを含む基質溶液2
70mlを120℃で15分間加熱殺菌してS型ジャー
に張込んだ。
産菌ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタム(AT
CC 13869)の種培養液30mlを加えて全量30
0mlとし、発酵を開始した。発酵は1〜1.2krp
mの攪拌と1/1vvmの通気をし、pHをアンモニア
で7.5に維持して行った。発酵温度は30℃にし、培
養開始後5時間目にポリオキシエチレンソルビタンモノ
パルミテート2000mg/L濃度になるよう添加し
た。
ース換算で42g/dlとなるように希釈し、120℃
で15分間加熱殺菌して用いた。糖液はポリオキシエチ
レンソルビタンモノパルミテートを2000mg/Lに
なるよう添加して基質溶液として発酵液中の糖濃度を1
〜2g/dlに保つように連続供給した。発酵結果は収
率が56%であった。
シル型膜モジュールで膜分離した。膜透過液に塩酸を添
加してpH3.2に調整してグルタミン酸結晶を晶析分
離した。
/L、尿素3g/L、KH 2PO41g/L、MgSO4・
7H2O100mg/L,FeSO4・7H2O10m
g/L,MnSO4・4H2O8mg/L,大豆蛋白酸
加水分解物(窒素として)1g/L、サイアミン塩酸塩
0.1mg/L及びビオチン0.3mg/Lを含有する
培地(pH7.0)を、500ml容振とうフラスコ3
本に各20mLづつ分注した。115℃で10分間加熱
殺菌後、この培地に、予めブイヨンスラント上で48時間
生育させたブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタム
(ATCC21800)を1白金耳接種し、31.5℃
で24時間振糖培養した。以上は種培養である。廃糖蜜
として80g/L、硫酸アンモニウム50g/L、KH 2P
O41g/L、MgSO4・7H2O1g/L、大豆蛋
白質加水分解物(窒素として)100mg/L、サイア
ミン塩酸塩0.1mg/L、及びビオチン0.3mg/
Lを含有する培地(pH7.0)を、3基の1L容ガラ
ス製小型発酵槽に300mLづつ分注し、120℃15
分間加熱殺菌した。31.5℃まで冷却後、上記のフラ
スコ培養終了液を発酵槽1基当り15mLづつ添加し、
温度31.5℃、通気量1/2vvm、攪拌数700r
pmの条件で培養を行った。培養液中の糖濃度が5g/
L以下になった時点よりフィード培地のフィードを開始
した。培地は参考例1で得られた糖液をグルコース換算
で40g/dlとなるように調整した糖液、大豆蛋白質
加水分解物(窒素として100mg/L)、サイアミン
塩酸塩(0.1mg/L)及びビオチン(0.3mg/
L)を含有していた。培養液中の糖濃度が5g/L以下
になるようにフィード培地のフィード速度を調節しつつ
培養を続け、100mLのフィード培地をフィード終了
後、培養液中の糖が消費し尽くされた時点で培養を終了
し、培養液中に蓄積したL−リジン濃度を定量した。培
養の結果は収率が35%であった。
機械的磨砕処理を加えることにより、膜状の物質の一部
が破壊され、そこに包まれていた澱粉粒子が抽出されて
その分の収率が向上した。また、機械的磨砕処理に加え
てセルラーゼ処理を施すことにより、この膜状の物質が
分解され、ほとんどの澱粉粒子が抽出されてくるため、
収率は大きく向上するという利点を享受できる。澱粉は
引き続き直接酵素液化・糖化することにより、40%以
上の高濃度の糖液を効率よく製造することができ、この
糖液を用いてアミノ酸を高い収率で取得することができ
る。このように、本発明によりキャッサバ澱粉のほとん
どを糖化させてアミノ酸発酵原料に利用することができ
る。
を行って得たカスのSEM写真(400倍)を示す。
を行って得たカスのSEM写真(1000倍)を示す。
たカスのSEM写真(400倍)を示す。
たカスのSEM写真(1000倍)を示す。
倍)を示す。
倍)を示す。
すフローシート。
Claims (3)
- 【請求項1】 キャッサバ芋に澱粉採取のための通常の
破砕処理を施して粒径1〜10mmに粉砕し、次いで機
械的磨砕を施して50メッシュパスとした後、澱粉懸濁
液とカスを分離し、澱粉懸濁液より澱粉を回収すること
を特徴とするタピオカ澱粉の製造方法。 - 【請求項2】 機械的磨砕を施した後、セルラーゼによ
る酵素的処理を施すことを特徴とする請求項1記載のタ
ピオカ澱粉の製造方法。 - 【請求項3】 請求項1または2記載の製造方法によっ
て得られたタピオカ澱粉を水に懸濁してスラリーとし、
これに澱粉液化酵素および糖化酵素を作用させて製造さ
れた糖液を発酵原料に用いるアミノ酸の発酵生産方法。
Priority Applications (1)
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