JP2000500984A

JP2000500984A - ２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシペプチドの製造方法

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Publication number: JP2000500984A
Application number: JP9520934A
Authority: JP
Inventors: イエシユケ，ペーター; ボンゼ，ゲルハルト; テイールキング，ゲルハルト; エツエル，ビンフリート; ハルダー，アヒム; メンケ，ノルベルト; クラインカウフ，ホルスト; ツオヒヤー，ライナー; 勝春飯沼; 功一宮本
Original assignee: バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト
Priority date: 1995-12-07
Filing date: 1996-11-25
Publication date: 2000-02-02
Anticipated expiration: 2016-11-25
Also published as: EP0865498B1; AU705762B2; JP2008092952A; HUP9903808A3; CN1208439A; HU223879B1; BR9611928A; CA2239537C; ATE226640T1; ES2184896T3; WO1997020945A1; HUP9903808A2; CA2239537A1; EP0865498A1; DE59609824D1; NZ322929A; HK1018482A1; DK0865498T3; PT865498E; DE19545639A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、無胞子不完全菌目（Ａｇｏｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ）の真菌株またはそれらから単離された酵素製剤による、式（Ｉ）（式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は明細書中に示された意味を有する）で示される２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシペプチドの新規な製造方法に関する。

Description

【発明の詳細な説明】２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシペプチドの製造方法本発明は、その幾つかが既知である、２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシペプチドの新規な製造方法に関する。微生物法による２４個の環原子を有する種々の環状、アリール乳酸含有デプシペプチド、例えば、ＰＦ１０２２Ａ、ＰＦ１０２２Ｂ、ＰＦ１０２２Ｃ、ＰＦ１０２２ＤおよびＰＦ１０２２Ｅの製造は既に記載された（シクロオクタデプシペプチドの発酵：欧州特許出願公開第３８２１７３号明細書；Ｔ．Ｓａｓａｋｉｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ４５，１９９２，６９２−６９７における、ミセリア・ステリリア（ＦＥＲＭＢＰ−２６７１；前名称ＦＥＲＭＰ−１０５０４）からのＰＦ１０２２Ａ；同一の培養物から単離された：ＰＦ１０２２Ｂ、ＰＦ１０２２ＣおよびＰＦ１０２２Ｄ：ＪＰ −Ｐａｔ．５１７０７４０、ＰＦ１０２２Ｅ：ＪＰ−Ｐａｔ．６１８４１２６を参照）。ＰＦ１０２２群の化合物は以下の式（Ｉ）を有する：また、２４個の環原子を有する多種類の環状、置換アリール乳酸含有デプシペプチドが化学合成法によって製造することができることは既に開示された（シクロオクタデプシペプチドの全合成：ＪＰＰａｔ．５２２９９９７；ＪＰＰａｔ．５３２０１４８；ＭａｋｏｔｏＯｈｙａｍａｅｔａｌ．，Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５８（６），１９９４，１１９３−１１９４頁；ＭａｋｉｏＫｏｂａｙｓｈｉｅｔａｌ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｐ．ＳａｎｋｙｏＲｅｓ．Ｌａｂ．４６，１９９４，６７−７５頁；ＳｔｅｐｈｅｎＪ．Ｎｅｌｓｏｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ４７，（１１），１９９４，１３２２−１３２７頁；Ｊ．Ｓｃｈｅｒｋｅｎｂｅｃｋｅｔａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ５１（３１），１９９５，８４５９−８４７０頁［ＰＦ１０２２Ａ］；国際公開第９４／１９３３４号明細書；国際公開第９５／１９０５３号明細書；欧州特許出願公開第６３４４０８号明細書；欧州特許出願公開第６２６３７５号明細書；欧州特許出願公開第６２６３７６号明細書を参照）。さらに、２４個の環原子を有する一定のアリール乳酸含有シクロデプシペプチドは殺内部寄生体剤として使用することができることは知られている（例えば、欧州特許出願公開第３８２号明細書；欧州特許出願公開第５０３５３８号明細書；国際公開第９３／１９０５３号明細書；欧州特許出願公開第０６３４４０８号明細書；国際公開第９４／１９３３４号明細書；；国際公開第９５／０７２７２号明細書；欧州特許出願公開第６２６３７５号明細書；欧州特許出願公開第６２６３７６号明細書を参照）。化学合成法によって、一定のシクロオクタデプシペプチドのフェニル乳酸フラグメント中の置換基Ｒ¹の広範な変形が可能になるが（国際公開第９４／１９３３４号明細書；国際公開第９５／１９０５３号明細書；欧州特許出願公開第６３４４０８号明細書；欧州特許出願公開第６２６３７５号明細書；欧州特許出願公開第６２６３７６号明細書を参照）、現在まで、微生物法では、非置換Ｄ−フェニル乳酸含有シクロオクタデプシペプチドだけが好適には生成した（Ｒ¹＝−Ｈ；ＰＦ１０２２Ａ、ＰＦ１０２２Ｂ、ＰＦ１０２２ＣおよびＰＦ１０２２Ｄを参照）。Ｄ−（４−ヒドロキシフェニル）乳酸含有シクロオクタデプシペプチドＰＦ１０２２Ｅ（Ｒ¹＝４−ヒドロキシ；ＪＰＰａｔ．６１８４１２６を参照）の既に記載した発酵の外には、他の置換アリール乳酸含有シクロオクタデプシペプチドの発酵的製造は現在まで開示されていなかった。それ故、本発明は、無胞子不完全菌目（Ａｇｏｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ）に属する種である真菌(fungal)株またはそれらから単離された酵素製剤による２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシペプチドの製造方法に関する。本発明による方法では、一般式（Ｉ）式中、Ｒ¹は、直鎖状もしくは分岐鎖状アルキル、環状アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルケニルオキシ、アリールアルコキシ、シクロアルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、アルコキシスルホニル、アルキルアミノスルホニル、ジアルキルアミノスルホニル、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、ヘテロアリールスルホニルを表し、それらの各々は場合により置換された、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、カルボキシル、カルバモイル、シアノであるか、または、適切には、置換された環状アミノ基であることができ、そしてＲ²、Ｒ³およびＲ⁴は、相互に独立して、直鎖状もしくは分岐鎖状アルキル、ヘテロアリールメチルまたはベンジル基を表し、べンジル基は場合により水素、直鎖状もしくは分岐鎖状アルキル、環状アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルケニルオキシ、アリールアルコキシ、シクロアルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、へテロアリールカルボニル、アルコキシスルホニル、アルキルアミノスルホニル、ジアルキルアミノスルホニル、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、へテロアリールスルホニルよりなる群からの基によって置換され、群の各々は場合により置換された、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、カルボキシル、カルバモイル、シアノであることができるか、または場合により適切な環状アミノ基によって置換されているが、Ｒ¹が４−ヒドロキシを表し、Ｒ³が非置換ベンジルを表し、そして他の基が上記の意味を有する、式（Ｉ）で示される化合物は除く、で示される２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシぺプチドは、ａ）一般式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）および（Ｖ）（式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は上記の意味を有す）で示される光学活性またはラセミアミノ酸、或いはｂ）一般式（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）（式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は上記の意味を有す）で示される光学活性またはラセミ２−ヒドロキシ−カルボン酸を、適切な栄養溶液中の無胞子不完全菌目に属する種である真菌株の存在下または緩衝系中のこれらの真菌株から単離されたシンテターゼの存在下で反応させ、次いで所望の２４個の環原子を有する置換されたアリール乳酸含有シクロデプシペプチドを単離することによって製造される。一般式（Ｉ）で示される２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシペプチド並びにそれらの酸付加塩および金属塩錯体は、特に医学および獣医学の分野において、内部寄生体の防除に顕著に適する。上記一般式における基それ自体または基の成分として、場合により置換されたアルキルは、好適には１〜６個、特に１〜４個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキルを示す。挙げることのできる例は、場合により置換されたメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ぺンチル、１−メチルブチル、２−メチルブチル、３−メチルブチル、１，２−ジメチルプロピル、１，１−ジメチルプロピル、２，２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、ヘキシル、１−メチルペンチル、２−メチルペンチル、３−メチルペンチル、４−メチルペンチル、１，２ −ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチル、２，３−ジメチルブチル、１，１ −ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、１，１，２−トリメチルプロピル、１，２，２−トリメチルプロピル、１−エチルブチルおよび２−エチルブチルである。好適には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルが挙げられてもよい。上記一般式における基それ自体または基の成分として、場合により置換されたアルケニルは、好適には１〜６個、特に１〜４個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルケニルを示す。挙げることのできる例は、場合により置換されたビニル、２−プロペニル、２−ブテニル、３−ブテニル、１−メチル−２− プロペニル、２−メチル−２−プロぺニル、２−ぺンテニル、３−ぺンテニル、４−ぺンテニル、１−メチル −２−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、３−メチル−２−ブテニル、１− メチル−３−ブテニル、２−メチル−３−ブテニル、３−メチル−３−ブテニル、１，１−ジメチル−２−プロペニル、１，２−ジメチル−２−プロペニル、１ −エチル−２−プロペニル、２−ヘキセニル、３−へキセニル、４−ヘキセニル、５−ヘキセニル、１−メチル−２−ぺンテニル、２−メチル−２−ぺンテニル、３−メチル−２−ぺンテニル、４−メチル−２−ぺンテニル、３−メチル−３ −ぺンテニル、４−メチル−３−ぺンテニル、１−メチル−４−ぺンテニル、２ −メチル−４−ぺンテニル、３−メチル−４−ぺンテニル、４−メチル−４−ぺンテニル、１，１−ジメチル−２−ブテニル、１，１−ジメチル−３−ブテニル、１，２−ジメチル−２−ブテニル、１，２−ジメチル−３−ブテニル、１，３ −ジメチル−２−ブテニル、１，３−ジメチル−３−ブテニル、２，２−ジメチル−３−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−３− ブテニル、１−エチル−２−ブテニル、１−エチル−３−ブテニル、２−エチル −２−ブテニル、２−エチル−３−ブテニル、１，１，２−トリメチル−２−プロペニル、１−エチル−１−メチル−２−プロペニルおよび１−エチル−２−メチル−２−プロペニルである。好適には、場合により置換されたエテニル、２− プロペニル、２−ブテニルまたは１−メチル−２−プロペニルを挙げることができる。上記一般式における基それ自体上または基の成分として、場合により置換されたシクロアルキルは、好適には３〜１０個、特に３、５もしくは７個の炭素原子を有する一、二または三環式シクロアルキルを表す。挙げることのできる例は、場合により置換されたシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、ビシクロ［２．２．１］へプチル、ビシクロ［２．２．２］オクチルおよびアダマンチルである。上記一般式における基それ自体または基の成分として、場合により置換されたアルコキシは、好適には１〜６個、特に１〜４個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルコキシを表す。挙げることのできる例は、場合により置換されたメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシである。上記一般式における基それ自体または基の成分として、場合により置換されたアルキルチオは、好適には１〜６個、特に１〜４個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキリチオを表す。挙げることのできる例は、場合により置換されたメチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、イソプロピルチオ、ｎ− ブチルチオ、イソブチルチオ、ｓｅｃ−ブチルチオおよびｔｅｒｔ−ブチルチオである。上記一般式における基それ自体または基の成分として、場合により置換されたアルコキシカルボニルは、好適には１〜６個、特に１〜４個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルコキシカルボニルを表す。挙げることのできる例は、場合により置換されたメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニルおよびｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである。上記一般式における基それ自体または基の成分として、場合により置換されたアルキルカルボニルは、好適には１〜６個、特に１〜４個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキルカルボニルを表す。挙げることのできる例は、場合により置換されたメチルカルボニル、エチルカルボニル、ｎ−プロピルカルボニル、イソプロピルカルボニル、ｎ−ブチルカルボニル、イソブチルカルボニル、ｓｅｃ−ブチルカルボニルおよびｔｅｒｔ−ブチルカルボニルである。上記一般式において、場合により置換されたアリールアルキルは、好適にはアリール部分および／またはアルキルにおいて場合により置換されており、好適にはアリール部分に炭素原子６個または１０個、特に８個有し（好適にはフェニルまたはナフチル、特にフェニル）、そしてアルキル部分に炭素原子を１〜４個、特に１〜２個有するものであり、アルキル部分が直鎖状もしくは分岐鎖状であることのできる、アリールアルキルを表す。場合により置換されたベンジルおよびフェニルエチルを好ましい例として挙げることができる。上記一般式における基それ自体または基の成分として、場合により置換されたヘタリル（ｈｅｔａｒｙｌ）は、好適には１〜３個、特に１または２個の、同一もしくは異なるヘテロ芳香族基を有する５〜７員環を表す。ヘテロ芳香族基におけるヘテロ原子は酸素、硫黄または窒素である。場合により置換されたフリル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、１，２，３−および１，２，４−トリアゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−、１，３，４−、１，２，４−および１，２，５−オキサジアゾリル、アゼピニル、ピロリル、ピリジル、ピペラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、１，３，５−、１，２，４−および１，２，３−トリアジニル、１，２，４−、１，３，２−、１，３，６−および１，２，６−オキサジニル、オキセピニル、チエピニル並びに１，２，４−ジアゼピニルを好ましい例として挙げることができる。上記一般式の置換された基は、一つまたはそれ以上、好適には１〜３個、特に１〜２個の、同一もしくは異なる置換基を持つことができる。好ましい例として挙げることのできる置換基は：メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルのような好適には１〜４個、特に１〜２個の炭素原子を有するアルキル；メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシのような好適には１〜４個、特に１〜２個の炭素原子を有するアルコキシ；メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、イソプロピルチオ、ｎ−ブチルチオ、イソブチルチオ、ｓｅｃ−ブチルチオおよびｔｅｒｔ−ブチルチオのようなアルキルチオ；ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、トリクロロメチルのような、好適には１〜４個、特に１〜２個の炭素原子および好適には１〜５個、特に１〜３個のハロゲン原子を有し、ハロゲン原子が同一もしくは異なりそしてハロゲン原子として好適にはフッ素、塩素または臭素特にフッ素または塩素であるハロゲンノアルキル；ヒドロキシル；ハロゲン、好適にはフッ素、塩素、臭素およびヨウ素、特にフッ素および塩素；シアノ；ニトロ；アミノ；メチルアミノ、メチルエチルアミノ、ジメチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、メチル−ｎ−ブチルアミノのような、好適にはアルキル当たり１〜４個、特に１〜２個の炭素原子を有するモノアルキルアミノおよびジアルキルアミノ；メチルカルボニルのようなアルキルカルボニル基；メトキシカルボニルおよびエトキシカルボニルのような、好適には２〜４個、特に２〜３個の炭素原子を有するアルコキシカルボニル；１〜４個、特に１〜２個の炭素原子を有するアルキルスルフィニル；トリフルオロメチルスルフィニルのような、１〜４個、特に１〜２個の炭素原子および１〜５個のハロゲン原子を有するハロゲノスルフィニル；スルホニル（−ＳＯ₂−ＯＨ）；メチルスルホニルおよびエチルスルホニルのような好適には１〜４個、特に１ない２個の炭素原子を有するアルキルスルホニル或いはトリフルオロメチルスルホニルのような、１〜４個、特に１〜２個の炭素原子および１〜５個のハロゲン原子を有するハロゲノアルキルスルホニルである。可能で適切な環状アミノ基は、ヘテロ原子として一つまたはそれ以上の窒素を有するヘテロ芳香族基または脂肪族環系であり、式中、ヘテロ環は飽和もしくは不飽和の、環系もしくは数種の縮合環系であることができ、そして場合により窒素、酸素および硫黄などのような他のヘテロ原子を含有す。追加的には、環状アミノ基はまたスピロ環または橋かけ環系を表すことができる。環状アミノ基を形成する原子数は、例えば、それらが３〜８個の原子よりなる単環系の場合および７〜１１個の原子の三環系の場合、制限されない。挙げることのできる環状アミノ基の例は、１−アゼチジニル、ピロリジノ、２ −ピロリン−１−イル、１−ピロリル、ピペリジノ、１，４−ジヒドロピリジン −１−イル１，２，５，６−テトラヒドロピリジン−１−イル、ホモピペリジノのような、ヘテロ原子として窒素を有する飽和および不飽和単環式環系であり；挙げることのできる環状アミノ基の例は、１−イミダゾリジニル、１−イミダゾリル、１−ピラゾリル、１−トリアゾリル、１−テトラゾリル、１−ピペラゾニル、１−ホモピぺラジニル、１，２−ジヒドロピリダジン−１−イル、１，２−ジヒドロプロピリミジン−１−イル、ぺルヒドロピリミジン−１−イルおよび１，４−ジアザシクロヘプタン−１−イルのような、ヘテロ原子のような２個またはそれ以上の窒素原子を有する飽和および不飽和の単環式環系であり；挙げることのできる環状アミノ基の例は、オキサゾリジン−３−イル、イソキサゾリド−２−イル、モルホリンまたは２，６−ジメチルモルホリノのような、ヘテロ原子として１〜３個の窒素原子および１〜２個の酸素原子を有する飽和および不飽和の単環式環系であり；挙げることのできる環状アミノ基の例は、ヘテロ原子として１〜３個の窒素原子および１〜２個の硫黄原子を有する飽和および不飽和の単環式環系であり、挙げることのできる環状アミノ基の例は、インドール−１−イル、１，２−ジヒドロベンゾイミダゾール−１−イル、ぺルヒドロピロロ−［１，２−ａ］ピリジン−２−イルのような、飽和および不飽和の縮合環式環系であり；挙げることのできる環状アミノ基の例は、２−アザスピロ［４，５］−デカン−２−イルのようなスピロ環式環系であり；言及されてもよい環状アミノ基の例は、２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イルのような橋かけヘテロ環式環系である。本発明に従って製造することができる２４個の環原子を有する飽和アリール乳酸含有シクロデプシペプチドは一般的に、一般式（Ｉ）によって特定される。好適に製造される一般式（Ｉ）で示される化合物は、式中、Ｒ¹が、４個までの炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル、特にメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル；６個までの炭素原子を有する環状アルキル、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル；アルコキシ、特にメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ；シクロアルコキシ、特にシクロプロピルオキシ；アルケニルオキシ、特にアリルオキシ；ジオキソアルキレン、特にジオキソメチレン；アルキルアミノ、特にメチルアミノ、エチルアミノ；ジアルキルアミノ、特にジメチルアミノ、ジエチルアミノ；アルコキシカルボニル、特にメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル；アルキルアミノカルボニル、特にメチルアミノカルボニル；ジアルキルアミノカルボニル、特にジメチルアミノカルボニル；アルキルアミノスルホニル、特にメチルアミノスルホニル；ジアルキルアミノスルホニル、特にジメチルアミノスルホニル；アルキルチオ、特にメチルチオまたはｔｅｒｔ −ブチルチオ；アルキルスルフィニル、特にメチルスルフィニルまたはｔｅｒｔ −ブチルスルフィニル；アルキルスルホニル、特にメチルスルホニルまたはｔｅｒｔ−ブチルスルホニル；ヘテロアリールスルホニル、特にＮ−モルホリノスルホニルまたはＮ−ピラゾリルスルホニルを表し、それらの各々は場合により置換された、ヒドロキシル、ハロゲン、特に臭素、塩素、フッ素もしくはヨウ素、ニトロ、アミノ、カルボキシル、カルバモイル、シアノまたは、適切には、置換された環状アミノ基、特にＮ−ピロリジノ、Ｎ−ピペリジノ、Ｎ−モルホリノ、Ｎ −（２，６−ジメチル−モルホリノ）、Ｎ−メチルピぺラジノ、Ｎ−チオモルホリノまたはＮ−ジオキソチオモルホリノであることができ、そしてＲ²およびＲ⁴が、４個までの炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル、特にメチルを表し、そしてＲ³が、４個までの炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル、特にメチルを表すか、或いは水素；４個までの炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル、特にメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル；６個までの炭素原子を有する環状アルキル、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル；アルコキシ、特にメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ；シクロアルコキシ、特に vシクロプロピルオキシ；アルケニルオキシ、特にアリルオキシ；ジオキソアルキレン、特にジオキソメチレン；アルキルアミノ、特にメチルアミノ、エチルアミノ；ジアルキルアミノ、特にジメチルアミノ、ジエチルアミノ；アルコキシカルボニル、特にメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル；アルキルアミノカルボニル、特にメチルアミノカルボニル；ジアルキルアミノカルボニル、特にジメチルアミノカルボニル；アルキルアミノスルホニル、特にメチルアミノスルホニル；ジアルキルアミノスルホニル、特にジメチルアミノスルホニル；アルキルチオ、特にメチルチオまたはｔｅｒｔ−ブチルチオ；アルキルスルフィニル、特にメチルスルフィニルまたはｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル；アルキルスルホニル、特にメチルスルホニルまたはｔｅｒｔ−ブチルスルホニル；ヘテロアリールスルホニル、特にＮ−モルホリノスルホニルまたはＮ−ピラゾリルスルホニルよりなる群からの基によって場合により置換されているをベンジル基を表し、それらの各々は場合により置換された、ヒドロキシル、ハロゲン、特に臭素、塩素、フッ素もしくはヨウ素；ニトロ、アミノ、カルボキシル、カルバモイル、シアノであることができるか、或いはそれは適切な環状アミノ基、特にＮ−ピロリジノ、Ｎ−ピペリジノ、Ｎ−モルホリノ、Ｎ−（２，６−ジメチルモルホリノ）、Ｎ−メチルピペラジノ、Ｎ−チオモルホリノもしくはＮ−ジオキソチオモルホリノによって場合により置換されているが、Ｒ¹が４−ヒドロキシを表し、Ｒ³が非置換べンジルを表し、そして他の基は上記の意味を有する式（Ｉ）で示される化合物は除く、ものである。特に好適に製造される一般式（Ｉ）で示される化合物は、式中、Ｒ¹が、アルコキシ、特にメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ；アルキルアミノ、特にメチルアミノ、エチルアミノ；ジアルキルアミノ、特にジメチルアミノ、ジエチルアミノ；ヒドロキシル；ハロゲン、特に臭素、塩素、フッ素もしくはヨウ素；ニトロ；アミノ；適切には、置換された環状アミノ基、特にＮ−モルホリノ、Ｎ−メチルピペラジノまたはＮ−ジオキソチオモルホリノを表し、そしてＲ²およびＲ⁴が、４個までの炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル、特にメチルを表し、そしてＲ³が、４個までの炭素原子を有する直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル、特にメチルを表すか、或いは水素；アルコキシ、特にメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ；アルキルアミノ、特にメチルアミノ、エチルアミノ；ジアルキルアミノ、特にジメチルアミノ、ジメチルアミノ；ヒドロキシル；ハロゲン、特に臭素、塩素、フッ素またはヨウ素；ニトロ；アミノよりなる群からの基によって場合により置換されているか、或いは適切な環状アミノ基、特にＮ−モルホリノ、Ｎ−メチルピペラジノまたはＮ−ジオキソチオモルホリノによって置換されているベンジル基を表すが、Ｒ¹が４−ヒドロキシを表し、Ｒ³が非置換ベンジルを表し、そして他の基が上記の意味を有する、式（Ｉ）で示される化合物は例外とする、それらである。一般式（Ｉ）で示される極めて特に好適な製造された化合物は、式中、Ｒ¹が、アルコキシ、特にメトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ；ヒドロキシル；ハロゲン、特に臭素、塩素、フッ素もしくはヨウ素；ニトロ；アミノ；ジアルキルアミノ、特にジメチルアミノ、または適切には、置換された環状アミノ基、特にＮ −モルホリノを表し、そしてＲ²およびＲ⁴がメチルを表し、そしてＲ³が、水素；アルコキシ、特にメトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ；ヒドロキシル；ハロゲン、特に臭素、塩素、フッ素もしくはヨウ素；ニトロ、アミノ；ジアルキルアミノ、特にジメチルアミノよりなる群からの基によって場合により置換されているか、或いは適切な環状アミノ基、特にＮ−モルホリノニよって場合により置換されているべンジルを表すが、Ｒ¹が４−ヒドロキシルを表し、Ｒ³が非置換ベンジルを表し、そして他の基が上記の意味を有する、式（Ｉ）で示される化合物は例外とする、それらである。本発明による製造条件下では、一般式（Ｉ）で示される光学活性な、立体異性型の化合物が形成される。しかし、好適には、α−アミノ酸が（Ｓ）−立体配置（Ｌ型）を有しそして２ −ヒドロキシ−カルボン酸が（Ｒ）−立体配置（Ｄ型）を有する一般式（Ｉ）で示される化合物が形成される。詳細には、一般式（Ｉ）で示される以下の光学活性化合物を挙げることができる：シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ニトロ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ニトロ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ニトロ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４− ニトローフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ニトロ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ニトロ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ニトローフェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３− ニトロ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ニトローフェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ニトロ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ニトロ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２− ニトロ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−アミノ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−アミノ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−アミノ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４− アミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−アミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−アミノ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−アミノ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３− アミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−アミノ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−アミノ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−アミノ−フェニルラクチル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２− アミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ヒドロキシ−フェニルラクチル −Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル −）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ヒドロキシ−フェニルラクチル −Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− ４−ヒドロキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル −）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ヒドロキシ−フェニルラクチル −Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− ４−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ヒドロキシ−フェニルラクチル −Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ヒドロキシ−フェニルラクチル −Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− ３−ヒドロキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル −）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロィシル−Ｄ−２−ヒドロキシ−フェニルラクチル −Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ヒドロキシ−フェニルラクチル −Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ヒドロキシ−フェニルラクチル −Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− ２−ヒドロキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル −）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−メトキシ−フェニルラクチル− Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−メトキシ−フェニルラクチル− Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−メトキシ−フェニルラクチル− Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４ −メトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−メトキシ−フェニルラクチル− Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−メトキシ−フェニルラクチル− Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−メトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル −Ｄ−３−メトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−メトキシ−フェニルラクチル− Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−メトキシ−フェニルラクチル− Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−メトキシ−フェニルラクチル− Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２ −メトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−４−Ｎ−モルホリノーフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル −Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ −ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−２−Ｎ−モルホリノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル −Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ −ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−３−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ− ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル− Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル −Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ジメチルアミノ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ −ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ヨードフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ヨードフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ヨードフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ヨードフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ヨードフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ヨードフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ヨードフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ヨードフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ヨードフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ヨードフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ヨードフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ヨードフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ブロムフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ブロムフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ブロムフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ブロムフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ブロムフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ブロムフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ブロムフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−ブロムフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシルーＤ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ブロムフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ブロムフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ブロムフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−ブロムフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−クロルフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−クロルフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ −フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−クロルフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−クロルフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−クロルフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−クロルフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−クロルフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−３−クロルフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−クロルフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−クロルフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−フェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）、シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−クロルフェニルラクチル−Ｎ− メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−２−クロルフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−）。一般式（Ｉ）で示される化合物は幾つかの場合に知られている（例えば、国際公開第９４／１９３３４号明細書；国際公開第９５／１９０５３号明細書；欧州特許出願公開第６２６３７５号明細書；欧州特許出願公開第６２６３７６号を参照）。２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシペプチド（Ｉ）の製造のための本発明による方法ａにおいて、４−ニトロフェニル−アラニン（Ｒ¹ ＝４−ＮＯ₂）が式（ＩＩ）で示されるアミノ酸として使用される場合、方法は、例えば、以下の反応スキームによって表すことができる。式（ＩＩ）〜（Ｖ）は、本発明による方法ａを行うための出発物質として必要なアミノ酸の一般的定義を提供する。これらの式では、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³ およびＲ⁴は好適には、本発明による式（Ｉ）で示される物質の説明に関連して、これらの置換基に好適であるとして既に記載されたそれらの基を表す。出発物質として使用された天然または合成アミノ酸は、それらがキラルである場合、（Ｓ）−または（Ｒ）−立体配置（Ｌ−またはＤ−型）で存在することができる。しかし、（Ｓ）−立体配置を有するα−アミノ酸は好適である。挙げることのできる例は：Ａａｄ、Ａｂｕ、ｊＡｂｕ、ＡＢｚ、２ＡＢｚ、εＡｃａ、Ａｃｈ、Ａｃｐ、Ａｄｐｄ、Ａｈｂ、Ａｉｂ、βＡｉｂ、Ａｌａ、βＡｌａ、ΔＡｌａ、Ａｌｇ、Ａｌｌ、Ａｍａ、Ａｍｔ、Ａｐｅ、Ａｐｍ、Ａｐｒ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ａｓｕ、Ａｚｅ、Ａｚｉ、Ｂａｉ、Ｂｐｈ、Ｃａｎ、Ｃｉｔ、Ｃｙｓ、（Ｃｙｓ）₂ 、Ｃｙｔａ、Ｄａａｄ、Ｄａｂ、Ｄａｄｄ、Ｄａｐ、Ｄａｐｍ、Ｄａｓｕ、Ｄｊｅｎ、Ｄｐａ、Ｄｔｃ、Ｆｅｌ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｇｕｖ、ｈＡｌａ、ｈＡｒｇ、ｈＣｙｓ、ｈＧｌｎ、ｈＧｌｕ、Ｈｉｓ、ｈｉＩｌｅ、ｈＬｅｕ、ｈＬｙｓ、ｈＭｅｔ、ｈＰｈｅ、ｈＰｒｏ、ｈＳｅｒ、ｈＴｈｒ、ｈＴｒｐ、ｈＴｙｒ、Ｈｙｌ、Ｈｙｐ、３ＨｙｐNＩｌｅ、Ｉｓｅ、Ｉｖａ、Ｋｙｎ、Ｌａｎｔ、Ｌｃｎ、Ｌｅｕ、Ｌｓｇ、Ｌｙｓ、βＬｙｓ、ΔＬｙｓ、Ｍｅｔ、Ｍｉｍ、Ｍｉｎ、ｎＡｒｇ、Ｎｌｅ、Ｎｖａ、Ｏｌｙ、Ｏｒｎ、Ｐａｎ、Ｐｅｃ、Ｐｅｎ、Ｐｈｅ、Ｐｈｇ、Ｐｉｃ、Ｐｒｏ、ΔＰｒｏ、Ｐｓｅ、Ｐｓｅ、Ｐｙａ、Ｐｙｒ、Ｐｚａ、Ｑｉｎ、Ｒｏｓ、Ｓａｒ、Ｓｅｃ、Ｓｅｍ、Ｓｅｒ、Ｔｈｉ、βＴｈｉ、Ｔｈｒ、Ｔｈｙ、Ｔｈｘ、Ｔｉａ、Ｔｌｅ、Ｔｌｙ、Ｔｒｐ、Ｔｒｔａ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ｎａｌ、Ｔｂｇ、Ｃｈｇ、Ｔｈｉａである（例えば、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ，有機化学の方法（ＭｅｔｈｏｄｅｎｄｅｒＯｒｇａｎｉｓｃｈｅｎＣｈｅｍｉｅ），第ＸＶ／１および２巻，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，１９７４年を参照）。しかし、好適には、置換フェニルアラニン（Ｐｈｅ）を挙げることができる。一般式（ＩＩ）で示される置換フェニルアラニンでは、Ｒ¹は好適には、本発明による式（Ｉ）で示される物質の説明に関連して、この置換基に好適であるとして既に記載された基を表す。２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシペプチド（Ｉ）の製造のための本発明による方法ｂでは、４−ニトロフェニル−乳酸（Ｒ¹＝４− ＮＯ₂）が式（ＶＩ）で示される２−ヒドロキシ−カルボン酸として使用される場合、方法ｂは、例えば、以下の反応スキームによって表すことができる。式（ＶＩ）〜（ＩＸ）は、本発明による方法ｂを行うための出発物質として必要な２−ヒドロキシ−カルボン酸の一般的定義を提供する。これらの式では、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は好適には、本発明による式（Ｉ）で示される物質の説明に関連して、これらの置換基に好適であるとして既に記載されたそれらの基を表す。出発物質として使用された２−ヒドロキシ−カルボン酸は、それらがキラルである場合、（Ｓ）−または（Ｒ）−立体配置（Ｌ−またはＤ−型）で存在することができる。しかし、（Ｓ）−立体配置を有する２−ヒドロキシ−カルボン酸は好適である。挙げることのできる例は：Ｈｙａｃ、Ｈｙｂａ、Ｈｙｄｄ、Ｈｙｄｅ、Ｈｙｉｃ、Ｈｙｉｖ、Ｈｙｍｂ、Ｈｙｐｐ、Ｈｙｐｒ（Ｌａｃ）、Ｈｙｔｄ、Ｈｙｕｄ、Ｈｙｖａ、ＰｈＬａｃ（例えば、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙ１，有機化学の方法（ＭｅｔｈｏｄｅｎｄｅｒＯｒｇａｎｉｓｃｈｅｎＣｈｅｍｉｅ）,第ＸＶ／１および２巻，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，１９７４年を参照。しかし、好適には、置換フェニル乳酸（ＰｈＬａｃ）を挙げることができる。一般式（ＶＩ）で示される置換フェニル乳酸では、Ｒ¹は好適には、本発明による式（Ｉ）で示される物質の説明に関連して、この置換基に好適であるとして既に記載された基を表す。本発明による方法ａおよびｂを行うために言及されてもよい適切な真菌株は無胞子不完全菌目に属する種であるミセリア・ステリリア（Mycelia sterilia）である。特に、ブダペスト条約に従ってＢｒｕｎｓｗｉｃｋのドイツ微生物保存機関（ｔｈｅＧｅｒｍａｎＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎｆｏｒＭｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ）（ＤＭＳ）に寄託番号ＤＳＭ１０３４５として１９９５年１１月３０日に寄託された真菌株ミセリア・ステリリア５４１− １１を挙げることができる。方法はまた微生物から単離されたシンテターゼを用いて行うこともできる。これに必要なシクロデプシペプチド・シンテターゼは、文献から既知である方法によって上記の真菌株から単離することができる（例えば、エンニアチン・シンテターゼの単離（Ｉｓｏｌａｔｉｏｎｏｆｅｎｎｉａｔｉｎｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ）：Ｒ．Ｐｉｅｐｅｒ，Ｈ．Ｋｌｅｉｎｋａｕｆ，Ｒ．Ｚｏｃｈｅｒ，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ４５，１９９３，１２７３−１２７７頁；西独特許出願公開第４４０６０２５号明細書を参照）。無胞子不完全菌目に属する種である真菌株の発酵は、適切な栄養溶液の存在下で、それ自体が既知である方法によって行われる。これらの栄養溶液は、真菌の増殖に必要な塩並びに炭素源および窒素源を含有する。本発明による方法を行うために適切で可能な有機塩は、周期表のＩＩ乃至ＶＩＩＩ亜族の元素のすべてのアルカリ金属塩、アルカリ土金属塩および金属塩である。これらについて挙げることのできる例は、リチウム、ナトリウム、カリウム、セシウム、マグネシウム、カルシウム、バリウム、亜鉛、カドミウム、スカンジウム、チタン、ジルコニウム、バナジウム、ニオブ、クロム、モリブデン、マンガン、鉄、コバルトまたはニッケルの酢酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、フッ化物、硝酸塩、亜硝酸塩、リン酸塩、リン酸水素塩、リン酸二水素塩、亜リン酸塩、亜リン酸水素塩、硫酸塩、硫酸水素塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、炭酸塩および炭酸水素塩である。好適には、アルカリ土類金属、特にマグネシウム、並びに周期表のＩＩ，ＶＩＩおよびＶＩＩＩ亜族の金属、例えば、亜鉛、マンガンおよび鉄の酢酸塩、ハロゲン化物、リン酸塩、リン酸水素塩、リン酸二水素塩および硝酸塩が使用される。本発明による方法を行うための可能な炭素源は炭水化物および炭水化物含有生成物である。これらについて挙げることのできる例は、ぺントース、特にリボース、ヘキソース、特にグルコースおよびフラクトースのような単糖、二糖、特にスクロース、マルトースおよびラクトース、三糖、特にラフィノース、並びに四、五および六糖のようなオリゴ糖である。好適には、ヘキソース、特にグルコースのような単糖、および二糖、特にスクロースのようなオリゴ糖が使用される。本発明による方法を行うための可能な窒素源はアミノ三および窒素含有塩である。これらについて挙げることのできる例は、上記の天然および合成アミノ酸、または硝酸アンモニウム、亜硝酸アンモニウムまたは上記の金属の硝酸塩および亜硝酸塩にような窒素含有塩である。好適には、上記の天然アミノ酸および硝酸アンモニウムのような窒素含有塩が使用される。発酵法のために使用された真菌株は、最初に、それ自体が既知である方法によって、例えば、糖蜜／コーンスティープリカーよりなる培地中で培養される。培養が起こった後、菌糸体が単離される。自由（ｆｒｅｅ）培養物の製造のために、炭素源および無機塩よりなる赤カビ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）規定培地（ＦＤＭ）に菌糸体を植菌し、そして再び発酵させる。数日後、ＦＤＭ主培養物は前培養物の各１ｍ１の“ｕｂｅｒｉｍｐｔｅｎ”によって製造され、同様に発酵させることができる。次いで実際の発酵は式（ＩＩ）〜（Ｖ）または（ＶＩ）〜（ＩＸ）で示される化合物の存在下で行われる。発酵期間は１〜３０日である。発酵は、＋５℃〜＋４０℃、好適には＋１５℃ 〜＋３５℃、特に好適には＋２５℃〜＋３０℃の範囲内の温度で行われる。それは無菌条件下で常圧下で行われる。発酵を行うために、式（ＩＩ）〜（Ｖ）または（ＶＩ）〜（ＩＸ）で示される化合物は一般的に５ｍＭ〜１００ｍＭ、好適には５ｍＭ〜７０ｍＭの濃度で使用される。発酵が完了した後、菌糸体は培養物から取り出し、そして濾液は場合により有機溶媒で数回抽出し、ホモジナイズし、次いで濾過する。得られた培養濾液は常法で抽出し、乾燥し、真空下で濃縮する。得られたシクロデプシペプチド粗生成物は、カラムクロマトグラフィーまたは向流分配によって常法で精製することができる。どれが最適な方法であるかは場合場合により決定されなければならない（製造実施例も参照）。本発明による方法が単離されたシクロデプシペプチド・シンテターゼの存在下で行われる場合、水性緩衝系中で、金属塩、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン（ＳＡＭ）およびアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）の存在下で行われる。挙げることのできる金属は：リチウム、ナトリウム、カリウム、セシウム、マグネシウム、カルシウムまたはバリウムの酢酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、フッ化物、硝酸塩、リン酸塩、リン酸水素塩、亜リン酸塩、亜リン酸水素塩、硫酸塩、硫酸水素塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、炭酸塩および炭酸水素塩である。好適には、アルカリ土類金属塩、例えば、フッ化マグネシウム、硫酸マグネシウムまたは酢酸マグネシウムが使用される。本発明による方法ａおよびｂは水性緩衝液中で行われる。これについて挙げることのできる例は市販の緩衝液、例えば、ｐＨ１．０の場合は特にグリシン−塩酸、ｐＨ２．０〜４．０の場合は特にクエン酸塩−塩酸、ｐＨ５．０〜６．０の場合は特にクエン酸塩−水酸化ナトリウム溶液、ｐＨ７．０の場合は特にリン酸塩、特にホウ酸塩−塩酸、およびｐＨ８．０、ｐＨ９．０〜１０．０の場合は特にホウ酸／塩化カリウム−水酸化ナトリウム溶液である。方法は好適には「生理学的範囲」内、即ち、６．０〜９．５のｐＨで行われ、そしてこのためにリン酸緩衝液、特にリン酸水素カリウム／リン酸水素二ナトリウムまたはリン酸水素カリウム／リン酸水素二カリウムが好適には使用される。方法を行う場合、一般的に２ｍＭ〜８ｍＭ、好適には３ｍＭ〜５ｍＭの式（ＩＩ）〜（Ｖ）または（ＶＩ）〜（ＩＸ）で示される化合物、Ｓ−アデノシル−Ｌ −メチオニン（ＳＡＭ）、３ｍＭ〜９ｍＭ，好適には４ｍＭ〜６ｍＭのアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、および２ｍＭ〜２５ｍＭ、好適には５ｍＭ〜１５ｍＭのアルカリ土類金属塩、１０ｍＭ〜１００ｍＭ、好適には４０ｍＭ〜６０ｍＭの緩衝液が、１００μｇ〜１０００μｇ、好適には２００μｇ〜６００ttｇの単離シクロデプシペプチド・シンテターゼと共に生体外で使用される。酵素的生体外合成の反応時間は２分乃至２４時間である。酵素的生体外合成は、０℃〜＋５０℃、好適には＋１０℃〜＋３５℃、特に好適には＋２０℃〜＋３０℃の温度範囲内で行われる。それは、６．５〜９．５、好適には７．０〜８．０のｐＨ範囲内で進行し、ｐＨは全反応の間は緩衝液の添加によって７．３の一定に維持される。好適には、方法は無菌反応条件下および常圧下で行われる。酵素的生体外合成は水の添加によって停止することができる。式（ＩＩ）〜（Ｖ）で示される化合物が使用される場合、酵素的生体外合成を、対応するトランスアミナーゼまたはデヒドロゲナーゼの存在下で、行うことは有利である。後処理のために、水性相は有機溶媒で数回抽出し、乾燥しそして真空下で濃縮する。得られたシクロデプシペプチド粗生成物はカラムクロマトグラフィーまたは向流分配によって常法で精製することができる。どれが最適な方法かはまた場合場合により決定しなければならない（製造実施例も参照）。製造実施例実施例１：シクロ（−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ニトローフェニルラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−ラクチル−Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−４−ニトロ−フェニルラクチル−）方法ａによる製造４−ニトロ−フェニルアラニンのインビボでの取り込み：５０ｍＭの濃度の４−ニトロ−フェニルアラニンを、無菌条件下で、無胞子不完全菌目（Ａｇｏｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ）に属する種であるミセリア・ステリリア（Ｍｙｃｅｌｉａｓｔｅｒｉｌｉａ）の３日令である主培養液に添加し、発酵をさらに３日間継続する。次いで、菌糸体を赤カビ属（Ｆｕｓａｒｉａ）の培養物から取り出し、凍結乾燥した後、メタノールで数回抽出する。次いで収集した有機相を蒸発乾固する。方法ｂによる製造４−ニトロ−フェニル乳酸のインビボでの取り込み：５０ｍＭの濃度の４−ニトローフェニル乳酸を、無菌形態で、無胞子不完全菌目に属する種であるのミセリア・ステリリアの３日令である主培養液に添加し、発酵をさらに３日間継続する。次いで、菌糸体を赤カビの培養物から取り出し、凍結乾燥した後、メタノールで数回抽出する。次いで収集した有機相を蒸発乾固する。方法ａおよびｂによって得た生成物を、調製用ＨＰＬＣ（ＲＰ−１８／アセトニトリル−水）によって精製する。¹Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃、δ）：７．４３（ｄ，８Ｈ，＝ＣＨ_メタ；４−ＮＯ₂−ベンジル）；８．１５；８．１８（２ｄ，８Ｈ，＝ＣＨ_オルト；４ −ＮＯ₂−ベンジル）ｐｐｍ［配座異性体混合物］ＡＰＣＩ−ＭＳｍ／ｚ（％）：１０４０（ＭＨ⁺，１３）４−ニトロ−フェニル乳酸のインビボでの取り込み：５０〜１００μｇの酵素を、４ｍＭのジチオスレイトール、２０％のグリセロールおよび以下の基質を持つトリス緩衝液ｐＨ７．８の混合物５ｍＭＡＴＰ、１０ｍＭＭｇＣｌ₂、２ｍＭＬ−ロイシン、０．５ｍＭＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニン、２ｍＭＤ−乳酸、５０〜１００μＭＤ−４−ニトロ−フェニル乳酸。次いで全反応混合物を酢酸エチルで抽出し、生成した生成物をクロマトグラフィーに付す（ＴＬＣ、ＨＰＬＣ）。下記の表１に示した一般式（Ｉ）で示される化合物を、ＬＤＬＤＬＤＬＤ立体異性体として同様に製造することができる： ^a) APCI-MS or EI-MS m/z(％)^b) ¹H-NMR(600MHz，CDCl₃)δin ppm^c) HMQC シグナル(600 MHz,CDCl₃)δin ppm 培養、前培養および主培養１．寒天上の培養寒天上の真菌培養物の培養の場合、以下の培地を使用する：グルコース２．０％、ぺプトン１．０％、酵母エキス１．０％、麦芽エキス１．０％、ＫＨ₂ ＰＯ₄ ０．０５％、寒天１．５％。次いで１２１℃での滅菌を２０分間行う。滅菌後の培地のｐＨは＝７．０である。２．液体培養ａ）コーンスティープ／糖蜜培地：関係するミセリア・ステリリア株を、糖蜜（３０ｇ／ｌ）、コーンスティープリカー（１０ｇ／ｌ）およびグルコース（３０ｇ／ｌ）よりなる培地中で培養する。前培養物の製造のために、培地に寒天プレートからの菌糸体を接種し、振盪装置上で約３日間の後、さらに同一培地のフラスコ（内容物、各々１００ｍｌ）に接種するのに使用する。ｂ）代替培地：別法として、以下の培地もまた、真菌培養物の培養に使用することができる：コムギ胚芽エキス２．０％ファーマメディア（Ｐｈａｒｍａｍｅｄｉａ）１．０％、ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ０．２％、ＮａＣｌ０．２％、澱粉２．６％、麦芽シロップ６．０％、ＣａＣＯ₃ ０．３％。次いで１２１℃での滅菌は２０分間行う。滅菌後の培地のｐＨは７．５である。以下の供給実験の場合、関係する前駆物質（例えば、４−ニトロフェニルアラニン、４−ニトロフェニル乳酸、４−アミノフェニルアミン、４−アミノフェニル乳酸）を３日令の培養物に添加する；最終濃度は５０ｍＭである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＨＵ，ＩＬ，ＪＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＫ，ＴＲ，ＵＡ，ＵＳ (72)発明者エツエル，ビンフリートドイツ連邦共和国デー―42799ライヒリンゲン・アンデアブツペル33 (72)発明者ハルダー，アヒムドイツ連邦共和国デー―51109ケルン・オイロパリング54 (72)発明者メンケ，ノルベルトドイツ連邦共和国デー―51381レーフエルクーゼン・グルンデルミユーレ２ (72)発明者クラインカウフ，ホルストドイツ連邦共和国デー―12205ベルリン・バゼラーシユトラーセ17 (72)発明者ツオヒヤー，ライナードイツ連邦共和国デー―12169ベルリン・ラウエンブルガーシユトラーセ37 (72)発明者飯沼勝春神奈川県小田原市栢山788 明治製菓株式会社薬品技術研究所 (72)発明者宮本功一神奈川県小田原市栢山788 明治製菓株式会社薬品技術研究所

Claims

【特許請求の範囲】１．無胞子不完全菌目（Ａｇｏｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ）に属する種である真菌株またはそれらから単離された酵素製剤による、２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシペプチドの製造方法。２．一般式（Ｉ）式中、Ｒ¹は、直鎖状もしくは分岐鎖状アルキル、環状アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルケニルオキシ、アリールアルコキシ、シクロアルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、アルコキシスルホニル、アルキルアミノスルホニル、ジアルキルアミノスルホニル、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、へテロアリールスルホニルを表し、それらの各々は場合により置換された、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、カルボキシル、カルバモイル、シアノであるか、または、適切には、置換された環状アミノ基であることができ、そしてＲ²、Ｒ³およびＲ⁴は、相互に独立して、直鎖状もしくは分岐鎖状アルキル、ヘテロアリールメチルまたはベンジル基を表し、べンジル基は場合により水素、直鎖状もしくは分岐鎖状アルキル、環状アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルケニルオキシ、アリールアルコキシ、シクロアルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アルコキシカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、へテロアリールカルボニル、アルコキシスルホニル、アルキルアミノスルホニル、ジアルキルアミノスルホニル、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、ヘテロアリールスルホニルよりなる群からの基によって置換され、群の各々は場合により置換された、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、カルボキシル、カルバモイル、シアノであることができるか、または場合により適切な環状アミノ基によって置換されているが、Ｒ¹が４−ヒドロキシを表し、Ｒ³が非置換ベンジルを表し、そして他の基が上記の意味を有する、式（Ｉ）で示される化合物は除く、で示される２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシぺプチドの製造方法であって、ａ）一般式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）および（Ｖ）（式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は上記の意味を有す）で示される光学活性またはラセミアミノ酸、或いはｂ）一般式（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）および（ＩＸ）（式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は上記の意味を有す）で示される光学活性またはラセミ２−ヒドロキシ−カルボン酸を、緩衝系中で、適切な栄養溶液中の無胞子不完全菌目に属する種である真菌株の存在下またはこれらの真菌株から単離されたシンテターゼの存在下で反応させ、次いで所望の２４個の環原子を有する置換アリール乳酸含有シクロデプシペプチドを単離することを特徴とする、一般式（Ｉ）で示されるぺプチドの製造方法。