JP2000516261A - 動物リン脂質の治療および／または食事療法での新規な使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 治療および／または食事療法での動物から得られたリン脂質の新規な使用。特に、メラトニンの分泌を調節するための製剤および／または食事療法用組成物を製造するための、動物の脳または鶏卵から得られた長鎖ポリ不飽和脂肪酸を豊富に含むリン脂質の使用。

Description

【発明の詳細な説明】 動物リン脂質の治療および／または食事療法での新規な使用 本発明は、動物から得られたリン脂質の治療および／または食事療法への新規 使用に関するものである。 本発明は特に、メラトニン分泌作用を有する治療および／または食事療法用組 成物を製造するためのポリ不飽和脂肪酸を豊富に含むリン脂質の利用に関するも のである。 これまでの研究では、メラトニンすなわち松果腺で生成される神経ホルモンは ヒトの内生調時機構として働くことが明らかにされている(Armstrong−メラトニ ン：哺乳動物の体内ツァイトゲーバー、Pineal Rres.Rev.、第７号、第157〜202 頁、1989年)。メラトニンの主たる薬理学的特性としては筋弛緩作用、鎮静、睡 眠および精神安定効果が挙げられる(Sudgen,D.、マウスおよびラットにおけるメ ラトニンの精神薬理学的効果−薬理学誌、Exp.Ther.、第227号、第587〜591頁、 1983年)。 メラトニンはストレスに起因する免疫不全症を緩和し(Mestroni、メラトニン 、ストレスと免疫系、松果体Rres.Rev.、第７号、第203〜206頁、1989年)、特に マウスにおいて寿命を延ばす。 メラトニンおよびその主な肝代謝産物（6-ヒドロキシメラトニン）は実験で膜 における過酸化脂質の生成を防止した(R.J.Reiter、メラトニンの酸化防止能力 ：受容体を必要としない新しい作用−神経内分泌学レター、第15号、第103〜116 頁、1993年)。 近年、多くの研究者が松果腺とメラトニンの両方を老化および老化に関連する 病気の原因とみなしている。これらの理論はメラトニンが多くの生物学的機能に 果たす大きな役割と、生体におけるメラトニン生成が年齢に従って徐々に下降す ることから導き出されたものである(R.J.Reiter−老化と松果腺およびメラトニ ン；老人学専門誌、第30号：第199〜212頁、1995年)。 人におけるメラトニンの効果を調べるためにいくつかの臨床試験が実施されて きた(R.Wurtman、人の気分および動作に対するメラトニンの作用、脳研究、第32 3号：第201〜207頁、1984年；R.Brook、ジェット機疲れの治療としてのメラ トニンの二重盲試験、生物精神医学、第33号：第526〜530頁、1993年)。その他 、アルツハイマー病の進行に及ぼすメラトニンの影響を確認するための研究も実 施された(C.P.,Maurizi、アルツハイマー病の謎と、メラトニンによるその防止) 。 メラトニンの慢性的使用がこのホルモンの摂取が明らかに有害ではない場合で も論議の対象となっている。しかし、松果腺、特に食物供給によるメラトニン生 成の調節を研究するのは有意義である。 松果腺のn-3脂肪酸含有量はα−リノール酸（18：n-3）が不足した餌を与え続 けた動物において大幅に減少することがわかっている。リン脂質グリセリドにつ いて最も激しい変化が起こる。すなわち、その22：6n-3脂肪酸の含有率が10.14 ％から2.33％に減少する。この状況では媒質へのメラトニンの放出によって測定 した培養したラット松果腺の活動は低下している(N.Sadra、培養ラット松果腺へ のメラトニンの放出におけるn-3脂肪酸が不足した餌の影響、神経科学誌、第61 号：第1057〜1063頁、1993年)。 アラキドン酸（20：4n-6）およびドコサヘキサエン酸すなわちＤＨＡ（22：6n -3）は松果腺の主たるポリ不飽和脂肪酸である。両脂肪酸は脂質全体の25％近く を占める。これらは魚油におけるトリグリセリドや脳や卵から得られる動物リン 脂質として存在することもある。 各種の実験によって、動物リン脂質が非常に多様な用途に用いられるＤＨＡお よびアラキドン酸の最も優れた補充栄養を成すことが証明されている。このこと から、リン脂質は、それ自体で生物膜の形成ブロックであると言える。 従って、本出願人は欧州特許第502,766号、欧州特許第502,765号、フランス国 特許第2,714,574号、欧州特許出願第95,923,373号および欧州特許第95,923,374 号において、食事療法および治療の目的に使用されるリン脂質をすでに開示して いる。 本発明の対象は、メラトニン分泌を調節する製剤および／または食事療法用組 成物を製造するための動物の脳または鶏卵から得られる長鎖ポリ不飽和脂肪酸に 豊んだリン脂質の使用にある。 長鎖ポリ不飽和脂肪酸は主として松果腺すなわちアラキドン酸（20：4n-6） およびドコサヘキサエン酸すなわちＤＨＡ（22：6n-3）にみいだされる。 このリン脂質は無毒の薬理学的に許容される賦形剤、希釈剤または不活性キャ リアと組み合わせて経口または非経口投与に適した製剤および／または食事療法 用組成物が製造される。 投与経路に適した賦形剤および希釈剤の例としては、経口投与用には炭酸カル シウム、リン酸トリカルシウム、リン酸マグネシウム、アルミナ、コロイドシリ カ、カオリン、クレー、珪酸アルミニウム、珪酸カルシウムおよび酸化鉄が挙げ られ、非経口的投与用には水または水性液等の無機物質が挙げられる。 不活性キャリアは澱粉、デキシトリン、ラクトース、セルロース、合成セルロ ース誘導体、アルギン酸塩、カラゲーナン、カゼイン、脂肪酸、蝋または樹脂等 の有機系のものでよい。 このリン脂質はさらに、ビタミン、微量元素または無機塩等、その他の補助活 性成分と組み合わせることもできる。 ビタミンは、例えば、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、葉酸、パ ントテン酸、ジヒドロ葉酸、ビタミンＰＰ等のＢ群に属するものでよい。微量元 素の例としてはセレン、リチウム、ルビジウムが挙げられ、無機塩としては例え ばマグネシウム塩を挙げることができる。 本発明による組成物は、経口アンプル、バイアル、ゼラチン質カプセル、カプ セル、剤皮で被覆または未被覆の錠剤、タブレット、パスタ、顆粒剤、甘味料を 添加または添加してない香味付きまたは香味なしの粉末として提供される。 これら組成物は、例えばゲル状製剤や経口懸濁液あるいは水中油形乳濁液のよ うな液体の投与形態として提供することも可能である。 リン脂質は、一回の投与単位当たり、10〜300mgの量を投与する。 本発明のリン脂質は、夜間の睡眠の質、日中の覚醒状態、記憶および学習能力 の向上を可能にするための製剤および／または食事療法用組成物を製造するため に使用される。 以下の実施例および実験によって、本発明をさらに詳しく説明するが、本発明 がこれらに制限されるものではない。実施例Ｉ 哺乳動物の脳から抽出したアラキドン酸およびＤＨＡの含有率が高いリン脂質 を基材とする組成物の製造 脳リン脂質 10から300ｍｇ 濃縮麦芽油 10から100ｍｇ ラクトース 50から200ｍｇ リン酸三カルシイウム 10から100ｍｇ カゼイン塩 15から50ｍｇ 臭化マグメシウム ５から20ｍｇ （ゼラチンカプセル１個当たり）実施例II アラキドン酸およびＤＨＡの含有率が高いリン脂質を基材とするゼラチン質カ プセル 脳リン脂質 10から300ｍｇ ビタミンＢ1 0.7から4.2ｍｇ ビタミンＢ２ 0.8から4.8ｍｇ ビタミンＢ６ 0.5から5ｍｇ 葉酸 100から600ｍｇ ラクトース 50から200ｍｇ スレアリンマグネシウム 50から30ｍｇ コロイドシリカ ５から25ｍｇ （ゼラチンカプセル１個当たり） 以下の実験では本発明の動物リン脂質の治療への適用、すなわちメラトニン分 泌の調節作用を説明する。本発明のリン脂質の薬理学的試験および治療への適用 １−試験 動物リン脂質はブタの脳または鶏卵から適切な溶剤を用いて抽出した。これら の動物にはn-3系の脂肪酸を豊富に含む特別餌を与え続けた。 リン脂質抽出手順および条件は、欧州特許出願第95,923,373号（鶏卵からの抽 出）および第95,923,374号（ブタの脳からの抽出）に記載されている。 最終生成物は通常タイプのリン脂質を含んでいたが、その比率は抽出源によっ て違った。 雌鶏に通常の餌を与えた場合には、脂肪酸の含有率は脳のリン脂質と鶏卵のリ ン脂質でほぼ等しくなった（下記の表を参照）。 て違った。 ２−動物実験実験の手順 ａ）動物および動物の餌 四つの動物グループについて実験した： １）グループ１および２ グループ１および２はウィスター（Wistar）ラットから構成される。これらの ラットには二世代にわたって、落花生とナタネ種子の混合物（60／40）を６％含 む餌を与え(このグループを「対照グループ」または「ナタネ種子グループ」と 呼ぶ)、あるいは、落花生油だけを与える(このグループは、「n-3不足グループ 」または「落花生グループ」と呼ぶ)。 対照グループに与える餌は、18：2n-6および18：3n-3の脂肪酸がバランスの取 れたものである。 ２）グループ３および４ グループ３および４は対照グループ（「ナタネ種子」）またはn-3不足グルー プ(「落花生」)に含まれる母ラットから生まれ、既に離乳させた生後21日のラッ トから構成される。これらのラットには、動物リン脂質（「ＰＬ」）を追加し、n- 3脂肪酸を豊富に含む餌を与え続け、不足グループ用の餌100g当たり200mgのn-3 脂肪酸を摂取させ(このグループは、n-3不足＋ＰＬグループまたは「落花生」＋ ＰＬと呼ばれる)、対照ラット用の餌100g当たり400mgのn-3脂肪酸を摂取させる ようにした(このグループは、対照＋ＰＬグループ、または「ナタネ種子」＋Ｐ Ｌと呼ばれる)。 ラットの餌は実験が終わるまで上記のように続けた。 ｂ）尿採取 動物を代謝監視籠に入れた後、厳密に制御した条件に維持する(光りを和らげ 、温度を21±０℃に保ち、餌および飲み物は自由に与える)。隔離によるストレ スに５日間配慮する。このようにして、この期間、試料は一切取り出さなかった が、尿の量の再現性は検査した。この５日間が過ぎた後、各ラットから尿を採取 した。 ｃ）結果 松果腺脂肪酸の投与によって、n-3系の脂肪酸、特にＤＨＡに関して、各グル ープに大きな差があることがわかった。 リン脂質（ＰＬ）の追加によって、22：6n-3脂肪酸の比率が大幅に増加した。 表Ｉこれら動物では、夜間のメラトニン分泌は対照グループに対してn-3不足グルー プが32％少ないことがわかった。 これに対して、動物リン脂質を摂取した場合、n-3不足グループと比較して尿 中のメラトニン分泌は75.8％多く、対照グループに対しては31％多かった。 図１は、５週間にわたって行った連続した二日間の夜間測定に基づき、日中（ Ｊ）および夜間（Ｎ）のラットの尿中のサルファトキシ−メラトニン分泌に対す る各食餌法の影響を示す。 横軸はＪ／Ｎ比を、また、縦軸は12時間にわたり尿中に分泌されたサルファト キシ−メラトニンの景を示す。 ープをそれぞれ表す。 （ａ）：ｐ＜0.01「ナタネ種子」(「落花生」に対して) （ｂ）：ｐ＜0.01「落花生」＋ＰＬ（「落花生」に対して） （ｃ）：ｐ＜0.01「ナタネ種子」＋ＰＬ（「ナタネ種子」に対して） ｄ）結論 これらデータから、リン脂質の摂取は松果体に関してn-3脂肪酸不足を矯正し 、ポリ不飽和脂肪酸を豊富に含むリン脂質の摂取はメラトニン生成を刺激し得る ことがわかった。 ３．よく眠れない人に対する脳リン脂質の効果に関する実験 ａ）実験条件 よく眠れないという24人の健常な被験者（男女を含み、平均年齢は30.3歳）に 対して次のような実験を行った。 これら被験者は、下記四つのうちの少なくとも二つを満たさなければならない 。 Ａ）寝入るまでの時間：≧20分 Ｂ）夜間に目覚める時間：≧60分 Ｃ）夜間に目覚める回数：４ Ｄ）睡眠時間：≦６時間30分 これらの基準は連続二晩の間二つのポリグラフ記録によって証明された。これ らのポリグラフ記録はRechtschaffenおよびKaleの採点方法で算定された。 コクランおよびコックスのランダム分布表に従って均等に分けた二つのグルー プに対して、四つのゼラチン質カプセルを毎日服用させることにより、９週間に わたって二つの盲実験を並行して行った。 グループＡ：ゼラチン質カプセル１個当たり15mgの脳リン脂質 グループＢ：偽薬 被験者は、寝入るまでの時間、目覚めた時の覚醒状態、睡眠持続時間に関する ３段階類推採点表に従い、各自の睡眠について毎日記録し、最後に、病院のスタ ッフが配った質問表に答えた。 ｂ）結果 Ａ）グループＡの被験者はグループＢの被験者より深い眠りを経験したと報告し た。図２はグループＡおよびＢの睡眠の深さの等級を示す。横軸は週数を示 し、縦軸は睡眠の深さの等級を示す。 Ｂ）目覚める回数についてはグループＡの被験者（０〜１回）はグループＢの被 験者（１〜２回）より少なかったと報告した。図３はグループＡおよびＢに ついて夜間目覚めた回数を示す。横軸は週数を示し、縦軸は夜間に目覚めた 回数を示す。 Ｃ）グループＡの被験者はグループＢの被験者と比較して夜間眠れずに過ごす時 間が少なくなったことも報告している。図４はグループＡおよびＢについて 、夜間目が覚めていた時間を示す。横軸は週数を、縦軸は夜間目が覚めてい た時間（分）を示す。 Ｄ）合計睡眠時間はグループＢ（362分±28分の睡眠時間）に対してグループＡ （445分±29分の睡眠時間）が大きく上回った。図５はＡおよびＢの両グル ープの合計睡眠時間を示す。横軸は週数を、縦軸は合計睡眠時間（分）をそ れぞれ示す。 Ｅ）日中の眠気および居眠りの回数はグループＡよりグループＢの方が多かった 。図６はＡおよびＢの両グループが眠気を感じた回数を示す。横軸は週数を 、縦軸は眠気を感じた回数を示す。 ｃ）結論 これらの結果は、睡眠の質、睡眠時間および日中の覚醒状態に対する脳リン脂 質の好ましい効果を証明するものである。 ４．よく眠れない人の精神運動性に関する日中の実験 ａ）実験条件 この実験は睡眠を専門とする大学病院施設において実施した。この調査のため によく眠れないという16人を選び、二つの完全に均等なグループに分けた。２カ 月にわたって両グループに化合物Ａ（１カプセル当たり15mgの脳リン脂質）また は化合物Ｂ（偽薬）のいずれかを含むカプセル４個を毎日服用させた。被験 者に対して、１、15、43および57日に、一連の精神運動性に試験を行った。分散 分析法（ANOVA）を用いて、統計的にデータを評価した。 ｂ）結果 １）注意力試験（コンピュータ利用） 平均反応時間はグループＡで大幅に増加した。エラーの回数はグループＡ（2. 48）に対し、グループＢ（4.58）で大幅に増加した(ｐ＝0.0005)。図７は注意力 試験を示す。斜線を引いた四角がグループＡを示し、白い四角がグループＢ（偽 薬）を示す。横軸は、試験が実施された時間を、縦軸はエラー数を示す。 ２）手作業試験 この試験により、視覚−運動の協調（組み立て）の最も複雑な試験を向上させ ることが証明されたが、非常に単純な作業の試験では有効ではないことがわかっ た。 ３）十字記号試験 正確な十字をした記号の比率はグループＡの方がはるかに大きかったが、速度 に関しては影響は認められなかった。 ４）口頭聴覚試験 記憶された単語数はグループＢ（75.64％）よりグループＡ（79.96％）の方が 多かった。学習速度はグループＢ（5.54）より、グループＡ（4.76）の方がはる かに速かった。図８はグループＡおよびＢの学習速度を示す。グループＡは斜線 を引いた四角で示し、グループＢ（偽薬）は白い四角で示した。横軸は試験が実 施された時間を、縦軸は学習速度を示す。エラー数はグループＢ（1.82）に対し てグループＡ（0.56）ははるかに少なかった。図９はグループＡおよびＢのエラ ー数を示す。グループＡは斜線を引いた四角で示し、グループＢ（偽薬）は白い 四角で示した。横軸は試験が実施された時間を、縦軸はエラー数を示す。 これらの結果から脳リン脂質は学習および記憶能力を非常に高め、これはメラ トニンの分泌の増加と関連すると結論付けることができる。 ５）数字列試験 この試験では一列の数字をできる限り長く反復する。両グループ間に大きな差 はみられなかった。 ６）遅延視覚認識試験 認識された対象の数は両グループ間で変わらなかった。 従って、結論として、脳リン脂質の摂取によって学習および記憶作用に関する 記憶力が高まると言える。これらの結果は、睡眠の質および日中の注意力の向上 を証明した前記実験と一致するものである。 これらデータから、学習能力への効果を理解することができる。 以上の実験調査によって、哺乳動物の脳または適切な餌を与えた雌鶏の卵から 得られたＤＨＡおよびアラキドン酸を豊富に含むリン脂質の摂取はメラトニンの 分泌を誘導し、最終的に、睡眠の質および学習能力を向上させることが確認され た。 メラトニン分泌を調節することを目的とした本発明の製剤および／または食事 療法用組成物は、通常夜間に血漿中のメラトニン濃度の減少が認められる高齢者 や、よく眠れない人に特に適している。 本発明の製剤および／または食事療法用組成物は、睡眠および睡眠の質、覚醒 状態および注意力、気分、学習および記憶作用に極めて優れた効果をもたらす。 メラトニンの酸化防止作用およびそのフリーラジカル補足剤としての作用によ って本発明の製剤用組成物は老化の進行を遅くするために使用することもできる 。特にアルツハイマー病はその好適な対象である。この疾病ではメラトニンの夜 間分泌がほとんどない。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 25/00 Ａ６１Ｐ 25/00 25/28 25/28 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ， ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，Ｌ Ｓ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＡＵ，ＢＲ，Ｃ Ａ，ＣＮ，ＣＺ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＲ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ ，ＰＬ，ＲＵ，ＵＳ，ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 動物の脳または鶏卵から得られる長鎖ポリ不飽和脂肪酸含有率の高いリン 脂質の、メラトニン分泌を調節するための製剤および／または食事療法用組成物 製造での使用。 ２． リン脂質がアラキドン酸（20：4n-3）およびドコサヘキサエン酸すなわち ＤＨＡ（22：6n-3）を高い含有率で含む請求項１に記載のリン脂質の使用。 ３． 上記リン脂質を、経口または非経口投与可能な無毒で薬学上許容される賦 形剤、希釈剤または不活性キャリアと組み合わせた製剤および／または食事療法 用組成物で使用する、請求項１または２に記載のリン脂質の使用。 ４． 製剤および／または食事療法用組成物で上記リン脂質を少なくとも一種の ビタミンと組み合わせる請求項１〜３の少なくとも一項に記載のリン脂質の使用 。 ５． 製剤および／または食事療法用組成物で上記リン脂質を少なくとも一種の 微量元素と混合する請求項１〜４の少なくとも一項に記載のリン脂質の使用。 ６． 製剤および／または食事療法用組成物で上記リン脂質を少なくとも一種の 無機塩と組み合わせる請求項１〜５の少なくとも一項に記載のリン脂質の使用。 ７． 夜間の睡眠の質および日中の注意力を向上させる製剤および／または食事 療法用組成物を製造するための請求項１〜６のいずれか一項に記載のリン脂質の 使用。 ８． 記憶および学習能力を向上させる製剤および／または食事療法用組成物を 製造するための請求項１〜６のいずれか一項に記載のリン脂質の使用。 ９． 上記リン脂質を単位投与量当たり10〜300mgの量投与する請求項１〜８の いずれか一項に記載のリン脂質の使用。