ITMI971517A1

ITMI971517A1 - Ossopirrolo-pirrolderivati

Info

Publication number: ITMI971517A1
Application number: IT97MI001517A
Authority: IT
Inventors: Francois Diederich; Ulrike Obst; Lutz Weber
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1996-07-18
Filing date: 1997-06-26
Publication date: 1998-12-28
Also published as: US5891900A; DE19730990A1; ITMI971517A0; FR2751332B1; DE19730990C2; US6083971A; FR2751332A1; JP2938407B2; IT1292424B1; JPH1067782A

Description

DESCRIZIONE dell'invenzione industriale

L'invenzione riguarda nuovi ossopirrolo-pirrolderivati, in particolare quelli di formula

m cui

R1 è alchile inferiore, cicloalchile oppure fenile, R2 è H, OH oppure C(0)0-A, in cui A è alchile inferiore, cicloalchile oppure fenile, e

R3, R4 e R5 sono metile oppure R3 è H e R4 insieme con R5 è trimetilene

e anche idrati oppure solvati e loro sali fisiologicamente impiegabili.

Inoltre, l'invenzione riguarda procedimenti per la preparazione dei suddetti -composti,- -riguarda preparati farmaceutici che contengono tali composti e riguarda l'impiego di questi composti nella preparazione di preparati farmaceutici.

Esempi di sali fisiologicamente impiegabili dei composti di formula I sono sali con acidi minerali fisiologicamente compatibili con acido cloridrico, acido solforico, acido solforoso oppure acido fosforico; oppure con acidi organici come acido metansolfonico, acido p-toluensolfonico, acido acetico, acido trifluoroacetico, acido citrico, acido fumarico, acido maleico, acido tartarico, acido succinico oppure acido salicilico. I composti di formula I con gruppi acidi, come il gruppo carbossilico, possono formar.e anche sali con basi fisiologicamente compatibili. Esempi di tali sali sono sali di metallo alcalino, sali di metallo alcalino-terrosi, sali di ammonio e sali di alchilammonio, come il sale di Na- K-, Caoppure il sale di tetrametilammonio. I composti di formula I possono essere presenti anche sotto forma di ioni anfoteri.

I composti di formula I possono essere solvatati, in particolare idratati. L'idratazione può venire effettuata nel corso del procedimento di preparazione oppure gradualmente come conseguenza di proprietà igroscopiche di un composto dapprima anidro di formula I.

I composti di formula I contengono almeno quattro atomi di carbonio asimmetrici e, pertanto possono essere presenti sotto forma di una miscela di diestereomeri, sotto forma di una miscela di enantiomeri oppure sotto forma di un composto otticamente puro.

Nell'ambito della presente invenzione "inferiore" indica un gruppo a catena lineare oppure ramificata contenente fino a 6 atomi di carbonio. Gruppi alchilici inferiori preferiti contengono fino a 4 atomi di carbonio. Esempi di essi sono metile, isopropile, butile, isobutile, sec-butile e ter:butile.

Esempi di composti di 'formula/I sono quelli nei quali R<1 >e R<2 >hanno il significato indicato sopra, in particolare R<1 >indica alchile inferiore,- R<2 >indica H e R<3>, R<4 >e R<5 >sono metile, in particolare la (1RS,3aSR,4SR,6aSR)-4-(5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-isopropil-2,3,3-trimetil-6-osso-ottaidro-pirrolo-[3,4-c]pirrol-l-il)-benzimmidammide .

Ulteriori esempi di composti di formula -I sono quelli nei quali R<3 >è H e R<4 >insieme con R<5 >indica trimetilene e R<1 >e R<2 >hanno il medesimo significato indicato nella formula I, in particolare R<1 >indica alchile inferiore oppure cicloalchile e R<2 >indica H, in particolare ·'

(1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4-(2-benzo[1,3]diossol-5-rimeti1-l-isopropil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a] pirrolizin-4-il)-benzimmidammide,

(1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4-(2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetill-ciclopropil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a] pirrolizin-4-il)-benzimmidammide e

(1RS,3aSR,4RS,6aRS}-4-{2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetill-etil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il)-benzimmidammide.

Ulteriori esempi di composti di formula I, in cui R<3>, R<4 >e R<5 >sono metile, sono:

(1RS,3aSR,4SR,6aSR)-4-(5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-2,3,3,4-tetrametil-6-osso-ottaidro-pirrolo [3,4-c]pirrol-l-il)-benzimmidammide,

(1RS,3aSR,4SR,6aSR)-4-(5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-etil-2,3,3-trimetil-6-osso-ottaidro-pirrolo [3,4-c]-pirrol-l-il)-benzimmidammide,

(1RS,3aSR,4RS,6aSR)-4- (5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-cicloesil-2,3,3-trimetil-6-osso-ottaidro-pirrolo-[3,4-c]pirrol-l-il)-benzimmidammide e

(1RS,3aSR,4RS,6aSR)-4- (5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-isopropil-2,3,3-trimetìl-6-osso-ottaìdro-pìrrolo-[3,4-c]pirrol-l-il)-N-idrossi-benzimmidammide * Ulteriori esempi di composti di formula I, in cui R<3 >è H e R<4 >e R<5>- insieme·<' >sono trimetilene> ossia<'>· di formula

I

sono

(1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4-(2-benzo[l,3]diossol-5-ilmetill-cicloesil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il)-benzimmidammide e

(1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4- (2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-3-osso-l-fenil-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il)-benzimmidammide.

I composti di formula I possono venire preparati in modo di per sè noto per esempio mediante trasformazione del gruppo ciano (CN) contenuto in un corrispondente nitrile avente la formula II indicata qui di seguito, in un gruppo ammidinico C(N-R<2>)NH2.

Per la trasformazione di CN in C(NH)NH2, si può trattare il nitrile di partenza, in un solvente, come etanolo oppure metanolo, oppure in una miscela di solventi, come cloroformio e metanolo oppure cloroformio ed etanolo, con un flusso-gassoso 'anidro di acido cloridrico, opportunamente ad una temperatura inferiore a 10°C. La soluzione di reazione viene trattata con un solvente, come dietiletere, e il prodotto intermedio precipitato viene filtrato. Quindi, si può sciogliere il prodotto intermedio in acqua, si può neutralizzarlo con una base come carbonato di sodio oppure idrossido di sodio e si può estrarlo dalla fase acquosa con un solvente come diclorometano, cloroformio oppure acetato di etile. Il prodotto così ottenuto viene trattato in un solvente come metanolo oppure etanolo, con ammoniaca gassosa oppure con un sale di ammonio come cloruro di ammonio, opportunamente ad una temperatura che arriva fino a 80°C. Come alternativa, il prodotto intermedio filtrato può venire trattato parimenti con ammoniaca gassosa oppure con un sale di ammonio in metanolo oppure in etanolo.

Per la trasformazione di CN in C(NOH)NH2, il nitrile di partenza viene sciolto in un solvente come DMF e viene aggiunto ad una soluzione di reazione costituita da una base inorganica come idruro di sodio oppure idrossido di sodio e idrossilammina oppure da un sale di idrossilammina con un acido inorganico, come idrossilammina-cloridrato, opportunamente ad una temperatura inferiore a 0°C.

Mediante reazione di un composto di formula I, in cui R<2 >è H, in un solvente, come diclorometano oppure DMF, con un estere dell'acido cloroformico di formula C1C(0)0-A, si ottiene il corrispondente composto in cui R<2 >è il gruppo C(0)0-A.

Mediante reazione di un acido α-amminocarbossilico di formula

in cui R<51 >è H oppure ha il medesimo significato di R<5 >nella formula I, con 4-bromobenzaldeide e .con N-piperonil-maleimmide, si forma un composto di formula

Questa reazione viene effettuata opportunamente in un solvente come DMF, DMSO, acetonitrile, THF, dietiletere, benzolo, toluolo, acido acetico, metanolo oppure etanolo, ad una temperatura compresa tra 0°C e 160°C. In modo particolarmente vantaggioso, si effettua la reazione a temperatura elevata 'in- DMF, DMSO oppure toluolo. Altrettanto vantaggiosamente, si può effettuare la reazione a temperatura elevata in metanolo con aggiunta di quantità catalitiche di acido acetico, oppure anche in acetonitrile a temperatura ambiente, con aggiunta di acetato d'argento e di una base azotata terziaria, come trietilammina, diazabicicloottano oppure etilmorfolina.

Se R<51 >è .H, si può N-metilare il composto III per esempio mediante reazione con una soluzione acquosa di acido formico e formalina, a temperatura elevata .

Un composto di formula III, in cui R<31 >ha il medesimo significato di R<5 >nella formula I, può venire ridotto per esempio in THF a circa -78°C con una soluzione di trietilboro-idruro di litio in THF ottenendo così un composto di formula

IV

mediante reazione di acido toluensolfinico con l'idrossipirrolano IV in CH2C12 in presenza di CaCl2, si ottiene il corrispondente estere dell'acido toluensolfonico. Mediante reazione di un tale estere con un composto di formula R<:>-MgCl, si ottiene un composto di formula

V

Questa reazione può venire effettuata facendo reagire una soluzione di ZnCl2 in THF in un solvente come CH2C12 dapprima con una soluzione di R<1>-MgCl in THF e, quindi, con una soluzione dell'estere dell'acido toluensolfonico di un idrossipirrolone di formula IV.in CH2C12. -Mediante riscaldamento di un bromuro V e di CuCN in DMF sotto riflusso, si ottiene il corrispondente nitrile di formula

Il

Inoltre, alcune delle indicazioni dettagliate degli esempi che seguono riguardano la preparazione di determinate sostanze di partenza e di determinati prodotti intermedi.

I composti di formula I, loro solvati e loro sali, inibiscono sia l'aggregazione di piastrine provocata da trombina, come anche la coagulazione del fibrinogeno nel plasma del sangue provocata da trombina. I suddetti composti influiscono sulla coagulazione del sangue provocata da piastrine e anche sulla coagulazione del sangue piasmatica. Essi, pertanto, in particolare impediscono la formazione di trombi di coagulazione, ma anche trombi -ricchi di piastrine e possono venire impiegati per combattere oppure per prevenire malattie come trombosi, apoplessia, infarto cardiaco, malattie infiammatorie e arteriosclerosi. Inoltre, questi composti hanno un effetto su cellule tumorali e impediscono la formazione di metastasi. Pertanto essi possono venire impiegati come prodotti antitumorali .

Una diversa inibizione di trombina e di altre serina.proteasi provocata dai composti di cui sopra è desiderabile per ottenere composti aventi una specificità la più possibile elevata e pertanto per impedire possibili azioni collaterali. Oltre ad altre serina-proteasi esaminate, si è considerato il rapporto tra l'inibizione della tripsina e l'inibizione della trombina, come misura generale della specificità di un composto (q ‘nella tabella-'che segue), poiché la tripsina, come serina-proteasi avente il massimo grado di non specificità, può venire facilmente inibita dai più svariati inibitori. Per potere confrontare direttamente l'inibizione di trombina e di tripsina, nonostante l'impiego di diversi substrati, come misura dell'inibizione si è determinata la costante di inibizione K1. indipendente dalla concentrazione del substrato e dalla concentrazione del-1'enzima .

Per la dimostrazione dell'inibizione dell'attività catalitica ..delle protessi di cui sopra si possono utilizzare specifici substrati di peptidi cromogeni. L'inibizione dell'attività amidolitica di trombina e tripsina provocata dai composti di cui sopra è stata dimostrata come descritto qui di seguito .

Le misurazioni sono state effettuate su piastre per microtitolazione a temperatura ambiente. Per questo, per ogni pozzetto della piastra, si sono introdotti 150 μΐ di tampone (Tris 5o mM, NaCl 100 mM, polietilenglicol 0,1%; pH 7,8) mescolati con 50 μΐ della sostanza inibitrice sciolta in DMSO e diluita nel tampone e 25 μΐ di trombina umana (concentrazione finale 0,5 nM). Dopo una incubazione di 10 minuti, la reazione è stata fatta'inizi-are-mediante aggiunta di substrato croniogeno S-2238 (H-D-Phe-Pip-Arg-Paranitroanilide di Kabivitrum ; concentrazione finale 10 oppure 50 μΜ), e si è seguita l'idrolisi del substrato spettrofotometricamente impiegando un dispositivo di lettura di piastre per microtitolazione cinetiche, nel corso di 5 minuti. Secondo la rappresentazione grafica delle curve di inibizione, si sono determinati i valori-Ki secondo il metodo descritto in Biochem.J. 55, 1955, 170-171. Si è effettuata l'inibizione della tripsina in modo analogo, però impiegando il substrato S-2251 (H-D-Val-Leu-Lys-Paranitroanilina) in una concentrazione finale 200 e 750 μΜ.

I risultati sono rilevabili dalla tabella che segue :

Come indicato all'inizio, farmaci contenenti un composto di formula I, un suo solvato oppure un suo sale, sono anch'essi oggetto della presente invenzione, inoltre è oggetto della presente invenzione anche un procedimento per la preparazione di tali farmaci, il quale è caratterizzato dal fatto che si portano in una forma di somministrazione galenica uno o più di tali composti, solvati, oppure sali ed eventualmente altre sostanze terapeuticamente pregiate. Questi farmaci possono venire somministrati per via orale, per esempio sotto forma di confetti, capsule di gelatina rigida e capsule di gelatina morbida, soluzioni, emulsioni oppure sospensioni, oppure per via rettale, per esempio sotto forma di supposte, oppure sotto forma di prodotti da applicare a spruzzo. La somministrazione può venire effettuata però anche per via parenterale per esempio sotto forma di soluzioni iniettabili.

Per la preparazione di compresse, compresse verniciate, confetti e -capsule di gelatina rigida, la sostanza attiva può venire mescolata con eccipienti farmaceuticamente inerti, inorganici oppure organici. Come tali eccipienti si possono impiegare compresse, compresse verniciate, confetti e capsule di gelatina rigida per esempio lattosio, amido di mais oppure suoi derivati, talco, acido stearico oppure suoi sali. Nel caso di capsule di gelatina morbida sono adatti, come eccipienti, per esempio oli, cere, grassi vegetali, polioli semisolidi e liquidi; a seconda delle caratteristiche della sostanza attiva, però, nel caso di capsule di gelatina morbida, praticamente non sono necessari eccipienti. Per la preparazione delle soluzioni e degli sciroppi, come eccipienti sono adatti per esempio acqua, polioli, saccarosio, zucchero invertito e glucosio, nel caso di soluzioni iniettabili sono adatti per esempio acqua, alcoli, polioli, glicerina e oli vegetali e nel caso di supposte sono adatti ·oli naturali oppure induriti,· cere, grassi, polioli semiliquidi oppure liquidi. I preparati farmaceutici possono contenere inoltre anche agenti di conservazione, sostanze che favoriscono la dissoluzione, stabilizzanti, tensioattivi, emulsionanti, dolcificanti, coloranti, aromatizzanti, sali per fare variare la pressione osmotica, sostanzetampone, agenti di rivestimento e antiossidanti.

Per combattere oppure per prevenire le malattie indicate sopra, si può fare variare il dosaggio della sostanza attiva entro ampi limiti e, naturalmente, in ogni singolo caso, lo si può adattare alle condizioni individuali. In generale, nel caso di una somministrazione orale oppure parenterale, per esempio endovenosa oppure sottocutanea, si dovrà adattare una dose di circa 0,1 fino a 20 mg/kg, preferibilmente di circa 0,5 fino a 4 mg/kg/giorno nel caso di adulti, però il limite superiore indicato sopra può venire anche superato oppure può non venire superato, quando si dovesse dimostrare che ciò è indicato.

Esempio 1

In una soluzione di (1RS,3aSR,4SR,6aSR)-4-(5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-2, 3,3,4-tetrametil-6-osso-ottaidro-pirrolo [3,4-c]pirrol-l-il)-benzonitrile (0,295 g, 0,707 mmoli) in cloroformio anidro (1,8 mi) e metanolo anidro (0,35 mi) si fa passare HC1 anidro a 0°C per 10 minuti. Quindi, la miscela di reazione viene lasciata a sè per 24 ore a 4°C. La sostanza solida che precipita dopo aggiunta di dietiletere viene essiccata sotto alto vuoto e viene quindi sciolta in metanolo (2 mi). Si aggiunge soluzione di ammoniaca metanolica fino a che l'odore di ammoniaca rimane persistente. .La miscela di reazione viene sottoposta ad agitazione per 3,5 ore a 65°C. Dopo il raffreddamento, il cloruro di ammonio viene fatto precipitare con acetone e viene filtrato. Il solvente viene allontanato mediante distillazione, il residuo viene sciolto in etanolo e il prodotto viene fatto precipitare lentamente con dietiletere. Resa 0,298 g (90%) (1RS,3aSR,4SR, 6aSR)-4- (5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-2, 3, 3,4-tetrametil-6-osso-ottaidro-pirrolo-[3,4-c]pirrol-l-il) -benzimmidammide cloridrato. Sostanza solida incolore. P.F. a partire da 190°C con decomposizione. DEI-MS; 435, 3 ([M+H]<+>,8); 434,3 ([M]<+>,6); 419,2 ([M-CH3]<+>;12); 214,2 (22); 197,1 (12); 135, 1 (99); 83,1 (100).

Esempio 2

Analogamente all'esempio 1, si preparano i seguenti composti :

2 .A) (1RS,3aSR,4SR, 6aSR)-4- (5-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-4-etil-2, 3,3-trimetil-6-osso-ottaidro-pirrolo [3,4-c]pirrol-l-il)-benzimmidammide cloridrato. Resa 90%. Schiuma incolore. P.F. da 270°C Dec..DEI-MS; 448,.3{[MI \ 47); 433,3 (100); 214,2 (35); 135,1 (45).

2.B) (1RS,3aSR,4RS,6aSR)-4-(5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-isopropil-2, 3,3-trimetil-6-osso-ottaidropirrolo [3,4-c]pirrol-l-il)-benzimmidammide cloridrato. Resa 66%. Sostanza solida incolore. P.F. da 250°C Dee. .DEI-MS; 462,3([M]\ 33); 447,2 (100); 430,3 (21); 214,2 (30); 135,1 (67).

2.C) (1RS,3aSR,4RS,6aSR)-4-(5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-cicloesil-2,3, 3-trimetil-6-osso-ottaidropirrolo [3,4-c]pirrol-l-il)-benzimmidammide cloridrato . Resa 74%. Sostanza solida incolore. P.F. 195-199°C . DEI-MS; 502,2([M]-, 11); 487,2 (42); 214,1 (38); 135 (100).

2.D) (1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4-(2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-l-isopropil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a] pirrolizin-4-il)-benzimmidammide cloridrato. Resa 79%. Sostanza solida incolore. P.F. 210°C-215°C .DEI-MS; 460,2([M]<+>, 33); 201,1 (84); 184,1 (37); 172,1 (23); 135,0 (100).

2.E) (1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4-(2-benzo [1, 3]diossol-5-ilmetil-l-cicloesil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a] pirrolizin-4-il)-benzimmidammide cloridrato. Resa 72%. Sostanza solida incolore. P.F.·219°C-224°C .DEIMS; 500,2 ([M]<'>, 18); 483,1 (6); 349,1 (5); 201,1 (77); 184,1 (75); 135,1 (100).

2 .F) (1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4-(2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-3-osso-l-fenil-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il)-benzimmidammide cloridrato. Resa 89%. Sostanza solida incolore. P.F. >195°C Dec..DEI-MS; 494,2([M]% 18); 477,2<' >(14); 342,2 (7); 201,2 (49);184,1 (100); 135,1 (74).

2 .G) (1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4-(2-benzo[1,3]diosso1-5-ilmetil-l-ciclopropil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]-pirrolizin-4-il )-benzimmidammide cloridrato. Resa 62%. Sostanza solida incolore. P.F. >165°C Dec..DEI-MS; 458,2([M]<+>, 23); 441,2 (10); 201,2 (54);184,1 (75); 135,1 (100).

2.H) (1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4-(2-benzo[1,3]diossol-5^ ilmetil-l-etil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il)-benzimmidammide cloridrato. Resa 78%. Sostanza solida incolore. P.F. 195°C-199°C..DEI-MS; 446,3([M]\ 22); 201,2 (64);184,1 (45); 135,1 (100).

Esempio 3

841 mg (12,12 mmoli) di idrossilammina-cloridrato vengono posti in 'sospensione in 4 mi di DMF e vengono raffreddati a 0°C. Si aggiungono lentamente 303 mg (10,1 mmoli) di idruro di sodio all'80%. Si aggiungono alla miscela di reazione 500 mg (1,13mmoli) di (1RS,3aSR,4RS,6aSR)-4-(5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-isopropil-2, 3,3-trimetil-6-osso-ottaidropirrolo [3,4-c]pirrol-l-il)-benzonitrile sciolti in DMF. Il raffreddamento viene quindi non più rinno-vato. Si lascia sotto agitazione per 5 giorni a temperatura ambiente. Quindi, si filtra e si allontana il solvente sotto alto vuoto. La miscela viene purificata mediante cromatografia (RP18, gradiente di acqua su metanolo). Si isola la (1RS,3aSR,4RS,6aSR)-4- (5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-isopropil-2,3,3-trimetil-6-osso-ottaidro-pirrolo [3,4-c]pirrol-l-il)-N-idrossi-benzimmidammide con resa 66%. Sostanza solida incolore. ISP-MS; 479,4 {[M+H]<+>, (100).

Esempio 4

550 mg (1 mmole) di '(1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4-(2-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-l-isopropil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il)-benzimmidammide cloridrato vengono trattati in una miscela di 10 ml di diclorometano e 10 mi di una soluzione di bicarbonato di sodio al 10% con 120 mmoli di estere metilico dell'acido cloroformico in 2 ml di diclorometano e vengono sottoposti a forte agitazione per 30 minuti. Quindi, la fase organica viene separata, la fase acquosa viene estratta con diclorometano. Le fasi organiche vengono riunite, vengono anidrificate con solfato di sodio ed evaporate. Si ottengono 360 mg di estere metilico dell'acido (1RS,3aSR, 4RS,6aRS) -4- (2-benzo [1,3]<’>diossol-5-ilmetil-l-isopropil-3-ossodecaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il) -fenilmetilencarbammico grezzo.. Resa 70%. ISP-MS; 518,6 ([M+H]~, 100) .

Esempio di riferimento 5

5.A) Una miscela di acido a-ammino-isobutirrico (1,03 g, 10 mmoli), 4-bromobenzoaldeide (1,85 g, 10 mmoli) e N-piperonil-maleinimmide (2,31 g, 10 mmoli) viene riscaldata in DMF (20 mi) per 16 ore a 90°C. Il solvente viene distillato sotto vuoto e il residuo viene separato mediante cromatografia su gel di si-lice (esano/EtOAc/NEt3 59,4: 39,6 : 1). Resa 2,17 g (48%) di 2-benzo [1,3jdiossol-5-ilmetil-4- (4-bromofenil) -6,6-dimetil-tetraidropirrolo [3,4-c]pirrol-l, 3-dione. Lamelle incolori, P.F. 149-150°C.

(EtOAc/esano)- FAB-MS; 915.3 (3); 457,1 ([M]<+>, 67); 225, 0 (40); 135,0 (100); 91 (45).

5.B) Una miscela di 2-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-4- (4-bromo-fenil)-6, 6-dimetil-tetraidro-pirrolo-[3,4-c] pirrol-1, 3-dione (2,17 g, 4,75 mmoli), acido forn ico all'85% (2,57 g, 47,5 mmoli) e soluzione di formalina al 35% (0,82 g, 9,5 mmoli) viene riscaldata a 100°C per 7 ore. Dopo il raffreddamento si aggiunge NaOH IN (40 mi) e si estrae la miscela con diclorometano. La fase organica viene anidrificata e concentrata ed il residuo viene separato mediante cromatografia su gel di silice (esano/EtOAc/NEt3 59,4: 39,6 : 1). Resa 2,06 g (923⁄4) di 2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil~4- (4-bromo-fenil)-5,6,6-trimetil-tetraidropirrolo [3,4-c]pirrol-.l,3-dione. Prismi incolori. P.F.

109-111°C (MeOH). FAB-MS; 941.0 (1); 471,0 ([M+H]<*>, 71); 470,0 ([M]<* >, 21); 469,0 (42); 455,0 ([Μ-0Η3Γ, 54); 135,0 (100).

5.C) Una soluzione di 2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4- (4-bromo-fenil)-5,6,6-trimetil-tetraidropirrolo [3,4-cjpirrol-l,3-dione(8,49 g, 18,0 mmoli) in THF (60 mi) viene raffreddata a -78°C e si aggiunge una soluzione in THF di litio-trietilboroidruro (30,65 mmoli). La miscela di reazione viene sottoposta ad agitazione per 2 ore a -78°C e quindi viene riscaldata a 0°C. Si aggiungono, una dopo l'altra, una soluzione satura di NaHC03 (20 mi) e di H202 al 30% (6 mi). La miscela viene sottoposta ad agitazione ancora per 1 ora a 0°C e il THF viene allontanato mediante distillazione. La fase acquosa viene estratta con CH2C12. La fase organica viene anidrificata e il solvente viene allontanato e il residuo viene separato mediante cromatografia (CH2C12/CH30H 98:2)..

Resa: 5,75 g (67%) di 2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-6- (4-bromo-fenil)-3-idrossi-5,4,4-trimetil-tetraidropirrolo [3,4-c]pirrol-l-one. Aghi incolori. P.F. 153-159°C (dietiletere). FAB-MS: 947.4 (4); 473,2 ([M+H]<f>, 76); 457,2 ([M-CH3]\ 61); 135,0 (100).

5.D) Ad una soluzione di acido toluensolfinico (5,49 g, 35,2 mmoli)· in CH_;C12 anidro (60 mi) si aggiunge CaCl2 secco, polverizzato (3,91g, 35,2 mmoli) e si agita la sospensione per 10 minuti (atmosfera di argon). Quindi, si aggiunge una soluzione di 2-benzo[l, 3]diossol-5-ilmetil-6-(4-bromofenil)-3-idrossi-5,4,4-trimetil-tetraidro-pirrolo-[3,4-c]pirrol-l-one (5,55 g, 11,7 mmoli) in CH2CI2 (20 mi). La miscela viene sottoposta ad agitazione per 19 ore. Quindi, si aggiunge una soluzione satura di NaHC03~ (20 mi) e si estrae la miscela con Ciccia. La fase organica viene lavata con H20 e viene anidrificata (Na2SOJ . Il solvente viene allontanato sotto vuoto e il residuo viene purificato mediante cromatografia (esano/EtOAc/NEt3 74 : 25 : l).Resa 5,29 g (74 %) di estere 2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4- (4-bromo-fenil)-5,6,6-trimetil-3-ossoottaidro-pirrolo [3,4-c]pirrol-l-ilico dell'acido toluensolfonico. Prismi incolori. P.F. 172-173°C ((EtOAc/esano). FAB-MS: 1223,3 (1); 1067,2 (1); 611,Or ( [Μ+Η], 30) ; 455, 1 ( 62 ) ; 135, 0 ( 100) .

Esempio di riferimento 6

In analogia all'esempio 5, da prolina, bromobenzaldeide e N-piperonil-maleinimmide, si ottengono; 6.A) in analogia all'esempio 5.A): il 2-benzo [1,3]diossol-5-Urneti1-4-(4-bromo-fenil)-esaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-1,3-dione. Resa 20%. Cristalli incolori. P.F. 134-136°C (MeOH). FAB-MS: 938.8 (4); 469,1 ([M)<+>, 100); 237,0 (38); 135,1 (91).

6.B) Una soluzione di 2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4- (4-bromo-fenil)-esaidro-pirrolo[3,4-a]pirrolizin-1,3-dione (2,18 g, 4,63 mmoli) in"THF (20 mi) viene raffreddata a -78°C e si aggiunge una soluzione in THF di litio-trietilboroidruro (7,87 mmoli). La miscela di reazione viene sottoposta ad agitazione per 0,5 ore a -78°C e quindi viene riscaldata a 0°C. Si aggiungono, una dopo l'altra, una soluzione satura di NaHC03 (5 mi) e H2O2 al 30% (1,5 mi). La miscela viene sottoposta ad agitazione ancora per 1 ora a 0°C e, quindi, il THF viene allontanato mediante distillazione. La fase acquosa viene estratta con CH2C12. La fase organica viene anidrificata e il solvente viene allontanato. All'idrossilattame grezzo che si forma si aggiungono acido toluensolfinico (2,17 g, 13,9 mmoli), CaCl2 (1,54 g, 13,9 mmoli) e CH0CI2 (40 mi) e si agita la miscela per 24 ore sotto atmosfera di argon. Si aggiunge una soluzione satura di NaHC03 e si estrae con CH2C1;2. La fase organica viene lavata con soluzione di NaHC03, viene anidrificata con Na∑SO.:/ il solvente viene allontanato e il residuo viene separato mediante cromatografia (esano/EtOAc/NEt3 74:25:1). Resa 2,06 g (73%) di estere 2-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-4- (4-bromo-fenil) -3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-l-ilico dell' a cido toluensolfonico . Prismi incolori. P.F. 199-201°C ((EtOAc). FAB-MS: 1218,8 (4); 609,0 ([Μ+ΗΓ, 100) ; 453, 0 (81); 307,1 (33); 135,0 (86).

Esempio di riferimento 7

Nitrile di partenza dell'esempio 1

7.A) Ad una soluzione di ZnCl2 (3,92 mmoli, sotto forma di soluzione 0,5 M in THF)) in CH2CI2 anidro (30 mi) si aggiunge cloruro di metilmagnesio (6,54 mmoli, sotto forma di soluzione in THF) e si agita la miscela per 30 minuti (atmosfera di argon). Quindi, si aggiunge una soluzione di estere 2-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-4- (4-bromo-fenil) -5, 6,6-trimetil-3-osso-ottaidro-pirrolo [3,4-c] pirro1-1- ilico dell' acido toluensolfonico (2 g, 3,27 mmoli) in CH2CI2 e si lascia sotto agitazione la miscela di reazione- per 13 ore.·Quindi"si'aggiunge una soluzione di HCl 1M, si neutralizza con soluzione di NaHC03 e si estrae la miscela con CH2CI2. La fase organica viene anidrificata, il solvente viene allontanato sotto vuoto e il residuo viene purificato mediante cromatografia (esano/EtOAc/NEt349,5 : 49,5 : 1).Resa 1,15 g (75 %) di 2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-6-(4-bromo-fenil)-3,4,4,5-tetrametil-esaidro-pirrolo [3,4-c]pirrol-l-one. Sostanza solida incolore. P.F. 142-144°C ((toluene). FAB-MS: 943,3 (6); 471,3 ([M+H]<+>, 82); 455,2 ([M-CH3]<÷ >45); 135,0 (100).

7.B) Una sospensione di 2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-6- (4-bromo-fenil)-3,4,4,5-tetrametil-esaidropirrolo [3,4-c]pirrol-l-one (1,00 g, 2,12 mmoli) e cianuro di rame (I) (0,76 g, 8,48 mmoli) in DMF (30 mi) viene riscaldata a riflusso per 17 ore (atmosfera di argon). Quindi si allontana una parte di DMF (circa 20 mi) mediante distillazione, e si aggiungono diclorometano (30 mi) e soluzione di ammoniaca acquosa concentrata (10 mi). La miscela viene sottoposta a forte agitazione per 1 ora. La fase acquosa di colore blu viene separata e la fase organica viene lavata ancora due volte con soluzione di ammoniaca ed una volta con acqua. Il solvente viene allontanato e il residuo viene purificato mediante cromatografia (esano/EtOAc/NEt3 49,5 : 49,5 ; 1). Resa:· 0,55 g (62%) di (1RS,3aSR,4SR,6aSR)-4-(5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-2,3, 3,4-tetrametil-6-osso-ottaidro-pirrolo-[3,4-c]pirrolo-l-il)-benzonitrile. Cristalli incolori- P.F. 165-166°c (EtOAc/dietiletere). FAB-MS: 835,3 (20); 418,2 ([M+H] <+ >, 100); 403,1 (52); 135,0 (40).

Esempio di riferimento 8

Nitrili di partenze degli esempio 2.A) fino a G) e 3.

1. In analogia all'esempio 7, si ottiene dall'estere 2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-(4-bromo-fenil)-5,6,6-trimetil-3-osso-ottaidro-pirrolo [3,4-c] pirrol-l-ilico dell'acido toluensolfonico.

8.A.a) con cloruro di etilmagnesio tramite il 2-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-6-(4-bromo-fenil)-3-etil-4,4,5-trimetil-esaidro-pirrolo [3,4-c]pirrol-l-one. Resa 76%. Cristalli aghiformi incolori. P.F. 156-157°C (CHCl3/esano). FAB-MS: 971,3 (5); 485,1 ([M+Hp, 68); 135,0 (100),

8.A.b) il (1RS,3aSR,4SR,6aSR)-4-(5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-etil-2, 3,3-trimetil-6-osso-ottaidropirrolo[3,4-c]pirrolo-l-il)-benzonitrile. Resa 40%. Cristalli aghiformi incolori- P.F. 188-190°C (EtOAc). FAB-MS: 863,3 (9); 432,2 ([M+H]<+>, 100); 416,2 (72); 135,0 (99).

8.B.a) con cloruro'di-isopropilmagnesio tramite-il 2-benzo [1/3]diossol-5-ilmetil-6-(4-bromo-fenil)-3-isopropil-4,4, 5-trimetil-esaidro-pirrolo[3,4-c]pirrol-l-one . Resa 35%. Cristalli aghiformi incolori. P.F. 146-147°C (CHCl3/esano). FAB-MS: 999,2 (2); 499,2 ([M+H]<+>, 78); 135,1 (100).

8.B.b) il (1RS,3aSR,4SR,6aSR)-4-(5-benzo[l,3]diossol-5-ilmetil-4-Ì50propil-2, 3,3-trimetil-6-osso-ottaidro-pirrolo [3,4-c]pirrol-l-il)-benzonitrile. Resa ' 55%. Prismi incolori- P.F. 160-162°C (EtOAc). FAB-MS: 991,4 (13); 446,2 ([M+H]<+>, 100); 430,2 (63); 135,0 (63),

8.C.a) con cloruro di cicloesilmagnesio tramite il 2-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-6-(4-bromo-fenil)-3-cicloesil-4,4,5-trimetil-esaidro-pirrolo [3,4-c]pirrol-1-one. Resa 31%. Cristalli incolori. P.F. 148-149°C (CHC13/esano). FAB-MS: 1079,9 (4); 539,4 ([M+H}<+>, 100); 135,0 (41).

8.C.b) il (1RS,3aSR,4SR,6aSR)-4-(5-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-cicloesil-2,3,3-trimetil-6-osso-ottaidro-pirrolo[3,4-c]pirrolo-l-il)-benzonitrile . Resa 62%. Cristalli aghiformi incolori- P.F. 114-116°C (CHCl3/esano). FAB-MS: 971,4 (6); 486,2 ([M+H]\ 93); 484,2 (40); 135,0 (100).

2. In analogia all'esempio 7 si ottengono dal-1'estere 2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-(-4-bromo-fenil) -3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-c]pirrolizin-l-ilico dell'acido toluensolfonico .

8.D.a) con cloruro di isopropilmagnesio tramite il 2-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-4- (4-bromo-fenil) -1-isopropil-ottaidro-pirrolo [3,4-a] pirrolizin-3-one . Resa 52%. Olio giallognolo. FAB-MS: 995,1 (3); 497,1 ([M+H]\ 100); 307,0 (78),<'>

8.D.b) il 4- (2-benzo[1,3]diossol-5-iìmetil-l-isopropil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]pìrrolizin-4-il) -benzonitrile . Resa: 56%. Aghi incolori. P.F. 152-1 53°C (EtOH). FAB-MS: 887,7 (4); 444,3 ([M+H]<+>, 100); 307,1 (20); 184,1 (36); 135,0 (64),

8.E. a) con cloruro di cicloesilmagnesio tramite il 2-benzo [1,3]diosso1-5- limeti1-4- (4-bromo-fenil)-1-cicloesil-ottaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-3-one. Resa 21%. Aghi incolori. P.F. 143-146°C (CHCl3/esano) . FAB-MS: 1074, 9 (9); 536,9 <[M4-H]\ 100); 135,0 (32), 8.E.b) il 4- (2-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-l-cicloesil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il) -benzonitrile . Resa: 66%. Aghi incolori. P.F. 204-207 °C (EtÒAc/esano) . FAB-MS: 967,3 (2); 484,2 ([M+H]<+>, 100); 307,0 (19); 154,1 (80); 135,0, 8.F.a) con cloruro di fenilmagnesio tramite il 2-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-4- (4-bromo-fenil) -1-fenil-ottaidro-pirrolo [3,-4-a]pirrolizin-3-one . · Resa 90%. Aghi incolori. P.F. 158-160°C (esano/EtOAc). FAB-MS: 531,1 ([M+H]\ 100); 237,0 (31); 135,0 (78), 8.F.b) il 4-(2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-3-osso-1-fenil-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il)-benzonitrile . Resa: 61%. Prismi incolori. P.F. 154-156°C (EtOAc). FAB-MS: 955,3 (7); 47812 ([M+H]\ 100); 184,1 (31); 135,0 (61),

8.G.a) con cloruro di ciclopropilmagnesio tramite il 2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-4-(4-bromo-fenil)-1-ciclopropil-ottaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-3-one. Resa 48%. Olio giallognolo. FAB-MS: 991,3 (16); 495,2 ([Μ+ΗΓ, 100),

8.G.b) il 4-(2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-l-ciclopropil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il)-benzonitrile. Resa: 71%. Prismi incolori. P.F.

120-122°C (EtOAc). FAB-MS: 883,4 (4); 442,2 ([M+H], 100); 307,1 (31); 184,1 (40);

Esempio di riferimento 9

Nitrile di partenza dell'esempio 2H

Ad una soluzione di ZnCl2 (5,92 mmoli, sotto forma di soluzione in dietiletere) in CH2C12 anidro (15 mi) si aggiunge cloruro di etilmagnesio (9,86 mmoli, sotto forma di soluzione in THF) e si agita la miscela per 30 minuti (atmosfera di argon). Quindi, si aggiunge una soluzione di estere 2-ben-zo[1,3]diossol-5-ilmeti1-4- (4-bromo-fenil)-3-ossodecaidro-pirrolo [3,4-c]pirrolizin-l-ilico dell'acido toluensolfonico (3,0 g, 4,93 mmoli) in CH2CI2 (15 mi) e si lascia sotto agitazione la miscela di reazione per 16 ore. Quindi, si aggiunge Hcl 1M, si neutralizza e si estrae la miscela con CH2C12. La fase organica viene anidrificata, e il solvente viene allontanato sotto vuoto e il residuo viene purificato mediante cromatografia (esano/EtOAc/NEt3 66 : 33: 1). Resa: 1,69 g (71%) di un olio giallognolo che è costituito da una miscela di due isomeri. Questa sostanza viene tratta con CuCN (1,25 g, 14 mmoli) e con DHF degassata (35 mi) e la miscela viene riscaldata sotto riflusso per 28 ore (atmosfera di argon). Quindi, una porzione di DMF (circa 20 mi) viene allontanata mediante distillazione, e si aggiungono quindi diclorometano (30 mi) e soluzione acquosa concentrata di ammoniaca (10 mi). La miscela viene sottoposta a forte agitazione per un'ora. La fase acquosa blu viene separata e la fase organica viene lavata ancora due volte con soluzione di ammoniaca ed una volta con acqua. Il solvente viene allontanato e il residuo viene purificato mediante cromatografia (esano/EtOAc/NEts 49,5 : 49,5 : 1). Resa: 0,805 g di 4-(2-benzo[1,3]diossol-5-ilmetil-l-etil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il)-benzonitrile.

Prismi incolori- P.F. 150-151°C (EtOAc). FAB-MS: 859,5 (14); 430,3 ([M+H] , 100); 135,1 (18).

Un composto di formula I, un suo solvato oppure un suo sale può venire impiegato in modo di per sè noto come sostanza attiva per la preparazione di preparati farmaceutici,.per esempio di compresse e di capsule aventi la seguente composizione:

Esempio A

Per ogni compressa Sostanza attiva 200 mg Cellulosa microcristallina 155 mg Amido di mais 25 mg Talco 25 mg Idrossipropilmetilcellulosa 20 mg

425 mg

Esempio B

per ogni capsula Sostanza attiva 100,0 mg Amido di mais 20,0 mg Lattosio 95,0 mg Talco 4,5 mg Stearato di magnesio 0,5 mg

220,0 mg

Claims

RIVENDICAZIONI 1) Composti di formula I m cui

R<1 >è alchile inferiore, cicloalchile oppure fenile....-R<2 >è H, OH oppure C(0)0-A, in cui A è alchile inferiore, cicloalchile oppure fenile, e R<3>, R<4 >e R<5 >sono metile oppure R<3 >è H e R<4 >insieme con R<5 >è trimetilene e anche loro idrati oppure loro solvati e loro sali fisiologicamente impiegabili.
2) Composti secondo la rivendicazione 1 in cui R<1 >è alchile inferiore, R<2 >è H e R<3>, R<4 >e R<5 >sono metile, in particolare la (1RS,3aSR,4RS, 6aSR)-4- (5-benzo [1,3]diossol-5-ilmetil-4-isopropil-2 ,3, 3-trimetil-6-osso-ottaidro-pirrolo [3,4-c] pirrol-l-il) -benzimmidaramide .
3) Composti secondo la rivendicazione 1, in cui R<3 >è H e R<4 >insieme con R<5 >è trimetilene, ossia aventi la formula : I" in cui R<1 >e R<: >sono come indicati nella rivendicazione 1, in particolare in cui R<1 >è alchile inferiore oppure cicloalchile e R<2 >è idrogeno, in particolare (1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4-{2-benzo[1,3]diossol-5-iImetill-isopropil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a] pirrolizin-4-il)-benzimmidammide, (1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4- (2-benzo[1,3]diosso1-5-ilmetill-ciclopropil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a] pirrolizin-4-il)-benzimmidammide e (1RS,3aSR,4RS,6aRS)-4- (2-benzo[1,3jdiossol-5-ilmetill-etil-3-osso-decaidro-pirrolo [3,4-a]pirrolizin-4-il)-benzimmidammide .
4) Composti secondo una delle rivendicazioni da 1 a 3 per l'impiego come farmaci, in particolare come inibitori dell'aggregazione di piastrine indotta da trombina e come inibitori della coagulazione del fibrinogeno nel plasma del sangue 5) Procedimento per la preparazione dei composti secondo una delle rivendicazioni da 1 a 3, caratterizzato dal fatto che a) in un nitrile di formula n si trasforma il gruppo ciano in un gruppo ammidinico di formula C(N-R<2>)NH2 e b) eventualmente si trasforma un composto di formula I in un sale fisiologicamente compatibile oppure si trasforma un sale di un composto di formula I nell'acido libero oppure nella base libera. 6) Preparati farmaceutici contenenti un composto secondo una delle rivendicazioni da 1 a 3 come sostanza attiva. -7) Impiego di un composto secondo una delle rivendicazioni da 1 a 3 per la preparazione di farmaci per il trattamento oppure la profilassi di malattie che sono provocate da un'aggregazione delle piastrine indotta da trombina oppure da una coagulazione del fibrinogeno nel plasma del sangue.