JP2000281584A

JP2000281584A - 好中球活性化剤

Info

Publication number: JP2000281584A
Application number: JP11084074A
Authority: JP
Inventors: Satoru Yoshida; 哲吉田; Okitsugu Konishi; 興亜小西
Original assignee: Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1999-03-26
Filing date: 1999-03-26
Publication date: 2000-10-10

Abstract

(57)【要約】【課題】優れた好中球活性化剤の創製。【解決手段】南瓜子、紅花、オオバコ及びスイカズラ
の４種の生薬を配合することからなる好中球活性化剤

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規な好中球活性化剤
に関する。

【０００２】

【従来の技術】好中球は、マクロファージとともに免疫
応答のエフェクター相に働き、異物処理や殺菌を行う食
細胞である。好中球とは顆粒白血球のうち中性顆粒をも
つものであるが、その役割は主としてブドウ球菌、連鎖
球菌、肺炎球菌、緑膿菌、大腸菌などの細菌類を取り込
んで殺菌することである。好中球は生体防御の中心をな
す細胞で、細菌感染、真菌感染防御には必須である。好
中球減少症、好中球の質的異常（慢性肉芽腫症等）では
著明な易感染性が見られる。

【０００３】好中球の特徴的な機能として、遊走能、貪
食能、殺菌能が挙げられる（免疫・アレルギー・リウマ
チ病学、第２版、医学書院発行）。遊走能好中球は炎症病巣に向かって遊走する特性がある。好中
球は、種々の化学物質に対するレセプターを持ち、濃度
勾配に逆らって濃度の高い方へ移動する走化性を持つ。
血管壁を通り抜けて炎症部に達し、その部の細菌や異物
を貪食（摂食処理）する。貪食能好中球は細胞表面にＩｇＧ−Ｆｃレセプター、Ｃ３ｂレ
セプターを持ち、抗体や補体を結合した細菌などを効率
よく取り込むことができる。その際、好中球が異物と接
触すると細胞膜が活性化され、異物を取り込んで、膜が
細胞内に反転して食胞を形成する。食胞はリソゾームと
融合してファゴリソゾームとなり、顆粒中に含まれる酵
素が放出されて、異物を消化ないし殺菌する。殺菌能好中球の殺菌作用には、酸素依存性の機序と、酸素非依
存性の機序がある。酸素依存性の機序には、ＮＡＤＰＨ
オキシダーゼによって種々の活性酸素を生じる系と、ミ
エロペルオキシダーゼによって生じるハロゲン化ヒドロ
キシラジカルおよび一重項酸素によって殺菌効果が発揮
されるものがある。酸素非依存性の機序として、ラクト
フェリン、リゾチーム、塩基性蛋白によるものがある。

【０００４】好中球の活性化に関与する生体内因子とし
ては、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球
・マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、
インターロイキン８（ＩＬ−８）、腫瘍壊死因子（ＴＮ
Ｆα）等が知られている。しかし、これらの生体内因子
以外では、ラクトフェリン、β−グルカンの他、好中球
活性化作用を有する化合物は報告されていない。まして
生薬の好中球活性化作用に関しては、全く報告はない。

【０００５】国際公開第９５／３４２１８号には、南瓜
子、オオバコ、スイカズラの１種以上（とりわけ３種の
生薬）を飼料に添加することにより、寄生虫、細菌及び
ウイルス病の特に自然感染を防ぎ、生体防御力の強化と
共に肉質、卵質を改善する旨が開示されている。更に
は、南瓜子、オオバコ、スイカズラ、紅花の４種の生薬
を配合した飼料について採卵鶏の健康状態、生存率、卵
質の向上、抗ロイコチトゾーン病効果が開示されてい
る。

【０００６】特開昭５６−９２８２０号にはニホンカボ
チャ等のウリ科植物からインターフェロン誘起剤が抽出
される旨が、特開昭５６−７９６２３号及び特開昭５６
−９７２３２号には金銀花、車前子等からインターフェ
ロン誘起剤が抽出され、ヒト及び動物のウイルス感染症
の予防及び治療に有用である旨が各々記載されている。
また、特開昭５７−３２２２２号にはベニバナから抽出
したインターフェロン誘起剤の抗ウイルス活性及び抗腫
瘍活性が開示され、抗腫瘍剤や生理作用改良、健康増進
剤として有用である旨が記載されている。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明者は、動物飼料
成分として優れた効果を有する、南瓜子、オオバコ、ス
イカズラ等の生薬の生理機能の解明及び更なる用途を見
出すことを目的として、鋭意検討を重ねてきた。その結
果、南瓜子、紅花、オオバコ及びスイカズラの４種の生
薬の配合により、優れた好中球活性化作用が得られるこ
とを見出し、本発明を完成させた。

【０００８】

【課題を解決する為の手段】即ち、本発明は、南瓜、紅
花、オオバコ及びスイカズラの４種の生薬を配合するこ
とからなる好中球活性化剤である。本発明の好中球活性
化剤は、好中球の機能の内、遊走能を維持して殺菌能と
貪食能を亢進させる点で、ラクトフェリンやβ−グルカ
ン等の従来の好中球活性化剤にはない優れた作用を特徴
とする。本発明の好中球活性化剤は、古来から民間療法
に使用されてその安全性は確認されている生薬の組合せ
であることから、ヒト又は動物の治療用医薬としてのみ
ならず、予防薬或いは機能性食品、健康食品として長期
に渡って常用するにはふさわしい。

【０００９】前述の各公開公報においては本発明の有効
成分である各生薬についてインターフェロン誘起作用が
開示されているが、好中球の活性化作用については何ら
開示も示唆もない。また、前述の国際公開第９５／３４
２１８号には、本発明の４種の生薬を配合した飼料につ
いて動物の寄生虫、細菌及びウイルスに対する感染防御
剤としての効果は開示されているものの、好中球の活性
化作用については開示も示唆もない。

【００１０】

【発明の実施の形態】以下、本発明を更に詳細に説明す
る。まず、本発明において使用される生薬について説明
する。南瓜子はウリ科の植物南瓜（和名：ニホンカボチ
ャCucurbita moschata Duch.）の種子であるが、本発明
においては本発明の目的を達成するその類縁植物の種子
も含む。南瓜子は、生のまま使用してもよいが、乾燥品
の方が医薬、健康食品として保存上好ましく、また、種
皮のみを用いてもよい。成分としてククルビチン、タン
パク質、ビタミンＡ、Ｂ_１、Ｂ_２，Ｃを含み、またカロ
チン等も含まれている。紅花はキク科の植物紅花（Cart
hamus tinctorius L.）の管状花の乾燥したものである
が、本発明においては本発明の目的を達成するその類縁
植物の種子も含む。成分としてはカルサミン、サフラー
イエロー、リグナン、ステロールを含む。婦人病、冷え
症、更年期障害などの血行障害の治療に用いる。

【００１１】オオバコはオオバコ科の植物オオバコ（Pl
antago asiatica L.）であるが、本発明においては本発
明の目的を達成するその類縁植物の種子も含む。成熟し
た種子（車前子）または全草（車前）が用いられる。成
分としては多糖類、Plantenolic acid.、コハク酸、ア
デニン、Aucubin、PlantagininやビタミンＡ、Ｂ_１等を
含む。生薬としてヒトにおいては消炎、利尿、止しゃ薬
として用いられている。スイカズラはスイカズラ科のス
イカズラ（Lonicera japonica Thunb.）であるが、本発
明においては本発明の目的を達成するその類縁植物の種
子も含む。花若しくは蕾（金銀花）、葉、茎或いは全草
（忍冬）が用いられる。成分としては蝋様物質、イノシ
トール、タンニン、サポニン、ロニセリン等を含む。生
薬としては、解熱、解毒、利尿、消炎薬として用いられ
ている。

【００１２】本発明の好中球活性化剤には配合生薬総量
の内、南瓜子、紅花、オオバコ、スイカズラを各々５〜
８５％の範囲で含む。本発明ではこれらの生薬を原末或
いは水又は有機溶媒抽出エキスとして用いることができ
る。即ち、原末、溶媒製剤、粉剤、成型剤、浸出剤等と
して用いる。有機溶媒としてはエタノール、アセトン等
が用いられ、これらは水或いは２種以上の有機溶媒と混
合して用いてもよい。抽出は生薬に対し数倍量の溶媒を
加え常温乃至加温下に抽出或いは浸出を行う。また、生
薬を原末として使用するときは、その生鮮、陰干し、或
いは乾燥したものを用い細断或いは粉末として用いる。

【００１３】本発明の好中球活性化剤、即ち上記生薬の
組合せは、各種食品用素材として広く使用でき、その用
途は食品素材として使用できるものであれば、いずれの
食品でも良い。本発明の生薬の原末或いは水又は有機溶
媒抽出エキスは、そのまま又は自体公知の方法で各種の
形態にして健康食品、機能性食品（サプリメント）、医
薬として利用できる。

【００１４】例えば、医薬或いは機能性食品（サプリメ
ント）は通常の製剤化方法により経口用の錠剤、散剤、
細粒剤、カプセル剤、丸剤、シロップ剤として提供され
る。製剤化の為に、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、
緩衝剤、矯味剤、安定剤等を必要に応じて添加すること
もできる。少なくとも一つの不活性な希釈剤、例えば乳
糖、マンニトール、ブドウ糖、ヒドロキシプロピルセル
ロース、微結晶セルロース、デンプン、ポリビニルピロ
リドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムと混合され
る。組成物は常法に従って、不活性な希釈剤以外の添加
剤、例えばステアリン酸マグネシウム、スターチ、タル
クのような潤滑剤や繊維素グリコール酸カルシウムのよ
うな崩壊剤、ラクトースのような安定化剤、グルタミン
酸又はアスパラギン酸のような溶解補助剤を含有してい
てもよい。錠剤又は丸剤は必要によりショ糖、ゼラチ
ン、寒天、ペクチン、ヒドロキシプロピルセルロース、
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートなどの
糖衣又は胃溶性若しくは腸溶性物質のフィルムで被膜し
てもよい。

【００１５】また、本発明の有効成分である生薬に影響
を与えない程度でカフェイン、ビタミンＢ１、ビタミン
Ｂ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビ
オチン、カルニチン、パントテン酸、及びニコチン酸と
その誘導体などの水溶性ビタミン、ビタミンＡ、ビタミ
ンＥとその誘導体などの脂溶性ビタミン、タウリン、ア
ルギニンなどのアミノ酸、生薬（甘草、蒲公英、魚腥
草、菊花、人参、桂皮など）を配合することができる。
経口投与の為の液体組成物は、製薬学的に許容される乳
濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤等を
含み、一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製
水、エタノールを含む。この組成物は不活性な希釈剤以
外に湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、
芳香剤を含有していてもよい。

【００１６】また、健康食品としては、飲料、或いはゼ
リー、ビスケット、クッキー、キャンディー等菓子の形
態で提供することができる。本発明の生薬は、投与対象
の年齢、性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定
されるが、通常、成人１日当たり生薬総量として１０ｍ
ｇ〜５ｇ、好ましくは５０ｍｇ〜３ｇを経口摂取するこ
とにより、重篤な副作用の恐れもなく、所望の好中球活
性化作用が発揮できる。

【００１７】

【実施例】以下の実施例は本発明を説明するものであ
る。実施例１養魚の鰾内好中球活性化試験（供試魚）供試魚は、自家繁殖させた平均体重７８ｇの
テラピア(Oreochromis niloticus)を１ヶ月程度予備飼
育し、試験水槽で５日間馴致したものを使用した。馴致
期間及び実験期間中の飼育密度は１尾／水槽とした。実
験期間中の飼育環境は水温２４．０〜２５．６℃、ｐＨ
６．５０〜７．２８、溶存酸素量５．５０〜７．８９ｐ
ｐｍであった。実験期間を除き、市販のウナギ用の配合
飼料を乾燥重量で１日当たり体重の２％程度になるよ
う、１日２回給餌した。（対照群及び試験郡の設置）馴致終了後、１群４尾と
し、５日間に渡って、表１の添加物を加えた前述の配合
飼料を毎日体重の２％重量になるよう１日２回給餌し
た。試験群である生薬混合物は南瓜子：紅花：オオバ
コ：スイカズラ＝５：３：１：３の比率で配合した。

【表１】

【００１８】（好中球の分離）５日目の２回目の給餌後
に、抗原として5mg/mlに調整した大腸菌死菌0.2mlを各
個体の鰾内に注射した。２４時間後に鰾内に浸出してき
た細胞をHANKS(-)液で洗浄し回収した。回収した細胞浮
遊液は、１８０×ｇで５分間遠心して沈殿した細胞をHA
NKS(-)液で再浮遊させた。（浸出好中球数の測定）細胞浮遊液を１０μｌ取り、同
量の０．５％トリパンブルー・HANKS(-)溶液を混合し、
血球計算板を用いて検鏡して細胞数を測定した。細胞が
多い場合、HANKS(-)液で数倍希釈して検鏡した。

【００１９】（活性酸素産生能の測定）HANKS(-)液で希
釈して5.0×10⁶cells/mlに調整した細胞浮遊液を使用し
た。0.5mlガラスチューブに細胞浮遊液0.05ml、発光剤
として２−エチル−６−フェニル−３，７−ジヒドロイ
ミダゾ［１，２−ａ］ピラジン（ＣＬＡ）0.1ml、HBSS
(-)液0.3mlを加え、化学発光測定器（日音医理科製作所
製NU-600 Shimazu Recorder U-135）にセットする。そ
の後、細胞膜刺激剤としてフォーボル−１２−ミリステ
ート−１３−アセテート（ＰＭＡ）0.05mlをマイクロシ
リンジにて注入する。この際、高圧に設定し、１０分間
測定を行った。（貪食能の測定）被貪食物質として0.5mg/mlに調整した
オプソニン化サイモサン0.3mlと5.0×10⁶cells/mlの細
胞浮遊液を等量混合し、２５℃で３０分間反応させた。
反応は、インキュベーター内でマイクロチューブテータ
を用いて回転させながら行った。反応後、混合液0.3ml
はスライドグラスに４０×ｇで１分間遠心塗沫を施し、
塗沫標本を作製した。塗沫標本はメイグリュンワルド・
ギムザ染色を施し、検鏡して貪食指数を算出した。貪食
指数は貪食陽性細胞１個当たりのザイモサン取り込み数
で表した。

【００２０】結果を表２と図１に示す。

【表２】

【００２１】遊走能本発明の配合生薬添加群である試験群は、鰾内浸出好中
球数において対照群と同等であり、好中球機能の内、遊
走能は維持されることが示された。一方、比較群１及び
２の鰾内浸出好中球数は有意差は出なかったものの対照
群より明らかに減少しており、好中球の遊走能の低下を
示した。殺菌能本発明の配合生薬添加群である試験群は、対照群の１．
５倍以上の活性酸素産生能を示し、殺菌能において顕著
に好中球機能を亢進することが確認された。一方、比較
群ではグルカン添加群である比較群２が有意な活性化酸
素産生能を示したが、ラクトフェリン添加群である比較
群１は活性酸素産生能は対照群より劣る結果であり、殺
菌能の低下を示した。

【００２２】貪食能本発明の配合生薬添加群である試験群、比較群１、２共
に貪食指数は対照群より有意に上昇しており、好中球機
能の内、貪食能の亢進が確認された。以上の実験から、
本発明の配合生薬は遊走能を維持して殺菌能と貪食能を
亢進する点で、従来知られたラクトフェリンやβ−グル
カゴンよりも優れた好中球活性化剤であることが確認さ
れた。

【００２３】実施例２顆粒剤南瓜子５．０ｇ、紅花３．０ｇ、オオバコ１．０ｇ、ス
イカズラ３．０ｇと乳糖６７ｇ及びデンプン１６ｇを堅
形混合機にて均一に混合し、先にハイドロキシプロピル
セルロース２ｇ、カプリン酸トリグリセライド５ｇを８
５％エタノール４０ｇに溶解したもの練合溶媒とし、練
合したのちバスケット型製粒機（スクリーン径１ｍｍ）
にて造粒後、１４メッシュ篩を通過させ乾燥後顆粒とす
る。上記成分とマンニット、ヒドロキシプロピルセルロ
ース、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、アスパルテ
ーム及び香料を均一に混合し、顆粒剤１２包を得た。

【００２４】

【発明の効果】本発明によれば、強力な好中球活性化剤
が提供される。遊走能を維持して殺菌能と貪食能を亢進
させる点で従来にない優れた好中球活性剤である。

【図面の簡単な説明】

【図１】はティラピアの鰾内浸出好中球数を、

【図２】は活性酸素産生能を、

【図３】は貪食指数を表す。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】南瓜子、紅花、オオバコ及びスイカズラの
４種の生薬を配合することからなる好中球活性化剤。