JP2000044472A

JP2000044472A - 糖尿病性合併症の予防または治療薬剤

Info

Publication number: JP2000044472A
Application number: JP10214996A
Authority: JP
Inventors: Toshiaki Ariga; 敏明有賀; Yukihiko Iwai; 幸彦岩井; Shigehiro Kataoka; 茂博片岡; Nobuyuki Yamatsugu; 信幸山次; Van Chuen Guyuen; グュエン・ヴァン・チュエン
Original assignee: Kikkoman Corp
Current assignee: Kikkoman Corp
Priority date: 1998-07-30
Filing date: 1998-07-30
Publication date: 2000-02-15

Abstract

(57)【要約】【課題】植物体にその存在が知られている化合物により
糖尿病性合併症の予防または治療を行なう。【解決手段】プロアントシアニジンオリゴマーを有効成
分とすることを特徴とする糖尿病性合併症の予防または
治療薬剤を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、プロアントシアニ
ジンオリゴマーを有効成分とする糖尿病性合併症の予防
または治療薬剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】糖尿病に関しては、特殊な慢性的合併症
例えば糖尿病性白内障、糖尿病性神経障害、糖尿病性網
膜症、糖尿病性腎症などの難治性疾患が発生する場合が
ある。従来、糖尿病に伴うこれらの難治性疾患の予防お
よび治療法として、十数件の方法が知られている。例え
ば、エイコサペンタエン酸または／およびドコサヘキサ
エン酸、もしくはそのエステルを用いる方法（特開昭６
０−２４８６１０号）、スピロ−３−ヘテロアゾリジン
化合物を用いる方法（特公平０３−７２２２６号）、ス
ピロ−インデン類およびスピロ−１，２−ジヒドロ−ナ
フタレン類を用いる方法（特開昭６０−２０９５７２
号）、ピロロキノリンキノンまたはその誘導体を用いる
方法（特開昭６３−４８２１５号）、ヒダントイン誘導
体を用いる方法（特公平０３−７２２２７号）、ローダ
ニン誘導体を用いる方法（登録２６０８０９７、同１９
７５９３７、特開平０４−９３８５、同０４−１７３７
９０）、テトラヒドロチオフエン誘導体を用いる方法
（特開平０５−３２６５９）、１，４−ベンゾチアジン
−２−酢酸誘導体を用いる方法（登録２７２９４３
０）、スクシンアミド酸誘導体を用いる方法（特開平０
７−８２２５９）、ビオチンアミド誘導体を用いる方法
（特開平０７−２８６７）、２−置換ベンゾチアゾール
誘導体を用いる方法（特開平０８−２０８６３１）およ
びイミダゾピロロキノリン類を用いる方法（特開平１０
−４５５９２）などが知られている。しかし、これらの
化合物は、非植物体より得られるもので、人体に対する
毒性、安全性の面で必ずしも満足するものではない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、植物体にそ
の存在が知られている化合物により糖尿病性合併症の予
防および治療を行なうことを目的とする。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するため鋭意検討を重ねた結果、ぶどう果実の種
子、果皮または搾汁粕より抽出して得られるプロアント
シアニジンオリゴマーが、糖尿病性合併症の予防および
治療剤として効果を奏し、課題を解決できることを発見
し、この知見に基づいて本発明を完成した。すなわち本
発明は、プロアントシアニジンオリゴマーを有効成分と
することを特徴とする糖尿病合併症の予防または治療薬
剤である。また本発明は、プロアントシアニジンオリゴ
マーが、一般式：

【化２】（式中、Ｒ₁は水素またはヒドロキシル基、Ｒ₂、Ｒ₃、
Ｒ₄は、同一でも異なっていてもよく、水素原子、ヒド
ロキシル基またはメトキシル基、Ｒ₅は水素、ガロイル
基またはグリコピラノシル基を示す。）で表されるフラ
バン−３，４−ジオールを構成単位として結合した２−
１００量体の群より選ばれた少なくとも一種である前記
の糖尿病性合併症の予防または治療薬剤である。また本
発明は、プロアントシアニジンオリゴマーが、プロアン
トシアニジンオリゴマーが、ブドウ果実の種子、果皮ま
たは搾汁粕より抽出して得られる抽出物である前記の糖
尿病性合併症の予防または治療薬剤である。

【０００５】本発明の特徴は、プロアントシアニジンオ
リゴマーを有効成分としている糖尿病性合併症の予防ま
たは治療薬剤である。そして本発明のプロアントシアニ
ジンオリゴマーには、当該物質もしくはその塩化物の他
に、当該物質の含有物、例えば、当該物質を含有する植
物体もしくはそれらの破砕物、植物体から抽出して得ら
れる抽出物もしくはそれらの精製物をも含むものとす
る。さらにプロアントシアニジンオリゴマーの各種混合
物もしくはプロアントシアニジンオリゴマーとその含有
物との混合物をも含むものである。そして、それらのも
のは製造法の如何を問わないものとする。

【０００６】前記の植物としては、本発明の目的を達成
できるものであればどのような植物でもよいのである
が、具体的には、ブドウ、アズキ、トチ、マツ、カシ、
ミチヤナギ、ヤマモモ、大麦、麦芽、メヒルギ、オウラ
テイー、二十日大根、紫蘇、キャベツ、ダリアなどが挙
げられる。また植物体としては、本発明の目的を達成で
きる部分であれば、どの部分、例えば、花、実、種子、
果実もしくはそれらの果肉または皮類、および根、樹
木、樹皮、葉などを使用してもよい。それらは乾燥した
もの、生のもの、どちらでもよい。更に、果実のジュー
ス類もしくはリンゴ酒、ブドウ酒などの果実酒、ビール
類、またはそれらの製造の際副産物として生成する粕
類、または植物体の加工物なども挙げられる。なお、本
発明の植物体としては、ブドウ果実の種子、果皮、また
は搾汁粕を使用するのが、特に好適である。そして、搾
汁粕としては、ジュース類の製造時のもの、ブドウ酒製
造時のものなどが挙げられる。

【０００７】プロアントシアニジンオリゴマーの具体例
としては、フラバン−３−オールもしくはフラバン−
３，４−ジオールまたはフラバン−４−オールなどを母
骨格とする化合物（母骨格自体およびそれらの各種誘導
体）を構成単位として縮合もしくは重合により結合した
化合物群（化学的合成法で製造される各種重合体もしく
は縮合体、各種植物体中に存在する縮合型タンニン、ま
た植物体を加水分解処理することによりシアニジン型、
デルフィニジン型、ペラルゴニジン型などの各種アント
シアニジン化合物などを生成するものなど）を例として
挙げることができる。なお、前記化合物群の中でも、前
記構成単位の２量体、３量体、４量体、さらには３０量
体以上の高分子のプロシアニジン型、プロデルフィニジ
ン型、プロペラルゴニジン型などの各種アントシアニジ
ン化合物群およびそれらの立体異性体もしくは各種誘導
体が好適なものである。また、前記の製造法として、化
学的もしくは酵素的合成法、植物体、微生物体からの抽
出法などを挙げることができる。

【０００８】前記の化合物の中でも、化合物自体の溶解
性、また薬剤の生体吸収、局在作用もしくは活性などか
ら、プロアントシアニジンオリゴマーとしては、前記一
般式（１）で表されるフラバン−３−オールもしくはフ
ラバン−３，４−ジオールを構成単位として結合した２
〜３０量体が好ましい。その中でも２〜１０量体が特に
好ましい。したがって、本発明の糖尿病性合併症の予防
または治療薬剤は、前記のような化合物群、好適には前
記の２〜３０量体から選択された少なくとも１種以上を
有効成分とするものである。

【０００９】ここで、本発明のプロアントシアニジンオ
リゴマーにつき、さらに具体的に示す。前記一般式で表
されるフラバン−３−オールもしくはフラバン−３，４
−ジオールを構成単位として結合した２〜３０量体など
のプロアントシアニジンオリゴマーは、公知の化学的も
しくは酵素的合成法あるいは各種植物体からの抽出法な
どにより得ることができる。前記抽出法の場合について
は、例えば、各種植物体もしくはその破砕物などを溶媒
を用いて抽出処理し、得た抽出物をさらに液体クロマト
グラフィーなどにより分別精製するか、あるいは植物体
を原料とした果実酒、ビールなどの二次加工品をプロア
ントシアニジンオリゴマーの選択的吸着剤で処理して、
該プロアントシアニジンオリゴマー区分を濃縮し、濃縮
物をさらに向流分配法、液体クロマトグラフィーなどに
より分別精製することによって得られる。本発明におい
ては、ブドウ果実の種子、果皮または搾汁粕を熱水また
は含水エタノールまたは含水アセトンにて処理して、本
発明のプロアントシアニジンオリゴマーを抽出し、抽出
物または混合物として得るのが、好適である。

【００１０】そして各種プロアントシアニジンオリゴマ
ーおよびその製法を例示すると次の通りである。（１）ブドウ果実の種子、果皮または搾汁粕から本発明
のプロアントシアニジンオリゴマーの抽出物の製造法：
公知の方法（特開平３−２００７８１号公報参照）に従
えばよい。例えば、ブドウ果実の種子、果皮または搾汁
粕を７０℃以上、好ましくは７０〜１２０℃、特に好ま
しくは８０〜１００℃で熱水抽出を行なう。その際、使
用うる水は、種子、果皮または搾汁粕に対して、通常、
１〜２０倍量（ｖ／ｗ）、好ましくは、３〜１０倍量で
ある。抽出時間は、抽出量が最大になるように適宜選択
されるが、通常は、１０分〜４時間、好ましくは１５分
〜２時間である。本発明においては、この段階での抽出
物、その乾燥物、精製物（部分精製物をも含む）を本発
明のブドウ果実の種子、果皮または搾汁粕の抽出物とし
もよいが、更に次の操作を施して当該抽出物とするのが
好適である。すなわち、この熱水抽出の際、熱水抽出処
理前に、７０℃未満、好ましくは、２０〜７０℃で、原
料と１〜２０倍量（ｖ／ｗ）、好ましくは３〜１０倍量
の水とを、５分〜４時間、好ましくは１０分〜２時間、
接触させ、原料に含有する糖などの夾雑物を除去してか
ら、本発明のプロアントシアニジンオリゴマーを抽出す
ると、高純度の当該物が得られる。この場合、得られた
本発明のプロアントシアニジンオリゴマーは、各種当該
物の混合物である。この抽出物は、それ自体、本発明の
プロアントシアニジンオリゴマーであるが、その後、公
知の各種操作により乾燥してもよい。また、各種の精製
操作を行なって各種精製段階の精製物（部分精製物を含
む）を得てもよい。本発明においては、前記のもの全て
を、本発明の当該抽出物と定義する。

【００１１】（２）２量体プロシアニジンＢ−２（Ｃ₄
−Ｃ₈結合Ｃａｔｅｃｈｉｎ−Ｃａｔｅｃｈｉｎ）、Ｃ₄
−Ｃ₈結合の２量体プロシアニジン（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ｃａ
ｔｅｃｈｉｎ−Ａｆｚｅｌｅｃｈｉｎ）：本発明者らの
アグリカルチュラル・バイオロジカル・ケミストリー
（Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．）第４５巻、２７
０９〜２７１２頁（１９８１年）記載の方法で、アズキ
（ＶｉｇｎａａｎｇｕｌａｒｉｓＯｈｗｉｅｔ
Ｏｈａｓｈｉ）の７０％水性アセトン抽出物をポリアミ
ドＣ−２００およびセファデックスＬＨ−２０のカラム
を用いた液体クロマトグラフィーにより分別精製するこ
とにより得られる。

【００１２】（３）２量体プロアントシアニジンＡ−
２：Ｄ．Ｊａｃｑｕｅｓらのジャーナル・オブ・ケミカ
ル・ソサイテー・パーキンＩ（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏ
ｃ．ＰｅｒｋｉｎＩ）２６６３〜２６７１頁（１９
７４年）記載の方法でトチ（Ａｅｓｃｕｌｕｓｈｉｐ
ｐｏｃａｓｔａｎｕｍ）の実の殻を原料として得られ
る。

【００１３】（４）Ｃ₄−Ｃ₈結合の２量体プロシアニジ
ン（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ｃａｔｅｃｈｉｎ−Ｃａｔｅｃｈｉ
ｎ）：Ｒ．Ｗ．Ｈｅｍｉｎｇｗａｙらのフィトケミスト
リー（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）第２２巻、２７
５〜２８１頁（１９８３）記載の方法でマツ（Ｌｏｂｏ
ｌｏｌｌｙｐｉｎｅ）の樹皮を原料として得られる。

【００１４】（５）Ｃ₆−Ｃ₈結合の２量体プロデルフィ
ニジン（Ｃ₆−Ｃ₈結合Ｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ−Ｃ
ａｔｅｃｈｉｎ）：Ｂｙｕｎｇ−ＺｕｎＡｈｎらのア
ーカイブ・デル・ファーマチー・ウント・ベリヒテ・デ
ル・ドイチェン・ファーマゾイティシェン・ゲゼルシャ
フト（Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍａｚ．）６６６〜６７３頁
（１９７０年）記載の方法でカシ（Ｏａｋ）の樹皮を原
料として得られる。

【００１５】（６）プロシアニジンＢ−１−没食子酸エ
ステル（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ｃａｔｅｃｈｉｎｇａｌｌａｔ
ｅ−Ｃａｔｅｃｈｉｎ）、プロシアニジンＢ−１二没食
子酸エステル（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ｃａｔｅｃｈｉｎｇａｌ
ｌａｔｅ−Ｃａｔｅｃｈｉｎｇａｌｌａｔｅ）：）野
中らのフィトケミストリー（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ）第２１巻、４２９〜４３２頁（１９８２）記載の
方法でミチヤナギ（Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍｍｕｌｔｉｆｌ
ｏｒｕｍ）の根を原料として得られる。

【００１６】（７）２量体プロデルフィニジンＢ−２二
没食子酸エステル（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ｇａｌｌｏｃａｔｅｃ
ｈｉｎｇａｌｌａｔｅ−Ｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ
ｇａｌｌａｔｅ）：野中らのフィトケミストリー（Ｐ
ｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）第２２巻、２３７〜２４
１頁（１９８３年）記載の方法でヤマモモ（Ｍｙｒｉｃ
ａｒｕｂｒａ）の樹皮を原料として得られる。

【００１７】（８）Ｃ₄−Ｃ₈結合の２量体プロペラルゴ
ニジン（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ａｆｚｅｌｃｈｉｎ−Ｃａｔｅｃ
ｈｉｎ）、Ｃ₄−Ｃ₈結合の３量体プロデルフィニジン
（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ−Ｇａｌｌ
ｏｃａｔｅｃｈｉｎ−Ｃａｔｅｃｈｉｎ）：Ｉ．Ｍｃｍ
ｕｒｒｏｕｇｈらのジャーナル・オブ・サイエンス・オ
ブ・フード・アグリカルチャー（Ｊ．Ｓｃｉ．ｆｏｏｄ
Ａｇｒｉｃ．）第３４巻、６２〜７２頁（１９８３
年）記載の方法により大麦および麦芽を原料として得ら
れる。

【００１８】（９）２量体プロシアニジンＢ−４ラムノ
サイド：メヒルギの皮部を原料として特開昭５９−５９
６３８号記載の方法で得られる。

【００１９】（１０）Ｃ₄−Ｃ₈結合の２量体プロペラル
ゴニジン［Ｃ₄−Ｃ₈結合Ａｆｚｅｌｃｈｉｎ−Ｇａｌｌ
ｏｃａｔｅｃｈｉｎ（４−０−ｍｅｔｈｙｌ）］：Ｆ．
Ｄ．Ｍｏｎａｃｈｅらのアナリ・デイ・キミカ〔Ａｎ
ｎ．Ｃｈｉｍ．（Ｒｏｍｅ）〕第５７巻、１３６４〜１
３７１頁（１９６７年）記載の方法によりオウラテイー
（Ｏｕｒａｔｅａ）の根の皮を原料として得られる。

【００２０】（１１）Ｃ₄−Ｃ₈結合の４量体プロシアニ
ジン（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ｃａｔｅｃｈｉｎ−Ｃａｔｅｃｈｉ
ｎ−Ｃａｔｅｃｈｉｎ−Ｃａｔｅｃｈｉｎ）：Ａ．Ｇ．
Ｈ．Ｌｅａのジャーナル・オブ・サイエンス・オブ・フ
ード・アグリカルチャー（Ｊ．Ｓｃｉ．ＦｏｏｄＡｇ
ｒｉｃ．）第２９巻、４７１〜４７７頁（１９７８年）
記載の方法で、リンゴ酒をセファデックスＬＨ−２０で
処理して得られるプロアントシアニジンの濃縮物を、酢
酸エチルおよび水を用いた向流分配法並びにセファデッ
クスＬＨ−２０のカラムを用いた液体クロマトグラフィ
ーにより分別精製することによって得られる。

【００２１】合成法については、例えば、以下の如くで
ある。：（１２）２量体プロシアニジンＢ−３（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ｃ
ａｔｅｃｈｉｎ−Ｃａｔｅｃｈｉｎ）、２量体プロシア
ニジンＢ−４（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ｃａｔｅｃｈｉｎ−Ｃａｔ
ｅｃｈｉｎ）：Ｇ．Ｆｏｎｋｎｅｃｈｔｅｎらのジャー
ナル・オブ・インスティチュート・ブルーイング（Ｊ．
Ｉｎｓｔ．Ｂｒｅｗ．）第８９巻、４２４〜４３１頁
（１９８３年）記載の方法により、ジヒドロケルセチン
およびカテキンまたはエピカテキンを原料として合成法
で得られる。また、Ｒ．Ｅａｓｉｍｏｎｄのジャーナル
・オブ・インスティチュート・ブルーイング（Ｊ．Ｉｎ
ｓｔ．Ｂｒｅｗ．）第８０巻、１８８頁（１９７４年）
記載の合成法によって得られる。

【００２２】上記の他に、化学合成法によってプロシア
ニジン２量体（Ａ−１）プロデルフィニジン２量体、プ
ロシアニジン３量体、プロシアニジン４量体なども得る
ことができる。

【００２３】前記の方法により、本発明のプロアントシ
アニジンオリゴマーは、液状もしくは半固形状の形態で
も得られるが、さらに凍結乾燥などを行なうことにより
粉末形態として得ることができる。

【００２４】また、医薬として許容される、前記プロア
ントシアニジンオリゴマーの塩をも本発明の糖尿病性合
併症の予防または治療薬剤として用いることができる。

【００２５】その塩としては、例えば、アルカリ金属塩
（例えばナトリウム塩、カリウム塩など）、アルカリ土
類金属塩（カルシウム塩など）、アンモニウム塩、エタ
ノールアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシ
ルアミン塩などが挙げられる。

【００２６】（投与方法）本発明の糖尿病性合併症の予
防または治療薬剤は、例えば糖尿病性白内障、糖尿病性
神経障害、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症などの糖尿病
に伴うこれらの難治性疾患の予防および治療のため、経
口的にあるいは非経口的に適宜使用される。すなわち、
経口、静脈、腹腔内の投与によっては勿論のこと、点眼
によっても著しい治療効果を表すものである。

【００２７】（製剤化）製剤の形態としては、例えば錠
剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤などの固形剤、または点
眼剤、注射剤などの液剤などいずれの形にも公知の方法
により適宜調製することができる。これらの製剤には通
常用いられている結合剤、崩壊剤、増粘剤、分散剤、再
吸収促進剤、矯味剤、緩衝剤、界面活性剤、溶解補助
剤、保存剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤、ｐＨ調製剤
および賦形剤などを適宜使用してもよい。

【００２８】｛投与量（本発明では以下用量という）｝
本発明の目的における本発明のプロアントシアニジンオ
リゴマーの用量は、その種類、その剤型、また患者の年
令、体重、適応症状などによって異なるが、例えば注射
剤の場合、成人１日１回０．０１〜１０００ｍｇ、好ま
しくは０．１〜１００ｍｇ程度、内服剤の場合は、成人
１日数回、一回量約０．１〜４０００ｍｇ、好ましくは
１〜３０００ｍｇ程度投与するのがよい。点眼剤の場合
は、濃度０．０１〜１０％（ｗ／ｗ）、好ましくは０．
５〜２％（ｗ／ｗ）程度のものを１日１〜５回、好まし
くは２〜５回程度１回につき１〜２滴点眼するのがよ
い。本発明においては、本発明の糖尿病性合併症の予防
または治療薬剤に、別種の薬効を奏する成分を適宜含有
させてもよい。

【００２９】なお、前記経口投与の場合に、本発明のプ
ロアントシアニジンオリゴマーを健康食品として利用す
ることもできる。また、飲食品に添加して、その飲食品
を飲食するという形態を採用することもできる。前者の
場合、プロアントシアニジンオリゴマーの飲食品に添加
する量は特に限定されないが、後者の場合は、通常０．
０１〜５％（ｗ／ｗ）、好ましくは０．５〜２％（ｗ／
ｗ）である。

【００３０】試験例１２量体プロシアニジンＢ−３（Ｃ₄−Ｃ₈結合Ｃａｔｅｃ
ｈｉｎ−Ｃａｔｅｃｈｉｎ）の合成：Ｒ．Ｅａｓｔｍｏｎｄの方法（Ｊ．Ｉｎｓｔ．Ｂｒｅｗ．；８０巻、１８８頁、１９
７４年）に準じ、（±）−ジヒドロケルセチン５０ｇ、
（＋）−カテキン５０ｇおよび水素化ホウ素ナトリウム
を原料として、合成反応を行なった。反応終了後、酢酸
にてｐＨ５．０に調整し、酢酸エチルにて抽出操作を行
なった。得られた抽出液を減圧蒸留し、得られた濃縮物
をセファデックスＬＨ２０（φ８×６５ｃｍ）を担体す
るカラムに掛けた。エタノールを展開溶媒とするカラム
クロマトグラフィーにて分画し、溶出液量９〜１３Ｌの
画分を分取することにより、２量体プロシアニジンＢ−
３画分を得た。この画分を有賀らの方法（Ａｇｒｉｃ．
Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．；５２巻、２７１７〜２７２
２，１９８８年）に準じ、逆相系シリカゲル高速液体ク
ロマトグラフィー｛カラム：μＢｏｎｄａｐａｃｋＣ
₁₈（５０×３００ｍｍ）；展開溶媒：７．５％ミタノー
ル；検出：ＯＤ_280nm｝にて精製した。得られた目的の
溶出画分を凍結乾燥することにより、５．１１ｇの２量
体プロシアニジンＢ−３を得た。

【００３１】試験例２ブドウ果実の種子からのプロアントシアニジンオリゴマ
ーの抽出物の製造：白ブドウ（品種：ミラトルガウ）の
種子１ｋｇに５Ｌの水を加え、５５℃で２時間、撹拌・
洗浄後、さらに種子を水５Ｌにて完全に洗浄した。得ら
れた洗浄種子を蒸留水５Ｌで９０℃、３時間抽出した。
粗抽出液を常法により濾過し、得られた清澄液をＢｒｉ
ｘ濃度１０まで濃縮し、一晩静置した。生じた沈殿を遠
心分離により除去し、得られた清澄液を濃縮した後、凍
結乾燥し、２７．２ｇのプロアントシアニジンオリゴマ
ー抽出物（含有量：全フラバノールとして８５．４％
（ｗ／ｗ））を得た。なお、プロアントシアニジンオリ
ゴマー含有量の分析は、次のように行なった。先ず、
Ｒ．Ｂ．Ｂｒｏａｄｈｕｒｓｔらのジャーナル・オブ・
フーズ・アンド・アグリカルチャー（Ｊ．Ｓｃｉ．Ｆｏ
ｏｄＡｇｒｉｃ．）、第２９巻、７８８〜７９８頁
（１９７８年）記載の方法に従い測定し、次いで、Ｓ．
Ｋｉｔａｏらの方法（Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｅｏｔｅｃｈ．
Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５７巻、２０１０〜２０１５頁、１
９９３年）に従い、単量体のカテキン類の含量を測定し
た。前者の測定値から後者の測定値を差し引くことによ
りプロアントシアニジンオリゴマー含有量を算出した。

【００３２】試験例３単回投与毒性試験（試験方法）５週齢、雌雄、Ｃｒｊ：ＩＣＲマウス（雄
マウス平均体重２７ｇ、雌マウス平均体重２２ｇ）を用
い（５匹／群）、前記試験例１および試験例２の方法と
同様な方法で製造した２量体プロシアニジンＢ−３試料
およびプロアントシアニジンオリゴマー抽出物につい
て、各々２ｇ／ｋｇを別々の雌雄マウスにおのおの強制
単回経口投与後１４日観察した。なお、対照として蒸留
水のみを雌雄マウスにおのおの同様に投与した。試験期
間終了後、全例の病理解剖を行い、全身各臓器の異常の
有無を確認した。

【００３３】（試験結果）前記当該物の投与で死亡動物
はなく、雄雌マウスはなんら臨床症状を示さず、試験期
間中順調な体重増加を示した。また、試験期間終了後の
全例の病理解剖で、なんら異常は認められなかった。

【００３４】実施例１（カプセル剤の調製）試験例１で得た２量体プロシアニジンＢ−３１００ｍｇ乳糖１６０ｍｇトウモロコシ澱粉４０ｍｇ以上を１カプセル分としてカプセルに充填した。

【００３５】実施例２（錠剤の調製）試験例２で得たプロアントシアニジンオリゴマー抽出物１００ｍｇ乳糖７０ｍｇトウモロコシ澱粉１７ｍｇ結晶セルロース１０ｍｇステアリン酸カルシウム３ｍｇ以上を１錠分として錠剤化した。

【００３６】実施例３（内服薬の調製）プロアントシアニジン（含有量９５
％、キッコーマン社製）６００ｍｇ／ｋｇとなるように
注射用蒸留水に懸濁し、内服薬を調製した。

【００３７】実施例４（糖尿病性合併症の予防および治療効果確認試験）糖尿
病ラット１８匹を６匹づつ（Ａ）対照群、（Ｂ）プロシ
アニジンＢ−３投与群（対飼料０．５％）、（Ｃ）プロ
アントシアニジン（含有量９６％）投与群（対飼料０．
５％）に分け、１２週間飼育した。その間、糖尿病性白
内障の進行状況を経日的に観察評価して白内障抑制効果
の確認試験した。また１２週間後ラットを解剖し、血糖
値の分析、血中ヘモグロビン糖化率の測定、血中（血漿
中）過酸化脂質の分析を行なった。

【００３８】なお、１）糖尿病ラットの作製、２）白内
障抑制効果の確認試験、３）血糖値の分析、４）糖化ヘ
モグロビンの分析（血中ヘモグロビン糖化率の測定）、
５）過酸化脂質の分析は、以下の方法により実施した。

【００３９】１）糖尿病ラットの作製法：Ｗｉｓｔａｒ
系ラット（雄、１０週齢、体重２７０ｇ）にストレプト
ゾトシン（Ｓｉｇｍａ社製）を体重１ｋｇ当たり５０ｍ
ｇを常法により腹腔内投与し、糖尿病ラットを作製し
た。

【００４０】２）白内障抑制効果確認試験法ラットの水晶体の白濁度を目視にて０〜９の１０段階で
評価した。０→変化なし１→水晶体赤道部に空泡状変化が少し起こる２→水晶体赤道部に空泡状変化が起こる３→水晶体表面の中央部にまで混濁が少し起こる４→水晶体表面の中央部にまで混濁が起こるが、眼底は
透視できる５→水晶体表面全体に混濁が広がり、眼底も透視できな
い７→水晶体の核の白濁が少し起こる８→水晶体の核が白濁する９→水晶体全体が完全に白色化する。

【００４１】３）血糖値分析方法：酵素グルコースオキ
シダーゼを利用する方法により、常法により血中のグル
コース濃度を測定した。

【００４２】４）糖化ヘモグロビン分析法常法によりアフィニティークロマトグラフィー法を用
い、血中のヘモグロビン糖化率を測定した。

【００４３】５）過酸化脂質分析法ＴＤＡ（チオバルビツール酸）を用い、血中の過酸化脂
質を定量し、測定した。

【００４４】結果を表１、表２および表３に示す。表１
〜表３の結果から、プロシアニジンＢ−３投与群やプロ
アントシアニジン投与群は、対照に比し、糖尿病性白内
障の発症が抑制されており、血糖値、血中ヘモグロビン
糖化率、血中過酸化脂質も低く、種々の糖尿病性合併症
の発症、進行の予防と治療に有効であると判定される。

【００４５】表１糖尿病ラットの糖尿病性白内障の進行経過（日）５６７８９１０１１対照 0.08 0.08 0.58 0.92 2.58 3.33 5.08 プロシアニジン 0 0 0 0 0.83 1.33 2.33 Ｂ−３投与群プロアントシア 0 0 0 0 0.75 1.33 2.17 ニジン投与群（注１）評点：６匹のラットの左右の水晶体の白濁度の平均値。

【００４６】表２糖尿病ラットの血糖値とヘモグロビン糖化率血中グルコース糖化ヘモグロビン（ｍｇ／ｄｌ）（％）対照６５９．７±６０．１（ａ）２１．１５±１．０８（ｄ）プロシアニジン５３０．２±９２．１（ｂ）１９．６２±１．３３（ｅ）Ｂ−３投与群プロアントシア５２７．１±９９．３（ｃ）１９．５６±１．３８（ｆ）ニジン投与群（注１）分析値：平均値±標準偏差（ｎ＝６）（注２）有意差検定結果：ａとｂ（ｐ＜０．０１）、ａとｃ（ｐ＜０．０１）ｄとｅ（ｐ＜０．０５）、ｄとｆ（ｐ＜０．０５）

【００４７】表３糖尿病ラット血漿中の過酸化脂質過酸化脂質（ｎｍｏｌＭＤＡ／ｍｌ血漿）対照１３．５０±４．４２（ａ）プロシアニジン８．２２±３．５７（ｂ）Ｂ−３投与群プロアントシア７．９７±３．６８（ｃ）ニジン投与群（注１）分析値：平均値±標準偏差（ｎ＝６）（注２）有意差検定結果：ａとｂ（ｐ＜０．０１）、ａとｃ（ｐ＜０．０１）（注３）ＭＤＡ：マロンジアルデヒド

【００４８】実施例５糖尿病性合併症の治療抑制効果確認試験糖尿病ラットを１０匹づつ、（Ａ）対照群、（Ｂ）
（＋）−カテキン（東京化成製）投与群（対飼料０．１
％添加）、（Ｃ）プロシアニジンＢ−３（試験１で調
製）投与群（対飼料０．１％添加）、（Ｄ）プロアント
シアニジン（グラヴィノール・スーパー、含有量９６
％、キッコーマン社製）投与群（対飼料０．１％）の４
つのグループに分け、１２週間飼育した後、血糖値を分
析した。

【００４９】結果を表４に示す。表４の結果から、対照
群や、カテキンに比し、プロシアニジンＢ−３やプロア
ントシアニジンは、糖尿病ラットの血糖値の上昇を抑制
し、糖尿病性合併症の予防や治療に有効と判定された。

【００５０】表４糖尿病ラットの血糖値血中グルコース（ｍｇ／ｄｌ）対照６６５．０±６０．８（ａ）（＋）−カテ６５５．８±８５．０キン投与群。プロシアニジン６１８．６±６９．１（ｂ）Ｂ−３投与群プロアントシア６１５．２±６５．５（ｃ）ニジン投与群（注１）分析値：平均値±標準偏差（ｎ＝１０）（注２）有意差検定結果：ａとｂ（ｐ＜０．０５）、ａとｃ（ｐ＜０．０５）

【００５１】実施例６（糖尿病マウスを用いた食後過血糖抑制試験）市販の糖
尿病マウス（ＫＫａｙＪｃｌ、１３週齢／日本クレア
社製）（ｎ＝５）を、本試験に先立ち、２０時間絶食さ
せ（水は可）、胃ゾンデを用いて、検体（実施例３で調
製した内服薬）を強制的に投与（投与量：６００ｍｇ／
ｋｇ・マウス体重の割合となる量とした）し、更に３０
分後トウモロコシ澱粉の懸濁液（１０００ｍｇ／ｋｇ・
注射用蒸留水）を強制的に経口投与（投与量：同上）し
た。各検体投与前０分、各検体投与後、３０、６０、
９０、１２０、１８０、２４０分に採血し、全サンプル
を、血糖測定器（アントセンス／バイエル三共製）を用
い、血糖値を測定した。結果を、図１に示す。

【００５２】図１の結果から、プロアントシアニジン
は、経口投与後（食後）、腸管での糖吸収を抑制するこ
とが判る。すなわち、糖尿病性合併症の抑制効果を期待
できることが判る。

【００５３】

【発明の効果】本発明の糖尿病合併症の予防または治療
薬剤は、毒性が少ない特徴を有し、しかも血糖値、血中
ヘモグロビン糖化率および血中過酸化脂質を低い値に制
御し、種々の糖尿病合併症の発症、進行の予防と治療に
有効であると判定される。

【図面の簡単な説明】

【図１】糖尿病マウスを用いた食後過血糖抑制試験結果
を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｃ０７Ｄ 311/62 Ｃ０７Ｄ 311/62 Ｃ０７Ｈ 17/065 Ｃ０７Ｈ 17/065 (72)発明者山次信幸千葉県野田市野田339番地キッコーマン株式会社内 (72)発明者グュエン・ヴァン・チュエン東京都町田市真光寺町798−15 Ｆターム(参考） 4C057 BB02 KK07 4C062 FF44 4C086 AA01 AA02 BA08 EA04 MA01 MA04 NA14 ZA01 ZA33 ZA81 ZC35 4C088 AB56 AC04 BA08 BA32 CA03 NA14 ZA01 ZA33 ZA81 ZC35

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】プロアントシアニジンオリゴマーを有効成
分とすることを特徴とする糖尿病性合併症の予防または
治療薬剤。
【請求項２】プロアントシアニジンオリゴマーが、一般
式：【化１】（式中、Ｒ₁は水素またはヒドロキシル基、Ｒ₂、Ｒ₃、
Ｒ₄は、同一でも異なっていてもよく、水素原子、ヒド
ロキシル基またはメトキシル基、Ｒ₅は水素、ガロイル
基またはグリコピラノシル基を示す。）で表されるフラ
バン−３，４−ジオールを構成単位として結合した２−
１００量体の群より選ばれた少なくとも一種である請求
項１記載の糖尿病性合併症の予防または治療薬剤。
【請求項３】プロアントシアニジンオリゴマーが、ブド
ウ果実の種子、果皮または搾汁粕より抽出して得られる
抽出物である請求項１または２記載の糖尿病性合併症の
予防または治療薬剤。