HUT63851A - Process for producing nucleoside derivatives and pharmaceutical compositions comprising such compounds - Google Patents
Process for producing nucleoside derivatives and pharmaceutical compositions comprising such compounds Download PDFInfo
- Publication number
- HUT63851A HUT63851A HU93964A HU96493A HUT63851A HU T63851 A HUT63851 A HU T63851A HU 93964 A HU93964 A HU 93964A HU 96493 A HU96493 A HU 96493A HU T63851 A HUT63851 A HU T63851A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- formula
- compounds
- hydrogen
- compound
- mmol
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
- A61K31/52—Purines, e.g. adenine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
- A61P33/10—Anthelmintics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
- C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
- C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/645—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
- C07F9/6509—Six-membered rings
- C07F9/6512—Six-membered rings having the nitrogen atoms in positions 1 and 3
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
- C07F9/65586—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system at least one of the hetero rings does not contain nitrogen as ring hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
- C07F9/65616—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings containing the ring system having three or more than three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members, e.g. purine or analogs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
- C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
A találmány nukleozidszármazékokra és gyógyászati szempontból elfogadható sóikra, e vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítményekre, valamint e vegyületek és készítmények előállítására vonatkozik. E vegyületek és készítmények a szerzett immunhiány-tünetcsoport (immunhiánybetegség; AIDS) valamint a replikációjukhoz reverz transzkriptázt igénylő vírusok - így az emberi (humán) immunhiány-vírus (HÍV) és hepatitisz B vírus - által előidézett fertőzések terápiás és megelőző kezelésére, továbbá egyéb vírusbetegségek, például herpesz-vírusbetegségek, általános fertőzéses megbetegedések és neopláziás, azaz rákbetegségek kezelésére alkalmazhatók.
A vírusoknak a szervezet funkcióira kifejtett hatása sejtszinten (celluláris szinten) és szubcelluláris szinten végbemenő változások végeredménye. A celluláris szinten végbemenő patogén (kóros) változások a vírusok és a befogadó sejtek (gazdasejtek) különböző kombinációinak az eseteiben eltérők. Míg egyes vírusok bizonyos sejtek teljes lebomlását idézik elő (sejthalál), más vírusok a sejteket neopláziás állapotú sejtekké alakíthatják át.
Jelentős és általános vírusfertőzések például: a bőrherpesz (herpes dermatitis) - beleértve az ajakherpeszt (herpes labiális) is -, a herpes keratitis, a nemiszerveken fellépő herpesz (herpes genitalis), herpes zoster (övsömör), a herpes ecephalitis, valamint a fertőző mononukleózis és a cytomegalovírus-fertőzések; ezeket a fertőzéseket olyan vírusok idézik elő, amelyek a herpesz-csoportba tartoznak. To• ·
-3vábbi fontos vírusbetegségek; az influenza A és B, amelyek kórokozója az influenza A, illetve influenza B vírus. Még további, lényeges és általános vírusmegbetegedés a vírusos májgyulladás, különösen a széles körben elterjedt, hepatitis B vírus által előidézett fertőzések. E betegségek kezelésére, valamint más, vírusok okozta megbetegedések kezelésére hatékony és szelektív vírus elleni (antivirális) hatóanyagokra van szükség.
Kimutatták, hogy számos különböző - mind DNS-, mind RNS-típusú - vírus állatokon daganatokat idéz elő. Kancerogén (rákképző) vegyszerek állatokra kifejtett hatása rejtőző (latens) tumorvírusok aktiválását válthatja ki. Lehetséges, hogy emberi tumorok kialakulásában a tumorvírusok szerepet játszanak. A jelenleg ismert, legvalószínűbb példák erre az emberen fellépő leukémiák, szarkómák, emlőkarcinómák, Burkitt-féle nyirokdaganatok (limfomák), az orr-garatüreg rákos betegségei, valamint a nyaktáji rákbetegségek, amelyek kifejlődésében az RNS-daganatvírusoknak és a herpesz vírusoknak szerepe van. Mindezek alapján a rákbetegség kezelésében a daganatkeltő vírusokra és azok funkcióira szelektív gátló hatást kifejtő hatóanyagok kutatásának fontos szerep jut.
A hetvenes évek végén új betegségről számoltak be, amelyet az azt követő időben szerzett immunhiány-tünetcsoportnak (AIDS) neveztek el. Jelenleg általánosan elfogadott vélemény, hogy az AIDS kóroktanában esszenciális szerepet játszik egy retrovírus: a humán immunhiány-vírus (röviden:
* ·
-4HIV), amelyet régebben humán T-sejt-limfotróp vírusnak (röviden: HTLV-III) vagy limfoadenopátiával kapcsolatos vírusnak (röviden: LAV) neveztek. A HÍV különböző típusait - így a HIV-l-et és HIV-2-t - fedezték fel, és valószínű, hogy további típusait is izolálni fogják.
Az AIDS betegség jellemzője mélyreható immunhiány, amely a HIV-fertőzés célpontját képező limfocita-T-segítő sejtek csekély számának a következménye. Az AIDS-betegek mélyreható immunhiánya e betegeket számos alkalmi, így bakteriális, gomba-, protozoa- vagy vírusfertőzéssel szemben igen érzékennyé teszi. Az alkalmi vírusfertőzések között gyakran jelentkeznek a herpesz-víruscsoporthoz tartozó kórokozók, így a herpes simplex vírus (HSV), Varicella Zoster vírus (VZV), Epstein-Barr vírus (EBV) és főként a cytomegalovírus (CMV). További, embereket érintő retrovírusok a HTLV-I és HTLV-II; állatokat fertőző retrovírusok például: a macskák leukémia-vírusa, valamint a lovakat fertőző anaemia-vírus. Beszámoltak arról, hogy egyes humán megbetegedések, így a sclerosis multiplex, pszoriázis, a trópusi görcsös bénulás, valamint a I Kawasaki-betegség szintén retrovírus-fertőzés következménye.
A hepatitis B vírus előidézte fertőzések súlyos megbetegedést - így akut, krónikus, vagy heves lefolyású májgyulladást - idézhetnek elő nagyszámú egyénen. A becslések szerint világszerte 200 millió beteg szenved krónikus hepatitis B fertőzésben. A krónikus májgyulladás eseteinek tekintélyes hányada májcirózissá vagy különféle májdaganatokká súlyosbodik. A májgyulladás-fertőzések egyes eseteiben gyors és
I
I
I • · ·
-5súlyos lefolyású megbetegedés lép fel, amelynek halálozási aránya körülbelül 90%. Jelenleg a hepatitis B fertőzések ellen alkalmazható hatásos kezelés nem ismert. A hepatitis B vírus replikációja a retrovírusokéhoz hasonlóan megy végbe, és ugyanazt az esszenciális jelentőségű, virális reverz transzkriptáz enzimaktivitást igényli.
Nagyszámú nukleozid-analóg különböző antimetabolit hatásokat fejt ki, mivel természetes eredetű nukleozidokat helyettesítenek, vagy azokkal kompetitivek. Újabban leírtak néhány olyan nukleozid-analógot, amelyek sejttenyészetben a humán immunhiány-vírus (HÍV, más néven HTLV-III, LAV), azaz az AIDS és az AIDS-sal kapcsolatos komplex betegség (tünetcsoport) (ARC) kórokozójának a szaporodását gátolják. Valamennyi nukleozid-analóg - amelyről közölték, hogy a HÍV szaporodását gátolja - β-D-furanozil konfigurációjú.
Azt találtuk, hogy olyan nukleozid-analógok, amelyekben a 2'-hidroxil- vagy 3'-hidroxilcsoportot metil- vagy (hidroxi-metilén)-csoport vagy valamilyen más metilénszármazék helyettesíti, a HÍV szaporodását gátolják. A furanozil-egység D-konfigurációjú vagy L-konfigurációjú lehet.
Egyes, jelen találmány szerinti vegyületeket és közbenső termékeket már előzőleg ismertettek.
A J. Med. Chem. 22., 518-525 (1979) közleményben leírták metil-[2,3-didezoxi-3-C-(hidroxi-metil)-B-D-eritro-pentofuranozid], valamint az ennek megfelelő dibenzil- és dibenzoilszármazék szintézisét. Ennek során az 5-0-benzoil-3-C-[(benzoil-oxi)-metil]-2,3-didezoxi-D-eritro-pentafuranozil• · · · • ·
-6-kloridot 2-acetamido-6-klór-purinnal kapcsolták. Az így kapott termék további feldolgozása során a 2-amino-9-[2,3-didezoxi-3-C-3- (hidroxi-metil) -D-eritro-pentofuranozil] -9H-purin-6(IN)-tion két anomerjét nyerték, és vizsgálták ezek daganatgátló (antitumor) hatását. A Nucleosides & Nucleotides 1, 263-273 (1982) közleményben ismertették a 2',3'-didezoxi-3 *(R)-(hidroxi-metil)-uridin szintézisét. Ennek során az uridint több lépésből álló reakciósorral l-(3-amino-2,3-didezoxi-B-D-glükopiranozil)-uracillá alakították, és ez utóbbit gyűrűszűkülési reakciónak vetették alá, epimerizálták, majd redukció után 2 ·, 3 '-didezoxi-3 ' (R) - (hidroxi-metil)-uridinhoz jutottak.
A WO 88/08001 számon közzétett PCT/SE88/00169 számú PCT Nemzetközi szabadalmi bejelentésben leírták az (A) általános képletű α-anomer vegyületeket - ahol az (A) képletben: X jelentése 0, S vagy CH2; Y jelentése OH vagy NH2; és R5 jelentése hidrogénatom, metil-, etil-, propil-, izopropil-, vinil-, etinil- vagy CH=CH-CH3 csoport - valamint ezek Banomerjeit.
A jelen találmány az (1A) és (1B) általános képletű új vegyületekre és azok gyógyászati szempontból elfogadható sóira vonatkozik - ahol az (1A) és (1B) képletben X jelentése O, S, SO, S02 vagy CH2 csoport;
RÍ jelentése OH, OPO(OH)2, 0P0(OH)-O-PO(OH)2,
OPO(OH)-0-PO(OH)-0-PO(OH)2 vagy (CH2)n0CH2P0(0H)2 képletű csoport, ahol n értéke 0, 1 vagy 2;
• · • · * · · · · • · · ♦ · · • ···· «··· · ·♦··· · · ····
R2 jelentése hidrogénatom, és R3 jelentése CH3, CH2OH, CH2OCH3, CH2SH, CH2F vagy CH2N3 képletű csoport; vagy
R3 hidrogénatomot jelent, és R2 jelentése CH3, CH2OH, CH2OCH3, CH2SH, CH2F vagy CH2N3 képletű csoport;
R4 jelentése (a) általános képletű vagy (b) általános képletű csoport, ahol
Y jelentése OH vagy NH2 csoport és r5 jelentése CH=CH2, OCH, CH=CH-CH3, -C=C-CH3, tien-2-il-, tien-3-il-csoport, hidrogénatom, CH3, C2H5, CH2CH2CH3 vagy CH(CH3)2 képletű csoport;
R6 és R7 azonosak vagy különbözők, és jelentésük: hidrogén-, fluor- klóratom, OH, NH2 vagy SH csoport.
Az (1A) általános képletű vegyületekben a cukorrész a-Dvagy B-D-konfigurációjú; e vegyületek ennek értelmében (lAa) általános képletű, illetve (lAb) általános képletű vegyületek.
Az (1B) általános képletű vegyületekben a cukorrész a-Lvagy β-L-konfigurációjú; e vegyületek ennek értelmében (lBa) általános képletű, illetve (lBb) általános képletű vegyületek.
Azt találtuk, hogy a fenti vegyületek gátolják a humán immunhiány-vírus (HÍV) szaporodását.
Ennek alapján a találmány tárgyát képezi az (1A) ,és (1B) ·· ♦· « · ·« • · · » · · · • · · · « · • · ········ ·
-8általános képletű vegyületek gyógyászati alkalmazása is. Az (1A) és (1B) általános képletű vegyületek emberi HlV-vírusfertőzések gyógyítására és/vagy megelőzésére alkalmazható hatóanyagok. Általánosabb fogalmazásban: az (1A) és (1B) általános képletű vegyületek emlősállatokon és emberen előforduló, retrovírusok és hepatitis B vírus által előidézett fertőzések megszűntetése és kezelése során terápiás és/vagy megelőző kezelésre hatóanyagokként alkalmazhatók.
Az összes retrovírusok - így a HÍV is - replikációjukhoz reverz transzkriptáz enzimet igényelnek.
A hepatitis B vírus (HBV) olyan DNS-vírus, amely különleges, cirkuláris kettősszálú, részben egyszálú DNS-genommal rendelkezik; a vírus a replikációjához specifikus DNS-polimeráz enzimet tartalmaz. Ez a DNS-polimeráz enzim a HBV replikációja során - amely egy RNS közbenső terméken át megy végbe - a reverz transzkriptáz szerepét is betölti.
Az (1A) és (1B) általános képletű vegyületek további más vírusok esetében antimetabolit és antineoplasztikus (rák elleni) hatóanyagokként alkalmazhatók.
Az (1A) és (1B) általános képletű vegyületek egyik alkalmazási lehetősége herpes-vírusfertőzések kezelése. A herpes vírusok közül az 1. és 2. típusú herpes simplex vírust, a varicella (herpes zoster) vírust, továbbá a fertőzéses mononukleózist előidéző vírust (azaz az Epstein-Barr vírust), cytomegalovírust és az emberi 6. típusú herpes vírust említjük. A herpes vírusok által előidézett jelentős megbetegedések például a herpes dermatitis (bőrherpes) beleértve az
ajakherpest is, valamint a nemiszerveken fellépő herpes genitalis, továbbá a herpes keratitis és a herpes encephalitis.
A jelen találmány szerinti vegyületek egy másik alkalmazási lehetősége rákos és daganatbetegségek, különösen a víruseredetű rák- és daganatbetegségek kezelése. A vegyületek e hatása különböző utakon valósítható meg, például a vírusoknak a transzformált sejtekből más, normális sejtekbe végbemenő szóródásának a gátlásával, valamint a vírusok által transzformált sejtek szaporodásának gátlásával.
A találmány szerinti vegyületek még további alkalmazási lehetősége parazitafertőzések kezelése. A paraziták nukleozid-metabolizmusukban általában specifikus enzimek aktivitását igénylik, s ennek következtében nukleozid-analógokkal végzett kezelésük lehetővé válik. Ilyen paraziták közül példaként említjük a Schistosoma, Dipetalonema, Trypanosoma, Leishmania, Trichomonas Emereia, valamint a Plasmodium és Toxoplasma családokhoz tartozó élősködőket. Ebben a vonatkozásban a Pneumocystis carinii egy fontos tagja a protozoák családjának, mert AIDS-betegeken alkalmilag súlyos fertőzéseket idéz elő.
A találmány révén még az alábbi lehetőségek adódnak:
- Gyógyászati készítmények előállítása, amelyek hatóanyagként egy (1A) vagy (1B) általános képletű vegyületet gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyaggal - beleértve liposzómákat is - összekeverve tartalmazzák.
Egy kezelésre szoruló gazdaállat vagy emberi gazdaszervezet vírusfertőzésének terápiás és/vagy megelőző kezelése,
* ··*·
-10ami abban áll, hogy egy (1A) vagy (1B) általános képletű vegyület hatásos mennyiségét adagoljuk.
A jelen találmány előnyös vonása, hogy lehetővé teszi a replikációjukhoz reverz transzkriptáz enzimet igénylő vírusok - így az emberi immunhiány-vírus és a hepatitis B vírus - által előidézett fertőzések kezelését.
A találmány tárgyát képezi továbbá az (1A) és (1B) általános képletű vegyületek felhasználása olyan gyógyszerek előállítására, amelyek replikációjukhoz reverz transzkriptázt igénylő vírusok által előidézett fertőzések, valamint a szerzett immunhiány-tünetcsoport terápiás és/vagy megelőző kezelésére alkalmazhatók.
A találmány szerinti vegyületek előnyösen alkalmazhatók HÍV vírusok és hepatitis B vírus által előidézett fertőzések kezelésére.
A gyógyszeres terápia céljára különösen alkalmasak az (1A) általános képletű vegyületek szűkebb csoportját képező (lAb) általános képletű vegyületek - ahol az (lAb) képletben X jelentése O, S vagy CH2 csoport;
R1 jelentése OH csoport;
R2 hidrogénatomot és R3 CH2OH csoportot jelent; vagy
R3 hidrogénatomot és R2 CH2OH csoportot jelent;
R4 jelentése (a) vagy (b) általános képletű csoport, amelyekben
Y NH2 csoportot, és R5 hidrogénatomot jelent; vagy
Y OH csoportot jelent, és R5 jelentése hidrogénatom,
CH3, -C=CH, CH=CH-CH3 csoport;
-11R6 NH2 csoportot jelent, és R7 jelentése hidrogénatom,
OH, SH vagy NH2 csoport; vagy
R6 hidrogénatomot jelent, és R7 jelentése OH, SH vagy NH2 csoport; vagy
R6 fluor- vagy klóratomot jelent, és R7 jelentése OH, SH vagy NH2 csoport; vagy
R6 OH csoportot, és R7 szintén OH csoportot jelent.
Az (IA) és (1B) általános képletű vegyületek gyógyászati szempontból elfogadható sói lehetnek bázisokkal alkotott sók, például alkálifémsók, így nátrium-, káliumsók, vagy alkáliföldfém- például magnéziumsók, valamint ammónium- és tetraalkil-ammóniumsók. Fiziológiailag elfogadható, savakkal alkotott sók savkomponense például szerves karbonsav lehet; e célra alkalmas például az ecetsav, glükonsav, citromsav, borkősav, maleinsav, almasav, pantoténsav, izetionsav, oxálsav, laktobionsav, borostyánkősav, alkalmazhatunk továbbá savkomponensként szerves szulfonsavakat, így metán-, etán-, benzol-, p-klór-benzolszulfonsavat vagy p-toluolszulfonsavat; valamint szervetlen savakat, például sósavat, jódhidrogénsavat, kénsavat, foszforsavat vagy szulfaminsavat is használhatunk.
A találmány továbbá az (IA) és (1B) általános képletű vegyületek mono-, di- és trifoszfát-észtereire is vonatkozik. A foszfátcsoportok fiziológiai szempontból elfogadható társionjai szervetlen vagy szerves kationok lehetnek. Szervetlen társionok például az ammónium-, nátrium-, kálium-, lítium-, magnézium- és kalciumion. Szerves társionok kapha-12-
tók nemtoxikus bázisokkal, például primer, szekunder vagy tercier aminok - így természetes eredetű aminok - alkalmazásával. Ilyen aminok például: a dietil-amin, trietil-amin, izopropil-amin, etanol-amin, morfolin, 2-(dietil-amino)-etanol, glükózamin, N-metil-glükamin, piperazin és diciklohexil-amin.
Az (IA) és (1B) képletű nukleozid-analógokat a klinikai gyakorlatban általában orális úton, befecskendezéssel, vagy infúzió útján, gyógyászati készítmény alakjában adagoljuk, amely a hatóanyagot az eredeti vegyület alakjában vagy adott esetben annak gyógyászati szempontból elfogadható sója alakjában gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyaggal öszszekeverve tartalmazza. E vivőanyag lehet szilárd, félszilárd vagy folyékony higítószer; bevehető kapszula is alkalmazható. A találmány szerinti vegyületek vivőanyag nélkül is felhasználhatók. A gyógyászati készítmények például tabletták, drazsék, kapszulák, granulátumok (szemcsézett készítmények) , szuszpenzió, elixír, szirup, oldat, liposzóma alakjában lehetnek. A hatóanyag mennyisége injekciós készítményben általában 0,05-20%, míg orális adagolásra szánt készítmények esetén 10-90%.
Retrovírus-fertőzésben, különösen HÍV vagy hepatitis B vírus fertőzésekben szenvedő betegek kezelése során a találmány szerinti vegyületek bármilyen célszerű úton - például orális, parenterális, rektális úton (végbélen át), nazális úton (orrnyálkahártyán át), vaginális úton (hüvelyen át) vagy helyileg (topikusan) adagolhatok. A parenterális adago• · · · · · · · • · * « · · · • · *··· *··· · ·······♦ « * ····
-13lást például szubkután, intramuszkuláris, intravénás vagy szublingvális űton (nyelv alatt) végezhetjük. A készítmények helyileg például a szájüregben vagy szublingválisan adagolhatok. A hatásos vegyületek dózisa széles tartományban változhat, és különböző tényezőktől - így a fertőzés súlyosságától, a beteg életkorától - függ, és adott esetben egyénileg kell beállítani. A találmány szerinti vegyület vagy annak fiziológiai szempontból elfogadható sójának lehetséges dózistartományaként naponta körülbelül 10 mg-tól körülbelül 10 000 mg-ig, előnyösen intravénás adagolás esetében körülbelül 50 mg-tól körülbelül 500 mg-ig, orális adagolás céljára előnyösen körülbelül 50 mg-tól körülbelül 3000 mg-ig terjedő mennyiséget jelölhetünk meg.
Az (1A) és (1B) általános képletű vegyületek más terápiás hatású szerek széles körével együttesen szinergetikus hatást fejthetnek ki: ennek következtében mindkét hatóanyag terápiás potenciálja (gyógyászati hatékonysága) növekszik toxikus hatásaik összegeződése nélkül, s így terápiás arányuk (biztonsági indexük) növekszik.
A fentiek alapján az (1A) és (1B) általános képletű vegyületek és gyógyászati szempontból elfogadható származékaik kombinációs terápiára is felhasználhatók, aminek során a kombinációban a két hatóanyag az optimális terápiás (biztonsági) indexnek megfelelő arányban van jelen. Ezt lehetővé teszi a két hatóanyag szinergetikus hatása a vírusfertőzéssel szemben és/vagy a toxicitás csökkenése, miközben a terápiás hatás additív vagy szinergetikus jellegű.
-14Az optimális terápiás (biztonsági) index akkor figyelhető meg, ha a két hatóanyag 500:1-től 1:500-ig, előnyösen 100:1-től 1:100-ig, különösen 20:1-től 1:20-ig, legfőképpen 10:1-től 1:10-ig terjedő arányban van jelen a kombinációban.
A fenti kombináció célszerűen adagolható egyszerre, például egyetlen gyógyászati készítményben; vagy például egyidőben külön-külön adagolt tabletták, vagy injekciók segítségével a kívánt terápiás hatás elérésére.
Az (1A) és (1B) általános képletű vegyületek hatását potencírozzák interferonok, valamint más antivirális hatóanyagok, így a foscarnet, AZT, fluor-timidin, didezoxi-inozin, didezoxi-didehidrotimidin, 9-[4-hidroxi-2-(hidroxi-metil)-butil]-guanin, acyclovir, HIV-proteáz-gátlók, immunmoduláló hatóanyagok, interferon-indukáló hatóanyagok és szaporodási (növekedési) faktorok.
E szempontból különösen előnyösek az interferon-indukáló a, b, és q típusok.
További, a jelen találmány szerint célszerűen alkalmazható kombinációk második hatóanyagként például interleukin-ΙΙ-t, foscarnet-észtereket, HIV-proteáz-gátlókat - így pepsztatint, szteroidokat - a limfociták számát növelő gyógyszereket, például levamizolt vagy timozint és/vagy a limfociták funkcióját fokozó hatóanyagokat, valamint G-CSF és más, a sejttevékenységet szabályzó faktorokat tartalmazhatnak .
A találmány szerinti vegyületek előállítását az alábbiakban vázoljuk, találmányunk azonban nem korlátozódik *· ·* · * ·· ····· f ·« • · · · ♦ · · • · ···« ·
-15ezekre az eljárásokra; a találmány szerinti vegyületek más, ismert eljárásokkal is előállíthatók.
Olyan (1A) képletű vegyület szintézisét, ahol R1 hidroxilcsoportot, R2 hidrogénatomot, R3 CH2OH csoportot és R4 uracil-l-il-csoportot jelent, előzőleg a Nucleosides and Nucleotides 1, 263-273 (1982) irodalmi helyen ismertettek. Ez a származék - célszerűen védett formában - ismert eljárások útján, például átglikozilezés útján célszerűen derivatizált purin- vagy pirimidinbázisokkal, vagy az uracil kémiai átalakításai útján más nukleozidszármazékokká alakítható.
A metil-[2,3-didezoxi-3-C-(hidroxi-metil)-fi-D-eritro-pentofuranozid] és metil-{5-0-benzoil-3-C-[(benzoil-oxi)-metil]-2,3-didezoxi-6-D-eritro-pentofuranozid} szintézisét - D-glükózt mint kiinduló anyag alkalmazásával - a J. Med. Chem. 22, 518-525 (1979) irodalmi közleményben írták le.
Az utóbbi vegyületet 5-0-benzoil-3-C-[(benzoil-oxi)-metil] -2 ,3-didezoxi-D-eritro-pentofuranozil-kloriddá alakították, melyet szililezett 2-acetamido-6-klór-purinnal glikozilező reakcióba vittek. Az (1A) képletű vegyület szénhidrát-egysége védett 2,3-didezoxi-D-glicero-pent-2-enono-l,4-laktonból is megvalósítható 1,4-típusú Michael-addíció útján megfelelő szén-nukleofil-partnerrel analóg módon, mint ezt a Carbohydr. Rés. 183, 261-275 (1988) és J. Org. Chem. 53. 4780-4786 (1988) irodalmi közleményekben leírták.
Az 1) reakcióvázlat szerint az (1A) általános képletű vegyületek - ahol X, R1, R2, R3 és R4 jelentése a fentiekben meghatározott - úgy állíthatók elő, hogy egy (IA‘) általános • V
-16képletű glükozidot egy pirimidinszármazékkal annak N-l helyzetében, vagy egy purinszármazékkal annak N-9 helyzetében kondenzálunk, ahol Z jelentése klór-, bróm- vagy jódatom, aciloxi- vagy alkoxicsoport; és R1', R2' és R3 ' jelentése RÍ, R2 és R3 fentebb meghatározott jelentésével azonos; vagy azzal a megkötéssel, hogy ha R1 vagy R2 jelentése OH csoport, akkor az oxigénatomon védőcsoportnak kell lennie; és R4 ' jelentése azonos R4 fentebb meghatározott jelentéseivel szilil-, acil- vagy alkilcsoporttal védett formában.
A 2) reakcióvázlat szerint az (1B) általános képletű vegyületek - ahol X, R1, R2 és R3 jelentése a fentiekben meghatározott - úgy állíthatók elő, hogy a 2) reakcióvázlat szerint egy (1B') általános képletű glükozidot egy pirimidinszármazékkal annak N-l helyzetében, vagy egy purinszármazékkal annak N-9 helyzetében kondenzálunk, ahol Z jelentése klór-, bróm- vagy jódatom, aciloxi- vagy alkoxicsoport; és R1', R2’ és R3’ jelentése R1, R2 és R3 fentebb meghatározott jelentésével azonos; vagy azzal a megkötéssel, hogy ha R1 vagy R2 jelentése OH csoport, akkor ennek védett formában kell lennie; és R4' jelentése azonos R4 fentebb meghatározott jelentéseivel szilil-, acil- vagy alkilcsoporttal védett formában.
Egy új módszer alkalmazásával az (IB) általános képletű vegyületeket - ahol X, R1, R2 és R3 jelentése a fentiekben meghatározott, és Z jelentése klór-, bróm-, jódatom, aciloxi- vagy alkoxicsoport - úgy állítjuk elő, hogy egy védőcsoporttal ellátott bután-l,4-diol-2,3-epoxidot 3 vagy ·· ·· · · ·· ♦ · ♦ · · » · • · · · I V · szénatomot és kettős kötést tartalmazó nukleofillal reagáltatunk, majd a kettős kötést átalakítjuk, és gyűrűzáró reakciót végzünk.
Ennek alapján az (1A) általános képletű (típusú) vegyületek az alábbi 3) reakcióvázlatban vagy a 4)-6) reakcióvázW latokban illusztrált eljárásokkal szintetizálhatok.
A 3) reakcióvázlatban bemutatott módszer különösen jól alkalmazható, mert olyan epoxid - mint kiinduló anyag használatával, amelynek kiralitása az (1) képletű vegyületéhez képes enantiomer - az (1B) általános képletű L-cukorszármazékok is szintetizálhatok. Ha R8 hidrogénatomot jelent, akkor R3 helyén különböző funkciós csoportokat tartalmazó vegyületek szelektíven állíthatók elő.
Analóg módon állíthatók elő olyan vegyületek, ahol X jelentése kénatom. A kénatom kívánt esetben SO vagy S02 csoporttá oxidálható.
Olyan vegyületek, ahol X jelentése CH2 csoport, a 4) reakcióvázlat szerint állíthatók elő.
Az (1) általános képletű királis epoxid, kémiailag (2S,3R)-3-{[(4-bróm-benzil)-oxi]-metil}-oxirán-2-metanol - ahol R9 jelentése p-bróm-benzil-csoport, és R8 hidrogénatomot jelent - a J. Org. Chem. 52., 2596-2598 (1987) irodalmi közleményben leírt eljárással állíthatók elő. R9 és/vagy R8 bármilyen, bázisokkal szemben stabilis védőcsoport, például benzil- vagy alkil- vagy szilil-védőcsoport lehet. Az (1) képletű epoxidot allil-magnézium-bromiddal vagy ezzel egyenértékű allil-anionos vegyülettel kezelve a ·· (2) és (3) képletű vegyületekhez jutunk, melyeket a szokásos módon, például kromatográfiával vagy kristályosítással különítünk el. Abban az esetben, ha R8 hidrogénatomot jelent, akkor a (2) képletű vegyületben e lépésben a szabad hidroxilcsoportot célszerűen acilcsoporttal, előnyösen benzoilcsoporttal védjük. A kettős kötés oxidatív hasításával, és az így kapott terméket katalitikus mennyiségű savat tartalmazó vízmentes metanollal kezelve jutunk a (4) képletű vegyülethez.
A (4) képletű vegyületet szililezett purinszármazékokkal vagy pirimidinszármazékokkal savkatalízis segítségével kapcsolva a kívánt nukleozidszármazékot a- és β-anomer keverékeként kapjuk. Ha a (4) képletű vegyületben R8 és R9 közül nem mindkettő benzoilcsoport, akkor a (4) képletű vegyületet e származékká alakítjuk a szokásos védőcsoport-eltávolító és blokkoló eljárások útján. A nukleozidok a- és β-anomerből álló keverékét előnyösen a védőcsoportoktól mentesítjük, majd az így kapott a- és β-anomert a szokásos úton, így például kromatográfiával vagy kristályosítással elkülönítjük, s így az (1A) képletű, fentiekben meghatározott vegyületet kapjuk, amelyben R1 és R3 jelentése hidroxil-, illetve hidroxi-metil-csoport.
Az (1B) általános képletű vegyületeket ugyanígy állítjuk elő azzal az eltéréssel, hogy az (1) képletnek megfelelő, azonban ellentétes kiralitású epoxidból indulunk ki.
Olyan vegyületeket, ahol X jelentése CH2 csoport, a
4) reakcióvázlat szerint a (7) képletű vegyületből állítjuk • · ·· · · ·· • ♦ · · ♦ • · ♦ · · · · « · ··«····« · ···· ···· · · ··««
-19elő [Chem. Pharm. Bull. 26, 15 (1988)] úgy, hogy a ketoncsoportot ketál alakjában védjük, utána az észtercsoportokat lítium-[tetrahidridoaluminát] alkalmazásával étercsoportokká redukáljuk, majd a ketálcsoportot hidrolizálva jutunk a (8) képletű vegyülethez. Ez utóbbinak a ketoncsoportját redukálva a (9) képletű hidroxilvegyületet kapjuk, amelyet a megfelelő purinszármazékkal kondenzálunk. A védőcsoport eltávolítása után (1A) képletű vegyületet kapunk. Ugyanígy szintetizáljuk azokat az (1B) típusú vegyületeket, amelyekben X CH2 csoportot jelent.
Olyan (1A) típusú vegyületeket, amelyekben X oxigénatomot, és R2 CH2OH, CH2F vagy CH2N3 csoportot jelent, az 5) reakcióvázlat szerint a (11) képletű (S)-4-(terc-butil-difenil-szilil-oxi)-metil-J^-butirolaktonból kiindulva állítjuk elő úgy, hogy azt etil-formiáttal acilezzük, majd az így kapott terméket nátrium-[tetrahidrido-borát]-tál redukáljuk, és acilezzük; így szilikagélen végzett oszlopkromatográfiás elválasztás után a (12) képletű vegyületet kapjuk. Ez utóbbit dialkil-alumínium-hidriddel redukáljuk, és a kapott terméket acilezzük, így a (13) képletű vegyülethez jutunk. Ez utóbbit a megfelelő nukleozid-bázis származékokkal glikozilezzük.
Olyan (1A) típusú vegyületeket, ahol X kénatomot jelent, a 6) reakcióvázlat szerint a (14) képletű vegyületből állítunk elő, hogy azt benzil-merkaptánnal és ón(IV)-kloriddal kezeljük, s így a (XV) képletű vegyülethez jutunk. Ez utóbbit trifenil-foszfin és trijód-imidazol alkalmazásával cik·· >· * • ♦ · ·
-20lizálva kapjuk a (16) képletű származékot. A (16) képletű vegyület egy részét szililezett iminnel kondenzáljuk, másik részét higany(II)-acetáttal kezelve a (17) képletű vegyületet kapjuk, amelyet szililezett citozinnal kondenzálunk.
Az alábbi példákban bemutatjuk a találmány alapelvét és alkalmazásait, azonban találmányunk nem korlátozódik e példákra. A példákban a hőmérsékleteket Celsius-fokokban adtuk meg. A bepárlásokat csökkentett (1-2 kPa) nyomáson legfeljebb 40 °C hőmérsékletű fürdőben végeztük. Az NMR-színképeket JEOL GX-270 vagy FX-100 eszközzel vettük fel, oldószerként D2O-t vagy CDC13~at használtunk. Belső standardként CDCI3 esetén tetrametil-szilánt (TMS), D2O esetén TSP-t vagy dioxánt alkalmaztunk. A kémiai eltolódásokat ppm-ben adtuk meg. Az UV abszorpciós színképeket Perkin-Elmer Lambda 5 spektrofotométeren vettük fel. A vékonyréteg-kromatogrammokat (VRK) Merck-féle, előre bevont 60 F-254 lemezeken készítettük. A foltokat UV fénnyel és/vagy 8%-os kénsawal hívtuk elő. Az oszlopkromatográfiát szilikagél 60 szorbenssel végeztük (0,040-0,063 mm, Merek). A túlnyomásos folyadékkromatográfiát (HPLC) előre töltött acélkolonnán végeztük (mérete 250 x 25 mm) Polygosil 60-7, C-18 töltettel (Macherey-Nagel). A szerves fázisokat vízmentes magnézium-szulfáton szárítottuk. Az optikai forgatóképességet Perkin-Elmer 141 polariméterrel határoztuk meg.
A találmányt az alábbi nem korlátozó jellegű példákban részletesen ismertetjük.
*♦ *· · • · · I
1. példa
1-[2 ·, 3 ' -Didezoxi-3 *-C-(hidroxi-metil) -β-D-eritro-pentofuranozil]-citozin előállítása
120 mg (1,08 mmól) citozin és kis kristálynyi ammónium-szulfát 2 ml hexaroetil-diszilazánnal és 0,2 ml trimetil-klór-szilánnal készült szuszpenzióját visszafolyató hűtő alatt tiszta oldat kialakulásáig forraljuk, utána az oldatot vákuumban bepároljuk, majd száraz xilol hozzáadása után ismét bepároljuk. A szilárd maradékot nitrogéngáz alatt 2 ml száraz diklór-metánban (röviden: DKM) oldjuk, és előbb 170 mg (0,46 mmól) metil-{5-0-benzoil-3-[ (benzoil-oxi)-metil] -2,3-didezoxi-D-eritro-pentofuranozid}-ot, majd 0,22 ml (0,96 mmól) (terc-butil-dimetil-szilil)-trif látót adunk hozzá. A reakcióelegyet 24 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal elbontjuk, és a kapott keveréket 30 percig keverjük. Ezt követően DKM-nal hígítjuk, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, és szűrés után bepároljuk. így a védett nukleozidot anomer keverékként kapjuk. Az elegyhez 20 ml telített metanolos ammóniaoldatot adunk, és 24 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A bepárlás után kapott maradékot vízben oldjuk, és DKM-nal extraháljuk. A vizes fázist kis térfogatra töményítjük, félpreparatív, C-18 fordított fázisú kromatografáló oszlopra visszük, és 2% metanolt tartalmazó vízzel eluáljuk. Elsőként az α-anomert gyűjtjük össze, ezt követi a β-anomer. A megfelelő frakciók egyesítése és bepárlása után az a-anomert
-2233 mg (30%), a β-anomert 27 mg (24%) hozammal kapjuk. Az α-anomer jellemzői: [a]26 -54° (c = 0,3, víz).
D
UV (H20) /max: 272 nm (^10894) iH-NMR (270 MHz, D2O) δ: 1,92 (m, J2·a,2'b=13> 5 Hz, J2'a,3'=9 Hz' J2'a,l,=6'5 Hz, 1H' Η-2'a); 2,5 (m, 1H, H-3'); 2,7 (m, J2·a,2·b=13·5 Hz, J2'a,3’=8H2' J2'a,l'=6 Hz, 1H H 2'b)7 3,67, 3,69 (d és lq, átfedés , Jé · , 3 ' 6,2 Hz, J5 · a, 5 1 b-^·2 ' Hz, J 4 · , 5 ' a 5,3 Hz, 3H, H-6' és Η-5'a); 3,85 (q, J5'a,5'b=12/5 Hz, J4',5'b= 3 Hz, 1H, Η-5'b); 4,28 (m, J3i/4»=8 Hz, J4',5'a=5/3 Hz, J4',5’b=3 HZ, 1H, H-4'); 6,1 (d és q, átfedés, J5,6=7,3 Hz, J,,2i=6,5 Hz, 2H,H-5 és H-l’);
| 7,8 (d, J5,6=7,3 Hz, 1H, H-6); | ||||
| 13C-NMR (25,05 MHz, D2O) Ó: | 36,4 | (C-2'); 42 | ,3 (C—3') | |
| 62,7, 63,6 (C-5', | C-6'); | 84,4, | 88,2 (C-l* | , C-4'); |
| 96,6 (C-5); 141,9 | (C-6); | 158,1 | (C-2); 166 | ,8 (C-4). |
| A β-anomer jellemzői: | [a]26 D | +64° | (c = 0,27, | VÍZ) . |
| UV (H2O) /max: 272 | nm (69208) | |||
| 1H-NMR (270 MHZ, D2O) | δ: | 2,2-2, | 46 (m, 3H, | H-2; H-3' |
3,68 (d, J3./6i=5,5 Hz, 2Η, H-6'); 3,76 (dd, J4',5'a=5,5 Hz, J5.a,5·b=i2>5 Hz, 1H, Η-5'a); 3,92 (dd, J4i/5.b=2,9 HZ, J5iaf5ib=12,5 Hz, 1H, Η-5'b);
4,01 (m, J3i,4i=8,1 Hz, J5a',4'=5,5 Hz, j5'b,4'= =2,9 Hz, 1H, H-4'); 6,05 (3, Js,6=7/3 Hz, 1Η» H-5) ;
6,11 (dd, Ji'z2'a=7'° Hz, Ji»,2'b=4'° Hz' 1H/ H_1')i
7,91 (d, J5,6=7,3 HZ, 1H, H-6);
-2313C-NMR (25,05 MHz, D2O) δ: 36,1 (C-2'); 40,8 (C-3') ;
62,7, 63,1 (C-5', C-6·); 84,7, 87,1 (C-l', C-4 ') ;
96,5 (C-5); 142,2 (C-6); 158,2 (C-2); 166,8 (C-4).
2. példa
9-(21,3' -Didezoxi-3 1 -C- (hidroxi-metil) -B-D-eritro-pentofuranozil]-adenozin előállítása; és
3. példa
9-[2·,3' -didezoxi-3' -C- (hidroxi-metil) -a-D-eritro-pentofuranozilj-adenozin előállítása
200 mg (1,3 mmól) 6-klór-purint 280 mg (0,76 mmól) metil-{5-0-benzoil-3-[ (benzoil-oxi) -metil] -2,3-didezoxi-D-eritro-pentofuranozid}-dal kondenzálunk az 1. példában leírtak szerint, oldószerként azonban acetonitril helyett DKM-et alkalmazunk. így anomer keveréket kapunk, amelyet elkülönítése után 5 ml metanolos ammóniaoldatban oldunk, és zárt csőben 20 órán át 100 °C hőmérsékleten melegítjük. Ezután az oldószert eltávolítjuk, a maradékot vízben oldjuk, és DKM-nal extraháljuk. A vizes fázist kis térfogatra töményítjük, félpreparatív C-18 fordított fázisú kromatografáló oszlopra visszük, és 8% metanolt tartalmazó vízzel eluáljuk. Elsőként kapjuk az α-izomert, ezt követi a β-izomer. A megfelelő frakciók egyesítése és bepárlása után 20 mg (10%) a-anomert (3. példa) és 40 mg (20%) B-anomert nyerünk (2. példa).
Az α-anomer jellemzői: [a]26 -41° (c = 0,23, víz).
D
UV (H20) Zmax: 260 nm (€12864) ·· • ·
-241H-NMR (270 MHz, D20) δ: 2,45 (m, 1H, Η-2'a); 2,6 (m, 1H, H-3'); 2,82 (m, J2'b,l’=6 Hz, J2'b,3'=7,8 Hz, J2'b,2'a=:14 Hz, 1H, Η-2'b); 3,72 és 3,74 (q és d, átfedés, J5'b,4’=5,5 Hz, J5 t b, 5 t a=12,5 Hz, Jgi>3i=5,9 Hz, 3H, Η-5'b és H-6'); 3,86 (q, J5.a,4'=2,9 Hz, J51a5.b=12,5 Hz, 1 H, Η-5'a); 4,31 (m, 1 Η, H-4');
6,35 (m, 1H, H-l'); 8,19 (s, 1H, H-2; 8,32 (s, 1H, H-8) ;
13C-NMR (25,05 MHz, D20) δ: 35,5 (C-2'); 42,3 (C-3');
| 62,5, | 63,3 (C-5', C-6' | ); 83,8, | 85,3 (C-l', | c-4·); | |
| 119,4 | (C-5); 140,3 | (C- | 8); 148, | 9 (C-4); 153 | ,0 (C-2); |
| 155,9 | (C-6). | ||||
| A β-anomer jellemzői: | [a] | 2 6 —17 ° D | (c = 0,27, | víz) . | |
| UV (H2O) | Z max: 260 | nm | (£10744) | ||
| ^H-NMR (270 MHz, D2O) | δ: | 2,5 (m, | 1H, H-3'); | 2,67 (m, |
2H, H-2’); 3,69 (q, J5.a,4i=5,l Hz, J51a,5.b=12,5 Hz,
1H, Η-5'a); 3,77 (d, J6i/3i=5,5 Hz, 2H, H-6'); 3,87 (q, J5'b,4'=2'9 Hz, J5’b,5'a=12'5 Hz > 1H, Η-5'b);
4,13 (m, 1H, H-4'); 6,34 (m, 1H, H-l'); 8,18 (s, 1H, H-2); 8,32 (s, 1H, H-8).
13C-NMR (25,05 MHz, D2O) δ: 35,7 (C-2'); 41,4 (C-3');
62,8, 63,4 (C-5',C-6'); 85,0, 85,3 (C-l', C-4');
119,2 (C-5); 140,5 (C-8); 148,7 (C-4); 153,0 (C-2);
155,8 (C-6).
···· ·· f 9·· • · é 9 99 • · · · ·9
9999 99999 •999 9 99999
4. példa
1- [2 ’, 3 * -Didezoxi-3' -C- (hidroxi-metil) -B-D-eritro-pentofuranozilj-timin előállítása
150 mg (1,19 mmól) timint 205 mg (0,47 mmól) metil-{3-C-[(benzoil-oxi)-metil]-5-0-(p-bróm-benzil)-2,3-didezoxi-D-eritro-pentofuranozid}-dal kondenzálunk az 1. és 2. példában leírt eljárással, s így védőcsoportot tartalmazó nukleozid-anomer keverékhez jutunk. Ezt a keveréket fölös mennyiségű nátrium-hidrogén-karbonátot tartalmazó etanolban oldjuk, és 10% palládiumot tartalmazó csontszenes palládiumkatalizátor jelenlétében atmoszféranyomáson 3 órán át hidrogénezzük. A feldolgozás után kapott maradékot 24 órán át metanolos ammóniaoldattal reagáltatjuk. A bepárlás után kapott maradékot vízben oldjuk, DKM-nal extraháljuk, a vizes fázist kis térfogatra bepároljuk, és félpreparatív C-18 fordított fázisú oszlopon kromatografáljuk. Eluálószerként 10% metanolt tartalmazó vizet alkalmazunk. Először az α-izomert eluáljuk, ezt követi a β-izomer. A megfelelő frakciókat egyesítve és bepárolva 40 mg (33%) α-anomert és 41 mg (33%) β-anomert kapunk.
Az α-anomer jellemzői: [a]26 -3,6° (c = 0,36, víz).
D
UV (H2O) Zmax: 268 nm (€13756) XH-NMR (270 MHz, D20) δ: 1,89 (d, J=l,l Hz, 3H, 5-CH3);
1,96 (m, ^21 a,2b12»2 Rz* J2’a,3,=9,9 Hz, J2'a,l’=7'7 Hz, 1H, H-2’a); 2,47 (m, 1H, H-3'); 2,6 (m, J2'a,2'b'=13>2 Hz' J2'b,3'=8/1 Hz, J2'b,l'= =6,2 Hz, 1H, Η-2'b); 3,64 és 3,68 (d és q átfedés, • ·· • · « • · · ···· · • ···· • 4 ···· J5'a,4'=5'5 Hz, Js'arS'b”12'1 Hz, Hz> 3H'
Η-5'a, H-6'); 3,81 (q, J5'b,4'— 2,9 Hz, J5'b,5*a— =12,1 Hz, Η-5'b); 4,24 (m, J3t4i=8,4 Hz, J4«,5'a=
| =5,5 | Hz, J41 | ,5'b-2»9 Hz· 1H, | H-4); 6,11 (q, | J1',2'a |
| =7,7 | Hz, Jjj | /2.b=6,2 HZ, 1H, | H-l'); 7,59 (d, | , J= |
| =1,1 | Hz, 1H, | H-6) ; | ||
| 13C-NMR | (25,05 | MHz, D2O) S: 12,í | 5 (5-CH3); 35,7 | (C-2·); |
| 42,7 | (C-3'); | 62,6, 63,5 (C-5 | ', C-6'); 84,2, | 87,3 |
(C-l', C-4'); 111,6 (C-5); 138,1 (C-6); 152,4 (C-2) ;
167,3 (C-4).
A β-anomer jellemzői: [a]26 +17,8° (c = 0,41, víz).
D
UV (H2O) Anax: 268 nm (ε8516) iH-NMR (270MHz, D2O) δ: 1,91 (s, 3H, 5-CH3); 2,3 (m,
2H, H-2'); 2,5 (m, lH,H-3'); 3,69 (d, J3./6i=5,9 Hz, 2H, H-6'); 3,76 (q, J5 · b, 5'a=12'4 Hz, J5ibf4i=5,l Hz,
1H, Η-5'b); 3,9=q, J5ia,5ib=12,4 Hz, J5'a,4'=2,9 Hz,
1H, Η-5'a); 3,99 (m, J4'f5'a =2,9 Hz, J4·,51b=5,1 Hz, J4./3.=8,l Hz, 1H, H-41); 6,14=(q, Ji.,2'a=4,8 Hz, Jl',2'b=6'6 Hz' 1H' H“l’) ; 7/73=d, J=l,l Hz, 1H, H-6) .
13C-NMR (25,05 MHz, D2O) 6: 12,5 (5-CH3); 35,4 (C-2·);
40,9 (C-3’); 62,8, 62,9 (C-5', C-6'); 84,5, 86,1 (C-l', C-4'); 111,7 (C-5); 138,3 (C-6); 152,7 (C-2) ;
167,5 (C-4).
Hasonló módon szintetizáltuk az 5-10. példákban a megfelelő (1B) általános képletű L-konfigurációjú nukleozid-analógokat. A szintézis menete a 3) reakcióvázlatot követte, ennek leírása részletesen az 1-4. példákban és a kiinduló anyagok előállítását ismertető példákban található. Az 5-10. példákban a 3) reakcióvázlat szerinti (5) általános képletű kiindul anyagunk a (2R, 3S)-3-{[(4-bróm-benzil) -oxi]-metil}-oxirán-2-metanol volt.
5. példa
1-[2',3' -Didezoxi-3 ' -C- (hidroxi-metil) -β-L-eritro-pentofuranozil]-citozin és
6. példa l-[2', 3 * -Didezoxi-3 · -C- (hidroxi-metil) -a-L-eritro-pentofuranoz il]-citoz in
Az α-anomer jellemzői: [a]22 +57,3° (c = 0,61, víz).
D
UV («2°) Z max: 273 nm (^7647)
ÍH-NMR (270 MHz, D2O) fi: 1,92 (m, J2·a,2'b=13’5 Hz,
J2·a,31=9 Hz, J2,a,l’=6»5 Hz, 1H, H—2’a) ; 2,5 (m, 1H, H-3'); 2,7 (m, J2«a,2'b=13' 5 Hz> J2'a,3'=8H2, J2'a,l,=6 Hz» 1H Η-2'b); 3,67, 3,69 (d és dd, átfedés , Jg1,31—6,2 Hz, J51 a,51b=12Hz, J4 »,5·5,3 Hz, 3H, H-6’ és Η-5'a); 3,85 (dd, J5ia,5ib=12,5 Hz,
| J4' 5»b=3 Hz, | , H-5 | ’b) | ; 4,28 (m, J3i,4i=8 Hz, | |
| J4,,5'a=5/3 Hz< | J4' ,5 | 'b= | 3 Hz, 1H, H-4'); 6,1 (d és | t, |
| átfedés, J5^6=7, | 3 Hz, | J, | f2i—6,5 Hz, 2H, H-5 és H-l' | ); |
| 7,8 (d, J5/6=7,3 | HZ, | 1H, | H-6) | |
| 13C-NMR (25,05 MHZ, | D20) | fi: | 36,4 (C-2·); 42,3 (C-3') | í |
| 62,7, 63,6 (C-5* | , C-6 | 84,4, 88,2 (C-l', C-4 ') ; |
96,6 (C-5); 141,9 (C-6); 158,1 (C-2); 166,8 (C-4). A β-anomer jellemzői: [a]22 -76,3° (c = 1,14, víz).
D
UV (H20) / max: 273 nm (e5333)
3-H-NMR (270 MHz, D2O) δ: 2,2-2,46 (m, 3H, H-2; H-3');
3,68 (d, J3.,6i=5,5 Hz, 2H, H-6'); 3,76 (dd, J4i,5.a=5,5 Hz, J51a,51b=12,5 Hz, 1H, Η-5'a); 3,92
| (dd, | J4',5'b=2'9 Hz' J5'a,5'b=1 | 2,5 Hz, 1H, | H-5’b); |
| 4,01 | (m, J3t/4t=8,l Hz, J5a',4' | =5,5 Hz, J5 | 'b,4'= |
| =2,9 | HZ, 1H, H-4'); 6,05 (3, J5 | r6=7/3 HZ, | 1H, H-5); |
| 6,11 | (dd, Ji'z2'a=7'° Hz' Jl',2 | tb=4,0 Hz, | 1H, H-l'); |
| 7,91 | (d, J5>6=7,3 Hz, 1H, H-6). | ||
| 13C-NMR | (25,05 MHz, D20) δ: 36,1 | (C-21); 40, | 8 (C-3·); |
| 62,7, | 63,1 (C-5', C-6'); 84,7, | 87,1 (C-l', | C-4 ' ) ; |
| 96,5 | (C-5); 142,2 (C-6); 158,2 | (C-2); 166, | 8 (C-4). |
7. példa
9— [ 2 ·, 3 ’ -Didezoxi-3 1 -C- (hidroxi-inetil) -β-L-eritro-pentofuranozilj-adenozin és
8. példa
9- [ 2 ’, 3 · -didezoxi-3 ’ -C- (hidroxi-metil) -α-L-eritro-pentofuranozilj-adenozin és
Az α-anomer jellemzői: [a]22 -45,2° (c = 0,37, víz).
D
UV (»2°) 7 maX: 260 nm (€10987);
3-H-NMR (270 MHz, D20) δ: 2,45 (m, 1H, Η-2'a); 2,6 (m,
1H, H-3') 2,82 (m, J2'b,l,=6 Hz/ J2'b,3'=7»8 Hz/ • ·
-29J2'b,2'a=14 Ηζ» 1H' Η-2'b); 3,72 és 3,74 (dd és d, átfedés, J5'b,4,== 5,5 Hz t J5' b, 5 ' a“^-2 ' $ Hz, Jgiz3i= =5,9 Hz, 3H, Η-5'b és H-6' ) ; 3,86 (q, J5'a,4,=2'9 Hz,
J5·a,5·b=12'5 Hz, 1Hz Η-5'a); 4,31 (m, 1H, H-4 ') ;
6,35 (m, 1H, H-l'); 8,19 (s, 1H, H-2); 8,32 (s, 1H, H-8) ;
13C-NMR (25,05 MHz, D2O) 6: 35,5 (C-2'); 42,3 (C-3');
62,5, 63,3 (C-5', C-6'); 83,8, 85,3 (C-l·, C-4 ' ) ;
119,4 (C-5); 140,3 (C-8); 148,9 (C-4); 153,0 (C-2);
155,9 (C-6).
A β-anomer jellemzői: [a]22 +22,5° (c = 0,44, víz).
D
UV (H2O) j max: 260 (€11482);
^-H-NMR (270 MHz, D2O) δ: 2,5 (m, 1H, H-3 ' ) ; 2,67 (m,
2H, H-2'); 3,69 (dd, Js'a^'5»1 Hz* J5'a,5'b= =12,5 Hz, 1H, Η-5'a); 3,77 (d, Jg. 3i=5,5 Hz, 2H, H-6'); 3,87 (dd, J5'b,4'=2/9 Hz, J5.b; 5.a=12,5 Hz,
1H, Η-5'b); 4,13 (m, 1H, H-4'); 6,34 (m, 1H, H-l'); 8,18 (S, 1H, H-2); 8,32 (s, 1H, H-8).
13C-NMR (25,05 MHZ, D20) δ: 35,7 (C-2'); 41,4 (C-3');
62,8, 63,4 (C-5' és C-6'); 85,0, 85,3 (C-l' és C-4·);
119,2 (C-5); 140,5 (C-8); 148,7 (C-4); 153,0 (C-2); 155,8 (C-6).
9. példa
1-[2', 3 ·-Didezoxi-3'-C-(hidroxi-metil) -B-L-eritro-pentofuranozilj-timin és
10. példa l-[2', 3' -didezoxi-3' -C- (hidroxi-metil) -a-L-eritro-pentofuranozil]-timin előállítása
Az α-anomer jellemzői: [a]22 +8,3° (c = 0,48, víz).
D
UV (H2O) Zmax: 268 nm (ε7976);
1H-NMR (270 MHz, D20) δ: 1,89 (d, 1=1,1 Hz, 3H, 5-CH3);
1,96 (m, J2'a,2'b=13'2 Hz· J2'a,3,=9/9 Hz, J2'a,l'=7'7 Hz' 1H' Η-2'a); 2,47 (m, 1H, H-3') ; 2,6 (m, 12 · a, 2 ’ b=3·3'2 Hz, ^2 1 b, 3 1 Hz, J2'b,l,— ®'2 Hz,
1H Η-2'b); 3,64, 3,68 (d és dd, átfedés, J51,4·= =5,5 Hz, J51a,5·b=12,1 Hz, 1^1,31=6,1 Hz, 3H, Η-6'a és H-6'); 3,81 (dd, 151)3,51=2,9 Hz, I51b,5·a=12,1 Hz, Η-5'b); 4,24 (m, 131,41=8,4 Hz, J4'/5'a==^'5 Hz, J4',5’b=2'9 Hz' 1H' H-4); 6'13- (dd/ Jl',2'a=7'7 Hz, l'l,2'b=6'2 Hz, 1H' H-l) /' 7<59 (d/ J=l,l Hz, 1H, H-6) ;
13C-NMR (25,05 MHz, D2O) δ: 12,5 (5-CH3); 35,7 (C-2’);
42,7, (C-3’) 62,6, 63,5 (C-5* és C-6'); 84,2, 87,3 (C-l* és C-4'); 111,6 (C-5); 138,1 (C-6); 152,4 (C-2); 167,3 (C-4).
A β-anomer jellemzői: [a]22 -21,2° (c = 0,32 víz).
D max: 268 nm (c8123);
l-H-NMR (270 MHz, D20) δ: 1,91 (s, 3H, 5-CH3) ; 2,3 (m,
2H, H-2’); 2,5 (m, =1H, H-3’); 3,69 (d, l3.,6.= =5,9 Hz, 2H, H-6'); 3,76 (dd, 115b,5·a=12,4 Hz, l5ib/4=5,l Hz, 1H, Η-5'b); 3,9 (dd, 15.a,5.b=12,4 Hz, • ·
-31····· · ·· • · · « · * · • · ··*····· ·
| J5a',4'-2'9 Hz, 1H, | Hsa)? =3/99 | (m, | J4',51 | a=2,9 | Hz, |
| (J4 ’ , 5 ’b=511 Hz, J4 | 1^31 =8,1 Hz, | 1H, | H-4) ; | 6,14 | (dd, |
| Jl',2'a=4'® Hzt Ji’ | ,2'b=6'6 Hz, | 1H, | H-i); | 7,73 | (d, |
J=l,1 Hz, 1H, H-6) .
13C-NMR (25,05 MHz, D2O) <5: 12,5 (5-CH3), 35,4 (C-2‘);
40,9 (C-3'); 62,8, 62,9 (C-5* és C-6'); 84,5 86,1 (C-l* és C-4'); 111.7 (C-5); 138,3 (C-6); 152,7 (C-
2); 167,5 (C-4):
A 11-16. példákban a szililezésre az alábbi általános eljárást alkalmaztuk:
mmól bázis és kis kristálynyi ammónium-szulfát 2 ml hexametil-diszilazán és 0,2 ml trimetil-klór-szilán elegyével készült szuszpenzióját tiszta oldat képződéséig visszafolyató hűtő alatt forraljuk, utána az illékony anyagokat lepároljuk, a maradékhoz xilolt adunk, és ismételten bepároljuk.
11. példa
1-[2’ ,3*-Didezoxi-3'-C-(fluor-metil)-a- és β-D-eritro-pentofuranozi1]-timin előállítása
150 mg (1,19 mmól) timint a fentebb megadott általános eljárással szililezünk, és a kapott terméket nitrogéngáz alatt 5 ml DKM-ban oldjuk. Ehhez az oldathoz előbb 200 mg (0,75 mmól) metil-[5-0-benzoil-3-C-(fluor-metil)-2,3-didezoxi-D-eritro-pentofuranozid]-ot, majd utána 0,3 ml (1,31 mmól) (terc-butil-dimetil-szilil)-triflátót adunk. Az • · «·
így kapott oldatot szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük, majd vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldat hozzáadásával elbontjuk, további 30 percen át keverjük, utána DKM-nal hígítjuk. A szerves fázist vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. így a védőcsoportot tartalmazó nukleozidok anomer keverékét kapjuk. E keverékhez 20 ml telített metanolos ammóniaoldatot adunk, 24 órán át a reakcióelegyet szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd szárazra pároljuk. A maradékot vízben oldjuk, DKM-nal mossuk. A vizes fázist kis térfogatra töményítjük, és a maradékot oszlopkromatográf iával választjuk el. Eluálószerként etil-acetát és metanol 20:1 arányú elegyét alkalmazva elsőként a B-anomert, majd az α-anomert eluáljuk. A megfelelő frakciók egyesítése és bepárlása után a cím szerinti a-anomert 70 mg (36%), míg a B-anomert 54 mg (28%) hozammal kapjuk.
Az α-anomer jellemzői: [a]22 -13,1° (c = 0,82, víz).
D
UV (H20) ^niax: 268 nm (€9268);
XH-NMR (270 MHz, D20) δ: 2,92 (5-CH3), 2,06 (Η-2'a),
2,60-2,82 (m, Η-2'b és H-3'), 3,68 (dd, Η-5'a), 3,85 (dd, H-5’b), 4,38 (m, H-4), 4,46-4,75 (2 m, Η-6'a-b), 6,15 (t, H-l'), 7,60 (d, H-6).
| Elemzés: a CnHi504N2F | összegképlet alapján: | ||
| számított: C 51,16; | H | 5,85; | N 10,85; |
| talált: C 50,91; | H | 5,78; | N 10,85. |
| A B-anomer jellemzői: [a] | 22 D | +16,3° | (C = 0,6, VÍZ) . |
• · • 9
-33UV (H20) <max: 268 nm (£8880);
fH-NMR (270 MHz, D2O) 6: 1,91 (d, 5-CH3), 2,3 (m,
H-2’), 2,73 (m, H-3’), 3,78 (dd, Η-5'a), 3,94 (dd, J4',5'b=2'9 Hz' Η-5'b), 4,1 (m, H-4) , 4,44-4,73 (2m, H-6'a,b), 6,15 (dd, H-l'), 7,77 (d, J=l,l Hz, H-6) .
Elemzés: a C11H15O4N2F összegképlet alapján:
számított: C 51,16; H 5,85; N 10,85;
talált: C 51,10; H 5,76; N 10,95.
12. példa
1- [ 2 ’, 3 ' -Didezoxi-3 ’ -C- (fluor-metil) -a- és -B-D-eritro-pentofuranozil]-citozin előállítása
200 mg (1,8 mmöl) citozint a fentebb leírt általános eljárással szililezünk, majd a szintézist az előző példában leírt eljárással folytatjuk. így 38 mg (38%) α-anomert és 26 mg (26%) B-anomert kapunk.
Az α-anomer jellemzői: [a]22 -53,7° (c = 0,94, víz).
D
UV (H20) Zmax: 272 nrn (£7762);
fH-NMR (270 MHZ, D20) δ: 1,98 (m, Η-2'a), 2,58-2,80 (m, Η-2'b és H-3'), 3,68 (Η-5'a), 3,85 (dd, Η-5'b),
4,37 (m, H-4), 4,39-4,72 (2 m, H-6'a,b), 6,04 (d, H-5), 6,12 (t, H-l'), 7,70 (d, H-6).
Elemzés: a C10Hi4O3N3F összegképlet alapján:
számított: C 49,38 H 5,80 talált: C; H.
A β-anomer jellemzői: [a]22 +44,8° (c = 0,6, víz).
D · ·
-34UV (H20) Λ maxi 272 nm (€8515);
1-H-NMR (270 MHz, D2O) S: 2,23 (m, Η-2'a), 2,39 (m, J2'b,3'=8/5 Hz, Η-2'b), 2,65 (m, H-3'), 3,77 (dd, Η-5'a), 3,93 (dd, Η-5'b), 4,11 (m, H-4), 4,43-4,73 (két m, H-6'a,b), 6,03 (d, H-5), 6,10 (dd, H-l · ) ,
7,93 (d, H-6).
Elemzés: a C10H14O3N3F összegképlet alapján:
számított: C 49,38 H 5,80 talált: C,
H.
13. példa
9—[2* ,3’-Didezoxi-3’-C-(fluor-metil)-a- és -β-D-eritro-pentofuranozil]-adenin előállítása
120 mg (0,78 mmól) 6-klór-purint a fentebb leírt általános eljárással szililezünk, majd a szintézist a fentebb leírt módon folytatjuk. így 25 mg (26%) cím szerinti a-anomert és 37 mg (39%) cím szerinti β-anomert kapunk.
Az α-anomer jellemzői: [a]22 -35,2° (c = 0,71, víz).
D
UV (H2°) í max: 260 nm (¢10239) ;
ÍH-NMR (270 MHz, D20) δ: 2,5 (m, H-2’a), 2,70-2,95 (m,
Η-2'b és H-3'), 3,73 (dd, Η-5'a), 3,88 (dd, Η-5'b),
4,40 (m, H-4), 4,52-4,78 (2 m, J3 1,61b = 10,0 Hz, Η-6'a-b), 6,34 (t, H-l'), 8,15 (s, H-2), 8,29 (s,
H-8) ,
Elemzés:
a C11H14O2N5F összegképlet alapján:
számított: C 49,43
H 5,28 talált:
C;
H.
• · ····· · ·· • · · « · · · • · ········ · ·♦······ · · ···«
-35Α β-anomer jellemzői: [a]22 -24,3° (c = 0,9, víz).
| uv | (H2O) | ^max: 260 nm | (C10364); | |||
| 1H- | -NMR ( | 270 | MHz, D2O) 5: | 2,47-2,48 (2 m, | H-2 | •a,b), |
| 2,85 | (m, | H-3'), 3,69 | (dd, Η-5'a), 3,87 | (dd, | Η-5'b) | |
| 4,21 | (m, | H-4), 4,51-4 | ,78 (2 m, H-6'a,b) | , 6, | 24 (dd, | |
| H-l' ) | , 8, | ,04 (s, H-2), | 8,25 (s, H-8). |
Elemzés:
a CHH14O2N5F összegképlet alapján:
számított: C 49,43; H 5,28 talált: C;
H.
14. példa l-[2 ' , 3 ’ -Didezoxi-3 ' -C-(azido-metil) -a- és -β-D-eritro-pentofuranozil] -timin előállítására
133 mg (1,06 mmól) timint a fentebb leírt általános eljárással szililezünk, és a kapott terméket 5 ml DKM-ban nitrogénáz alatt oldjuk. Ehhez az oldathoz előbb 154 mg (0,53 mmól) metil-[3-C-(azido-metil)-5-0-benzoil-2',3'-didezoxi-D-eritro-pentofuranozid]-ot, majd utána 0,25 ml (1,09 mmól) (terc-butil-dimetil-szilil)-triflátót adunk. Az így kapott oldatot 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük, ekkor vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldat hozzáadásával elbontjuk, további 30 percig keverjük, majd DKM-nal hígítjuk. A szerves fázist vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. így a védőcsoportot tartalmazó nukleozidok anomer keverékéhez jutunk. E keverékhez 20 ml telített metanolos ammóniaoldatot adunk, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 24 órán át állni hagyjuk. A • · • 4 ····
-36szárazra párlás után kapott maradékot vízben oldjuk, és DKM-nal mossuk. A vizes fázist kis térfogatra töményítjük, majd liofilizáljuk, s így a védőcsoportot már nem tartalmazó nukleozidok anomer keverékét 110 mg (0,39 mmól, 74%) hozammal kapjuk. E keveréket DMF és 53 mg (0,78 mmól) imidazol ele gyében oldjuk, 70 mg (0,46 mmól) (terc-butil-dimetil)-szilil-kloridot adunk hozzá, és a reakcióelegyet 3 órán át szo bahőmérsékleten keverjük. Ezt követően 1 ml vizet teszünk hozzá, az elegyet 10 percig keverjük, utána DKM-nal hígítjuk, 1 mólos sósavoldattal, utána telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk. Az anomereket őszlopkromatográfiával különítjük el. Hexán és etil-acetát 1:1 arányú elegyével előbb az α-anomert, utána a β-anomert eluáljuk.
Az elkülönített anomereket 2 ml THF-ban 70 mg (0,22 mmól) (tetrabutil-ammónium)-fluoriddal 24 órán át reagáltatjuk, utána a reakcióelegyet bepároljuk, a maradékot vízben oldjuk, és DKM-nal mossuk. A vizes fázist kis térfogatig töményítjük, és HPLC-vel tisztítjuk. Eluálószerként víz és metanol 80:20 térf./térf. arányú elegyét alkalmazva a cím szerinti a-anomert 43 mg (29%), a cím szerinti β-anomert 44 mg (30%) hozammal kapjuk.
Az α-anomer jellemzői: [a]22 +3,1° (c = 1,45, víz).
D
UV (H20) /max: 26θ ™ (€9155) ;
ÍH-NMR (270 MHz, D20) 6: 1,92 (s, 5-CH3), 2,02 (m,
Η-2'a), 2,50-2,74 (2m, Η-2'b és H-3'), 3,54 és 3,58 (2 dd, H-6'a,b), 3,67 (dd, Η-5'a), 3,85 (dd, Η-5'b), • ·
4,25 (m, J4i/5ia=5,l
Hz, H-4), 6,12 (dd, H-l), 7,60
-37Elemzés: a C^H]_5O4N2F összegképlet alapján:
H 5,85 számított: C 51,16
| talált: | C; | H. | |
| A B-anomer | jellemzői: | [a] | 22 12,5° (c = 0,96, víz) . D |
| UV (H20) , | Zmax: 268 | nm | (€9434) ; |
| !h-NMR (270 | MHz, D2O) | δ: | 1,91 (s, 5-CH3) 2,34 (dd, |
3,47-3,61 (2 dd, H-6'a,b),
H-21), 2,59 (m, H-3'),
3,78 (dd, Η-5'a), 3,94 (dd, Η-5'b), 3,98 (m, H-4),
6,1 (t, H-l), 7,76 (s,
1H, H-6).
Elemzés: a C11H15O4N5 összegképlet alapján:
számított:
C 46,97
H 5,38 talált:
C;
H.
15. példa
1-[2',3 *-Didezoxi-3'-C-(azido-metil)-a- és -β-D-eritro-pentofuranozil]-citozin előállítása
250 mg (2,25 mmól) citozint a fentebb leírt eljárással szililezünk, majd a szintézist a fenti leírás szerint foly tatjuk, így a cím szerinti a-anomert 84 mg (43%), míg a cím szerinti B-anomert 45 mg (23%) hozammal kapjuk.
UV (H20) Zmax: 272 nm (εθ320);
^H-NMR (270 MHz, D2O) δ: 1,96 (m, Η-2'a), 2,56 (m,
H-3'), 2,74 (m, Η-2'b), 3,46-3,58 (2 dd, H-6'a,b),
3,68 (dd, Η-5'a), 3,85 (dd, Η-5'b), 4,25 (m,
6,09 (t, H-l), 7,79
-38(d, H-6)
Elemzés:
a c10H14°3N6 összegképlet számított: C 45,10
5,30 talált:
C 44,87
5,13
A β-anomer jellemzői:
[a]16 * * * * * 22
D
55,0° ·· · · « · ·· ··«·· * · · • · · · · · · • · ········ · alapján:
N 31,57
N 31,37.
Η-5) , (c = 0,99, víz).
UV (H2O) /max: 272 nm (ε8209);
i-H-NMR (270 MHZ, D2O)
6:
2,22-2,58 (m, H-2' és H-3'),
3,48-3,61 (2 dd, H-6' ), 3,79 (dd, Η-5'a), 3,94 (dd, (m, H-4' , 6,04 (d, H-5), 6,11 (dd,
H-l'), 7,93 (d, H-6)
Elemzés: a ^θΗ^ΟβΝξ összegképlet alapján:
számított:
C 45,10
H 5,30 talált:
c;
H.
16. példa
9-[2*,3’-Didezoxi-3’-C-(azido-metil)-a- és -B-D-eritro-pentofuranozil] -adenin előállítása
360 mg (2,33 mmól) 6-klór-purint a fentebb leírt általános eljárással szililezünk, majd a szintézist a fenti leírás szerint folytatjuk, s így a cím szerinti a-anomert 38 mg (17%), míg a cím szerinti B-anomert 39 mg (17%) hozammal nyerjük. Elemezés céljára mindkét anomert HPLC módszerrel tisztítjuk. Eluálószerként víz és metanol 70:30 térf./térf. arányú elegyét használjuk.
Az a-anomer jellemzői: [a]22 +58,3° (c = 1,0, víz).
D ·· ·« ···«
UV (H20) / max: 260 nm (^9353) ;
* · · ···« é··· • ·
-39fH-NMR (270 MHz, D20) δ: 2,43 (m, Η-2'a),
2,67 (m,
H-3'),
3,73 (dd,
Η-5'a) ), 6,28 (t,
H-l'),
8,11 (s, H-2), 8,28 (s, H-8).
Elemzés:
a C11H14O2N3 összegképlet alapján:
számított: C 45,51
Gm 4,86
N 38,61 talált:
C 45,31
Gm 4,80
N 38,30.
A β-anomer [a]17 * * * * 22 -27,6°
D (c = 1,05, víz).
UV (H20) /max:
260 nm (e14102);
ÍH-NMR (270 MHz,
D2O) <5:
2,52 (m, Η-2'a), 2,75 (m,
6,2
4,12
H-2) ,
Elemzés:
3,51 (dd, H-6
Hz, Η-6'b), 3,71 (dd, (m, H-4’), 6,36
8,33 (s, H-8).
a C^^Hi4O2Ng számított:
C 45,51 talált:
C 45,28 •a) , 3,64 (dd, J3,6'b =
Η-5'a, 3,88 (dd, Η-5'b), (dd, és 3,0 Hz, H-l’), 8,19 (s, összegképlet alapján:
H 4,86
H 4,97
N 38,61
N 38,36.
17. példa
9-[ (3S, 4S) -3,4-di (Hidroxi-metil) -ciklopentil]-guanozin előállítása
528 mg (2,0 mmól) trifenil-foszfin és 342 mg (2,0 mmól)
2-amino-6-klór-purin 14 ml THF-nal készült fehér szuszpenziójához szobahőmérsékleten, nitrogéngáz alatt 0,33 ml (2,3 mmól) azodikarbonsav-dietil-észtert (röviden: DEAD) adunk, és az így kialakult sárga szuszpenziót 4 órán át to····< 4 ·· • · · * · · · • · ···« ···« · ········ · · ···· vább keverjük, majd 20 mg (0,57 mmól) 3,4-di(benzoil-oxi-metil)-ciklopentanol 5 ml száraz THF-nal készült oldatát adjuk hozzá, és a reakcióelegyet további 30 percig keverjük. Ekkor az oldószert lepároljuk, és az így kapott nyers maradékot szilikagéloszlopon kromatografiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és etil-acetát 1:1 arányú elegyét alkalmazzuk. Az így kapott nyers terméket 2 ml metanolban oldjuk, 2 ml 1 mólos vizes nátronlúgoldatot csepegtetünk hozzá, és a reakcióelegyet keverés közben 80 °C hőmérsékleten 4 órán át melegítjük. Lehűtés után a reakcióelegyet 2 mólos vizes sósavoldattal közömbösítjük, a vizes fázist THF és etil-acetát 1:1 arányú elegyével többször extraháljuk, majd az oldószereket lepároljuk. Az így kapott nyers terméket szilikagéloszlopon kromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként kloroform és metanol 6:1 arányú elegyét alkalmazzuk, a kapott terméket vízből átkristályosítjuk, s így a cím szerinti vegyületet 57 mg (36%) hozammal kapjuk.
18. példa
1—[2 ’, 3 ’ -Didezoxi-2' -C- (hidroxi-metil) -B-D-eritro-pentofuranzoil]-timin előállítása
253 mg (2,01 mmól) timin, 0,300 ml trimetil-klór-szilán, néhány ammónium-szül fát kristály és 4 ml hexametil-disz Hazán keverékét nitrogéngáz alatt visszafolyató hűtővel 6 órán át forraljuk, majd az így kapott tiszta oldatot bepároljuk, és az illékony anyagok teljes eltávolítására 5 ml toluol hozzáadása után ismételten bepároljuk. A maradékot 10 ml • · MM ··«· · ··«····· * « ·«··
-419:1 arányú DKM-acetonitril keverékben oldjuk, és ehhez az oldathoz 630 mg (1,34 mmól) 2-C-(acet-oxi-metil)-1-O-acetil-5-0-(terc-butil-difenil-szilil)-D-eritro-pentofuranóz 5 ml 9:1 arányú DKM-acetonitril eleggyel készült oldatát adjuk.
Az így kapott oldathoz jéghűtés közben 0,370 ml (1,16 mmól) (terc-butil-dimetil-szilil)-triflátót csepegtetünk. A reakcióelegyet jéghűtés közben 30 percig, majd szobahőmérsékleten 15 órán át keverjük. Ekkor 2 ml piridint adunk hozzá, és az elegyet szilikagélrétegen szűrjük. A szűrletet bepároljuk, és a maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. így 1-[2'—C—(acetoxi-metil)-5’-0-(terc-butil-difenil-szilil)2 · , 3'-didezoxi-B-D-eritro-pentofuranozil]-timint kapunk. E termékből 100 mg (0,186 mmól) mennyiséget 9 ml 1 mólos (tetrabutil-ammónium)-fluorid 3 H20 oldatban oldunk, és szobahőmérsékleten 20 percig keverjük. A bepárlás után kapott terméket oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és aceton 1:1 arányú elegyét alkalmazzuk. Az így kapott terméket 4 ml metanolban oldjuk, 2 ml telített metanolos ammóniaoldatot adunk hozzá, másnapig keverjük, majd bepároljuk, és a maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként 9:1 arányú kloroform-metanol elegyet alkalmazva a cím szerinti vegyületet 38 mg hozammal kapjuk.
A termék jellemzői:
| [a]D +9, | 1° (C | = 0,70, | víz) : | ||
| 13C-NMR | (D20, | 40 °C), | 12,3 | (CH3, timin), | 29,2 (C-3') |
| 46,7 | (C-2·) | , 62,4, | 63,8 | (C-5·, C-6·), | 81,0 (C—4') |
| 88,8 | (C-l·) | , 112,2 | (C-5, | 138,6 (C-6), | 152,5 (C-4) |
f
-42167,2);
ÍH-NMR (D20, 40 °C) 1,90 (s, 3H, CH3, timin), 2,09 (m,
2H, H-3 ' , H-3''), 2,64 (m, 1H, H-2'), 3,76 (m, 4H,
H-5', H-5'', H-6', H
J=5,13 Hz, 1H, H-l')
Elemzés: a c11h16°5n2 számított: C 51,56 talált: C 51,28
6''), 4,31 (m, H-4'), 5,93 (d,
7,68 (d, 1H, H-6). összegképlet alapján:
H 6,29 N 10,93
H 6,11 N 10,71.
19. példa
1- [2 ’, 3 * -Didezoxi-2' -C- (hidroxi-metil) -B-D-eritro-pentofuranozil]-citozin előállítása
A cím szerinti vegyületet a 12. példában leírt eljárással állítjuk elő azzal az eltéréssel, hogy timin helyett citozint alkalmazunk. így a cím szerinti vegyületet 41 mg hozammal kapjuk.
A termék jellemzői:
[a ]D + 31,2° (C=l,20, víz):
13C-NMR (D20, 40 °C) 29,2 (C-3'), 47,6 (C-2'), 62,5, 64,0 (C-5', C-6'), 81,2 (C-4'), 89,8 (C-l'), 96,8 (C-5), 142,6 (C-6). 158,3 (C-4), 166,9 (C-2) ;
ÍH-NMR (D20, 40 °C) 2,04 (m, 2H, H-3', H-3''), 2,55 (m,
1H, H-2'), 3,77 (m, 4H, H-5', H-5'', H-6', H-6'·),
4,33 (m, 1H, H-4'), 5,91 (d, J=4,77 Hz, 1H, H-l'), 6,05 (d, J=7,32 Hz, 1H, H-5), 7,85 (d, J=7,32 Hz, 1H, H-6) .
Elemzés: a C3qH35O4N3 · H20: összegképlet alapján:
| számított: | C | 46,33 | H | 6,61 | N | 16,21 |
| talált: | C | 46,41 | H | 6,31 | N | 16,16. |
20. példa
2·,3'-Didezoxi-2'-C-(hidroxi-metil)-adenozin előállítása
E vegyületet a 12. példában leírt eljáráshoz hasonlóan állítjuk elő azzal az eltéréssel, hogy timin helyett adenint alkalmazunk. így a cím szerinti vegyületet 20 mg hozammal kapjuk.
A termék jellemzői:
[a]D -10,3° (c=0,20, víz):
| UV (H2O) Zmax: | 260 | nm; | ||
| 13C-NMR (D2O, 40 | °C) | 29,4 (C-3 ') , | 46,8 | (C-2'), 62,2, |
| (C—5', C—6'), | 81,4 | (C-4·), 88,3 | (C-l1 | 1 ) , 141,2-169,4 |
(5ArC);
XH-NMR (D20, 40 °C) 2,21 (m, 2H, H-3', H-3''), 3,06 (m,
1H, H-2'), 3,76 (m, 4H, H-5' ' , H-6', H-6''), 4,45 (m, 1H, H-4'), 6,07 (d, J=5,32 Hz, 1H, H-l'), 8,15, 8,30 (s, s, 2H, H-2, H-8) .
Elemzés: a C71H15O3N5 összegképlet alapján:
számított: C 49,81 H 5,70 N 26,40 talált: C 50,01 H 5,54 N 26,35.
21. példa
1-[2 ’ -C- (Azido-metil) -2 1,3 ' -didezoxi-B-D-eritro-pentofuranozil]-timin előállítása
440 mg (0,820 mmól) 1-[2'-C-(acetoxi-metil)-5'-O-(tere-44-butil-difenil-szilil)-2',4 '-didezoxi-B-D-eritro-pentofuranozil]-timin 15 ml telített metanolos ammóniaoldattal készült oldatát éjszakán át keverjük, majd bepároljuk, és a maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és aceton 1:1 arányú elegyét alkalmazzuk. A kapott terméket (lepárlási maradék hozama 170 mg, 344 mmól) 5 ml piridinben oldjuk, 0,030 ml (379 mmól) metán-szulfonil-kloridot adunk hozzá, 1 órán át állni hagyjuk, majd bepároljuk, a maradékhoz toluolt adunk, és ismét bepároljuk. Az így kapott maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és aceton 2:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így l-[5'-0-(terc-butil-difenil-szilil) -2'-C-(metánszulfonil-oxi-metil)-21,3'-didezoxi-B-D-eritro-pentofuranozil]-timinhez jutunk. E terméket 2 ml DMF-ban oldjuk, 72 mg (1,11 mmól) nátrium-azidot adunk hozzá, az így kapott szuszpenziót 60 °C-on 3 órán át keverjük, majd bepároljuk, és a maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és aceton 2:1 arányú elegyét alkalmazva 151 mg terméket kapunk, amelynek IR abszorpciós maximuma kloroformban 2100 cm-1-nél van. E terméket szobahőmérsékleten 10 ml 1 mólos THF-os (tetrabutil-ammónium)-fluorod · 3 I^O-ban oldjuk, 10 percig állni hagyjuk, majd bepároljuk, és a maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és aceton 1:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így a cím szerinti vegyületet 72 mg hozammal kapjuk.
E termék jellemzői:
[a]D -31,3° (C=0,76, CHC13) 12,5 (C3, timin), 29,6 • ·
-45(C-3'), 44,5 (C-3), 52,0 (C-6'), 63,8 (C-5'), 79,8 (C-4'), 89,0 (C-l'), 111,0 (C-5). 136,6 (C-6), 150,9 (C-4), 164,4 (C-2);
XH-NMR (CDC13) <£1,89 (s, 3H, CH3, timin), 1,96 (m, 1H,
H-3') , 2,28 (m, 1H, H-3' ') , 2,61 (m, 1H, H-2') , 3,53,
3,82 (m, m, 4H, H-5', H-5'', H-6', H-6''), 4,29 (m,
Ih, H-4') 5,81 (d, J=5,50 Hz, 1H, Hl', 7,56 (s, 1H, H-6), 9,90 (s, 1H, H-3).
Elemzés: a C11H15O4N5 összegképlet alapján:
számított: C 46,97 H 5,38 N 24,90 talált: C 46,83 H 5,21 N 24,71.
22. példa [2’—C—(Azido-metil)-2',3'-didezoxi]-citidin előállítása
260 mg (0,489 mmól) 2'-C-(acetoxi-metil)-5'-0-(terc-butil-difenil-szilil)-2',3'-didezoxi-citidin és 10 ml telített metanolos ammóniaoldat elegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd bepároljuk, és a maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként kloroform és metanol 9:1 arányú elegyét alkalmazva az O-dezacetilezett citidin-analógot 395 mg hozammal kapjuk. E termékből 100 mg (0,208 mmól) mennyiséget 3 ml piridinben oldunk, keverés közben 0,020 ml (0,250 mmól) metánszulfonil-kloridot adunk hozzá, és 1 órán át állni hagyjuk, majd bepároljuk, a maradékhoz toluolt adunk, és ismételten bepároljuk. Az így kapott maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként kloroform és metanol 9:1 arányú elegyét alkamazzuk,
..... • · · · · • · · « · · s igy 110 mg terméket kapunk.
13C-NMR (CDC13) δ: 37,3 (CH3), 69,7 (C-6'); l-H-NMR (CDC13) δ: 3,08 (s, 3H, CH3), 4,50 (d, J=4,21 Hz, 2H, H-6', H-6).
E termék 100 mg (0,179 mmól) mennyiségét 2 ml DMF-ban oldjuk, 41 mg (0,628 mmól) nátrium-azidot adunk hozzá, és az így kapott szuszpenziót 60 °C hőmérsékleten 3,5 órán át keverjük, majd bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és aceton 2:1 arányú keverékét alkalmazva 84 mg terméket kapunk, amelynek IR abszorpciós maximuma (kloroformban) 2100 cm-1-nél van.
Ez utóbbi terméket 4 ml 1 mólos THF-os (tetrabutil-ammónium)-fluorid · 3 H2O-ban szobahőmérsékleten oldjuk, 15 percig állni hagyjuk, majd bepároljuk, és a maradékot előbb oszlopkromatográfiával tisztítjuk, ehhez eluálószerként kloroform és metanol 5:1 arányú elegyét alkalmazzuk. Ezt követően a tisztítást fordított fázisú HPLC módszerrel folytatjuk, eluálószerként metanol és víz 85:15 arányú elegyét használjuk, s így a cím szerinti vegyületet 36 mg hozammal kapjuk. E termék jellemzői:
[a]D +54,4° (C=0,95, víz): IR(CHC12) 2100 cnT1, (azid):
13C-NMR (D20, 40 °C) δ: 29,9 (C-3'f), 44,9 (C-2'), 52,6 (C-6', 64,0 (C-5'), 80,8 (C-4'), 90,0 (C-l'), 97,1 C-5), 142,6 (C-6), 158,3 (C-4), 166,9 (C-2) ;
Ιη-NMR (D2o, 40 °C) δ: 2,03 (m, 2H, H-3', H-3''), 2,61 (m, 1H, H-2'), 3,56 (m, 2H, H-6', H-6''), 3,75 (m, 2H, H-5', H-5), 4,33 (m, 1H, H-4'), 5,92 (d, J=
-k7=5,50 Hz, 1H, H-l'), 6,05 (d, J=7,32 Hz, 1H, H-5),
7,82 (d, J=7,32 Hz, 1H, H-6).
Elemzés: a C1QH14O3N6 összegképlet alapján:
számított: C 45,11 H 5,30 N 31,56 talált: C 45,02 H 5,41 N 31,28.
23. példa l-{5’-0-Benzoil-3 *-C-[(benzoil-oxi)-metil]-2·,3 -didezoxi-4'-tio-α- és -B-D-eritro-pentofuranozil}-timin előállítása
150 mg (1,19 mmól) timin és kis kristálynyi ammónium-szulfát 2 ml hexametil-diszilazánnal és 0,2 ml trimetil-klórszilánnal készült oldatát tiszta oldat kialakulásáig visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Ezután az illékony anyagokat lepároljuk, a matadékhoz toluolt adunk, ismét lepároljuk, és ezt a műveletet többször ismételjük. Az így kapott szirupot nitrogéngáz alatt 2 ml DKM-ban oldjuk, 153 mg (0,32 mmól) (16) képletű vegyületet, majd ezt követően 0,075 ml (0,33 mmól) (terc-butil-dimetil-szilil)-triflátót, végül 0,102 g (0,32 mmól) higany(II)-acetátot adunk hozzá, és szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük. Ekkor a reakcióelegyet telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal elbontjuk, elválasztás után a szerves fázist szárítjuk, bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként kloroform és etil-acetát 1:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így 0,127 g (87%) terméket kapunk. Ennek NMR színképe azt mutatta, hogy a timinnel végzett kapcsolási re-48 akció végbement, azonban a színképek túlságosan összetettek, s ezért csak az anomerek elkülönítésével végezhettük el a színképek elemzését.
A kapott terméket metanolos nátrium-metanolát-oldattal szobahőmérsékleten O-debenzoilezzük, s így 1-[31-C-(hidroxi-metil)]-2', 3'-didezoxi-4'-tio-α- és -β-D-eritro-pentofuranozil-timinhez jutunk.
24. példa l-{5 * -O-Benzoil-3 ·-C-[ (benzoil-oxi) -metil]-2 ’, 3 ’ -didezoxi-41 -tio-α- és -B-D-eritro-pentofuranzoil}-citozin előállítása
100 mg (0,901 mmól) citozint ugyanolyan módon szililezünk, mint ahogyan ezt a (18) képletű vegyület előállítására leírtuk, és a kapott terméket nitrogéngáz alatt 3 ml acetonitrilben oldjuk. Az így kapott oldathoz előbb 119 mg (0,287 mmól) (17) képletű vegyületet, majd utána 0,13 ml (0,574 mmól) (terc-butil-dimetil-szilil)-triflátót adunk, és a kapott oldatot 1 órán át 0 °C hőmérsékleten keverjük. Ekkor a reakcióelegyet telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal elbontjuk, 30 percig keverjük, majd DKM-nal hígítjuk. A szerves fázist telített vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk, és a maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként etil-acetát és metanol 4:1 arányú elegyét alkalmazva a (19) képletű, védőcsoportot tartalmazó nukleozidot anomer keverék formájában 49 mg (37%) hozammal kapjuk. E termék NMR szín• ·
-49képe arra utal, hogy a citozinnal végzett kapcsolás megtörtént, azonban a színképek bonyolultságuk következtében nem elemezhetők az anomerek elválasztása nélkül.
A kapott terméket nátrium-metanolát metanolos oldatával szobahőmérsékleten O-debenzoilezzük, s így 1-[3'-C-(hidroxi-metil)-2',3'-didezoxi-4'-tio-α- és -β-D-eritro-pentofuranozil]-citozinhoz jutunk.
A kiinduló anyagok előállítása
Az 1-4. példákban előállított vegyületek kiinduló anyagait az alábbi a) - d) reakciókkal állítottuk elő:
a) (2S,3R)-l-O-(p-Bróm-benzil)-3-C-(2’-propenil)-
-1,2,4-butántriol ml 1 mólos allil-magnézium-bromid és 100 ml száraz dietil-éter elegyet nitrogéngáz alatt -50 °C-ra hűtjük, és 1,36 g (5 mmól) (2S,3R)-3-{[(4-bróm-benzil)-oxi]-metil}-oxirán-2-metanol-l 140 ml száraz dietil-éterrel készült oldatát csepegtetjük hozzá -50 °C hőmérsékleten 30 perc alatt. A reakcióelegyet 30 percig -50 °C hőmérsékleten erélyesen keverjük, majd telített vizes ammónium-klorid-oldattal elbontjuk. A szerves fázist elkülönítjük, és a vizes fázist dietil-éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves fázist előbb 1 mólos sósavoldattal, utána telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, szűrjük, bepároljuk. A kapott terméket oszlopkromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként toluol és etil-acetát 1:5 arányú elegyét alkalmazzuk, s így 1 g (64%) (2) képletű vegyületet, és 0,4 g (25%) (3) • · · « • · · · ····
-50képletű vegyületet kapunk.
A kívánt termék jellemzői:
[a]22 : +1,56 (c=l,03, CHC13);
D 1H-NMR (100 MHz, CDCI3): 1,8 (m 1H, H-3); 2,13 (t, J1',21=J1',3=6,8 Hz, 2H, H-l'); 3,3 és 3,0 (széles, 2H, OH-2); 3,59 (m, 4H, H-l, H-4); 4,0 (m, 1H, H-2); 4,48 (s, 2H, CH2Ph); 4,94 és 5,09 (m, 2H, Η-3'a, Η-3'b); 5,78 (m, 1H, H-2'); 7,14-7,5 (m, 4H, aromás; 13C-NMR (25,05 MHZ, CDCI3); 30,6 (C-l'); 42,3 (C-3);
63,3 (C-4); 71,9, 72,3, 72,5 (CH2Ph, C-l, C-2');
116,4 (C-31); 121,5, 129,1, 131,3 (aromás C); 136,4 (C-2 és aromás C);
b) (2S,3R)-4-O-Benzoil-l-O-(p-bróm-benzil)-3-C-(2·-propenil) -1,2,4-butántriol [(4) képletű vegyület, lásd a 3) reakcióvázlatot] előállítása
8,54 g (27 mmól) (2) képletű vegyület 50 ml száraz piridinnel készült oldatához 0 °C hőmérsékleten 3,21 ml (27,6 mmól) benzoil-kloridot csepegtetünk. A reakcióelegyet 0 °C hőmérsékleten 15 percig tovább keverjük, majd 5 ml vizet teszünk hozzá, és bepároljuk. A maradékot DKM-ban oldjuk, előbb 1 mólos sósavoldattal, majd telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, bepároljuk, és a maradékot gyorskromatográfiával (flash kromatográfiával) tisztítjuk. Eluálószerként toluol és etil-acetát 2:1 arányú elegyét alkalmazva a (4) képletű vegyületet 9/77 g (87%) hozammal nyerjük. E termék jellemzői:
-51[α]22 : +8,5 (c=0,71, CHCI3);
ÍH-NMR (100 MHz, CDC13) 1,95-2,43 (m, 3H, H-3, H-l');
2,59 (d, Jh(OH),2=3'9 Hz, 1H' OH-2); 3,54 (m, sec. order, 2H, H-la, H-lb), 3,95 (m, 1H, Η-2); 4,34 (d, J4/3=5,l Hz, 2H, H-4); 4,48 (s, 2H, CH2Ph); 5,14 és 5,0 (m, 2H, Η-3'a, Η-3'b); 5,78 (m, 1H, H-2'); 8,1-7,14 (m, 9H, aromás);
13C-NMR (25,05 MHz, CDCI3); 31,3 (C-l'; 40,4 (C-3);
70,1 C-2; 64,0 (C-4); 72,3 (CH2Ph); 72,5 (C-l); 116,3 (C-3'); 121,4-134,7 (aromás); 136,4 (C-2'); 166,1 (COPh).
c) Metil-{3-C-[(benzoil-oxi)-metil]-5-O-(p-bróm-benzil)-2,3-didezoxi-D-eritro-pentofuranozid} [(5) képletű vegyület, lásd a 3) reakcióvázlatot] előállítása
7,5 g (17,9 mmól) (4) képletű vegyület, 4,8 g (35,5 mmól) N-metil-morfolin-N-oxid és 70 ml 3:1 arányú THF-víz jéghideg oldatához 18 ml (0,36 mmól) 0,02 mólos terc-butanolos, 1% TBHP-vel stabilizált ozmium-tetroxid-oldatot adunk, néhány perc múlva a jégfürdőt eltávolítjuk, és a reakcióelegyet másnapig nitrogéngáz alatt szobahőmérsékleten keverjük. Ekkor 2 g nátrium-hidrogén-szulfitot adunk hozzá, és az elegyet 15 percig tovább keverjük, utána az oldószert lepároljuk, a maradékot etil-acetáttal hígítjuk, előbb 1 mólos sósavoldattal, majd telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, és szűrés után bepároljuk. Az így kapott nyers terméket 200 ml 3:1 arányú THF-víz elegyben oldjuk, és 7,65 g (35,8 mmól) nátrium-metaperjodátot adunk hozzá. A cisz-diol szobahőmérsékleten 30 perc alatt teljes mértékben hasad. A THF-t lepároljuk, és a vizes maradékot konyhasóval telítjük, majd dietil-éterrel extraháljuk. A szerves oldatot szárítjuk, bepároljuk, és a maradékot 50 ml 0,05%-os metanolos hidrogén-klorid-oldattal 10 percig állni hagyjuk, majd Dowex 2x8 (HCO3) gyantával közömbösítjük, szűrjük, bepároljuk. Az így kapott maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként toluol és etil-acetát 3:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így az (5) képletű vegyületet anomer keverékként színtelen szirup formájában 6,63 g (85%) hozammal kapjuk. E termék jellemzői:
1H-NMR (100 MHz, CDC13): 1,7-2,9 (három m, 3H, H-3,
H-2a, H-2b); 3,31, 3,35 (2s, 3H, OCH3); 3,6 (m, 2H, H-5); 4,1 (m, 1H, H-4); 4,4 (m, 2H, H-6); 4,6 (m, 2H,
| CH2Ph); 5,1 | (m, 1H, H-l); 7,1-8,0 (m, | 9H, | aromás) ; | |
| 13C-NMR (25,05 | MHz, CDC13): 35,6, | 36,4 | (C-2) | ; 38,7, |
| 39,3 (C-3); | 54,3, 54,5 (OCH3); | 65,7, | 66,6, | (C-6); |
71,5, 72,35, 72,37, 73,8 (C-5) (CH2Ph); 79,9, 80,1 (C-4); 104,8 (C-l); 121,0-136,4 (aromás); 165,8 (COPh).
d) Metil-{5-0-benzoil-3-C-[(benzoil-oxi)-metil]-2,3didezoxi-D-eritropentofuranozid} [(6) képletű vegyület, lásd a 3) reakcióvázlatot] előállítása lg (2,3 mmól) (5) képletű vegyület és 3 ml száraz dietil-éter oldatát Dewar-edényben 50 ml cseppfolyós ammóniá • * • · bán oldjuk, és 5 perc alatt 300 mg (13 mmól) nátriumot adunk hozzá részletekben. Ezután az oldatot 30 percig keverjük, majd szilárd ammónium-kloriddal elbontjuk. Az ammóniát nitrogéngázáram segítségével elpárologtatjuk, és a szilárd maradékot etil-acetáttal felvesszük. A szilárd terméket szűrjük, és etil-acetáttal többször mossuk. A szűrletet bepároljuk, a maradékhoz száraz toluolt adunk, és ismét bepároljuk. Az így kapott nyers maradékot 30 ml száraz piridinben oldjuk, hozzáadunk 0,8 ml (6,9 mmól) benzoil-kloridot, és az oldatot szobahőmérsékleten 40 percig keverjük, majd 5 ml vizet adunk hozzá, és szárazra pároljuk. A maradkot DKM-ban oldjuk, előbb 1 mólos vizes sósavoldattal, majd telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, szűrjük, és szárazra pároljuk. A maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként toluol- és etil_acetát 3:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így a cím szerinti vegyületet anomer keverékként 580 mg (68%) hozammal kapjuk. Elemzés céljára e termék kis mintáját szilikagélen kromatografálva tisztítjuk. A β-anomer 1H-NMR színképe és olvadáspontja az előzőleg közölt értékekkel összhangban van.
A 11-16. példákban előállított vegyületek kiinduló anyagait az alábbi a) - e) reakciókkal állítottuk elő:
a) Metil-[5-O-(p-bróm-benzil)-3-C-(hidroxi-metil)-2,3-didezoxi-D-eritro-pentofuranozid] előállítása
1,61 mg (3,70 mmól) metil-[3-C-(benzoil-oxi)-5-0-(a-bróm-benzil)-2,3-didezoxi-D-eritro-pentofuranozid]-ot 30 ml •••V ··*·
-54telített metanolos ammóniaoldattal 24 órán át reagáltatunk, majd az oldószert lepároljuk, és a maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és etil-acetát
1:2 arányú elegyét alkalmazva a cím szerinti vegyületet
1,17 (93%) hozammal nyerjük.
Elemzés: a C^H^BrC^ összegképlet alapján:
számított: C 50,77; H 5,78%.
talált: C 50,67; H 5,73%.
b) Metil-[5-0-(p-bróm-benzoil)-3-C-(fluor-metil)-2,4-didezoxi-D-eritro-pentafuranozid] előállítása Az előző a) reakcióban kapott vegyületből 637 mg (1,92 mmól) mennyiséget nitrogéngáz alatt 15 ml DKM és 0,31 ml (3,85 mmól) piridin elegyével oldunk, az oldatot -15 °C-ra hűtjük, és 0,38 ml (2,26 mmól) trifluor-metánszulfonsavanhidrid 5 ml DKM-nal készült oldatát csepegtetjük hozzá. A reakcióelegyet 10 percig -15 °C hőmérsékleten keverjük, majd 100 ml DKM-nal hígítjuk, s előbb 1 mólos sósavoldattal, majd telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, és legfeljebb 20 °C hőmérsékletű fürdőn bepároljuk. A maradékot 15 percig 6 ml 1 mólos vízmentes THF-os (tetrabutil-ammónium)-fluorid-oldattal reagálhatjuk, utána a reakcióelegyet bepároljuk, és a maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és etil-acetát 9:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így 466 mg (73%) cím szerinti vegyülethez jutunk.
Elemzés: a Ci4H3gBrFO3 összegképlet alapján:
• · számított
C 50,46
H 5,45% ·· ·· · • · · · ·
-55talált
C 50,28
c) Metil-[5-0-(benzoil)-3-C-(fluor-metil)-2,3-didezoxi-
D-eritro-pentofuranozid] előállítása
572 mg (1,72 mmól) előző b) reakcióban kapott vegyület, ml etanol, fölös mennyiségű nátrium-hidrogén-karbonát és mg 10%-os csontszenes palládiumkatalizátor keverékét szobahőmérsékleten 5 órán át hidrogénezzük. Ezt követően a szilárd komponenseket kiszűrjük, és a szűrletet bepároljuk. A nyers maradékot 3 ml DKM és 0,3 ml (3,7 mmól) piridin elegyében oldjuk, 0,24 ml (2,07 mmól) benzoil-kloridot adunk hozzá, és a reakcióelegyet 15 percig keverjük. Ezután 2 ml vizet adunk hozzá, az elegyet 10 percig keverjük, majd DKM-nal hígítjuk, előbb 1 mólos sósavoldattal, majd telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként toluol és etil-acetát 4:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így a cím szerinti vegyületet 372 mg (81%) hozammal kapjuk.
Elemzés: a C14H17FO4 összegképlet alapján:
számított: C 62,68
H 6,39% talált
C 62,55
H 6,33%
d) Metil-[3-C-(azido-metil)-5-O-(p-bróm-benzil)-2,3-didezoxi-D-eritro-pentofuranozid] előállítása
1,95 g (5,89 mmól) metil-[5-0-(p-bróm-benzil)-3-C• ·
-56-(hidroxi-metil)-2',3'-didezoxi-D-eritro-pentofuranozid],
1,6 g (6,1 mmól) trifenil-foszfin, 1,5 g (30,6 mmól) lítium-azid és 25 ml száraz DMF keverékéhez szobahőmérsékleten 1,95 g (5,89 mmól) szén-tetrabromidot adunk, majd a reakcióelegyet 24 órán át erélyesen keverjük. Ezután 3 ml metanolt adunk hozzá, és az oldószert lepároljuk. A visszamaradó keveréket DKM-nal hígítjuk, vízzel mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként toluol és etil-acetát 4:1 arányú elegyét használjuk, s így 1,99 g (95%) cím szerinti vegyülethez jutunk.
IR rmax: 2100 cm-1
Elemzés: a összegképlet alapján:
számított: C 47,20; H 5,09; N 11,80%;
talált: C 47,15; H 4,98; N 11,9%.
e) Metil-[3-C-(azido-metil)-5-O-benzoil-2,3-didezoxi-Deritro-pentofuranozid] előállítása
4,7 ml (58,3 mmól) száraz piridin és 20 ml DKM elegyéhez keverés közben 2,8 g (28,0 mmól) króm(III)-trioxidot adagolunk, majd a reakcióelegyet 15 percig szobahőmérsékleten tovább keverjük. Ehhez az oldathoz 1,68 g (4,72 mmól) előző reakcióban kapott vegyület 20 ml DKM-nal készült oldatát, és ezt követően 3,2 ml (32,0 mmól) ecetsavanhidridet adunk, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 10 percig keverjük. Ekkor a keveréket rövid szilikagéloszlopon vezetjük át, etil-acetáttal eluáljuk, és az így kapott nyers terméket 24 órán át 30 ml telített metanolos ammóniaoldattal reagál9 · • · 4 »
-57tatjuk. Utána az oldószert lepároljuk, és a maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és etil-acetát 1:1 arányú elegyét alkalmazzuk. Az így kapott terméket 15 ml DKM és 1 ml (12,4 mmól) piridin elegyében oldjuk, és 0,55 ml (4,73 mmól) benzoil-kloridot adunk hozzá. A reakcióelegyet 15 percig keverjük, utána 2 ml vizet adunk hozzá, ismét 10 percig keverjük, majd DKM-nal hígítjuk, előbb 1 mólos sósavoldattal, majd telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, szárítjuk, és bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként toluol és etil-acetát 9:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így a cím szerinti vegyületet 1,0 g (57%) hozammal kapjuk.
Elemzés: a C14H17N3O4 összegképlet alapján:
számított: C 57,72; H 5,88; N 14,43%;
talált: C 57,86; H 5,74; N 14,43%.
A 17. példa szerint előállított vegyületek kiinduló anyagát az alábbi a) - b) reakciókkal állítottuk elő:
a) (3S, 4S) -3,4-di (Benzoil-oxi-metil) -ciklopentanon [(8) képletű vegyület, lásd a 4) reakcióvázlatot] előállítása
0,93 g (4,6 mmól) (-)-(3S,4S)-3,4-di(metoxi-karbonil)ciklopentanon [(7) képletű vegyület, lásd a 4) reakcióvázlatot], 6,5 ml (0,12 mól) etilénglikol, 25 mg p-toluolszulfonsav-monohidrát és 50 ml toluol elegyét Dean-Stark vízleválasztó feltéttel visszafolyató hűtő alatt 6 órán át forraljuk. Lehűlés után 20 mg nátrium-hidrogén-karbonátot adunk hozzá, az elegyet 5 percig keverjük, majd telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így maradékként nyers ketál-diészter-származékot kapunk, amely az ÍH-NMR színkép alaján el nem reagált ketont nem tartalmaz. E nyers ketál-diészter-terméket 15 ml száraz dietil-éterben oldjuk, és 1 óra alatt 0,35 g (9,2 mmól) lítium-[tetrahidrido-aluminát] 35 ml száraz, dietil-éteres, jéghideg oldatához csepegtetjük, majd szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük, és ennek eltelte után a hidrid feleslegét 0,5 ml víz, 0,5 ml 3 mólos nátronlúg és 1,5 ml víz óvatos adagolásával elbontjuk. A keveréket 1 órán át keverésben tartjuk, majd 20 g magnézium-szulfátot adunk hozzá, és további 5 percen át keverjük. A csapadékot és a magnézium-szulfátot szűréssel eltávolítjuk, etil-acetáttal többször mossuk, majd bepároljuk. így a szűrlet bepárlási maradékaként a diolvegyületet olaj szerű nyers termékként kapjuk. E dióit 13,5 ml piridinben oldjuk, 2,3 ml (20,1 mmól) benzoil-kloridot csepegtetünk hozzá keverés közben, és utána a keverést szobahőmérsékleten további 3 órán át folytatjuk. Ekkor 5 ml vizet adunk hozzá, 10 percig keverjük, majd telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és DKM-nal hígítjuk. A szerves fázist elkülönítjük, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. Rövid szilikagéloszlopon végzett kromatográfia után (amelyhez eluálószerként toluol és etil-acetát 3:1 arányú elegyét alkalmazzuk) szirupszerű maradékhoz jutunk, amely a dibenzoi···» • · e * t 3 . * · · · · » .·....:.. '·;· ···
-59lezett ketálvegyület mellett a dibenzoilezett keton nyomait tartalmazza. E szirupszerű terméket 92 ml metanol és 31 ml 2 mólos vizes sósavoldat elegyében oldjuk, szobahőmérsékleten 2 órán át, majd 50 °C hőmérsékleten további 2 órán át keverjük, utána 5,2 g nátrium-hidrogén-karbonáttal közömbösítjük, vízzel hígítjuk, és DKM-nal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk, és a maradékot dietil-éter és hexán elegyéből átkristályosítjuk. így tűs kristályok formájában 0,90 g (55%) cím szerinti vegyületet kapunk, op.: 85-86 °C. E termék jellemzői: [α]β -59,1° (C=l,04, kloroform);
ÍH-NMR (100 MHz, CDC13) δ: 2,12-2,73 (m, 6H, 2 CH,
CH2), 4,50 (d, 4H, 2 CH2~OBz), 7,36-7,64 és 7,94-8,07 (m, 10H, aromás H);
13C-NMR (25,05 MHz, CDC13) δ: 38,3 (2 CH2), 41,6 (2 CH)
65.9 (2 CH2-OBz), 128,2, 128,2 és 133,0 (aromás C),
165.9 és 214,9 (C=0).
Elemzés: a C21H20°5 (352,4) összegképlet alapján:
számított: C 71,58; H 5,72.
talált: C 71,34; H 5,73.
b) (3S,4S)-3,4-di(Benzoil-oxi-metil)-ciklopentanol [(9) képletű vegyület, lásd a 4) reakcióvázlatot] előállítása
193 mg (0,55 mmól) előző a) reakcióban kapott (8) képletű vegyület 10 ml metanollal készült oldatához részletekben 41 mg (1,10 mmól) nátrium-[tetrahidrido-borát]-ot adagolunk, • »
-60utána a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 30 percig keverjük, majd vízzel és dietil-éterrel hígítjuk. A szerves fázist telített vizes konyhasóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és utána bepároljuk. A szirupszerű maradékot szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként toluol és etil-acetát 1:1 arányú elegyét alkalmazva 189 mg (97%) cím szerinti vegyületet kapunk.
E termék jellemzői:
[a]D -16,4° (C=l,09, kloroform);
!h-NMR (100 MHz, CDC13) 6: 1,6-2,7 (m, 7H, 2 CH, 2 CH2,
OH), 4,41 (t, 4H, 2 CH2-OBz), 7,34-7,56 és 7,97-8,09 (m, 10H, aromás H);
13C-NMR (25,05 MHz, CDCI3) δ: 38,3, 39,3, 39,8, 40,0 (2 CH2 2 CH), 67,4, 68,2 (2 CH2-0Bz), 72,5 (CHOH), 128,1, 129,3, 129,8, 132,8 (aromás C), 166,3 (C=O).
Elemzés: a C2iH22O5 (354,4) összegképlet alapján:
számított: C 71,17; H 6,26 talált: C 71,05; H 6,18.
A 18-22. példák szerint előállított vegyületek kiinduló anyagait az alábbi a) - c) reakciósorral állítottuk elő.
a) (S)-4-(terc-Butil-difenil-szilil-oxi)-metil- (R, S) —2— (hidroxi-metil) -butirólakton [ (11) képletű vegyület] előállítása ml száraz dietil-éterben elhelyezett 280 mg (12,17 mmól) nátriumhoz 28 pl (0,48 mmól) etanolt adunk, és • *
-61a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük, majd 6 ml dietil-éterben oldott 3,50 g (9,87 mmól) (S)-4-(terc-butil-difenil-szilil-oxi)-metil-J/-butirolaktont és 980 mg (13,23 mmól) etil-formiátot adagolunk hozzá, és a keverést szobahőmérsékleten további 16 órán át folytatjuk. Ezt követően 20 ml dietil-étert és 10 ml 1 mólos nátrium-dihidrogén-foszfát-oldatot adunk hozzá, és a fázisokat elkülönítjük. A szerves fázist vízzel mossuk, szárítjuk, bepároljuk. A maradékot 10 ml etanolban oldjuk, és 10 ml etanolban oldott 500 mg (13,22 mmól) nátrium-[tetrahidrido-borát]-ot adunk hozzá. A reakcióelegyet 5 percig keverjük, majd néhány csepp 80%-os ecetsavval a reakciót leállítjuk, és a reakcióelegyet etil-acetát és víz között megoszlatjuk. A szerves fázist szárítjuk, bepároljuk, és a maradékot őszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és aceton 9:1 arányú elegyét használjuk, s így 3,40 g (90%) (11) képletű vegyületet kapunk.
Elemzés: a c22R28U4Si összegképlet alapján:
számított: C 68,71; H 7,34% talált: C 68,58; H 7,36%.
b) (S) —2— (Acetoxi-metil) - (S) -4- (terc-butil-difenilszilil-oxi)-metil-JÁ-butiralakton [(12) képletű vegyület előállítása
2,00 g (5,20 mmól) (11) képletű vegyület, 20 ml piridin és 10 ml ecetsavanhidrid elegyét keverés közben 30 percig 60 °C hőmérsékleten melegítjük, utána az oldatot bepároljuk, és a maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és aceton 10:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így a kívánt (12) képletű vegyületet 1,44 g (64%) hozammal kapjuk, e termék jellemzői:
[a]D +22,4 0 (C=l,00, CHC13):
13C-NMR (CDCI3) δ: 29,3 (C, tere.), 20,8 (CH3, acetát),
26,9 (3 · CH3), 27,3 (C-3), 39,8 (C-2), 63,1, 65,7 (CH20AC, C-5), 78,1 (C-4), 127,9, 128,3-135,7 (ArC),
170,7 (acetát), 176,4 (karbonil);
l-H-NMR (CDC13) δ: 1,05 (s, 9H, 3 · CH3) , 2,07 (s, 3H, CH3, acetát), 2,39 (m, 2H, H-3, H-3'), 3,13 (m, 1H, H-2), 3,79, 4,35 (m, m, 4H, H-5, H-5', H-6, H-6·), 4,58 (m, 1H, H-4), 7,17-7,72 (m, 10H, ArH).
Elemzés: a C24H3qO5Sí összegképlet alapján:
számított: C 67,57; H 7,09.
talált: C 67,48; H 7,15.
c) 2-C- (Acetoxi-metil) -l-O-acetil-5-O-(terc-butildifenil-szilil)-D-eritro-pentofuranóz [(13) képletű vegyület] előállítása
500 mg (1,17 mmól) (12) képletű lakton 30 ml toluollal készült oldatához -78 °C hőmérsékleten 3,00 ml (2,95 mmól) 20%-os hexános diizobutil-alumínium-hidrid-oldatot adunk. Az oldatot másfél órán át keverjük, majd szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, és 0,5 ml metanolt adunk hozzá. Ezután az oldathoz 30 ml etil-acetátot és 4 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot adunk, 2 órán át keverjük, • · ·
-63majd 2,0 g száraz magnézium-szulfátot adunk hozzá, ismét órán át keverjük, utána szűrjük. A szűrletet bepároljuk, a maradékot 6 ml piridinben 3 ml ecetsavanhidriddel 30 percig °C hőmérsékleten melegítjük, majd bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként toluol és aceton 10:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így a cím szerinti vegyületet anomer keverék alakjában 500 mg (91%) hozammal nyerjük. E termék jellemzői:
13C-NMR (CDCI3, kiválasztott szignálok) 6: 19,4 (C, tere.). 20,9, 21,3, 21,4 (CH3, acetátok), 26,9 (3 · CH3), 28,4 (03), 42,3, 44,8 (C-2), 62,8, 63,7, 65,8, 66,8 (05 és C-6), 80,0, 81,4 (C-4), 97,6,
100,2 (C-l), 127,8-135,7 (ArC), 170,2, 170,9 (acetátok) .
Elemzés: a C26H340gSi összegképlet alapján:
számított: C 66,35; H 7,29.
talált: C 66,51; H 7,28.
A 23-24. példák szerint előállított vegyületek kiinduló anyagait az alábbi a) - c) reakciósorral állítottuk elő.
a) 5-0-Benzoil-3-C-[(benzoil-oxi)-metil]-2,3-didezoxiL—treo-pentóz—(dibenzil-ditioacetál) [(15) képletű vegyület] előállítása
0,191 g (0,516 mmól) (14) képletű vegyület 3 ml, katalitikus mennyiségű ón(IV)-kloridot tartalmazó DKM-nal készült oldatához 0,24 ml (2,07 mmól) benzil-merkaptánt adunk, és az elegyet szobahőmrésékleten 24 órán át állni hagyjuk, majd • »
-64DKM-nal hígítjuk, telített vizes nátrium-hidrogén-szulfát-oldattal mossuk, szárítjuk, szűrjük, bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként toluol és etil-acetát 9:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így 0,266 g (88%) hozammal, színtelen szirup alakjában kapjuk a (15) képletű vegyületet. E termék jellemzői:
[a]22 -8,1° (C=l,0, CHC13).
13C-NMR (25,05 MHz, CDCI3) 6: 34,0, 34,6, 34,9 (C-2,
CH2Ph), 38,9 (C-3), 47,9 (C-l), 63,2 (C-4), 67,6 (C5, 69,8 (C-6), 127,1-138,0 (aromás), 166,7 (COPh).
b) Benzil-{5-0-benzoil-3-C-[ (benzoil-oxi)-metil]-2,3-didezoxi-l,4-ditio-a- és -B-D-eritro-pentofuranozid [(16) képletű vegyület] előállítása
0,347 g (0,592 mmól) (15) képletű vegyületet 9 ml 2:1 arányú toluol-acetonitril elegyben oldunk, előbb 0,93 g (3,55 mmól) trifenil-foszfint, majd 0,79 g (1,78 mmól) trijód-imidazolt adunk hozzá, s utána a reakcióelegyet másnapig 100 °C hőmérsékleten melegítjük. Ezután a reakcióelegyet toluollal hígítjuk, telített vizes nátrium-hidrogén-szulfát-oldattal mossuk, szárítjuk, szűrjük, bepároljuk, és a maradékot oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluálószerként toluol és etil-acetát 50:1 arányú elegyét alkalmazva színtelen szirup alakjában 0,219 g (77%) (16) képletű vegyületet kapunk. E termék jellemzői:
[a]22 -4,2° (C=l,0, CHCI3);
• ·
-65ÍH-NMR (100 MHz, CDC13) δ: 2,0-2,3 (m, 2H, H-2), 2,8 (m, 1H, H-3), 3,8 (m, 3H, CH2Ph, H-4), 4,5 (m, 5H, H-l, H-5, H-6), 7,1-8,1 (m, 15H, aromás).
c) Acetil-{5-0-benzoil-3-C-[ (benzoil-oxi) -metil]-2,3didezoxi-4-tio-a- és -B-D-eritro-pentofuranozid [(17) képletű vegyület] előállítása
0,182 g (0,381 mmól) (16) képletű vegyületet 5 ml jégecetben 0,243 g (0,761 mmól) higany(II)-acetáttal szobahőmérsékleten 30 percig keverünk, utána az oldószert lepároljuk, és a lepárlást száraz toluol hozzáadása után megismételjük. A maradékot DKM-nal hígítjuk, Celiten szűrjük, és bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk, eluálószerként toluol és etil-acetát 9:1 arányú elegyét alkalmazzuk, s így színtelen szirup alakjában 0,156 g (99%) (17) képletű vegyületet kapunk. E termék jellemzői:
| ÍH-NMR | (100 MHz, CDC13) δ: 2, | ,03, | 2,07 (2s, | 3H, | COOCH3), |
| 2,3 | (2H, H-2), 3,0 (m, 1H, | H-3) | , 3,8 (m, | 1H, | H-4) , |
| 4,4 | (m, 4H, H-5, H-6), 6,2 | (m, | 1H, H-l), | 7,0- | -7,9 (m, |
| 10H, | aromás). |
Hatástani (biológiai) vizsgálatok
I. Vizsgálati módszer: az (I) általános képletű vegyületek hatása HIV-ra H9 sejtekben
A H9 sejtek fertőzése HIV-val
Egy 24-üreges lemezen üregenként 105 sejtet 2 ml RPMI közeggel alkotott szuszpenzióban helyeztünk el; az RPMI 10% ·♦ ·· « · «· • * · · · · · • · · · · · · • · ···· ···· · ······· · « ····
-66borjúmagzatszérumot, 100 mg/ml penicillint, 10 mg/ml streptomicin-szulfátot és 2 mg/ml polybrent tartalmazott. A sejteket HÍV (HTLV-IIIB) vírusokkal fertőztük, és a vizsgálandó vegyületek különböző koncentrációival kezeltük. A lemezeket
6-7 napon át 5% szén-dioxidot tartalmazó atmoszférában 37 °C hőmérsékleten inkubáltuk, majd minden egyes üreg tartalmát pipettával homogenizáltuk, és centrifugacsőbe vittük át. A csöveket 10 percig 1500 percenkénti fordulatszámmal (rpm) centrifugáltuk, a felülúszót eltávolítottuk, és a sejtpelleteket elemzés céljából üveglemezeken metanolban fixáltuk.
1:80 vagy 1:160 arányban hígított, emberi HIV-pozitív szérumot adtunk hozzá, és a lemezeket 30 percig 37 °C hőmérsékleten inkubáltuk, majd Ca2+ és Mg2+ ionokat tartalmazó, foszfáttal puff erőit konyhasóoldattal (PBS-oldattal) mostuk. Ezt követően antihumán, birkából származó konjugátumot (röviden: FITC) adtunk hozzá, a lemezeket ismét inkubáltuk, és ismételten PBS-sel mostuk. A kontrasztoló festést Evans-kék színezékkel végeztük, és szárítás után mikroszkóp alatt meghatároztuk a HIV-antigént tartalmazó sejtek előfordulási arányát. E vizsgálatunk eredményeit az 1. táblázatban összegez tük.
• · • ·
1. táblázat
A humán immunhiányt előidéző vírus sejttenyészetben végbemenő szaporodásának gátlásában mutatott IC50 érték (az
50%-os gátlásnak megfelelő koncentráció μΜ-ban
| A vegyület | IC50 (MM) |
| 1-[2',3·-Didezoxi-3'-C-(hidroxi-metil)-β- -D-eritro-pentofuranozil]-citozin | 0,01 |
| l-[21,3'-Didezoxi-3'-C-(hidroxi-metil)-a~ -D-eritro-pentofuranozil]-citozin | 5 |
| 1-[2',3'-Didezoxi-3’-C-(hidroxi-metil)-β- -D-eritro-pentofuranozil]-timin | 5 |
| l-[2',3'-Didezoxi-31-C-(hidroxi-metil)-a- -D-eritro-pentofuranozil]-timin | 10 |
| l-[2’,3’-Didezoxi-3'-C-(hidroxi-metil)-a- -D-eritro-pentofuranozil]-adenin | 10 |
Az 1. táblázatból kitűnik, hogy a vizsgált vegyületek hatásosan gátolják a HÍV vírus szaporodását.
• ·
-68II. Vizsgálati módszer: a sejttoxicitás vizsgálata
Lemezenként 2 x ΙΟ7 H9 sejtet inkubáltunk 10% borjúmagzatszérumot, 70 mg/1 penicillint, 100 mg/1 streptomicint és 10 mM hepes-t tartalmazó RPMI-1640 közegben a vizsgálandó vegyűletek jelenlétében vagy e vegyűletek nélkül. 48 óra eltelte után meghatároztuk a sejtek számát lemezenként. A vizsgálandó vegyűletek nélkül inkubált sejteket ezt követően két sejtoszlási ciklusnak vetettük alá.
Lemezenként 1 x 105 F5000 humán embriósejtet Eagle-féle minimáltáptalajon - amelyet Earle-sókkal, nem esszenciális aminosavakkal, 10% borjúmagzatszérummal, 10 mM hepes-sel, 70 mg/1 penicillennel és 100 mg/1 streptomicinnel egészítettünk ki - a vizsgálandó vegyűletek jelenlétében vagy azok nélkül inkubáltunk. 48 óra eltelte után meghatároztuk a sejtek számát lemezenként. Ezt követően a vizsgálandó vegyületek nélkül inkubált sejteket egy sejtoszlási ciklusnak vetettük alá. Az eredményeket a sejtszaporodásra kifejtett gátlás százalékos értékében megadva a 2. táblázatban összegeztük.
2. táblázat
A H9 sejtekre kifejtett sejttoxicitás
Avegyület A gátlás %-os értéke l-[2',3’-Didezoxi-3'-C-(hidroxi-metil)-β- 50
-D-eritro-pentofuranozil]-citozin (1 mM)
A 2. táblázatból látható, hogy az a koncentráció, amelyben a vegyület toxicitást mutat, meghaladja azt a koncentrációt, amely a HÍV szaporodását - az 1. táblázatban feltünte tett adat szerint - 50%-ban gátolja.
Claims (28)
1. (IA) általános képletű vegyületek, azzal jellemezve, hogy
X jelentése 0, S, SO, S02 vagy CH2 csoport;
R1 jelentése OH, OPO(OH)2, 0P0(OH)-O-PO(OH)2,
OP0(0H)-O-PO(OH)-O-PO(OH)2 vagy (CH2)nOCH2PO(OH)2 képletű csoport, ahol n értéke 0, 1 vagy 2;
R2 jelentése hidrogénatom, és R3 jelentése CH3, CH2OH, CH2OCH3, CH2SH, CH2F vagy CH2N3 képletű csoport; vagy
R3 hidrogénatomot jelent, és R2 jelentése CH3, CH2OH,
CH2OCH3, CH2SH, CH2F vagy CH2N3 képletű csoport;
R4 jelentése (a) általános képletű vagy (b) általános képletű csoport, ahol
Y jelentése OH vagy NH2 csoport és
R5 jelentése CH=CH2, C=CH, CH=CH-CH3, -C^C-CH3l tien-2-il-, tien-3-il-csoport, hidrogénatom, CH3, C2H5, CH2CH2CH3 vagy CH(CH3)2 képletű csoport;
r6 és R7 azonosak vagy különbözők, és jelentésük: hidrogén-, fluor- klór atom, OH, NH2 vagy SH csoport, az a- és β-anomerek keverékének alakjában vagy az egyedi (tiszta) a- vagy B-anomerek alakjában, valamint e vegyületek
-71gyógyászati szempontból elfogadható sói, azzal a megkötéssel, hogy
a) ha X jelentése: 0, S; R2 jelentése H, és R3 jelentése CH2OH; Y jelentése OH vagy NH2 csoport; R5 jelentése ch=ch2, c=ch, ch=chch3, h, ch3, c2h5, CH2CH2CH3, CH(CH3)2 képletű csoport, akkor az (1A) általános képletű vegyületek csak az α-anomer alakjában lehetnek;
b) ha X jelentése: CH2; R2 jelentése H és R3 jelentése CH2OH csoport, akkor az igényelt (1A) általános képletű vegyületekben R4 jelentése olyan (b) általános képletű csoport, amelyben R6 és R7 azonosak vagy különbözők, és jelentésük H, Cl, OH, NH2 vagy SH csoport.
c) ha X jelentése: oxigénatom; R1 jelentése OH csoport; R2 hidrogénatomot jelent; és R3 jelentése CH2OH, CH2SH, CH2OCH3, CH2F vagy CH2N3 képletű csoport, akkor az oltalmi kör nem terjed ki olyan (1A) általános képletű vegyületekre, ahol Y jelentése OH vagy NH2 csoport, és R5 jelentése hidrogénatom, CH3, C2H5 csoport, vagy R6 jelentése hidrogén-, klóratom, NH2 csoport, és R7 hidrogén-, klóratomot, NH2, OH vagy SH csoportot jelent.
2. (18) általános képletű vegyületek, azzal jelle- mezve/ hogy
X jelentése O, S, SO, S02 vagy CH2 csoport;
R1 jelentése OH, OPO(OH)2, OPO(OH)-O-PO(OH)2, • ·
-72OPO(OH)-0-PO(OH)-0-PO(OH)2 vagy (CH2) nOCH2PO(OH) 2 képletú csoport, ahol n értéke 0, 1 vagy 2;
R2 jelentése hidrogénatom, és R3 jelentése CH3, CH2OH, CH2OCH3, CH2SH, CH2F vagy CH2N3 képletű csoport; vagy
R3 hidrogénatomot jelent, és R2 jelentése CH3, CH2OH, CH2OCH3, CH2SH, CH2F vagy CH2N3 képletú csoport;
R4 jelentése (a) általános képletú vagy (b) általános képletú csoport, ahol
Y jelentése OH vagy NH2 csoport és
R5 jelentése CH=CH2, OCH, CH=CH-CH3, -CsC-CH3, tien-2-il-, tien-3-il-csoport, hidrogénatom, CH3, C2H5, CH2CH2CH3 vagy CH(CH3)2 képletú csoport ;
r6 és R7 azonosak vagy különbözők, és jelentésük: hidrogén-, fluor- klóratom, OH, NH2 vagy SH csoport az a- és β-anomerek keverékének alakjában vagy az egyedi (tiszta) a- vagy β-anomerek alakjában, valamint e vegyületek gyógyászati szempontból elfogadható sói.
3. Az 1. igénypont vagy 2. igénypont szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy X jelentése oxigénatom.
4. Az 1. igénypont vagy 2. igényopnt szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy X jelentése kénatom, SO vagy SO2 csoport.
5. Az 1. igénypont vagy 2. igénypont szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy X jelentése CH2 csoport.
6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy R1 OH csoportot, R3 hidrogénatomot és R2 CH2OH csoportot jelent.
7. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy R1 OH csoportot, R3 hidrogénatomot jelent, és R2 jelentése CH3, CH2SH, CH20CH3, CH2F vagy CH2N3 képletű csoport.
8. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy R1 jelentése (CH2)nOCH2PO(OH)2 képletű csoport, amelyben n értéke 0, 1 vagy 2.
9. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy X jelentése OH vagy NH2 csoport, és R5 jelentése H, CH3, CH=CH2, CsCH vagy CH=CH-CH3 képletű csoport.
10. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy ha R7 jelentése H, OH, SH vgy NH2 csoport, akkor R6 NH2 csoportot jelent.
11. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy ha R7 OH, SH vagy NH2 csoportot jelent, akkor R6 jelentése hidrogén-, fluor- vagy klóratom.
12. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy R6 és R7 jelentése OH csoport.
13. Az 1-12. igénypontok bármelyike szerinti vegyületek, azzal jellemezve, hogy α-anomer alakban vannak.
14. Az 1-12. igénypontok bármelyike szerinti vegyüle-
-74tek, azzal jellemezve, hogy B-anomer alakban vannak.
15. Az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti (1A) vagy (1B) általános képletű vegyületek gyógyászati alkalmazása.
16. Gyógyászati készítmény, azzal jellemezve, hogy hatóanyagként egy 1-14. igénypontok bármelyike szerinti (1A) vagy (1B) általános képletű vegyületet és gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyagot - beleértve liposzómákat is - tartalmaz.
17. Eljárás vírusfertőzések kezelésére egy ilyen kezelésre szoruló állati vagy emberi gazdaszervezetben, azzal jellemezve, hogy egy 1-14. igénypontok bármelyike szerinti (IA) vagy (1B) általános képletű vegyület hatásos mennyiségét adagoljuk.
18. A 17. igénypont szerinti eljárás replikációjukhoz reverz transzkriptázt igénylő vírusok - így a humán immunhiányt okozó vírusok és hepatitis B vírus - által előidézett fertőzések kezelésére.
19. A 17. igénypont szerinti eljárás herpes vírusok által előidézett fertőzések kezelésére.
20. A 17. igénypont szerinti eljárás paraziták által előidézett fertőzések kezelésére.
21. Az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti (1A) vagy (IB) általános képletű vegyületek alkalmazása olyan gyógyszerek gyártására, amelyek replikációjukhoz reverz transzkriptázt igénylő vírusok által előidézett, szerzett immunhiány-tünetcsoport és fertőzések kezelésére alkalmazhatók.
22. A 21. igénypont szerinti alkalmazás HIV-vírusok ál< ' ··
-75tal előidézett fertőzések kezelésére.
23. (1A) általános képletű vegyületek - ahol: X, R1, R2, R3, Y, R6 és R7 jelentése az 1., valamint 3-14. igénypontok bármelyike szerinti, vagy ahol X jelentése 0; R1 OH csoportot jelent; R2 jelentése hidrogénatom; R3 jelentése CH2OH, CH2SH, CH2OCH3, CH2F vagy CH2N3 képletű csoport;
Y jelentése OH, NH2 csoport és R5 hidrogénatomot, CH3, C2H5 csoportot jelent; vagy R6 jelentése hidrogén-, klóratom, NH2 csoport, és R7 jelentése hidrogén-, klóratom, NH2, OH vagy SH csoport - vagy a 2-14. igénypontok bármelyike szerinti (1B) általános képletű vegyületek alkalmazása hepatitis B vírus által előidézett fertőzések kezelésében.
24. A 21. igénypont szerinti alkalmazás herpes vírusok által előidézett fertőzések kezelésére.
25. A 21. igénypont szerinti alkalmazás paraziták által előidézett fertőzések kezelésére.
26. Eljárás az (1A) általános képletű vegyületek előállítására - ahol X, RÍ, R2, R3 és R4 jelentése az 1. igénypontban meghatározott - azzal jellemezve, hogy egy (IA‘) általános képletű glükozidot egy pirimidinszármazékkal annak N-l helyzetében, vagy egy purinszármazékkal annak N-9 helyzetében kondenzálunk, ahol Z jelentése klór-, bróm- vagy jódatom, aciloxi- vagy alkoxicsoport; és R1*, R2’ és R3 ’ jelentése R1, R2 és R3 fentebb meghatározott jelentésével azonos; vagy azzal a megkötéssel, hogy ha R1 vagy R2 jelentése OH csoport, akkor az oxigénatomon védőcsoportnak kell lennie; és R4 ’ jelentése azonos R4 fentebb meghatározott je< · . i
-76lentéseivel szilil-, acil- vagy alkilcsoporttal védett formában .
27. Eljárás az (1B) általános képletű vegyületek előállítására - ahol X, RÍ, R2, R3 és R4 jelentése az 1. igénypontban meghatározott - azzal jellemezve, hogy egy (1B') általános képletű glükózidőt egy pirimidinszármazékkal annak N-l helyzetében, vagy egy purinszármazékkal annak N-9 helyzetében kondenzálunk, ahol Z jelentése klór-, bróm- vagy jódatom, aciloxi- vagy alkoxicsoport; és R1', R2' és R3' jelentése RÍ, R2 és R3 fentebb meghatározott jelentésével azonos; vagy azzal a megkötéssel, hogy ha R1 vagy R2 jelentése OH csoport, akkor ennek védett formában kell lennie; és
R4* jelentése azonos R4 fentebb meghatározott jelentéseivel szilil-, acil- vagy alkilcsoporttal védett formában.
28. Eljárás az (1B”) általános képletű vegyületek előállítására - ahol X, RÍ, R2 és R3 jelentése az 1. igénypontban meghatározott, és Z jelentése klór-, bróm-, jódatom, ciloxi- vagy alkoxicsoport - azzal jellemezve, hogy egy védőcsoporttal ellátott bután-1,4-diol-2,3-epoxidot 3 vagy 4 szénatomot és kettős kötést tartalmazó nukleofillal reagáltatunk, majd a kettős kötést átalakítjuk, és gyűrűzárő reakciót végzünk.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE9003151A SE9003151D0 (sv) | 1990-10-02 | 1990-10-02 | Nucleoside derivatives |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9300964D0 HU9300964D0 (en) | 1993-06-28 |
| HUT63851A true HUT63851A (en) | 1993-10-28 |
Family
ID=20380539
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU93964A HUT63851A (en) | 1990-10-02 | 1991-09-27 | Process for producing nucleoside derivatives and pharmaceutical compositions comprising such compounds |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US5473063A (hu) |
| EP (1) | EP0554274A1 (hu) |
| JP (1) | JPH06501261A (hu) |
| KR (1) | KR930702371A (hu) |
| AU (1) | AU8641091A (hu) |
| CA (1) | CA2093020A1 (hu) |
| HU (1) | HUT63851A (hu) |
| IE (1) | IE913374A1 (hu) |
| PT (1) | PT99130A (hu) |
| SE (1) | SE9003151D0 (hu) |
| WO (1) | WO1992006102A1 (hu) |
Families Citing this family (50)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ234534A (en) * | 1989-07-17 | 1994-12-22 | Univ Birmingham | Pyrimidine 4'-thionucleoside derivatives and their preparation; intermediates therefor |
| US5827727A (en) * | 1990-02-01 | 1998-10-27 | Emory University | Method of resolution of 1,3-oxathiolane nucleoside enantiomers |
| US5521163A (en) * | 1990-07-13 | 1996-05-28 | University Of Birmingham | Antiviral pyrimidine nucleosides and methods for using same |
| SE9003151D0 (sv) * | 1990-10-02 | 1990-10-02 | Medivir Ab | Nucleoside derivatives |
| US5444063A (en) * | 1990-12-05 | 1995-08-22 | Emory University | Enantiomerically pure β-D-dioxolane nucleosides with selective anti-Hepatitis B virus activity |
| US6235887B1 (en) | 1991-11-26 | 2001-05-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Enhanced triple-helix and double-helix formation directed by oligonucleotides containing modified pyrimidines |
| TW393513B (en) * | 1991-11-26 | 2000-06-11 | Isis Pharmaceuticals Inc | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified pyrimidines |
| WO1993010820A1 (en) * | 1991-11-26 | 1993-06-10 | Gilead Sciences, Inc. | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified pyrimidines |
| GB9218810D0 (en) * | 1992-09-04 | 1992-10-21 | Univ Birmingham | Antiviral pyrimidine nucleosides |
| WO1994021658A1 (en) * | 1993-03-15 | 1994-09-29 | Kalman Thomas I | Antiviral imidazolinone nucleoside derivatives |
| US6200952B1 (en) * | 1993-06-02 | 2001-03-13 | Sciclone Pharmaceuticals, Inc. | Combination therapy method for treating chronic hepatitis B |
| FR2709754B1 (fr) * | 1993-09-10 | 1995-12-01 | Centre Nat Rech Scient | Composés 2' ou 3'-déoxy- et 2', 3'-didéoxy-beta-L-pentofuranonucléosides, procédé de préparation et application thérapeutique, notamment anti-virale. |
| US20020120130A1 (en) | 1993-09-10 | 2002-08-29 | Gilles Gosselin | 2' or 3' -deoxy and 2', 3' -dideoxy-beta-L-pentofuranonucleo-side compounds, method of preparation and application in therapy, especially as anti- viral agents |
| US5587362A (en) * | 1994-01-28 | 1996-12-24 | Univ. Of Ga Research Foundation | L-nucleosides |
| WO1995032983A1 (en) * | 1994-05-31 | 1995-12-07 | Medivir Ab | Post exposure prevention of hiv |
| US5612319A (en) * | 1994-05-31 | 1997-03-18 | Medivir Ab | Postexposure prevention of HIV infection or seroconversion |
| GB9413724D0 (en) | 1994-07-07 | 1994-08-24 | Wellcome Found | Therapeutic nucleosides |
| US5811408A (en) * | 1994-07-12 | 1998-09-22 | Yamasa Corporation | 2'-deoxy-2'-(substituted or unsubstituted)methylidene-4'-thionucleosides |
| MX9702927A (es) * | 1994-10-24 | 1998-04-30 | Genencor Int | L-piranosilnucleosidos. |
| US5559101A (en) * | 1994-10-24 | 1996-09-24 | Genencor International, Inc. | L-ribofuranosyl nucleosides |
| US5703058A (en) * | 1995-01-27 | 1997-12-30 | Emory University | Compositions containing 5-fluoro-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxycytidine or a mono-, di-, or triphosphate thereof and a second antiviral agent |
| US6391859B1 (en) | 1995-01-27 | 2002-05-21 | Emory University | [5-Carboxamido or 5-fluoro]-[2′,3′-unsaturated or 3′-modified]-pyrimidine nucleosides |
| US5808040A (en) * | 1995-01-30 | 1998-09-15 | Yale University | L-nucleosides incorporated into polymeric structure for stabilization of oligonucleotides |
| JP4413996B2 (ja) | 1995-06-07 | 2010-02-10 | エモリー・ユニバーシティ | 抗ｂ型肝炎ウィルス活性を有するヌクレオシド |
| US6072051A (en) * | 1995-11-02 | 2000-06-06 | Chong Kun Dang Corp. | Nucleoside derivatives and process for preparing the same |
| GB9600143D0 (en) | 1996-01-05 | 1996-03-06 | Wellcome Found | Therapeutic compounds |
| US5869493A (en) * | 1996-02-16 | 1999-02-09 | Medivir Ab | Acyclic nucleoside derivatives |
| US6703394B2 (en) | 1996-02-16 | 2004-03-09 | Medivir Ab | Acyclic nucleoside derivatives |
| US5753789A (en) * | 1996-07-26 | 1998-05-19 | Yale University | Oligonucleotides containing L-nucleosides |
| CA2266889A1 (en) * | 1996-10-16 | 1998-04-23 | Guangyi Wang | Purine l-nucleosides, analogs and uses thereof |
| US6509320B1 (en) * | 1996-10-16 | 2003-01-21 | Icn Pharmaceuticals, Inc. | Purine L-nucleosides, analogs and uses thereof |
| EP1072607A3 (en) * | 1996-10-16 | 2001-09-12 | ICN Pharmaceuticals, Inc. | Purine L-nucleosides, analogs and uses therof |
| AU6221998A (en) | 1997-02-13 | 1998-09-08 | Glaxo Group Limited | Benzimidazole derivatives |
| GB9807355D0 (en) | 1998-04-07 | 1998-06-03 | Glaxo Group Ltd | Antiviral compound |
| GB9807354D0 (en) * | 1998-04-07 | 1998-06-03 | Glaxo Group Ltd | Antiviral compound |
| GB9821058D0 (en) * | 1998-09-28 | 1998-11-18 | Univ Cardiff | Chemical compound |
| YU25500A (sh) | 1999-05-11 | 2003-08-29 | Pfizer Products Inc. | Postupak za sintezu analoga nukleozida |
| US7019129B1 (en) | 2000-05-09 | 2006-03-28 | Biosearch Technologies, Inc. | Dark quenchers for donor-acceptor energy transfer |
| AU2003251524A1 (en) * | 2002-06-17 | 2003-12-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Carbocyclic nucleoside analogs as RNA-antivirals |
| EP1835916B1 (en) * | 2004-12-30 | 2009-04-01 | Medivir Ab | Compounds useful in the treatment of hiv |
| CA2720511A1 (en) | 2008-04-01 | 2009-10-08 | Biosearch Technologies, Inc. | Stabilized nucleic acid dark quencher-fluorophore probes |
| AU2013241341B2 (en) | 2012-03-28 | 2016-09-08 | Fujifilm Corporation | Salt of 1-(2-deoxy-2-fluoro-4-thio-beta-D-arabinofuranosyl)cytosine |
| HUE044412T2 (hu) | 2012-08-13 | 2019-10-28 | Fujifilm Corp | Intermedier l-(2-deoxi-2-fluor-4-tio-beta-D-arabinofuranozil)-citozin szintézisére, intermedier tionukleozid szintézisére és eljárások ezen intermedierek elõállítására |
| EP3109245B1 (en) | 2014-02-18 | 2018-01-03 | FUJIFILM Corporation | Method for producting thiolane skeleton-type glycoconjugate, and thiolane skeleton-type glycoconjugate |
| JP6204223B2 (ja) | 2014-02-19 | 2017-09-27 | 富士フイルム株式会社 | チオピラノース化合物等の製造方法 |
| TWI678373B (zh) | 2014-10-31 | 2019-12-01 | 日商富士軟片股份有限公司 | 硫代核苷衍生物或其鹽及醫藥組合物 |
| JP6806709B2 (ja) * | 2015-05-12 | 2021-01-06 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | ウイルス感染症の治療と予防のための新規置換アミノチアゾロピリミジンジオン |
| BR112019003946A2 (pt) | 2016-08-31 | 2019-05-21 | Fujifilm Corporation | agente antitumoral, reforçador do efeito antitumoral e kit antitumoral |
| AU2018404329B2 (en) | 2018-01-29 | 2021-09-09 | Fujifilm Corporation | Antitumor agent for biliary tract cancer and method for treating biliary tract cancer |
| CN114409655A (zh) * | 2022-01-26 | 2022-04-29 | 郑州大学 | 3′,4′-不饱和核糖c-核苷类似物及其制备方法 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3116282A (en) * | 1960-04-27 | 1963-12-31 | Upjohn Co | Pyrimidine nucleosides and process |
| FR2040177A1 (en) * | 1969-01-31 | 1971-01-22 | Robugen Gmbh | 2-deoxyribosyl-uracil derivs |
| US3817982A (en) * | 1971-12-29 | 1974-06-18 | Syntex Inc | 2{40 ,3{40 -unsaturated nucleosides and method of making |
| US4247544A (en) * | 1979-07-02 | 1981-01-27 | The Regents Of The University Of California | C-5 Substituted uracil nucleosides |
| US4267171A (en) * | 1979-07-02 | 1981-05-12 | The Regents Of The University Of California | C-5 Substituted cytosine nucleosides |
| JPS57146798A (en) * | 1981-03-06 | 1982-09-10 | Yamasa Shoyu Co Ltd | Hexosyl nucleoside derivative |
| US4724232A (en) * | 1985-03-16 | 1988-02-09 | Burroughs Wellcome Co. | Treatment of human viral infections |
| EP0286825A3 (en) * | 1987-03-18 | 1989-04-12 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Use of 3'-fluro-3' deoxythymidine for the manufacture of a medicament for the treatment of virus infections |
| SE8701605D0 (sv) * | 1987-04-16 | 1987-04-16 | Astra Ab | Novel medicinal compounds |
| SE8704298D0 (sv) * | 1987-11-03 | 1987-11-03 | Astra Ab | Compounds for use in therapy |
| SE8802173D0 (sv) * | 1988-06-10 | 1988-06-10 | Astra Ab | Pyrimidine derivatives |
| FI95384C (fi) * | 1989-04-06 | 1996-01-25 | Squibb Bristol Myers Co | Menetelmä 3'-deoksi-3'-substituoitujen metyylinukleosidien valmistamiseksi ja menetelmässä käytettäviä välituotteita |
| JPH03223264A (ja) * | 1990-01-30 | 1991-10-02 | Nippon Kayaku Co Ltd | 新規なシクロペンタン誘導体及びその製造法 |
| SE9003151D0 (sv) * | 1990-10-02 | 1990-10-02 | Medivir Ab | Nucleoside derivatives |
| CA2163456C (en) * | 1993-05-21 | 2009-06-23 | Franco Lori | New procedure to block the replication of reverse transcriptase dependent viruses by the use of inhibitors of deoxynucleotides synthesis |
| US5521161A (en) * | 1993-12-20 | 1996-05-28 | Compagnie De Developpment Aguettant S.A. | Method of treating HIV in humans by administration of ddI and hydroxycarbamide |
-
1990
- 1990-10-02 SE SE9003151A patent/SE9003151D0/xx unknown
-
1991
- 1991-09-26 IE IE337491A patent/IE913374A1/en unknown
- 1991-09-27 AU AU86410/91A patent/AU8641091A/en not_active Abandoned
- 1991-09-27 US US08/030,168 patent/US5473063A/en not_active Expired - Fee Related
- 1991-09-27 KR KR1019930701006A patent/KR930702371A/ko not_active Withdrawn
- 1991-09-27 CA CA002093020A patent/CA2093020A1/en not_active Abandoned
- 1991-09-27 EP EP91917480A patent/EP0554274A1/en not_active Ceased
- 1991-09-27 JP JP3516127A patent/JPH06501261A/ja active Pending
- 1991-09-27 WO PCT/SE1991/000653 patent/WO1992006102A1/en not_active Ceased
- 1991-09-27 HU HU93964A patent/HUT63851A/hu unknown
- 1991-10-01 PT PT99130A patent/PT99130A/pt not_active Application Discontinuation
-
1995
- 1995-08-18 US US08/516,551 patent/US5747473A/en not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-03-12 US US09/041,135 patent/US5952500A/en not_active Expired - Fee Related
-
1999
- 1999-06-17 US US09/334,756 patent/US6121431A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5473063A (en) | 1995-12-05 |
| US6121431A (en) | 2000-09-19 |
| PT99130A (pt) | 1992-08-31 |
| EP0554274A1 (en) | 1993-08-11 |
| KR930702371A (ko) | 1993-09-08 |
| JPH06501261A (ja) | 1994-02-10 |
| WO1992006102A1 (en) | 1992-04-16 |
| US5747473A (en) | 1998-05-05 |
| AU8641091A (en) | 1992-04-28 |
| IE913374A1 (en) | 1992-04-08 |
| US5952500A (en) | 1999-09-14 |
| CA2093020A1 (en) | 1992-04-03 |
| SE9003151D0 (sv) | 1990-10-02 |
| HU9300964D0 (en) | 1993-06-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HUT63851A (en) | Process for producing nucleoside derivatives and pharmaceutical compositions comprising such compounds | |
| AU614082B2 (en) | Nucleosides and nucleoside analogues, pharmaceutical composition and processes for the preparation of the compounds | |
| Jones et al. | 4'-Substituted nucleosides. 5. Hydroxymethylation of nucleoside 5'-aldehydes | |
| EP1058686B1 (en) | 2'-fluoronucleosides | |
| CA2268703C (en) | Enantiomerically pure .beta.-d-dioxolane nucleosides with selective anti-hepatitis b virus activity | |
| US5607922A (en) | 1,5-anhydrohexitol nucleoside analogues | |
| JP3421335B2 (ja) | 鏡像異性的に純粋なβ−Ｄ−（−）−ジオキソラン−ヌクレオシド | |
| US5925643A (en) | Enantiomerically pure β-D-dioxolane-nucleosides | |
| US5248776A (en) | Process for enantiomerically pure β-L-1,3-oxathiolane nucleosides | |
| HU211132A9 (en) | Nucleoside derivatives useful in treating retroviral infections | |
| Secrist III et al. | Synthesis and anti-HIV activity of 4'-thio-2', 3'-dideoxynucleosides | |
| EP0352248A1 (en) | Nucleoside derivatives | |
| HU203363B (en) | Process for producing 2',3'-dideoxy-2',2'-difluoronucleosides and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient | |
| JP2722215B2 (ja) | 新規なアリステロマイシン／アデノシン誘導体類 | |
| US5215970A (en) | Nucleosides and nucleotide analogues, pharmaceutical composition and processes for the preparation of the compounds | |
| AU2002303187C1 (en) | Process for the preparation of 2'-HALO-Beta-L-arabinofuranosyl nucleosides | |
| Sahabuddin et al. | Nucleoside synthesis from 3-alkylated sugars: role of 3β-oxy substituents in directing nucleoside formation | |
| Olsen et al. | Synthesis and evaluation of anti-HIV activity of 3-azido-4-(hydroxymethyl) tetrahydrofuran derivatives containing 2-(thymin-1-yl) methyl, 2-(cytosin-1-yl) methyl or 2-(adenin-9-yl) methyl substituents–a new series of AZT analogues | |
| EP0516186A2 (en) | Nucleosides and nucleoside analogues, pharmaceutical composition and processes for the preparation of the compounds | |
| Pei et al. | Synthesis of 3′-C-hydroxymethyl-substituted pyrimidine and purine nucleosides as potential anti-hepatitis C virus (HCV) agents | |
| EP0615975A1 (en) | Nucleosides and nucleoside analogues, pharmaceutical composition and processes for preparation of the compounds | |
| HU205089B (en) | Process for producing new thymine derivatives and pharmaceutical compositions comprising same |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DFD9 | Temporary prot. cancelled due to non-payment of fee |