JP2000501095A - ２’‐［［４’‐ハロ‐［１，１’‐ビフェニル］‐４‐イル］メチル］‐５’‐メチル‐スピロ［シクロペンタン‐１，７’（８’Ｈ）‐［３Ｈ］イミダゾ［２，１‐ｂ］プリン］‐４’（５’Ｈ）‐オン類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 降圧性および気管支拡張性である式Ｉの化合物、または薬学的に受容可能なその塩：

Description

【発明の詳細な説明】2'-[[4'- ハロ-[1,1'-ビフェニル]-4-イル]メチル]-5'-メチル-スピロ[シクロペ ンタン-1,7'（8'H）-[3H]イミダゾ[2,1-b]プリン]-4'（5'H）-オン類 背景 本発明は、2'-[[4'-ハロ-[1,1'-ビフェニル]-4-イル]メチル]-5'-メチル-スピ ロ[シクロペンタン-1,7'（8'H）-[3H]イミダゾ[2,1-b]プリン]-4'（5'H）-オン 類、心臓血管疾患および肺疾患の処置におけるそれらの使用、およびそれらを含 有する薬学的組成物に関する。本発明のホスホジエステラーゼ阻害性化合物は、 1991年12月26日に公開されたPCT公報第WO91/19717号において、具体的ではなく 一般的に開示された。そして、関連化合物は、1994年9月1日に公開されたPCT公 報第WO94/19351号において、一般的かつ具体的に開示された。本発明者らは、静 脈内に、皮下に、または経口的に投与した場合に、本発明の化合物が、先の刊行 物の化合物と比較して予期しない優れた血漿中濃度を示すことを見出した。発明の要旨 本発明は、式Ｉの2'-[[4'-ハロ-[1,1'-ビフェニル]-4-イル]メチル]-5'-メチ ル-スピロ[シクロペンタン-1,7'（8'H）-[3H]イミダゾ-[2,1-b]プリン]-4'（5'H ）-オン類： またはその薬学的に受容可能な塩に関する、ここで： Xは、フルオロ、クロロ、またはブロモである。 式Ｉの化合物は、降圧薬、気管支拡張薬、および血小板阻害薬として有用であ る。本発明の化合物は、ホスホジエステラーゼ酵素の阻害において有用である； 血管ホスホジエステラーゼ阻害は、血管拡張および血管弛緩に関連し、従って、 降圧活性および抗狭心活性を誘導することが期待される。また、式Ｉの化合物は 、平滑筋弛緩薬として役に立ち得、従って、気管支収縮の処置に有用である。ま た、そのような化合物は、平滑筋の増殖、血管成長、および血小板機能を阻害し 得、そして血管形成術後の再狭窄、アテローム性動脈硬化のような病気、および 血小板機能の阻害が有益な病気の処置に有用である。上記の生理学的メカニズム の１つ以上を通して、また、式Ｉの化合物は虚血疾患および末梢脈管障害（peri pheral vascular disease）の処置にも有効である。 既知の類似構造のホスホジエステラーゼ阻害剤と比較して、本発明の化合物は 容易に代謝されるものではない。それらは、高い血中濃度を維持し、抗血小板活 性および血管拡張活性を示すと同時に、ホスホジエステラーゼアイソザイムタイ プＩおよびタイプＶの阻害の良好な選択性を示す。 また、本発明は、ホスホジエステラーゼ酵素、平滑筋増殖、血管成長、または 血小板機能を阻害するため、または平滑筋を弛緩させるために有効な量の式Ｉの 化合物を含有する薬学的組成物に関する。また、本発明は、抗高血圧、抗狭心症 、気管支拡張、または血小板阻害に有効な量の式Ｉの化合物を含有する薬学的組 成物に関する。 また、本発明は、哺乳動物における高血圧、狭心症、気管支収縮、血管形成術 後の再狭窄、アテローム性動脈硬化、虚血、末梢脈管障害、または血小板阻害が 有益な疾患を処置する方法に関する。この方法は、そのような処置が必要な哺乳 動物に、上記いずれかの疾患を処置するために有効な量の式Ｉの化合物を投与す る工程を包含する。また、本発明は、グアノシン3',5'-サイクリックモノホスフ ェート（cGMP）レベルを維持または増加するために有効な量の式Ｉの化合物を投 与することによって、哺乳動物におけるcGMPレベルを維持する方法に関する。発明の詳細な説明 本発明の化合物は、塩基性窒素を含む部分を有し、そして有機酸および無機酸 を用いて、薬学的に受容可能な塩を形成し得る。そのような塩の形成に適切な酸 の例は、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、クエン酸、シュウ酸、マロン酸、サリチル 酸、リンゴ酸、フマル酸、コハク酸、アスコルビン酸、マレイン酸、メタンスル ホン酸、および当業者に周知な他の無機酸およびカルボン酸である。この塩は、 従来の方法で、遊離塩基形状のこの化合物を、塩を生成するのに十分な量の所望 の酸と接触されることにより、調製される。 本発明の化合物は、第WO91/19717号および第WO94/19351号に記載された経路の ようないくつかの経路により調製され得る。次の実施例は、代表的な手順である が、これらの化合物の調製はこれらの手順に限定されないことを当業者は認識す る。以下の実施例では、Meはメチルを表し、Bnはベンジルを表し、Phはフェニル を表し、そしてSEMはトリメチルシリルエトキシメチルを表す。 実施例１ 工程１： 4-クロロビフェニル（115g、0.61mol）のCH₂Cl₂（l200ml）撹拌氷冷溶液に、A lCl₃（97.5g、0.73mol）を、0.5時間にわたり分割して加える。塩化アセチル（4 8ml、0.68mol）を0.75時間にわたり滴下し、そして生じた赤色の反応混合物を０ 〜５℃で撹拌する。3.5時間後、この反応混合物を10℃まで温め、次いで激しく 撹拌しながら、氷／1M HClのスラリー（1000ml）上に注ぐ。この混合物を一晩静 置し、次いで有機層を飽和NaCl溶液で洗浄し、乾燥し（MgSO₄）、濾過し、そし て蒸発させて淡黄色の固体を得る。この固体をエーテルを用いて粉砕し、回収し てケトン１（122g、87％）を得る。¹H NMR CDCl₃δ8.01m,2H;7.62m,2H;7.53m,2H ;7.41m,2H;2.62s,3H。工程２ ： ケトン１（60g、0.26mol）、イオウ（12.5g、0.39mol）、およびモルホリン（ 38ml、0.43mol）の混合物を環流下で加熱する。28時間後、生じた褐色の固体をN aOH（240g）の水（1200ml）溶液中に加える。この混合物を24時間環流し、冷却 し、沈殿物を回収し、水で洗浄し、そして風乾する。この固体を熱水（2000ml） 中に懸濁し、約200ｍlの１M HClでpH２まで酸性化する。この混合物を冷却し、 この固体を回収し、水で洗浄し、そして風乾する。この固体をEtOAc（1000ml） に入れ、飽和NaCl溶液で洗浄し、乾燥し（MgSO₄）、濾過し、そして乾燥状態ま で蒸発させて、褐色の固体として酸２（54.9g、86％）を得る。¹H NMR CDCl₃δ7 .52m,4H;7.40m,4H;3.72s,2H。工程３ ： ジアミノウラシル３（33.3g、0.21mol）、酸２（58.0g、0.24mol）および４− ジメチルアミノピリジン（2.6g、0.021mol）のDMF（1000ml）撹拌溶液に、1-（3 -ジメチルアミノプロピル）-3-エチルカルボジイミドメチオジド（76g、0.26mol ）を加える。室温で一晩撹拌し、次いで、この反応混合物を氷水スラリー（3000 ml）上に注ぐ。固体を回収し、水およびエタノールで洗浄し、そして真空中で乾 燥し、アミド４（69.9g、87％）を得る。このアミドは、これ以上精製せずに使 用する。¹H NMR DMSO-d6δ10.51s,1H;8.64s,1H;7.70-7.40m,8H;6.01s,2H;3.65s, 2H;3.02s,3H。工程４ ： アミド４（45.0g、0.117mole）のPOCl₃（1500ml）撹拌懸濁液を90〜95℃で43 時間加熱し、次いで100℃で16時間、次いで110℃で８時間加熱する。減圧下の蒸 留によりPOCl₃を除去し、そして生じたオイルを氷浴中で冷却する。飽和NaHCO₃ を慎重に加えて残留POCl₃を中和し、生じた固体を濾過で回収し、水で数回洗浄 し、風乾し、次いで真空中、50℃で乾燥する。この固体（53g）をCH₂Cl₂/CH₃OH （9:1）（1000ml）で粉砕し、回収し、次いで穏やかに加熱しながらCH₃OH/CH₂Cl₂ （1:1）でさらに粉砕する。この濾液を真空中で濃縮し、褐色の固体としてクロ ロプリン５（25.6g）を得る。CH₂Cl₂/CH₃OH（9:1）粉砕からの濾液を真空中で濃 縮し、そして最小容量のCH₂Cl₂/CH₃OH（約4:1）を吸収させる。固体が分離し始 めるまで、生じた溶液にヘキサンを加える。褐色の固体を回収し、CH₂Cl₂で洗浄 して、追加のクロロプリン５（6.0g）を得る。このクロロプリン（真空中で乾燥 後の合計収量31.0g、69％）は、これ以上精製せずに次の工程で使用する。¹H NM R CDCl₃δ7.53-7.46m,4H;7.41-7.37m,4H;4.31s,2H;3.75s,3H。工程５ ： クロロプリン５（11.7g、0.030mole）、1-アミノ-1-シクロペンタンメタノー ル（7.1g、0.06mole）およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン（13.2ml、0.076m ole）のNMP（25ml）懸濁液を、アルゴンガス中120℃で30時間加熱する。この反 応混合物を冷却し、次いで氷／水の撹拌スラリー（1000ml）に注ぐ。沈殿物を回 収し、水で洗浄し、風乾し、そして真空中、50℃で乾燥する。その固体（13.3g ）を、温CH₂Cl₂/CH₃OH（1:1）で粉砕し、次いで濾過する。その濾液をシリカゲ ル（75g）上に吸着させ、フラッシュクロマトグラフ（CH₂Cl₂/CH₃OH（24:1）、 次いで生成物が溶出し始めたときにCH₂Cl₂/CH₃OH（19:1））を行い、灰白色の固 体としてアルコール６（7.5g、53％）を得る。C₂₅H₂₆N₅O₂Cl・0.75H₂O 理論値:C ,62.11;H,5.73;N,14.49.実測値:C,62.38;H,5.59;N,14.30％.MS（FAB）m/z 466.1 ,464.1（M+H）⁺。工程６ ： アルコール６（12.1g、0.026mol）のCH₂Cl₂（750ml）撹拌懸濁液にSOCl₂（5.7 ml、0.078mol）を速やかに滴下する。この反応混合物を３時間よく撹拌し、次い で、真空下で蒸発させる。その残留物をCH₃OH（100ml）に溶解し、濾過し、その 濾液を10％NaHCO₃急速撹拌溶液に注ぐ。沈殿物を回収し、水（1000ml）およびCH₃ OH（150ml）で洗浄し、次いで乾燥する。CH₃OH/CH₂Cl₂から再結晶して、灰白色 の粉末（10.30g、88％）として生成物７を得る。C₂₅H₂₄N₅OCl 理論値:C,67.33;H ,5.42;N,15.70;Cl,7.95 実測値:C,67.41;H,5.66;N,15.41;Cl,8.24％。MS（FAB） m/z448.3,446.3（M+H）⁺。工程７ ： スチームバスで温められたテトラサイクリックグアニン７（10.30g、0.023mol ）のEtOH（125ml）懸濁液に、濃HCl（1.9ml、0.023mol）を加える。生じた濁っ た混合物を濾過し、そしてフィルターのパッドを温EtOH（75ml）で洗浄する。濾 液および洗液を合わせたものに、熱水（100ml）を加え、その溶液を放置する。 結晶性の塊を回収し、EtOH/H₂O（1:1）で洗浄し、風乾し、そして真空中、50℃ で乾燥して、塩酸塩８（7.0g、63％）を得る。生成物８の二次回収物（second c rop）（3.0g、27％）は母液から得る。２つの回収物を合わせ、そして真空中、5 0℃でP₂O₅で乾燥する。C₂₅H₂₅N₅OCl₂・1.75H₂O 理論値:C,58.43;H,5.59;N,13.63 ;Cl,13.80 実測値:C,58.45;H,5.24;N,13.45;Cl,13.70％。¹H NMR CD₃ODδ7.58-7 .56m,4H;7.43-7.37m,4H;4.38s,2H;4.19s,2H;3.46s,3H;2.10-1.79m,8H。 実施例２ 工程１： 実施例１の工程１の手順を使用し、ブロモビフェニル（51.36g，0.22mol）を 用いて、明るい黄色の固体としてケトン９（50.94g、84％）を得る。¹H NMR CDC l₃δ8.03dd（J=6.6および2.2Hz）,2H;7.65dd（J=6.6および2.2Hz）,2H;7.55dd（ J=6.6および2.2Hz）,2H;7.49dd（J=6.6および2.2Hz）,2H;2.64s,3H。工程２ ： 実施例１の工程２の手順を使用し、イオウおよびモルホリンと共に４時間加熱 して、ケトン９（50.93g、0.19mol）を、白色固体である酸10（51.3g、95％）に 転化する。¹H NMR DMSO-d6δ7.65-7.59,m,6H;7.35d（J=8.2Hz）,2H;3.60s,2H。工程３ ： 実施例１の工程３の手順を使用して、酸10（51.3g、0.18mol）を処理し、黄色 の固体としてアミド12（61.2g、82％）を得る。¹H NMR DMSO-d6δ10.52s,1H;8.6 6s,1H;7.66-7.59m,6H;7.43d（J=8.2Hz）,2H;6.01s,2H;3.61s,2H;3.04s,3H。工程４ ： アミド12（40.0g、0.093mole）のPOCl₃（2100ml）撹拌懸濁液を、90〜100℃で ６日間加熱する。減圧下（45℃未満）で回転蒸発（rotovaporation）によりPOCl₃ を除去し、そして生じたオイルを、最小量のCH₂Cl₂（〜400ml）に溶解する。こ のCH₂Cl₂溶液を、冷飽和NaHCO₃（2200ml）に１時間にわたり注意深く注ぐことに より、残留POCl₃を中和する。この混合物を室温で一晩撹拌し、濾過により生じ た固体を回収し、水で数回洗浄し、風乾し、そして真空下、60℃で乾燥する。こ の固体（28.47g、71％）は、それぞれ、クロロプリン13およびキサンチン14の26 :1の混合物である（¹H NMR分析）。¹H NMR CDCl₃δ7.64-7.58m,6H;7.38d（J=8.2 Hz）,2H;4.13s,2H;3.61s,3H。工程５ ： クロロプリン13（28.57g、0.066mole）、1-アミノ-1-シクロペンタンメタノー ル（19.77g、0.17mole）およびN,N-ジイソプロピルエチルアミン（30ml、0.17mo le）のNMP（96ml）懸濁液を、アルゴン中、120℃で18時間加熱する。この反応混 合物を冷却し、次いで、氷／ブラインの撹拌スラリー（1000ml）上に注ぐ。沈殿 物を回収し、水で洗浄し、風乾し、そして真空中、50℃で乾燥する。この固体（ 42.36g）をCH₂Cl₂-CH₃OH（4:1）で粉砕し、次いで濾過して、アルコール15およ びキサンチン14からなる17.48gの固体を得る。この濾液をシリカゲル上に吸着さ せ、そしてフラッシュクロマトグラフィー[グラジエントCH₂Cl₂/CH₃OH=32:1〜19 :1（生成物が溶出を始める）〜11.5:1]を行い、灰白色の固体としてアルコール1 5（7.4g、22％）を得、キサンチン14を含んだ不純物15（5.79g）を得る。¹H NMR CDCl₃δ7.64-7.58m,6H;7.37m,2H:5.76-5.63m,1H;5.09,4.89t,t(J=5.8Hz),1H;4. 02,3.97s,s,2H;3.64d（J=5.8Hz）,2H;3.36s,3H;2.05m,2H;1.72m,4H;1.53m,2H。工程６ ： 実施例１の工程６の手順に従って、アルコール15（10.1g、0.020mol）を処理 し、白色固体としてテトラサイクリックグアニン16（9.6g、95％）を得る。¹H N MR DMSO-d6δ7.65-7.58,m,6H;7.37,d（J=8.2Hz）,2H;4.02s,2H;4.80s,2H;3.18s, 3H;1.75-1.62m,8H。工程７ ： CH₃OHから２回、次いでエタノール−水から２回再結晶する以外は、実施例１ の工程７と同様の手順を使用して、アミン16（11.7g，0.024mol）を処理し、白 色の固体として塩酸塩17（10.22g、81％）を得る。C₂₅H₂₅N₅OBrCl・3H₂O理論値: C,51.69;H,5.39;N,12.06;Br,13.75;Cl,6.10 実測値:C,51.58;H,5.63;N,11.84;Br ,13.55;Cl,5.77％。MS（FAB）m/z 490.1,491.1（M+H）。¹H NMR DMSO-d6+D₂Oδ7 .63-7.56,m,6H;7.37,d（J=8.2Hz）,2H;4.28s,2H;4.12s,2H;3.31s,3H;1.98-1.87m ,4H;1.79-1.61m,4H。 実施例３ 工程１： Pd（OH）₂（５g）のCH₃OH懸濁液に、HNH₄CO₂(14g、223mmol)を加え、次に5'- メチル-3'−（フェニルメチル）-スピロ[シクロペンタン-1,7'（8'H）-[3'H]-イ ミダゾ[2,1-b]プリン]-4'（5'H）-オン（15g、44.7mmol）のCH₃OH溶液を室温で 加える（全容積1000ml）。この混合物を環流下で６時間加熱し、濾過し、その濾 液を濃縮して白色の固体を得る。この触媒を、熱10％CH₃OH/CH₂Cl₂中で撹拌し、 濾過し、そして濃縮する。濃縮した濾液を合わせ、10-％CH₃OH/CH₂Cl₂（400ml） に溶解し、そしてNaHCO₃水で洗浄する。この水溶液を、10％CH₃OH/CH₂Cl₂（200m l×２）で抽出し、合わせた抽出物をMgSO₄で乾燥し、濾過し、そして濃縮して、 白色の固体として化合物18（9.7g、88.5％）を得る。¹H NMR CDCl₃δ7.62,s,1H; 3.95,s,2H;3.40,s,3H;1.8-2.0,m,br,4H;1.6-1.8,m,br,4H。工程２ ： 室温でNaH（3.16g、60％、79mmol）を、18（9.7g、39.5mmol）のTHF（400ml） 混合物に加える。室温で1.5時間撹拌し、トリメチルシリルエトキシメチルクロ ライド（9.88g、59.25mmol）を加え、そして室温で1.5時間撹拌する。生じた黄 色の混合物を氷でクエンチし、EtOAc（200ml×２）で抽出し、EtOAc抽出液を合 わせ、ブラインで洗浄し、MgSO₄で乾燥し、濾過し、そして濃縮する。この粗生 成物をSiO₂のフラッシュクロマトグラフィー（１％〜10％ CH₃OH/CH₂Cl₂）で精 製し、化合物19（11.4g）、20（2.37g）、ならびに19および20の混合物（1.1g） を得る（98％）。19の¹H NMR CDCl₃δ7.61,s,1H;5.65,s,2H;3.91,s,2H;3.62,t,2 H;3.38,s,3H;1.8-2.0,m,4H;1.6-1.8,m,4H;0.95,t,3H;0.00,s,9H。20の¹H NMR CD Cl₃δ7.26,s,1H;5.32,s,2H;4.00,s,2H;3.53,t,2H;3.40,s,3H;1.8-2.0,m,4H;1.6- 1.8,br,4H;0.92,t,2H;0.00,s,9H。工程３ ： Pd（PPh₃）₄（1.5g、1.3mmol）のトルエン（52ml）混合物に、p-ブロムベンズ アルデヒド（4.8g、25.98mmol）、Na₂CO₃水（26ml、2.0M、52mmol）、ならびにp -フルオロフェニルボロン酸（４g、28.58mmol）のEtOH（13ml）およびCH₃OH（２ ml）溶液を加える。この混合物を環流下６時間加熱し、室温まで冷却し、NaHCO₃ 水に注ぎ、EtOAc（200ml×３）で抽出し、MgSO₄で乾燥し、濾過し、そして濃縮 して黒みがかかった濃厚オイルを得る。この粗生成物をSiO₂のフラッシュカラム クロマトグラフィー（1:9、1:7 EtOAc/ヘキサン）により、精製し、化合物21（4 .88g、93.8％）を得る。¹H NMR CDCl₃δ10.06,s,1H;7.96,d,2H;7.72,d,2H;7.62, dd,2H;7.18,t,2H。工程４ ： n-BuLi（6.65ml、2.5M、16.62mmol）を、ジイソプロピルアミン（1.68g、16.6 2mmol）のTHF溶液（30ml）に０℃で加える。０℃で１時間撹拌し、-70℃まで冷 却し、そして化合物19（4.8g、12.78mmol）のTHF溶液（60ml）を滴下する。この 添加が完了した後、この混合物を-70℃で１時間撹拌し、次いであらかじめ冷却 した21（3.85g、19.17mmol）のTHF溶液（15ml）を加える。この混合物を-70℃で ３時間撹拌し、AcOH（４ml）でクエンチし、０℃まで温め、そしてNH₄Cl水（30m l）で処理する。この混合物をEtOAc（200ml×３）で抽出し、NaHCO₃水およびブ ラインで洗浄し、乾燥し（MgSO₄）、そして濃縮する。この粗生成物をSiO₂のフ ラッシュカラムクロマトグラフィー（０％〜２％ CH₃OH/EtOAc）により精製し、 化合物22（5.34g、72.6％）を得る。¹H NMR CDCl₃δ7.55,m,4H;7.54,2H;7.15,t, 2H;6.05,d,br,1H;5.56,ABq,2H;3.97,s,2H;3.60,t,2H;3.38,s,3H;1.8-2.0,m,4H;1 .6-1.8,m,4H;0.90,m,2H;0.00,s,9H。工程５ ： EtSiH（5.34g、45.4mmol）を、22（5.23g、9.08mmol）のTFA溶液（24ml）に室 温で加える。この反応混合物を室温で一晩撹拌し、NaHCO₃水で注意深く中和し、 10％CH₃OH/CH₂Cl₂で抽出し、MgSO₄で乾燥し、濾過し、そして濃縮する。この粗 生成物をSiO₂のフラッシュカラムクロマトグラフィー（３％〜10％ CH₃OH/CH₂Cl₂ ）により精製し、化合物24（3.35g）を得る。¹H NMR CDCl₃δ7.51,m,4H;7.49,d ,2H;7.11,t,2H;4.18,s,2H;3.92,s,2H;3.39,s,3H;1.8-2.0,m,4H:1.6-1.8,m,4H。工程６ ： 実施例３の工程４の手順で化合物20（８g、21.7mmol）を使用して、化合物23 （4.6g、37％）を調製する。¹H NMR CDCl₃δ7.50,m,6H;7.10,t,2H;6.18,s,1H;5. 21,s,2H;3.99,ABq,2H;3.39,s,3H;3.10,m,2H;1.8-2.0,m,4H;1.6-1.8,m,4H;0.65,t ,2H;-0.10,s,9H。工程７ ： 実施例３の工程５の手順に従って、化合物23を処理し、化合物24を得る。¹H N MR CDCl₃δ7.51,m,4H;7.49,d,2H;7.11,t,2H;4.18,s,2H;3.92,s,2H;3.39,s,3H;1. 8-2.0,m,4H;1.6-1.8,m,4H。工程８ ： 24（17.5g、40.74mmol）の熱EtOH懸濁液に濃HCl（5.1ml、61.2mmol）を滴下し 、透明溶液を得る。この溶液を室温で30分間撹拌し、EtOHを蒸発させて、白色の 固体を得、この固体を、真空中、50℃でP₂O₅で乾燥する。C₂₅H₂₄N₅OF.1.05HCl.0 .75H₂O 理論値:C,62.39;H,5.56;N,14.55;Cl,7.73,F,3.95実測値:C,62.44;H,5.71 ;N,14.38;Cl,7.80;F,4.00％。¹H NMR DMSO-d6δ10.65,d,br,1H;7.7,m,2H;7.65,d ,2H;7.40,d,2H;7.26,t,2H;4.32s,2H;4.19s,2H;3.39s,3H;1.6-2.1m,8H。薬学的調製物 式Ｉの化合物は、適切な薬学的キャリアと結合され得、非経口的または経口的 投与に適切な薬学的組成物を調製する。このような薬学的組成物は、哺乳動物の 高血圧症および気管支収縮のような心臓血管疾患および肺疾患の処置に有用であ る。 本化合物の降圧に有効な１日用量（ED₅₀）は、代表的には、哺乳動物の体重１ kgあたり約１〜約100mgの範囲であり、単一用量または分割用量で投与される。 投与されるべき正確な用量は、かかりつけの臨床医によって決定され得、前掲の 範囲内にある特定の化合物、ならびに個体の年齢、体重および症状に依存する。 一般的に、高血圧症または気管支収縮についての処置を必要とする人の処置に おいて、本化合物は、患者１人あたり約10〜約500mgの範囲の投薬量で１日あた り何回も投与でき、１日あたり約10〜約2000mgの１日の総投薬量が提供される。 本発明の組成物は、経口的または非経口的に投与され得る。代表的な注射可能 な処方物には、溶液および懸濁液が挙げられる。代表的な経口処方物には、錠剤 、カプセル剤、シロップ剤、懸濁剤、エリキシル剤が挙げられる。また、機械的 な送達系（例えば、経皮性の投与形態）も意図される。 上記の処方物における使用についての、代表的な薬学的に受容可能なキャリア は、糖（例えば、ラクトース、スクロース、マンニトールおよびソルビトール） 、デンプン（例えば、トウモロコシデンプン、タピオカデンプンおよびジャガイ モデンプン）；セルロースおよび誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロース ナトリウム、エチルセルロースナトリウムおよびメチルセルロースナトリウム） ；カルシウムリン酸塩（例えば、リン酸ジカルシウムおよびリン酸トリカルシウ ム）；硫酸ナトリウム；硫酸カルシウム；ポリビニルピロリドン、ポリビニルア ルコール；ステアリン酸；アルカリ土類金属のステアリン酸塩（例えば、ステア リン酸マグネシウムおよびステアリン酸カルシウム）、ステアリン酸、植物油（ 例えば、落花生油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油およびトウモロコシ油）；非イ オン性、カチオン性およびアニオン性界面活性剤；エチレングリコール重合体； β−シクロデキストリン；脂肪アルコールおよび穀物の加水分解固形物（hydrol yzed cereal solids）；ならびに他の無毒性で適合性の賦形剤、結合剤、崩 壊剤、緩衝剤、保存剤、抗酸化剤、潤滑剤、香料（flavoring agents）、および 薬学的処方物において一般的に使用される類似物により例証される。 下記は、経口的および非経口的処方物の代表的な例である。ここで、用語「有 効成分」は、式Ｉの化合物をいう。 カプセル 量（mg） 有効成分 250.0 125.0 ラクトース 173.0 86.5 トウモロコシデンプン 75.0 37.5 ステアリン酸マグネシウム 2.0 1.0 総量 500.0 250.0 この有効成分、ラクトースおよびトウモロコシデンプンを均一になるまで調合 する；次いで、生じた粉末にステアリン酸マグネシウムを調合する。この混合物 を、適切なサイズの硬いツーピースゼラチンカプセルにカプセル化する。 錠剤 量（mg） 有効成分 250.0 125.0 ラクトース 161.0 80.5 トウモロコシデンプン 12.0 6.0 水（1000錠あたり） 120ml 60ml （蒸発させた）（蒸発させた） トウモロコシデンプン 75.0 37.5 ステアリン酸マグネシウム 2.0 1.0 総量 500.0 250.0 この有効成分を均一になるまでラクトースと調合する。少ない方の量のトウモ ロコシデンプンを水と調合して、生じたトウモロコシデンプンペーストを加え、 次いで均一な湿潤塊が形成されるまで混合する。残りのトウモロコシデンプンを この湿潤塊に加え、均一な顆粒が得られるまで混合する。3/4インチのステンレ ス鋼のふるいを使用して、この顆粒を適切な製粉機械に通してふるい分けする。 製粉した顆粒を、適切な乾燥オーブン中において、所望の含水量が得られるまで 乾燥する。乾燥した顆粒を、16メッシュステンレス鋼のふるいを使用した適切な 製粉機械に通して、製粉する。ステアリン酸マグネシウムを混合し、得られた混 合物を、所望の形状、厚さ、硬度および崩壊性の錠剤に圧縮する。 注射可能溶液 mg/ml 有効成分 5.00 パラヒドロキシ安息香酸メチル 0.80 パラヒドロキシ安息香酸プロピル 0.10 エデト酸ジナトリウム 0.10 クエン酸１水和物 0.08 デキストロース 40.0 注射用水 十分量（qs.ad.） 1.0ml 60℃と70℃の間の温度で、これらのp-ヒドロキシ安息香酸類を注射用水の一部 に溶解し、そしてこの溶液を20℃〜30℃に冷却する。全ての他の賦形剤および有 効成分を投入し、溶解させる。この溶液を最終的な体積にして、滅菌した膜を通 して濾過し、無菌の容器に充填する。2'-[[4'- ハロ-[1,1'-ビフェニル]-4-イル]メチル]-5'-メチル-スピロ[シクロペ ンタン-1,7’（8'H）-[3H]イミダゾ[2,1-b]プリン]-4’（5'H）-オン類の生物学 的活性 本化合物は、ホスホジエステラーゼ酵素（特にホスホジエステラーゼアイソザ イムのタイプＩおよびタイプＶ）の阻害に有用である。これらのホスホジエステ ラーゼ酵素は、平滑筋においてcGMPを加水分解することが公知である。高いレベ ルのcGMPは、血管平滑筋の弛緩に関係し、結果的な後の血圧の減少を伴う。従っ て、これらのホスホジエステラーゼ酵素の阻害により、筋肉中のcGMPレベルが維 持されるかまたは増加されるかのいずれかがなされ、後の血圧の減少を伴うこと が考えられる。インビボの降圧活性を、自然発症高血圧ラット（SHR）において 、経口的に測定するインビトロにおけるホスホジエステラーゼ阻害 化合物を、サイクリックグアノシンモノホスフェート（cGMP）を加水分解する ２つのホスホジエステラーゼ酵素の阻害について評価する。第１の酵素、カルシ ウム−カルモジュリン依存性ホスホジエステラーゼ（CaM-PDE）は、ウシ大動脈 のホモジネートから得られ、DEAE-セルロースおよびカルモジュリン−アフィニ ティークロマトグラフィーにより精製した、部分的に純粋な酵素である。この酵 素は、Ca-カルモジュリンにより数倍に活性化され、cGMPに対して選択的である が、cAMPもまた、加水分解する。第２の酵素、cGMPホスホジエステラーゼ（cGMP -PDE）は、ウシの肺から得られ、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過、お よびスクロース勾配遠心法により精製した均一の酵素である。cGMP-PDEは、cGMP に対して選択性が高い。ウシ大動脈のホモジネート、ならびにウシ大動脈の内皮 細胞および血管平滑筋の初代培養物は、肺のアイソザイムと非常に類似の性質を 有する酵素を含む。 この酵素アッセイを、Biomek Automated Pipetting Stationを使用して実施す る。化合物を、蒸留水またはDMSOに溶解し、そして10％DMSOで希釈する。化合物 を、対数間隔の数個の濃度（代表的には、0.1、1.0、10および100μMの最終濃度 ）で検定する。 アッセイは、次の成分を含む： １μMの基質³H-cGMP 50mMのTris-HCl（pH7.5）、5mMのMgCl₂ 0.5mg/mlの蛇毒アルカリホスファターゼ 0.1μMのカルモジュリンおよび1mMのCaCl₂（CaM-PDE用のみ） アッセイは、酵素の添加により開始し、10mMイソブチルメチルキサンチン（一 般的なホスホジエステラーゼ阻害剤）の添加により停止する。アッセイは、25分 間室温で実施し、基質の加水分解が５〜１０％達成される。次いで、負に荷電し た基質を、陰イオン交換樹脂（AG1-X8）との結合および遠心分離または濾過によ り、グアノシンから分離する。そして、この生成物を、残存している可溶性物質 の１分あたりの計数（cpm）をシンチレーションでカウントすることにより、定 量する。阻害のパーセントを、次のように計算する： 阻害の％＝100-[（化合物−ブランクのcpm）/（対照−ブランクのcpm）×100] 活性は、IC₅₀値（すなわち、酵素活性を５０パーセント阻害するために必要な濃 度）として表す。ラットにおける降圧活性 本発明の化合物が血圧を下げる能力は、意識のある自然発症高血圧ラット（SH R）においてインビボで評価できる。SHRの雄は、Taconic Farms,Germantown New Yorkから購入し、エーテルで麻酔した時点で、約16〜18週令である。Baum,TらJ .Cardiovasc.Pharmacol.５巻、655-667頁、（1983）に記載されているように、 尾側（腹側の尾）の動脈に、ポリエチレン管（PE50）を用いてカニューレ挿入し 、血圧および心拍数を記録する。ラットを、プラスチック製の円柱状のケージに 置き、その場所でラットはすぐに意識を回復する。化合物の投与の前に約90分間 、血圧と心拍数を安定にするために放置する。化合物を、給餌針（feeding need le）を介して、0.4％水溶性メチルセルロースビヒクルの水溶液または懸濁液と して経口投与する。この化合物または0.4％水溶性メチルセルロースビヒクルを 、一晩絶食したSHRに４ml/kgの量で与える。活性は、水銀柱のミリメーター（mm Hg）で、平均血圧（MBP）の低下として表す。化合物により引き起こされる変化 は、適切なプラセボ群における変化と比較する。血漿中濃度 ： テスト化合物を10mpkで経口的にSHRへ投与し、引き続き、0.5、１、２、３お よび４時間の間隔で血漿中濃度を測定した。投与後の時間に対し血漿中濃度（μ g/ml）をプロットし、曲線下面積（AUC、μghr/ml）を計算した。 次のテストの結果は、既知の化合物である、2'-[[（4'-メトキシ-1,1'-ビフェ ニル）-4-イル]メチル]-5'-メチル-スピロ[シクロペンタン-1,7'（8'H）-[3H]イ ミダゾ-[2,1-b]プリン]-4'（5'H）-オン（参考化合物）と比較したものである。 活性

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 7/02 Ａ６１Ｋ 31/00 ６０７Ａ 11/08 ６１１Ｄ 43/00 ６４３Ｄ Ａ６１Ｋ 31/522 31/52 ６０１ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ Ｚ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ， ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＲ，ＫＺ，Ｌ Ｃ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ， ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ (54)【発明の名称】 ２’‐［［４’‐ハロ‐［１，１’‐ビフェニル］‐４‐イル］メチル］‐５’‐メチル‐スピ ロ［シクロペンタン‐１，７’（８’Ｈ）‐［３Ｈ］イミダゾ［２，１‐ｂ］プリン］‐４’ （５’Ｈ）‐オン類

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．以下の式を有する化合物または薬学的に受容可能なその塩： ここで、Ｘは、クロロ、フルオロまたはブロモである。 ２．以下から選択される請求項１に記載の化合物： 2'-[[4'-フルオロ-[1,1'-ビフェニル]-4-イル]メチル]-5'-メチル-スピロ[シ クロペンタン-1,7’（8'H）-[3H]イミダゾ[2,1-b]プリン]-4'（5'H）-オン； 2'-[[4'-クロロ-[1,1'-ビフェニル]-4-イル]メチル]-5'-メチル-スピロ[シク ロペンタン-1,7'（8'H）-[3H]イミダゾ[2,1-b]プリン]-4'（5'H）-オン；および 2'-[[4'-ブロモ-[1,1'-ビフェニル]-4-イル]メチル]-5'-メチル-スピロ[シク ロペンタン-1,7'（8'H）-[3H]イミダゾ[2,1-b]プリン]-4'（5'H）-オン。 ３．薬学的に受容可能なキャリアに、有効量の請求項１または請求項２に記載の 化合物を含有する薬学的組成物。 ４．請求項１または請求項２に記載の化合物と、薬学的に受容可能なキャリアと を混合する工程を包含する、請求項３に記載の薬学的組成物を調製する方法。 ５．高血圧、狭心症、気管支収縮、血管形成術後の再狭窄、アテローム性動脈硬 化症、虚血、末梢脈管障害、あるいは血小板阻害が有益な疾患を処置する薬物か 、またはグアノシン3',5'-サイクリックモノホスフェート（cGMP）レベルを維持 する薬物を調製するための、請求項１または請求項２に記載の化合物の使用。 ６．高血圧、狭心症、気管支収縮、血管形成術後の再狭窄、アテローム性動脈硬 化症、虚血、末梢脈管障害、あるいは血小板阻害が有益な疾患を処置する方法ま たはグアノシン3',5'-サイクリックモノホスフェート（cGMP）レベルを維持する 方法であって、有効量の請求項１または請求項２に記載の化合物を、そのような 処置を必要とする哺乳動物に投与する工程を包含する、方法。